Размещено на http://www.allbest.ru/

1

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

УО «Витебский государственный медицинский университет»

Фармацевтический факультет

Кафедра промышленной технологии с курсом ФПК и ПК

Курсовая работа

«Разработка лабораторного регламента производства раствора адреналина гидротартрата 0,18 % для инъекций (на 1000 л в ампулах по 1 мл)»

Выполнила: студентка 18 группы 4 курса

фармацевтического факультета

Матвейчук Алеся Алексеевна

Проверила: старший преподаватель,

Шимко Ольга Михайловна

Витебск, 2016



Содержание

• 1. Характеристика готовой продукци
• 2. Химическая схема производства
• 3. Технологическая схема производства
• 4. Аппаратурная схема производства и спецификация оборудования
• 5. Характеристика сырья, материалов и полупродуктов
• 6. Описание технологического процесса
• 7. Материальный баланс
• 8.Переработка и обезвреживание отходов производства
• 9. Контроль производства
• 10. Техника безопасности, пожарная безопасность и производственная санитария
• 11. Охрана окружающей среды
• 12. Информационные материалы
• Выводы и предложения по совершенствованию технологии конкретной лекарственной формы
• Список литературы



1. Характеристика готовой продукци

Solutio Adrenalini hydrotartras 0,18% pro injectionibus (Раствор адреналина гидротартрата 0,18% для инъекций).

Состав: Адреналина гидротартрат -- 1,8 г

Натрия метабисульфит --1 г

Натрия хлорид -- 8 г

Вода для инъекций -- до 1 л.

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость, имеет рН 3,0-3,8.

Подлинность.

1. 5 мг образца растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа; появляется изумрудно-зелёное окрашивание, которое от прибавления 1 капли раствора аммиака переходит в вишнево-красное, а затем в оранжево-красное.

2. К 1 мл 0,2% раствора препарата прибавляют 5 мл гидротартратного буферного раствора с рН 3,56 и 2 мл 0,1 н. раствора йода, оставляют на 5 минут, после чего смешивают с 3 мл 0,1 н. раствора тиосульфата натрия. Раствор сохраняет тёмно-красное окрашивание (отличие от норадреналина). Повторяют определение с 10 мл буферного раствора с рН 6,5; образуется красно-фиолетовое окрашивание.

3. 0,5 г препарата растворяют в 20 мл воды, содержащей 0,1 г бисульфита натрия, прибавляют раствор аммиака до отчетливого запаха и оставляют на 1 час в холодильнике при температуре не выше 4°С. Выпавший осадок отфильтровывают и промывают холодной водой три раза по 2 мл, затем 5-10 мл охлажденного спирта и 5-10 мл охлажденного эфира, после чего сушат в вакуум-эксикаторе над серной кислотой или фосфорным ангидридом в течение 3 часов. 0,4 г полученного основания адреналина растворяют в 10 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты и определяют удельное вращение, которое должно быть от -48° до -54°.

4. Раствор препарата (1:100) дает характерную реакцию на тартраты.

Количественное определение. Около 0,15 г тонкоизмельченного и высушенного препарата (точная навеска) растворяют в 20 мл ледяной уксусной кислоты, слегка нагревая до 40° в случае медленного растворения, и титруют 0,1 н. раствором хлорной кислоты до голубовато-зелёного окрашивания (индикатор - метиловый фиолетовый). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 н. раствора хлорной кислоты соответствует 0,03333 г С₉Н₁₃NО₃ · С₄Н₆О₆.

Хранение. В герметично укупоренных банках оранжевого стекла или в запаянных

ампулах, в защищенном от света месте.

Срок годности: 2 года.

2. Химическая схема производства

В процессе производства раствора адреналина гидротартрата 0,18% химические реакции не протекают, поэтому химическая схема производства не приводится.



3. Технологическая схема производства

4. Аппаратурная схема производства и спецификация оборудования

1. Промышленные настольные весы ВВА231-3А15 (1 шт): для отвешивания действующего и вспомогательных веществ.

2. Аквадистиллятор «Finn-Aqua» (1 шт): для получения воды для инъекций.

3. Шаровая мельница PM 400 (1шт): для измельчения ЛС.

4. Сито вибрационное СВ-1 (1 шт): для просеивания ЛС.

5. Фармацевтический реактор из нержавеющей стали Normit (1 шт): для растворения действующего и вспомогательных веществ.

6. Друк-фильтр из нержавеющей стали (1 шт): объём установки 100 л: для фильтрации раствора.

7. Полуавтомат роторного типа для вскрытия ампул (1 шт). Производительность - 12000 амп/час.

8. Полуавтомат для резки спаренных ампул ГФ-12-205 (1 шт).

9. Полуавтомат для укладки ампул в кассеты ГФ-13-205 (1шт). Производительность - 16220 амп/час;

10. Печь для отжига ампул с газовыми горелками (1 шт).

11. Аппарат мойки наружной поверхности ампул ГФ-20-02а-206 (1 шт). Продолжительность цикла 105 сек.

12. Аппарат мойки внутренней поверхности ампул ГФ-20-02б-206 (1 шт). Продолжительность цикла 105 сек.

13. Аппарат сушки ампул ГФ-20-03-206 (1шт): для сушки ампул в кассетах вакуумом с местным подогревом. Температура сушки 180-290 град.

14. Аппарат наполнения ГФ-20-06-206 (1 шт): для наполнения ампул раствором. Питание аппарата вакуумом не <0,08 Мпа.

15. Аппарат запайки ампул ГФ-20-09-206 (1 шт). Управление автоматическое.

16. Установка для стерилизации ампул и контроля на герметичность ГФ 24-207 (1 шт). Рабочее давление 0,2 Мпа. Заполнение камеры водой или окрашенным раствором 10 минут, время откачки 7 минут. Температура моющей воды 50-70 град.

17. Стол просмотровый. ГФ-30-208 (1 шт). Имеет светильник настольный по ГОСТ 8607. Одно рабочее место.

18. Автоматическая линия для упаковки ампул ГФ 31-209 (1 шт). Производительность 600 уп/час.

Спецификация оборудования, используемого при изготовлении раствора адреналина гидротартрата 0,18%

Наименование	Количество	Материал рабочей зоны, способы защиты	Техническая характеристика
Промышленные настольные весы ВВА231-3А15	1	Терминал: пластик; платформа: углеродистая сталь; полированная нержавеющая сталь	Наибольший предел взвешивания 15 кг; Размер платформы 240 x 300 мм; Время автономной работы: более 80 часов. Противоперегрузочные упоры для защиты весового датчика от механических повреждений.
Аквадистиллятор «Finn-Aqua»	1	Нержавеющая сталь SS 316L	Стабильная работа во время перепадов давления; система управления Allen-Bradley; сенсорный дисплей. Производительность: до 15000л/ч
Шаровая мельница PM 400	1	Закалённая сталь, нержавеющая сталь, карбид вольфрама, агат, корунд, оксид циркония.	Напольная модель с четырьмя размольными станциями. Загрузка: 4-8 x 220 мл; скорость планетарного диска: 30 - 400 об/мин; мощность привода: 1,5 кВт; габариты в закрытом виде: 836 x 1220 (1900) x 780 мм. Масса: 290 кг.
Сито вибрационное СВ-1	1	Нержавеющая или углеродистая сталь	Диаметр корпуса 1,2 м; ситовая поверхность 1 м2; габариты: 1565х1720х1720 мм. Масса: 444 кг.
Фармацевтический реактор из нержавеющей стали Normit	1	Сталь 12Х18Н10Т; нержавеющая сталь марки AISI 316L или AISI 304.	Рабочая вместимость: 10-10 000 л; температура: от -80 до + 250°С; установленная мощность: 3,0-45 кВт; скорость вращения мешалки 0-18000 об/мин; рабочее давление пара в рубашке: 0,2-0,4 Мпа
Друк-фильтр из нержавеющей стали	1	Сталь нержавеющая AISI 304	Объём сосуда 100 л; имеет мешалку с приводом; диапазон рабочих температур: 0..+150 0С;
Полуавтомат роторного типа для вскрытия ампул	1	Ст.12Х18Н10Т ГОСТ 5632-72	Производительность 12000 амп/час. Масса 450 кг. Габариты: 2000х1200х800 мм.
Полуавтомат для резки спаренных ампул ГФ-12-205	1	Ст.12Х18Н10Т ГОСТ 5632-72	Производительность 12000 амп/час. Загрузка ампул вручную, наставка в биксы автоматическая. Масса 450 кг. Габариты: 2000х1200х800 мм.
Полуавтомат для укладки ампул в кассеты ГФ-13-205	1	Ст.12Х18Н10Т ГОСТ 5632-72	Производительность 16220 амп/час. Загрузка ампул в бункер, установка пустых кассет и съём наполненных вручную. Масса 700 кг. Габариты: 1100х1050х1400 мм.
Печь для отжига ампул с газовыми горелками	1	Комплект материалов	Производительность 23800 амп/час. (Ёмкость ампул 1 или 2 мл); 32 горелки; Габаритные размеры: 1926х7515Х1930 мм. Масса: 3490 кг.
Аппарат мойки наружной поверхности ампул ГФ-20-02а-206	1	Комплект материалов	Продолжительность цикла 105 с. Снабжена активатором. Производительность 30000 ампул в час.
Аппарат мойки внутренней поверхности ампул ГФ-20-02б-206	1	Комплект материалов	Тип АП3283.2.2-00-00. Управление автоматическое. Температура моющей воды для инъекций 50-60оС.
Аппарат сушки ампул ГФ-20-03-206	1	Комплект материалов	Тип АП3283.2.3-00-00. Управление автоматическое. Длительность цикла 105 с. Температура сушки 180-290оС. В ёмкости 6 тенов.
Аппарат наполнения ГФ-20-06-206	1	Комплект материалов	Тип АП3283.2.4-00-00. Управление автоматическое. Длительность цикла 105 с. Питание аппарата вакуумом не < 0,08 МПа.
Аппарат запайки ампул ГФ-20-09-206	1	Комплект материалов	Тип АП3283.2.6-00-00. Управление автоматическое. Продолжительность цикла 110 с. Расход природного газа не более 0,1м3/ч
Установка для стерилизации ампул и контроля на герметичность ГФ 24-207	1	Комплект материалов	Тип ГПСД 1700 А. Рабочее давление 0,2 Мпа. Заполнение камеры водой или окрашенным раствором 10 минут, время откачки 7 минут. Температура моющей воды 50-70оС. Габаритные размеры: 3000х1410х2075 мм. Масса 2890 кг.
Стол просмотровый. ГФ-30-208.	1	Сборный	Оснащён светильником настольным по ГОСТ 8607. Габаритные размеры: 1200х600х700 мм. Одно рабочее место.
Автоматическая линия для упаковки ампул ГФ 31-209.	1	Комплект материалов	Производительность 600 уп/час. Габаритные размеры: 5214х895х535 мм. Масса 1600 кг.

5. Характеристика сырья, материалов и полупродуктов

Номер ФС или ГОСТ	Техническое или торговое название	Содержание, %	Сортность
ГФ РБ, Т3, с. 125	Адреналина гидротартрат	Не <98,5 и не >101,0% (1R)-1-(3,4-дигидроксифенил)-2-(метиламина) этанола гидро(2R,3R)-2,3-дигидроксибутандиоата в пересчёте на сухое вещество	По ГФ РБ
ГФ РБ, Т.3, с. 431	Натрия метабисульфит	Не < 95,0% и не >100,5% Na2S2O5	По ГФ РБ
ГФ РБ, Т.3, с.435	Натрия хлорид	Не <99,0 и не >100,5 NaCl в пересчёте на сухое вещество	По ГФ РБ
ГФ РБ, Т.2, с. 95	Вода для инъекций	рH 5,0-7,0 апирогенная	По ГФ РБ

Адреналина гидротартрат (Adrenalini hydrotartras)

Описание: Белый или серовато-белый кристаллический порошок. Легкорастворим в воде, малорастворим в спирте.

Подлинность : А. Удельное оптическое вращение (2.2.7): от -50 до -53,5. 5,0 г испытуемого образца растворяют в 50 мл раствора 5 г/л натрия метабисульфита Р и подщелачивают раствором аммиака Р. Полученную смесь выдерживают при комнатной температуре не менее15 мин и фильтруют. Фильтрат используют для идентификации С. Полученный осадок (адреналин) трижды промывают метанолом Р порциями по 10 мл и сушат при температуре 80°С. Готовят раствор 20,0 г/л полученного адреналина в0,5 М растворе хлористоводородной кислоты.

В. Абсорбционная спектрофотометрия в инфракрасной области (2.2.24). Приготовление: в дисках; используют адреналин, полученный в идентификации А. Сравнение: адреналин, полученный как указано в идентификации А из 50 мг ФСО адреналина гидротартрата, растворенного в 5 мл раствора 5 г/л натрия метабисульфита Р. Полученную смесь выдерживают при комнатной температуре не менее 30 мин. Фильтруют через стеклянный фильтр.

С. 0,2 мл фильтрата, полученного в идентификации А, дают реакцию (b) на тартраты (2.3.1).

Испытания:

Прозрачность (2.2.1). Раствор S по степени мутности не должен превышать эталон II.

Цветность (2.2.2, метод II). Окраска раствора S должна быть не интенсивнее эталона BY(КЖ)5.

Сопутствующие примеси. Жидкостная хроматография (2.2.29).

- примесь А (не более 0,3 %): на хроматограмме испытуемого раствора площадь пика, соответствующего примеси А, не должна превышать 3-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а);

- примеси В, С (не более 0,2 %): на хроматограмме испытуемого раствора площади пиков, соответствующих примесям В и С, не должны превышать 2-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а);

- примеси D, Е (не более 0,1 %): на хроматограмме испытуемого раствора площади пиков, соответствующих примесям D и Е, не должны превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а);

- неспецифицированные примеси (не более 0,10 %): на хроматограмме испытуемого раствора площадь любого пика, кроме основного и пиков примесей А, В, С, D и Е, не должна превышать площаью основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а);

- сумма примесей (не более 0,6 %): на хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей всех пиков, кроме основного, не должна превышать 6-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а). На хроматограмме испытуемого раствора не учитывают пики с площадью менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (а) (0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %.

Сульфатная зола (2.4.14, метод А). Не более 0,1 %. Определение проводят из 1,000 г испытуемого образца.

# Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец должен выдерживать требования статьи (5.4).

# Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Адреналина гидротартрат в условиях испытания обладает антимикробным действием. Посев на питательные среды проводят методом мембранной фильтрации.

Количественное определение:

0,300 г испытуемого образца растворяют в 50 мл кислоты уксусной безводной Р, при необходимости слегка подогревая, и титруют 0,1 М раствором кислоты хлорной до появления синевато-зеленого окрашивания, используя в качестве индикатора 0,1 мл раствора кристаллического фиолетового Р.

Хранение : В воздухонепроницаемом контейнере или в запаянной ампуле под вакуумом или в среде инертного газа в защищенном от света месте.

Натрия метабисульфит (Natrii metabisulfis)

Описание: Белый или почти белый порошок либо бесцветные кристаллы. Легкорастворим в воде, малорастворим в 96 % спирте.

Подлинность: А. Испытуемый образец выдерживает испытание «рН» как указано в разделе «Испытания».

В. К 0,4 мл раствора калия йодида йодированного Р прибавляют 8 мл воды дистиллированной Р и 1 мл раствора S, приготовленного как указано в разделе «Испытания», разведенного водой дистиллированной Р в 10 раз. Полученный раствор бесцветный и дает реакцию (а) на сульфаты (2.3.1).

С. Раствор S дает реакцию (а) на натрий (2.3.1).

Испытания:

Прозрачность (2.2.1). Раствор S должен быть прозрачным.

Цветность (2.2.2, метод II). Раствор S должен быть бесцветным.

рН (2.2.3). От 3,5 до 5,0. Измеряют рН раствора S.

Тиосульфаты. К 5 мл раствора S прибавляют 5 мл кислоты хлористоводородной разведенной Р. Раствор должен быть прозрачным (2.2.1) в течение не менее 15 мин.

Мышьяк (2.4.2, метод А). Не более 0,0005 % (5 ppm).

Железо (2.4.9). Не более 20 ppm. Раствор S должен выдерживать испытание на железо.

Тяжелые металлы (2.4.8, метод А). Не более 0,002 % (20 ppm).

# Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец должен выдерживать требования статьи (5.4).

# Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Натрия метабисульфит в условиях испытания обладает антимикробным действием. Посев на питательные среды проводят методом мембранной фильтрации.

Количественное определение:

0,200 г испытуемого образца растворяют в 50,0 мл 0,05 М раствора йода, прибавляют 5 мл кислоты хлористоводородной разведенной Р и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл раствора крахмала Р, который прибавляют в конце титрования. 1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 4,753 мг Na2S2O5.

Хранение: В защищенном от света месте.

Натрия хлорид (Natrii chloridum)

Описание: Белый кристаллический порошок, либо бесцветные кристаллы, либо белые крупинки. Легкорастворим в воде, практически нерастворим в этаноле.

Подлинность: А. Испытуемый образец дает реакции на хлориды (2.3.1).

В. Испытуемый образец дает реакции (а) и (b) на натрий (2.3.1).

Испытания:

Прозрачность (2.2.1). Раствор S должен быть прозрачным.

Цветность (2.2.2, метод II). Раствор S должен быть бесцветным.

Кислотность или щелочность. К 20 мл раствора S прибавляют 0,1 мл раствора бромтимолового синего Р1. При прибавлении не более 0,5 мл 0,01 М раствора кислоты хлористоводородной или 0,01 М раствора натрия гидроксида окраска раствора должна измениться.

Бромиды. Не более 0,01 % (100 ppm). К 0,5 мл раствора S прибавляют 4,0 мл воды Р, 2,0 мл раствора фенолового красного Р2, 1,0 мл раствора 0,1 г/л хлорамина Р и немедленно перемешивают. Точно через 2 мин прибавляют 0,15 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, перемешивают и доводят водой Р до объема 10,0 мл.

Оптическая плотность (2.2.25) полученного раствора, измеренная при длине волны 590 нм, не должна превышать оптическую плотность эталона, приготовленного параллельно с испытуемым раствором с использованием 5 мл раствора 3,0 мг/л калия бромида Р. В качестве компенсационного раствора используют воду Р.

Ферроцианиды. 2,0 г испытуемого образца растворяют в 6 мл воды Р, прибавляют 0,5 мл смеси из 5 мл раствора 10 г/л железа (III) аммония сульфата Р в растворе 2,5 г/л кислоты серной Р и 95 мл раствора 10 г/л железа (III) сульфата Р. В течение 10 мин не должно появиться синее окрашивание.

Йодиды. 5 г испытуемого образца увлажняют, прибавляя каплями свежеприготовленную смесь из 0,15 мл раствора натрия нитрита Р, 2 мл 0,5 М раствора кислоты серной, 25 мл раствора крахмала, свободного от йодидов, Р и 25 мл воды Р. Полученный раствор через 5 мин просматривают при дневном освещении. Не должно появиться синее окрашивание.

Нитраты. К 10 мл раствора S прибавляют 10 мл воды Р. Оптическая плотность (2.2.25) полученного раствора, измеренная при длине волны 354 нм, не должна превышать 0,01.

Фосфаты (2.4.11). Не более 0,0025 % (25 ppm).

Сульфаты (2.4.13). Не более 0,02% (200 ppm).

Алюминий (2.4.17). Не более 0,00002 % (0,2 ppm).

Мышьяк (2.4.2, метод А). Не более 0,0001 % (1 ppm). 5 мл раствора S должны выдерживать испытание на мышьяк.

Барий. К 5 мл раствора S прибавляют 5 мл воды дистиллированной Р и 2 мл кислоты серной разведенной Р. Через 2 ч опалесценция полученного раствора не должна превышать опалесценцию смеси из 5 мл раствора S и 7 мл воды дистиллированной Р.

Железо (2.4.9). Не более 0,0002 % (2 ppm). Р.

Магний и щелочноземельные металлы (2.4.7). Не более 0,01 % (100 ppm) в пересчете на Са.

Калий. Если субстанция предназначена для производства лекарственных средств для парентерального применения или растворов для гемодиализа, перитонеального диализа и гемофильтрации, она должна выдерживать испытание на калий. Не более 0,05 % (500 ppm). Атомно-эмиссионная спектрометрия (2.2.22, метод 1). Испытуемый раствор. 1,00 г испытуемого образца растворяют в воде Р и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем. Раствор сравнения. Готовят соответствующими разведениями раствора, приготовленного следующим образом: 1,144 г калия хлорида Р, предварительно высушенного при температуре от 100°С до 105°С в течение 3 ч, растворяют в воде Р и доводят до объема 1000,0 мл этим же растворителем

(600 мкг/мл К). Интенсивность эмиссии измеряют при длине волны 766,5 нм.

Тяжелые металлы (2.4.8, метод А). Не более 0,0005 % (5 ppm).

Потеря в массе при высушивании (2.2.32). Не более 0,5 %. Бактериальные эндотоксины (2.6.14). Менее 5 МЕ/г, если субстанция предназначена для производства лекарственных средств для парентерального применения без последующей процедуры удаления бактериальных эндотоксинов.

# Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец должен выдерживать требования статьи (5.4).

# Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Натрия хлорид в условиях испытаний не обладает антимикробным действием.

Количественное определение:

50,0 мг испытуемого образца растворяют в воде Р и доводят до объема 50 мл этим же растворителем и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата потенциометрически (2.2.20). 1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 5,844 мг NaCl.

Маркировка:

При необходимости указывают:

- субстанция пригодна для производства лекарственных средств для парентерального применения;

- субстанция не содержит бактериальных эндотоксинов;

- субстанция пригодна для производства растворов для перитонеального диализа, гемодиализа и гемофильтрации.

Вода для инъекций (Aqua ad iniectabilia)

Вода, используемая в качестве растворителя при изготовлении лекарственных средств для парентерального применения или для растворения, или для разведения субстанций либо лекарственных средств для парентерального применения перед использованием.

Бесцветная, прозрачная жидкость, без запаха и вкуса. рН от 5,0 до 7,0. Сухой остаток не более 0,001%. Вода не должна содержать хлоридов, сульфатов, ионов кальция и тяжелых металлов, восстанавливающих веществ, нитратов, нитритов, диоксида углерода. Содержание аммиака допускается не более 0,00002%.

Вода для инъекций должна быть апирогенной не содержать антимикробных веществ и других добавок.

Испытания:

Содержание общего органического углерода (2.2.44). Не более 0,5 мг/л.

Удельная электропроводность. Не более 25 мкСм · см^-1 для контейнеров с номинальным объемом 10 мл или менее.

Нитраты. Не более 0,00002 % (0,2 ppm).

Алюминий (2.4.17). 0,000001 % (10 мкг/л).

Тяжелые металлы (2.4.8, метод А). Не более 0,00001 % (0,1 ppm). Бактериальные эндотоксины (2.6.14). Менее 0,25 МЕ/мл.

# Пирогенность. На испытуемой воде для инъекций готовят раствор 9 г/л натрия хлорида Р. Тест-доза -- 10 мл на 1 кг массы животного. Тест «Пирогенность» проводится в качестве альтернативного тесту «Бактериальные эндотоксины».

Хранение: Воду для инъекций хранят и используют в условиях, позволяющих избежать роста микроорганизмов и проникновения каких-либо других загрязнений и при температуре 5-10 ^оС или 80-95 ^оС в закрытых емкостях, обеспечивающих рециркуляцию воды 1-5 раз за час.

6. Описание технологического процесса

ВР.1. Подготовка помещений, оборудования, персонала, воздуха.

ВР.1.1. Подготовка помещений.

Осуществляется согласно ТПК 030 - 2013 (02040).

Готовят инъекционные растворы согласно стандартам чистоты. Асептика - это комплекс мероприятий, позволяющий свести к минимуму возможность попадания любых видов микроорганизмов в лекарственные препараты на всех этапах технологического процесса. Кроме этого, в помещениях для производства стерильных лекарственных средств должна быть обеспечена высокая степень чистоты окружающей среды.

Обычный воздух сильно загрязнен механическими частицами и бактериями, поэтому для создания асептических условий атмосферный воздух дополнительно очищается.

Выделяют 4 зоны чистых помещений: А, В, С и D.

Для подтверждения класса чистоты зон периодически осуществляют контроль содержания частиц и микробиологический контроль.

Таблица 1. Рекомендованные пределы микробной контаминации

Класс	Проба воздуха, КОЕ/м3	Седиментация на пластину (d=90 мм), КОЕ/4часа	Контактная пластина (d=55 мм), КОЕ/пластина	Отпечаток пяти пальцев в перчатке, КОЕ/перчатка
А	<1	<1	<1	<1
В	10	5	5	5
С	100	50	25	-
D	200	100	50	-

Помещения класса чистоты А предназначаются для проведения операций, представляющих высокий риск для качества продукции, например, приготовление и фасование в асептических условиях, наполнение, укупорка, вскрытие ампул.

Помещения класса чистоты В окружают помещения класса А и предназначены для асептического приготовления и наполнения.

Помещения классов С и D предназначены для осуществления менее критичных стадий производства стерильной продукции, например, операции с первичной упаковкой и материалами после мойки.

Между помещениями различных классов чистоты устанавливаются шлюзовые соединения.

В чистых зонах все открытые поверхности должны быть гладкими, непроницаемыми, неповреждёнными, позволяющими многократно применять моющие и дезинфицирующие средства. В помещениях не должно быть не поддающихся очистке зон, поверхностей, углублений и не должно быть много выступающих краёв, полок, шкафов, оборудования. Подвесные потолки должны быть герметичны. Нельзя устанавливать раковины и сливы в зонах класса А и В. В других зонах стоки в полу должны быть обеспечены сифонами или гидрозатворами.

ВР.1.2. Подготовка оборудования.

Лента конвейеров не должна пересекать разделительный барьер, отделяющий зону класса А или В от производственной зоны с более низкой чистотой воздуха, за исключением случаев, когда сама лента подвергается непрерывной стерилизации.

Конструкция, установка и расположение оборудования, мест соединения и зоны обслуживания должны предусматривать возможность проводить работы с оборудованием, его техническое обслуживание и ремонт. Если необходима стерилизация, то она должна быть проведена после максимально полного монтажа оборудования.

Все критическое оборудование (стерилизаторы, системы подготовки и фильтрации воздуха, воздушные и газовые фильтры, системы приготовления, хранения и распределения воды и пр.) подлежит аттестации (валидации) и плановому техническому обслуживанию.

ВР.1.3. Подготовка персонала.

В чистых зонах должно находиться минимальное количество необходимого персонала, что особенно важно для асептического производства.

Весь персонал (включая персонал, занимающийся очисткой и техническим обслуживанием), который работает в таких зонах, должен регулярно проходить обучение по дисциплинам, связанным с надлежащим производством стерильной продукции, включая вопросы гигиены и основы микробиологии. Посторонние работники, не прошедшие такого обучения, должны быть подробно проинструктированы и за ними должно быть установлено строгое наблюдение.

Необходимо соблюдать требования к личной гигиене и чистоте. Следует организовать контроль за состоянием здоровья персонала.

В чистых зонах персоналу запрещается носить наручные часы и ювелирные украшения, а также использовать косметику.

Переодевание и мытье необходимо осуществлять в соответствии с письменными инструкциями, чтобы свести к минимуму риск контаминации одежды для работы в чистых зонах и не внести загрязнения в чистые зоны.

К одежде, предназначенной для зон каждого класса чистоты, предъявляются следующие требования.

Класс D: волосы и борода (при наличии) должны быть закрыты. Следует носить обычный защитный костюм и соответствующую обувь или бахилы. Должны быть приняты соответствующие меры для предотвращения любой контаминации чистой зоны извне.

Класс С: волосы, а также борода и усы (при их наличии) должны быть закрыты. Необходимо носить комбинезон или брючный костюм, плотно прилегающий на запястьях и имеющий высокий воротник, а также соответствующую обувь или бахилы. От них практически не должны отделяться волокна или частицы.

Класс А/В: головной убор должен полностью закрывать волосы, а также бороду и усы (при их наличии); он должен быть заправлен под воротник костюма; необходимо на лице носить маску для предотвращения распространения капелек. Следует носить соответствующим образом простерилизованные и неопудренные резиновые или пластиковые перчатки и простерилизованные или продезинфицированные бахилы. Нижние края штанин должны быть заправлены в бахилы, а рукава одежды - в перчатки. Защитная одежда практически не должна выделять волокна или частицы и должна задерживать частицы, которые отделяются от тела.

Уличную одежду запрещается вносить в помещения для переодевания, которые ведут в помещения классов В и С. Каждый работник в зоне класса А/В должен быть обеспечен чистой стерильной (простерилизованной или прошедшей соответствующую санитарную обработку) защитной одеждой для каждой смены. Перчатки во время работы необходимо регулярно дезинфицировать. Маски и перчатки необходимо менять, по крайней мере, каждую смену.

Одежду для чистых помещений необходимо очищать и обрабатывать таким образом, чтобы она впоследствии не становилась причиной контаминации. Ненадлежащим образом проведенная обработка одежды приводит к повреждению волокон ткани, что увеличивает риск отделения частиц.

ВР.1.4. Подготовка воздуха.

Воздух подаётся через фильтр при длительной очистке, затем через стерилизующий фильтр. Подача отфильтрованного воздуха должна поддерживать положительный перепад давления относительно окружающих зон с более низким классом чистоты, а также эффективное обтекание воздухом контролируемой зоны.

Системы ламинарного воздушного потока должны обеспечивать равномерную скорость движения воздуха.

ВР. 2. Подготовка субстанции адреналина гидротартрата, натрия хлорида, натрия метабисульфита, получение воды для инъекций, подготовка фильтров и фильтровальных материалов.

Все фармацевтические субстанции для производства стерильного раствора для инъекций соответствуют классу «годен для инъекций». Стадии подготовки фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ включают их отвешивание, измельчение и просеивание.

ВР.2.1. Подготовка адреналина гидротартрата.

Данная стадия включает в себя отвешивание, измельчение и просеивание адреналина гидротартрата.

ВР.2.2. Получение воды для инъекций.

В качестве растворителя при изготовлении лекарственных средств для парентерального применения используется вода для инъекций.

Вода для инъекций хранится при температуре 5-10 ^оС или 80-95 ^оС в закрытых емкостях, обеспечивающих рециркуляцию воды 1-5 раз за час.

Вода для инъекций получается из воды питьевой или воды очищенной методом дистилляции на оборудовании, контактирующая с водой поверхность которого изготовлена из нейтрального стекла, кварца или подходящего металла. Для этой цели используется аквадистиллятор Finn-Aqua. Основными его узлами являются испаритель, конденсатор и сборник.

Он предназначен для перегонки воды, прошедшей ионообменную очистку. Работа дистилляционных колон Finn-Aqua основана на двух принципах: мгновенном испарении подаваемой воды и механическом центробежном отделении пирогенных веществ и механических включений.

Вода поступает через регулятор давления в конденсатор, проходит теплообменники камер предварительного нагрева, а после нагревания поступает в зону испарения, состоящую из системы трубок, обогреваемых внутри греющим паром. Нагретая вода подается на наружную поверхность обогреваемых трубок в виде пленки, стекает по ним и нагревается до кипения.

В испарителе за счет поверхности кипящих пленок создается интенсивный поток пара, который движется снизу вверх со скоростью 20-60 м/с. Центробежная сила, возникающая при этом, обеспечивает стекание капель в нижнюю часть корпуса, прижимая их к стенкам.

ВР.2.3. Подготовка фильтров.

Для фильтрования используется друк-фильтр.

Перед началом работы необходимо проверить внешним осмотром комплектность и состояние фильтра, проверить его подключение к внешнему источнику сжатого воздуха. Затем установить кран в положение сброса давления; подать на фильтр сжатый воздух; установить с помощью клапана необходимое для работы давление (контроль по манометру).

ВР.2.4. Подготовка вспомогательных веществ: натрия хлорида, натрия метабисульфита.

Данная стадия включает в себя отвешивание, измельчение и просеивание вспомогательных субстанций: натрия хлорида, натрия метабисульфита.

ТП.1. Приготовление и фильтрация раствора адреналина гидротартрата 0,18%.

ТП.1.1. Приготовление раствора

Получение раствора проводят в помещениях класса чистоты С с соблюдением всех правил асептики.

Растворение осуществляется в герметически закрытых фармацевтических реакторах Normit из нержавеющей стали марки AISI 316L с паровой рубашкой и мешалкой. Материал сосуда не должен влиять на приготовляемый раствор или загрязнять его. Перед работой реактор тщательно моют и ополаскивают водой очищенной.

Применяют реактор с пропеллерной мешалкой. Её лопасти изогнуты от 0^о у оси до 90^о на конце лопасти. Постепенно меняющийся угол наклона плоскости мешалки при её вращении создаёт интенсивные потоки, обеспечивая эффективное перемешивание. Скорость вращения от 160 до 1000 об/мин.

Сначала проводится растворение действующего вещества -- адреналина гидротартрата, затем проводят его изотонирование натрия хлоридом и стабилизируют натрия метабисульфитом.

ТП.1.2. Фильтрация раствора

Фильтрацию осуществляют с помощью друк-фильтра. Рабочей частью установки является цилиндрическая ёмкость, имеющая в нижней части перфорированную перегородку с фильтрующим материалом (бельтинг). Фильтр трубопроводом соединён с реактором. К верхней части реактора подсоединён трубопровод с вентилем, идущий от компрессора. При нагнетании воздуха, жидкость под давлением, фиксируемым манометром, через трубу поступает на фильтр. Скорость фильтрации регулируется с помощью клапана. Преимущество данного фильтра в том, что он защищает раствор от контакта с воздухом, так как фильтрование проводиться по принципу газовой защиты.

ТП.2. Ампулирование раствора.

ТП.2.1. Резка ампул

Производится на полуавтомате роторного типа для вскрытия и резки спаренных ампул ГФ-12-205. Операция проводится так, чтобы ампулы получались одинаковой высоты. Это важно для точности их наполнения вакуумным способом. Концы капилляров на месте вскрытия должны иметь ровные и гладкие края для уменьшения загрязнения ампул стеклянной пылью и для обеспечения качественной запайки.

В качестве транспортера применяется ротор с гнездами для ампул, они перемещаются к вращающемуся дисковому ножу. Перед нанесением кругового надреза ампула приводится во вращательное движение роликом. Дисковый нож делает на капилляре круговой надрез, на месте которого происходит вскрытие за счет термоудара при нагревании горелкой. После вскрытия капилляр оплавляется горелкой, и ампула поступает в бункер для набора в кассеты. Далее на второй горелке кончик капилляра оплавляется, и ампулы попадают в бункер для набора ампул в кассеты.

ТП.2.2. Укладка ампул в кассеты

Проводится на полуавтомате для укладки ампул в кассеты ГФ-13-205. Загрузка ампул в бункер, установка пустых кассет и съём наполненных осуществляется вручную. В кассете помещается 512 ампул.

Отжиг ампул

Происходит для снятия внутреннего напряжения в стекле, образующегося в результате неравномерного охлаждения. Это повышает термоустойчивость.

Ампулы отжигают в специальной печи с газовым нагревом. Печь состоит из 3х камер: нагрева, выдержки (отжига) и охлаждения ампул.

Используются газовые горелки инфракрасного излучения и горелки инжекторного типа (устанавливаются под низкими чугунными плитами). Нагревают до размягчения стекла (до 560-580^оС за 10 минут). Выдерживают при 560-580^оС 10 минут.

Постепенно охлаждают (сначала до 200^оС за 30 минут, затем до 60^оС за 5 минут).

ТП.23. Мойка ампул

Наружная мойка ампул

Проводится в аппарате мойки наружной поверхности ампул ГФ-20-02а-206.

Кассеты с ампулами помещают в ванну на подставку и душируют фильтрованной горячей водой. Под воздействием струй воды кассета с ампулами вращается, что способствует равномерной обмывке всей наружной поверхности ампул. Производительность 30000 амп/час.

Внутренняя мойка ампул

Осуществляется пароконденсационным способом, на аппарате мойки внутренней поверхности ампул ГФ-20-02б-206 автоматически.

Кассеты с ампулами, капиллярами вниз, помещается в рабочую емкость, крышка закрывается. Из аппарата и ампул паром выдавливают атмосферный воздух и аппарат наполняют горячей водой 80-90^оС.

Пар, находящийся в ампулах конденсируют, в результате чего они почти целиком заполняются турбулентным потоком воды (из-за резкого перепада давления). Под воздействием возникающего вакуума вода в ампулах вскипает и мгновенно выбрасывается из них. Цикл повторяют несколько раз, меняя воду до полной очистки ампул. После последнего цикла в аппарате создается вакуум без подачи воды в рабочую емкость. Из ампул окончательно удаляется вода, они поступают на стадию сушки.

ТП.2.4. Сушка ампул.

Проводится на аппарате сушки ампул ГФ-20-03-206. Кассеты с ампулами перемещаются по транспортёру при нагревании инфракрасными лучами при 170^оС.

ТП.2.5. Наполнение ампул.

Наполнение ампул проводится в помещениях класса чистоты А с соблюдением всех правил асептики. Проводится на аппарате наполнения ГФ-20-06-206.

Осуществляется пароконденсационным способом (в сочетании с ультразвуком). Ампулы погружают капиллярами вверх в ёмкость с водой, снабжённую ультразвуковыми излучателями. При воздействии ультразвука, ампулы быстро заполняются водой и тут же дополнительно озвучаются. После этого ампулы переворачивают капиллярами вниз и направляют в камеру для дозированного заполнения раствором пароконденсационным способом.

ТП.2.6. Запайка ампул.

Т.к. применялся пароконденсационный способ наполнения ампул (разновидность вакуумного), то запайка осуществляется способом оплавления кончиков капилляров ампул.

Запайка ампул осуществляется в автомате для запайки ампул ГФ-20-09-206.

Разогревают капилляр непрерывно вращающейся ампулы, затем отпаиваемую часть капилляра захватывают специальными щипцами и, оттягивая, отпаивают и отбрасывают в отходы. В это же время несколько отводят пламя горелки в сторону для пережога стеклянной нити образующейся в месте отпайки и для оплавления запаянной части.

Горелку настраивают на определённую массу стекла.

Контроль качества запайки проходят все ампулы. Кассеты с ампулами помещают в вакуум-камеру капиллярами вниз. В капилляре создают разрежение, при этом из негерметично запаянных ампул раствор выливается, что обнаруживается визуально. Такие ампулы отбраковываются.

ТП.3. Стерилизация и проверка на герметичность.

ТП.3.1. Стерилизация ампул.

Ампулы с раствором стерилизуют насыщенным паром при избыточном давлении 1,1±0,2 атм и температуре 120±2°С в паровом стерилизаторе (автоклаве). Он имеет две двери, через одну происходит загрузка нестерильной продукции, через другую - выгрузка простерилизованной. Корпус стерилизатора обогревается глухим паром, затем в стерилизующую камеру для вытеснения воздуха подается острый пар.

Отсчет времени начинается с момента достижения заданного давления по манометру. Стерилизатор оснащен автоматической контрольной аппаратурой. Продолжительность стерилизации - 8 минут.

ТП.3.2. Проверка ампул на герметичность

После стерилизации контроль герметичности ампул проводится путем немедленного полного погружения горячих ампул в кассетах в ёмкость с раствором метиленового синего. При резком остывании в ампулах создаётся разрежение, и окрашенная жидкость попадает внутрь негерметичных ампул (раствор в ампулах становится синим). Эти ампулы сразу отбраковываются.

ТП.4. Просмотр ампул.

Контролер берет ампулу в руку, вносит в зону просмотра в положении вверх донышками и просматривает на белом и черном фонах. Затем ампулы плавным движением переворачивают в положение вниз донышками и также просматривают на белом и черном фонах.

ТП.5. Стандартизация.

Описание: Раствор адреналина гидротартрата 0,18% представляет собой бесцветную прозрачную жидкость.

Подлинность

1. 5 мг образца растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа; появляется изумрудно-зелёное окрашивание, которое от прибавления 1 капли раствора аммиака переходит в вишнево-красное, а затем в оранжево-красное.

2. К 1 мл 0,2% раствора препарата прибавляют 5 мл гидротартратного буферного раствора с рН 3,56 и 2 мл 0,1 н. раствора йода, оставляют на 5 минут, после чего смешивают с 3 мл 0,1 н. раствора тиосульфата натрия. Раствор сохраняет тёмно-красное окрашивание (отличие от норадреналина). Повторяют определение с 10 мл буферного раствора с рН 6,5; образуется красно-фиолетовое окрашивание.

3. 0,5 г препарата растворяют в 20 мл воды, содержащей 0,1 г бисульфита натрия, прибавляют раствор аммиака до отчетливого запаха и оставляют на 1 час в холодильнике при температуре не выше 4°С. Выпавший осадок отфильтровывают и промывают холодной водой три раза по 2 мл, затем 5-10 мл охлажденного спирта и 5-10 мл охлажденного эфира, после чего сушат в вакуум-эксикаторе над серной кислотой или фосфорным ангидридом в течение 3 часов. 0,4 г полученного основания адреналина растворяют в 10 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты и определяют удельное вращение, которое должно быть от -48° до -54°.

4. Раствор препарата (1:100) дает характерную реакцию на тартраты.

Определение прозрачности и степени мутности

ВИЗУАЛЬНЫЙ МЕТОД

Для определения прозрачности и степени мутности жидкостей используют одинаковые пробирки из бесцветного, прозрачного и нейтрального стекла с плоским дном, которые имеют внутренний диаметр от 15 мм до 25 мм. Слой испытуемой жидкости толщиной 40 мм сравнивают с 40 миллиметровым слоем свежеприготовленного эталона. Сравнение растворов проводят при рассеянном дневном освещении через 5 минут после приготовления эталона, просматривая объекты вдоль вертикальной оси пробирок на черном фоне. Рассеянный свет должен быть таким, чтобы эталон I легко отличался от воды, а эталон II легко отличался от эталона I. Раствор S (адреналина гидротартрата) по степени мутности не должен превышать эталон II.

Определение степени окрашивания (Цветность)

Определение степени окрашивания жидкостей в ряду коричневый-желтыйкрасный проводят визуально путем сравнения с соответствующими эталонами (растворами сравнения).

Степень окрашивания испытуемого раствора не должна превышать степени окрашивания соответствующего эталона, а цвет испытуемого раствора должен быть максимально приближен к цвету соответствующего эталона.

Цветность раствора адреналина гидротартрата определяется по методу II.

Метод II

40-миллиметровый слой испытуемой жидкости сравнивают с 40-милпиметровым слоем воды Р, растворителя или эталона, указанногo в частной статье, используя одинаковые пробирки из бесцветногo, прозрачногo, нейтральногo стекла с плоским дном, которые имеют внутренний диаметр от 15 мм до 25 мм. Сравнение окраски проводят при рассеянном дневном освещении, просматривая объекты вдоль вертикальной оси пробирок на белом фоне.

Окраска раствора S (адреналина гидротартрата) должна быть не интенсивнее эталона BY(КЖ)5.

Количественное определение

300 г испытуемого образца растворяют в 50 мл кислоты уксусной безводной Р, при необходимости слегка подогревая, и титруют 0,1 М раствором кислоты хлорной до появления синевато-зеленого окрашивания, используя в качестве индикатора 0,1 мл раствора кристаллического фиолетового Р.

Испытание на бактериальные эндотоксины-пирогены

Испытание на бактериальные эндотоксины проводят для определения наличия или количества эндотоксинов, источником которых являются грамотрицательные бактерии, с использованием лизата амебоцитов мечехвоста Limulus polyphemus или Tachypleus tridentatus. Существует три способа проведения данного испытания: способ гель-тромба, основанный на образовании геля; турбидиметрический способ, основанный на помутнении в результате расщепления эндогенного субстрата; хромогенный способ, основанный на появлении окраски после расщепления синтетического пептидно-хромогенного комплекса.

В ГФ РБ описаны шесть методов:

Метод А. Гель-тромб-метод: предельное испытание.

Метод В. Гель-тромб-метод: количественное испытание.

Метод С. Турбидиметрический кинетический метод.

Метод D. Хромогенный кинетический метод.

Метод Е. Хромогенный метод конечной точки.

Метод F. Турбидиметрический метод конечной точки.

Ипытание выполняют любым из этих шести методов. В сомнительных и спорных случаях окончательное решение принимают, основываясь на методе А, если иное не предписано в частной статье.

Испытание выполняют в условиях, не допускающих загрязнения посторонними эндотоксинами.

Оборудование

Всю стеклянную посуду и другую термоустойчивую аппаратуру депирогенизируют в сухожаровом шкафу с использованием процесса с подтвержденной эффективностью. Общеприняты минимальные значения времени и температуры обработки, составляющие 30 минут и 250⁰С, соответственно. При использовании пластиковой аппаратуры, например, микротитрационных планшетов и наконечников для автоматических пипеток, следует продемонстрировать отсутствие на ней поддающихся определению эндотоксинов и мешающих факторов.

СПОСОБ ГЕЛЬ-ТРОМБА (МЕТОД А)

Способ гель-тромба позволяет определять наличие и количество эндотоксинов и основывается на свёртывании лизата в присутствии эндотоксинов. Минимальная концентрация эндотоксинов, требующаяся для свертывания лизата в стандартных условиях, представляет собой указанную на этикетке чувствительность лизата. Для обеспечения точности и достоверности испытания указанную чувствительность лизата следует подтвердить, а также провести испытание на мешающие факторы, как описано в подразделе «1. Предварительные испытания».

1. ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ИСПЫТАНИЯ

Подтверждение заявленной чувствительности лизата

Перед использованием лизата в испытаниях указанную на этикетке чувствительность л, выраженную в МЕ/мл, следует подтвердить в четырех повторностях. Подтверждение чувствительности лизата выполняют при использовании новой партии лизата или при любом изменении экспериментальных условий, способном повлиять на проведение испытания.

Готовят стандартные растворы не менее, чем четырех концентраций, эквивалентных 2л, л, 0,5л и 0,25л путём разбавления исходного стандартного раствора эндотоксина водой для испытания на бактериальные эндотоксины.

В каждой из пробирок смешивают раствор лизата с равным объемом одного из стандартных растворов (например, по 0,1 мл каждого). Если используются одноразовые флаконы или ампулы с лиофилизированным лизатом, растворы добавляют непосредственно в ампулу или флакон. Реакционную смесь инкубируют в течение определенного периода, в соответствии с рекомендациями производителя лизата (обычно 37±1 ⁰С в течение 60±2 минут), избегая вибрации. Исследуют целостность геля: при использовании пробирок каждую из них по очереди извлекают из инкубатора и переворачивают одним плавным движением приблизительно на 180^о. Если образуется прочный гель, остающийся на своем месте после переворачивания, результат записывают как положительный. Результат отрицательный, если неповрежденного геля не образуется.

Результаты испытания считают достоверными, если низшая концентрация стандартных растворов во всех повторностях дает отрицательный результат.

2. ПРЕДЕЛЬНОЕ ИСПЫТАНИЕ (МЕТОД А)

Методика

Готовят растворы A, B, C и D в соответствии с Таблицей 2.6.14.-2 в ГФ РБ и выполняют испытание для этих растворов в соответствии с указаниями подраздела «1. Предварительные испытания. Подтверждение заявленной чувствительности лизата, указанной на этикетке».

Растворы А и В (положительный контроль с образцом) готовят в разведениях не более МДР и обрабатывают в соответствии с указаниями подраздела «1».

Предварительные испытания. Определение мешающих факторов. Растворы В и С (положительные контроли) содержат стандартный образец эндотоксина в концентрации, соответствующей двукратной заявленной чувствительности. Раствор D (отрицательный контроль) представляет собой воду для ИБЭ.

Интерпретация

Результаты испытания считают достоверными, если растворы В и С в обеих повторностях дают положительный результат, а раствор D - отрицательный результат.

Испытуемый препарат выдерживает испытание, если для раствора А в обеих повторностях получен отрицательный результат.

Испытуемый образец не выдерживает испытания, если для раствора А в обеих повторностях получен положительный результат.

В случае, если для одной из повторностей раствора А получен положительный результат, а для другой - отрицательный, испытание повторяют. Испытуемый образец выдерживает испытание, если в повторном эксперименте для раствора А в обеих повторностях получен отрицательный результат. Образец не выдерживает испытание, если для раствора А в одной или обеих повторностях получен положительный результат. Однако, если испытуемый образец не выдерживает испытания при разведении меньшем, чем МДР, то испытание может быть повторено при большем разведении, но не превышающем МДР.

Биологическое испытание

Испытание состоит в измерении роста температуры тела, вызванного у кроликов внутривенным введением стерильного раствора испытуемого образца.

Выбор животных. Используют здоровых взрослых кроликов обоего пола массой не менее 1,5 кг, получавших полноценное сбалансированное питание, не включающее антибиотиков, масса тела которых не снижалась в течение недели, предшествующей испытанию. Кролика не следует использовать в испытании на пирогeннocть, если:

а) он использовался в аналогичном испытании, давшем отрицательный результат, в течение предшествующих 3 дней;

b) он использовался в аналогичном испытании, в котором испытуемая субстанция была признана несоответствующей требованиям, в течение предшествующих 3 недель.

Предварительное испытание. Точность термометра - 0,1^оС. Термометр вводят в прямую кишку кролика на глубину около 5 - 7 см.