Гельминтозоонозы: эхинококкоз и дирофиляриоз (биоморфологические особенности возбудителей, совершенствование мер борьбы)

4

ГЕЛЬМИНТОЗООНОЗЫ: ЭХИНОКОККОЗ И ДИРОФИЛЯРИОЗ

(биоморфологические особенности возбудителей, совершенствование мер борьбы)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. В начале XXI века паразитарные болезни продолжают наносить значительный ущерб человечеству. Это касается не только негативного воздействия на здоровье людей и животных, но и является следствием больших экономических потерь, связанных с сокращением валового национального продукта и затратами общества на лечение и ликвидацию последствий массового распространения инвазионных болезней. Значительную эпидемическую опасность для жителей как городской, так и сельской местности представляют собаки, поскольку они являются хозяевами ряда гельминтов, опасных для человека. Эта опасность многократно возрастает из-за большого числа неконтролируемых бродячих животных. Так, число зарегистрированных больных токсокарозом в России за последние 15 лет увеличилось более чем в 100 раз. Произошел трехкратный рост заболеваемости эхинококкозами, причем 14,4% среди больных составляют дети (СергиевВ.П., Филатов Н.Н., 2006). Отмечено резкое увеличение распространенности и риска заражения дирофиляриозом - единственным в умеренном климате гельминтозом с трансмиссивным путем передачи через комаров. В последние годы, как в России, так и в странах Западной Европы дирофиляриоз продвигается на север. Случаи дирофиляриоза человека зарегистрированы в 39 субъектах Российской Федерации, расположенных в пределах 41є - 58є с.ш. Основная масса больных - 518 чел. (90,9%) зарегистрирована в Европейской части России, в том числе, в зоне устойчивого риска - 386, в зоне низкого риска - 96 и в зоне умеренного риска - 36 случаев (Дарченкова Н.Н. и др., 2009).

Отмечая факторы, влияющие на эпидемические и эпизоотические процессы при паразитозах, необходимо сослаться на Б.Л. Черкасского (2008), который полагал, что эпидемический процесс при инфекционных и инвазионных болезнях в современных условиях характеризуется качественным своеобразием. Наиболее значимы в этом своеобразии следующие факторы: искусственно изменяемая эволюция возбудителей под воздействием химических, физических и биологических факторов научно-технического развития; снижение естественной сопротивляемости людей и животных возбудителям разных болезней под воздействием различных химических соединений, физических факторов, лекарственных препаратов, нервно-эмоцианального напряжения и т.п.; смена или активизация механизмов передачи возбудителей болезни в результате меняющихся условий жизни.

Цель и задачи исследований. Целью нашей работы было охарактеризовать штаммы Echinococcus granulosus по их биологическим и морфологическим свойствам и эпизоотологическим особенностям, разработать и испытать новые лекарственные формы препаратов при цестодозах и смешанных гельминтозах собак, изучить эпизоотическую ситуацию по дирофиляриозу собак в Московском регионе, усовершенствовать прижизненную диагностику и испытать новые средства и схемы терапии и профилактики инвазии.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

· Изучить особенности распространения ларвального эхинококкоза сельскохозяйственных животных с выявлением активно функционирующих циклов паразита в разных регионах СНГ.

· Уточнить сроки развития разных штаммов E. granulosus до имагинальной стадии в организме собак.

· Выявить восприимчивость лабораторных мышей к заражению E. granulosus от разных хозяев.

· Сравнить морфологические признаки штаммов (личинок и взрослых цестод) E. granulosus.

· Провести испытания по разработке и оценке эффективности в экспериментальных и производственных условиях новых цестодоцидных и комбинированных форм препаратов для терапии и профилактики цестодозов и смешанных гельминтозов собак.

· Изучить распространение, сезонную и возрастную динамику дирофиляриоза собак в Московском регионе.

· Разработать новый метод обнаружения микрофилярий в крови собак и провести сравнительное изучение его эффективности.

· Установить сроки жизнеспособности микрофилярий в крови собак при хранении.

· Установить клинические проявления дирофиляриоза собак, выявить влияние вида возбудителя и степени инвазии на гематологические показатели животных.

· Разработать оптимальные схемы терапии и профилактики дирофиляриоза собак.

Научная новизна. Впервые выявлены активно функционирующие циклы E. granulosus в разных регионах СНГ. Установлены различия свиного, бычьего, овечьего и верблюжьего штаммов E. granulosus по срокам развития у дефинитивного хозяина (собаки), особенностям развития вторичных ларвоцист у лабораторных мышей, морфологии личинок и взрослых форм паразита.

Усовершенствована и испытана в экспериментальных и производственных условиях лекарственная форма празиквантела с полимерами. Оптимальное соотношение названных компонентов позволило значительно (до 6 месяцев) продлить профилактическое действие празиквантела против цестод, и снизить кратность обработки собак до 2 раз в год. Разработана лекарственная форма и изучены в экспериментальных и производственных условиях цестодоцидные свойства ресинтезированного препарата бунамидина гидрохлорида. Разработана комбинированная лекарственная форма на основе азинокса и нилверма - азинил, изучены ее фармакотоксикологические и терапевтические свойства при смешанных гельминтозах собак.

Впервые в Московском регионе выявлено распространение дирофиляриоза собак. Установлены два вида дирофилярий: D. immitis и D. repens. Выяснено влияние пола, породы и условий содержания собак на зараженность дирофиляриями. Разработан и испытан в производственных условиях метод прижизненной диагностики дирофиляриоза собак. Установлены сроки жизнеспособности микрофилярий в пробах крови собак при хранении. Выявлено влияние дирофилярий на организм собак в зависимости от вида возбудителя и степени инвазии. Впервые в России изучено макрофилярицидное действие препаратов меларсомина и абиктина. Разработана и испытана в производственных условиях наиболее рациональная схема профилактики дирофиляриоза собак в условиях Центрального региона России.

Практическая ценность и внедрение результатов исследований. Материалы исследований, выполненные автором самостоятельно, а также совместно с другими учеными и специалистами были использованы при подготовке следующих нормативных документов:

1. Рекомендации по борьбе с имагинальным и ларвальным эхинококкозом сельскохозяйственных животных. Утверждены Главным управлением ветеринарии с Государственной ветеринарной инспекцией 31.10.90 г. №043-4.

2. Таблетки гидробунида. Технические условия ТУ 10.07.117-91. Утверждены ГУВ при Госкомиссии Совмина СССР по продовольствию и закупкам 16.04.91 г.

3. Временное наставление по применению таблеток гидробунида при цестодозах собак. Утверждено ГУВ ГК Совмина СССР по продовольствию и закупкам №043-5 от 16.04.91 г.

4. Временное наставление по применению азинпрола при цестодозах собак. Утверждено ГУВ ГК Совмина СССР по продовольствию и закупкам №044-3 от 24.01.91 г.

5. Фенапэг. Технические условия ТУ 9310-029-00008064-96. Утверждены Департаментом ветеринарии МСХ РФ 14.05.96 г.

6. Наставление по применению фенапэга при цестодозах собак. Утверждено Департаментом ветеринарии МСХ РФ 14.05.96 г. №13-4-2/605.

7. СанПиН 3.2.569-96 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», Москва. Минздрав России, 1997. - 166 с. (Утверждены 31.10.96 г.)

8. Азинил. Технические условия на опытную партию ТУ ОП 93-84-00008064-97. Утверждены Департаментом ветеринарии МСХ РФ 18.11.97 г.

9. Временное наставление по применению азинила при гельминтозах собак и кошек. Утверждено Департаментом ветеринарии МСХ РФ 18.11.97 г. №13-4-2/1085.

10. Инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации заболеваний животных гельминтозами. - М.: Информагротех. МСХиП РФ, 1999. - 72 с.

11. Методические указания по лабораторной диагностике цистного эхинококкоза и гидатидоза животных. Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии 27.09.2001 г.

12. Методические указания МУ 3.2.1756-03. «Эпидемиологический надзор за паразитарными болезнями», Москва. Минздрав России, 2003. - 84 с. (Утверждены 28.03.2003 г.)

13. СанПиН 3.2.1333-03 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», Москва, Минздрав России, 2003. - 68 с. (Утверждены 28.05. 2003 г.)

14. Рекомендации по профилактике дирофиляриоза собак. Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии 23.05.2003 г.

15. Методические рекомендации по лабораторной диагностике цистного (Echinococcus granulosus) и альвеолярного (Echinococcus multilocularis) эхинококкозов и гидатидозов животных. Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии 28.05.2004 г.

16. Методические указания МУ 1880-04 «Профилактика дирофиляриоза», Москва, Минздрав России, 2004. - 29 с. (Утверждены 03.03.2004 г.)

17. Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике дирофиляриоза собак в Московском регионе. Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» отделения ветеринарной медицины РАСХН 29.05.2008 г.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены на Ученых советах и отчетных научных конференциях ВИГИС (1987-2009); пятой Закавказской конференции по паразитологии (Ереван, 1987); пятой национальной конференции по паразитологии (Варна, 1987); 12_й, 15_й международных конференциях «Всемирной ассоциации за прогресс ветеринарной паразитологии» (Монреаль, 1987, Иокогама, 1995); научных конференциях ВОГ «Гельминтология сегодня: проблемы и перспективы» (Москва, 1989), «Эколого-биологические и фаунистические аспекты гельминтозов» (Ереван, 1991), «Гельминтозоонозы - меры борьбы и профилактика» (Москва, 1994), «Актуальные вопросы теоретической и прикладной трематодологии и цестодологии» (Москва, 1997), «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» (Москва, 1999, 2002-2005, 2007-2009); Всесоюзных научно-практических конференциях «Современное состояние и перспективы оздоровления хозяйств от эхинококкоза и цистицеркоза» (Фрунзе, 1987, Чимкент, 1989, Караганда, 1990, Москва, 1993); седьмом Международном конгрессе паразитологов (Париж, 1990); научно-практическом совещании «Паразитарное загрязнение мегаполиса Москвы» (Москва, 1994); четвертой Международной научной конференции, посвященной 125_летию со дня рождения академика К.И. Скрябина и 70_летию кафедры медицинской биологии и общей генетики Витебского государственного медицинского университета «Современные проблемы общей, медицинской и ветеринарной паразитологии» (Витебск, 2004); межрегиональной научной конференции Российской Федерации служебного собаководства (Москва, 2004); 6 - 8, 12, 15 Международных конгрессах по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных (Москва, 1998-2000, 2004, 2007).

Личный вклад соискателя. Представленная диссертационная работа является результатом 23_летних научных исследований автора. Основная часть работы выполнялась под руководством академика РАСХН Бессонова А.С. Все исследования по биоморфологической характеристике штаммов Echinococcus granulosus и дирофиляриозу собак выполнены соискателем лично, часть раздела по разработке и испытанию новых лекарственных форм препаратов при цестодозах собак выполнена совместно с кандидатом ветеринарных наук Белоусовым М.Н., не возражающим в использовании результатов совместных исследований.

Основные положения, выносимые на защиту.

· Биоморфологические особенности штаммов Echinococcus granulosus.

· Разработка и испытание цестодоцидных лекарственных форм для терапии и профилактики цестодозов собак.

· Разработка и испытание комбинированных лекарственных форм препаратов при смешанных гельминтозах собак.

· Эпизоотология дирофиляриоза собак в Московском регионе.

· Прижизненная диагностика дирофиляриоза и влияние инвазии на организм собак в зависимости от вида возбудителя.

· Оптимальные схемы терапии и профилактики дирофиляриоза собак.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 77 научных работ, в том числе 18 работ в изданиях, рекомендованных ВАК РФ для докторских диссертаций, в которых изложены основные положения и выводы по изучаемым вопросам.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 244 страницах компьютерного текста, включает 30 таблиц, 15 рисунков, состоит из введения, 3 глав собственных исследований, выводов и практических предложений. Каждая глава включает обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований, обсуждение и заключение. Список литературы включает 536 источников, в том числе 256 отечественных и 280 зарубежных авторов.

Собственные исследования

Материалы и методы

Эпизоотологические особенности штаммов E. granulosus изучали методом выявления активно функционирующих циклов (АФЦ) эхинококка.

Сущность метода. В исследуемом регионе выявляли активно функционирующие циклы (АФЦ) эхинококка (цепь: окончательный хозяин - промежуточный хозяин), характеризующиеся ярко выраженной хозяинной специфичностью паразита, высокой экстенсивностью инвазии у промежуточного хозяина (50% и более) и высоким уровнем фертильности ларвоцист (40-50% и более от общего количества зараженных животных), что обеспечивает непрерывное активное функционирование паразитарной системы.

Порядок исследования животных на цистный гидатидоз. В период массового убоя скота на мясокомбинатах Российской Федерации, Белоруссии, Молдавии, Казахстана и Узбекистана в 1987-1991 гг. провели исследование на цистный гидатидоз 15887 голов крупного рогатого скота, 16129 овец, 11170 свиней, 369 верблюдов и 4288 лошадей. Осмотр внутренних органов и туш убойных животных проводили на точках ветсанэкспертизы поточных линий на мясокомбинатах и применяли методы, регламентированные «Правилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов» (1983). Возраст животных определяли по гуртовым ведомостям, актам выбраковки животных и, в случае необходимости, по зубам (Чернявский М.В., 1977).

Экстенсивность инвазии учитывали по отношению зараженных животных к общему числу обследованных в процентах. Учитывали также локализацию и физиологическое состояние ларвоцист. Фертильность цисты, т.е. наличие в ней протосколексов определяли по Echeguia A.A. (1971).

Биологические особенности штаммов изучали по срокам преимагинального развития E. granulosus у собак и восприимчивости беспородных белых мышей к внутрибрюшинному заражению протосколексами от разных хозяев. Для заражения собак и мышей использовали протосколексы из ларвоцист печени овец из Казахстана, крупного рогатого скота из Молдавии, свиней из Белоруссии и верблюдов из Узбекистана.

Опыт по срокам преимагинального развития штаммов E. granulosus провели в марте-мае 1988 года на 22 беспородных собаках в возрасте до 1 года на базе экспериментального хозяйства ВИГИС «Курилово». Животных содержали на огороженной площадке с бетонированным покрытием в индивидуальных металлических клетках с поддонами. Кормили согласно нормам сырым мясом (калтыки), поили водой из артезианской скважины. Уход осуществляли с соблюдением мер личной профилактики (WHO, 1981). За 14 суток до заражения собак дегельминтизировали дронталом с последующим трехкратным гельминтоовоскопическим исследованием методом Щербовича и последовательного промывания. В опыте использовали собак, свободных от гельминтов.

Перед заражением собак оценивали жизнеспособность протосколексов по окрашиванию 0,01%-ным водным раствором генцианвиолета. Погибшие протосколексы приобретали синюю окраску, а живые не окрашивались и при подогреве до 37є С активно двигались (Патуне Ю.Ю., 1958). Каждой собаке скормили индивидуально с молоком по 25000±1100 жизнеспособных протосколексов. В течение опыта наблюдали за общим состоянием собак. Начиная с 30_го дня после заражения, ежедневно фекалии собак исследовали методами последовательного промывания и Щербовича до обнаружения в них яиц или члеников паразита.

Для определения приживаемости протосколексов на 75_й день после заражения всех собак усыпили, предварительно выдержав сутки на голодной диете, и тонкий кишечник подвергли полному гельминтологическому вскрытию. Кишечник разделили на 5-6 равных отрезков, каждый из которых разрезали продольно, поместили в стеклянный цилиндр емкостью 1 л и исследовали отдельно путем промывания теплой водой. Цестоды постепенно отходили от слизистой и оседали на дне цилиндра. Для полного извлечения гельминтов слизистую оболочку кишечника тщательно соскабливали шпателем. Соскоб несколько раз промывали, надосадочную жидкость после просветления осторожно удаляли, а осадок порциями просматривали в чашках Петри под микроскопом (МБС_1 х16) и подсчитывали число паразитов. Приживаемость паразитов определяли в процентах по отношению числа обнаруженных гельминтов в кишечнике собак к дозе заражения.

Опыт по восприимчивости лабораторных мышей к внутрибрюшинному заражению протосколексами E. granulosus от разных хозяев провели в 1988-1989 гг. на базе вивария ВИГИС. Фертильные ларвоцисты получали от спонтанно инвазированных E. granulosus овец из Казахстана, свиней из Белоруссии, крупного рогатого скота из Молдавии и верблюдов из Узбекистана. Цисты, выделенные из печени животных, промывали проточной холодной водой в течение 10 мин. Для стерилизации ларвоцист последние помещали на 10-15 мин. в 0,5%-ный раствор перманганата калия, затем наружную стенку цисты обрабатывали 1%-ным спиртовым раствором йода. Стерильным шприцем отсасывали эхинококковую жидкость. С помощью ножниц и пинцета рассекали оболочку цисты и, придерживая ее пинцетом, стерильной пипеткой, введенной в образовавшуюся полость, соскабливали и собирали выводковые капсулы с протосколексами. Жидкость с протосколексами отстаивали в течение 10-15 мин. при комнатной температуре, затем осторожно сливали, а осадок из протосколексов 5-6 раз промывали в стерильном растворе Хэнкса с антибиотиками (2000 ЕД/мл бензпенициллина натриевой соли и 1 мг/мл стрептомицина сульфата). Жизнеспособность и инвазионность протосколексов определяли по их двигательной активности при нагревании до 39єС и наличию пламеневидных (протонефридиальных) клеток (Smyth J.D., Barrett N.J., 1980). Для заражения использовали 300 самцов аутбредных белых мышей массой 14 - 16 г., разделенных на 4 подопытные и 1 контрольную группы по 60 животных в каждой. Всем подопытным животным ввели внутрибрюшинно по 1000±105 жизнеспособных протосколексов в 0,2 - 0,5 мл стерильного раствора Хэнкса с антибиотиками. Мышам первой группы ввели протосколексы из ларвоцист E. granulosus от овцы, второй - верблюда, третьей - свиньи, четвертой - крупного рогатого скота. Контрольным мышам ввели только стерильный раствор Хэнкса, в том же объеме, что и подопытным животным. Вскрытие мышей проводили через 6, 12 и 15 месяцев после введения протосколексов равными частями (по 20 животных). Учитывали количество развившихся ларвоцист, определяли их размеры, локализацию, физиологическое состояние, фертильность.

Морфологию протосколексов и взрослых цестод E. granulosus изучали по нескольким критериям (число и размеры хоботковых крючьев, общая длина стробилы и количество члеников).

Для исследования отбирали фертильные ларвоцисты размером 3 - 6 см в диаметре из печени спонтанно инвазированных овец, свиней, крупного рогатого скота и верблюдов из разных регионов. Жизнеспособные протосколексы фиксировали в 2,5%-ном глутаровом альдегиде на фосфатном буфере (рН 7,4). Перед измерением протосколексы просветляли не менее 2 часов в 40%-ной молочной кислоте под покровным стеклом с грузом, добиваясь расположения крючьев в одной плоскости. Подсчет общего количества и размеры крючьев проводили под микроскопом при увеличении 350 - 700, пользуясь калибровочным окулярным микрометром. Исследовали ларвоцисты не менее чем от 5 хозяев каждого вида, а из каждой ларвоцисты не менее 50 протосколексов. От взрослых цестод исследовали обычно 20 - 40 сколексов. Изучали число, форму и расположение крючьев на хоботке, измеряя длину 2 больших и 2 малых крючьев в каждом сколексе.

Взрослых (35_дневных) цестод для исследования получали в результате экспериментального заражения собак протосколексами из ларвоцист E. granulosus от разных промежуточных хозяев. После вскрытия кишечника собак цестоды промывали в физиологическом растворе и фиксировали в охлажденном до 4є С 2,5%-ном растворе глутарового альдегида на фосфатном буфере. Фиксировали только живых гельминтов с расслабленными сокращениями мускулатуры. При такой фиксации длительное время сохранялись крючья цестод. Измерения длины хоботковых крючьев проводили по G.K. Sweatmen, R.J. Williams (1963).

Статистическую обработку результатов исследований проводили по В.Ю. Урбаху (1963) и Н.А. Плохинскому (1978).

Результаты исследований

Эпизоотологические особенности штаммов E. granulosus

Цистный гидатидоз овец. При обследовании овец максимальную зараженность эхинококками выявили у животных старше двух лет с фертильностью ларвоцист 72,8 - 83,1%. У овец в возрасте до двух лет фертильных ларвоцист не обнаружили, а зараженность их была значительно ниже. Отмечена преимущественная локализация ларвоцист в легких и печени одновременно (83,3 - 87,9% случаев). По отдельным регионам максимальная зараженность овец зарегистрирована в Молдавии - 63,6% с фертильностью ларвоцист 83,1%, затем в Узбекистане и Казахстане - зараженность 31,6% и 29,9%, а фертильность ларвоцист 72,8% и 74,2% соответственно. В Белоруссии и Бурятии цистный гидатидоз овец не выявлен. Таким образом, овцы включены в АФЦ E. granulosus во всех обследованных нами регионах, кроме Белоруссии и Бурятии.

Цистный гидатидоз свиней. При обследовании свиней высокую зараженность у животных старше года выявили в неспециализированных хозяйствах Молдавии и Белоруссии, которая составила 14,3% и 10,2%

соответственно с фертильностью ларвоцист от 71,4% до 100%. Фертильные ларвоцисты обнаруживали и у свиней в возрасте до 1 года, причем в хозяйствах Белоруссии до 62,5%. Зараженность свиней в специализированных хозяйствах (комплексах) была незначительной. Отмечена преимущественная локализация ларвоцист в печени свиней (84,6 - 100%). В подсобных хозяйствах Казахстана, Узбекистана и неспециализированных хозяйствах Бурятии цистный гидатидоз у свиней не выявлен. Таким образом, свиньи включены в АФЦ E. granulosus в Молдавии и Белоруссии.

Цистный гидатидоз крупного рогатого скота. Высокую зараженность выявили у животных старше трех лет из Молдавии, Казахстана и Узбекистана (38,7% - 39,8%). Фертильность ларвоцист у взрослых животных составила от 1,7 до 9,1%, у молодняка до трех лет фертильных ларвоцист не обнаружили. Отмечена преимущественная локализация ларвоцист в легких (67,9% - 85,9%). В Белоруссии и Бурятии цистный гидатидоз у крупного рогатого скота не выявили. Таким образом, крупный рогатый скот включен в СФЦ E. granulosus в Молдавии и Казахстане.

Цистный гидатидоз верблюдов. При обследовании верблюдов в возрасте от 2 до 24 лет в Узбекистане и Казахстане выявили их зараженность 35,8% и 27,0% соответственно; фертильность ларвоцист составила 60,6% и 73,9%. Преимущественной локализации ларвоцист в каком-либо органе не наблюдали, печень и легкие были поражены примерно одинаково. Необходимо отметить очень крупные размеры ларвоцист (до 20 см в диаметре) с большим числом жизнеспособных протосколексов. Таким образом, верблюды включены в АФЦ E. granulosus в Узбекистане и Казахстане.

Цистный гидатидоз лошадей. При обследовании 4288 лошадей в возрасте от 3 до 30 лет из разных регионов (Казахстан, Узбекистан, Молдавия, Дагестан, Бурятия) цистный гидатидоз не обнаружили. Таким образом, в обследованных регионах лошади не включены в АФЦ E. granulosus, а лошадиный штамм не выявлен.

Биологические особенности штаммов E. granulosus

Сроки преимагинального развития E. granulosus у собак

Результаты исследований показали, что сроки преимагинального развития E. granulosus у собак зависят от штамма паразита (табл. 1). Минимальными эти сроки были у паразита верблюжьего штамма - 35 - 42 дня (в среднем 37,8±1,3), а максимальными - у свиного штамма - 54 - 68 дней (в среднем 58,8±2,3). Развитие цестод овечьего и бычьего штаммов завершилось примерно в одни и те же сроки: 42 - 57 дней (в среднем 48,3±2,4) и 45 - 56 дней (в среднем 50,2±2,1) соответственно. Различия в сроках у свиного, верблюжьего и овечьего штаммов оказались статистически

достоверными (Р < 0,05), не выявлено достоверной разницы по срокам развития между бычьим и овечьим штаммами. Наиболее высокой приживаемостью отличались протосколексы верблюжьего штамма (19,4%), а наименьшей - свиного (8,4%).

Восприимчивость лабораторных мышей к внутрибрюшинному заражению протосколексами E. granulosus от разных хозяев

Приживаемость протосколексов штаммов E. granulosus оказалась неодинаковой, о чем свидетельствует трехкратная разница в экстенсивности заражения мышей личинками паразита (от 28,3±5,8% до 93,3±3,2%) (табл. 1).

Наиболее высокая приживаемость отмечена у протосколексов овечьего штамма E. granulosus (из 60 мышей заразились 56 или 93,3%). Ларвоцисты локализовались в брюшной полости, на печени, диафрагме. Большинство ларвоцист имело вид конгломератов, состоящих из множества отдельных мелких пузырей, покрытых общей тонкой соединительной капсулой. Некоторые цисты, обычно более крупные, располагались одиночно. У 60% мышей, вскрытых через 15 месяцев, обнаружили фертильные ларвоцисты, в выводковых капсулах которых содержалось по 3 - 8 сформированных протосколексов. Все ларвоцисты были жизнеспособными, их размеры колебались от 2 до 38 мм, интенсивность инвазии составляла от 4 до 185 ларвоцист / мышь.

Верблюжьим штаммом заразилось 27 (45%) мышей. Ларвоцисты, как одиночные, так и в виде конгломератов, локализовались в брюшной полости. Размеры их через 6 месяцев достигали 3 - 18 мм, в крупных одиночных ларвоцистах развивались выводковые капсулы с 5 - 12 протосколексами. Фертильные ларвоцисты обнаружены у 22,2% мышей к числу заразившихся, интенсивность инвазии колебалась от 6 до 82 ларвоцист.

При вскрытии 60 мышей, зараженных протосколексами свиного штамма E. granulosus через 6 и 12 месяцев, у 17 из них (28,3%) на печени, диафрагме и селезенке обнаружили петрифицированные очажки размером 1 - 6 мм плоской и округлой формы. Жизнеспособных ларвоцист у животных этой группы не обнаружили.

В четвертой группе (бычий штамм) заразилось 45 (75%) мышей. Одиночные ларвоцисты обнаруживали, главным образом, на печени и очень

Таблица 1. Приживаемость протосколексов и развитие вторичных ларвоцист E. granulosus разных штаммов у аутбредных мышей

Группы мышей*)	Штаммы E. granulosus	Приживаемость протосколексов, %	Срок развития фертильных лар- воцист, мес.	Количество мышей с фертильными ларвоцистами, %	Преимущест- венная лока- лизация лар- воцист
1	овечий	93,3±3,2	15	60,0	брюшная полость, печень, диафрагма
2	верблюжий	45,0±6,4	6	22,2	брюшная полость
3	свиной	28,3±5,8	-	-	диафрагма, пе- чень, селезенка
4	бычий	75,0±5,6	12	75,0	печень
5 ((контр.)	раствор Хэнкса	-	-	-	-

*) В каждой группе было по 60 мышей

редко в брюшной полости. Через 12 месяцев у 75% заразившихся мышей находили фертильные ларвоцисты, выводковые капсулы которых содержали по 10 - 17 протосколексов. Размеры фертильных ларвоцист (все на печени) достигали 30 - 40 мм. Интенсивность инвазии колебалась от 2 до 27 ларвоцист.

Все мыши контрольной группы были свободны от E. granulosus. Естественный отход мышей в подопытных и контрольной группах не превышал 8 - 12%.

Морфологические особенности штаммов E. granulosus

У вида E. granulosus крючья относятся к диорхоидному типу и состоят из двух морфологических структур - лезвия и корня. Крючья расположены на хоботке в 2 ряда: внешний - большие крючья, внутренний - малые крючья. Иногда можно наблюдать третий дополнительный ряд, состоящий из мелких недоразвитых крючьев. Крючья непостоянны по своей форме. Лезвие крючка имеет различную степень кривизны, в корне различают две части: корневой отросток и рукоятку. Свободные концы рукоятки и корневого отростка имеют утолщения, к которым прикрепляются мышечные волокна. Рукоятка крючка по своей морфологии более однотипна, у малых крючьев она менее выражена. Длина лезвия обычно превышает длину рукоятки. При одинаковой общей длине крючьев может наблюдаться значительная разница в размерах их частей - лезвий, рукояток или корневых отростков.

Хоботковые крючья протосколексов E. granulosus от разных хозяев различались по размерам и форме. Хотя морфологические структуры, из которых состоят крючья протосколекса выражены слабее по сравнению с крючьями взрослых цестод, у протосколексов свиного и верблюжьего штаммов крючья выглядели стройнее и с более длинными лезвиями по сравнению с более массивными утолщенными крючьями овечьего и бычьего штаммов. Исследования показали, что количество крючьев у протосколексов варьирует в зависимости от вида промежуточного хозяина. В таблице 2 приведены вариации показателей и средние данные для крючьев протосколексов из ларвоцист E. granulosus от разных видов животных из разных регионов. Пределы колебания количества крючьев у протосколексов составляли 28 - 42 экземпляра. Например, в Самаркандской области максимальное количество крючьев было у протосколексов от верблюда (в среднем 36,9±0,56) и от овцы (в среднем 35,7±0,36), меньшее от свиньи (в среднем 32,8±0,37) и крупного рогатого скота (в среднем 32,35±0,45). Различия в числе крючьев протосколексов от овцы по сравнению с их числом от свиньи и крупного рогатого скота статистически достоверны (P < 0,01), а от верблюда - недостоверны (P > 0,05). Максимальная длина больших и малых крючьев в этом регионе была отмечена у протосколексов от верблюда - 30,82±0,09 и 22,21±0,15 мкм. Средняя длина больших крючьев протосколексов от овцы и крупного рогатого скота не различалась (табл. 2).Сравнение длины больших и малых крючьев протосколексов от овцы и крупного рогатого скота с таковыми от верблюда и свиньи показало, что между ними существуют статистически достоверные различия (P < 0,01).

В Крыму максимальное число крючьев отмечено у протосколексов овечьего штамма E. granulosus (35,83±0,69), минимальное - у бычьего штамма (29,88±0,81). Различия в числе крючьев у протосколексов овечьего и свиного, овечьего и бычьего штаммов в этом регионе достоверны (P < 0,01). Сравнение длины больших крючьев от протосколексов этих штаммов также показало, что между ними существуют достоверные различия (P < 0,01). Максимальная длина больших крючьев была у протосколексов свиного штамма - 25,97±0,51 мкм, минимальная - у овечьего - 22,97±0,5 мкм.

В Молдавии установлены достоверные различия по числу хоботковых крючьев у протосколексов от овцы и крупного рогатого скота (P <0,01) и не выявлены различия по размерам больших и малых хоботковых крючьев (табл. 2).

Наиболее крупными были размеры больших крючьев у протосколексов верблюжьего штамма E. granulosus как из Казахстана (30,35±0,44 мкм), так и из Узбекистана (30,82±0,09 мкм).

Таким образом, протосколексы верблюжьего и свиного штаммов E. granulosus из всех регионов имели стабильные морфологические признаки и достоверно различались по размерам хоботковых крючьев, как между собой, так и в сравнении с протосколексами овечьего и бычьего штаммов. Протосколексы овечьего и бычьего штаммов не всегда имели достоверные различия по размерам хоботковых крючьев. Число крючьев протосколексов E. granulosus - неустойчивый признак, и его можно учитывать при идентификации штаммов только в комплексе с другими морфологическими показателями.

Крючья взрослых цестод разных штаммов E. granulosus также различались по форме и размерам. Так, большие крючья E. granulosus, полученные по схеме коза - собака, имели массивную, волнистую с вентральной стороны рукоятку и ярко выраженную бифуркацию корневого отростка. Изогнутое лезвие было гораздо меньше рукоятки. У больших крючьев бычьего штамма наблюдалась менее выраженная бифуркация корневого отростка и массивная рукоятка, у малых крючьев - короткое лезвие и утолщенный корневой отросток. У других штаммов бифуркацию корневого отростка не наблюдали. У цестод верблюжьего штамма крючья отличались крупным закругленным корневым отростком и удлиненной стройной рукояткой с овальным концом. Крючья свиного штамма были с удлиненным лезвием, овальным корневым отростком и вытянутой закругленной на конце рукояткой. Крючья овечьего штамма - с вытянутым овальным или округлым корневым отростком и утолщенной, массивной, часто заостренной на конце рукояткой. Вентральный край корня часто имел седловидную форму, типичную для цестод овечьего штамма. У малых крючьев корневой отросток овальный и часто составлял с лезвием прямой угол. У цестод овечьего и верблюжьего штаммов иногда наблюдали третий, неполный ряд мелких крючьев (3 - 7 экз.), состоящих из одного лезвия размером 5 - 7 мкм.

Цестоды разных штаммов E. granulosus из Самаркандской области отличались по числу и размерам хоботковых крючьев. Максимальное число крючьев было у цестод верблюжьего и овечьего штаммов: 36,85±0,69 и 36,31±0,21 соответственно. Цестоды, полученные при заражении собак протосколексами из ларвоцист E. granulosus от крупного рогатого скота, свиньи и козы также существенно не отличались друг от друга по числу хоботковых крючьев (P > 0,05), но достоверно отличались от таковых от овцы и верблюда (P < 0,05). При сравнении средних значений длины больших и малых крючьев 35_дневных цестод овечьего и верблюжьего штаммов получены достоверные различия (P < 0,01). Также получены достоверные различия по размерам больших и малых крючьев у половозрелых цестод E. granulosus 105_дневного возраста свиного, козьего и бычьего штаммов (P < 0,01).

Таблица 2. Количество и размеры хоботковых крючьев протосколексов E. granulosus от разных хозяев и из разных регионов

Хозяин прото- сколексов	Регион исследования	Общее количество крючьев	Длина больших крючьев, мкм	Длина малых крючьев, мкм
овца	Крым, Украина	35,83±0,69 (34 - 38)	22,98±0,5	18,4±0,21
овца	Молдавия	37,3±0,8 (34 - 40)	24,7±0,52	19,6±0,27
овца	Джамбульская обл., Казахстан	35,19±0,99 (30 - 42)	23,6±0,38	18,4±0,22
овца	Джамбульская обл., Казахстан	34,7±0,4 (32 - 40)	23,71±0,14	19,66±0,16
овца	Кзыл-Ординская обл., Казахстан	34,5±0,34 (34 - 36)	26,45±0,44	21,57±0,38
овца	Самаркандская обл., Узбекистан	35,7±0,36 (32 - 38)	23,87±0,38	16,87±0,32
свинья	Крым, Украина	34,5±0,16 (34 - 36)	25,97±0,51	18,63±0,71
свинья	Минская обл., Белоруссия	30,5±0,32 (28 - 32)	28,95±0,16	24,21±0,12
свинья	Самаркандская обл., Узбекистан	32,75±0,37 (32 - 36)	28,7±0,11	20,21±0,68
кр. рог. скот	Крым, Украина	29,88±0,81 (28 - 33)	24,84±0,53	17,84±0,54
кр. рог. скот	Молдавия	33,4±0,34 (32 - 35)	25,04±0,54	18,63±0,01
кр. рог. скот	Самаркандская обл., Узбекистан	32,35±0,45 (30 - 36)	23,87±0,28	15,18±0,47
верблюд	Кзыл-Ординская обл., Казахстан	35,13±0,99 (34 - 36)	30,31±0,37	23,6±0,34
верблюд	Западно-Казахстанская обл.	36,84±0,65 (34 - 40)	30,35±0,44	21,47±0,52
верблюд	Самаркандская обл., Узбекистан	36,9±0,56 (36 - 42)	30,82±0,09	22,21±0,15

Взрослые (35_дневные) цестоды E. granulosus одинакового возраста из разных регионов отличались не только по числу и размерам хоботковых крючьев, но и по размеру стробилы. Стробила свиного штамма E. granulosus (Белоруссия) состояла в основном из 2, реже 3 члеников, а средняя длина цестоды составляла 2,47±0,07 мм, овечьего (Казахстан) и бычьего (Молдавия) штаммов состояла в основном из 3 члеников, реже из 2 или 4, а средняя длина цестод была 4,31±0,06 и 4,21±0,06 мм соответственно.

Максимальными по размеру были цестоды верблюжьего штамма (Узбекистан) - 5,63±0,07 мм, состоящие в основном из 4 члеников.

Таким образом, хотя морфологическая характеристика хоботковых крючьев цестод E. granulosus укладывается в рамки морфологических отличий вида, имеются статистически достоверные различия между штаммами по изученным нами морфометрическим показателям. Кроме того, морфометрические различия подтверждаются результатами изучения биологии развития этих штаммов

Разработка и испытание лекарственных препаратов при гельминтозах собак

Материалы и методы

Опыты по изучению цестодоцидной эффективности препаратов проводили на экспериментально зараженных собаках в 1988-1998 гг. на базе экспериментального хозяйства ВИГИС «Курилово», в вивариях Джамбульского отдела ВИГИС и Западно-Казахстанской НИВС (г. Уральск). В опытах использовали беспородных собак разного возраста, массы и пола. Животные содержались индивидуально, в металлических клетках с поддонами. Подготовка животных к опытам, условия содержания и кормления изложены в главе 1. Материал для заражения агельминтозных собак, методы определения жизнеспособности и инвазионности протосколексов E. granulosus, доза и техника заражения собак также описаны в главе 1. Доза заражения мультицепсами составляла 50 экз. протосколексов M. multiceps на собаку, а цистицерками тенуикольными - 3 экз. C. tenuicollis на собаку. Методика вскрытия животных и учета результатов вскрытия описаны в первой главе. Работа по этому разделу исследований выполнялась совместно со старшим научным сотрудником ВИГИС, кандидатом ветеринарных наук Белоусовым М.Н.

Испытание антигельминтной эффективности гидробунида. Таблетки гидробунида испытали в дозе 50 мг/кг по ДВ, однократно, внутрь с кормом на 5 собаках, экспериментально зараженных эхинококками, и 12 собаках, экспериментально зараженных эхинококками, мультицепсами и цистицерками тенуикольными одновременно. Убой и вскрытие собак проводили на 5_й день после лечения.

Изучение эффективности эпсипрантела при экспериментальном эхинококкозе собак провели в апреле 1992 года на базе вивария Западно-Казахстанской НИВС. Таблетки эпсипрантела испытали против юных (12_дневных) форм эхинококка на 15 собаках. Собакам 1_й группы задали препарат в дозе 2,5 мг/кг, собаки 2_й группы получили препарат в дозе 5,0 мг/кг, а третья группа служила контролем. Эффективность препарата учитывали на 5_й день после лечения по результатам гельминтологического вскрытия кишечников собак опытной и контрольной групп.

Изучение химиопрофилактического действия азинпрола - двухкомпонентной лекарственной формы азинокса, состоящей из 10%-ной суспензии препарата в силиконовом каучуке (полидиметилсиликсан) и отвердителя (1 часть октоата олова и 3 части тетраэтоксисилана) провели с октября 1989 года по апрель 1990 года на базе вивария Западно-Казахстанской НИВС. В опыте использовали 18 собак, разделенных на 5 групп - по 3 животных в четырех подопытных группах и 6 - в контрольной. Собакам четырех подопытных групп ввели препарат подкожно в залопаточную область в следующих дозах:

- 1_й группе - 10%-ную силиконовую суспензию без отвердителя в дозе 0,25 мл/кг (5_кратная терапевтическая доза по празиквантелу);

- 2_й группе - 10%-ную силиконовую суспензию без отвердителя в дозе 0,5 мл/кг (10_кратная терапевтическая доза по празиквантелу);

- 3_й группе - 10%-ную силиконовую суспензию в дозе 0,25 мл/кг одновременно с отвердителем до 5% на вводимый объем (5_кратная терапевтическая доза по празиквантелу);

- 4_й группе - 10%-ную силиконовую суспензию в дозе 0,5 мл/кг одновременно отвердителем до 5% на вводимый объем (10_кратная терапевтическая доза по празиквантелу);

- 5_я группа препарат не получала и служила контролем.

Через 4 дня всем собакам опытных и контрольной групп скормили индивидуально по 3 экз. цистицерков тенуикольных и по 30 тыс. протосколексов эхинококка из ларвоцист печени овец. Реинвазию в той же дозе проводили через каждые 2 недели в течение шести месяцев. Начиная с 36 дня после заражения, еженедельно фекалии собак исследовали на наличие яиц и члеников цестод методами последовательного промывания и Калантарян.

Антигельминтную эффективность комбинированных препаратов изучали на базе кинологического центра «Красная звезда» на служебных собаках, спонтанно инвазированных нематодами и цестодами. С этой целью отбирали животных после двукратных положительных копроовоскопических исследований методом флотации (модификация Калантарян) и формировали группы с учетом интенсивности инвазии, массы, пола, возраста и породы собак. Все препараты задавали однократно, перорально, с небольшим количеством сухого корма в утреннее кормление. Специальной диеты не назначали.

Эффективность препаратов определяли на основании учета количества яиц гельминтов в 1 г фекалий до и через 7 - 10 дней после лечения согласно «Руководству по оценке эффективности антгельминтиков у собак и кошек», одобренному Всемирной ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии (1994).

Результаты исследований

Испытание новых лекарственных препаратов при цестодозах собак

Разработка и изучение эффективности гидробунида при цестодозах собак

Бунамидин гидрохлорид (гидробунид) - N-N_ди-н-бутил_4_гексилокси_1_нафтамидин гидрохлорид синтезирован оригинальным способом в технологической лаборатории ИОХ им. И.Д. Зелинского АН СССР и группой химиков ВИГИС. Технологический процесс получения бунамидин гидрохлорида технического разработан во ВНИТИГ (г. Уфа), препарат выпускается на экспериментальном заводе ВНИТИГ по ТУ 113-04-2-140-90 и представляет собой порошок серого цвета с температурой плавления 206 - 208 єС, хорошо растворяется в метаноле и этилацетате и слабо растворим в воде.

Выпуск таблеток бунамидин гидрохлорида под названием гидробунид массой по 0,4 г по ДВ освоен во ВНИТИГ. Гидробунид по степени воздействия на организм относится к умеренно токсичным веществам, класс опасности 3 по ГОСТ 12.1.007-76. ЛД₅₀ гидробунида для крыс 1750 мг/кг, для мышей - 750 мг/кг. Собаки хорошо переносят 5_кратные терапевтические дозы препарата. Препарат обладает раздражающим действием на слизистые оболочки. У собак и кошек иногда вызывает рвоту, легкий понос без снижения антигельминтной активности.

Таблетки гидробунида испытали в дозе 50 мг/кг по ДВ, однократно, внутрь с кормом на 5 экспериментально зараженных эхинококками собаках и 12 собаках, экспериментально зараженных эхинококками, мультицепсами и цистицерками тенуикольными одновременно. Получен 100%-ный терапевтический эффект против крупных цестод, ЭЭ препарата против эхинококков составила 80 - 91,7%.

Эффективность эпсипрантела (цестекса) при экспериментальном эхинококкозе собак

Препарат относится к группе пиразинизохинолинов. Препараты этой группы малотоксичны, обладают широким спектром действия против цестод и трематод, быстро выводятся из организма. Механизм их действия основан на индуцировании распада тегумента и нарушении нервно-мышечной регуляции у паразитов.

Эпсипрантел - 2 (циклогексилкарбонил) - 4_оксо - 1,2,3,4,6,7,8,12б-октогидропиразина (2,1 - а) бензацепин - белый порошок, слабо растворимый в воде. Препарат выпускается фирмой Smith Kline Beecham в таблетках (цестекс) с содержанием 12,5; 25,0; 50,0 и 100,0 мг эпсипрантела в одной таблетке.

Эпсипрантел назначали в дозах 2,5 мг/кг и 5,0 мг/кг при однократном применении против юных (12_дневных) форм E. granulosus.

Эффективность лечения определяли на 5_е сутки после применения препарата по результатам гельминтологического вскрытия кишечников собак опытных и контрольной групп. В первой группе у всех леченых животных обнаружили эхинококки от 60 до 2000 экземпляров. Во второй группе 40 экз. эхинококков обнаружили только у одной собаки, остальные были свободны от цестод. Собаки третьей группы (контроль) были заражены эхинококками в количестве от 2900 до 7200 экз.

Таким образом, таблетки эпсипрантела (цестекса) при экспериментальном эхинококкозе собак при однократном применении в дозе 2,5 мг/кг показали ЭЭ = 0, ИЭ = 84,2%, а в дозе 5,0 мг/кг - ЭЭ = 80%, ИЭ = 99,2%.

Химиопрофилактическое действие 10%-й силиконовой суспензии азинокса и азинпрола при экспериментальном эхинококкозе и тениозе собак

Определяли химиопрофилактическую эффективность 10%-ной силиконовой суспензии азинокса и азинпрола в 5- и 10_кратных терапевтических дозах по празиквантелу при экспериментальном эхинококкозе и тениозе гидатигенном собак.

Собаки контрольной группы начали выделять яйца и членики цестод на 49 - 63 сутки после заражения (табл. 3).

У собак первой группы, которой вводили 10%-ную силиконовую суспензию без отвердителя в 5_кратной терапевтической дозе по празиквантелу, было отмечено начало выделения яиц и члеников цестод на 85, 91 и 98 сутки после первичного заражения. При вскрытии собак этой группы через 3,5 месяца после заражения у животных обнаружили в кишечнике 12, 18 и 20 тыс. экз. E. granulosus и 2, 3 и 5 экз. T. hydatigena.

У собак второй группы, получивших аналогичную силиконовую суспензию препарата в 10_кратной терапевтической дозе, было отмечено начало выделения яиц на 98 сутки после первичного заражения. При вскрытии через 3,5 месяца после заражения у собак этой группы обнаружили 12, 22 и 25 тыс. экз. E.granulosus и 0, 2 и 3 экз.T. hydatigena

Таблица 3. Химиопрофилактическая эффективность азинпрола при экспериментальном эхинококкозе и тениозе собак

Группа собак	Кол-во живных в группе	Форма вводимого препарата	Доза препарата по ДВ, мг/кг	Срок, в течение которого с фекалиями не выделялись яйца и членики цестод (сутки)
Первая	3	10%-ная силиконовая суспензия азинокса	25	85
Вторая	3	10%-ная силиконовая суспензия азинокса	50	98
Третья	3	Азинпрол	25	180
Четвертая	3	Азинпрол	50	180
Контроль	6	-	-	49

У собак третьей группы, обработанных азинпролом (10%-ная силиконовая суспензия азинокса с отвердителем) в 5_кратной терапевтической дозе, не отмечали выделений яиц и члеников цестод в течение всего срока наблюдения (180 дней). При вскрытии через 6 месяцев после первого заражения у одной собаки в кишечнике обнаружили 1400 экз. незрелых E. granulosus (длина стробил которых соответствовала таковой 22_дневных цестод) и 1 экз. T. hydatigena длиной 25 см с незрелыми члениками. Две другие собаки из этой группы были свободны от гельминтов.

В четвертой группе, обработанной азинпролом в 10_кратной терапевтической дозе, собаки не выделяли яиц и члеников цестод в течение 6 месяцев (срок наблюдения). При вскрытии животных через 6 месяцев у двух собак обнаружили в кишечнике незрелые E. granulosus (с одним члеником) в количестве 500 и 1800 экз. и 3 экз. T. hydatigena длиной 15, 18 и 25 см с неполовозрелыми члениками. Третья собака этой группы была свободна от гельминтов.

У собак контрольной группы обнаружили от 40 до 110 тыс. экз. половозрелых E. granulosus и от 2 до 8 экз. половозрелых T. hydatigena.

Таким образом, азинокс в 10%-ной силиконовой суспензии в 5- и 10_кратных терапевтических дозах профилактировал заражение собак цестодами в течение 30 суток. Выделение яиц и члеников цестод было отмечено на 85 - 98 сутки после заражения.

Азинпрол в 5- и 10_кратных терапевтических дозах полностью профилактировал заражение собак цестодами в первые 3,5 месяца и подавлял развитие цестод еще в течение 2,5 месяцев. Выделение яиц и члеников цестод в течение 6 месяцев (срок наблюдения) не отмечали.

Испытание эффективности таблеток гидробунида при цестодозах собак в производственных условиях

В 1991 году нами совместно с сотрудниками ВНИТИГ (г. Уфа) разработаны технические условия на производство опытной партии таблеток гидробунида - ТУ 10.07.117-91 и временное наставление по его применению при цестодозах собак №043-5 от 16. 04. 1991 г.

В 1991-1992 гг. на экспериментальном заводе ВНИТИГ наработано 2000 кг препарата и нами проведены широкие производственные испытания эффективности таблеток гидробунида на приотарных собаках в неблагополучных по ларвальным цестодозам зонах: Кызылординской и Западно-Казахстанской областях Казахстана. Испытания провели на 2900 собаках в дозе 50 мг/кг по ДВ с кратностью применения 8 раз в год в совхозах Сырдарьинского района, Кызылординской области и с кратностью применения 4 раза в год в совхозах Джамбейтинского района, Западно-Казахстанской области. Контрольно-диагностическую дегельминтизацию собак проводили 1%-ным раствором ареколина выборочно 1 раз в квартал. Средняя зараженность собак Джамбейтинского района, Западно-Казахстанской области по данным ветотчетности на 01. 01. 1991 г. составляла: E. granulosus - 1,8%, M. multiceps - 6,1% и T. hydatigena - 20,3%, а в Сырдарьинском районе, Кызылординской области - 3,4%, 7,2% и 12,9% соответственно.