Вирусные инфекции

Размещено на http://www.allbest.ru/

Вирусные инфекции

1. Основы классификации вирусов

1. По размеру:

* Маленькие 15-100 нм. (вирус полиомиелита)

* Средние 100-300 нм.

* Большие 300-350 нм. (вирус натуральной оспы)

2. По форме:

* Палочковидные (вирус табачной мозаики)

* Нитевидные (филовирусы)

* Пулеобразные (вирус бешенства)

* Шаровидные (вирус полиомиелита)

* В виде сперматозоидов (бактериофаги)

3. По строению: простые - безоболочечные (вирус гепатита А), сложные - оболочечные (вирус гриппа)

4. По симметрии:

* Спиральные (вирус гриппа)

* Икосаэдрические (вирус герпеса)

5. По нуклеиновой кислоте:

* ДНК

* РНК

* Однонитевая

* Двунитевая

* Линейная

* Кольцевая

4. По способу размножения;

5. По способу передачи вирусов;

6. По географическому расположению;

7. По хозяину;

8. По антигенным свойствам.

2. Интеграция вирусной нуклеиновой кислоты в клеточный геном

Данный путь взаимодействия между вирусом и клеткой не одинаков для ДНК - и РНК-содержащих вирусов. В первом случае вирусная ДНК в кольцевой форме интегрирует в клеточный геном. При этом место интеграции определяется гомологичными нуклеотидными последовательностями ДНК клетки. Это происходи при участии ряда ферментов: рестриктаз, эндонуклеаз, лигаз. Вирус, интегрированный в клеточный геном, называют провирусом. Репликация провируса пропорционально делению клетки. При этом каждая дочерняя клетка получает копию провирусного генома.

В случае РНК-содержащих вирусов включение РНК в клеточный геном происходит путем обратной транскрипции. Механизм обратной транскрипции:

1) образование ДНК-транскрипта на матрице РНК при участии обратной транскриптазы. Этот транскрипт представляет собой одну нить ДНК, являющуюся матрицей для образования второй нити.

2) Образование второй нити ДНК.

3) Двунитевой ДНК-транскрипт замыкается в кольцо и встраивается в клеточный геном. Данный процесс объединения вирусной нуклеиновой кислоты с хромосомой клетки хозяина называется вирогенией.

3. Молекулярно-генетическая организация вирусов

Вирусы - мельчайшие микробы, не имеющие клеточного строения, состоящие из ДНК или РНК - генома, окруженного белками.

Для вирусов характерно наличие структурных и не структурных белков. Структурные белки обуславливают строение вирусов, а не структурные участвуют в репродукции вирусов.

Простые вирусы: нуклеиновая кислота + структурные белки (т.е. капсид) = нуклеокапсид. У простых вирусов капсид участвует в прикреплении к клетке хозяину.

Сложные вирусы: нуклеокапсид + суперкапсид ( двойная липопротеиновая оболочка). Суперкапсид образуется при почковании вириона через мембрану клетки. На оболочке вируса расположены гликопротеиновые шипы. Рецепторные белки, обуславливающие специфическое взаимодействие с клеткой, антигенные и иммуногенные свойства вирусов.

4.Типы вирусных инфекций

1) По пермиссивности чувствительных клеток:

А) Продуктивная вирусная инфекция с образованием дочерних популяций и характерными клиническими проявлениями возможна лишь при наличии в заражённом организме чувствительных клеток, в которых осуществляется репродуктивный цикл возбудителя. Например, возбудитель полиомиелита может реплицировать только в клетках ЖКТ и ЦНС приматов и человека.

Б) Абортивная инфекция развивается при проникновении возбудителя в нечувствительные клетки (например, при попадании вируса лейкоза коров в организм человека) либо в клетки, не способные обеспечить полный репродуктивный цикл (например, находящиеся в стадии клеточного цикла G0), а так же если данный вирус дефектный. Способность клеток оказывает противовирусный эффект против самых различных вирусов.

В) Ограниченная

2) По длительности взаимодействия:

А) острая

Б) Персистирующая вирусная инфекция возникает при таком взаимодействии между вирусом и заражённой клеткой, когда в последней продолжается выполнение собственных клеточных функций. Если заражённые клетки делятся, образуется инфицированный клон. Таким образом, увеличение числа заражённых клеток способствует увеличению общей популяции возбудителя в организме. Тем не менее персистирующие вирусные инфекции обычно нарушают функции клеток, что в конце концов приводит к клиническим проявлениям. Делится на вирусоносительство, латентную, хроническую и медленную.

3)По распространенности: очаговые и генерализованные.

5. Взаимодействие вируса с клеткой хозяина (стадии)

Выделяют следующие стадии взаимодействия вируса клеткой:

1. Адсорбция вириона на клеточной мембране. Специфическое взаимодействие за счет рецепторов.

2. Проникновение вириона в клетку

3. Раздевание и высвобождение вирусного генома - депротеинезация.

4. Синтез вирусных компонентов

5. Сборка вирус. Соединение нуклеиновой кислоты и капсидных белков.

6. Выход вирусного потомства из клетки.

6. Вирионы, вироиды, прионы

Вирион - полностью формированная вирусная частица, состоящая из нуклеиновой кислоты и белковой оболочки - капсида. Хранит и переносит генетический материал вируса от одной клетки к другой. Внеклеточная покоящаяся форма.

Вироиды - небольшие молекулы кольцевой, суперспирализованной РНК, не содержащие белок и вызывающие заболевания растений.

Прионы - белковые инфекционные агенты, не содержащие нуклеиновых кислот и вызывающие ряд заболеваний НС и человека и животных.

7. Основы гемагглютинации и гемадсорбции при вирусных инфекциях

Гамадсорбция обусловлена специфическим взаимодействием рецепторов вируса с гликопротеином, в состав которого входит сиаловая кислота и который является компонентом мембраны эритроцитов. Например, у вируса гриппа существует белок на поверхности оболочки - гемагглютинин. Этот фермент имеет сродство к мукопротеидным рецепторам клеток, то есть он с ними реагирует и вирус адсорбируется на поверхности чувствительных клеток. Такие рецепторы есть на поверхности эритроцитов. Вслед за гемадсорбцией вируса следует гемагглютинация, т.е. склеивание эритроцитов. Данные свойства некоторых вирусов позволили проводить их диагностику с помощью следующих реакций: РГА, РТГА.

8. Основные свойства вирусов

1. Ультрамикроскопические размеры

2. Фильтруемость

3. Неклеточное строение

4. Облигатные внутриклеточные паразиты

5. Не размножаются на пит. Средах

6. Дизъюктивный способ размножения

7. Патогенность

8. Не имеют белоксинтезирующих систем

9. Содержат либо РНК или ДНК

10. Автономная генетическая структура

11. Специфичность и иммуногенность

9. Химический состав вирионов. Вирусная ДНК и РНК

Различают РНК и ДНК содержащие вирусы, которые гаплоидны. Диплоидный геном имеют только ретровирусы. Геном вирусов содержит от 6 до 200 генов и представлен различными видами нуклеиновых кислот: однонитевыми, двунитевыми, линейными, кольцевыми и фрагментированными.

РНК содержащие вирусы: + нить РНК и - нить РНК (полярность РНК).

+ нить выполняет следующие функции: наследственная (геномная), иРНК или матричная РНК. Она является матрицей для синтеза белка на рибосомах инфицированной клетки. Является инфекционной, при введении в клетку вызывает инфекционный процесс.

- нить выполняет только наследственную функцию, для синтеза белка на - нити РНК синтезируется комплементарная ей нить.

Для вирусов характерно наличие структурных и не структурных белков. Структурные белки обуславливают строение вирусов, а не структурные участвуют в репродукции вирусов.

10. Внутриклеточные включения вирусного происхождения. Методы их обнаружения

Внутриклеточные включения иногда формируются в результате вирусной репликации в клетке. Они видимы при световой микроскопии и представляют собой прямое доказательство присутствия инфекции. Они составлены или из собранных вирусных частиц или остатков вирусного синтеза нуклеиновой кислоты. Внутриклеточные включения выявляются или в ядре, или в цитоплазме и могут быть использованы при диагностике определенных вирусных заболеваний. Окраска по Романовскому- Гимзе.

* Герпес: эозинофильные большие внутриядерные включения, окруженные светлым ободком.

* Вирус натуральной оспы: большие, зернистые, округлые эозинофильные цитоплазматические включения (тельца Гарньери).

* Вирус бешенства: Округлые, эозинофильные цитоплазматические включения (тельца Негри).

* Вирус гепатита В : Цитоплазма в виде матового стекла

* Вирус кори: Маленькие эозинофильные внутриядерные включения.

11. Формы персистенции вирусов

Выделяют три группы персистентных вирусных инфекций:

1. хронические,

2. латентные

3. медленные.

Хронические инфекции отличаются от двух других тем, что присутствие вируса определяется относительно просто с помощью лабораторных методов; к их числу относятся, например, хронические формы вирусного гепатита В. При латентных инфекциях, типичных, в частности, для герпесвирусов, возбудитель маскирован в тканях, и его выявление возможно при обострениях. При медленных инфекция вирусная персистенция приходится на чрезвычайно длительный (несколько лет) инкубационный период, предшествующий медленно развивающемуся заболеванию.

12. Интеграция нуклеиновой кислоты вирусов в клеточный геном. Примеры

Данный путь взаимодействия между вирусом и клеткой не одинаков для ДНК- и РНК-содержащих вирусов. В первом случае вирусная ДНК в кольцевой форме интегрирует в клеточный геном. При этом место интеграции определяется гомологичными нуклеотидными последовательностями ДНК клетки. Это происходи при участии ряда ферментов: рестриктаз, эндонуклеаз, лигаз. Вирус, интегрированный в клеточный геном, называют провирусом. Репликация провируса пропорционально делению клетки. При этом каждая дочерняя клетка получает копию провирусного генома.

В случае РНК-содержащих вирусов включение РНК в клеточный геном происходит путем обратной транскрипции. Механизм обратной транскрипции:

1) образование ДНК-транскрипта на матрице РНК при участии обратной транскриптазы. Этот транскрипт представляет собой одну нить ДНК, являющуюся матрицей для образования второй нити.

2) Образование второй нити ДНК.

3) Двунитевой ДНК-транскрипт замыкается в кольцо и встраивается в клеточный геном.

1. обязательно интеграбельные: ВИЧ, онковирусы;

2. факультативно интеграбельные вирусы, вызывающие интегративные инфекции только при определенных условиях (вирусы гепатита В, папилломы человека);

3. неинтеграбельные вирусы, не вызывающие интегративной инфекции (респираторные вирусы, кишечные вирусы, энтеровирусы, арбовирусы).

13. Морфология и структура вирионов

Вирусы - мельчайшие микробы, не имеющие клеточного строения, состоящие из ДНК или РНК - генома, окруженного белками.

По форме могут быть: Палочковидные, Нитевидные, Пулеобразные, Шаровидные, В виде сперматозоидов. По симметрии: спиральные и икосаэдрические.

Для вирусов характерно наличие структурных и не структурных белков. Структурные белки обуславливают строение вирусов, а не структурные участвуют в репродукции вирусов.

Простые вирусы: нуклеиновая кислота + структурные белки (т.е. капсид) = нуклеокапсид. У простых вирусов капсид участвует в прикреплении к клетке хозяину.

Сложные вирусы: нуклеокапсид + суперкапсид (двойная липопротеиновая оболочка). Суперкапсид образуется при почковании вириона через мембрану клетки. На оболочке вируса расположены гликопротеиновые шипы. Рецепторные белки, обуславливающие специфическое взаимодействие с клеткой, антигенные и иммуногенные свойства вирусов.

14. Особенности вирусных инфекций

1) Цитодеструктивное действие вирусов обусловлено строго внутриклеточным паразитизмом. Вирусы запускают клеточную генетическую программу гибели (апоптоза) клеток. Механизм цитопатического действия вирусов обусловлен подавлением синтеза клеточных ДНК, РНК и белков, разрушением клеточных лизосом и высвобождением лизосомальных ферментов, которые оказывают пагубное влияние на клеточные структуры.

2) Интеграционные взаимодействия - встраивание вирусной геномной ДНК или ДНК - копии геномной РНК - провируса в клеточную ДНК. При интегративных инфекциях вирусные гены, как и клеточные гены, передаются по наследству дочерним клеткам при делении инфицированных клеток, несущих интегрированный вирусный геном. По этому свойству все вирусы делятся на 3 группы:

3) Иммунодепрессивное влияние вирусных инфекций

Подавление иммунитета часто приводит к хронизации инфекционного процесса, развитию тяжелых осложнений вирусных инфекций. Регистрируют развитие иммунодефицита, подавление специфического и неспецифического клеточного и гуморального иммунитета.Иммунодепрессивный эффект вирусных инфекций обусловлен аффинностью (тропизмом) многих вирусов к клеткам имунитета.

4) Сенсибилизирующее влияние вирусных инфекций

В основе аллергических реакций при вирусных инфекциях лежат процессы инициации особого типа иммунного ответа в виде синтеза аллергических антител - иммуноглобулина класса Е

5) Аутоиммунные процессы при вирусных инфекциях- вырабатываются АТ в организме к собственным клеткам.

6) Мутагенный и онкогенный эффекты вирусов.

15. Методы идентификации вирусов

1) Реакция связывания комплемента

Реакция протекает в две фазы. Первая фаза - взаимодействие антигена и антител при обязательном участии комплемента.

Вторая - выявление результатов реакции при помощи индикаторной гемолитической системы (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка). Разрушение эритроцитов гемолитической сывороткой происходит только в случае присоединения комплемента к гемолитической системе. Если же комплемент адсорбировался ранее на комплексе антиген-антитело, то гемолиз эритроцитов не наступает.

2) Реакция торможения гемаглютинации.

Принцип реакции основан на способности АТ связывать различные вирусы и нейтрализовать их, лишая возможности агглютинировать эритроциты.

3) РНГА

Под непрямой, или пассивной, агглютинацией понимают реакцию, в которой антитела взаимодействуют с антигенами, предварительно адсорбированными на инертных частицах. В реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) в качестве носителя используют эритроциты.

4) ИФА и РИФ.

16. Методы культивирования вирусов

Для культивирования вирусов используют:

? культуры клеток - представляют собой соматические или эмбриональные клетки животных или человека, культивируемые в лабораторных условиях. Их подразделяют на первичные(неперевиваемые), полуперевиваеые и перевиваемые.

? культуры тканей

? куриные эмбрионы. Для культивирования используют 8-12-дневные куриные эмбрионы. Для заражения куриных эмбрионов исследуемый материал вводят в аллантоисную и амниотическую полости, на хорион-аллантоисную оболочку или в желточный мешок куриного эмбриона.

? чувствительных лабораторных животных.

17. Патогенез ВИЧ-инфекции

Путь передачи: через кровь, половым путем, от матери к плоду.

Заражение происходит при тесном контакте с кровью и другими биологическими жидкостями, содержащими вирус. В проникновении вируса в организм участвуют дендритные клетки слизистых. Вирус стремительно поражает клетки, несущие на своей поверхности рецепторы CD4 вблизи ворот инфекции и проникает с ними в региональные лимфатические узлы. ВИЧ распространяется по всему организму с током крови и лимфы.

При ВИЧ инфекции снижается количество Т4 -лимфоцитов, нарушается функция В-лимфоцитов, подавляется функция естественный киллеров ответ на АГ и митогены, снижается и нарушается продукция комплементов, лимфокинов и др. факторов, регулирующих иммунных функции. В результате происходит дисфункция иммунной системы и расстройство всей ее деятельности. Это приводит к появлению иммунодефицитов, проявлению вторичных заболеваний инфекционной и неинфекционной природы, а так же появлению злокачественных опухолей.

18. Патогенез гепатита А и В

Гепатит А. Механизм заражения - фекально-оральный. Первичное место размножения вируса - эндотелий тонкой кишки. Оттуда он попадает в портальный кровоток и печень. Повреждение гепатоцитов возникает за счет иммунопатологических механизмов.

Гепатит В. Вирус передается путем гемоконтакта. Вирус связывает с рецептором на поверхности гепатоцита и путем эндоцитоза проникает в клетку. Нуклеокапсид достигает ядра, где высвобождается геном. В ядре формируется двунитевая суперспирализованная циркулярная вирусная ДНК. Далее возможно развитие интегративной и продуктивной инфекции. Интегративная: ДНК вируса интегрирует в геном клетки с образованием провируса. Наблюдается синтез НВs-антигена. Клинически проявляется вирусоносительством. Продуктивная: на минус-цепи вирусной ДНК кодируются 4 вирусных РНК разной длины. Субгеномные РНК транспортируется в цитоплазму, где транслируются с образованием оболочечных большого (L), среднего (M) и малого (S) белков и продукта гена Х. Они внедряются в липидную мембрану ЭПС. Прегеномная РНК является и-РНК для синтеза белков сердцевины (pre core) и служит матрицей для синтеза полноценной минус-цепи ДНК. В ядре формируется нуклеокапсид, который достигает тоннелей ЭПС и в дальнейшем секретируется через аппарат Гольджи из клетки. Pre core полипептид также проходит через каналы ЭПС и секретируется в виде НВе-антигена. Клинически продуктивная инфекция проявляется в виде острого или хронического гепатита. Особенностью ВГВ является то, что повреждение опосредуется цитотоксическими СD8 T-лимфоцитами.

19. Патогенез гриппозной инфекции

Входные ворота - верхние дыхательные пути.

Первичная репродукция происходит в клетках эпителия респираторного тракта. Инфицированные клетки вырабатывают интерферон, оказывающий неспецифическое противовирусное действие. Развиваются воспаление, отек, набухание базальной мембраны, десквамация эпителия. Через поврежденный эпителиальный барьер вирус гриппа приникает в кровоток и вызывает виремию.

Всасывание продуктов распада клеток также оказывает токсическое действие.

Вирус активирует систему протеолиза и вызывает повреждение эндотелия капилляров.

Это повышает проницаемость сосудов, возникают геморрагии и нарушение гемодинамики с расстройством микроциркуляции. Также развивается транзиторный вторичный иммунодефицит, что предрасполагает к развитию вторичной бактериальной инфекции.

20. Лабораторная диагностика: методы диагностики вирусных инфекций

1. Вирусоскопический метод - делаем мазок, окрашиваем по Романовскому-Гимзе, ищем включения в клетке.

2. Вирусологический метод - выделение вируса из исследуемого материала и его идентификация

3. Серологический - определение нарастания титра антител, используются парные сыворотки

4. Молекулярно-биологический - обнаружение в материале фрагментов нуклеиновых кислот вируса.

21. Лабораторная диагностика полиомиелита - серологический метод, особенности

Серологическая диагностика основана на использовании парных сывороток больных с применением эталонных штаммов вируса в качестве диагностикума. Проводят РН, РСК и РТГА. Определяют нарастание титра АТ для взрослых в 4 раза, для детей - в 2.

РН. Компоненты: сыворотка больного и диагностикум. Готовят разведения сывороток, добавляют диагностикум, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

РСК: Компоненты: 1 система - сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система - гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат - отсутствие гемолиза.

РТГА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.

Содержание сывороточных иммуноглобулинов классов IgG, IgA, IgM определяют методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Метод основан на реакции образования нерастворимого комплекса (преципитата) выявляемого белка со специфическими антителами в тонком слое агара. Преципитат имеет форму визуально видимого кольца.

22. Лабораторная диагностика и патогенез гепатита В

Патогенез: Вирус передается путем гемоконтакта. Вирус связывает с рецептором на поверхности гепатоцита и путем эндоцитоза проникает в клетку. Нуклеокапсид достигает ядра, где высвобождается геном. В ядре формируется двунитевая суперспирализованная циркулярная вирусная ДНК. Далее возможно развитие интегративной и продуктивной инфекции. Интегративная: ДНК вируса интегрирует в геном клетки с образованием провируса. Наблюдается синтез НВs-антигена. Клинически проявляется вирусоносительством. Продуктивная: на минус-цепи вирусной ДНК кодируются 4 вирусных РНК разной длины.

Субгеномные РНК транспортируется в цитоплазму, где транслируются с образованием оболочечных большого (L), среднего (M) и малого (S) белков и продукта гена Х. Они внедряются в липидную мембрану ЭПС.

Прегеномная РНК является и-РНК для синтеза белков сердцевины (pre core) и служит матрицей для синтеза полноценной минус-цепи ДНК. В ядре формируется нуклеокапсид, который достигает тоннелей ЭПС и в дальнейшем секретируется через аппарат Гольджи из клетки. Pre core полипептид также проходит через каналы ЭПС и секретируется в виде НВе-антигена. Клинически продуктивная инфекция проявляется в виде острого или хронического гепатита.

Особенностью ВГВ является то, что повреждение гепатоцитов опосредуется цитотоксическими СD8 T-лимфоцитами.

Диагностика:

Используют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены (HBs и HBe) и антитела (анти-HBc-IgM, анти-HBc-IgG, анти-HBs, анти-HBe-IgM). ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени.

Для острого гепатита в поджелтушном и начальной стадии желтушного периода характерно обнаружение HBs антигена, HBe антигена и анти-HBc-IgM антитела. В период реконвалесценции - анти-HBe-IgM, анти-HBc-IgG, анти-HBs антител.

вирус инфекция клетка вакцина

23. Лабораторная диагностика полиомиелита - вирусологический метод, особенности

Исследуемый материал: испражнения, носоглоточный смывы. Заражают культуру клеток почек обезьян. В культуре вирус оказывает ЦПД. Идентифицируют вирус, проводя РН с типоспецифическими сыворотками и ИФА.

РН. Компоненты: вируссодержащий. материал и диагностическая сыворотка. Готовят разведения сывороток, добавляют вирусод. материал, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

24. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции

Вирусологический метод: материал - кровь, биоптаты костного мозга, пунктаты из лимфоузлов. Заражают культуру клеток лимфоцитов. Вирус обнаруживают по ЦПД и с помощью РИФ - готовят препарат, окрашивают специфической меченной антисывороткой, наблюдают зеленое свечение. Идентификация - РН и ИФА.

РН. Компоненты: вируссодержащий материал и диагностическая сыворотка. Готовят разведения сывороток, добавляют вирусод. материал, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

Также проводят ПЦР.

Серологический метод:

ИФА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают диагностикум с пластиком лунки планшета, вносят разведенную сыворотку, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИА: на лунках планшета сорбируют диагностикум, добавляют разведенную сыворотку больного. При наличии соответствующих АТ формирует комплекс АГ-АТ. Вносят меченную изотопом антивидовую сыворотку. Меченный АТ адсорбируются на комплексе АГ-АТ. Чем больше АТ в сыворотке больного, тем больше будет связана радиоактивная метка. Определение радиоактивности в жидкой фазе содержимого лунок позволяет судить о количестве АТ в сыворотке больного.

25. Патогенез полиомиелита

Входные ворота - слизистые оболочки верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта. Первичная репродукция вирусов происходит в лимфатических узлах глоточного кольца и тонкой кишки. Это обусловливает обильное выделение вирусов из носоглотки и с фекалиями еще до появления клинических симптомов болезни. Из лимфатической системы вирусы проникают в кровь (виремия), а затем в ЦНС, где избирательно поражают клетки передних рогов спинного мозга (двигательные нейроны). В результате этого возникают параличи мышц. В случае накопления в крови вируснейтрализующих антител, блокирующих проникновение вируса в ЦНС, ее поражения не наблюдается.

26. Лабораторная диагностика вирусных инфекций. Экспресс-диагностика

Для эксперсс-диагностики используют РИФ и ИФА.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИФ: Компоненты: вируссод. материал и меченная сыворотка. Готовят препарат, окрашивают специфической меченной антисывороткой, микроскопируют. Пол. результат: наблюдают зеленое свечение.

27. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций Коксаки А и В

Вирусологический метод: материал - испражнения, носоглоточные смывы, везикулярная жидкость. Одновременно заражают мышей-сосунков (в мозг - Коксаки В, внутрибрюшинно - Коксаки А) и культуру клеток почек обезьян. Вирусы идентифицируют в РТГА, РСК, РН, ИФА, учитывая также характер патологических изменений у зараженных мышей.

Серологический метод:

РН. Компоненты: сыворотка больного и диагностикум. Готовят разведения сывороток, добавляют диагностикум, заражают смесью культуру клеток или мышей-сосунков. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета; опытные мыши выживают, контрольные погибают

РСК: Компоненты: 1 система - сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система - гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат - отсутствие гемолиза.

РТГА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.

28. Лабораторная диагностика гепатита В

Вирусологический метод: ИФА, РИА, + молекулярно-генетический - ПЦР.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИА: на лунках сорбируют известные АТ, вносят вируссод. материал и добавляют меченные изотопом АГ той же специфичности. Если АТ соответствуют вирусу, то образуется комплекс АГ-АТ, и меченные изотопом АГ остаются свободными в жидкой фазе лунок. Т.о. радиоактивность жидкой части будет больше, чем в контроле - пол. результат.

Серологический метод: ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены (HBs и HBe) и антитела (анти-HBc-IgM, анти-HBc-IgG, анти-HBs, анти-HBe-IgM).

ИФА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают диагностикум с пластиком лунки планшета, вносят разведенную сыворотку, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РНГА: Компоненты: ИХН, сыворотка больного, эритроцитарный диагностикум. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум, в термостат 24 ч 37С. Пол. результат: зонтик.

29. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций (общие принципы)

Вирусологический метод: материал: фекалии, носоглоточные смывы, ликвор, содержимое везикул, кровь. Заражают культуру клеток почек обезьян или однодневных мышей сосунков. Оказывают ЦПД, Коксаки выявляют по патологической картине погибших мышей. Идентификация: РН и ИФА.

РН. Компоненты: вируссодержащий материал и диагностическая сыворотка. Готовят разведения сывороток, добавляют вирусод. материал, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

Серологический метод:

РН. Компоненты: сыворотка больного и диагностикум. Готовят разведения сывороток, добавляют диагностикум, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

РСК: Компоненты: 1 система - сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система - гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат - отсутствие гемолиза.

РТГА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.

30. Лабораторная диагностика гепатита А

Вирусологический метод: Материал: фекалии. Готовят экстракт из фекалий, заражают животных (шимпанзе, мармозеток), культуры клеток лимфоцитов. ЦПД не оказывает, выявляют с помощью РИФ - готовят препарат, окрашивают специфической меченной антисывороткой, наблюдают зеленое свечение. Идентификация: ИФА и РИА.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИА: Компоненты: фекальный экстракт, диагностическая сыворотка, меченные изотопом АТ. Адсорбируют АТ из сыворотки на поливиниловой поверхности пробирок, добавляют фекальный экстракт, определяют адсорбировавшийся АГ с помощью меченных радиоактивным йодом АТ.

Серологический метод: выявляют IgM и IgG. Используют РСК, РИА, ИФА.

РСК: Компоненты: 1 система - сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система - гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат - отсутствие гемолиза.

ИФА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают диагностикум с пластиком лунки планшета, вносят разведенную сыворотку, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИА: на лунках планшета сорбируют диагностикум, добавляют разведенную сыворотку больного. При наличии соответствующих АТ формирует комплекс АГ-АТ. Вносят меченную изотопом антивидовую сыворотку. Меченный АТ адсорбируются на комплексе АГ-АТ. Чем больше АТ в сыворотке больного, тем больше будет связана радиоактивная метка. Определение радиоактивности в жидкой фазе содержимого лунок позволяет судить о количестве АТ в сыворотке больного.

31. Лабораторная диагностика гриппозной инфекции

Экспресс-диагностика: РИФ и ИФА.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИФ: Компоненты: вируссод. материал и меченная сыворотка. Готовят препарат, окрашивают специфической меченной антисывороткой, микроскопируют. Пол. результат: наблюдают зеленое свечение.

Вирусологический метод: материал: носоглоточный смывы, отделяемое слизистой оболочки носовых ходов, кровь, ликвор. Заражают куриные эмбрионы, вводят материал в полость амниона или аллантоис; либо заражают культуру клеток почек обезьян. Выявляют по ЦПД, образованию бляшек, цветной пробе, РГА и по гемадсорбции. Идентификация: РСК, РТГА, ИФА, РН.

РТГА: Компоненты: диагностическая сыворотка, вируссод. материал, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют вирус. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.

РН. Компоненты: диагностическая сыворотка и вируссод. материал. Готовят разведения сывороток, добавляют вирус, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

РСК: Компоненты: 1 система - диагностическая сыворотка, вируссод. материал, комплемент, ИХН; 2 система - гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат - отсутствие гемолиза.

Серологический метод. Диагноз подтверждают при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом 10-14 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА,

32. Морфология и структура вируса гриппа

Вирион имеет сферическую форму, иногда нитевидную форму. Вирион представляет собой нуклеокапсид (имеющий спиральный тип симметрии), покрытый липопротеиновой оболочкой - сложный вирус. Внутри нуклеокапсида расположена однонитевая сегментированная минус-нитевая РНК. Нуклеокапсид у вирусов гриппа окружен слоем белков М1, которые составляют внутренний слой липопротеиновой оболочки. Липопротеиновая оболочка (суперкапсид) имеет клеточное происхождение. Суперкапсид включает в себя вирусные трансмембранные белки (такие, как М2, NB, ВМ2, СМ2) и несет на своей поверхности шипики, образованные двумя сложными белками-гликопротеинами - гемагглютинином (НА) и нейраминидазой (NА).

33. Специфические препараты для лечения гриппа

К ним относятся противогриппозная сыворотка и донорский гамма-иммуноглобулин.

Противогриппозная сыворотка содержит высушенные антитела. Выпускают в виде порошка. Если порошок "сушит" или вызывает раздражение, можно использовать жидкую сыворотку. Для этого содержимое флакона разводят в 20 мл кипяченой воды и используют для закапывания носа и полоскания горла. Действие сыворотки кратковременное, поэтому ее следует вводить в нос повторно по 0,3-0,5 г. Можно вдыхать или вдувать в нос и носоглотку - места, где накапливается и размножается гриппозный вирус. В носовой полости и носоглотке она связывает вирус и препятствует его проникновению в клетки и распространению по организму. Сыворотка эффективна на ранней стадии заболевания.

34. Донорский иммуноглобулин, его использование

Донорский противогриппозный иммуноглобулин (гамма-глобулин) содержит противогриппозные антитела. Его вводят внутримышечно (0,15-0,2 мл / кг). Препарат дает эффект только в начале болезни - в первые 1-3 дня. Продолжительность иммунитета после введения иммуноглобулина - 18-20 дней. Используют для профилактики гриппа у детей, контактировавших с больными.

35. Противогриппозные сыворотки, получение, применение

Поливалентная гриппозная сыворотка.

Получена путем гипериммунизации лошадей вирусами гриппа разных серотипов. Выпускается в сухом виде в смеси с антибиотиками и сульфаниламидами. Применяется интраназально с целью профилактики гриппа и для лечения больных в самом начале заболевания.

Типоспецифические гриппозные сыворотки H0N, H1N1, H2N2, H3N2, B, C.

Получают путем иммунизации животных соответствующим вирусом.

Применяются для серотипирования вирусов гриппа в РТГА РСК.

36. Интерферон, характеристика препарата, его применение

Интерферон- белок, образующийся в клетках макроорганизма, защищающий его от вирусных инфекций. Интерферон является гликопротеидом. Синтезируется в клетках иммунной системы и соединительной ткани. Различают три типа интерферона: а-интерферон: получают в культурах лейкоцитов крови донора, используя в качестве интерфероногенов вирусы не опасные для людей (вирус осповакцины). Обладает выраженным противовирусным и противоопухолевым действием. В-интерферон: получают в полуперевиваемых культурах фибробластов. Противоопухолевая активность выше, чем противовирусная. Гама-интерферон: иммунный, получают в перевиваемых культурах лимфобластоидных клеток (Т-лимфоциты, макрофаги, е-киллеры) под действием митогенов бактериального и растительного происхождения.

Интерферон синтезируется в организме постоянно, его концентрация в крови увеличивается при инфицировании вирусами. Интерферон обладает видоспецифичностью.

Эффекты интерферона: противовирусный, противоопухолевый, иммуномодулирующий (стимуляция фагоцитоза), активация экспрессии главного комплекса гистосовместимости. Интнрферон непосредственно на вирус вне клетки не действует, он связывается с рецепторами клеток, нарушая репродукцию вируса внутри клеток на стадии синтеза белка.

Препараты интерферона получают 2 путями: 1) путем инфицирования клеток крови человека безопасным вирусом. Выделяют интерферон и конструируют из него препараты интерферона. 2) генно-инженерным способом: путем выращивания в производственных условиях рекомбинантных штаммов бактерий (со встроенными в их ДНК генами интерферона), способных продуцировать интерферон (псевдомонады, кишечная палочка). В нашей стране рекомбинантный интерферон- Реаферон. Также создано большое количество препаратов интерферона: виферон, инферон, локферон, леардирон и др.

Применение: профилактика многих вирусных инфекций (грипп и др.); лечение хронических вирусных инфекций (парентеральные гепатиты, герпес, рассеянный склероз), лечение злокачественных опухолей, иммунодефицитных заболеваний.

37. Специфическая профилактика гриппа. Типы вирусных противогриппозных вакцин

1. Пассивная профилактика:

Противогриппозный донорский иммуноглобулин: готовится из сыворотки крови доноров, иммунизированных живой гриппозной вакциной типов А и В. Применяется для профилактики и лечения гриппа в эпидемических очагах.

Человеческий лейкоцитарный интерферон: видоспецифический белок, синтезированный лейкоцитами человека, находящимися в культуральной среде, в ответ на воздействие вируса-интерферогена. Применяется для профилактики и лечения гриппа.

2. Активная профилактика - вакцины:

Их применяют перед началом эпидемического сезона (октябрь-середина ноября).

Живая аллантоисная интраназальная и подкожная вакцины: готовятся из аллантоисной жидкости куриных эмбрионов, зараженных вакцинными штаммами вируса гриппа основных серотипов.

Тривалентные инактивированные цельновирионные гриппозные интраназальная и подкожная вакцины: Грипповак.

Химические вакцины (субвирионные): Инфлювакс, Агриппал.

Полимер-субъединичная: Гриппол.

Сплит-вакцины (расщепленные): Ваксигрипп, Бегривак, Флюарикс. Высокоочищенные, содержат полный набор вирусных антигенов.

38. Химическая гриппозная вакцина. Принципы приготовления. Достоинства

Химечаская гриппозная вакцина- субъединичная (расщепленная) вакцина - очищенные поверхностные антигены вируса гриппа. Получают антиген в молекулярной форме, особенно детерминанты антигена, химическим синтезом, после расшифровки его структуры. Для выделения из вирусов антигенных комплексов очищенную суспензию вирионов обрабатывают детергентами: трихлоруксусную кислоту, фенол, ферменты; применяют ультрацентрифугирование, хроматографию и др. методы. Из полученных химическим синтезом АГ или их эпитопов конструируют молекулярные вакцины.

Содержание: содержат только протективные антигены- гемагглютинин и нейраминидазу, т.е. именно те антигены, против которых вырабатываются вируснейтрализующие антитела.

Достоинства: наименее реактогенны, обладают высокой иммуногенностью.

Для повышения иммуногенности химических вакцин к ним добавляют адъюванты (гидроксид алюминия, фосфат алюминия и др.)

Назначение: используется для специфической активной профилактики вируса гриппа.

39. Убитая полиомиелитная вакцина, характеристика, недостатки, назначение

Инактивированная вакцина получается путем выращивания на культуре клеток вируса полиомиелита и обработкой вируса раствором формалина. Содержит антигены вируса полиомиелита.

Недостатки: эта вакцина не обеспечивает надежного местного иммунитета кишечника. Еще недостаток- необходимость ее трехкратного введения парентеральным путем.

Назначение: используется для специфической профилактики полиомиелита, создает стойкий общий иммунитет.

40. Пассивная иммунопрофилактика гепатита А. Характеристика препарата

Для специфической пассивной (экстренной) профилактики используют нормальный человеческий иммуноглобулин. Проводится лицам контактировавшим с больными HAV инфекцией. Иммуноглобулин человека нормальный - поливалентный иммуноглобулин человека. Имеет все свойства иммуноглобулина G, встречающегося у здорового населения. Получение: вначале получают иммунные сыворотки путем гипериммунизации животных (напр. лошади) специфическим антигеном или из крови людей-доноров. Затем из нативных иммунных сывороток выделяют и подвергают очистке и концентрированию специфические белки- Ig. Для очистки и концентрирования используют методы фракционирования - осаждение спиртом или ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.

Применяется с целью замещения и восполнения природных антител в сыворотке больного. Иммунитет сохраняется около 3 месяцев.

41. Специфическая профилактика гепатита А

Для специфической пассивной (экстренной) профилактики используют нормальный человеческий иммуноглобулин. Проводится лицам контактировавшим с больными HAV инфекцией. Иммуноглобулин человека нормальный - поливалентный иммуноглобулин человека. Имеет все свойства иммуноглобулина G, встречающегося у здорового населения. Получение: вначале получают иммунные сыворотки путем гипериммунизации животных (напр. лошади) специфическим антигеном или из крови людей-доноров. Затем из нативных иммунных сывороток выделяют и подвергают очистке и концентрированию специфические белки- Ig. Для очистки и концентрирования используют методы фракционирования- осаждение спиртом или ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.

Применяется с целью замещения и восполнения природных антител в сыворотке больного. Иммунитет сохраняется около 3 месяцев.

Для неспецифической активной (плановой) профилактики используют инактивированную культуральную концентрированную вакцину ("ГЕП-А-ин-ВАК". Разработана также рекомбинантная генно-инженерная вакцина. Получают инактивированную вакцину путем выращивания выращивания в культурах клеток вирусов, которые затем инактивируют, разрушают, выделяют антигенные комплексы, очищают, конструируют в виде препарата. Рекомбинантная вакцина: получается путем использования бактерий и вирусов, способных синтезировать молекулы несвойственным их антигенов.

42. Препараты для специфической профилактики полиомиелита

Активная:

Инактивированная вакцина получается путем выращивания на культуре клеток вируса полиомиелита и обработкой вируса раствором формалина. Содержит антигены вируса полиомиелита.

Недостатки: эта вакцина не обеспечивает надежного местного иммунитета кишечника. Еще недостаток- необходимость ее трехкратного введения парентеральным путем.

Назначение: используется для специфической профилактики полиомиелита, создает стойкий общий иммунитет.

Живая полиомиелитная вакцина является поливакциной, т.к. содержит аттенуированные штаммы вируса полиомиелита 1, 2 и 3 типа, выращенных на культуре клеток почек африканских зелёных мартышек. Вакцина выпускается в жидком виде и в форме драже для перорального применения.

Преимущества перед убитой: обеспечивает не только гуморальный, но и местный иммунитет кишечника за счет синтеза секреторных Ig A; вводится через рот, что облегчает её применение.

Назначение: используется для специфической профилактики полиомиелита.

Пассивная:

Иммуноглобулин нормальный человеческий: сырье для получения: плацентарная, донорская кровь, содержащей антитела. Присутствие АТ может быть результатом бытовой иммунизации, перенесенной инфекции или вакцинации против нее. Сначала получают от специально иммунизированных доноров иммунную сыворотку, затем выделяют очищенные и концентрированные препараты- иммуноглобулины.

Применение: профилактика и лечение полиомиелита.

43. Морфология и структура вируса иммунодефицита человека (ВИЧ)

Вирус иммунодефицита человека - лимфотропный вирус, который вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчивающуюся развитием СПИДа, который характеризуется преимущественным поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфностью клинических проявлений, высокой летальностью, многообразием естественных путей передачи (г.о. половым и парентеральным), склонностью к быстрому эпидемическому распространению.

ВИЧ открыт в 1983 году Л. Монтанье и Р. Галло.

Семейство: Retroviridae, Род: Lentivirus.

Морфология и структура ВИЧ.

ВИЧ- РНК-содержащий вирус. Вирионы ВИЧ имеют сферическую форму, диаметром 100 нм. Внешняя оболочка вирионов образована двойным слоем липидов, пронизанного гликопротеинами- "шипами". Липидная оболочка происходит из плазматической мембраны клетки хозяина, в которой репродуцируется вирус. Гликопротеиновая молекула состоит из 2 субъединиц- gp 120- находится на поверхности вириона, gp 41- пронизывает липидный слой. Образование обоих белков происходит с нековалентной связью между ними происходит при разрезании белка внешней оболочки ВИЧ- gp-161. Под внешней оболочкой вириона расположена сердцевина. Она имеет конусовидную или цилиндрическую форму и состоит из капсидных белков p24 и р25, ряда матриксных белков (р6 и р11), белков протеазы (р11 и р11). Для осуществления репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу или ревиртазу. Геном ВИЧ состоит из: 1) 3 основных структурных генов: gag- кодирует матриксные, капсидные, нуклеокапсидные белки и белки протеазы; pol- кодирует обратную транскриптазу; env- кодирует gp120 и gp41. 2) 7 регуляторных и функциональных генов: tat и rev - увеличивают скорость транскрипции белков, nef- контролирует прекращение репродукции ВИЧ, vif- кодирует белок, отвечающий за отпочковывание вируса от одной клетки и заражение другой. Также к ним относятся vpr, vpu, vpx- обеспечивают осуществление процессов репродукции и инфицирования.

Антигенными свойствами обладают белки сердцевины и оболочечные гликопротеины (р161), которые характеризуются высоким уровнем антигенной изменчивости.

Выделяют 2 типа вируса- ВИЧ-1 и ВИЧ-2, которые различаются по структурным и антигенным характеристикам, что и обусловливает различия в течение заболевания.

Жизненный цикл ВИЧ состоит из 4-х стадий (адсорбция, высвобождение РНК, синтез РНК, сборка), который реализуется за 1-2 дня. Вирус поражает в основном лимфоциты, иногда макрофаги, лейкоциты, дендритные клетки, клетки нервной системы, т.к. они содержат рецептор CD 4, с которым специфически взаимодействует р120 вируса.

44. Генно-инженерная противогепатитная В вакцина. Принципы получения. Назначение

Получение: выращивают в производственных условиях рекомбинантные штаммы дрожжей, способные синтезировать АГ вируса гепатита В. Для этого в геном дрожжей встраивают ген контролирующий синтез антигена вируса гепатита В. Затем, в процессе культивирования рекомбинантных штаммов дрожжей в условиях способствующих экспрессии этих генов, получают молекулярные антигены вируса гепатита В.

Генно-инженерная противогепатитная В вакцина содержит HBsAg.

Назначение: специфическая активная (плановая) профилактика гепатита В. Вакцинации подлежат все новорожденные в первые 24 часа жизни, далее по календарю прививок- через 1 месяц и в 5-6 месяцев. Среди взрослого населения трехкратной вакцинации подвергаются лица, относящиеся к группе высокого риска заражения гепатитом В. Длительность поствакцинального иммунитета- не менее 7 лет.

45. Принципы приготовления генно-инженерных вирусных вакцин

Метод приготовления генно- инженерных вирусных вакцин заключается в следующем: 1) подбирают реципиента, в клетки которого будет встроен ген, отвечающий за синтез антигена того вируса, для профилактики которого создается вакцина. Реципиента подбирают с учетом возможности встройки чужеродного гена, уровня экспрессии синтеза вещества, кодируемого геном, легкости и доступности массового культивирования, экологической безопасности. В качестве реципиентов чаще всего используют кишечную палочку, псевдомонад, дрожжей. 2) встраивают в геном реципиента ген, отвечающий за синтез того антигена вируса, который надо получить для создания вакцины. 3) создаются условия культивирования для нормальной экспрессии встроенного гена. 4) при этом клетка реципиента начинает синтезировать антигены вируса. 5) выделенные антигены вируса в дальнейшем используются для получения генно-инженерной вакцины, которая используются для специфической профилактики заболевания, вызываемого этим вирусом.

46. Живая полиомиелитная вакцина. Характеристика, преимущества перед убитой, назначение

Живая полиомиелитная вакцина является поливакциной, т.к. содержит аттенуированные штаммы вируса полиомиелита 1, 2 и 3 типа, выращенных на культуре клеток почек африканских зелёных мартышек. Вакцина выпускается в жидком виде и в форме драже для перорального применения.

Преимущества перед убитой: обеспечивает не только гуморальный, но и местный иммунитет кишечника за счет синтеза секреторных Ig A; вводится через рот, что облегчает её применение.

Назначение: используется для специфической профилактики полиомиелита.

47. Морфология и структура вируса гепатита А

Вирус гепатита А- возбудитель острой инфекционной болезни, характеризующейся лихорадкой, преимущественным поражением печени, интоксикацией, иногда желтухой и отличающуюся склонностью к эпидемическому распространению. Антропоноз.

Вирус гепатита А открыт в 1973 г. С.Фейнстоном.

Семейство: Picornaviridae, Род: Hepatovirus, Вид: HAV.

Морфология и структура: HAV- мелкий, просто организованный, РНК-содержащий вирус, диаметром 27-28 нм. Имеет кубический тип симметрии. Не имеет суперкапсидной оболочки. В их составе нет углеводов и липидов. В РНК вируса гепатита А обнаружены нуклеотидные последовательности, общие с другими энтеровирусами. РНК- одноцепочечная плюс нитевая.

HAV имеет один вирусоспецифический антиген белковой природы. Типовой вид - вирус гепатита А - имеет один серотип. Вирус гепатита А отличается от энтеровирусов более высокой устойчивостью к действию физических и химических факторов. Репродукция вируса в культуре клеток не сопровождается ЦПД. Передается водным, алиментарным, контактно-бытовым путями.

48. Признаки, отличающие вирусы от прокариот

Признаки, отличающие вирусы от прокариот, следующие:

Вирусы не имеют клеточного строения

Вирусы имеют ультрамикроскопические размеры- видны только в электронном микроскопе.

Вирусы не имеют собственной белоксинтезирующей системы, используют систему хозяина.