Размещено на http://www.allbest.ru/

МИНИСТЕРСТВО ВЫСШЕГО И СРЕДНЕГО СПЕЦИАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН

Национальный университет Узбекистана имени Мирзо Улугбека

На правах рукописи

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание академической степени магистра

на тему: "Гиполипидемическое, антиоксидантное и мембраностабилизирующее свойство экстракта, выделенного из пажитника пряморогого"

по специальности 5А 420109 - Биохимия

Автор: Мажидова (Худойбердиева) Дилафруз Насировна

Научный руководитель:

к.б.н., доц. Умарова Г.Б.,

к.м.н. Зияева А.В.

Ташкент - 2012

Содержание

Введение

1. Основная часть

1.1 Выбор направления исследования

1.2 Материал и методы исследования

1.3 Результаты исследования

1.3.1 Выявление перспективных растительных экстрактов на наличие гиполипидемического, антиоксидантного и мембраноcтабилизирующего свойства на модели эндогенной гиперлипидемии

1.3.2 Оценка гиполипидемической, антиоксидантной и мембраностабилизирующей эффективности растительных экстрактов при этаноловой гиперлипидемии

1.3.3 Влияние экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого (Trigonella orthoseras K), на липидный обмен при экспериментальном холестериновом атеросклерозе

1.3.4 Влияние экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого (Trigonella orthoseras K), на углеводный обмен при экспериментальном холестериновом атеросклерозе

1.3.5 Оценка состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы, а также функционального состояния печени при экспериментальном атеросклерозе на фоне длительного применения экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого (Trigonella orthoseras K)

1.3.6 Изучение фармакологической безвредности экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого (Trigonella orthoseras K)

2. Обсуждение результатов исследования

Заключение

Список использованной литературы

Приложение

Введение

Актуальность проблемы. Высокая заболеваемость, болезненность и смертность в индустриально-развитых странах, в том числе в Республике Узбекистан (8, 16, 17, 18, 30, 80) выводит проблему эффективной фармакопрофилактики и фармакотерапии атеросклероза в число важнейших проблем медицины. Между тем, современные антиатеросклеротические (преимущественно гиполипидемические) препараты далеко не полностью удовлетворяют требования практической медицины (29). Они недостаточно эффективны при длительном употреблении, способны вызывать ряд побочных явлений и осложнений, вплоть до стимулирования канцерогенеза (58, 72). В связи с этим поиск новых эффективных и безвредных препаратов для профилактики и лечения больных атеросклерозом является актуальной задачей.

С учетом необходимости длительного применения таких препаратов мы сочли целесообразным осуществлять поиск среди растительных соединений, поскольку они эволюционно близки организму млекопитающих и посему хорошо переносятся больными при длительном употреблении (2).

Растительные препараты, содержащие комплекс биологически активных веществ, характеризуются широким спектром фармакологического действия, эффективностью и малой токсичностью, что позволяет использовать их длительное время для профилактики и лечения многих заболеваний без риска возникновения побочных явлений. По данным ВОЗ, около 80 % населения мира при первичной медико-санитарной помощи пользуются, в основном, традиционными медикаментами природного происхождения (2). В настоящее время более 40 % применяемых в медицине лекарственных средств составляют препараты из растительного сырья (5). Лекарственные растения издавна применяются в качестве сырья для получения медикаментов в виде галеновых, неогаленовых препаратов, либо в виде выделенных из них индивидуальных соединений (алкалоиды, лактоны, флавоноиды, гликозиды и т.д.). Необходимо отметить, что лекарственное растительное сырье является наиболее дешевым и доступным источником получения лекарственных средств. Благодаря этому препараты растительного происхождения с успехом применяются для профилактики и лечения различных заболеваний.

Ранее среди большого количества растительных экстрактов в опытах in vivo нами был отобран экcтракт, выделенный из плодов пажитника пряморогого, обладающий мощным гиполипидемическим, антиоксидантным и мембраностабилизирующим действием. Изучение влияния экстракта данного растения на липидный, углеводный обмен, антиоксидантную систему и функциональное состояние печени при экспериментальном холестериновом атеросклерозе вызывает огромный интерес.

Степень изученности проблемы. Флора представляет собой богатейшую возможность для получения высокоактивных препаратов, в том числе лечения сердечно-сосудистых заболеваний. На территории Средней Азии, особенно Республики Узбекистан, на территории которой произрастает около 30 % известных в странах СНГ растений. Многие виды широко используются в кардиологической практике, для профилактики и лечения атеросклероза, инфаркта миокарда, в качестве антиаритмических веществ. Вне конкуренции растительные вещества в качестве препаратов, повышающих устойчивость организма по отношению к вредным факторам внешней среды (адаптогенное действие).

В качестве примеров можно привести ряд растений из флоры Республики Узбекистан, получивших признание в научной и практической медицине и используемых как суммарные препараты в виде различных экстрактов, а также препаратов в виде индивидуальных соединений.

Солодка - Glycyrrhiza L., Узбекское название - кизилмия. Это многолетнее травянистое растение. На территории Узбекистана произрастают два вида: Солодка гладкая - Glycyrrhisae glabra и Солодка уральская - Glycyrrhiza uralensis. В фармации и медицине оба вида используются в равной степени. Эти растения в своем составе содержат: тритерпеновый гликозид - глициризиновую кислоту, флавоноиды, флавоновый гликозид - ликвиритозид, тритерпен - карбеноксолон и другие физиологически активные вещества. В медицинской практике это растение получило очень широкое применение. Растение обладает выраженным адаптогенным, противовоспалительным, антиатеросклеротическим, гипогликемическим (только при повышенном содержании сахара в крови), язвозаживляющим и др. эффектами (М.И. Айзиков, 1975; А.Г. Курмуков, 1976). В медицинской практике используются ряд лекарственных форм: препарат ликвиритон (сумма флавоноидов из корней и корневища), глицирам (полусинтетическое производное глицирризиновой кислоты), глидеринин (производное агликона глицирризиновой кислоты), флакарбин гранулы (содержит в составе ликурозид).

Софора японская - Sophora Japonica. Узбекское название Япон софори (тухумак). Крупное дерево, широко культивируется в Республике Узбекистан. В листьях содержится до 17 %, в цветочных бутонах до 30 % и более рутина и другие флавоноиды. Рутин обладает Р-витаминной активностью, то есть уменьшает проницаемость и ломкость капилляров, оказывает антиоксидантное и адаптогенное действие. Широко используется в терапии при различных заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

Род: Серпухи - Seratula и в частности Серпуха согдийская - Seratula sogdiana Bunge, произрастающая на территории Республики Узбекистан, в своем составе имеет оксистероиды: экдистерон, витикостерон, согдистерон обладающие мошным антистрессорным, а также анаболическим действием. Препарат экдистерон применяется в кардиологии для лечения и реабилитации больных инфарктом миокарда. Экдистен обладает, гиполипидемическим и гипохолестеринемическим действием, уменьшает общую площадь атероматозных бляшек у кроликов с гиперхолестериновым атеросклерозом.

Дуб - Quercus, Семейство: буковые. Узбекское название - Оддий эман. Используется кора дуба - Cortex quercus. Из коры дуба выделен проантоцианидин, обладающий выраженным антигипоксическим и антиатеросклеротическим действием. В настоящее время этот проантоцианидин разрешен для применения в медицине в качестве гиполипидемического, гипохолестеринемического, ангиопротекторного и антигипоксического препарата для профилактики и лечения атеросклероза - препарат кавергал.

Аморфа кустарниковая - Amorpha fruticosa L. Семейство: бобовые - Fabaceae. Узбекское название - бутасимон аморфа. Многолетний кустарник или небольшое дерево, культивируется в Республике Узбекистан. Семена, листья, и молодые побеги содержат гликозиды, относящиеся к ротеноидам: преимущественно аморфин, а также аморфол и др. Аморфин под названием препарат глирофам применяется в качестве препарата для лечения атеросклероза. Он обладает гиполипидемическим, гипохолестеринемическим и ангиопротекторным действием.

Полынь белеющая - Artemisia leucodes, Семейство сложноцветных. Узбекское название - шувок (эрмон). Двулетнее растение. Растет в Средней Азии и в частности в Бухарской области. Из надземной части выделен лактон леукомизин, который обладает выраженным ангиопротекторным, а также гиполипид- и гипохолестеринемическим действием. Применяется в медицинской практике под названием препарат олигвон для профилактики и лечения атеросклероза.

Аконит левкоидный - Aconitum leucostomum - это растение содержит алкалоиды и в частности лаппаконитин, обладающий мощным антиаритмическим действием. На основе этого алкалоида создан препарат аллапинин - наиболее активный среди существующих антиаритмических препаратов.

Барвинок прямой - Vinca erecta Regel et Schmal. Семейство- Apocinaceae. Узбекское название - Тик эсувчи бэригул. Барвинок прямой является эндемическим и растет только на территории Республике Узбекистан. Из всех растений, произрастающих в различных областях Республики, выделено более 60 алкалоидов и среди них наиболее активные: эрвин и винкарин - антиаритмические соединения, акуаммидин - центральный адренолитик (аминазиноподобный), эрвинин - дыхательный аналептик, винэрвин - гипотензивное средство, винканин - стрихниноподобный судорожный аналептик и др.

Сердечно-сосудистые заболевания на почве атеросклероза остаются одной из самых актуальных нерешенных задач медицины и здравоохранения во всех высокоразвитых странах мира. Массовые эпидемиологические исследования показывают, что практически все люди болеют атеросклерозом, однако, тяжесть и скорость развития заболевания необычайно широко варьируют (6, 20, 33, 34, 36, 46, 66).

По данным Национального института здоровья (США), лечение ИБС (коронарный атеросклероз) у 5,4 млн. американцев обходится в сумму более 60 млрд. в год (36, 48, 66). В странах СНГ в медикаментозном лечении атеросклероза нуждаются более 45 млн. человек (20, 21, 34). Примерно половине населения требуется изменить пищевые привычки, ограничить действие факторов среды, ускоряющих развитие атеросклероза. Решение этих неотложных медицинских и социальных проблем требует значительных капиталовложений. Отсрочка или медленное их решение приведет к тому, что уже в недалеком будущем проблема атеросклероза может стать тормозом на пути решения важнейших экономических, социальных и демографических задач бурно изменяющегося мира.

В обширных эпидемиологических наблюдениях показано, что примерно в 2/3 случаев атеросклероз начинается с первичных нарушений в обмене липопротеидов очень низкой плотности (ЛПНОП) и липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) (20, 36, 59, 60, 61, 66). В 1/3 всех случаев начало атеросклероза объясняют снижением концентрации антиатерогенных липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) в плазме крови (59, 61-63). Более точно современная липопротеидная концепция атеросклероза сейчас формулируется как дисбаланс распределения холестерина между кровью и тканями (36, 37, 38).

Запасы холестерина в организме человека распределены неравномерно: в клетках и тканях сконцентрировано 93 %, тогда как на долю холестерина циркулирующих в крови липопротеидов приходится только 7 % (20, 36). В норме 70 % холестерина находятся в составе "атерогенных" ЛПНП и ЛПОНП, тогда как в составе "антиатерогенных" ЛПВП циркулирует около 30 %. При таком соотношении сохраняется баланс скорости притока и оттока холестерина в сосудистой стенке и других тканях.

Массовые эпидемиологические наблюдения определили верхнюю допустимую норму общего содержания холестерина в плазме крови. При концентрации общего холестерина в плазме крови 200 мг/дл сохраняется нулевой баланс холестерина в сосудистой стенке. Повышение уровня общего холестерина в плазме крови выше 200 мг/дл ведет к постепенному отложению холестерина в сосудах, а при его концентрации 160-180 мг/дл наблюдается отрицательный баланс холестерина в сосудистой стенке (74-77).

Всасывание пищевых липидов, скорость синтеза холестерина и липопротеидов, скорость выведения липопротеидов из кровотока и скорость выведения холестерина из организма является главными реакциями, определяющими стационарные концентрации атерогенных липопротеидов в кровотоке. Печень и тонкий кишечник являются главными органами, регулирующими стационарные концентрации атерогенных липопротеидов в кровотоке, так как более 50 % этих частиц синтезируются и выводятся печенью (54, 55). Периферические ткани вносят существенный вклад лишь в утилизацию атерогенных липопротеидов, поскольку они не производят аполипопротеиды и выводят холестерин, главным образом, с помощью с ЛПВП. В эндотелиальных гладкомышечных клетках, фибробластах рецепторное поглощение ЛПНП автоматически блокируют в них синтез холестерина за счет блокады активности ферментов и генов, контролирующих синтез ключевых ферментов образования мевалоновой кислоты (38, 39). Таким путем периферические ткани в здоровом организме запрограммированы на утилизацию холестерина из ЛПНП, циркулирующих в кровотоке.

Клетки печени играют роль центральной диспетчерской в распределении холестерина в организме. В этих клетках существует несколько "программ" распределения холестерина по разным адресам разной молекулярной "упаковке". Пищевые нагрузки холестерином возникают как следствие преимущественного питания человека жирами животного происхождения (38, 40, 46). Для обеспечения энергетических потребностей человек ежедневно поглощает не менее 100-120 г жиров, с которыми в кишечник попадает около 1 г холестерина. В просвете кишечника триглицериды расщепляются до свободных жирных кислот и 2 - моноацилглицерина. В ворсинках эпителия тонкого кишечника при всасывании ресинтезируются триглицериды, а холестерин превращается в эфиры холестерина.

Ежедневно в организме синтезируется 2-3 г холестерина и поступает с пищей около 1 г холестерина. Из печени ежедневно экскретируется около 0,5-0,8 г желчных кислот. Абсолютная концентрация холестерина в гепатоцитах может колебаться в 30-40 раз, т.е. печень не способна временно аккумулировать холестерин, а затем его перераспределяет по другим органам (54, 55). Множество разных функциональных классов липопротеидов плазмы крови существует в здоровом организме для постоянного выравнивания градиентов концентрации холестерина в организме за счет адресной перетранспортировки холестерина от клеток-доноров к клеткам-реципиентам (54, 55). Таким образом, повышение концентрации атерогенных липопротеидов в циркулирующей крови может вызываться: 1) снижением скорости их выведения из крови в печень; 2) повышением скорости их синтеза; 3) нарушением метаболизма липопротеидов в плазме крови, включая образования аномальных модифицированных липопротеидов.

Наряду с нарушением обмена холестерина наблюдается нарушение со стороны фосфолипидов. При экспериментальном атеросклерозе у кроликов содержание в крови холестерина увеличивается в 9 раз, а фосфолипидов только трехкратно (21, 22). Имеются немногочисленные данные об исследовании в мембранах клеток при атеросклерозе. Так, в мембранах эритроцитов наблюдается увеличение холестерин/фосфолипидного коэффициента при атеросклерозе (3, 44) и перераспределение фосфолипидных фракций при коронарном атеросклерозе (4).

Липидный обмен тесно связан с обменом углеводов. Взаимосвязь обмена углеводов и липидов четко выявляется в экспериментальных работах, посвященных моделированию атеросклероза. Введение экзогенного холестерина оказывает значительное влияние на ряд показателей углеводного обмена, изменение которых, в свою очередь, сказываются на процессах липидного обмена.

К.И. Цинзадзе и соавт. (32) наблюдали при кормлении кроликов в течении четырех месяцев холестерином снижение содержание гликогена в клетках печени вплоть до полного исчезновения. В дальнейшем было установлено, что расстройство гликогенообразовательной функции предшествует развитию гиперхолестеринемии и экспериментального атеросклероза у кроликов (32).

Напротив, другие авторы (67) отметили повышение содержания гликогена в печени кроликов, получавших холестерин в дозе 200-300 мг/кг веса в течение 5-60 дней (причем это повышение было пропорционально продолжительности введения холестерина). По характеру гликемических кривых у подопытных животных было выявлено повышение толерантности по отношению к гипогликемическому действию инсулина. Снижение интенсивности гликолиза отмечено в ряде тканей (печень, почки, мозг) животных с экспериментальным холестериновым атеросклерозом (14, 35,).

Манта и сотрудники (68) в тканях кроликов с экспериментальным холестериновым атеросклерозом обнаружили снижение активности гексокиназы, глюкозо-6-фосфатазы, альдолазы. Эти же авторы (15) отмечали увеличение содержания пировиноградной кислоты в крови кроликов после 45 - дневного кормления холестерином.

Снижение активности дегидрогеназы, глюкозо-6-фосфата в тканях аорты и печени кроликов, получавших 20 % - ный раствор холестерина в подсолнечном масле обнаружила А.С. Алексеева (1). К.В. Слободкина (28) наблюдала повышение интенсивности пентозо-фосфатного пути превращения углеводов в печени кроликов с экспериментальным атеросклерозом.

Повышение активности дегидрогеназы, глюкозо-6-фосфата было обнаружено в тканях печени, коркового вещества почки и мозга кроликов с экспериментальным холестериновым атеросклерозом (23).

Отмечены изменения активности транскетолаз и скорости утилизации пентоз в тканях кроликов, носящие волнообразный характер (19). По мнению М.Г. Крицман и А.С. Кониковой (12) холестерин активно меняет каталитическую функцию многих ферментов, в том числе пентозофосфатного пути превращения углеводов, причем активность транкетолазы повышается в результате непосредственного индуцирующего действия холестерина.

Исследования, проведенные на кафедре биохимии Куйбышевского мединститута, позволяют предполагать ведущую роль углеводов в механизме возникновения и развития экспериментального атеросклероза (25, 26), причем, конкретным и главным звеном нарушения обмена веществ являются, по-видимому, изменения в активности ферментов, участвующих в обмене альфа-глицерофосфата. При экспериментальном атеросклерозе обнаруживается снижение альфа-глицерофосфатдегидрогеназной активности (24); в альфа-глицерофосфатдегидрогеназе, выделенной из скелетной мышцы кролика с экспериментальным атеросклерозом, изменено число фракций и содержание белка в них, что позволяет предположить количественную перестройку субъединиц в молекуле фермента (7).

Имеются данные, указывающие на изменения первичной структуры этого фермента при экспериментальном атеросклерозе (13).

Длительная нагрузка с холестерином вызывала повышение активности гексокиназы, фосфофруктокиназы, альдолазы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и 6-фосфоглюконатдегидрогеназы в эритроцитах кроликов, а также увеличение содержания диоксиацетонфосфата, альфа-глицерофофсфата, пирувата и лактата (27).

При экспериментальном атеросклерозе отмечено (31) угнетение в печени аэробного превращения пировиноградной кислоты (наряду со снижением окисления субстратов цикла Кребса).

У здоровых людей хорошо сбалансировано равновесие между количеством холестерина, всасываемого в кишечнике, синтезируемого в тканях и выводимого из организма. Если в пище содержится много холестерина, то его уровень в крови временно повышается, при этом синтез холестерина в организме снижается. При голодании весь холестерин синтезируется в тканях. Роль пищевого холестерина и диеты в атерогенезе показано Н.Н. Аничковым и его последователями на животных. У кроликов в ответ на поступление холестерина и триглицеридов печень прекращает синтезировать антиатерогенные апо-А-содержащие липопротеиды и усиленно вырабатывает бета-ЛОНП, богатые эфирами холестерина и апо-Е. Поэтому реакцию травоядных кроликов на животные жиры и холестерин можно рассматривать как неадекватную защитную реакцию на нефизиологические стимулы (9, 10, 40, 47). Эпидемиологические исследования заставили признать, что нынешняя довольно стандартная пищевая диета, существующая в высокоразвитых странах, является одной из причин массового распространения атерогенных нарушений обмена липопротеидов и развития в последующем атеросклероза (46, 50, 51, 54, 56, 60, 65, 66).

В опытах на животных и в наблюдениях за больными с коронарными шунтами было установлено, что при концентрации 180-200 мг/дл сохраняется нулевой баланс холестерина в сосудистой стенке. Если концентрацию холестерина в плазме крови снизить ниже 200 мг/дл, то начинается выход холестерина из клеток сосудистой стенки. При концентрации холестерина более 200 мг/дл часть ЛПНП начинает откладываться в интиме сосудов. Конечно, в каждом отдельном случае вопрос о том, быть или не быть атеросклерозу, зависит от большого числа средовых, пищевых, генетических факторов, определяющих как чувствительность, так и резистентность к атеросклерозу. Поэтому современная гиполиподемическая терапия - это симптоматическое лечение, когда корригируется не первопричина (молекулярный деффект в клетках), а биохимический симптом - концентрация холестерина в ЛПНП (81, 82).

Любое лечение больных атеросклерозом начинается с диеты, поскольку пищевые нарушения в системе липопротеидов сильно распространены среди населения (36, 38, 40, 46, 73). В связи с этим интенсивно изучается роль пищевого холестерина в происхождении атерогенных дислипопротеидемий. Как и ожирение, атерогенные дислипопротеидемии в ряде случаев возникает в результате того, что количество потребляемых калорий превышает потребности организма в АТФ. Попытки рассматривать атеросклероз, как ответную реакцию на хроническую "интоксикацию" холестерином возникли из расчетов ежедневной потребности организма человека в триглицеридах и холестерине (38, 40, 69, 73). Расчеты показывают, что для насыщения клеток холестерином через ЛПНП - рецепторы требуются на порядок меньшие концентрации ЛПНП, чем существующий уровень частиц в кровотоке.

В настоящее время выделяют следующие основные группы препаратов, применяемые при атеросклерозе:

А) ингибиторы всасывания пищевого холестерина;

Б) стимуляторы синтеза желчных кислот;

В) ингибиторы синтеза холестерина;

Г) "ловушки" кислородных радикалов и окислительно-модифицированных ЛПНП

Д) аналоги фиброевой кислоты и другие ингибиторы и корректоры гипертриглицеридемий;

Е) стимуляторы обратного транспорта холестерина и синтеза ЛПВП;

Ж) ангиотропные вещества, блокирующие рост бляшек и стимулирующие их частичную регрессию (20, 36, 38, 46, 48, 49, 50).

Секвестранты желчи особенно эффективны, когда имеет место снижение интенсивности вывода атерогенных липопротеидов в печени (58). Поэтому секвестранты желчных кислот широко используются для лечения гетерозигот с семейной гиперхолетеринемией и в случае диетарной гиперхолестеринемии, когда избыток холестерина в клетках печени тормозит рецепторный катаболизм ЛПНП (58, 60, 65, 66, 78).

Фибраты. Механизм действия безафибрата и других производных фиброевой кислоты на метаболизм печени сложен, ведет к множественным перестройкам обмена веществ в гепатоцитах (19, 70, 81, 82). На первый план выступает торможение синтеза всех апобелков, секреция апо-В и апо-Е - содержащих ЛПОНП (11, 36). Хотя препараты и блокируют синтез холестерина на 30-50 %, это не сопровождается значительной активизацией рецепторного катаболизма ЛПНП. Безафибрат встраивается в молекулу липопротеидов и меняет их функциональные свойства. Фибраты индуцируют пролиферацию пероксисом (41, 42, 46, 49, 52) и таким путем они стимулируют окисление жирных кислот в пероксисомах и митохондриях и, соответственно, уменьшается синтез триглицеридов, синтез и секреция ЛПОНП клетками печени.

Антиоксиданты являются ловушкой активных форм кислорода и поэтому оказывают защитное действие на клетки. Одновременно они блокируют образование модифицированных липопротеидов, как в кровотоке, так и в тканях.

Ингибиторы эндогенного синтеза холестерина. Подлинная революция в лечении ускоренного атеросклероза произошла после открытия нового класса препаратов, синтезируемых некоторыми видами грибов. Эти вещества (мокалины) избирательно блокируют образование в клетках мевалоновой кислоты из ацетата. Мишенью их действия являются два фермента - ОМГ-редуктаза и синтетаза (5, 49, 57, 79) У человека мевалоновая кислота и изопреноиды расходуются главным образом на синтез одного продукта - холестерина. Поскольку около 75 % холестерина в организме человека синтезируется ежедневно из ацетата, очевиден их огромный потенциальный резерв как гиполипидемических агентов (38, 39, 43, 45).

В кардиологии наибольшую активность получили 3 препарата: ловастатин, симвастатин, правастатин, флувастатин, церивастатин (5, 49, 65, 71), которые применяются в медицинской практике, для коррекции атерогенных дислипопроотеидемий.

Но длительный прием этих препаратов приводит к возникновению у больных некоторых побочных явлений таких как: миозиты, боль в животе, запоры, метеоризм; тошнота, диарея, панктреатит, рвота, гепатит, желтуха. В сыворотке крови наблюдается устойчивое повышение активности трансаминаз, щелочной фосфотазы, КФК, гамма - глутаминтранспептидазы. Также отмечено побочное влияние на нервную систему: головная боль, головокружение, мышечные судороги, парестезии, периферическая нейропатия.

1. Основная часть

1.1 Выбор направления исследования

Цель исследования:

Поиск и разработка нового растительного лекарственного экстракта для профилактики и лечения атеросклероза.

Задачи исследования:

1. Выявление гиполипидемического, антиоксидантного и мембраностабилизирующего действия экстрактов, выделенных из растений, произрастающих в Узбекистане, в опытах in vivo.

2. Изучение антиатеросклеротического действия растительного экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого (Trigonella orthoseras K), при экспериментальном холестериновом атеросклерозе у кроликов.

3. Изучение фармакологической безвредности экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого (Trigonella orthoseras K).

Объект исследования:

750 белых беспородных крыс-самцов весом 180-200 г., 25 кроликов-самцов весом 2,5-2,9 кг, сыворотка и эритроцитарная масса крови больных.

Предмет исследования:

Экспериментальный холестериновый атеросклероз, липидный спектр крови, перекисное окисление липидов, антиоксидантная система, экстракт из семян овса и плодов пажитника пряморогого, морфология крови.

Ключевые слова:

Экстракты, липопротеиды, эритроциты, мембраны, перекисное окисление липидов (ПОЛ), холестерин, гиперлипидемия, гомеостаз, экспериментальный атеросклероз, триглицериды, гиполипидемические препараты, морфология крови, эндотоксемия, среднемолекулярные пептиды.

1.2 Материал и методы исследования

Первую серию экспериментов проводили на 659 белых-беспородных крысах самцах. Экстракты растений вводили перорально в дозе 10 мг/кг массы тела, в течение 5 дней. На шестые сутки воспроизводили модель эндогенной гиперлипидемии путем 24 часового голодания животных без ограничения потребления воды (Мещерская К.А., Сонина Г.П., 1972) и этаноловую гиперлипидемию путем перорального введения 50 % ного этилового спирта в дозе: первый день опыта 2 г/кг, на второй день - 4 г/кг, на третий день - 6 г/кг массы тела (Леонтьева Т.П., Рыженков В.Е., 1979). Затем животных забивали путем декапитации. Исследования проводились на сыворотке крови и эритроцитарной массе. Определяли концентрацию общего холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеидов высокой плотности ферментативным методом на автоанализаторе "DAYTONA" фирмы Randox (Великобритания), содержание общих липидов колориметрическим методом, c использованием набора "Lachema" (Чехия), концентрацию церулоплазмина определяли по методу Ravin, а также определяли степень перекисного гемолиза эритроцитов.

Вторую серию экспериментов проводили на кроликах - самцах весом 2,2-2,6 кг. Экспериментальный холестериновый атеросклероз создавали по общепринятому методу Аничкова С. С. и Халатова Н.Н. путем кормления 10 % масляным раствором холестерина в дозе 200 мг/кг массы тела, ежедневно, в течение 90 дней. Животные были разделены на 3 экспериментальные группы: 1-группу составили интактные животные, во вторую группу входили контрольные животные, которых в течение 3 месяцев кормили холестерином. 3-группу составили животные, которым вместе с холестерином ежедневно вводили перорально экстракт, выделенный из плодов пажитника пряморогого, в дозе 30 мг/кг массы тела (лечебно-профилактическая группа). Животных забивали путем декапитации под легким эфирным наркозом. В сыворотке крови исследовали липидный спектр. Печеночную ткань обрабатывали смесью хлороформ-метанол в соотношении 1:20, после получения липидов изучали в них содержание холестерина, триглицеридов, общих липидов и фосфолипидов. Концентрацию общего холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеидов высокой плотности, глюкозы, С-реактивного белка, молочной и пировиноградной кислот, АЛТ, АСТ определяли ферментативным методом на автоанализаторе "DAYTONA" фирмы Randox (Великобритания), содержание общих липидов определяли колориметрическим методом, c использованием набора "Lachema" (Чехия), а концентрацию фосфолипидов по методу Зильверсмита и Дэвиса. Содержание липопротеидов низкой и очень низкой плотности рассчитывали по формуле Фредриксона. Уровень МДА определяли методом Андреевой А.И. и соавт., ДК и ТК - по методу Гаврилова В.Б., Гавриловой А.Р. Содержание гликогена в сердечной и печеночной тканях определяли по методу Kerr, Le Baron.

В третьей серии экспериментов изучали фармакологическую безопасность длительного применения экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого. Исследовали острую и хроническую токсичность экстрактов на кроликах и крысах в опытах in vivo. Для этого животным перорально вводили раствор экстракта в различных дозах в течение 1-го и 3-х месяцев. Все животные были разделены на 4 группы. 1-я группа получала дистиллированную воду в объёме, соответствующем объёму препарата (контроль); 2-я группа получала препарат в дозе 3,0 мг/кг (пажитник пряморогий), разведенный в 2 мл дистиллированной воды; третья группа получала препарат в дозе 30 мг/кг в таком же объёме, 4-я группа получала препарат в дозе 60 мг/кг в таком же объёме, как и животные предыдущих групп. Препарат вводили ежедневно перорально 1 раз в день утром до кормления в течение 1-го и 3-х месяцев.

Исследовали картину периферической крови животных на первый и третий месяцы введения экстракта. Кровь брали из кончика хвоста и краевой вены уха кроликов. В крови подсчитывали число эритроцитов, лейкоцитов, эозинофилов, лимфоцитов, определяли содержание гемоглобина и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Также определяли содержание общего белка, глюкозы, АЛТ, АСТ, мочевины, креатинина в сыворотке крови на автоанализаторе "DAYTONA" фирмы Randox (Великобритания), содержание среднемолекулярных пептидов по методу Н.И. Габриэльян и соавт. Оценка степени эндотоксемии проводилась с помощью парамецийного теста, где была использована чистая культура Paramecium caudatum, время гибели которой, при смешивании с сывороткой крови опытных животных свидетельствует о степени токсичности сыворотки (Пафомов Г.А. и соавт.).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью стандартных методов вариационной статистики с применением t- критерия Стьюдента для оценки достоверности различий с использованием программы Eхsel-2000 на компьютере фирмы IBM PC. Средние величины представлены в виде М+m (средняя + средняя ошибка средней).

Новизна полученных результатов. По результатам проведенного первичного скрининга 105 экстрактов, выделенных из растений, произрастающих в Республике Узбекистан, в опытах in vivo на наличие гиполипидемического, антиоксидантного и мембраностабилизирующего действия был отобран растительный экстракт из плодов Trigonella orthoseras K (пажитника пряморогого).

Были получены результаты, свидетельствующие о положительном влиянии экстракта из плодов пажитника пряморогого на липидный и углеводный обмен, состояние ПОЛ и АОС, функциональное состояние печени при экспериментальном атеросклерозе.

Исследования, посвященные изучению фармакологической безопасности экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого, показали, что применение его в течение 1, 2 и 3-х месяцев практически не влияет на функциональное состояние иммунной, выделительной, детоксицирующей систем организма, а также на моторно-эвакуаторную функцию ЖКТ и не вызывает существенных изменений в картине периферической крови и основных биохимических показателей животных, а также не приводит к эндотоксемии.

Практическая значимость. Результаты исследований дадут возможность разработать препараты на растительной основе для лечения и профилактики атеросклероза, что позволит снизить риск развития ОИМ и других сердечно-сосудистых осложнений, позволит сократить число госпитализаций, инвалидность и смертность. Результаты проведенных исследований показали, что длительное применение экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого, приводит к улучшению показателей липидного обмена при экспериментальном холестериновом атеросклерозе. Полученные результаты могут быть предпосылкой для изучения механизмов гиполипидемического действия экстракта, выделенного из плодов пажитника пряморогого.

Исследования, посвященные изучению фармакологической безопасности длительного применения экстракта из пажитника пряморогого, показали абсолютную безвредность данных экстрактов, так как не были выявлены существенные изменения в гомеостазе организма и в картине периферической крови, в функциональном состоянии иммунной, выделительной, детоксицирующей систем организма, а также в моторно-эвакуаторной функции ЖКТ.

Поскольку себестоимость растительных экстрактов крайне невысока, применение их в качестве гиполипидемического средства может быть экономически выгодным, и результаты исследований могут быть конкурентоспособными на мировом рынке.

Диссертация содержит: 76 страниц, 32 таблицы и 83 источника литературы.

1.3 Результаты исследования

1.3.1 Выявление перспективных растительных экстрактов на наличие гиполипидемического, антиоксидантного и мембраноcтабилизирующего свойства на модели эндогенной гиперлипидемии

Проведенные исследования выявили ряд существенных изменений в липидном спектре крови при экспериментальной эндогенной гиперлипидемии (таблица 1). Полученные результаты свидетельствуют о том, что при эндогенной гиперлипидемии уровень общего холестерина и триглицеридов в сыворотке крови составляет 1,84 + 0,15 ммоль/л и 1,03 + 0,05 ммоль/л, соответственно, что на 71,9 % и 43,1 % выше по сравнению с интактными животными (1,07 + 0,03 ммоль/л и 0,73 + 0,041 ммоль/л).

Таблица 1. Скрининг растительных экстрактов на наличие гиполипидемического эффекта при эндогенной гиперлипидемии

Наименование экстракта	ОХС, Ммоль/л	ТГ, Ммоль/л	ХС ЛПВП, ммоль/л	ОЛ, г/л
Интактная группа	1,07+0,03	0,72+0,041	0,6+0,077	4,35+0,17
Контрольная группа	1,84+0,15	1,03+0,05	0,47+0,033	6,61+0,26
Plantago lanceolata (R)	1,69±0,15*	1,03±0,12*	0,39±0,04*	7,35±0,18*,**
Rosa canina (Bk)	1,59±0,25*	1,08±0,05*	0,35±0,08*	7,28±0,49*
Cratalgus songarica (R)	1,56±0,13*	1,11±0,19*	0,35±0,06*	8,07±0,17*,**
Cynodon dactulon (R)	1,90±0,61*	1,07±0,12*	0,33±0,11*	5,82±0,31
Prunus sogdiana (R)	1,55±0,26*	0,97±0,12*	0,39±0,03*	8,34±0,96*,**
Rosa canina (R)	1,65±0,14*	0,94±0,1*	0,37±0,11*	5,3±0,22
Crataegus pontica (L)	1,55±0,2*	1,06±0,06*	0,4±0,08*	7,68±0,65*,**
Iuniperus zeravshanica (Fr)	1,32±0,25	0,96±0,03*	0,39±0,09*	7,3±0,72*
Cynodon dactulon (O)	1,43±0,32	1,07±0,05*	0,35±0,05*	5,9±0,6
Rosa canina (Fr)	1,63±0,2*	0,92±0,09*	0,45±0,01*	5,89±0,39
Picnomon acarna (O)	1,91±0,11*	0,96±0,13*	0,43±0,05*	6,97±0,91*
Alhagi pseudalhagi (R)	1,84±0,16*	1,01±0,09*	0,48±0,08	7,46±0,75*,**
Rosa canina (L)	1,78±0,06*	0,95±0,13*	0,44±0,04	7,79±0,96*,**
Prunus sogdiana (Fr)	1,83±0,16*	0,95±0,15*	0,44±0,08	7,43±0,9*,**
Chenopodium album (Fr)	1,96±0,23*	1,07±0,02*	0,42±0,06	5,37±0,85
Rubus caesius (L)	1,77±0,13*	0,89±0,09	0,45±0,09	7,3±1,4*
Chenopodium album (R)	1,99±0,2*	0,94±0,05*	0,38±0,02*	6,3±0,39*
Amaranthus retroplexus (L)	1,9±0,04*	1,01±0,04*	0,35±0,06*	6,74±0,97*
Prunus sogdiana (L)	1,72±0,15*	0,89±0,1	0,47±0,09	7,23±2,08*
Amaranthus retroplexus (St)	1,78±0,15*	0,89±0,07	0,41±0,07	5,23±1,15
Amaranthus retroplexus (Fr)	1,74±0,12*	0,9±0,06	0,49±0,17	6,94±1,17*
Prunus sogdiana (Bk)	1,85±0,11*	0,98±0,05*	0,47±0,08	5,42±1,35
Prunus sogdiana (R)	1,95±0,11*	1,01±0,08*	0,48±0,07	5,9±1,59*
Prunus sogdiana (O)	1,68±0,14*	0,97±0,14*	0,47±0,07	7,32±0,59*
Pheum Fedtshenokovi (F)	1,86±0,19*	0,98±0,11*	0,43±0,07	5,54±1,41
Atraphaxis pyrifolia (Bk)	1,89±0,1*	1,06±0,09*	0,45±0,02	5,26±0,5
Atraphaxis pyrifolia (St)	1,96±0,28*	1,04±0,04*	0,51±0,1	6,08±0,55*
Atraphaxis pyrifolia (R)	2,14±0,08*	0,89±0,08	0,39±0,11*	7,79±1,03*
Amygdalis spinosissima (S)	1,75±0,05*	0,95±0,18*	0,43±0,06	6,32±1,1*
Cerasus erythrocapra (L)	1,86±0,12*	0,96±0,06*	0,35±0,03*	7,89±0,69*
Trigonella orthoseras K	1,24±0,06**	0,73±0,08**	0,49±0,05**	4,91±0,13**
Amygdalis bucharica (L)	1,97±0,23*	1,04±0,19*	0,35±0,04*	6,89±0,96*
Trifolium pratense (F)	1,88±0,04*	0,94±0,11*	0,43±0,03	5,87±1,35
Amygdalis bucharica (Bk)	1,87±0,2*	0,86±0,08	0,43±0,11	4,22±0,57**
Pheum Fedtshenokovi (L)	1,72±0,1*	0,93±0,06*	0,42±0,02	4,87±0,89**
Amygdalis bucharica (L)	1,65±0,18*	0,9±0,17	0,45±0,04	7,47±0,86*
Trifolium repens (O)	1,81±0,17*	0,94±0,09*	0,46±0,02	6,48±1,0*
Solidago dahurica Kitag (O)	1,72±0,1*	0,96±0,08*	0,45±0,08	7,4±0,49*
Acroptilon repens (L)Op.(O)	1,73±0,06*	0,95±0,07*	0,36±0,03*	6,458±0,8*
Melandrium turkestanicus (Rgl)Vved (R)	1,72±0,14*	0,94±0,07*	0,46±0,04	7,55±0,79*
Inula helenium (R)	1,81±0.1*	1,03±0,11*	0,45±0,02	7,42±1,26*
Artemisia vulgaris h. (O)	1,87±0,03*	0,98±0,04*	0,37±0,06*	7,75±1,67*
Berberis integerrima (Bge) (Fr)	1,71±0,12*	0,93±0,1*	0,35±0,06*	7,89±0,94*
Juniperus turkestanica Kom (L)	1,01±0,1**	0,72±0,05**	0,56±0,03	4,59±0,22**
Solonum nigra h. (Fr)	2,0±0,21*	0,98±0,11*	0,42±0,06	5,28±1,39
Solidago dahurica kitag ®	1,77±0,14*	0,98±0,12*	0,4±0,02*	6,51±1,31*
Melandrium turkestanicus (Rgl)Vved (O)	1,9±0,06*	0,98±0,08*	0,42±0,06	5,09±1,73
Acroptilon repens (F)	1,85±0,14*	0,83±0,06	0,35±0,07*	5,1±0,95
Trifolim pratense h.(F)	1,67±0,05*	1,01±0,09*	0,42±0,06	7,03±1,2*
Cousinia saawertziwii Regel (O)	1,92±0,11*	1,05±0,21*	0,44±0,06	7,09±0,49*
Anaphalis Velutina Krasch (O)	1,87±0,13*	0,94±0,06*	0,43±0,02	4,96±0,98**
Astragalus sp. (O)	1,75±0,08*	1,12±0,05*	0,44±0,06	7,68±0,34*
Berberis oblonga (Rgl) Schneid ®	1,84±0,05*	0,96±0,03*	0,39±0,01*	6,29±0,48*
Hieracium procerum Fr ®	1,83±0.16*	0,92±0,11*	0,46±0,07	6,98±1,31*
Stachys betoniciflora rupr. ®	1,84±0,11*	0,96±0,2*	0,46±0,04	4,96±1,49**
Acantholimon erythraeum Bge (A)	1,0±0,07**	0,79±0,06**	0,55±0,05**	4,64±0,48**
Pulicaria salviifolia Bunge (R)	1,76±0,06*	1,02±0,1*	0,45±0,09	7,85±2,16*
Psoralea drupacea Bunge (S)	1,78±0,18*	1,01±0,2*	0,47±0,03	7,91±1,43*
Trifolim pratense h.(O)	1,74±0,06*	0,99±0,09*	0,41±0,05	6,48±0,48*
Melandrium turkestanicus (Rgl)Vved (Fr)	1,91±0,13*	1,1±0,17*	0,38±0,07*	5,48±0,57
Artemisia vulgaris h. (R)	1,91±0,1*	1,13±0,25*	0,43±0,05	6,94±0,37*
Descurania Sophia (L) Schur (Fr)	0,98±0,08**	0,73±0,06**	0,53±0,04**	4,39±0,39**
Xantium strumarium h. (St)	1,78±0,17*	0,85±0,07	0,45±0,04	7,8±0,27*
Conum maculatum h. (St)	1,78±0,16*	0,91±0,05*	0,44±0,05	6,56±0,49*
Cortusa turkestanica A. Los (O)	1,81±0,09*	0,89±0,06	0,38±0,04*	6,2±1,0*
Tanasetopsis mucronatun S kovalev (O)	1,85±0,18*	0,9±0,06*	0,5±0,1	6,43±0,1*
Xantium strumarium h. (S)	1,79±0,08*	0,81±0,1	0,37±0,09*	7,8±0,3*
Herniaria glabra h. (O)	1,76±0,13*	0,84±0,05	0,37±0,04*	7,98±1,04*
Leonurus turkestanicusV.Krecr et Kupr (O)	1,88±0,09*	0,91±0,1*	0,44±0,12	6,57±0,91*
Arctium tomentisum Mill (R)	1,76±0,18*	1,1±0,04*	0,46±0,07	4,57±0,87**
Ziziphora pedicillate Parii et Vved (R)	1,74± 0,12*	0,93±0,11*	0,39±0,07*	8,38±1,2*
Solidago dahurica Kitag (F)	1,7±0,14*	0,93±0,1*	0,47±0,03	7,2±0,6*
Hierasiun procerum Fr (O)	1,56±0,06*	0,91±0,06*	0,37±0,18*	6,17±0,51*
Solonum nigra h. (St)	1,91±0,08*	0,98±0,13*	0,44±0,03	7,45±0,82*
Agrimonia asiatica Ius (R)	1,83±0,05*	0,92±0,12*	0,33±0,07*	6,41±1,24*
Xantium strumarium h.(R)	1,82±0,06*	0,91±0,11*	0,34±0,07*	5,29±1,3
Cortusa turkestanica A. Los (F)	1,99±0,08*	1,04±0,14*	0,52±0,06	5,88±1,44
Artemisia vilgaris L.(F)	1,67±0,04*	0,93±0,06*	0,42±0,06	6,5±0,21*
Chamenerium angustibolium (L) Scop (R)	1,82±0,13*	1,04±0,12*	0,4±0,17*	6,91±0,51*
Stachyopsys oblongata M. Popet Vved (O)	1,84±0,05*	0,9±0,09*	0,51±0,1	8,02±0,79*
Stachys betoniciflora Rupr (F)	1,9±0,18*	1,0 ±0,1*	0,54±0,15**	6,11±0,82*
Ziziphora pedicillate Parii et Vved (St)	1,73±0,1*	0,96±0,11*	0,49±0,08	7,56±0,82*
Spiraea pilosa Franch (O)	1,93±0,05*	0,94±0,11*	0,38±0,05*	7,83±1,02*
Acroptilon repens (R)	1,65±0,12*	0,84±0,04	0,36±0,07*	7,39±1,3*
Solonum nigra h. (R)	1,78±0,16*	1,03±0,1*	0,52±0,08	6,01±1,1*
Phragmites communis Trin (St)	1,89±0,07*	1,14±0,09*	0,51±0,1	6,78±0,23*
Cortusa turkestanica A. hos (R)	1,8±0,03*	0,86±0,08*	0,4±0,02*	4,29±0,97**
Trigonella pamirica Boriss (A)	1,0±0,12**	0,76±0,74**	0,54±0,08	4,54±0,57**
Astragalus sp. (R)	1,86±0,17*	0,98±0,13*	0,34±0,08*	7,53±0,76*
Trifolium pratense L. (R)	1,73±0,13*	0,98±0,24*	0,42±0,11	7,98±0,62*
Solonum nigra h. (L)	1,79±0,2*	0,96±0,15*	0,41±0,05	6,7±0,41*
Pulicaria salviibolia Binge (St)	1,49±0,17	0,69 ±0,1**	0,4±0,04*	5,84±1,46
Phragmites communis Tren (L)	1,75±0,6*	0,94±0,1*	0,45±0,16	5,94±1,29
Phragmites communis Trin (R)	1,69±0,16*	0,98±0,15*	0,41±0,08	6,24±1,0*
Oberna beechen (L) Ikonn (Fr)	1,68±0,15*	0,78±0,06**	0,46±0,08	7,69±0,51*
Agrimonia ariatica Ius (L)	1,83±0,13*	1,07±0,13*	0,44±0,05	8,33±0,39*
Serophularia umbrosa Dumort (St)	1,91±0,1*	1,07±0,06*	0,32±0,08*	7,19±1,13*
Serophularia umbrosa Dumort (O)	1,69±0,13*	0,85 ±0,18	0,54±0,15**	8,04±0,7*
Siderities montana L (St)	1,89±0,12*	0,94±0,1*	0,43±0,06	6,01±0,73*
Phlomis olgae Rgl (R)	1,01±0,1**	0,74±0,07**	0,54±0,06**	4,5±0,22**
Serratula alatavica c.A.M. (F)	1,83±0,11*	1,03±0,16*	0,38±0,07*	4,84±0,52**
Serratula alatavica c.A.M.(O)	1,89±0,08*	0,97±0,08*	0,37±0,07*	7,15±0,68*
Inula helenium L (F)	1,66±0,04*	0,95±0,13*	0,43±0,04	7,6±1,18*
Psoralea drupacea Bunge (R)	1,77±0,2*	0,96±0,17*	0,45±0,11	8,99±0,4*
Inula helenium L (L)	1,8±0,19*	1,06±0,08*	0,43±0,1	7,05±1,09*
Phlomis sewerzowii Rgl (O)	1,38±0,17*	0,96±0,16*	0,47±0,01	6,24±0,5*

Примечание: достоверное отличие Р<0,05 * - от интактной группы; ** - от контрольной группы

Содержание холестерина липопротеидов высокой плотности, напротив, снижалось на 21,7 % и составило 0,47 + 0,033 ммоль/л против 0,6 + 0,036 ммоль/л. Эндогенная гиперлипидемия привела к повышению уровня общих липидов сыворотки крови на 52,0 %, что составило 6,61 + 0,26 г/л, у животных интактной группы аналогичный показатель составлял 4,35 + 0,17 г/л.

В последние годы появилось много работ, свидетельствующих о важной роли процессов перекисного окисления липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза. Известно, что контроль за процессами ПОЛ в организме осуществляют антиоксидантные системы (АОС). Одним из главных антиоксидантов сыворотки крови является церулоплазмин. В связи с этим было целесообразно изучить влияние исследуемых экстрактов на уровень церулоплазмина. Изучение антиоксидантной системы показало, что при экспериментальной эндогенной гиперлипидемии содержание церулоплазмина в сыворотке крови снизилось в 1,2 раза по сравнению с животными интактной группы (таблица 2). Так, уровень церулоплазмина в интактной и контрольной группах составил 16,82 + 2,24 мг/дл и 13,08 + 1,38 мг/дл, соответственно. Снижение уровня антиоксидантов в организме приводит к увеличению аутоокисления липидов мембран эритроцитов, что снижает их устойчивость к гемолизу. В связи с этим, нами был изучен перекисный гемолиз эритроцитов в эритроцитарной массе. При эндогенной гиперлипидемии наблюдалась тенденция к повышению перекисного гемолиза эритроцитов: в интактной группе данный показатель составил 13,87 + 0,66 %, а в контрольной 16,18 + 0,12 %.

Таблица 2. Скрининг растительных экстрактов на наличие антиоксидантного и мембраностабилизирующего эффекта при эндогенной гиперлипидемии

Наименование экстракта	Церуло плазмин, Мг/100мл	ПГЭ %
Интактная группа	16,82+2,24	13,87+0,66
Контрольная группа	13,08+1,38	16,18+0,12
Plantago lanceolata (R)	11,75±2,19*	15,4±0,11
Rosa canina (Bk)	13,69±3,3	14,0±0,08
Cratalgus songarica (R)	10,96±2,84*	16,0±0,1
Cynodon dactulon (R)	12,82±2,35*	12,13±0,1
Prunus sogdiana (R)	8,4±1,74*,**	13,2±0,13
Rosa canina (R)	8,91±1,39*	14,9±0,1
Crataegus pontica (L)	10,17±2,69*	15,2±0,13
Iuniperus zeravshanica (Fr)	12,37±3,48*	17,1±0,1
Cynodon dactulon (O)	17,37±3,7**	18,1±0,09*
Rosa canina (Fr)	15,99±2,7**	17, 0±0,11
Picnomon acarna (O)	15,89±2,38**	13,1±0,21
Alhagi pseudalhagi (R)	8,25±1,98*,**	13,2±1,05
Rosa canina (L)	10,59±1,59*	14,7±1,0
Prunus sogdiana (Fr)	16,08±3,08**	17,0±0,15
Chenopodium album (Fr)	14,19±2,26	18,3±0,71*
Rubus caesius (L)	6,73±2,34*,**	19,2±0,12*
Chenopodium album (R)	13,15±2,01*	14,3±0,45
Amaranthus retroplexus (L)	9,46±1,99*	13,3±0,6
Prunus sogdiana (L)	10,98±2,0*	18,1±0,92*
Amaranthus retroplexus (St)	13,72±3,48*	17,0±0,71
Amaranthus retroplexus (Fr)	6,72±1,81*,**	14,3±0,19
Prunus sogdiana (Bk)	12,8±2,95*	15,3±0,21
Prunus sogdiana (R)	13,3±1,54	18,0±1,3*
Prunus sogdiana (O)	9,45±2,18*	17, 0±0,43
Pheum Fedtshenokovi (F)	6,89±2,92*,**	13,2±0,47
Atraphaxis pyrifolia (Bk)	6,36±1,31*,**	15,0±0,53
Atraphaxis pyrifolia (St)	6,56±1,15*,**	13,7±0,79
Atraphaxis pyrifolia (R)	8,73±4,59*	17,2±0,42
Amygdalis spinosissima (S)	7,89±1,6*	12,3±0,24
Cerasus erythrocapra (L)	10,62±1,48*	14,2±0,73
Trigonella orthoseras K	15,46±1,04**	15,0±0,15
Amygdalis bucharica (L)	6,31±2,17*,**	13,7±0,79
Trifolium pratense (F)	10,62±1,84*	19,2±0,71*
Amygdalis bucharica (Bk)	14,53±2,89	14,2±0,48
Pheum Fedtshenokovi (L)	11,72±1,84*	17,9±1,24
Amygdalis bucharica (L)	11,52±3,26*	15,0±0,15
Trifolium repens (O)	7,71±1,49*	18,4±0,13
Solidago dahurica Kitag (O)	12,44±1,69*	12,3±0,72
Acroptilon repens (L)Op.(O)	6,48±1,71*,**	17,2±0,49
Melandrium turkestanicus (Rgl)Vved (R)	14,31±4,31	12,3±0,73
Inula helenium (R)	13,9±2,7	15,0±0,28
Artemisia vulgaris h. (O)	8,24±1,18*	16,3±0,39
Berberis integerrima (Bge) (Fr)	14,1±3,13	14,4±0,47
Juniperus turkestanica Kom (L)	15,03±2,59**	17,2±0,78
Solonum nigra h. (Fr)	16,88±1,31**	15,0±0,43
Solidago dahurica kitag ®	15,02±3,88**	12,3±0,47
Melandrium turkestanicus (Rgl)Vved (O)	7,5±1,27*	17,4±0,78
Acroptilon repens (F)	8,0±2,77*	13,9±0,49
Trifolim pratense h.(F)	13,51±1,34	14,2±0,17
Cousinia saawertziwii Regel (O)	6,07±1,93*,**	15,3±0,79
Anaphalis Velutina Krasch (O)	14,71±2,16	17,3±0,48
Astragalus sp. (O)	9,67±2,02*	14,3 ±0,48
Berberis oblonga (Rgl) Schneid ®	10,35±1,85*	14,7±0,79
Hieracium procerum Fr ®	12,49±3,59*	12,3±0,47
Stachys betoniciflora rupr. ®	9,58±0,6*	17, 3±0,13
Acantholimon erythraeum Bge (A)	14,55±1,96	18,4±0,49*
Pulicaria salviifolia Bunge (R)	14,62±1,69	18,2±0,74*
Psoralea drupacea Bunge (S)	15,57±1,49	20,5±0,95*
Trifolim pratense h.(O)	8,32±2,85*	14,2±0,24
Melandrium turkestanicus (Rgl)Vved (Fr)	8,84±2,65*	12,3±0,71
Artemisia vulgaris h. (R)	13,47±1,84	11,7±0,83
Descurania Sophia (L) Schur (Fr)	15,79±1,95	17,3±0,49
Xantium strumarium h. (St)	17,37±2,51**	12,9±0,55
Conum maculatum h. (St)	13,47±3,42	11,8±0,67
Cortusa turkestanica A. Los (O)	9,68±3,0*	16,2±0,79
Tanasetopsis mucronatun S kovalev (O)	14,9±2,61	17,8±0,97
Xantium strumarium h. (S)	18,1±5,48**	13,2±0,42
Herniaria glabra h. (O)	13,4±3,55	10,0±0,85
Leonurus turkestanicusV.Krecr et Kupr (O)	11,85±1,52*	11,2±1,35
Arctium tomentisum Mill (R)	11,62±2,92*	12,1±0,67
Ziziphora pedicillate Parii et Vved (R)	7,8±0,69*	19,7±1,43
Solidago dahurica Kitag (F)	12,84±1,61*	14,7±0,81
Hierasiun procerum Fr (O)	10,5±3,06*	15,6±0,67
Solonum nigra h. (St)	9,48±11,13*	12,6±0,24
Agrimonia asiatica Ius (R)	9,33±0,15*	13,6±0,42
Xantium strumarium h.(R)	9,33±2,15*	14,7±0,81
Cortusa turkestanica A. Los (F)	6,65±1,88*,*	11,8±0,3
Artemisia vilgaris L.(F)	11,6±1,71*	17,3±0,67
Chamenerium angustibolium (L) Scop (R)	7,16±2,11*	18,3±0,95
Stachyopsys oblongata M. Popet Vved (O)	8,63±2,84*	12,4±0,79
Stachys betoniciflora Rupr (F)	11,37±2,17*	17,1±1,24
Ziziphora pedicillate Parii et Vved (St)	17,58±2,28**	18,9±0,29*
Spiraea pilosa Franch (O)	12,63±2,47*	17,0±1,23
Acroptilon repens (R)	10,10±2,11*	18,4±0,45*
Solonum nigra h. (R)	5,79±1,01*,**	12,5±0,17
Phragmites communis Trin (St)	15,2±0,66	17,6±0,79
Cortusa turkestanica A. hos (R)	14,2±2,92	18,8±0,97*
Trigonella pamirica Boriss (A)	20,74±1,11*.**	13,4±0,48
Astragalus sp. (R)	13,4±2,11	15,5±0,57
Trifolium pratense L. (R)	15,72±2,54	18,7±0,49*
Solonum nigra h. (L)	15,07±2,24	14,3±0,74
Pulicaria salviibolia Binge (St)	7,09±1,26*	14,7±0,85
Phragmites communis Tren (L)	5,64±1,19*,**	16,3±0,23
Phragmites communis Trin (R)	8,83±1,85*	12,4±0,43
Oberna beechen (L) Ikonn (Fr)	7,38±2,02*	12,4±0,75
Agrimonia ariatica Ius (L)	16,69±2,45**	18,3±0,13*
Serophularia umbrosa Dumort (St)	8,25±2,2*	11,9±0,47
Serophularia umbrosa Dumort (O)	7,86±1,93*	10,9±0,49
Siderities montana L (St)	12,21±1,66*	18,0±0,12*
Phlomis olgae Rgl (R)	16,54±1,87**	17,1±0,18
Serratula alatavica c.A.M. (F)	7,62±3,53*	16,3±0,94
Serratula alatavica c.A.M.(O)	12,36±1,59*	12,4±0,17
Inula helenium L (F)	12,12±1,75*	13,1±0,74
Psoralea drupacea Bunge (R)	12,11±1,96*	12,4±0,19
Inula helenium L (L)	5,82±1,73*,**	17,3±0,89
Phlomis sewerzowii Rgl (O)	11,24±3,41*	16,6±0,62

Примечание: достоверное отличие Р<0,05 * - от интактной группы; ** - от контрольной группы

Первичный скрининг растительных экстрактов показал, что самым мощным гиполипидемическим и антиоксидантным эффектом обладают экстракты следующих растений: листья Juniperus turkestanica Kom, надземная часть Acantholimon erythraeum Bge, плоды Descurania Sophia (L) Schur, надземная часть Trigonella pamirica Boriss, плоды Trigonella orthoseras K, корни Phlomis olgae Rgl. Так, экстракт из листьев Juniperus turkestanica Kom снижал концентрацию общего холестерина и триглицеридов в сыворотке крови на 45,7 % и 30,1 % по сравнению с контролем, а содержание холестерина липопротеидов высокой плотности повышал на 19,1 %. Под влиянием данного экстракта наблюдалось снижение общих липидов в 1,4 раза и повышение содержания церулоплазмина на 15,0 %. Экстракт из листьев Juniperus turkestanica Kom на степень перекисного гемолиза эритроцитов практически не влиял.