На правах рукописи

Грушко Мария Павловна

АВТОРЕФЕРАТ

диссертациина соискание ученой степени

доктора биологических наук

Клеточный состав кроветворных органов половозрелых самок представителей класса рыб, земноводных и пресмыкающихся

03.03.04 - Клеточная биология, цитология, гистология

Астрахань - 2010

Работа выполнена на кафедре гидробиологии и общей экологии Астраханского государственного технического университета

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор

Федорова Надежда Николаевна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Родзаевская Елена Борисовна

доктор биологических наук, профессор

Джандарова Тамара Исмаиловна

доктор медицинских наук, профессор

Наумова Любовь Ивановна

Ведущая организация:

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург

Защита диссертации состоится «21» мая 2010 года в 12⁰⁰ часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна,1. Естественный институт АГУ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета.

Автореферат разослан ___ __________2010 года

Ученый секретарь

Диссертационного совета

доктор биологических наук, доцент

Ю.В. Нестеров

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Путь, который помогает изучить отдельные элементы биологической проблемы, установить взаимосвязь процесса и тем самым подойти к пониманию явления в целом, - это обращение к филогенетически менее организованным формам жизни с постепенным переходом от групп, в которых данное явление только зарождалось, к группам, в которых оно усложнилось (Купер Э., 1980; Селезнев С.Б. , 1999; Ройт А. и др., 2000; Галактионов В.Г., 2004). Для понимания различных физиологических состояний в клинической и научной практике широко используются показатели, связанные с важнейшей тканью организма позвоночных - кровью. Правильное представление о кроветворении, составе и свойствах крови помогает достаточно точно распознавать нормальные и патологические процессы в организме. Не будучи объединенной в единый орган, кровь все же является целостной системой, своеобразным подвижным органом, имеющим строго определенную морфологическую структуру и постоянные весьма многочисленные функции (Заварзин А.А.,1953; Горышина Е.Н., Чага О.Ю., 1990; Хамидов Д. Х. и др., 1978).

Помимо клинической диагностики кровь и органы гемопоэза являются объектами для исследования организмов разного филогенетического уровня. В этом отношении функциональные и морфологические характеристики отдельных гемопоэтических ростков в каждом классе позвоночных имеют существенные различия (Житенева Л.Д. и др., 2001; Ямщиков Н.В. и др., 2007; Силс Е.А., 2008). С этих позиций определенный интерес представляет класс рыб, земноводных и пресмыкающихся - представителей разных ступеней эволюции позвоночных животных. Интерес к сравнению этих животных связан с тем, что они существуют в разных средах, что, несомненно, отразилось на механизме кроветворения и иммунной защиты. Кроме того, выяснение особенностей эволюционной динамики тканей позволяет объяснить с исторических позиций сущность патологических процессов, прогнозировать их, биологически обосновать мероприятия, направленные на ликвидацию или восстановление пораженной области (Хамидов Д. Х. и др., 1978).

На настоящий момент существуют вопросы, связанные с гематологией, на которые необходимо получить ответы для более полного осмысления генетического родства животных даже далеко стоящих друг от друга в эволюционном древе. Недостаточно подробно изучены особенности организации и функционирования гемопоэтической ткани рыб, земноводных и пресмыкающихся. В этом случае сравнительно-эволюционный подход оказывается весьма плодотворным при анализе сложных биологических явлений, часто не поддающихся прямому экспериментальному изучению (Купер Э., 1980; Селезнев С.Б., 1999; Житенева Л.Д. и др. 2001,2004).

Накопленный к настоящему времени материал, касающийся этой области, характеризуется недостатком фактов и достаточно противоречив (Заварзин А.А., 1953; Иванова Н.Т.,1970, 1982; Купер Э., 1980; Золотова Т.Е.,1989; Пестова И.М., Четверных В.Н. , 1990; Житенева Л.Д. и др.,2004).

Большинство литературных сведений посвящалось вопросам морфологии и физиологии форменных элементов периферической крови в связи с проблемами токсикологии и болезней этих животных (Остроумова И.Н., 1957; Калашникова З.М., 1976; Хамидов Д. Х. и др., 1978; Крейтцманн Х.Л., Франке П., 1983; Hine P.M., Wain J.M., 1988; Аносова Н.В. и др., 1989; Житенева Л.Д., 1989; Сахарова Н.Ю., 2004 Fournier M. et ol., 2005 и др.). Гистологические исследования, наряду с подсчетами форменных элементов крови, наиболее полно отражают количественную и качественную стороны гемопоэза, его мощность и потенциальные возможности. Но морфофункциональная характеристика кроветворных органов у рыб, земноводных и пресмыкающихся, где подробно рассмотрена топография, строение, качественный и количественный состав формирующихся клеток в сравнительном аспекте - практически отсутствует в научной литературе.

Это и побудило к исследованиям процесса гемопоэза у представителей класса рыб, земноводных и пресмыкающихся.

Цель и задачи исследования. Целью исследования явилось установление закономерностей цитогенеза, а также выявление характера прогрессивных изменений качественного и количественного состава гемопоэтических клеток в органах кроветворения представителей рыб, земноводных и пресмыкающихся.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Выявить особенности морфологии органов гемопоэза с учетом принадлежности исследованных животных к разным классам.

2. Определить качественный и количественный состав клеток крови, продуцируемых органами кроветворения исследованных животных.

3. Провести сравнительный цитологический анализ органов кроветворения представителей рыб, земноводных и пресмыкающихся.

4. Установить филогенетическую изменчивость качественного и количественного состава гемопоэтических клеток в органах кроветворения животных разных систематических групп.

Научная новизна исследования. Впервые в сравнительном аспекте проведено подробное исследование качественного и количественного состава клеточных компонентов, особенностей организации органов кроветворения животных разных систематических групп. Выявлены морфофункциональные признаки дефинитивного кроветворения у рыб (на примере воблы, ската), земноводных (на примере озерной лягушки), пресмыкающихся (на примере прыткой ящерицы). Установлены и доказаны закономерности преобразования гемопоэтической ткани по мере усложнения организации животных. Доказано, что у исследованных животных впервые выделение иммунной системы из общей системы кроветворения наблюдается у представителя костистых рыб (воблы). Описана локализация развивающихся элементов крови эритроцитопоэтического, лимфоцитопоэтического, миелоцитопоэтического и моноцитопоэтического рядов у разных животных в кроветворных органах в период половозрелости.

На основании различий по качественному и количественному составу формирующихся клеток крови в органах кроветворения, а также по особенностям их организации у представителей разных классов животных, высказана концепция о влиянии образа жизни и степени развития организма на становление и преобразование органов гемопоэза.

Положения, выносимые на защиту:

1. У представителя костистых рыб - воблы, в полостях челюстных костей черепа и перикарде присутствует гемопоэтическая ткань.

2. Наряду с изменением организации органов кроветворения исследованных животных, существенно меняется качественный и количественный состав пролиферирующих и созревающих в них гемопоэтических клеток.

3. У представителей земноводных и пресмыкающихся, наряду с сокращением количества очагов гемопоэза, по сравнению с рыбами, наблюдается постепенное отделение иммунной системы из общей системы кроветворения, трансформация кроветворных органов, выполнявших ранее функции формирования всех клеточных элементов крови.

4. Тимус преобразуется в лимфоидный орган у костистых рыб, а кроветворная ткань, ассоциированная с пищеварительным трактом, преобразуется в лимфоидную ткань - у земноводных.

5. Селезенка исследованных животных постепенно утрачивает функцию универсального органа кроветворения.

6. В гемопоэтической ткани красного костного мозга земноводных и пресмыкающихся появляется структурная единица - гемопоэтический островок.

7. Сравнительный анализ топографии, цитоархитектоники и гистологии кроветворных органов и тканей представителей класса рыб, земноводных и пресмыкающихся демонстрирует историческую направленность этой системы по линии морфологического прогресса, которая обусловлена изменением среды обитания.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследований значительно расширяют представления об особенностях гемопоэза органов кроветворения у представителей животных разных таксономических групп, вносят определенный вклад и дополнение в понимание механизмов и принципов организации структуры системы гемопоэза, что позволяет представить эволюционные изменения гемопоэтических клеток и кроветворной ткани у этих животных в виде единого процесса.

Практическая ценность результатов исследования состоит в том, что разработанные гематологические показатели позволяют применять их для экспертной оценки физиологического состояния половозрелых рыб, земноводных и пресмыкающихся, обитающих в естественных условиях Астраханской области. Представленные табличные данные о состоянии клеток крови эритроидного ряда, лейкограммы всех животных помогут в проведении различных мониторинговых исследований.

Выявленные различия в строении и локализации гемопоэтической ткани позволяют глубже осмыслить становление этой системы у различных классов животных. Эти данные используются в учебном процессе в преподавании курсов физиологии, гистологии, цитологии, иммунологии, эмбриологии для студентов специальностей «Водные биоресурсы и аквакультура», «Биоэкология» в Астраханском государственном техническом университете, а также в научной работе.

Апробация работы. Основные результаты исследований доложены и обсуждены на ежегодных научно-технических конференциях профессорско-преподавательского состава Астраханского государственного технического университета (1998-2009), Международной научной конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря (Астрахань, 2006), 7-й Международной конференции «Актуальные проблемы современной науки» (Самара, 2006), Международном симпозиуме «Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата» (Астрахань, 2007), Международной конференции, посвященной 75-летию Астраханского государственного технического университета «Экология биосистем: Проблемы изучения, индикации и прогнозирования» Астрахань, 2007), 2-ой научной конференции с участием стран СНГ «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов» (Петрозаводск, 2007), Международном Форуме по проблемам науки, техники и образования III тысячелетие - новый мир (Москва, 2007), X Международной научной конференции, посвященной 450-летию Астрахани «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря и водоемов внутреннего стока Евразии» (Астрахань, 2008), IV Международной научно-практической конференции «Человек и животные» (Астрахань, 2008), XII Всероссийской научно-практической конференции «Образование-наука-технологии; XI Всероссийской научно-практической конференции «Агропромышленный комплекс и актуальные проблемы экономики регионов», XI Международной научно-практической конференции «Экологические проблемы современности» (Майкоп, 2008), Международной научной конференции «Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии и генетики животных» (Саранск, 2009), VI Международной научно-практической конференции «Проблемы сохранения и рационального использования биоразнообразия Прикаспия и сопредельных регионов» (Элиста, 2009), Международной научно-практической конференции «Способы и технологии интенсификации» (Астрахань, 2009).

Публикация результатов исследования. Всего опубликовано 79 научных работ, из них 55 по материалам диссертации, в том числе 10 в ведущих научных журналах, перечень которых утвержден ВАК.

Объем и структура работы. Диссертационная работа построена по классическому типу и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, трех глав с описанием результатов собственных исследований, их обсуждением, заключения, выводов и библиографического списка. Диссертация изложена на 364 страницах, содержит 59 таблиц, 211 рисунков. Список литературы включает 314 источников, в том числе 86 иностранных.

1 Материалы и методы исследования

Работа выполнена в Астраханском государственном техническом университете на кафедре гидробиологии и общей экологии в течение 1999-2009гг.

Объектом исследования являлись половозрелые самки белуги (Huso huso (L.)), осетра (Acipenser gЬldenstдdti Brandt), севрюги (Acipenser stellatus Pallas), стерляди (Acipenser ruthenus L.), воблы (Rutilus rutilus caspicus) (Jakowlew, 1870)), озерной лягушки (Rana ridibunda Pall., 1771), прыткой ящерицы (Lacerta agilis (Linnaeus, 1758)), а также головастики озерной лягушки и представители хрящевых рыб - скат морской кот (Dasyatis pastinaca). Представители осетровых рыб были выловлены на тоне 9-ая Огневка (Чкаловская), доставленные на Лебяжий осетровый завод, используемые, в дальнейшем, для рыбоводных целей. Вобла была выловлена в р. Волга (район г. Нариманов Астраханской области и г. Астрахани). Скат пойман на Черном море. Земноводные отлавливались из водоемов Наримановского и Красноярского районов Астраханской области. Ящерицы были отловлены в окрестностях г. Нариманов и с. Красной Яр Астраханской области. В работе придерживались общепринятой систематики (Определитель … , 1977; 1977 а; 1989; Ананьева Н.Б. и др., 1998; Орлов В.Ф, 1999; Колябина-Хауф С.А. и др., 2004; Васильева Е.Д. 2004). Для исследования были взяты самки, в одно время, так как в основе состояния крови и кроветворных органов лежат морфофизиологические свойства организма, связанные с экологическими особенностями местообитания (Иванова Н.Т. , 1970).

При выполнении работы был применен комплекс методов исследования: морфометрические, гистологические, гистохимические, физиологические, статистические.

Отлов и хранение животных проводили по стандартным методикам (Правдин И.В., 1966; Шляхтин Г.В., Голикова В.Л., 1986). Животных взвешивали на рычажных весах.

Морфометрические методы. Осуществляли промеры всех животных по общепринятым методикам (Правдин И.Ф. ,1966; Терентьев П.В. ,1950, 1961; Ноздрачев А.Д., Поляков У.Л., 1994; Шляхтин Г.В., Голикова В.Л. , 1986; Шамгунова Р. Р., Старикова В. П., 2008). Определение возраста у особей осуществляли согласно методикам И.Ф. Правдина (1966), Смириной Э. М (1972), Ляпкова С.М. (2007, 2008) (табл.1,2).

Эксперименты с животными проводились с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ № 742 от 13.11.84). У всех рыб, взятых для гистологического анализа, были исследованы следующие органы кроветворения: селезенка, туловищная и головная почка, тимус, сердце, кости головы, стенки кишки, жабр, кроме того, изготавливались мазки крови. У лягушек и ящериц взяты кусочки тканей селезенки, тимуса, красного костного мозга, всех отделов пищеварительного тракта, «лимфатические узлы» подкрыльцовой области и изготовлены мазки крови. Также, у этих животных для исследования были взяты сердце и почки.

Таблица 1.

Программа исследований

Изучаемое явление	Методы	Количество использованного материала	Время проведения исследований
I этап - полевые наблюдения
Биологические показатели самок рыб, лягушек, ящериц	морфометрия (вес, длина) - возраст	Кол-во белуг - 36 Кол-во осетров - 60 Кол-во севрюг - 69 Кол-во стерлядей - 35 Кол-во вобл - 150 Кол-во лягушек - 78 Кол-во ящериц - 60 Кол-во головастиков - 6 Кол-во скатов - 3 Взятие проб тканей и мазков крови	1999-2002гг. 2002-2008гг. - весна-лето
II этап - Лабораторные исследования
Гематологические показатели самок	Гематологические: количество эритроцитов и лейкоцитов, расчет лейкограммы	10244 мазка крови	Август-май 1999-2008 гг.
Морфофункциональные показатели кроветворных органов исследуемых особей животных	Гистологические методы	2434 пробы 9600 гистологических препаратов	Август-май 1999-2009 гг.
III этап - комплексные оценки полученных результатов
Оценка полученных результатов			Сентябрь-май 2001-2009гг.

Таблица 2.

Качественные показатели и количество самок исследованных животных

Вид животного	Время проведения исследования	Вес (Р), г	Возраст, годы	Абсолютная длина (L), см	Кол-во рыб, экз.
белуга	1999-2000	70500,0±241,20	16,81±0,35	205,5±3,51	36
осетр	1999-2000	22010,0±200,12	16,85±0,34	153,48±2,99	60
севрюга	1999-2000	11080,0±185,12	10,94±3,23	146,4±3,61	69
стерлядь	1999-2000	1388,2±111,63	8,03±0,37	62,65±1,35	35
вобла	2002-2007	130,0±6,96	3,34±0,24	18,5±1,64	150
лягушка	2005-2009	160,0±7,11	3,62±0,19	11,3±1,99	78
ящерица	2005-2009	15,0±3,25	3,55±0,22	7,0±1,45	60

Физиологические методы. Изучение гематологических показателей крови проводилось по методикам, рекомендуемым Л.Д. Житеневой, Т.Г. Полтавцевой, О.А. Рудницкой (1989), Н.Т.Ивановой (1982), А.А.Кудрявцевым, и др., (1969), Хамидовым Д.Х. и др., (1978) .

Идентификация форменных клеток крови осуществлялась по атласам Н.Т. Ивановой (1984), В.Н. Никитина (1949), Г.И. Козинца (1998, 2004), С.Л. Козинца и др. (2006), Р.П. Самусева и др.(2004), изменения форменных элементов - согласно рекомендациям Л.Д. Житеневой (1989), О.Н. Давыдова (2006). Мазки крови окрашивались по Романовского-Гимза, гематоксилин-эозином (Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1982). Проводили измерение и подсчет клеток крови исследуемых животных (воблы, озерной лягушки, прыткой ящерицы). Подсчет форменных элементов как красной, так и белой крови проводили методом четырех полей, т.е. более 500 эритроцитов и 200 лейкоцитов в мазке (Житенева Л.Д, 1989; Иванова Н.Т, 1984).

Гистологические и гистохимические методы. Материал обрабатывался методами классической гистологии (Пирс Э., 1962; Ромейс Б., 1954; Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1989). Ткани органов были фиксированы в 10%-ом нейтральном формалине, 96% этиловом спирте, жидкостях Буэна, Сера, Карнуа. Далее материал заливали в парафин, срезы изготовляли на микротоме. Гистологические срезы окрашивались гематоксилин-эозином; азур II-эозином; по методу Маллори; метиловым зелёным - пиронином по Браше. Микроскопирование фиксированных и окрашенных препаратов, осуществлялось с помощью светового микроскопа «OLYMPUS BH-2», «МИКРОМЕД-2» с применением иммерсии. Подсчет клеточного состава форменных элементов белой и красной крови проводился отдельно в каждом кроветворном органе (Стефанов С.Б. 1974; Сапин М.П. и др., 1988; Житенева Л.Д., 1989). В-клеточные популяции лимфоцитов определяли путём выявления РНК (избирательное присоединение пиронина к РНК) (Пирс Э., 1962; Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1989). Микрофотосъемка производилась при помощи фотонасадки SONI DSC-W7.

Статистические методы. При обработке полученного материала использовали следующие статистические подходы и показатели: расчет относительных показателей, определение средних величин, оценка достоверности различий по критерию Стьюдента, корреляционный анализ (Плохинский И.А., 1961; Лакин Г.Ф. 1990), кластерный анализ (R. C. Tryjon, 1936; J.A. Hartigan, 1975; В.И.Боровиков, 2001).

2 Результаты и их обсуждение

2.1 Клеточный состав органов кроветворения костистых рыб (на примере воблы)

Кроветворная ткань передней части почки

Анализ участков головной почки, состоящих из дифференцирующихся клеток крови, показал, что среди ретикулярных клеток в ней пролиферируют и дифференцируются клетки красной и белой крови. Клетки крови располагались диффузно или в виде небольших групп (до 5 клеток). Содержание клеток грануло - и агранулоцитопоэтического рядов несколько превосходило содержание формирующихся клеток эритроидного ряда, составляя, в среднем 58,06% и 41,94% - соответственно.

Было отмечено небольшое количество гемоцитобластов, их удельный вес составлял 1,3%. От числа всех клеток эритроидного ряда на бластные клетки, а именно на эритробласты приходилось 34,2%. Созревающие клетки эритроидного ряда составляли 42,5%, а зрелые эритроциты - 22,3%.

В головной почке воблы дифференцировались все лейкоциты. Количество дифференцирующихся гранулоцитов (52,2%) несколько превышало формирующиеся агранулоциты (47,8%). Из клеток гранулоцитопоэтического ряда были выявлены клетки всех стадий созревания. Из бластных клеток были отмечены миелобласты, их удельный вес составлял 2,3%. Самой многочисленной группой, из созревающих клеток, были эозинофильные метамиелоциты (12,3%). Из зрелых гранулоцитов больше всего было отмечено сегментоядерных эозинофилов - 15,5%.

Из формирующихся агранулоцитов монобласты составляли - 0,2%, лимфобласты - 4,3%, плазмобласты - 7,1%. Из созревающих клеток были отмечены пролимфоциты (8,7%) и проплазмоциты (1,9%). Зрелых лимфоцитов было выявлено больше всего - 17,5%, плазмоциты составили 8,0% .

Таким образом, анализ строения и функций головной почки воблы показал, что пронефрос рыб является многофункциональным органом, в нем происходит физиологическая регенерация эритроцитов и лейкоцитов. Кроме того, почка является еще и органом иммунологической защиты организма.

Сравнение гемопоэтической ткани головной почки осетровых рыб с гемопоэтической тканью представителя костистых рыб - воблы, показало, что у половозрелых рыб этих семейств в головной почке происходит формирование клеток эритро -, грануло - и агранулоцитопоэтического рядов. У всех рыб количество развивающихся лейкоцитов незначительно превосходило количество эритроцитов. Отмечены различия в процентном соотношении этих клеток внутри рядов. У воблы количество формирующихся эритробластов (34,2%) было на 8,2-9,2% выше, чем у осетровых рыб (Р<0,001). Из числа формирующихся эритроцитов у осетровых наибольший процент составляли зрелые эритроциты (от 37,0% - у севрюги до 39,0% -у стерляди), это на 14,7-16,7% больше, чем у воблы (Р<0,001). Среди клеток белой крови у осетровых количество формирующихся гранулоцитов (от 91,0% - у стерляди до 94,0% - у севрюги) в головной почке значительно превышало аналогичные показатели воблы (Р<0,001). Следовательно, среди формирующихся лейкоцитов у воблы количество гранулоцитов и агранулоцитов отличалось незначительно, у осетровых основная масса формирующихся лейкоцитов была представлена гранулоцитами.

Туловищная почка как кроветворный орган

Анализ клеток межканальцевой ткани туловищной почки показал, что среди ретикулярных клеток в ней пролиферируют и дифференцируются клетки эритропоэтического, грануло - и агранулоцитопоэтического рядов. Формирующиеся клетки крови располагались, в основном, диффузно или в виде небольших групп, в среднем, по 5,0±0,31 клеток. Было выявлено сравнительно небольшое количество гемоцитобластов, их удельный вес составлял - 1,3 %. Процент содержания клеток грануло - и агранулоцитопоэтического ряда был выше, чем клеток эритроидного, составляя - 60,7% и - 39,2% - соответственно.

От общего количества клеток эритропоэтического ряда эритробласты составляли - 27,5%. Наибольший процент из всех обнаруженных клеток этого ряда был у созревающих клеток (35,6%). Зрелые эритроциты составляли - 35,6%.

В туловищной почке исследованных рыб происходила дифференцировка всех видов лейкоцитов. Количество дифференцирующихся гранулоцитов (56,7%) несколько превышало количество агранулоцитов (43,3%). Из бластных были отмечены миелобласты (1,6%). Палочкоядерные эозинофилы были самой многочисленной группой из всех клеток гранулоцитопоэтического ряда (19,5%). Из зрелых гранулоцитов были отмечены нейтрофилы и эозинофилы, среди них превалировали сегментоядерные эозинофилы (4,1%).

Из формирующихся агранулоцитов бластные клетки составляли - 9,9 %; созревающие клетки - 13,7%, зрелые клетки - 20,2%. Среди бластных агранулоцитов, на монобласты приходилось - 0,5%, на лимфобласты - 3,7%, больше всего было отмечено плазмобластов - 4,6%. Среди созревающих клеток самой малочисленной группой клеток были промоноциты - 0,3%.

Таким образом, туловищные почки рыб являются универсальным органом кроветворения рыб. В них происходит дифференцировка, пролиферация и созревание клеток эритропоэтического, грануло- и агранулоцитопоэтического рядов.

В туловищной почке также, как и в головной у вобл и осетровых, формировались клетки тех же рядов. Процент формирующихся эритроцитов и лейкоцитов отличался незначительно. Отмечено, что у вобл среди формирующихся эритроцитов, удельный вес бластных клеток был выше - 27,5%, в отличие от осетровых (от 9,0 % - у осетра до 10,0% - у севрюги) (Р<0,001). Формирующихся клеток гранулоцитопоэтического ряда у осетровых рыб было больше на 38,3-40,3%, чем у воблы (56,7%) (Р<0,001), т.е. у осетровых рыб среди лейкоцитов значительно превалировали развивающиеся гранулоциты, у воблы разница между развивающимися клетками грануло- и агранулоцитопоэтического рядов была незначительна.

Морфофункциональные особенности селезенки

В участках белой пульпы, которая на срезе занимала 23,0%, среди ретикулярных клеток были обнаружены дифференцирующиеся клетки крови как красной, так и белой крови, причем, эти клетки распределялись хаотично, без какой-либо упорядоченности. В результате процесса кроветворения в белой пульпе формировались клетки эритропоэтического (37,4%), гранулоцитопоэтического (20,2%), агранулоцитопоэтического (41,9%) и тромбоцитопоэтического (0,5%) рядов.

Гемоцитобласты составляли 1,0%. Эритробласты составляли 10,9%. Зрелые эритроциты были самой многочисленной группой и составляли - 65,3%.

Из клеток гранулоцитопоэтического ряда были выявлены бластные, созревающие и зрелые клетки. Миелобластов было отмечено 2,3%. Среди зрелых клеток меньше всего было отмечено базофилов (1,5%). Нейтрофилы тоже были немногочисленной группой: из них на палочкоядерные приходилось - 0,8%, на сегментоядерные - 2,3%. Эозинофилы были самой многочисленной группой из всех клеток гранулоцитопоэтического ряда: удельный вес палочкоядерных эозинофилов, в среднем, составлял 6,8%, а сегментоядерных - 5,3%.

Из формирующихся агранулоцитов также были отмечены клетки всех стадий зрелости. Среди бластных агранулоцитов на монобласты приходилось - 0,8%, на лимфобласты - 11,3%, на плазмобласты - 3,0%. Среди созревающих клеток были отмечены пролимфоциты - 12,8% проплазмоциты - 3,0%. Из зрелых клеток меньше всего приходилось на моноциты - 0,8%, на втором месте по количеству были плазмоциты - 2,1%, и самой многочисленной группой клеток были лимфоциты - 33,6%.

Таким образом, в селезенке исследованных рыб происходит процесс кроветворения, в результате которого образуются клетки эритропоэтического, гранулоцитопоэтического, агранулоцитопоэтического и тромбоцитопоэтического рядов, кроме того, здесь накапливаются и разрушаются клетки крови.

Так, сравнивая полученные данные по кроветворной функции селезенки у воблы (представителя костистых рыб) с ранее полученными данными по кроветворению у осетровых (костно-хрящевыми), было установлено, что строение этого органа у исследованных рыб отличается: у осетровых строма селезенки визуально имела четкое подразделение на белую и красную пульпы, у воблы это разделение прослеживалось нечетко. У представителей обоих семейств (отрядов) в этом органе формировались все форменные элементы, в том числе и тромбоциты. У воблы превалировали клетки грануло- и агранулоцитопоэтического рядов (62,1%) (Р<0,001), у осетровых рыб - превалировали клетки эритропоэтического ряда (52,0-68,0%) (Р<0,001). Клетки тромбоцитопоэтического ряда у осетровых (2,0-6,5%) составляли больший процент, чем у вобл (0,5%) (Р<0,001). Среди лейкоцитов, у вобл превалировали клетки агранулоцитопоэтического ряда (67,4%) (Р<0,001), у осетровых - гранулоцитопоэтического (76,0-90,0%) (Р<0,001).

Следовательно, селезенка является универсальным органом кроветворения как у костистых, так и у костно-хрящевых рыб, но в селезенке костистых рыб стало заметным превалирование размножения лейкоцитов.

Морфофизиологические особенности тимуса

У исследованных видов этот орган парный, представл собой оформленный орган в виде небольшого треугольного утолщения, располагающегося поверхностно по медиальной стенке жаберной полости.

Со стороны жаберной полости орган покрыт однослойным призматическим эпителием. Ниже, расположен соединительнотканный слой, содержащий жировые клетки. Отмечено нечеткое разделение органа на темные участки или корковую зону и светлые участки или мозговую зону. Соотношение площадей этих зон составляло 1:2. Основными клетками тимуса являлись ретикулоэпителиальные клетки. В органе отмечены эпителиальные слоистые тельца Гассаля, которые, преимущественно, были выявлены в мозговом веществе органа. Количество лимфоцитов в мозговом веществе, по сравнению с корковым, было значительно меньшим. Среди них на зрелые лимфоциты приходилось 82,2%, на пролимфоциты - 10,7%, на лимфобласты - 4,6%. Здесь же изредка встречались проплазмоциты (0,5%) и плазмоциты (1%).

В корковом веществе клеток лимфоцитопоэтического ряда было обнаружено значительно больше, этим и обусловлен более темный цвет этого слоя: из них на зрелые лимфоциты приходилось - 54,7%, т.е. удельный вес этих клеток снизился на 27,5%, по сравнению с мозговым веществом (Р<0,001). Удельный вес пролимфоцитов (24,5%) и лимфобластов (7,0%) в корковом веществе был выше, чем в мозговом веществе (Р<0,001). Плазматических клеток здесь было отмечено больше, чем в мозговом веществе (Р<0,001).

У осетровых (Ложниченко О.В., 2007) и костистых рыб тимус являлся парным органом, который находился за глоткой на медиальной стороне жаберной крышки. По сведениям О.В. Ложниченко (2007), тимус осетровых рыб подразделялся на дольки, где хорошо было различимо корковое и мозговое вещество, корковое вещество по объему доминировало. В нем у осетровых происходило формирование лимфоцитов и эозинофилов, хотя доля клеток гранулоцитопоэтического ряда была незначительной (0,7-0,9%). В отличие от осетровых, тимус воблы не подразделялся на дольки, строма органа четко делилась на корковое и мозговое вещество, в соотношении 1:2. Из формирующихся клеток крови у вобл в тимусе были обнаружены только лимфоциты, что указывало на следующую закономерность: выделение лимфоидных органов из универсальных кроветворных органов происходит постепенно, первым лимфоидным органом становится тимус. Такая специализация тимуса происходит у костистых рыб.

Особенности кроветворения в пищеварительном тракте

У особей, подвергнутых анализу, в собственной пластинке слизистой оболочки кишки были отмечены различные клеточные элементы: фибробласты, лимфоциты, плазматические клетки, эозинофилы, нейтрофилы и макрофаги. Кроме того, здесь были выявлены небольшие одиночные скопления кроветворной ткани, форма этих скоплений была различной: от вытянутой до округлой. Они встречались на всем протяжении пищеварительного тракта. Нередко было отмечено, что лимфоидные скопления плотно прилегали к эпителиальному слою слизистой оболочки кишечника. По мере приближения к заднему отделу кишечной трубки количество лимфоидных скоплений увеличивалось. Клеточный состав кроветворных образований переднего, среднего и заднего отделов незначительно отличался и был представлен клетками гранулоцитопоэтического (9,6%, 11,4%, 5,0% - соответственно) и агранулоцитопоэтического (90,4; 88,6%; 95,5% - соответственно) рядов.

Во всех отделах кишечной трубки у исследованных особей, в большей степени в центре скоплений кроветворной ткани, были выявлены гемоцитобласты, хотя их было незначительное количество. Остальные формирующиеся клетки во всех отделах диффузно распределялись между активными ретикулярными клеткам. В гемопоэтических образованиях кишечника воблы были выявлены формирующиеся агранулоциты - лимфоциты, в том числе плазмоциты и гранулоциты.

Удельный вес лимфобластов от числа всех развивающихся клеток лимфоцитопоэтического ряда составлял в переднем отделе пищеварительного тракта - 10,2%, в среднем их количество было на 3,4±0,12% меньше, чем в переднем отделе (Р<0,001), и в заднем отделе этих клеток было выявлено меньше всего - 5,9% (Р<0,001). Отмечена тенденция объединения этих клеток в группы по 2-3 шт. Пролимфоциты были разбросаны диффузно. Удельный вес пролимфоцитов в переднем отделе кишечника составлял -10,0%, в среднем кишечнике их количество несколько уменьшилось, по сравнению с передним отделом, составляя - 9,6% (разница не достоверна), в заднем отделе их оказалось меньше всего - 5,8% (Р<0,001). Лимфоциты были рассредоточены почти равномерно по всему кроветворному образованию. Эти клетки были самой многочисленной группой. Их процентное соотношение в краниально-каудальном направлении несколько увеличивалось. Следует обратить внимание на то, что процесс дифференцировки унипотентных клеток предшественниц приводил к образованию плазмобластов, затем проплазмоцитов и, наконец, плазмоцитов. Эти клетки располагались диффузно по всем кроветворным образованиям. Удельный вес плазмобластов от числа развивающихся клеток был равен в переднем отделе пищеварительного тракта - 5,1%, в среднем - 6,8% (Р<0,001) и в заднем отделе их количество понизилось на 2,5%, в сравнении со средним отделом (Р<0,001). Кроме того, в кроветворных образованиях пищеварительного тракта было отмечено небольшое количество формирующихся гранулоцитов. Миелобласты встречались только в переднем отделе кишечника, составляя - 1,0%; промиелоциты - в переднем (2,3%) и среднем (0,9%) отделах (Р<0,001). Миелоциты нейтрофильные в переднем отделе пищеварительного тракта составляли - 1,1%, в среднем - 0,9% (различия не достоверны). Метамиелоциты нейтрофильные встречались во всех отделах и составляли - 2,5%; 4,1% (Р<0,001); 0,8% (Р<0,001) - соответственно.

Кроветворные образования пищеварительной системы сравниваемых представителей костистых и костно-хрящевых рыб отличались как по строению, так и по клеточному составу. У осетровых рыб гемопоэтические образования пилорической железы, среднего кишечника и спирального клапана имели различные размеры: от мелких до крупных, были заключены в плотную соединительнотканную капсулу. Наибольшие отличия по количественному составу дифференцирующихся клеток у сравниваемых рыб были выявлены в переднем отделе пищеварительного канала (Р<0,001). У обеих групп рыб в гемопоэтической ткани формировались агранулоциты и гранулоциты.

Кроветворная функция сердца

Внутри перикарда, на уровне нижнего края желудочка были обнаружены относительно небольшие кроветворные очаги, различные по форме, которые содержали сравнительно небольшое количество развивающихся клеток крови. Основу этих очагов составляли ретикулярные клетки, среди которых были диффузно расположены развивающиеся клетки крови.

В кроветворных образованиях сердца были отмечены клетки гранулоцитопоэтического, агранулоцитопоэтического и эритропоэтического рядов. Причем, клетки эритропоэтического ряда составляли 36,36%; 63,64% - приходилось на клетки грануло - и агранулоцитопоэтического рядов, из них гранулоциты составили - 45,45%, агранулоциты - 18,19%.

Из клеток эритропоэтического ряда встречались эритробласты (22,3%), проэритробласты (27,76 %), оксифильные эритроциты (21,9%) и зрелые эритроциты (28,04%), т.е. половина из них уже содержала гемоглобин. Из числа агранулоцитов были выявлены лимфоциты (12,6 %) и пролимфоциты (16,0%), клеток моноцитарного ряда не было обнаружено. Из клеток гранулоцитопоэтического здесь развивались миелобласты (10,0%), промиелоциты (18,6%), миелоциты (5,21%), метамиелоциты эозинофильные -28,5% и эозинофилы палочкоядерные - 9,09%.

При сравнении строения кроветворного образования перикарда у воблы и у осетровых рыб, были выявлены отличия. У осетровых на вентральном листке перикарда было обнаружено образование, усеянное бугорками - фолликулярными узелками овальной формы, заключенными в тонкую соединительнотканную капсулу. Внутри узелок был разделен соединительнотканными перегородками на лопасти, где ретикулярная ткань концентрировалась по периферии. У воблы, в отличие от осетровых рыб, кроветворные узелки в перикарде представляли собой небольшие скопления развивавшихся клеток крови, находившихся среди ретикулоцитов. Но у тех и у других видов рыб в перикарде образовывались клетки гранулоцитопоэтического, агранулоцитопоэтического и эритропоэтического рядов. У осетровых рыб, на примере русского осетра, формирующиеся лейкоциты составляли больший процент (85,0%), в сравнении с воблой (Р<0,001). Формирующихся эритроцитов, наоборот, больше было у воблы (Р<0,001). Среди формирующихся клеток эритропоэтического ряда, у осетровых рыб, процент бластных клеток (34,2%) был выше:, чем у воблы на 11,9% (Р<0,001). Таким образом, в кроветворной ткани расположенной в полости перикарда, формировались все форменные элементы, кроме тромбоцитов и моноцитов.

Гемопоэтические образования в жабрах

Небольшие скопления ретикулярной ткани были отмечены в области жаберных дужек, у основания жаберных лепестков. В этих кроветворных образованиях жабр были выявлены развивающиеся клетки грануло- и агранулоцитопоэтического рядов, которые располагались в ретикулярной ткани диффузно. Процентное соотношение развивающихся клеток таково: гранулоцитов - 50,9%; агранулоцитов -48,2%; всего 0,9% приходилось на гемоцитобласты. Среди формирующихся гранулоцитов бластных и зрелых клеток отмечено не было. Дифференцирующиеся клетки лимфоцитопоэтического ряда были представлены тремя классами. Среди бластных клеток были отмечены только лимфобласты (9,3%). Из созревающих клеток были отмечены пролимфоциты (18,5%) и проплазмоциты (1,9%). Из зрелых клеток были выявлены лимфоциты - 15,7%, и плазмоциты - 2,8%.

В основании филаментов жабр у представителей обоих семейств формировались грануло- и агранулоциты, причем, у представителя осетровых рыб - белуги, преобладали развивающиеся клетки лимфоцитопоэтического ряда (72,0%) (Р<0,001). У воблы клеток агрануло - и гранулоцитарных рядов было примерно одинаковое количество. Следовательно, в гемопоэтической ткани жабр происходило формирование только лейкоцитов.

Кроветворение в полостях черепных костей

В висцеральном отделе черепа исследованных видов рыб, а именно в полостях челюстных костей, были обнаружены скопления кроветворной ткани. Следует подчеркнуть, что так называемый «красный костный мозг» появляется у костистых рыб, сразу становясь универсальным органом кроветворения. Дифференцирующиеся клетки крови в костных полостях образовывали гемопоэтические тяжи. В них находились клетки крови различной степени формирования и зрелости. В этих образованиях происходили процессы эритроцитопоэза, гранулоцитопоэза, лимфоцитопоэза, моноцитопоэза, тромбоцитопоэза. В ретикулярной ткани среди развивающихся клеток были отмечены жировые клетки, которые отличались большими размерами.

Среди формирующихся клеток крови были отмечены гемоцитобласты. От числа всех формирующихся клеток гемоцитобласты составляли - 1,9%, на клетки эритропоэтического ряда приходилось 21,3%, на клетки лимфоцитопоэтического ряда - 49,5%, на гранулоциты - 27,7%, на тромбоциты -1,5%, причем, агранулоциты среди лейкоцитов превалировали. Из развивающихся клеток эритропоэтичесого ряда были выявлены эритробласты - 17,1%, проэритробласты - 10,0%, базофильные эритробласты - 8,1%, полихрамотофильные эритробласты - 11,9%, оксифильные эритробласты - 10,8%. На зрелые эритроциты, в среднем, приходилось - 40,2±0,32%.

Среди формирующихся агранулоцитов были выявлены развивающиеся лимфоциты, в том числе плазмоциты. От числа клеток лимфоцитопоэтического ряда были выявлены: лимфобласты - 18,9%, пролимфоциты - 13,5%, лимфоциты - 19,6%. Плазмобласты составляли 5,4%, проплазмоциты и плазмоциты - по 2,7%. Выявленные монобласты и промоноциты составляли по 0,5%, и 1,0% приходилось на зрелые моноциты.

Клетки гранулоцитопоэтического ряда были представлены миелобластами, которые, в среднем, составляли - 8,2±0,13%, промиелоциты - 5,4%, миелоциты эозинофильные - 13,5%, метамиелоциты эозинофильные - 2,7%, палочкоядерные эозинофилы - 5,4%.

Удельный вес мегакариоцитов составил 1,5% от числа всех формирующихся клеток крови гемопоэтических тяжей.

В результате исследований черепа вобл, было выявлено, что в полостях их костей находились гемопоэтические очаги, где также формировались все форменные элементы крови.

При исследовании кроветворения у осетровых Н. Т. Иванова (1970), О.В. Ложниченко (2007) обратили внимание на кроветворную ткань, находящуюся в краниальном хряще рыб. Авторы утверждали, что в краниальном органе осетровых формировались все типы форменных элементов крови. О.В. Ложниченко (2007) отметила, что с небольшим перевесом у осетровых рыб в краниальном органе доминировали развивающиеся эритроциты, у воблы в полостях черепных костей развивающиеся клетки эритропоэтического ряда по количеству, были на втором месте, а доминировали клетки агранулоцитопоэтического ряда (64,8%). В отличие от осетровых рыб у вобл из развивающихся гранулоцитов были отмечены только эозинофильные клетки.

Сопоставляя результаты по количеству образующихся клеток крови разных рядов в органах гемопоэза исследованных рыб, была выявлена взаимосвязь между количественными показателями - процентным соотношениям клеток эритропоэтического и лейкопоэтического рядов (рис.1).

Рис.1. Зависимость между относительным количеством развивающихся клеток разных рядов у воблы (-0.55x + 16.84, r = 0.51)

У всех исследованных рыб был отмечен достаточно высокий коэффициент корреляции (r от 0.51 - у воблы до 0,84 - у стерляди).

Состояние периферической крови

Следует отметить следующее, что у рыб дифференцировка клеточных элементов происходит как итраваскулярно, так и экстраваскулярно. Так в периферической крови рыб происходит формирование клеток эритропоэтического, агрануло- и гранулоцитопоэтического рядов.

В мазках крови костистых рыб были обнаружены эритробласты (1,83 %), проэритробласты (2,0%), базофильные эритробласты (1,0%), полихроматофильные эритробласты (0,5%), оксифильные эритробласты (6,0%). Самой многочисленной группой клеток эритроидного ряда были зрелые эритроциты (53,7%).

У костистых и костно-хрящевых рыб в периферической крови наряду с дефинитивными эритроцитами были выявлены бластные и созревающие клетки. Эритробластов у вобл (1,83%) было отмечено несколько больше (0,34-1,02%),чем у осетровых рыб (Р<0,001).

У половозрелых особей воблы наблюдались следующие категории лейкоцитов - это гранулоциты: нейтрофилы и эозинофилы с различными степенями зрелости, агранулоциты - лимфоциты и моноциты. Следует подчеркнуть, что были обнаружены миелобласты - родоначальные клетки разных видов миелоидных форм (1,35%). Единичными также были созревающие клетки гранулоцитопоэтического ряда. Среди них отмечены промиелоциты (2,0%). Из зрелых клеток гранулоцитопоэтического ряда были выявлены эозинофильные (0,33%) и нейтрофильные гранулоциты (0,66%). Из лейкоцитов самыми многочисленными были лимфоциты. Среди них были выявлены лимфобласты (5,0%), пролимфоциты (11,0%) и лимфоциты (69,33%). Процент моноцитов в лейкограмме у рыб составлял 10,33 %.

Проведенные исследования показали, что многие дефинитивные эритроциты костистых рыб имели патологические изменения, такие как олигохромазия (12,8%), пойкилоцитоз (19,0%), анизоцитоз (3,17%), агглютинация (26,93 %). Кроме того, у некоторых рыб была отмечена вакуолизация цитоплазмы эритроцитов, амитоз их ядер в единичных случаях.

У сравниваемых семейств рыб были отмечены аналогичные патологические изменения зрелых эритроцитов, но у вобл, подвергнутых анализу, процент клеток подвернутых этим процессам был выше. Было отмечено, что удельный вес гранулоцитов у осетровых рыб был выше (от 25,09% - у стерляди до 47,75% -у белуги), чем у вобл (4,34%), а агранулоцитов - наоборот (Р<0,001).

2.2 Клеточный состав органов кроветворения хрящевых рыб

(на примере ската)

Исследование межканальцевой ткани мезонефроса исследованных особей ската, показало, что гемопоэтическая ткань в этом органе концентрировалась в виде редких, небольших по размеру, островков. Дифференцирующиеся клетки этого органа были представлены эритроцитами, агранулоцитами и гранулоцитами. Превалировали клетки агранулоцитопоэтического ряда (77,0%), второе место, по количеству, занимали формирующиеся эритроциты (20,0%).

Процентное соотношение формирующихся клеток в туловищной почке хрящевых и костно-хрящевых рыб резко отличалось. Удельный вес формирующихся эритроцитов у представителей костно-хрящевых на 11,0% (у осетра) - 21,0% (у севрюги) был выше, чем у представителей хрящевых рыб (Р<0,001). У ската среди формирующихся эритроцитов, удельный вес бластных клеток был выше (37,5%), в отличие от осетровых (от 9,0 % - у осетра до 10,0% - у севрюги) (Р<0,001). Основной процент формирующихся клеток белой крови у ската приходился на агранулоциты, в то время как у осетровых рыб превалировали гранулоциты (Р<0,001).

Площадь, занимая белой пульпой селезенки исследованных хрящевых рыб на срезе, составляла 31,0%, здесь среди элементов ретикулярной ткани формировались клетки всех рядов. Основной процент формирующихся клеток приходился на агранулоциты - 58,0%, 34,0% - составляли эритроциты, 7,0% - гранулоциты, и меньше всего было выявлено клеток тромбоцитопоэтического ряда - 1,0%.

При сравнении ткани селезенки хрящевых и костно-хрящевых рыб отмечено снижение площади белой пульпы у изученных представителей костно-хрящевых на 1-3%. У представителей сравниваемых рыб в селезенке формировались форменные элементы крови всех рядов. У ската превалировали клетки агранулоцитопоэтического ряда (58,0%) (Р<0,001), у осетровых рыб - клетки эритропоэтического ряда (52,0% - у белуги, 68,0% - у осетра и стерляди) (Р<0,001). Клетки тромбоцитопоэтического ряда у осетровых (2,0% - у стерляди, 6,0% - у белуги и севрюги) составляли больший процент, чем у ската (1,0%) (Р<0,01; Р<0,01).

В полости перикарда у исследованных хрящевых рыб были обнаружены скопления гемопоэтических клеток, в виде узелков, которые в большей степени концентрировались у кровеносных сосудов. Были выявлены формирующиеся клетки эритропоэтического (16,2%), гранулоцитопоэтического (14,7%) и агранулоцитопоэтического (69,1%) рядов.

У представителей хрящевых и костно-хрящевых рыб в перикарде образовывались клетки тех же рядов. Среди формирующихся клеток всех рядов, у осетра, процент бластных клеток был ниже, чем у ската (Р<0,001). У ската зрелых клеток эритропоэтического и гранулоцитопоэтического рядов в гемопоэтической ткани перикарда не выявлено, в отличие от осетра. У ската созревающих клеток лимфоцитопоэтического ряда было меньше на 21,5% (Р<0,001). Зрелых лимфоцитов наоборот больше было выявлено в перикардиальных гемопоэтических образованиях у ската (Р<0,001).

Исследование гемопоэтической ткани ассоциированной со слизистой оболочкой пищеварительного тракта показало, что здесь у этих рыб происходил лимфомиелопоэз, причем, преобладали развивающиеся клетки лимфоцитопоэтического ряда. У обеих групп рыб в гемопоэтической ткани формировались из агранулоцитов - лимфоциты и гранулоциты, с преобладанием лимфоцитов.

В среднем отделе кишечника удельный вес формирующихся агранулоцитов у ската составлял 94,7%, у осетровых рыб от 87,0% - у стерляди (Р<0,001), до 97,0% - у севрюги (различия не достоверны). В клоаке ската эти клетки составляли 94,0%, у осетровых в спиральном клапане от 96,0% - у осетра (различия не достоверны) до 97,0% - у белуги (Р<0,05). Отмечено, что у исследованных скатов в клоаке были отмечены развивающиеся нейтрофилы и эозинофилы, у осетровых - только эозинофилы

2.3 Клеточный состав органов кроветворения земноводных

(на примере половозрелых особей озерной лягушки)

Костный мозг земноводных

Костный мозг у исследованных особей лягушек располагался внутри костно-мозговых полостей трубчатых костей конечностей. Строма органа представленная ретикулярными клетками, адипоцитами и макрофагами, была пронизана многочисленными сосудами. На срезе основная масса костного мозга состояла из жировых клеток (60%). Между этими компонентами располагались гемопоэтические клетки, которые концентрировались, в основном, по периферии кроветворных образований. Были отмечены пигментные клетки, которые также максимально концентрировались по периферии. Кроветворные элементы были представлены клетками эритропоэтического (53,9%), гранулоцитопоэтического (35,5%), лимфоцитопоэтичесого (6,9%), моноцитопоэтического (2,8%) и тромбоцитопоэтического (0,9%) рядов.

Дифференцирующиеся клетки располагались группами, что особенно характерно для формирующихся эритроцитов: формирующиеся клетки эритропоэтического ряда группировались в эритропоэтические островки: количество эритроидных клеток в этих островках колебалось от 10 до 20 шт.(15,0±1,0), причем, здесь были отмечены, практически, клетки всех стадий зрелости. Удельный вес эритробластов, от числа развивающихся клеток эритропоэтического ряда, составлял 7,2%. Из созревающих клеток проэритробласты были самой многочисленной группой (41,55%). Были выявлены немногочисленные гемоцитобласты, средний удельный вес которых был равен 1,7±0,11%.

Среди развивающихся лейкоцитов самыми многочисленными были клетки гранулоцитопоэтического ряда, которые составляли 79,3% от числа всех формировавшихся лейкоцитов, 15,5% приходилось на клетки лимфоцитопоэтического ряда, 5,2% - на клетки моноцитопоэтического. Из гранулоцитов здесь были выявлены дифференцирующиеся эозинофилы и нейтрофилы. Эти клетки располагались как группами, так и хаотично. Миелобластов в этих островках было обнаружено, в среднем - 10,3±0,15%. Созревающих нейтрофилов было отмечено несколько больше (44,4%), чем эозинофилов (21,6%). Из формирующихся клеток лимфоцитопоэтического ряда также были отмечены и бластные, и созревающие, и зрелые клетки. На лимфобласты приходилось - 3,1%, и на плазмобласты - 4,1%. Среди созревающих клеток были отмечены пролимфоциты - 2,1%, проплазмоциты - 1,0%. Из зрелых клеток на лимфоциты приходилось - 4,9%, на плазмоциты - 0,3%.

Среди формирующихся клеток самой малочисленной группой были клетки моноцитопоэтического ряда. Были отмечены монобласты - 3,1% и моноциты - 2,0%.