Экспериментальное обоснование новых способов патогенетической коррекции пиелонефрита у детей

Анализ эффективности включения препаратов Вобэнзим и Суперлимф в комплексную терапию острого пиелонефрита. Изучение современных особенностей течения пиелонефрита в детском возрасте. Характеристика роли эндогенной кишечной бактериемии в его развитии.

Рубрика Медицина
Вид автореферат
Язык русский
Дата добавления 29.12.2017
Размер файла 205,5 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Центральная научно-исследовательская лаборатории Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Росздрава»

На правах рукописи

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Экспериментальное обоснование новых способов патогенетической коррекции пиелонефрита у детей

14.03.03 - патологическая физиология

14.01.08 - педиатрия

Косарева Полина Владимировна

Челябинск 2010

Работа выполнена в Центральной научно-исследовательской лаборатории Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Росздрава»

Научные консультанты: академик РАН и РАМН, доктор медицинских наук, профессор Валерий Александрович Черешнев

доктор медицинских наук, профессор Наталья Ивановна Аверьянова

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Борис Германович Юшков

доктор медицинских наук, профессор Леонид Александрович Дулькин

доктор медицинских наук Михаил Владимирович Осиков

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет» им. Н.И. Пирогова, г. Москва

Защита диссертации состоится 2010 г. на заседании специализированного Совета Д-208.117.02 Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Росздрава» (г. Челябинск, ул. Воровского, 64).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Росздрава» (г. Челябинск, ул. Воровского, 64).

Автореферат разослан 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор Н.В. Тишевская.

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Заболеваемость пиелонефритом на сегодняшний день не имеет тенденции к снижению (Коровина с соавт., 2003; Никитина с соавт., 2007; Orellana et al., 2002), а хронизация инфекционного процесса в ткани почек, его рецидивирование и прогрессирование с формированием нефросклероза и развитием хронической почечной недостаточности, приводящих к инвалидизации больного (Domann еt al., 2003), ставят эту проблему в ряд особо важных.

Существование подобной ситуации обусловлено многими факторами, среди которых ведущими являются рост антибиотикорезистентности условно-патогенной микрофлоры (Manges et al., 2001) и тенденцией к снижению иммунологической резистентности у детей (Румянцев с соавт., 2000). Антибактериальная терапия, которой отводится ведущая роль в терапии пиелонефрита, зачастую оказывается недостаточной для ликвидации инфекционно-воспалительного процесса, что определяет растущий интерес исследователей к поиску новых эффективных и безопасных средств патогенетической терапии инфекционно-воспалительных заболеваний почек.

Несмотря на достаточную полноту данных, касающихся этиологии и патогенеза пиелонефрита, в данной области имеется ряд открытых вопросов. К их числу относится, прежде всего, вопрос о роли эндогенной бактериемии в развитии и течении инфекционно-воспалительного процесса в почках. По мнению ряда авторов, в патогенезе пиелонефрита определяющее значение имеет восходящая уроинфекция, а гематогенное инфицирование встречается редко, обычно происходит на фоне системных инфекций и сопровождается острым двусторонним гнойным (метастатическим) пиелонефритом (Тареева, 2000; Симченко с соавт., 2000; Лукьянов, 2006; Schlader, 2001). Тем не менее, рядом отечественных и зарубежных авторов высказывается точка зрения, заключающаяся в том, что эндогенная бактериемия энтерального происхождения способствует развитию инфекционного процесса в удаленных от первичного очага инфекции органах и, в частности, в почках (Вялкова, 1989; Бондаренко, 2004; Гриценко с соавт., 2008; Mandell et al., 2000; Papp et al., 2003).

Поскольку чаще всего источником эндогенной бактериемии служит толстая кишка как наиболее массивно заселенный биотоп в организме (Зурочка, 1984; Долгушин, Эберт, Лившиц, 1989), основным этиологическим фактором пиелонефрита при эндогенном инфицировании ткани почек является микрофлора желудочно-кишечного тракта (Mandell et al., 2000; Alverdy et al., 2003). Поэтому поиск средств, препятствующих реализации процесса транслокации бактерий через стенку кишечника в системный кровоток, также представляется весьма актуальным. Согласно литературным данным, наиболее оптимальным в этом отношении может стать дополнительное включение в рацион продуктов, содержащих пищевые волокна, являющиеся источником короткоцепочечных жирных кислот, под действием которых происходит селективная стимуляция роста и активности индигенной микрофлоры и одновременно подавление роста патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и укрепление стенки кишечника, а, следовательно, и стабилизация гематоинтестинального барьера (Roberfroid et al., 2002; Priebe et al., 2002).

Обозначенные проблемы определили цели и задачи диссертационной работы.

Цель диссертационной работы: разработать экспериментальную модель острого пиелонефрита и апробировать на доклиническом материале и в клинике новые методы его патогенетической коррекции с учетом выявленных современных особенностей течения микробно-воспалительных заболеваний почек в детском возрасте.

Задачи исследования:

1. Разработать экспериментальную модель пиелонефрита, позволяющую воспроизводить инфекционно-воспалительный процесс в почках, подобный наблюдаемому в клинике, и не сопровождающуюся нанесением животному операционной травмы.

2. На разработанной экспериментальной модели пиелонефрита исследовать целесообразность диеты с высоким содержанием метаболизированных пищевых волокон для нормализации качественного и количественного состава кишечной микрофлоры и стабилизации гематоинтестинального барьера.

3. Оценить в эксперименте эффективность включения препаратов Вобэнзим и Суперлимф в комплексную терапию острого пиелонефрита.

4. Изучить современные особенности течения пиелонефрита в детском возрасте и охарактеризовать роль эндогенной кишечной бактериемии в его развитии.

5. Провести клинические исследования эффективности применения биологически активной добавки к пище «Ультрасорб» в качестве компонента функционального питания и препарата Вобэнзим у детей как средства патогенетической терапии.

Научная новизна исследования. Разработаны два новых варианта моделирования острого пиелонефрита у экспериментальных животных, включая наиболее приближенную к реальным клиническим условиям модель пиелонефрита, развивающегося вследствие эндогенного инфицирования на фоне острого холодового стресса. От пациентов с пиелонефритом, подтвержденным клиническими и лабораторными данными, выделены и охарактеризованы штаммы микроорганизмов (Escherichia coli № 2899 и Staphylococcus saprophyticus № 1256), вызывающие развитие острого пиелонефрита у животных при различных способах заражения.

Выявлено, что у животных с воспалительными изменениями в ткани почек отмечается выраженная экспрессия ICAM-1 на эндотелиальных клетках и эпителиоцитах проксимальных извитых канальцев. У животных, подвергнутых ректальному введению урокультуры кишечной палочки и последующему острому стрессу, в толстой кишке отмечается активация процессов апоптоза и уменьшение индекса пролиферации.

Впервые установлено, что включение «Ультрасорба» в рацион экспериментальных животных обеспечивает нормализацию популяционной численности и видового состава микрофлоры, образующей биотоп толстой кишки, и показателей периферической крови. При моделировании острого пиелонефрита, развившегося в результате феномена бактериальной транслокации кишечной микрофлоры на фоне острого холодового стресса, включение «Ультрасорба» в диету экспериментальных животных способствует устранению кишечного дисбактериоза и препятствует транслокации условно-патогенной микрофлоры кишечника во внутреннюю среду организма, таким образом обеспечивая профилактику инфекционных осложнений в условиях острого стресса, что подтверждается результатами гематологических, бактериологических, гистологических и иммуногистохимических исследований.

Впервые установлено, что включение в экспериментальную терапию пиелонефрита комплекса природных цитокинов и антибактериальных катионных пептидов в составе препарата Суперлимф так же, как и комплекса протеолитических энзимов в виде препарата Вобэнзим, способствует нормализации лабораторных показателей и ликвидации признаков микробного воспаления в ткани почек экспериментальных животных.

Охарактеризованы современные тенденции течения пиелонефрита у детей. На клиническом и патологоанатомическом материале показана роль эндогенной бактериемии, развивающейся вследствие транслокации условно-патогенной кишечной микрофлоры в системный кровоток, в развитии пиелонефрита в детском возрасте.

Впервые установлено, что использование «Ультрасорба» в качестве компонента функционального питания у пациентов с пиелонефритом способствует более быстрой нормализации клинических и лабораторных показателей. Выявлено, что применение ферментного препарата Вобэнзим в составе комплексной терапии пиелонефрита у детей способствует более быстрому клиническому улучшению и нормализации лабораторных показателей.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты экспериментальных и клинических исследований, свидетельствующие о роли эндогенной бактериемии в развитии пиелонефрита, позволяют расширить представление о механизмах патогенеза инфекционно-воспалительных заболеваний органов мочевыделительной системы, а также определить оптимальные точки приложения патогенетической терапии при лечении данной патологии.

Установленный в эксперименте эффект «Ультрасорба» в профилактике развития пиелонефрита на фоне эндогенного инфицирования является аргументом в защиту значимости эндогенной бактериемии, обусловленной стрессом, в формировании инфекционно-воспалительных заболеваний почек. Разработанный в эксперименте способ профилактики пиелонефрита может использоваться в клинической практике как у пациентов с хроническим пиелонефритом - в плане предупреждения обострений, так и у пациентов, страдающих дисбактериозом кишечника, с целью профилактики микробно-воспалительного поражения почек. Положительное влияние диеты, обогащенной пищевыми волокнами и короткоцепочечными жирными кислотами, на клинические и лабораторные показатели при остром пиелонефрите получило подтверждение в клинических исследованиях.

Выявленная в эксперименте эффективность препарата Суперлимф делает перспективным дальнейшее его изучение с целью последующего применения в клинической, в том числе, педиатрической практике. Результаты проведенных доклинических и клинических исследований эффективности применения ферментного препарата Вобэнзим при лечении пиелонефрита дают основание к широкому применению его в детской нефрологии. пиелонефрит бактериемия детский

Положения, выносимые на защиту:

1. Разработанная модель острого пиелонефрита, имитирующая развитие инфекционно-воспалительного процесса в почках вследствие феномена бактериальной транслокации на фоне острого стресса, является оптимальным способом воспроизведения острого пиелонефрита в эксперименте.

2. Включение метаболизированных пищевых волокон в рацион животных, подвергшихся ректальному заражению урокультурой Escherichia coli, способствует нормализации популяционной численности и активности облигатной микрофлоры кишечника, стабилизации гематоинтестинального биологического барьера и профилактике эндогенного пиелонефрита.

3. Включение в экспериментальную терапию пиелонефрита препарата Суперлимф оказывает регулирующее влияние на процессы иммунного ответа и воспаления.

4. Применение препарата Вобэнзим как компонента патогенетической терапии острого пиелонефрита ускоряет регрессию воспалительных изменений в ткани почек и способствует восстановлению нормальной структуры тканей в органах иммунитета.

5. В детском возрасте в возникновении и прогрессировании пиелонефрита существенную роль играет эндогенная бактериемия, развивающаяся вследствие транслокации условно-патогенной кишечной микрофлоры в системный кровоток; в связи с чем патогенетически обоснованным является использование в качестве компонента функционального питания метаболизированных пищевых волокон с целью нормализации кишечного микробиоценоза и предотвращения нарушения целостности гематоинтестинального барьера.

6. Включение ферментного препарата Вобэнзим в комплексную терапию пиелонефрита у детей положительно влияет на клинические и лабораторные показатели.

Внедрение в практику. Полученные в ходе экспериментальных и клинических исследований результаты внедрены в работу отдела морфологических и патофизиологических исследований ЦНИЛ, используются в учебном процессе на кафедре пропедевтики детских болезней и факультетской педиатрии, кафедре патологической физиологии, кафедре гистологии, эмбриологии и цитологии, кафедре микробиологии и вирусологии, кафедре нормальной, топографической и клинической анатомии ГОУ ВПО «ПГМА им. академика Е.А. Вагнера Росздрава», внедрены в работу городского нефрологического отделения и поликлиник №1, №2, №3 ГДКБ им. П.И. Пичугина г. Перми.

Связь работы с научными программами. Работа выполнена в соответствие с планом НИР ГОУ ВПО «ПГМА им. академика Е.А. Вагнера Росздрава».

Апробация работы и публикации. Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на II Всероссийской научно-практической конференции «Здоровье и образование», Пермь, 2004 г.; IV Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине», Тула, 2005 г.; VI Международной конференции «Проблемы загрязнения окружающей среды», Пермь-Казань-Пермь, Россия, 2005 г.; II Международной конференции «Микробное разнообразие: состояние, стратегия сохранения, биологический потенциал», Пермь-Казань-Пермь, Россия, 2005 г.; Научно-практической конференции «Научно-практические итоги региональных конкурсов РФФИ-Урал в Пермском крае 2004-2006 годов», Пермь, 2007 г.; научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы медицины», Пермь, 2007 г.; Весенней сессии Российской Академии Естествознания, Москва, 2007 г.; VII Международной конференции «Загрязнение окружающей среды, адаптация, иммунитет», Пермь-Нижний Новгород-Пермь, 2008 г.; II Межрегиональной гастроэнтерологической научно-практической конференции «Неинфекционные заболевания кишечника: от научных достижений к стандартам терапии», Нижний Новгород, 2008 г.; III Научно-практической конференции гастроэнтерологов ПФО «Диагностика и лечение заболеваний органов пищеварения: от научных достижений к стандартам терапии», Нижний Новгород, 2009 г.; Заседании Пермского нефрологического общества, Пермь, 2009 г.; Итоговых научных сессиях ПГМА им. академика Е.А. Вагнера Росздрава, Пермь, 2005 г., 2006 г., 2009 г.

По теме диссертации опубликована 51 печатная работа, из них 9 работ, опубликованных в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ, 4 патента РФ на изобретение.

Объем и структура диссертации. Диссертация включает следующие разделы и главы: содержание, введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, четыре главы собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, практические рекомендации, список литературы. Материалы диссертации изложены на 442 печатных страницах, содержат 100 таблиц, 124 рисунка, 2 клинических примера, включают 324 литературных источника, из которых 151 - отечественных и 173 - иностранных авторов.

Содержание работы

Материалы и методы исследования

Экспериментальный раздел работы. Эксперименты проведены на 190 животных - нелинейных белых крысах, самцах и самках, четырехмесячного возраста массой тела 150-200 г. Животные содержались в стандартных условиях экспериментально-биологической клиники - вивария (свободный доступ к пище и воде и 12-14-часовой световой день), получали типовой рацион питания в соответствии с нормами, утвержденными приказом МЗ СССР от 10 марта 1966 г. № 163 и Приказом МЗ СССР от 10.10.83 № 1179 (пункт 4.1). Все эксперименты выполнены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1977 г. N 755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г. на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории Государственного учреждения высшего профессионального образования «Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», имеющего разрешение на работу с экспериментальными животными.

Для заражения животных использованы выделенные от пациентов урокультуры бактерий: лактозонегативная Escherichia coli (штамм № 2899) и Staphylococcus saprophyticus (штамм № 1256). Культуры микроорганизмов изолированы из мочи детей, входящих в клиническую выборку и имеющих диагноз «острый пиелонефрит», в концентрации не менее 105 КОЕ/мл. Идентификацию чистых культур проводили при помощи систем одноразового использования для дифференциации микроорганизмов - «ЭНТЕРОтест 24» (PLIVA-Lachema Diagnostica s.r.o., г. Москва) для идентификации E. coli, «ПБДС» (НПО «Диагностические системы», Нижний Новгород) - для идентификации St. saprophyticus.

Экспериментальная терапия включала следующие препараты.

Антибиотики группы цефалоспоринов, имеющие широкий спектр антимикробного действия: Цефазолин (из расчета 50 мг/кг в 500 мкл физиологического раствора) и Клафоран (Цефотаксим) - из расчета 25 мг/кг в 500 мкл физ. раствора. К данным антибактериальным препаратам установлена чувствительность урокультур St. saprophyticus и E. coli в экспериментах in vitro.

Суперлимф (Superlimf) - комплекс природных антибактериальных пептидов (протегринов) и цитокинов - разработан и внедрен в клиническую практику кафедрой иммунологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет» им. Н.И. Пирогова совместно с предприятием «Иммунохелп» (г. Москва), является иммуномодулятором с прямым противовирусным и противомикробным действием. Суперлимф в эксперименте применяли из расчета 0,1 мг/кг в 500 мкл физиологического раствора.

Антибиотики и Суперлимф животным вводили интраперитонеально, 1 раз в сутки.

Вобэнзим (Wobenzyme) - ферментный препарат («МУКОС-Фарма», Германия), обладает иммуномодулирующим, противовоспалительным, противоотечным, фибринолитическим и антиагрегационным действием. Вобэнзим животным вводили перорально 1 раз в сутки в дозе 0,1 таблетки (2,4 мг трипсина, 0,1 мг химотрипсина, 1,0 мг амилазы, 1,0 мг липазы, 4,5 мг бромелаина, 6,0 мг папаина, 10,0 мг панкреатина, 5,0 мг рутозида) в 400 мкл физиологического раствора.

Введение препаратов в эксперименте начинали спустя 48 часов после заражения, продолжительность терапии составила 8 дней.

В качестве компонента функционального питания использовали биологически активную добавку (БАД) «Ультрасорб» (ЗАО «Ягодное», г. Киров, д. Югрино) в количестве 10% суточного объема пищи (3 г/сутки). «Ультрасорб» представляет собой таблетированный комплекс «Рекицена-РД» с фруктоолигосахаридами. Его основными компонентами являются нерастворимые и растворимые пищевые волокна пшеничных отрубей, метаболизированные винными дрожжами Saccharomices vini, и короткоцепочечные жирные кислоты. Продукт используется в качестве профилактического средства практически здоровыми людьми, при воздействии неблагоприятных экологических и производственных факторов, как компонент функционального питания при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, нарушениях обмена веществ, алкогольной интоксикации, аллергической патологии, в комплексной терапии вторичной иммунной недостаточности.

Проведено 2 серии экспериментов.

Моделирование острого пиелонефрита путем интраперитонеального введения микробной суспензии. Лабораторным животным интраперитонеально однократно вводили суточную бульонную урокультуру лактозонегативной E. coli или St. saprophyticus в определенной концентрации, определяемой нефелометрическим методом, в количестве 400 мкл. Оптическую плотность микробной суспензии, соответствующую заданной концентрации, устанавливали эмпирически (Веслополова, 1995) на фотоэлектрокалориметре КФК-3 (зеленый светофильтр, длина волны 540 нм, кювета - 1,060 мм).

Были сформированы 10 экспериментальных групп по 10 животных в каждой.

1. Интактные животные, находящиеся в стандартных условиях вивария.

2. Введение St. saprophyticus (108 КОЕ/мл), терапию не получали.

3. Введение St. saprophyticus (106 КОЕ/мл), терапию не получали.

4. Введение St. saprophyticus (108 КОЕ/мл), экспериментальная терапия - Цефазолин.

5. Введение St. saprophyticus (108 КОЕ/мл), экспериментальная терапия - Суперлимф.

6. Введение St. saprophyticus (108 КОЕ/мл), экспериментальная терапия -Цефазолин и Суперлимф.

7. Введение E. coli (109 КОЕ/мл), терапию не получали.

8. Введение E. coli (106 КОЕ/мл), терапию не получали.

9. Введение E. coli (109 КОЕ/мл), экспериментальная терапия - Цефазолин.

10. Введение E. coli (109 КОЕ/мл), экспериментальная терапия - Цефазолин и Вобэнзим.

Терапию начинали через 48 ч от заражения, проводили в течение 8 дней, на 14 сутки от заражения животных выводили из эксперимента.

Моделирование острого пиелонефрита путем ректального введения микробной суспензии с последующим острым стрессовым воздействием. Лаборатор-ным животным ректально однократно вводили суточную бульонную урокультуру лактозонегативной Escherichia coli № 2899 в количестве 400 мкл. В последующие за заражением сутки животное подвергали острому холодовому стрессу при следующих условиях: t0 = 0+20 С, экспозиция - 2 ч. Через 14 дней после заражения животных выводили из эксперимента.

Были сформированы 9 экспериментальных групп по 10 животных в каждой.

1. Интактные животные, получавшие в течение всего периода наблюдения только типовой рацион вивария.

2. Интактные животные, получавшие в дополнение к рациону вивария БАД «Ультрасорб».

3. Введение E. coli (109 КОЕ/мл), острый стресс.

4. Введение E. coli (106 КОЕ/мл), острый стресс.

5. Предварительный прием «Ультрасорба» в течение 14 дней, затем введение E. coli (109 КОЕ/мл), острый стресс, последующий прием «Ультрасорба» в течение 14 дней.

6. Предварительный прием «Ультрасорба» 14 дней, введение E. coli (106 КОЕ/мл), острый стресс, последующий прием «Ультрасорба» в течение 14 дней.

7. Предварительный прием «Ультрасорба» 14 дней, введение E. coli (109 КОЕ/мл), острый стресс, последующий прием «Ультрасорба» 14 дней, терапия клафораном через 48 ч от заражения в течение 8 дней.

8. Введение E. coli (109 КОЕ/мл), острый стресс, «Ультрасорб» 14 дней, терапия клафораном через 48 ч от заражения в течение 8 дней.

9. Введение E. coli (109 КОЕ/мл), острый стресс, терапия клафораном через 48 ч от заражения в течение 8 дней.

Ежедневное наблюдение за животными в условиях 2 серий эксперимента включало регистрацию поведения, внешнего вида, физиологических функций. До начала и по окончании исследования у животных регистрировали показатели периферической крови рутинными лабораторными методиками. Определяли количество эритроцитов (109 клеток в 1 мл), лейкоцитов (106 клеток в 1 мл), концентрацию гемоглобина (г/л). Из нативной капли крови готовили мазок, фиксировали в смеси Никифорова и подвергали окрашиванию по Романовскому-Гимзе. Окрашенные мазки микроскопировали под иммерсией (Micros, Austria, х 1000), проводили подсчет лейкоцитарной формулы, определяя относительное содержание клеток в мазке и абсолютные значения (абс. колич. = абс. колич. лейкоцитов х относит. / 100).

У интактных животных, получавших «Ультрасорб» в дополнение к типовому рациону вивария, дополнительно проводили бактериологическое исследование содержимого толстой кишки. С этой целью первичный посев разведения фекалий осуществляли на дифференциально-диагностические среды с последующей характеристикой выделенных бактерий по стандартным методикам. Количество микроорганизмов выражали в десятичных логарифмах (lg) колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 г сырой массы фекалий.

Животных выводили из эксперимента путем перерезки спинного мозга под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. Сразу после наступления биологической смерти животного в асептических условиях забирали для проведения бактериологического исследования органы: почки, печень, селезенку, а у животных с ректальным заражением дополнительно забирали брыжеечные лимфатические узлы. Бактериологические исследования проводили по стандартным методикам. Выделенные чистые культуры идентифицировали по стандартным схемам микроскопией мазка, окрашенного по Граму, и изучением культуральных и биохимических свойств (Приказ МЗ СССР № 535, 1985). Одновременно для гистологического исследования забирали почки, печень, тимус, селезенку, подвздошную кишку с пейеровыми бляшками и у животных с ректальным заражением - дополнительно толстую кишку. Кусочки тканей, толщиной 5-7 мм, фиксировали в 10%-ном забуференном по Лилли формалине (pH-7,2), гистологические препараты готовили по стандартным методикам с заливкой в гистамикс. Срезы, полученные на ротационном микротоме (толщиной 3-4 мкм), депарафинировали и подвергали окрашиванию гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван Гизону с целью визуализации коллагеновых волокон. Гистологические препараты ткани почек дополнительно окрашивали нитратом серебра по Футу с целью визуализации гломерулярной базальной мембраны. Гистологические препараты ткани селезенки и срезы пейеровых бляшек подвздошной кишки окрашивали нитратом серебра по Футу для выявления ретикулярных волокон и метиловым зеленым-пиронином для выявления РНК в клетках.

Иммуногистохимические исследования тканей органов проводили, используя антитела и полный диагностический набор компании Diagnostic BioSystems (USA), предназначенный для проведения экспериментальных исследований. Для выявления пролиферативной активности клеток использовали моноклональные антитела к регуляторному протеину Ki-67 (Clone SP6, Isotype IgG), процессы апоптоза в клетках оценивали по уровню экспрессии Fas ligand (Polyclonal Rabbit Antibody to Fas Ligand); выраженность воспалительных реакций в тканях - по уровню экспрессии адгезивных молекул ICAM-1 (Clone 15.2, Isotype IgG1). При исследовании экспрессии ICAM-1 в ткани почек использовали криостатные срезы нативного материала, полученные на замораживающем микротоме Shandon creatom FE. Иммуногистохимические исследования проводили по стандартным протоколам, использовали позитивные контроли согласно рекомендациям фирмы-производителя. Срезы докрашивали гематоксилином Майера, заключали в канадский бальзам и исследовали в проходящем свете микроскопа при увеличении х 600.

Оценка интенсивности пероксидазной метки и определение индекса пролиферации проводились полуколичественным методом: учитывалось число позитивных результатов на 100 учтенных ядер (при подсчете 500-1000 клеток) (Корсакова, 2007). При определении экспрессии Ki-67 ядерная реакция любой интенсивности фиксировалась как позитивная; уровень пролиферации расценивался как низкий, если <15% клеток имели позитивную реакцию, умеренный, если 15-30% ядер были позитивны на Ki-67, и высокий при позитивной реакции более 30% клеток (Раскин, 2007). Гибель клеток в форме апоптоза в покровно-ямочном эпителии СОЖ определяли по индексу апоптоза (IАПТ) по формуле: IАПТ (%) = N (число апоптозных клеток, позитивных к Fas Ligand)/N1 (общее число клеток)Ч100 (Осадчук с соавт., 2004).

Морфометрические исследования выполнены при помощи специализированного программного обеспечения для медицины и биологии BioVision, version 4,0 (Австрия). Захват изображений осуществляли при помощи цифровой камеры для микроскопа CAM V200, Vision (Австрия). При проведении гистометрических исследований ткани почек учитывали следующие параметры: толщину гломерулярной базальной мембраны, толщину базальной мембраны проксимальных извитых канальцев, измеряемые при увеличении х 1500 и импрегнации гистологических срезов нитратом серебра по Футу, площадь мочевого пространства на срезах, проходящих по максимальному диаметру почечного тельца, площадь поперечного сечения капилляров клубочков. Кроме того, определяли степень выраженности воспалительной инфильтрации в ткани почек. В селезенке учитывали относительный объем белой пульпы, относительный объем периаритериальных лимфоидных муфт (ПАЛМ) и светлых центров в лимфатических узелках. В ткани тимуса определяли относительный объем коркового вещества в дольках. В тонкой кишке учитывали количество клеток Панета в дне кишечных крипт и количество поперечно срезанных крипт, содержащих дегранулирующие клетки Панета. Морфометрические исследования проводили при увеличении микроскопа х 600 не менее, чем в 10 полях зрения микроскопа в каждом гистологическом препарате. При изучении пейеровых бляшек определяли относительный объем светлых центров в лимфатических узелках.

Исследование аутопсийного материала. В работе проанализировано 22 случая смерти детей, умерших в возрасте от 1,5 до 5,5 месяцев от острых кишечных инфекций, вызванных условно-патогенной кишечной микрофлорой. Вскрытия проведены на базе патологоанатомического отделения Пермской краевой детской клинической больницы в 2004-2008 гг. Бактериологическому исследованию подвергали образцы тканей легких, селезенки, стенки толстой кишки. Проводили гистологическое исследование образцов стенки толстой кишки и ткани почки. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином и пикрофуксином по ван Гизону.

Клинический раздел работы. В период с 2005 по 2009 гг. проведено клиническое и лабораторное наблюдение за 144 детьми с острым пиелонефритом и обострением хронического пиелонефрита, находящихся в нефрологическом отделении городской детской клинической больницы им. П.И. Пичугина г. Перми. Возраст пациентов - от 1 года до 15 лет. Распределение в выборке больных по полу: 32 мальчика (22,2%) и 112 девочек (77,8%). Критерии включения в исследование: наличие типичной для пиелонефрита клинической симптоматики и лабораторных данных, включая высев из мочи микроорганизмов в концентрации не ниже 105 КОЕ/мл. Критерии исключения из исследования: наличие грубых аномалий развития органов мочевыделительной системы.

Всем больным проводили полное клинико-лабораторное обследование, обращая особое внимание на данные анамнеза заболевания. Учитывали выраженность симптомов интоксикации, в том числе длительность лихорадочного периода, болевого и дизурического синдромов. Лабораторное обследование включало проведение анализов крови: общеклинического и биохимического; анализа мочи: общеклинического, пробы Зимницкого, исследование суточного ритма произвольных мочеиспусканий, суточной экскреции солей, бактериологическое исследование мочи, исследование кала на дисбактериоз. Забор мочи для проведения бактериологического исследования и интерпретация полученных результатов проводились в соответствии с приказом МЗ СССР № 535 от 22 апреля 1985 г. Исследование микробного пейзажа толстой кишки проводили по общепринятым методикам (Николаева с соавт., 2000; Леванова с соавт., 2001). Дополнительно в сыворотке крови 36 пациентов определяли IL-6, IL-8 и ФНО-б серологическими методами.

Инструментальное обследование подразумевало проведение ультрасонографического исследования органов мочевыделительной системы, микционной цистографии и экскреторной урографии.

Методы статистической обработки материала. Результаты исследований подвергнуты статистической обработке с применением программного пакета Biostat. Характеризуя клинические выборки, определяли средние величины и стандартное отклонение, а также процент больных, обладающих изучаемым признаком, от общего числа пациентов в группе. Наличие связи между признаками определяли на основе анализа таблиц сопряженности и расчета статистики (Гланц, 1999), которая была сопоставлена с теоретическими значениями (Айвазян, 1985, Тюрин с соавт, 1995) и при помощи коэффициента ранговой корреляции Спирмена (rs).

При проведении статистической обработки результатов экспериментальных исследований также вычисляли среднее арифметическое и стандартное отклонение, сравнение между собой двух выборок проводили при помощи критерия Стьюдента и критерия Манна-Уитни (для выборок с характером распределения, отличным от нормального). Для оценки различий между несколькими случайными выборками использовали метод однофакторного дисперсионного анализа. Анализируя результаты повторных измерений, пользовались парным критерием Стьюдента.

Результаты и их обсуждение

Результаты экспериментальных исследований

С целью экспериментального обоснования роли стрессогенной бактериемии в развитии острого пиелонефрита и разработки и дизайна доклинической апробации новых методов его патогенетической коррекции разработано два способа моделирования острого пиелонефрита.

У животных с острым пиелонефритом, воспроизведенным путем внутрибрюшинного введения клинических изолятов лактозонегативной E. coli № 2899 и St. saprophyticus № 1256, к 14-м суткам эксперимента отмечалось статистически значимое (p<0,05) по сравнению с исходным уровнем повышение количества лейкоцитов периферической крови, причем, наиболее выраженные изменения отмечались в группах, которым вводили урокультуру E. coli. В группах, зараженных урокультурой St. saprophyticus, достоверные изменения были выявлены только при использовании для заражения концентрации бактериальной взвеси 108 КОЕ/мл (рис. 1).

Анализируя исходные показатели количества лейкоцитов, мы обнаружили некоторые отличия в экспериментальных группах, что не противоречит современным представлениям о нормальных показателях периферической крови крыс (Sharp, La Regina, 1998).

Образцы биоматериала, полученные от интактных животных, были стерильны. Из ткани почек, селезенки и печени животных, которым уропатогенные штаммы вводили в высоких концентрациях (109 и 108 КОЕ/мл), в 100% случаев были изолированы культуры St. saprophyticus и E. coli, по свойствам идентичные использованным для заражения штаммам, в концентрациях, превышающих 105 КОЕ/мл. При использовании концентрации 106 КОЕ/мл положительные результаты микробиологического исследования были получены в меньшем проценте случаев (табл. 1).

Рис. 1. Динамика количества лейкоцитов периферической крови экспериментальных животных, интраперитонеально зараженных урокультурами бактерий.

Гистологическое исследование органов экспериментальных животных выявило наличие микробного воспаления в ткани почек, выражающееся в полнокровии дуговых, междольковых сосудов и капилляров, воспалительной инфильтрации межуточной ткани почек и стенок лоханок без формирования абсцессов, наличии дистрофических изменений в эпителиоцитах проксимальных извитых канальцев нефрона, появлении белковых цилиндров в их просветах, а также в воспалительных изменениях стенок мочеточников. Более выраженные изменения получены в экспериментальных группах, зараженных урокультурами бактерий в высоких концентрациях (109 КОЕ/мл и 108 КОЕ/мл). Патогистологические изменения документированы результатами морфометрических исследований (табл. 2).

Таблица 1. Результаты бактериологического исследования органов экспериментальных животных

Исследуемый материал

Заражение St. saprophyticus 106 КОЕ/мл, n=10

Заражение E. coli 106 КОЕ/мл, n=10

Процент животных, от которых были получены высевы

Концентрация выделенной культуры St. saprophyticus, КОЕ/г

Процент животных, от которых были получены высевы

Концентрация выделенной культуры E. coli, КОЕ/г

Почки

60%*

103-104*

50%*

<103*

Печень

70%

105

70%

105

Селезенка

50%*

<103*

50%*

<103*

*p<0,05 по сравнению с соответствующей экспериментальной группой, зараженной высокой концентрацией культуры

Таблица 2. Результаты морфометрических исследований ткани почек экспериментальных животных

Показатель

Интактные животные, n=10

Заражение St. saprophyticus

108 КОЕ/мл, n=10

Заражение E. coli

109 КОЕ/мл, n=10

Толщина ГБМ, мкм

10,37±0,864

19,01±1,641*

22,52±2,212*

Толщина БМ проксимальных извитых канальцев, мкм

34,68±7,038

47,5±3,501*

51,79±6,32*

Площадь мочевого пространства в почечном тельце, мкм2

1582,9±386,4

1090,034±394,4*

1122±235,5*

Площадь поперечного сечения капилляров в почечном тельце, мкм2

16,24±2,85

49,71±10,05*

48,96±9,242*

Площадь сечения в препарате, занимаемая воспалит. Инфильтрацией %

0

32,94±1,14*

26,27±4,71

*p<0,05 по сравнению с интактными животными

Гистологическое исследование ткани тимуса выявило отек и разрежение коркового вещества, нечеткость границ между корковым и мозговым веществом, набухание и десквамацию эндотелиоцитов в сосудах коркового вещества. В периферических органах иммунной системы (селезенка, пейеровы бляшки тонкой кишки) выявлялись пролиферативные процессы в Т- и В-зависимых зонах. В слизистой оболочке подвздошной кишки обнаружено большое количество дегранулирующих клеток Панета. В ткани печени в дольках (вокруг центральных вен) и в междольковой соединительной ткани наблюдалась умеренно выраженная воспалительная инфильтрация. Результаты исследования подтверждены данными морфометрических исследований (табл. 3).

Таблица 3. Результаты морфометрических исследований органов иммунной системы экспериментальных животных

Показатель (M±m)

Интактные животные, n=10

Заражение St. saprophyticus

108 КОЕ/мл, n=10

Заражение E. coli

109 КОЕ/мл, n=10

Относительный объем коркового вещества в дольках тимуса, %

65,19±7,71

34,05±2,38*

36,22±2,71*

Относительный объем белой пульпы в селезенке, %

30,18±2,69

41,66±4,91*

42,71±4,82*

Относительный объем ПАЛМ в селезенке, %

12,72±2,45

33,33±2,98*

31,51±3,94*

Относительный объем светлых центров в белой пульпе, %

8,9±1,25

3,99±0,52*

5,18±2,68*

Количество крипт с дегранулирующими клетками Панета в гистологических срезах подвздошной кишки, n

0,8±0,051

3,9±0,982*

3,5±0,763*

Относительный объем светлых центров в лимфатических узелках пейеровых бляшек тонкой кишки, %

20,01±2,52

37,24±2,49*

35,17±3,97*

*p<0,05 по сравнению с интактными животными

Следующим этапом экспериментального раздела работы было воспроизведение у лабораторных крыс острого пиелонефрита, индуцированного транслокацией условно-патогенных бактерий из просвета кишечника в системный кровоток. В качестве объекта транслокации был выбран клинический штамм лактозонегативной Escherichia coli № 2899 в концентрациях 106 и 109 КОЕ/мл.

В периферической крови интактных животных количество лейкоцитов к окончанию эксперимента не отличалось от исходных показателей (рис. 2). У экспериментальных животных количество лейкоцитов периферической крови к концу эксперимента достоверно повышалось по сравнению с исходным уровнем, в большей степени в группе, которой вводили микробную суспензию в концентрации 109 КОЕ/мл (рис. 2). Также в опытных группах отмечалось достоверное увеличение абсолютного и относительного количества лимфоцитов и уменьшение количества сегментоядерных нейтрофилов, что является отражением реакции периферической крови на бактериальную инфекцию и стрессовое воздействие.

Рис. 2. Динамика количества лейкоцитов периферической крови крыс при моделировании острого пиелонефрита, индуцированного бактериальной транслокацией.

Результаты бактериологического исследования образцов органов экспериментальных животных представлены в табл. 4.

Таблица 4. Результаты бактериологического исследования органов экспериментальных животных

Исследуемый материал

I группа (интактные животные), n=10

II группа

(E. coli 109), n=10

III группа

(E. coli 106), n=10

Брыжеечные лимфоузлы

Роста нет

100%

109 КОЕ/мл

60%*

102-103 КОЕ/мл

Ткань печени

Роста нет

100%

107-109 КОЕ/мл

60%*

103 КОЕ/мл

Ткань селезенки

Роста нет

100%

107-109 КОЕ/мл

40%*

<103 КОЕ/мл

Ткань почки

Роста нет

100%

109 КОЕ/мл

40%*

103 КОЕ/мл

*p<0,05 по сравнению с III группой

Гистологическое исследование аутопсийного материала выявило в ткани почек изменения микробно-воспалительного характера, типичные для острого пиелонефрита (табл. 5), более выраженные у животных, которым вводили урокультуру E. coli в концентрации 109 КОЕ/мл.

В центральных и периферических органах иммунной системы животных выявлены пролиферативные процессы, сопровождающиеся увеличением количества клеток лимфоидного ряда в Т- и В-зависимых зонах и формированием светлых центров в лимфоидных узелках селезенки и пейеровых бляшек. В ткани печени наблюдались умеренно выраженные изменения воспалительного характера, преимущественно в группе животных, зараженных культурой E. coli в концентрации 109 КОЕ/мл (табл. 6).

Таблица 5. Характер патогистологических изменений в ткани почек экспериментальных животных, зараженных per rectum урокультурой E. coli, % животных в группе

Выявленные патологические изменения

Животные, которым вводили культуру

E. coli в концентрации

109 КОЕ/мл (I, n=10), %

Животные, которым вводили культуру E. coli в концентрация

106 КОЕ/мл (II, n=10), %

Полнокровие сосудов почек

100

60*

Краевое стояние лейкоцитов в венулах

60

30*

Наличие участков зернистой дистрофии проксимальных извитых канальцев

90

70

Воспалительная инфильтрация межуточной ткани почки и стенки лоханки

100

60*

Периваскулярно расположенные воспалительные инфильтраты

80

30*

Воспалительная инфильтрация стенки мочеточника

60

20*

* p<0,05 по сравнению с I

Таблица 6. Характер патогистологических изменений в органах иммунной системы и ткани печени экспериментальных животных, зараженных per rectum урокультурой E. coli

Выявленные патологические изменения, % животных

Животные, которым вводили культуру

E. coli в концентрации

109 КОЕ/мл (I, n=10), %

Животные, которым вводили культуру

E. coli в концентрации

106 КОЕ/мл (II, n=10), %

Отек коркового вещества тимуса

80

40*

Набухание и десквамация эндотелиоцитов в корковом веществе

90

50*

Краевое стояние лейкоцитов в венулах с высоким эндотелием

60

40*

Отек ткани селезенки

80

50*

Набухание эндотелия капилляров красной пульпы и маргинальной зоны

90

30*

Наличие светлых центров в лимфатических узелках селезенки

100

50*

Краевое стояние лейкоцитов в венулах

70

70

Утолщение ретикулярных волокон в строме селезенки

50

50

Воспалительная инфильтрация слизистой оболочки тонкой кишки

90

70*

Набухание и десквамация эндотелия сосудов собственной пластинки слизистой оболочки

50

30*

Выявление дегранулирующих клеток Панета в дне крипт

90

50*

Выявление пролиферативных процессов в лимфатических узелках пейеровых бляшек

100

90

Полнокровие центральных вен

80

30*

Воспалительная инфильтрация паренхимы печени

90

40*

Вакуольная дистрофия гепатоцитов

100

40*

Полнокровие синусоидных капилляров

70

20*

Воспалительная инфильтрация междольковой соединительной ткани

60

30*

* p<0,05 по сравнению с I

Таким образом, для моделирования в условиях эксперимента острого пиелонефрита, вызванного как интраперитонеальным введением урокультур условно-патогенных бактерий, так и ректальным их введением с последующим острым стрессом, целесообразно использовать культуры данных микроорганизмов в высоких концентрациях - 108 КОЕ/мл для стафилококка и 109 КОЕ/мл при заражении животных культурой кишечной палочки.

На животных с экспериментальным пиелонефритом, вызванном ректальным введением урокультуры E. coli и острым стрессом, исследована эффективность диеты с высоким содержанием метаболизированных пищевых волокон. С целью исследования протективной роли пищевых волокон в предупреждении феномена бактериальной транслокации и развития гематогенного пиелонефрита, а также влияния пищевых волокон на состав кишечного микробиоценоза, мы провели серию экспериментов на животных, в процессе выполнения которых последовательно решали ряд практических задач.

Бактериологическое исследование содержимого толстой кишки интактных животных, получавших «Ультрасорб» в течение 14 суток, выявило, что высокое содержание в рационе пищевых волокон обеспечивает нормализацию количественных и качественных характеристик кишечного микробиоценоза (табл. 7).

Как показали результаты анализа показателей периферической крови, у животных опытных групп, находящихся на стандартном рационе вивария, к концу эксперимента отмечалось достоверное увеличение количества лейкоцитов периферической крови (рис. 3), абсолютного и относительного количества лимфоцитов и уменьшение количества сегментоядерных нейтрофилов (p<0,05). Подобные изменения отсутствовали у животных, подвергнутых заражению и стрессу и получавших «Ультрасорб» - как в группах, получавших антибиотик, так и в экспериментальных группах без антибактериальной терапии (рис. 3). Вместе с тем, у животных, получавших антибактериальную терапию на фоне стандартного рациона вивария, отмечалось увеличение относительного и абсолютного количества лимфоцитов и моноцитов и уменьшение количества сегментоядерных нейтрофилов, что свидетельствовало о сохраняющейся у них реакции периферической крови на стрессовое воздействие. «Ультрасорб» способствовал достоверному уменьшению процента положительных результатов бактериологического исследования и достоверному уменьшению концентрации выделяемых из аутопсийного материала культур E. coli (табл. 8). Оптимальный результат достигнут в группах, получавших одновременно антибактериальную терапию и «Ультрасорб» (группы VII, VIII, табл. 8).

К концу эксперимента у животных с пиелонефритом, получавших в дополнение к стандартному рациону вивария «Ультрасорб», признаки воспаления в ткани почек и печени, а также описанные ранее изменения органов иммунной системы были в значительной степени менее выражены в сравнении с животными, получавшими типовой рацион вивария, и встречались у меньшего процента животных.

Таблица 7. Количественная характеристика микроорганизмов, вегетирующих в биотопе толстой кишки интактных нелинейных белых крыс через 14 дней от начала использования в рационе «Ультрасорб» в сравнении с исходными показателями, lg КОЕ на 1 г сырой массы фекалий (M ± m), n=10

Микроорганизм

Содержание бактерий в кале животных, КОЕ/г, lg

Исходные данные

Содержание бактерий в кале животных, КОЕ/г, lg

Спустя 14 от начала эксперимента

Bifidobacteria (M + m)

6,4 ± 1,8

6,8 ± 1,1

Lactobacillus (M + m)

7,2 ± 1,7

8,2 ± 0,5

Enterobacteriacea (M + m)

5,6 ± 0,5

5,0 ± 1,0

Enterobacteriacea (лактозонегативные)

(M + m)

5,6 ± 0,5

0 *

Enterococcus spp (M + m)

8,0

8,0

Staphylococcus spp (M + m)

5,8 ± 0,8

5,2 ± 0,5

Candida spp (M + m)

1,8 ± 1,1

0 *

Saccharomyces spp

(M + m)

2,4 ± 1,5

0 *

Bacillus spp (M + m)

2,4 ± 1,5

2,0 ± 1,2

* - p<0,05 по отношению к исходным показателям

Рис. 3. Динамика количества лейкоцитов периферической крови у животных I-IX экспериментальных групп (характеристика групп, соответствующая нумерации, дана в разделе «Материалы и методы»).

Таблица 8. Результаты бактериологического исследования органов экспериментальных животных (по группам)

Исследуемый материал

I группа (интактные животные, стандартный рацион), n=10

II группа (интактные животные, рацион + БАД «Ультрасорб»), n=10

III группа

(E. coli 109, стандартный рацион), n=10

IV группа

(E. coli 106, стандартный рацион), n=10

V группа

(E. coli 109, рацион + БАД «Ультрасорб»), n=10

VI группа

(E. coli 106, рацион + БАД «Ультрасорб»), n=10

VII группа

(E. coli 109, рацион + БАД «Ультрасорб» пролонгир. курс + клафоран), n=10

VIII группа

(E. coli 109, рацион + БАД «Ультрасорб» короткий курс + клафоран), n=10

IX группа

(E. coli 109, стандартный рацион + клафоран), n=10

Брыжеечные лимфоузлы


Подобные документы

  • Патологическая анатомия пиелонефрита. Основные факторы развития воспаления в почке. Клиническая картина острого пиелонефрита. Диспансерное наблюдение детей с пиелонефритом и особенности их вакцинации. Современные подходы к лечению пиелонефрита у детей.

    контрольная работа [61,2 K], добавлен 16.06.2010

  • Выявление ранних признаков обострения пиелонефрита, позднего токсикоза беременных. Осложнение пиелонефрита бактериальным шоком, азотемией, эклампсией. Особенности лечение гестационного пиелонефрита при беременности. Лечение пиелонефрита во время лактации.

    реферат [19,1 K], добавлен 10.07.2010

  • Особенности пиелонефрита у ребенка. Первичный и вторичный пиелонефрит. Особенности пиелонефрита у новорожденных и грудничков. Лабораторные и инструментальные методы исследования. Биохимический анализ крови с определением общего белка и белковых фракций.

    презентация [350,4 K], добавлен 13.09.2016

  • Описание прогрессирующего воспаления ткани и канальцев почек, вызывающего деструктивные изменения в чашечно-лоханочной системе. Исследование основных причин возникновения пиелонефрита. Дифференциальная диагностика и лечение хронического пиелонефрита.

    презентация [226,5 K], добавлен 03.11.2013

  • Виды инфекций мочевой системы. Пиелонефрит как неспецифическое микробно-воспалительное заболевание. Особенности течения вторичного процесса при заболевании. Пути инфицирования почки. Клиническая картина пиелонефрита у детей, диагностический алгоритм.

    презентация [1,9 M], добавлен 13.04.2015

  • Неспецифическое бактериальное воспаление чашечно-лоханочной системы почек. Этиология хронического пиелонефрита. Факторы риска, патогенез, классификация форм и клиническая картина заболевания. Диагностика, лечение и профилактика хронического пиелонефрита.

    презентация [4,4 M], добавлен 08.05.2015

  • Этиология, патогенез и классификация острого и хронического гломерулонефрита и пиелонефрита у детей. Клиническая картина заболеваний почек, возможные осложнения. Критерии определения активности и стадий пиелонефрита. Методы диагностики и способы лечения.

    презентация [474,8 K], добавлен 31.03.2016

  • Неспецифическое воспалительное заболевание почек бактериальной этиологии, нарушение уродинамики. Понятие об остром пиелонефрите. Пункционная и инцизионная биопсия почечной ткани. Клиническая картина острого пиелонефрита. Гнойные формы пиелонефрита.

    реферат [208,7 K], добавлен 16.09.2011

  • Эпидемиология, этиология и патогенез острого и хронического пиелонефрита. Изменения биохимических показателей крови, показателей азотистого и белкового обмена. Морфологическое исследование элементов осадка мочи. Определение креатинина в сыворотке крови.

    курсовая работа [166,8 K], добавлен 03.11.2015

  • Изучение причин и особенностей развития пиелонефрита, инфекционно-воспалительного заболевания слизистой оболочки мочевыводящих путей и ткани почек. Пути распространения инфекции. Исследование основных форм пиелонефрита. Диагностика и методы лечения.

    презентация [47,5 K], добавлен 30.08.2013

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.