Новые отечественные препараты для терапии и профилактики паразитарных болезней животных (противопаразитные и фармакотоксиологические свойства)

Нами изучены значения массовых коэффициентов органов крыс, получавших гиподектин инъекционный в дозах 780 и 390 мг/кг в течение 28 суток. Массовые коэффициенты органов у животных двух подопытных групп колебались в пределах контрольных значений и физиологической нормы для данного вида животных.

При изучении 10 основных биохимических показателей, отражающих состояние обмена веществ в организме животных, пришли к выводу, что введение в течение 28 суток гиподектина инъекционного как в дозе 1/10 от ЛД₅₀, так и 1/20 от ЛД₅₀ не изменило существенно ни один из тестируемых биохимических показателей у животных по сравнению с контролем.

Функциональное состояние почек также не претерпело отрицательных изменений при введении препарата в обеих дозах, так как уровень креатинина и мочевины был сравним со значениями контрольной группы.

Анализируя в целом результаты изучения субхронической токсичности следует отметить, что гиподектин инъекционный в двух тестируемых дозах 780 и 390 мг/кг в течение 28 суток (суммарные дозы 21840 и 10920 мг/кг соответственно) не изменял общего состояния и поведения животных, приём корма и воды, динамику прироста массы тела, гематологические и биохимические показатели. На основании вышеизложенного, можно сделать вывод, что дозы гиподектина 1/10; 1/20 от ЛД₅₀ являются безопасными для животных.

Влияние гиподектина инъекционного на антитоксическую функцию печени. Важным для токсикологической характеристики препарата является его влияние на антитоксическую функцию печени. Гексеналовую пробу, основанную на продолжительности гексеналового сна, проводили на белых крысах. Полученные результаты учёта продолжительности гексеналовогосна белых крыс при введении препарата свидетельствуют о том, что гиподектин инъекционный в терапевтической и в 5 раз увеличенной дозах не снижал детоксикацию барбитурата-гексенала (P > 0,05).

Таким образом, гиподектин инъекционный не вызывает изменений в антитоксической функции печени.

Раздражающее и аллергизирующее действие гиподектина инъекционного. При нанесении гиподектина на кожу животных наблюдали адекватную реакцию на нанесение чужеродного вещества. Каких-либо признаков интоксикации, изменений состояния и поведения крыс не наблюдали в течение всего периода наблюдений.

Гиподектин инъекционный не оказывал отрицательного воздействия на неповреждённую кожу крыс. Через 10 - 12 суток после нанесения препарата кожа покрывалась ровным шёрстным покровом.

При изучении влияния гиподектина инъекционного на конъюнктиву глаза кроликов наблюдали адекватную реакцию на внесение инородного тела. Выраженность реакции на препарат соответствовала 0 баллов. Никаких других признаков не наблюдали.

Таким образом, гиподектин инъекционный не вызывает раздражающего действия на кожу и конъюнктиву глаз животных.

Результаты изучения аллергизирующих свойств гиподектина инъекционного свидетельствуют о том, что он в испытанной дозе не обладает антигистаминной активностью, так как не предотвращает смерть животных от введённой дозы гистамина, а также и не ускоряет её, что указывало бы о гистаминном, аллергизирующем действии. Следовательно, гиподектин инъекционный не обладает аллергизирующим действием.

Эмбриотропные свойства гиподектина инъекционного. Полученные результаты исследований возможного эмбриотоксического действия гиподектина инъекционного свидетельствуют о том, что препарат в терапевтической дозе не обладает эмбриотоксическим действием. Предимплантационная гибель зигот составила 12,72 + 2,60 в подопытных и 13,04 + 2,85 в контрольной группах; постимплантационная гибель эмбрионов - 2,52 + 0,64 и 2,60 + 0,48; общая эмбриональная смертность 15,96 + 2,92 и 16,08 + 3,05% соответственно.

При измерении костной системы плодов установлено, что длина трубчатых костей плодов разных групп была практически одинаковой (P > 0,05). Не установлено случаев уродств и изменений внутренних органов при исследовании плодов. Данные, полученные при визуальном осмотре и измерении плодов в подопытных и контрольной группах, также подтвердили отсутствие тератогенного действия гиподектина. Результаты изучения размеров костей плодов крыс, получавших гиподектин инъекционный, свидетельствуют об отсутствии разницы по сравнению с показателями плодов крыс контрольной группы.

Таким образом, гиподектин инъекционный, введённый в терапевтической дозе беременным крысам, не проявил ни тератогенного, ни эмбриотоксического действия.

Влияние гиподектина инъекционного на организм крупного рогатого скота. Полученные результаты свидетельствуют о том, что колебание показателей клинического состояния подопытных животных, получавших гиподектин инъекционный в дозах 0,6 и 1,8 мкг/кг, были в пределах физиологической нормы крупного рогатого скота и существенно не отличались от состояния этих животных до дачи препарата, а также от животных контрольной группы.

Изменений в клиническом состоянии не отмечали у крупного рогатого скота, получавшего препарат в 5 раз увеличенной дозе, т.е. 3 мкг/кг. Следовательно, индекс безопасности гиподектина инъекционного превышает 5.

Колебания в количестве эритроцитов и лейкоцитов в 1 мкл крови, содержании гемоглобина и в лейкограмме крови крупного рогатого скота 1, 2 и 3-й подопытных групп в течение всего периода исследований были в пределах нормы и существенно не отличались от показателей животных контрольной группы.

Физико-химические и биохимические свойства мочи животных, получавших гиподектин инъекционный, не изменялись после введения препарата в дозах 0,6, 1,8 и 3 мкг/кг.

Результаты биохимических исследований крови крупного рогатого скота до и через 1, 3 и 5 суток после введения гиподектина инъекционного показали, что препарат в терапевтической дозе (0,6 мкг/кг) и в 3 раза увеличенной дозе (1,8 мкг/кг) не оказал существенного отрицательного влияния на биохимические показатели крупного рогатого скота. Активность щелочной фосфатазы, амилазы и содержание билирубина, креатинина, триглицеридов, мочевины и мочевой кислоты находились в пределах физиологической нормы и не отличались от показателей животных контрольной группы (Р > 0,05).

Таким образом, гиподектин инъекционный в терапевтической (0,6 мкг/кг), а также в 3 и 5 раз увеличенных (1,8 и 3 мкг/кг) дозах не оказывает отрицательного влияния на общие клинические, гематологические и биохимические показатели крупного рогатого скота и не вызывает реакции на месте введения.

Содержание ивермектина в органах и тканях крупного рогатого скота после применения гиподектина инъекционного. Результаты определения содержания ивермектина биологическим методом в молоке коров после применения гиподектина инъекционного в дозах 0,6 - 3,0 мкг/кг показали отсутствие препарата в молоке.

Результаты определения остаточных количеств ивермектина в органах и тканях животных после применения гиподектина инъекционного в дозе 0,6 мкг/кг показали, что препарат быстро выводится из организма. Через 5 дней в органах и тканях остаточных количеств ивермектина не обнаруживали. Наибольшее содержание остаточных количеств препарата наблюдали в печени и на месте инъекции в первые трое суток после его применения.

Результаты исследования методом тонкослойной хроматографии в сочетании с УФ-денситометрией проб молока, органов и тканей от животных после введения им подкожно гиподектина инъекционного в дозе 0,6 мкг/кг массы тела показали, что остатки препарата не обнаружены в молоке обработанных гиподектином инъекционным коров, а также в мышцах, печени и почках. В жире через 3 суток найдено 1,4+0,2 нг/г в месте инъекции - 0,3+0,08 нг/г. Через 5 суток препарат в органах и тканях не обнаруживали.

Результаты определения выделения ивермектина методом ВЭЖХ в органах и тканях животных после подкожного введения гиподектина инъекционного в дозе 0,6 мкг/кг показали, что остатки препарата не обнаруживали в молоке коров, получивших подкожно дозу 0,6 мкг/кг. В мышцах, органах, тканях и жире уровень остатков препарата через сутки составлял 0,22 - 0,4 нг/г, через 3 суток около 0,2 нг/г, в ткани на месте инъекции через 1 и 3 суток 0,66 и 0,29 нг/г соответственно.

Таким образом, проведённые тремя методами (биологическим, ТСХ с УФ-денситометрией, ВЭЖХ с УФ-детектированием) исследования выделения ивермектина с молоком у коров при подкожном введении гиподектина в дозе 0,6 - 3,0 мкг/кг показали, что препарат при минимальной чувствительности определения методом ВЭЖХ 0,2 нг/мл и биологическим - 0,01 нг/мл в молоке не обнаруживается. После введения такой же дозы остатки препарата в мышцах, органах и тканях, обнаруженные разными методами, в течение 4-х суток не превышают 1нг/г. Следовательно, убой животных может быть рекомендован через 5 суток после применения препарата.

Комиссионные и производственные испытания гиподектина инъекционного при гиподерматозе крупного рогатого скота. Результаты комиссионных испытаний гиподектина инъекционного при гиподерматозе крупного рогатого скота показали 99,62%-ную интенсэффективность при 92,4%-ной экстенсэффективности.

Препарат хорошо переносился животными и не вызывал проявления местной реакции. Комиссия рекомендует препарат для широких производственных испытаний при гиподерматозе крупного рогатого скота.

Производственные испытания гиподектина инъекционного для ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота (1996-1997 гг.) в хозяйствах Смоленской области показали высокую эффективность препарата в дозе 2 и 3 мл на голову. Препарат в дозе 3 мл на голову показал 100%-ную эффективность при учёте эффективности 24 апреля и 23 мая 1997 года. Интенсэффективность гиподектина инъекционного в дозе 2 мл/голову составила 98,3 - 100%, а экстенсэффективность была равной 88,2 - 100%. Животные контрольной группы весной оказались заражёнными на 43,7 - 62,5% при обнаружении 16,4+1,4 - 25,2+2,1 экз. личинок гиподерм, в среднем у одного животного.

В 1997-1998 гг. проведено производственное испытание гиподектина инъекционного в хозяйствах Смоленской области на 807 коровах и нетелях в Духовщинском районе (ферма «Кислово»), Починковском районе (ферма Даньково) и Хиславичском районе (ферма Шатиловка и Субировка). Препарат в дозе 2 мл/голову проявил 80-96,2%-ную экстенсэффективность и 96,4 - 99,8%-ную интенсэффективность при осеннем применении. Он не вызывал каких-либо отклонений в состоянии здоровья животных.

В дальнейшем, в 1997-1998 гг. проведены широкие производственные испытания гиподектина инъекционного в 19 регионах России и в двух областях Белоруссии на поголовье 715000 голов крупного рогатого скота, которые подтвердили высокую эффективность препарата при гиподерматозе крупного рогатого скота и безвредность для животных, что позволяет рекомендовать его для применения на практике.

2.3 Эффективность и фармакотоксикологические свойства гиподектина-Н

2.3.1 Эффективность гиподектина-Н при гиподерматозе крупного рогатого скота

Для удобства в применении нами разработана лекарственная форма ивермектина для накожного нанесения. Гиподектин-Н представляет собой раствор с содержанием 0,1 мг ивермектина в 1 мл. Препарат предназначен для лечения и профилактики гиподерматоза крупного рогатого скота, в том числе лактирующих коров.

Испытания гиподектина-Н при клиническом проявлении заболевания в ранне-весенний период на 51 голове крупного рогатого скота показали, что препарат в дозе 15 мл на голову (500 кг) показал 100%-ную эффективность при интенсивности инвазии в среднем по 15,6 + 1,4 экз. личинок гиподерм (H. bovis) у контрольных животных.

Испытания гиподектина-Н при применении в осенний период против личинок 1-й стадии гиподерм крупного рогатого скота показали также высокую эффективность. Препарат в дозе 15 мл на голову проявил 100%-ную эффективность. У 7 из 14 животных контрольной группы обнаружили, в среднем, по 14,7 + 1,2 экз. личинок гиподерм. Препарат хорошо переносился животными и не оказывал побочного действия на организм крупного рогатого скота.

Таким образом, гиподектин-Н в дозе 15 мл/голову при накожном применении для терапии гиподерматоза крупного рогатого скота в осенний и ранне-весенний периоды, показал 100%-ную эффективность и хорошую переносимость.

2.3.2 Титрация терапевтической дозы гиподектина-Н при гиподерматозе крупного рогатого скота

Испытания гиподектина-Н в разных дозах показали различную эффективность против личинок гиподерм крупного рогатого скота (500 кг). Получена 100%-ная эффективность гиподектина-Н в дозе 3,0 и 4,0 мкг/кг по ДВ при накожном применении против личинок гиподерм 2 и 3-й стадии. Из 17 леченных гиподектином-Н в дозе 2,0 мг/кг 14 полностью освободились от личинок гиподерм. Препарат в этой дозе оказал 95,4%-ную эффективность при 82,4%-ной экстенсэффективности.

Следует отметить, что гиподектин-Н не оказывал отрицательного действия на организм крупного рогатого скота.

Нами также проведено испытание гиподектина-Н против личинок гиподерм 1-й стадии в осенний период. При накожном применении гиподектина-Н в дозах 2,0; 3,0 и 4,0 мкг/кг по ДВ, в апреле 1996 года была получена соответственно: 95,7; 99,4 и 100%-ная интенсэффективность при 83,6; 96,2 и 100%-ной экстенсэффективности.

Таким образом, гиподектин-Н при накожном применении в дозе 4,0 и 3,0 мкг/кг показал высокую эффективность против личинок гиподерм при применении, как в ранне-весенний, так и осенний период. Дозу гиподектина-Н 3,0 мкг/кг по ДВ из расчёта 15 мл на голову рекомендуем как терапевтическую для ранней и поздней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота.

2.3.3 Фармакотоксикологические свойства гиподектина-Н

Изучение острой токсичности гиподектина-Н. После введения в желудок белым мышам гиподектина в дозе 5000 мг/кг не отмечали признаков токсического действия препарата. Аналогичные результаты получены и на белых крысах при введении гиподектина-Н в желудок в дозе 6000 мг/кг. У подопытных животных не отмечали изменений в поведении и состоянии после введения препарата в этих дозах.

При повышении дозы препарата до 7000 мг/кг через 5-8 часов у мышей начали отмечать признаки интоксикации, выражающиеся в беспокойстве животных и нарушении координации движений. От этой дозы пало 3 мыши из 10. При дальнейшем повышении дозы препарата признаки отравления проявлялись более выражено. Гибель животных после введения гиподектина-Н в дозе 7000, 9000 и 11000 мг/кг составила соответственно 30, 80 и 100%.

Токсические свойства гиподектина-Н на белых крысах были менее выражены и проялялись через 6-10 часов нарушением координации движений и гибелью животных. После введения крысам гиподектина-Н в дозе 8000, 10000 и 12000 мг/кг пало соответственно 3, 5 и 6 животных.

Гибель крыс после введения препарата отмечали обычно, в первые 2-4 суток. ЛД₅₀ для мышей при введении в желудок составила 7800, а для крыс - 8150 мг/кг. По степени токсичности согласно ГОСТу 12.1.007-76 препарат гиподектин-Н относится к 1У классу опасности (вещества малотоксичные).

Токсические свойства гиподектина-Н при длительном применении

При ежедневном в течение 28 суток введении гиподектина-Н в двух тестированных дозах 1/10 и 1/20 от ЛД₅₀ для крыс 815 и 407,5 мг/кг признаков токсикоза и гибели крыс не наблюдали в течение всего опытного периода. Еженедельные приросты и конечные показатели массы тела, а также процент к исходной массе тела у крыс, которым вводили гиподектин-Н, не отличались значительно от данных показателей у контрольных животных (Р > 0,05). Массовые коэффициенты органов у животных двух подопытных групп колебались в пределах контрольных значений и физиологической нормы для данного вида животных. Препарат в дозах 815 и 407,5 мг/кг/сутки не оказал достоверного влияния на гематологические показатели крыс. Введение препарата не привело к изменению лейкограммы.

Биохимические показатели сыворотки крови крыс, которым вводили гиподектин-Н в дозах 815 и 407,5 мг/кг/сутки и у животных контрольной группы существенно не отличались. Введение гиподектина-Н в обеих дозах не привело к существенному повышению активности аланинамино- и аспартатаминотрансфераз и щелочной фосфатазы, что свидетельствует об отсутствии функциональных нарушений печени. Функциональное состояние почек также не претерпело изменений после введения препарата в дозах 1/10 и 1/20 от ЛД₅₀, так как уровень креатинина и мочевины был сравним с показателями животных контрольной группы.

Обобщая результаты изучения субхронической токсичности можно констатировать, что гиподектин-Н в двух тестированных дозах 815 и 407,5 мг/кг/сутки (суммарные дозы 22820 и 11410 мг/кг соответственно) не приводил к изменению общего состояния и поведения животных, приёма корма и воды, динамики прироста массы тела, гематологические и биохимические показатели.

На основании вышеизложенного можно сделать вывод, что гиподектин-Н в дозах 1/10 и 1/20 от ЛД₅₀ является безопасным для организма животных при введении в течение 28 суток.

Влияние гиподектина-Н на антитоксическую функцию печени

Результаты изучения влияния гиподектина-Н на антитоксическую функцию печени свидетельствуют о том, что препарат в терапевтической и в 5 раз увеличенной дозах не влияет на детоксикацию барбитурата-гексенала (Р > 0,05).

Таким образом, гиподектин-Н в терапевтической и увеличенной в 5 раз дозах не влияет на антитоксическую функцию печени, о чём указывает отсутствие разницы в продолжительности гексеналового сна у крыс подопытных и контрольной групп.

Местное действие и антигистаминная активность гиподектина-Н

При нанесении гиподектина-Н на кожу животных наблюдали адекватную реакцию на нанесение чужеродного вещества. Каких-либо признаков интоксикации или изменений состояния и поведения крыс не наблюдали в течение всего периода наблюдений. Препарат не оказывал отрицательного воздействия на неповреждённую кожу крыс. Через 12-14 суток после нанесения препарата кожа покрылась ровным шёрстным покровом.

При изучении влияния гиподектина-Н на конъюнктиву глаза кроликов наблюдали также адекватную реакцию на внесение инородного тела. Выраженность реакции на препарат соответствовала 0 баллов. Никаких других признаков, свидетельствующих о раздражающем действии препарата, не наблюдали.

Таким образом, гиподектин-Н не проявил раздражающего действия при нанесении на кожу и слизистые оболочки животных.

Результаты изучения аллергизирующих свойств гиподектина-Н свидетельствуют о том, что он, в испытанной дозе, не обладает антигистаминной активностью, так как не предотвращает гибель животных от введённой дозы гистамина, а также не ускоряет её, что указывало бы о гистаминном аллергизирующем действии.

Эмбриотоксическое и тератогенное действие гиподектина-Н

Результаты изучения эмбриотоксического действия гиподектина-Н в терапевтической дозе свидетельствуют о том, что препарат не обладает эмбриотропной активностью. Предимплантационная гибель зигот составила 12,62+2,64 в подопытных (суммарная во все периоды беременности - 3 группы) и 12,86+2,75 в контрольной группах; постимплантационная гибель эмбрионов - 2,50+0,96 и 2,58+0,68; общая эмбриональная смертность 15,13+3,20 и 15,8+3,15 соответственно. Количество женских особей было равным 50,84 и 50,80%; количество мужских особей 49,16 и 49,20%.

Показателями тератогенного действия являются нарушения органогенеза во внутриутробном периоде и изменения костной системы плода. При измерении костной системы плодов установлено, что длина трубчатых костей была почти одинаковой (Р > 0,05). Не выявлено случаев уродств и изменений внутренних органов при исследовании плодов. Данные, полученные при визуальном осмотре и измерении плодов в подопытных и контрольной группах, также подтвердили отсутствие тератогенного действия гиподектина-Н. Результаты изучения размеров костей плодов крыс, получавших гиподектин-Н, свидетельствуют об отсутствии разницы по сравнению с показателями плодов крыс контрольной группы.

Таким образом, гиподектин-Н, введённый беременным крысам в терапевтической дозе не проявил ни тератогенного, ни эмбриотоксического действия.

Влияние повышенных доз гиподектина-Н на организм крупного рогатого скота

Гиподектин-Н в терапевтической и в 5 раз увеличенной дозах не оказывает отрицательного влияния на общее состояние и гематологические показатели крупного рогатого скота. Показатели животных всех подопытных групп в течение всего периода опыта были в пределах физиологической нормы и существенно не отличались от показателей крупного рогатого скота контрольной группы (Р > 0,05). Как видно из результатов, гиподектин-Н в терапевтической и в 5 раз увеличенной дозах, не оказывает отрицательного влияния на общее состояние и гематологические показатели крупного рогатого скота. Показатели животных всех подопытных групп в течение всего периода опыта были в пределах физиологической нормы и существенно не отличались от показателей крупного рогатого скота контрольной группы.

Исследования физико-химических свойств мочи крупного рогатого скота подопытных групп в течение всего опыта не выявили отрицательного влияния гиподектина-Н в терапевтической, в 3 и 5 раз увеличенных дозах.

Биохимические показатели крупного рогатого скота после введения гиподектина-Н в 5 раз увеличенной дозе (15,0 мкг/кг) свидетельствуют об отсутствии существенной разницы в показателях животных до и после лечения, а также в сравнении с животными контрольной группы.

Содержание ивермектина в органах и тканях крупного рогатого скота после применения гиподектина-Н. Изучение выделения авермектинов с молоком, проведённые M. Alvinere et al. (1987), методом ВЭЖХ с чувствительностью 2 нг/мл показало, что препарат может выделяться с молоком. В последующем это было подтверждено другими авторами. Однако эти исследования были выполнены с применением больших доз препаратов.

Гиподектин-Н и его инъекционный аналог существенно отличаются от известных препаративных форм авермектинов и 22,23-дигидроавермектинов, применявшихся для лечения животных, пониженным в 50 - 100 раз содержанием действующего начала в препаративной форме (0,01% вместо 1,0 - 0,5%) и уменьшенной в 66,7 - 830 раз лечебной дозой (вместо 500 - 200 мкг/кг - 0,6 - 3 мкг/кг). Поэтому представляло интерес выяснить содержание остаточных количеств препарата в органах и тканях и определить выделяется ли он с молоком у коров после обработки их против подкожного овода.

Результаты определения остаточных количеств ивермектина в молоке коров методом ВЭЖХ с УФ-детектированием после накожного применения гиподектина-Н в дозах от 0,5 до 5 мкг/кг показали отсутствие препарата в молоке.

Результаты изучения остаточных количеств ивермектина в органах и тканях крупного рогатого скота после применения гиподектина-Н методом нанесения на спину в дозе по ДВ 3 мкг/кг свидетельствуют о том, что препарат довольно быстро выводится из организма животных. Через 5 суток остатки 22,23-дигидроавермектина не обнаружены ни в одной пробе даже при очень высоком уровне чувствительности метода порядка 0,01 нг/г. Исходя из этого, можно рекомендовать убой животных на мясо через 5 суток после применения гиподектина-Н.

Эффективность гиподектина-Н в комиссионных и производственных опытах при гиподерматозе крупного рогатого скота. Результаты комиссионного испытания гиподектина-Н для ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого подтвердили высокую эффективность препарата. Только у трёх из 242 леченых коров обнаружили весной следующего года единичные экземпляры личинок оводов. Экстенсэффективность гиподектина-Н в дозе 10 мл на голову составила 98,8% при 99,4%-ной интенсэффективности. Препарат хорошо переносился крупным рогатым скотом и не вызывал побочного действия.

Результаты производственных испытаний гиподектина-Н для борьбы с подкожными оводами крупного рогатого скота в хозяйствах Смоленской области показали, в среднем, 88,4%-ную эффективность.

Гиподектин-Н был также испытан в хозяйствах Нижегородской области на 3672 головах крупного рогатого скота с получением, в среднем 96,7%-ной эффективности.

При испытании гиподектина-Н в Удмуртской Республике на 10788 головах крупного рогатого скота получена эффективность 99,8% при ранней химиотерапии гиподерматоза.

Производственные испытания гиподектина-Н в дозе 10 мл на голову в Читинской области на 33972 головах крупного рогатого скота в 1996-1997 гг. показали также высокую эффективность препарата против личинок гиподерм.

Высокая эффективность гиподектина-Н в дозе 5, 10 и 15 мл на голову получена при испытании в Тюлячинском районе Республики Татарстан в 1996-1997 гг. на 440 коровах для ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота (98,26-99,4%). Максимальная эффективность гиподектина-Н установлена в дозе 15 и 10 мл на голову.

При испытании препарата в дозе 10 мл на голову в хозяйствах Смоленской области на 36 головах крупного рогатого скота получили 97,0%-ную эффективность против личинок гиподерм 2 и 3-й стадии при интенсивности от 14,3 до 17,0 экз./голову.

В хозяйствах Саратовской области весной 1997 года обработали 836 голов крупного рогатого скота и получили 100%-ную эффективность.

Широкие производственные испытания гиподектина - Н проводили в Республике Беларусь совместно с сотрудниками БелНИИЭВ им. Вышелесского в 1996-1997 гг. Получена 98-100%-ная эффективность.

Проведенные производственные испытания позволяют рекомендовать гиподектин-Н для применения на практике.

2.4 Эффективность и фармакотоксикологические свойства новомека

2.4.1 Эффективность новомека при гиподерматозе крупного рогатого скота

Учитывая то, что предыдущие препараты были предназначены для терапии и профилактики гиподерматоза, нами разработан на основе ивермектина препарат - новомек широкого спектра действия, включая эктопаразитов, нематод и личинок гиподерм. Новомек представляет собой 1%-ный раствор ивермектина.

Результаты предварительного испытания новомека при гиподерматозе крупного скота свидетельствуют о высокой эффективности препарата при весенней химиотерапии гиподерматоза как при подкожном (100%), так и при внутрикожном (99,7%) введении в дозах соответственно 10 и 8 мкг/кг.

Учитывая полученные результаты, нами проведено установление терапевтической дозы новомека при ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота. Препарат применяли подкожно и внутрикожно в разных дозах. Полученные результаты показали, что максимальная эффективность новомека при подкожном и внутрикожном введении получена в дозах 12 и 10 мкг/кг. Получена 100%-ная эффективность новомека в дозе 12 мкг/кг при подкожном введении и в дозе 10 мкг/кг при внутрикожном введении с помощью безигольного инъектора. Высокой оказалась эффективность новомека в дозе 10 мкг/кг при подкожном введении и 100%-ная в дозе 8 мкг/кг при внутрикожном введении крупному рогатому скоту. Несколько ниже была эффективность препарата в дозе 8 мкг/кг при подкожном введении и 6 мкг/кг при внутрикожном введении (ИЭ% соответственно 97,48 и 96,93%, при 94,03 и 94,55%-ной ЭЭ). Учитывая полученные результаты, нами рекомендована доза 10 мкг/кг при подкожном введении и доза 8 мкг/кг при внутрикожном введении как терапевтические при ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота.

Таким образом, новомек при внутрикожном введении отличается низкой трудоёмкостью, высокой скоростью обработки, отсутствием риска распространения заболеваний, уменьшением стресса для животного и отсутствием необходимости фиксации при обработке животных.

2.4.2 Эффективность новомека при псороптозе крупного рогатого скота

Полученные результаты свидетельствуют о высоком акарицидном действии новомека в испытанной дозе. Наилучшие результаты получены при двукратном применении новомека с интервалом 8 суток.

В соскобах кожи крупного рогатого скота (1 г) обнаруживали до лечения 13,0+1,5 экз. у животных первой группы и 12,8+1,6 экз. у животных второй группы. Спустя 28 суток у двух животных первой группы, обработанных однократно обнаруживали единичные экземпляры Psoroptes bovis.

Крупный рогатый скот второй группы был свободным от клещей. Животные контрольной группы были заражены клещами Р. bovis до и в конце опыта в равной степени (Р > 0,05).

Таким образом, новомек в дозе 0,2 мг/кг при двукратном применении с интервалом 8 суток показал 100%-ный эффект при псороптозе крупного рогатого скота. При однократном применении эффективность новомека была равной 96,08%. Кроме того, у крупного рогатого скота после лечения исчезли признаки зуда. На поражённых участках отмечен рост волосяного покрова.

2.4.3 Испытание новомека при саркоптозе свиней

Результаты испытания новомека при саркоптозе свиней показали разницу в его эффективности при применении в разных дозах. Препарат в дозе 0,4 и 0,3 мг/кг при двукратном введении обладает 100%-ной эффективностью. Препарат в дозе 0,2 мг/кг показал недостаточный эффект против клещей S. suis, равный 94,4%. Оптимальной оказалась доза новомека, равная 0,3 мг/кг, т.е. 1,5 мл раствора на 50 кг массы тела. На наш взгляд, эта доза препарата является наиболее рациональной, и её рекомендуем для применения при саркоптозе свиней. Следует отметить, что после лечения у свиней прекратился зуд. В соскобах кожи живых клещей не обнаруживали, наблюдали восстановление поражённых воспалительных участков кожи.

2.4.4 Эффективность новомека при псороптозе овец

Результаты испытания новомека при псороптозе овец свидетельствуют о различной степени эффективности препарата в разных дозах.

Через 10 суток после повторного подкожного введения новомека в дозе 0,1 мг/кг освободилось от клещей только 6 из 10 обработанных овец. Количество клещей P. ovis снизилось на 94,8%.

100%-ная эффективность новомека против клещей Р. ovis получена при испытании его в дозе 0,2 мг/кг. У всех 10 леченых овец клещей не обнаруживали.

Высокая эффективность новомека получена при псороптозе овец в дозе 0,2 мг/кг при двукратном с интервалом 8 суток применении. 10 обработанных овец были полностью свободны от Р. ovis. Эффективность новомека в этой дозе составила также 100%. На поражённых участках кожи исчезли признаки воспаления, отмечали отторжение корочек.

2.4.5 Эффективность новомека при гематопинозе свиней и крупного рогатого скота

Новомек при испытании в дозе 0,2 мг/кг на свиньях и крупном рогатом скоте показал 100%-ный эффект против Haematopinus suis, H. bovis.

Заражённость животных контрольных групп до опыта и в конце опыта существенно не отличалась и превышала 320,4 экз./голову у свиней и 143,4 экз./голову у крупного рогатого скота.

Таким образом, новомек в дозе 0,2 мг/кг у свиней и 0,2 мг/кг у крупного рогатого скота показал 100%-ную эффективность при гематопинозе.

2.4.6 Эффективность новомека при нематодозах крупного рогатого скота

По результатам копрологических исследований получено 100%-ное снижение количества личинок диктиокаул в фекалиях молодняка крупного рогатого скота. При этом у животных после применения новомека прекратился кашель, улучшилось состояние здоровья. Заражённость тёлок контрольной группы в период опыта существенно не изменялась и составила до опыта 35,8+3,7 экз. личинок в г фекалий, а в конце опыта 38,2+4,1 экз.

Новомек в дозе 10 мкг/кг при однократном подкожном введении и в дозе 8 мкг/кг при внутрикожном введении крупному рогатому скоту показал 100%-ную эффективность при диктиокаулёзе и стронгилоидозе.

Эффективность препарата в дозе 200 мкг/кг подкожно при нематодирозе составила 99,2%, при других стронгилятозах пищеварительного тракта - 99,5%, при трихоцефалёзе - 98,0%. Препарат хорошо переносился животными и не вызывал побочного действия или проявления местной реакции.

2.4.7 Фармакотоксикологические свойства новомека

Параметры острого токсического действия новомека. При введении новомека белым мышам и белым крысам разных групп в желудок в дозах от 1000 до 8000 мкг установлено, что доза препарата 1000 мг/кг не вызывала изменений в поведении и общем состоянии крыс и мышей. Они сохраняли активность, охотно потребляли корм и воду. Однако при повышении дозы новомека до 2000 мг/кг через 2-4 часа у отдельных животных отмечали признаки интоксикации, которые выражались в угнетённом состоянии, отказе от корма и даже гибели 2 животных из группы.

При дальнейшем повышении дозы новомека отмеченные признаки отравления проявились ранее, т.е. через 40-70 минут и были более продолжительными. После введения новомека крысам в дозе 3000 мг/кг пало 4 крысы; после дозы 4000 мг/кг - 5 голов, а после введения дозы 5000 мг/кг пали все 6 животных из группы.

Фармакодинамика новомека у мышей незначительно отличалась в сторону снижения токсичности. Признаки отравления у мышей начали отмечать после введения препарата в дозе 2000 мг/кг и выше. Интоксикация проявлялась аналогично. После введения препарата в дозе 2000; 4000; 6000 и 8000 мг/кг пало соответственно 2, 6, 8 и 10 из 10 мышей в группах. Падёж животных отмечали, в основном, в первые 3-5 суток после введения новомека.

ЛД₅₀ новомека для мышей при введении в желудок составила 3700 (3330 ч 4111) мг/кг, а для крыс 2600 (2363ч2860) мг/кг. Следует отметить, что белые крысы оказались более чувствительны к новомеку, чем белые мыши. Новомек относится к Ш классу опасности (вещества умеренно опасные) по ГОСТ 12.1.007-76.

Токсические свойства новомека в субхроническом опыте. При ежедневном введении новомека в дозах 1/10 и 1/20 от ЛД₅₀ (т.е. 260 и 130 мг/кг в сутки) признаков токсического действия препарата и гибели крыс не отмечали в течение всего опыта, длящегося в течение 28 суток.

Анализируя в целом результаты изучения субхронической токсичности можно констатировать, что новомек в двух тестированных дозах (суммарные дозы 7280 и 3640 мг/кг соответственно) не изменял общего состояния и поведения животных, приём корма и воды, динамику прироста массы тела и гематологические показатели. Однако, новомек в дозе 1/10 от ЛД₅₀, т.е. 260 мг/кг в сутки привёл к существенному повышению активности аланинамино- и аспартатаминотрансфераз и щелочной фосфатазы. Доза 130 мг/кг/сутки изменений биохимического профиля сыворотки крыс не вызывала. На основании вышеизложенного, можно сделать вывод, что доза новомека 1/10 от ЛД₅₀ является пороговой.

Влияние новомека на антитоксическую функцию печени. Результаты изучения влияния новомека на антитоксическую функцию печени указывают на то, что препарат в терапевтической и в 5 раз увеличенной дозах не влияет на детоксикацию барбитурата - гексенала (Р > 0,05). Продолжительность гексеналового сна через 6 и 12 часов после введения новомека в терапевтической дозе составила соответственно 56,0+3,2 и 56,2+3,0 мин., а в 5 раз увеличенной - 57,0+3,1 и 57,3+3,2 минуты. Показатели антитоксической функции печени белых крыс подопытных и контрольной групп отличались незначительно (Р > 0,05).

Таким образом, новомек в терапевтической и увеличенной в 5 раз дозах не влияет на антитоксическую функцию печени, о чём указывает отсутствие разницы в продолжительности гексеналового сна у крыс подопытных и контрольной групп.

Раздражающее и аллергизирующее действие новомека. При нанесении препарата на кожу животных наблюдали адекватную реакцию на нанесение чужеродного вещества. Каких-либо признаков интоксикации или изменений состояния и поведения животных не наблюдали в течение всего периода опыта.

При изучении влияния новомека на конъюнктиву глаза кроликов наблюдали также адекватную реакцию на внесение инородного тела. Выраженность реакции на препарат соответствовала 0 баллов. Никаких других признаков, свидетельствующих о раздражающем действии препарата не отмечали.

Следовательно, новомек не проявил раздражающего действия при нанесении на кожу и слизистые оболочки животных.

Результаты изучения аллергизирующих свойств новомека указывают на то, что препарат в испытанной дозе не обладает антигистаминной активностью, так как не предотвращает смерть животных от введённой дозы гистамина, а также и не ускоряет её, что указывало бы о гистаминном аллергизирующем действии.

При введении гистамина морским свинкам через 6 и 12 часов после введения новомека время наступления гистаминного шока у подопытных и контрольных морских свинок не отличалось (Р > 0,05). Таким образом, новомек не обладает аллергизирующим действием.

Эмбриотропные свойства новомека. Результаты изучения возможного эмбриотропного действия новомека при введении самкам крыс в различные периоды беременности позволяют сделать вывод о том, что новомек не оказывает отрицательного влияния на эмбриональное развитие плода. Так, при введении новомека в течение всей беременности (сводные данные по трём периодам беременности) общая эмбриональная смертность составила 13,0+0,92% в подопытной группе против 13,4+1,10 в контроле (Р > 0,05).

Об отсутствии эмбриотоксического эффекта новомека свидетельствуют показатели массы и размера плодов. Так, при введении новомека в разные периоды беременности не изменялась масса плодов. При исследовании плодов не выявлено наличия внешних аномалий развития черепа, глаз ушных раковин, брюшной стенки, конечностей, хвоста. Нами не установлено нарушений топографии крупных сосудов (артерий и вен), сердца, лёгких, органов брюшной полости.

На черепе отмечали симметричность расположения анатомических структур нижней челюсти, переднего отдела твёрдого нёба, носовой полости глазных яблок и обонятельных луковиц, больших полушарий головного мозга, мозжечка и продолговатого мозга.

На срезах у подопытных и контрольных объектов отмечена идентичность топографии органов. Также не отмечали дефектов скелета.

Размеры зачатков лопаточной, плечевой, локтевой, лучевой, а также бедренной, большой и малой берцовых костей у подопытных и контрольных плодов находились в близких пределах (Р > 0,05).

Таким образом, новомек в форме 1%-ного раствора в терапевтической дозе (0,2 мг/кг) не обладает эмбриотоксичским и тератогенным свойствами при ежедневном введении белым крысам в разные сроки беременности.

Влияние новомека на клинико-гематологические и биохимические показатели крупного рогатого скота. Полученные результаты свидетельствуют о том, что колебания показателей клинического состояния подопытных животных, получавших новомек в терапевтической (0,2 мг/кг) и в три раза увеличенной (0,6 мг/кг) дозах, были в пределах физиологической нормы крупного рогатого скота и существенно не отличались от клинического состояния этих животных до получения препарата, а также от тёлок контрольной группы.

После введения новомека в пять раз увеличенной дозе (1,0 мг/кг) у одной из пяти тёлок отмечали угнетённое состояние в течение первых суток после лечения. На вторые сутки после лечения новомеком в 5-кратной дозе отклонений в общем клиническом состоянии животных не отмечали.

Колебания в количестве эритроцитов, лейкоцитов в 1 мкл крови, содержание гемоглобина и в лейкограмме крупного рогатого скота подопытных групп в течение всего периода исследований были в пределах нормы и существенно не отличались от показателей животных контрольной группы.

Результаты биохимических исследований показали, что новомек в терапевтической (0,2 мг/кг) и в 3 раза увеличенной дозе не оказывал существенного влияния на показатели. После введения новомека в 5 раз увеличенной дозе (1,0 мг/кг) отмечали значительное повышение активности щелочной фосфатазы и амилазы в крови крупного рогатого скота (Р < 0,05) на первые сутки после инъекции.

На основании полученных результатов определён химиотерапевтический индекс новомека при подкожном введении - равный пяти.

Таким образом, новомек является безопасным препаратом для организма крупного рогатого скота.

Комиссионные и производственные испытания новомека при паразитарных болезнях животных. Результаты комиссионного испытания новомека при гиподерматозе крупного рогатого скота (весенняя химиотерапия) показали высокую эффективность. Получена 100%-ная эффективность новомека в дозе 10 мкг/кг при подкожном введении и 100%-ная эффективность при внутрикожном введении в дозе 8 мкг/кг.

Препарат хорошо переносился животными и не вызывал проявления местной реакции. На месте внутрикожного введения препарата образовывался небольшой пузырёк. Через некоторое время (6 - 10 часов) пузырёк рассасывался. Животные во время обработки находились на привязи и не проявляли беспокойства.

Результаты комиссионных испытаний новомека для ранней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота показали 100%-ную эффективность.

Проведённые испытания показали возможность применения 1%-ного новомека для ранней и поздней химиотерапии гиподерматоза крупного рогатого скота, как при подкожном, так и при внутрикожном способе введения.

Результаты комиссионного испытания новомека при диктиокаулёзе телят свидетельствуют о 100%-ной эффективности новомека в дозе 10 мкг/кг при подкожном введении и в дозе 8 мкг/кг при внутрикожном применении с помощью безигольного инъектора, а также при псороптозе крупного рогатого скота подкожно двукратно с интервалом 8 суток в дозе 0,2 мг/кг, гематопинозе крупного рогатого скота в дозе 0,2 мг/кг и саркоптозе свиней в дозе 0,3 мг/кг двукратно с интервалом 8 суток.

Таким образом, новомек при комиссионных и производственных испытаниях показал высокую эффективность и безопасность в применении для организма животных. Полученные результаты позволяют рекомендовать препарат для применения в ветеринарной практике.

2.5 Эффективность акаромектина при паразитозах плотоядных

Для лечения заболеваний плотоядных, вызванных эктопаразитами, нами разработана лекарственная форма ивермектина - акаромектин в форме 0,01%-ного раствора для наружного применения.

Результаты испытания акаромектина при саркоптозе собак двукратно с интервалом 7 суток показали 100%-ную эффективность. Акаромектин при однократном применении оказал 85,7%-ный эффект. Следует отметить, что через 7 суток после повторной обработки собак отмечено улучшение клинического состояния животных. На поражённых местах отмечали рост волосяного покрова.

Таким образом, при саркоптозе собак рекомендуем применять акаромектин двукратно с интервалом 7 суток, что обеспечивает полное освобождение собак от клещей Sarcoptes canis.

Испытания акаромектина в 0,01%-ной концентрации при одно- и двукратном с интервалом 7 суток применении при клиническом проявлении отодектоза кошек показали 100%-ную эффективность.

После однократной обработки улучшение клинического состояния кошек и освобождение от клещей Otodectes cati отмечали у 60% животных. Количество клещей снизилось на 84,0%.

Испытания акаромектина двукратно с интервалом 8 суток показали 100%-ную эффективность против клещей Notoedres cati и блох Ctenocephalides canis. Через 14 суток после применения акаромектина при демодекозе собак отмечено улучшение состояния поражённых участков кожи собак. Получена 93,6%-ная эффективность препарата при пятикратной с интервалом 8 суток обработке собак при демодекозе.

2.6 Эффективность отодектина при паразитозах плотоядных

Отодектин в форме 0,1%-ного раствора ивермектина предназначен для подкожного применения на плотоядных.

Результаты изучения эффективности отодектина против эктопаразитов плотоядных свидетельствуют о высокой эффективности отодектина при двукратном применении в дозе 200 мкг/кг. Получена 100%-ная эффективность препарата при отодекозе кошек, саркоптозе собак, нотоэдрозе кошек и ктеноцефалидозе собак.

Эффективность двукратного применения отодектина в дозе 200 мкг/кг составила при демодекозе собак 80,5%. В связи с этим, рекомендуем отодектин применять при демодекозе в сочетании с накожными акарицидами и более продолжительным курсом лечения.

Отодектин в испытанной дозе при однократном введении показал 100%-ную эффективность при токсокарозе кошек, токсаскаридозе собак и унцинариозе собак. После лечения животных при указанных гельминтозах яиц этих гельминтов в фекалиях собак и кошек не обнаруживали. Отодектин проявил 99,7%-ную эффективность при токсокарозе и анкилостомозе собак.

Таким образом, отодектин в дозе 200 мкг/кг при двукратном применении показал 100%-ную эффективность при отодектозе, саркоптозе, нотоэдрозе и ктеноцефалидозе плотоядных и при однократном применении при токсокарозе кошек, собак, токсаскаридозе и унцинариозе собак. Получена 99,7%-ная эффективность при токсокарозе собак и 99,8%-ная - при анкилостомозе собак. Эффективность препарата при демодекозе собак составила 80,5%.

2.7 Эффективность и фармакотоксикологические свойства циперила

2.7.1 Испытание циперила при псороптозе овец

Циперил представляет собой лекарственную форму в виде 5 и 10%-ного раствора циперметрина для наружного применения против эктопаразитов.

Результаты испытания циперила при псороптозе овец методом купки свидетельствуют о различной степени эффективности препарата в разных концентрациях.

Через 7 суток после купки овец в ваннах с 0,004%-ным раствором циперила освободилось от клещей только 13 из 17 обработанных овец. Численность клещей P. ovis снизилась на 89,0%.

100%-ная эффективность циперила против клещей P. оvis была получена при купке овец в 0,006%-ной концентрации. У всех обработанных овец эктопаразитов не обнаруживали.

Получена высокая эффективность циперила при псороптозе овец в 0,005%-ной концентрации. 17 обработанных овец полностью были свободны от P. оvis. Эффективность препарата в этой концентрации составила 100%. На поражённых участках кожи исчезли признаки воспаления, отмечали отторжение корочек.

Таким образом, концентрацию циперила, равную 0,005% по ДВ, считаем оптимальной для купки овец и рекомендуем для дальнейшего применения как терапевтическую при псороптозе овец.

Результаты изучения эффективности циперила при псороптозе овец методом опрыскивания свидетельствуют о высокой эффективности препарата в 0,02 и 0,0125%-ной концентрации.

Через 7 суток после повторного опрыскивания овец циперилом в 0,02 и 0,0125%-ной концентрации с нормой расхода на животное 2 л все овцы полностью освободились от клещей P. оvis. Получена 100%-ная эффективность.

Эффективность циперила в 0,0075%-ной концентрации при опрыскивании поражённых клещами овец составила 94,3%.

Таким образом, концентрацию циперила, равную 0,0125% по ДВ, считаем оптимальной для опрыскивания овец и рекомендуем для дальнейшего применения как терапевтическую при псороптозе овец.

2.7.2 Испытание циперила при саркоптозе свиней

Результаты испытания циперила при саркоптозе свиней свидетельствуют о разнице в его эффективности при применении в разной концентрации методом опрыскивания. Результаты исследований показали, что циперил в 0,02%-ной концентрации, обладает при двукратном с интервалом 10 суток применении 100%-ной эффективностью. Препарат в 0,0075%-ной концентрации показал недостаточный эффект против клещей Sarcoptes suis, равный 87,1%. Оптимальной ожидалась концентрация циперила, равная 0,0125%. Через 7 суток после повторного опрыскивания свиней 0,0125%-ной водной эмульсией циперила получена 100%-ная эффективность. В связи с этим, эта концентрация циперила является наиболее рациональной, и её рекомендуем для применения при саркоптозе свиней.

2.7.3 Эффективность циперила против иксодовых клещей на крупном рогатом скоте

Результаты испытания циперила при иксодидозах крупного рогатого скота указывают на различную степень эффективности препарата в разных концентрациях.

По результатам учёта обнаруженных клещей циперил в 0,004%-ной концентрации, показал 86,8%-ную эффективность против иксодовых клещей. Только 13 из 16 коров полностью освободились от клещей после повторного опрыскивания. Через 7 суток после опрыскивания коров циперилом в 0,006 и 0,005%-ной концентрации клещей на крупном рогатом скоте не находили и следовательно, эффективность составила 100%.

Исходя из полученных результатов, рекомендуем при искодидозах крупного рогатого скота применять циперил с интервалом 10 суток в 0,005%-ной концентрации, которую считаем как оптимальную, обеспечивающую высокую эффективность.

2.7.4 Испытание циперила против эктопаразитов в птичниках

Результаты испытания циперила в форме 0,0125%-ной водной эмульсии при обработке птичника против клещей Dermanyssus gallinae указывают на высокую его эффективность. Через 7 суток после обработки помещений циперилом клещей не обнаруживали как на птице, так и в помещении.

Эффективность 0,0125%-ной водной эмульсии циперила против мух в помещении птичника через 7 суток составила 100%.

Таким образом, циперил высокоэффективен в испытанных концентрациях против мух и клещей Dermanyssus gallinae в птицеводческих помещениях.

2.7.5 Оценка острой токсичности циперила

После введения мышам циперила в дозе 1000 мг/кг не отмечали признаков токсического действия препарата. Аналогичные результаты получены и на крысах при введении препарата в желудок в дозе 3000 мг/кг. У животных не отмечали изменений в поведении и состоянии после введения препарата в этих дозах.

При повышении дозы препарата до 1500 мг/кг через 1-2 часа у животных начали отмечать признаки интоксикации, выражающиеся в беспокойстве животных и нарушении координации движений. От этой дозы пало две мыши из 10.

При дальнейшем повышении дозы препарата признаки интоксикации проявлялись более выражено. Увеличилась гибель животных - она составила после введения препарата в дозе 2000, 2500 и 3000 мг/кг соответственно 50, 80 и 100%.

Токсическое действие циперила на белых крысах было менее выражено и проявилось через 2-3 часа нарушением координации движений и гибелью животных. После введения крысам циперила в дозе 3500, 4000, 4500 и 5000 мг/кг пало соответственно 1, 3, 4, и 6 из 6 животных. Гибель крыс от токсических доз препарата отмечали в первые 1-3 суток после введения.

Установлено, что ЛД₅₀ препарата при введении в желудок для мышей составила 2320, а для крыс - 4160 мг/кг.