Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите у коров

12

56

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ДИОКСИДИНА И ДОКСИЦИКЛИНА И ИХ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ МАСТИТЕ У КОРОВ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Воспаление молочной железы - мастит у коров имеет широкое распространение и наносит огромный экономический ущерб за счет снижения удоев, санитарных и технологических качеств молока, преждевременной выбраковки высокопродуктивных коров, заболеваемости новорожденных телят, затрат на лечение больных животных (Д.Д. Логвинов с соавт., 1970; Г.В. Зверева, 1971; В.И. Мутовин, 1974; Н.К. Оксамитный, 1982; В.И. Беляев с соавт., 1983; И.С. Загаевский, 1986; А.П. Солдатов, 1986; М.Г. Миролюбов, 1988; В.Я. Никитин, 1988; В.А. Париков, 1990; А.Я. Батраков, 1991; В.И. Слободяник, 1994; Г.Н. Кузьмин, 1995; В.В. Подберезный, 1995; Л.К. Попов, 1998; Н.Г. Гасанов, 1999; Л.Д. Демидова, 2002; В.П. Родин, 2002).

По данным Национального Совета по маститу США общий ущерб, наносимый этой болезнью, складывается из снижения молочной продуктивности - 70%, преждевременной выбраковки коров - 14%, ухудшения качества молока - 8%, увеличения расходов на лечение - 8%.

Наибольшую хозяйственно-экономическую проблему представляет субклинический мастит, встречающийся в 2-7 раз чаще, чем клинически выраженный. Он может регистрироваться у 20-80% лактирующих коров (В.А. Париков с соавт., 2000; В.К. Копытин с соавт., 2002).

Отечественной наукой и практикой достигнуты определенные успехи в решении проблемы мастита у животных. Разработаны и внедряются в производство методы ранней диагностики, профилактики и лечения данного заболевания путем применения различных антимикробных препаратов и физиотерапевтических средств (В.А. Париков, 1990; В.И. Слободяник, 1994; В.П. Иноземцев 1997).

Вместе с тем, несмотря на имеющиеся достижения, проблема мастита продолжает оставаться одной из актуальных для ветеринарной науки и практики. Длительное и повсеместное, а порой бессистемное применение химиотерапевтических средств, привело к снижению эффективности лечения данного заболевания из-за образования лекарственно устойчивых штаммов микроорганизмов, вызывающих развитие воспалительного процесса (В.М. Ивченко, 1988; В.И. Слободяник с соавт., 1994; Г.Н. Кузьмин, 1995; А.И. Ивашура с соавт., 1998; В.Л. Юрков с соавт., 2001; В.Ю. Коптев с соавт., 2002 и др.).

В то же время, в борьбе с маститом практически нельзя обойтись без применения антимикробных средств, поскольку основными возбудителями заболевания являются различные патогенные микроорганизмы, к тому же часто обладающие полирезистентностью к большинству антибиотиков. Поэтому в решении проблемы профилактики и лечения этого заболевания в современных условиях разведения молочного скота необходимы дальнейшие исследования по изучению этиологической структуры мастита, выявлению связей между степенью микробной обсемененности молочной железы и выраженностью воспалительного процесса, разработке новых более эффективных антибактериальных препаратов и их фармако - токсикологической оценке в соответствии с современными требованиями. Крайне необходимо формирование новых подходов к использованию антимикробных средств в зависимости от степени пораженности молочных стад маститом и новых принципов антибактериальной терапии, включая выбор оптимальных доз, продолжительности курса лечения.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы является изучение и разработка новых средств и способов фармакотерапии и фармакопрофилактики мастита у коров. Для её достижения были поставлены следующие задачи:

1. Изучить распространение, формы проявления и этиологическую структуру мастита у коров в хозяйствах различных регионов России.

2. Установить показатели бактерицидности и микробной обсемененности кожи вымени у клинически здоровых коров и при заболевании субклиническим маститом.

3. Выявить эффективность использования средств неспецифической патогенетической терапии при субклиническом мастите у коров.

4. Обосновать состав и разработать препараты для лечения мастита у коров в период лактации на основе диоксидина, изучить их фармако-токсикологические свойства и терапевтическую эффективность.

5. Разработать препараты на основе доксициклина для профилактики мастита у коров и дать им фармако-токсикологическую оценку.

6. Разработать новые принципы оздоровления молочных стад от мастита в зависимости от уровня заболеваемости коров.

Научная новизна. Выявлено значение технологических факторов и патогенной микрофлоры в развитии воспалительного процесса в молочной железе при разной степени пораженности коров маститом. Показано, что преобладающим возбудителем заболевания является агалактийный стрептококк и золотистый стафилококк (в монокультуре и в ассоциациях), а также энтерококки. Впервые определена взаимосвязь микробной обсемененности молочной железы и заболеваемости коров маститом с бактерицидными свойствами кожи вымени. Созданы комплексные антибактериальные препараты на основе диоксидина - диофур, диеномаст и линдомаст для лечения коров, больных маститом, в период лактации и комплексные препарты пролонгированного действия на основе доксициклина - доксимаст и неодоксимаст для профилактики данного заболевания. Показано синергидное антибактериальное действие компонентов разработанных препаратов, дана их фармако-токсикологическая и клиническая оценка. Определена перспективность использования созданных препаратов в ветеринарной практике.

Определена эффективность терапии коров, больных субклиническим маститом, общестимулирующими патогенетическими средствами.

Научная новизна подтверждена тремя патентами на изобретения: (№2048805, №2350332 и №2367433).

Практическая значимость и реализация результатов исследований. На основании результатов исследований разработаны и предложены производству эффективные антибактериальные препараты (диофур, диеномаст, линдомаст) и способ лечения мастита у коров в период лактации, обеспечивающие выздоровление соответственно 93,6 и 83,7% животных, а также для его профилактики (доксимаст, неодоксимаст), позволяющие предупредить развитие мастита у 92,4 - 97,0% коров.

Материалы исследований вошли в «Комплексную экологически безопасную систему ветеринарной защиты здоровья животных», - М., 2000; «Методические рекомендации по диагностике, терапии и профилактике мастита у коров», одобренные бюро Отделения ветеринарной медицины РАСХН 1 июня 2005 г. (протокол №3), а также в нормативную документацию и наставление по применению диофура в ветеринарии, утвержденного 1 июня 1999 г. (регистрационный номер ПВР -2-1.9/00081) и Инструкцию по применению диеномаста для лечения мастита у коров, утвержденную 18 июня 2007 г. (регистрационный номер ПВР_2-0.2/01043).

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены и одобрены на: VIII Всероссийском симпозиуме по машинному доению сельскохозяйственных животных (Оренбург, 1995); Международной научно-практической конференции, посвященной 35_летию организации ВНИВИПФиТ «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (Воронеж, 2005); Международной научно-производственной конференции, посвящённой 100_летию со дня рождения проф. А.А. Авророва «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006); Республиканской научно-производственной конференции посвященной 90_летию со дня рождения И.Ф. Заянчковского «Актуальные проблемы физиологии и патологии размножения животных» (Уфа, 2007); 1_ом съезде ветеринарных фармакологов России «Достижения ветеринарной науки - на вооружение практическому животноводству» (Воронеж, 2007); научно-практической конференции «Проблемы повышения продуктивного долголетия животных» (Курган, 2007); XIV международном симпозиуме по машинному доению сельскохозяйственных животных (Углич, 2008); Международной научно-практической конференции, посвящённой 100_летию со дня рождения проф. В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных» (Воронеж, 2009); Международной научно-практической конференции, посвященной 35_летию образования факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета «Достижения современной ветеринарной науки и практики в области охраны здоровья животных» (Краснодар, 2009).

Публикации. Основные научные результаты, включенные в диссертацию, опубликованы в 35 печатных работах, в том числе в 10 статьях ведущих научных журналов, рекомендованных ВАК Минобразования РФ, 2 монографиях и в 3 патентах.

Основные положения, выносимые на защиту:

- этиологическая структура мастита у коров в зависимости от уровня их заболеваемости;

- бактерицидность и микробная обсемененность кожи вымени клинически здоровых лактирующих коров и при заболевании их маститом;

- фармако-токсикологическая и клиническая характеристика комплексных антимикробных препаратов на основе диоксидина для терапии мастита у коров в период лактации;

- фармако-токсикологическая оценка и клиническая характеристика антибактериальных препаратов на основе доксициклина для профилактики мастита у коров;

- этапная фармакотерапия и фармакопрофилактика в комплексной системе оздоровления молочных стад от мастита.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 271 страницах текста в компьютерном исполнении, включает обзор литературы, материал и методы исследований, результаты собственных исследований и их анализ, выводы, практические предложения, список литературы, содержащий 531 источник, в том числе 169 зарубежных авторов, и приложения. Диссертация содержит 69 таблиц и 18 рисунков.

2. Материал и методы исследований

Научные исследования выполнены в 1990-2008 гг. в соответствии с планом научно-исследовательских работ Всероссийского НИВИ патологии, фармакологии и терапии по заданиям: 04.03 (номер гос. регистрации 01.9.40.00.75.89), 04.03 Д (номер гос. регистрации 01.9.90001257), 04.01.03 (номер гос. регистрации 01.200.117018), 08.04. (номер гос. регистрации 15070.36660226906).

Для изучения степени распространения и форм проявления мастита у коров проведено клиническое обследование 7355 коров 15 хозяйств Белгородской, Воронежской, Липецкой и Орловской областей. Диагноз на заболевание устанавливали в соответствии с «Наставлением по диагностике, терапии и профилактике мастита у коров» (М., 2000).

Этиологическая структура мастита у коров изучалась путём бактериологического исследования секрета из 112 пораженных маститом долей вымени в соответствии с «Методическими указаниями по бактериологическому исследованию молока и секрета вымени коров» (М., 1983).

Изучение бактерицидности и микробной обсеменённости кожи вымени у здоровых и больных маститом коров во взаимосвязи с показателями титра лизоцима М и количества соматических клеток в молоке и секрете выполнено на 30 коровах. Бактерицидные свойства кожи вымени определяли по методике Н.Н. Клемпарской и О.Г. Алексеевой (1959) в модификации А.А. Гинзбург (1976), титр лизоцима М по В.И. Мутовину (1974), подсчёт соматических клеток на приборе «Фоссоматик».

Разработка рационального метода патогенетической терапии у коров с использованием ПДЭ, АСД_2Ф и витаминных препаратов проведена на 244 животных. Использовали клинические, бактериологические и иммунологические методы. Определение суммарных иммуноглобулинов осуществляли цинк-сульфатным методом (М.А. Воловенко, 1975).

Разработка новых антибактериальных препаратов на основе диоксидина и доксициклина осуществлялась на основе определения антимикробной активности отдельных компонентов и различных сочетаний, определения их фармакодинамики и фармакокинетики.

Антимикробную активность изучали методом серийных разведений (В.И. Антонов, 1981) и дисков в отношении референтных и полевых штаммов микроорганизмов - основных возбудителей мастита.

Изучение острой и хронической токсичности препаратов проведено общепринятыми методами (М.П. Беленький, 1963; И.В. Саноцкий, 1970; О.Н. Елизарова, 1971) на половозрелых нелинейных разнополых белых мышах с массой тела 20-22 г. (n=660), белых крысах с массой тела 110-220 г. (n=800).

Общетоксическое действие препаратов оценивали по динамике массы тела животных при взвешивании 1 раз в неделю, гематологическим показателям и состоянию системы гомеостаза - по окончании курса инъекций и через неделю восстановительного периода.

Гематологические исследования проведены по общепринятым методам, биохимические - в соответствии с «Методическими указаниями по применению унифицированных биохимических методов исследований крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях» (М., 1981).

Раздражающее действие препаратов на кожу изучали на кроликах методом кожных и конъюнктивальных проб, а их аллергенные свойства определяли с помощью кожно-провокационной пробы (О.Л. Алексеева, Л.А. Дуева, 1978).

Влияние препаратов, разработанных на основе диоксидина, на молочную железу лактирующих коров изучено на 9 клинически здоровых коровах на 3-5 месяце лактации.

Исследования по установлению времени нахождения компонентов препаратов в секрете молочной железы, крови и моче проведены на 18 лактирующих коровах. В секрете молочной железы, крови и моче определеляли содержание диоксидина, фурациллина, гентамицина сульфата и линкомицина гидрохлорида, входящих в состав препаратов, через 12; 24; 36; 48; 60; 72 и 96, 120 часов после их введения. Определение содержания гентамицина сульфата и линкомицина гидрохлорида проводили микробиологическими методами диффузии в агар, а концентрацию диоксидина и фурацилина - хроматографически. При проведении исследований руководствовались «Методическими указаниями по определению остаточных количеств антибиотиков в продуктах животноводства» №3049-84 от 29.06.84.

Клинико-фармакологическая оценка разработанных препаратов и их компонентов проведена на 138 коровах, больных субклиническим маститом, и 117 коровах, больных клинически выраженным катаральным маститом на базе ЗАО «Манино Воронежской, ЗАО «Должанское» и ОАО «Роговатовская Нива» Белгородской, СПК «Здоровецкий» и АОНП «Успенское» Орловской областей.

Препараты вводили внутрицистернально по 10 мл один раз в сутки в течение 3-4 дней. Оценка эффективности лечения осуществлялась путем клинического обследования молочной железы, количественного определения соматических клеток в молоке методом Прескотта-Брида, а также с использованием счетчика соматических клеток DCC фирмы ДеЛаваль и постановки пробы отстаивания.

Терапевтическая эффективность диофура определена на 72 коровах, больных субклиническим (n=36) и клинически выраженным катаральным маститом (n=36) в сравнении с мастисаном А и 1% диоксидином.

Определение эффективности применения диеномаста и его компонентов для терапии субклинического и клинически выраженного катарального мастита проведено на 81 больных коровах.

Изучение терапевтической эффективности линдомаста и его компонентов проведено на 102 больных субклиническим и клинически выраженным катаральным маститом.

Производственная оценка эффективности диофура, диеномаста и линдомаста проведена на 642 больных маститом коровах (199 - субклиническим, 171 - клиническим выраженным катаральным, 143 - гнойно-катаральным и 129 - серозным).

Изучение эффективности применения доксимаста для профилактики мастита в послеродовый период проведено в сравнении с препаратом септогель на 370 коровах переводимых в сухостой. Препараты вводили внутрицистернально однократно после последнего доения.

Изучение эффективности применения неодоксимаста для профилактики мастита у коров после отела проведено на 80 коровах, разделенных по принципу аналогов на 4 группы. Животным первой группы (n=20) после последнего доения однократно внутрицистернально вводили неодоксимаст в дозе 10 мл, второй (n=20) - септогель, третьей (n=20) - орбенин ДС согласно наставлений по их применению, коровы четвертой группы (n=20) - служили в качестве отрицательного контроля и им препарат не вводили.

Профилактическую эффективность доксимаста и неодоксимаста определяли в первый день после отела по результатам исследования секрета молочной железы с 2% раствором мастидина и пробой отстаивания.

Гематологические, биохимические, иммунобиологические, бактериологические, фармакологические и токсикологические исследования проведены совместно с сотрудниками других подразделений института, за что автор выражает им свою признательность и благодарность.

Полученный цифровой материал подвергали математической обработке с помощью программы ExStat на ЭВМ РС АМD K7-800 Athlon.

Экономическую эффективность лечебно-профилактических мероприятий оценивали по «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (М., МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 1997).

3. Результаты собственных исследований

Распространение и формы проявления мастита у коров в хозяйствах с различной технологией их содержания и использования

Установлено, что заболеваемость коров маститом в хозяйствах различная и колеблется от 7,1 до 60,3%. В целом из 7355 обследованных коров мастит диагностирован у 2598 животных, что составляет 34,9%. На долю субклинического мастита приходится 79,1% и на долю клинически выраженного - 20,9%.

При этом следует отметить, что в хозяйствах с уровнем молочной продуктивности свыше 6500 кг заболеваемость маститом наименьшая и составляет в среднем 15,26%, менее 4500 кг ? наибольшая - 46,78%, от 4500 кг до 6500 кг молока - 35,93%. То есть, чем ниже заболеваемость коров маститом, тем выше их молочная продуктивность.

Заболеваемость маститом коров чёрно-пестрой породы составила 32,51%, а симментальской - 41,23%. При этом заболеваемость коров черно-пёстрой породы с уровнем продуктивности 6000 кг и выше составила 20,3%, а 4600 кг и менее - 53,05%, а коров симментальской породы с продуктивностью более 5000 кг ? 35,80%, 4300 кг и менее ? 43,0%.

Нами также установлено, что при привязном содержании и доении коров на линейной доильной установке заболеваемость маститом составляет 37,3%, при беспривязном содержании и доении в доильных залах, оснащенных в основном импортной доильной техникой, - 30,3%. При грубых нарушениях в технологии машинного доения заболеваемость животных маститом возрастает до 52,5%, а при соблюдении технологии доения составляет менее 10,0%.

По уровню заболеваемости коров сельхозпредприятия (молочные фермы) можно разделить на три группы: первая ? заболеваемость превышает 30%, вторая - составляет 10-30% и третья ? менее 10%.

Наибольшая заболеваемость коров маститом (более 30%) отмечена в период лактации и при запуске. Особенно это выражено в тех хозяйствах, где недостаточно внимания уделяется диагностике и профилактике этого заболевания, а также соблюдению технологии доения независимо от использованных доильных систем (запоздалое или преждевременное подключение доильного аппарата, несвоевременное снятие доильных стаканов с вымени, использование изношенной сосковой резины). В то же время при полном соблюдении технологии машинного доения и отсутствии погрешностей в работе доильной техники уровень заболеваемости маститом составляет менее 10%, при времени доения одной коровы не более 5 минут.

Проведенными исследованиями установлено, что при отсутствии антисептической обработки сосков вымени коров после доения заболеваемость маститом в среднем составила 35,2%, а при её наличии - 22,6%. Это свидетельствует как о необходимости проведения данной процедуры, так существенной роли микрофлоры в возникновении и развитии воспалительного процесса в молочной железе.

Также следует отметить, что даже при соблюдении технологии доения коров на самом современном доильном оборудовании, заболеваемость маститом при ежемесячном обследовании составляет 7,1-9,3%, что также указывает на ведущую роль микрофлоры окружающей среды в этиологии мастита.

Этиологическая структура мастита у коров

Бактериологическими исследованиями 112 проб секрета пораженных маститом долей вымени выделено 121 культура микроорганизмов 15 видов и один вид микроскопических грибов. Из числа выделенных культур 54,9% представлены грамположительными кокками, а остальные 45,1% - представителями семейства Enterobacteriaceae и Ps. aeruginosa. Доминирующими были стафилококки - 28,6%, стрептококки - 22,6% и энтерококки - 19,2%. Монокультуры выделены в 59,3%, в том числе Str. аgalactiae - 19,1%, Staph. аureus - 16,5%, Ent. faecium ? 15,7%, Str. dysgalactiae - 3,5%, Staph. haemolyticus - 2,6% и Staph. epidermidis - 1,7%.

Такие микроорганизмы как Ps. aeruginosa, Staph. saprophyticus, Ent. aerogenes, C. diversus выделены в ассоциациях со стафило- и стрептококками, реже друг с другом в 40,9%.

При анализе данных бактериологических исследований от больных маститом коров установлено (табл. 1), что этиологическая структура несколько различается.

Таблица 1. Контаминация секрета вымени в зависимости от уровня заболеваемости коров маститом

Возбудитель	Заболеваемость, %
	до 10	10-30	свыше 30
	проб	%	проб	%	проб	%
Staph. aureus	2	13,3	13	30,9	4	7,3
Staph. haemolyticus	2	13,3	1	2,4	-
Staph. epidermidis	-	-	-	-	2	3,6
Str. agalactiae	7	46,7	15	35,7	-
Str. dysgalactiae	-	-	4	9,5	-
Ent. faecalis	-	-	1	2,4	9	16,3
Staph. aureus + Str. agalactiae	4	26,7	2	4,8	-
Staph. aureus + Ps. aerug.	-	-	-	-	8	14,5
Staph. sapr. + Ps. aerug.	-	-	-	-	4	7,3
Ent. faecalis + Klebsiella	-	-	-	-	1	1,8
Ent. faecium + C. diversus	-	-	-	-	1	1,8
Ent. faecium +Ent. aerogenes	-	-	-	-	3	5,5
Ent. aerogenes + C. diversus	-	-	-	-	1	1,8
E. сoli	-	-	-	-	4	7,3
E. сoli + C. diversus	-	-	-	-	2	3,6
Micrococcus	-	-	2	4,8	-
Citrobacter diversus	-	-	-		3	5,5
Сandida	-	-	-		3	5,5
Микрофлора не выделена	-	-	4	9,5	10	18,2
Всего	15		42		55

Так, при заболеваемости маститом коров менее 10%, патогенная микрофлора выделена в 100% случаев: Staph. aureus ? 13,3%, Staph. haemolyticus ? 13,3%, Str. agalactiae ? 46,7%, смешанная микрофлора (Staph. aureus + Str. agalactiae) ? 26,7%.

В сельхозпредприятиях, где заболеваемость коров маститом составляет 10-30%, установлен рост микрофлоры в 90,5% случаев (38 проб), которая была представлена патогенными стрепто - и стафилококками (Str. agalactiae - 35,7%, Staph. aureus - 30,9%, Staph. haemolyticus ? 2,4%, и их ассоциациями ? в 4,8%), а также Micrococcus - 4,8%, Str. dysgalactiae - 9,5%, Ent. faecalis ? 2,4%, не являющиеся основными патогенами молочной железы. Таким образом, в хозяйствах, где уровень заболеваемости маститом составляет 10-30%, патогенная микрофлора выделена в 73,8% проб секрета вымени и условно-патогенная - 16,7%.

При заболеваемости коров маститом свыше 30% микрофлора выделена из 81,8% случаев. Из выделенных культур на долю патогенных приходилось 32,7% (Staph. aureus в монокультуре -7,3% и в ассоциации с Ps. aeruginosa - 14,5%; E. сoli в монокультуре - 7,3%; E. сoli + C. diversus - 3,6%), условно-патогенных - 23,6% (Ent. faecalis - 16,3%; Ent. faecalis+ Klebsiella - 1,8; Citrobacter ? 5,5%), сапрофитных -20,0% (Staph. saprophyticus + Ps. aeruginosa - 7,3%; Staph. epidermidis - 3,6% Ent. Аerogenes + C. diversus - 1,8%, Ent. faecium + C. diversus ? 1,8%; Ent. faecium + Ent. aerogenes - 5,5%;) и грибы (Сandida) - 5,5%.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что при уровне заболеваемости коров маститом до 10%, из всех проб секрета вымени выделена патогенная кокковая микрофлора, как в монокультуре (Str. agalactiae ? 46,7%, Staph. aureus ? 13,3%, Staph. haemolyticus ? 13,3%), так и ассоциации (Staph. aureus + Str. agalactiae ? 26,7%).

При уровне заболеваемости от 10% до 30% ? кроме патогенной микрофлоры (73,8%), выделена и условно-патогенная ? 16,7%, в 9,5% проб микрофлора отсутствовала.

При уровне заболеваемости коров маститом свыше 30% патогенная микрофлора (Staph. aureus, E. сoli) выделена в 32,7% случаев, условно-патогенная (C. diversus, Ent. faecalis,) - 23,6%, в 20,0% сапрофитная (Staph. saprophyticus, Staph. epidermidis, Ent. аerogenes, Ps. aeruginosa), грибы (Саndida) ? 5,5%, и в 18,2% проб микрофлора отсутствовала.

Следовательно, в сельхозпредприятиях с уровнем заболеваемости коров маститом до 30% основным фактором вызывающим развитие мастита (100-90,5%) является воздействие на молочную железу патогенной и условно-патогенной микрофлоры с преобладанием стафило - и стрептококков (73,8%-100%), среди которых доминировали Str. agalactiae и Staph. aureus как в монокультуре, так и в ассоциациях.

В сельхозпредприятиях с более высоким уровнем заболеваемости маститом основными факторами, способствующими его возникновению, являются грубые нарушения в технологии машинного доения коров с последующим инфицированием молочной железы не только патогенной и условно-патогенной, но даже сапрофитной микрофлорой. Кроме того, отсутствие микрофлоры в 17,2% случаев свидетельствует о том, что вначале мастит начинает развиваться как асептический, а затем при инфицировании микрофлорой ? как инфекционный процесс различной степени тяжести.

Выявленная нами роль технологических факторов и патогенной микрофлоры в степени проявления патологических реакций со стороны молочной железы свидетельствует о необходимости выработки более рациональных подходов к решению проблемы терапии и профилактики воспалительных заболеваний данного органа. Разрабатываемые программы по снижению заболеваемости коров маститом должны учитывать особенности каждого сельхозпредприятия и степень заболеваемости маститом.

Бактерицидность и микробная обсемененность кожи вымени здоровых и больных маститом коров

Изучение бактерицидности кожи молочной железы у коров проведено нами при разном её функциональном состоянии.

Установлено, что бактерицидность кожи вымени у клинически здоровых животных в различные функциональные периоды молочной железы снижается от начала лактации к запуску. Так, наибольшая величина индекса бактерицидности кожи отмечена нами в первую неделю после родов 91,8±2,0%. С началом лактации индекс бактерицидности снижается до 87,8±2,4% и остается практически неизменным до середины лактации. В конце лактации бактерицидность кожи уменьшается до 79,7±2,3% (Р<0,05), что на 12,1% ниже уровня этого показателя в первую неделю после родов. У запускаемых коров отмечается тенденция дальнейшего снижения этого показателя по сравнению с лактирующими коровами, что связано вероятно, с ослаблением активности всей системы неспецифической резистентности.

При изучении показателей естественной резистентности молочной железы и микробной обсемененности её кожи у клинически здоровых и больных маститом лактирующих коров установлено, что у коров, больных субклиническим маститом, из секрета пораженных долей выделены патогенные микроорганизмы, количество соматических клеток достигало 6585,0± 133,5 тыс./мл, индекс бактерицидности кожи вымени данных долей оказался ниже в 1,5 раза, а обсемененность её микрофлорой выше в 2,9 раза, чем у клинически здоровых животных (табл. 2).

Установлено также, что индекс бактерицидности и микробная обсемененность кожи вымени оказались значительно измененными и в непораженных смежных с больными долях. Так, индекс бактерицидности этих долей оказался ниже на 20,0% (74,5±6,5%), а бактериальная обсемененность - на 66% больше (560,8±128,5 тыс. КОЕ), в сравнении со здоровыми животными.

Следовательно, развитие воспалительного процесса происходит на фоне понижения бактерицидной активности кожи и повышения её бактериальной обсемененности, как пораженных долей, так и всей молочной железы. При этом показатели бактерицидности кожи и её бактериальной обсемененности находятся в тесной взаимосвязи с количеством соматических клеток и титром лизоцима М (табл. 2).

Таблица 2. Показатели естественной резистентности и микробной обсемененности кожи вымени здоровых и больных субклиническим маститом коров

Показатели	Клинически здоровые,	Больные субклиническим маститом
		непораженные доли	пораженные доли
Титр лизоцима М, мм	22,5±0,3	21,8±0,7	16,1±1,9*
Количество соматич. клеток, тыс/мл	124,3±12,4	384,0±10,6*	6585,0±133,5
Индекс бактерицидности, %	84,2±1,9	74,5±6,5	54,5±5,3*
Обсемененность, тыс, КОЕ	337,6±19,1	560,8±128,0	985,0±150,0*

* Р < 0,001 по сравнению с клинически здоровыми

При изучении роли показателей бактерицидности и микробной обсемененности кожи вымени в возникновении скрыто протекающего воспалительного процесса, проведенные в течение двух месяцев лактации, установлено, что индекс бактерицидности кожи вымени в области пораженных долей уже за неделю до заболевания снизился в 1,35 раза (Р<0,001) по сравнению с исходным уровнем, а интактных долей этих коров 17,5% (табл. 3).

Таблица 3. Бактерицидность кожи вымени коров до и при заболевании маститом

Время исследования	Бактерицидность кожи вымени, %
	Клинически здоровые коровы	заболевшие субклиническим маститом
		непораженные доли	пораженные доли
За 3 недели до заболевания	85,5±2,1	88,5±3,7	90,2±3,4
За 2 недели до заболевания	85,2±3,3	89,1±3,2	88,5±4,3
За 1 неделю до заболевания	88,1±2,5	75,3±5,5	66,4±6,9*
В день заболевания	85,1±4,0	74,5±6,5	55,4±5,3*

* - Р <0,05-0,001 по сравнению с клинически здоровыми

Аналогичная закономерность выявлена и в количестве микробной обсемененности кожи (табл. 4). Так, за неделю до заболевания обсемененность кожи вымени микрофлорой возросла с 301,7±60,9 до 670,0±150,0 тыс. КОЕ или в 2,2 раза (Р<0,05), а в день заболевания до 985,0±150,0 тыс. КОЕ или в 3,3 раза. В непораженных долях заболевших маститом коров этот показатель возрос на 20%.

Одновременно установлено, что уже за неделю до заболевания коров маститом в секрете молочной железы отмечается увеличение соматических клеток с 152,6±57,5 тыс/мл до 358,3±95,8 или в 2,2 раза и в день заболевания в пораженных долях до 9253±1934 тыс/мл или в 5,8 раза (Р<0,001), а в непораженных долях до 446,2±92,9 тыс/мл или 2,9 раза. Титр лизоцима М снизился с 22,7±0,2 мм до 16,2±1,9 или в 1,4 раза (Р<0,05). Только в день заболевания и только в пораженных долях.

Таблица 4. Обсемененность кожи вымени микрофлорой до и при заболевании маститом

Время исследования	Обсемененность кожи вымени микрофлорой, тыс. КОЕ/мл
	клинически здоровые	заболевшие субклиническим маститом
		непораженные доли	пораженные доли
За 3 недели до заболевания	406,2±56,4	347,5±264,5	301,7±60,9
За 2 недели до заболевания	325,4±55,5	550,0±159,6	200,0±47,4
За 1 неделю до заболевания	338,3±39,6	578,3±168,1	670,0±150,0*
В день заболевания	300,0±58,7	560,0±128,3	985,0±150,0*

* - Р <0,05 по сравнению с клинически здоровыми

Полученные нами данные свидетельствуют, что показатель бактерицидности кожи вымени обладает большей реактивностью по сравнению с титром лизоцима М и количеством соматических клеток.

Анализ литературных данных и собственных исследований позволяет сделать вывод, что в возникновении воспаления в молочной железе коров главную роль играет изменение взаимодействия двух факторов - неспецифической резистентности молочной железы и патогенной микрофлоры окружающей среды. В частности, снижение бактерицидной активности кожи (в 1,5 раза) или увеличение патогенности микроорганизмов способствует увеличению обсемененности молочной железы (в 2,9 раза) и проникновению в неё возбудителей мастита главным образом через сосковый канал. Поэтому показатели бактерицидности и микробной обсемененности кожи, отражающие состояние локальной естественной резистентности, может служить тестом для выявления патологического состояния организма и молочной железы, а разработка профилактических мероприятий, должна базироваться на применении средств, повышающих общую и локальную резистентность и снижающих микробную обсемененность вымени, подавляющих патогенное действие микроорганизмов.

Эффективность использования средств неспецифической патогенетической терапии субклинического мастита у коров

В качестве средств, стимулирующих общую неспецифическую резистентность организма, факторы локальной защиты молочной железы коров и позволяющих тем самым ликвидировать воспалительный процесс использовали препарат плаценту эмульгированную денатурированную (ПДЭ) и антисептик стимулятор Дорогова фракция_2 (АСД_2Ф).

В экспериментальных исследованиях, выполненных на 45 животных, одной группе пятикратно подкожно с интервалом 48 часов вводили ПДЭ в дозе 20 мл, второй - внутримышечно трижды с интервалом 48 час 15% АСД_2Ф на тетрагидровите в дозе 10 мл и третьей группы в первый, третий и пятый дни лечения подкожно вводили ПДЭ по 20 мл, а на второй, четвертый и шестой дни - внутримышечно 15% АСД_2Ф в дозе 10 мл.

Выявлено, что эффективность применения ПДЭ и АСД_2Ф оказалась недостаточной и составила соответственно 60,0 и 53,3%.

Наилучший эффект при субклиническом мастите -87,6% достигнут при комплексном применении данных препаратов. У клинически выздоровевших животных отмечено увеличение индекса бактерицидности кожи вымени с 53,7 ±1,7% до 86,2±2,4 или в 1,4 раза (Р<0,001), снижением количества соматических клеток в молоке с 4178,0±1035,8 тыс/мл до 296,8±90,6 тыс/мл или в 6,3 раза (Р<0,01). Через сутки после выздоровления микрофлора отсутствовала в 60% проб молока, а через неделю у всех животных.

Комплексное применение ПДЭ и АСД_2Ф при лечении субклинического мастита сопровождалось достоверным увеличением в крови содержания общего белка на 9,48%, в-глобулинов - на 16,28%, лимфоцитов - на 9,6%, при снижении уровня альбуминов - на 9,56% и эозинофилов - на 39,13%.

Производственные испытания эффективности комплексного метода лечения с использованием ПДЭ и АСД_2Ф проведены на 199 коровах, больных субклиническим маститом, подтвердили результаты экспериментальных исследований (табл. 5)

Таблица 5. Терапевтическая эффективность ПДЭ, 15% АСД_2Ф на тетрагидровите и ПДЭ + 15% АСД_2Ф на тетрагидровите при субклиническом мастите у лактирующих коров

Препарат	Подвергнуто лечению	Выздоровело	Осталось больных
	коров	долей	коров	%	долей	%	коров	%	долей	%
ПДЭ	35	39	24	68,5	26	66,7	11	31,4	13	33,3
15% АСД_2Ф	35	38	20	57,1	21	55,3	15	42,9	17	44,7
ПДЭ+15% АСД_2Ф	129	144	108	83,7	117	81,3	21	16,3	27	18,7

Терапевтическая эффективность применения отдельно ПДЭ или 15%-ного АСД_2Ф при субклиническом мастите составила соответственно 68,5 и 57,1%, а при их комплексном использовании 83,7%.

Таким образом, проведенные исследования позволяют заключить, что разработанный нами комплексный метод лечения субклинического мастита у коров с использованием ПДЭ и АСД_2Ф в виде 15% раствора на тетрагидровите является достаточно эффективным и экологически безопасным.

Однако он требует продолжительного времени лечения (не менее 6 инъекций препаратов), дает эффект только при субклиническом мастите и не может быть использован при клинических формах воспаления вымени.

Разработка новых антимикробных лекарственных препаратов для лечения больных маститом коров и их фармако-токсикологическая и клиническая оценка

На основе химиотерапевтического средства диоксидин, проявляющего антимикробную активность в отношении грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов, нами подобрано три комбинации антимикробных средств, обладающих синергидным действием: диоксидин и фурацилин в соотношении 1:0,2; диоксидин и гентамицина сульфата ? 1:2, диоксидин и линкомицина гидрохлорид ? 1:4. На их основе были разработаны препараты для лечения мастита у коров в период лактации.

Диофур, включающий в себя следующие компоненты, масс.% диоксидин ? 1,0; фурациллин ? 0,2; вода дистиллированная до 100,0

Диеномаст, комплексный препарат, содержащий следующие компоненты, масс.%: диоксидин ? 1,0; гентамицина сульфат ? 2,0; воск - 5,0; масло вазелиновое до 100,0.

Линдомаст, комплексный препарат, содержащий следующие компоненты, масс.%: диоксидин ? 1,0; линкомицина гидрохлорид ? 3,0; моноглицерид мягкий ? 3,0; моноглицерид дистиллированный ? 3,0; масло вазелиновое до 100,0.

Антимикробная активность диофура, диеномаста и линдомаста

Определение анимикробной активности препаратов диофур, диеномаст и линдомаст проведено совместно с сотрудниками отдела микробиологии, вирусологии и иммунологии и лаборатории диагностики инфекционных и инвазионных заболеваний института.

Результаты исследований, приведенных в таблицах 6, 7, 8, свидетельствуют, что диофур обладает широким спектром и высоким антимикробным действием в отношении основных возбудителей мастита в концентрации 0,98-7,8 мкг/мл, что превышает антимикробную активность диоксидина и фурациллина в 2-8 раз. Данная комбинация подавляет рост кокковой микрофлоры в концентрации 3,9-7,8 мкг/мл, а грамотрицательной - 0,98 мкг/мл (табл. 6).

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) диеномаста составляет 0,39-3,1 мкг/мл, что превышает антимикробную активность диоксидина и гентамицина сульфата в 2-32 раза, диеномаст ингибирует рост кокковой микрофлоры в концентрации 0,39-0,98 мкг/мл, а грамотрицательной - 0,39-3,1 мкг/мл (табл. 7).

Линдомаст подавляет рост исследованной микрофлоры в концентрации 3,1-25,0 мкг/мл (табл. 8), что превышает антимикробную активность диоксидина и линкомицина в отдельности в 2-16 раз.

Таблица 6. Антимикробная активность диоксидина, фурациллина и диофура в отношении основных возбудителей мастита

Штаммы микроорганизмов	МИК, мкг/мл
	Диоксидин	Фурацилин	Диофур
Staph. aureus ВМ_57	15,6	31,25	7,8
Staph. aureus_589	7,8	31,25	3,9
Str. agalactiae_2646	15,6	31,25	7,8
Str. agalactiae_587	15,6	31,25	7,8
Ent. faecalis_2890	15,6	62,5	7,8
Ent. faecalis_2894	15,6	31,25	7,8
E. сoli_1640	7,8	15,63	0,98
E. сoli_1649	7,8	7,8	0,98

Таблица 7. Антимикробная активность диоксидина, гентамицина и диеномаста в отношении основных возбудителей мастита

Штаммы микроорганизмов	МИК, мкг/мл
	Диоксидин	Гентамицина	Диеномаст
Staph. aureus_209 Р	25,0	1,56	0,39
Staph. aureus_589	25,0	3,1	0,78
Str. agalactiae_2646	12,5	3,1	0,78
Str. agalactiae_587	25,0	1,56	0,39
Ent. faecalis_2890	25,0	3,1	0,78
Ent. faecalis_2894	12,5	6,25	0,78
Ent. faесium_2899	50.0	3,1	0,39
E. сoli_0138	50,0	0,78	0,39
E. сoli_866	12,5	6,25	3,1
E. сoli_643	50,0	0,78	0,39

Таблица 8. Антимикробная активность диоксидина, линкомицина и линдомаста в отношении основных возбудителей мастита

Штаммы микроорганизмов	МИК, мкг/мл
	Диоксидин	Линкомицин	Линдомаст
Staph. aureus_209 Р	25,0	12,5	6,3
Staph. aureus_589	25,0	6,3	3,1
Str. agalactiae_586	12,5	12,5	6,3
Str. agalactiae_587	25,0	25,0	3,1
Ent. faecalis_640	50,0	100,0	25,0
Ent. faecalis_2894	25,0	50,0	6,3
Ent. faесium_2899	50,0	50,0	32,5
E. сoli_644	50,0	100,0	25,0
E. сoli_643	50,0	100,0	25,0

Таким образом, разработанные новые антимикробные препараты для лечения мастита у коров диофур, диеномаст и линдомаст обладают высокой антимикробной активностью в отношении грамположительной и грамотрицательной микрофлоры, изолируемой из секрета молочной железы больных маститом коров.

Изучение параметров токсичности препаратов диофур, диеномаст и линдомаст

Определение параметров токсичности препаратов диофур, диеномаст и линдомаст в остром опыте выполнено совместно с сотрудниками лаборатории экспериментальной фармакологии института.

Острая токсичность препаратов

Пероральный способ введения. Препараты вводили однократно внутрь в дозах от 3500 до 30000 мг/кг веса в объеме для белых мышей - 0,6 мл, для белых крыс - 6 мл (диофур - 6000,0-30000,0 мг/кг, диеномаст - 5000,0-20000,0 мг/кг, линдомаст - 4500,0-22500,0 мг/кг массы тела). Дозы являются предельно допустимыми по объему для перорального введения.

При внутрижелудочном введении препаратов диофур, диеномаст и линдомаст в изученных дозах за весь период наблюдения (14 дней) гибели животных не отмечено.

Подкожный способ введения. При подкожном введении данные препараты вводили однократно в дозах от 10 до 50 г./кг массы тела в объеме 1,0 мл на мышь и 5,0 мл на крысу.

Полученные данные позволили определить параметры острой токсичности диофура, диеномаста и линдомаста при подкожном введении (табл. 9).

Таблица 9. Параметры острой токсичности диофура, диеномаста и линдомаста для лабораторных животных при однократном подкожном введении (мг/кг)

Вид животных	Параметры токсичности	SLD50
	МПД	LD16	LD50	LD84	LD100
Диофур
Белые мыши	20000,0	46645,6	61462,2 (54900ч 68100)	77517,0	85234,8	±3280,4
Белые крысы	21000,0	38848,9	61330,6 (53600ч69100)	85459,4	97112,0	±3866,0
Диеномаст
Белые мыши	4500	6166,7	11108,3 (9010ч13200)	16227,2	18742,4	±1034,5
Белые крысы	5500	8048,4	12015,1 (11500ч13500)	16069,7	18075,0	±757,1
Линдомаст
Белые мыши	10500,0	11877,0	15170,1 (13400ч17000)	18326,2	19938,5	±878,0
Белые крысы	10000,0	11118,8	14017,5 (12600ч15500)	16755,0	19000,0	±702,7

Результаты проведенных исследований показывают, что диофур, диеномаст и линдомаст по степени токсичности относятся к IV классу опасности - вещества малоопасные (ГОСТ 12.1.007-76).

Хроническая токсичность

Установлено, что многократное подкожное введение диофура в дозе 1227 мг/кг, диеномаста - 240 мг/кг и линдомаста - 280,0 мг/кг (1/50 LD₅₀), а также введение диофура в дозе - 6133 мг/кг, диеномаста - 1202 мг/кг и линдомаста - 1400,0 мг/кг массы тела (1/10 LD₅₀ в остром опыте) не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии животных. Поведение, аппетит, частота дыхания у всех животных опытных групп, как в период применения препарата, так и в течение 10 дней после окончания применения оставались в пределах нормы. За период наблюдения у животных опытных групп не было отмечено нарушений функций пищеварения и мочеотделения.

	Диофур. Скорость роста крыс опытных групп существенно не отличалась от скорости роста крыс контрольной группы. Среднесуточный прирост массы тела за весь период наблюдения (31 день) составил 103,8% при применении препарата в дозе 1227,0 мг/кг и 105,9% при применении препарата в дозе 6133 мг/кг массы тела по сравнению с контролем (рис. 1).
Рис. 1. Динамика изменения массы тела белых крыс при многократном подкожном введении диофура (% к исходной массе тела)
Диеномаст. Скорость роста крыс опытных групп существенно не отличалась от скорости роста крыс контрольной группы. Среднесуточный прирост массы тела за весь период наблюдения (31 день) составил 100,7% при применении диеномаста в дозе 240,0 мг/кг и 98,7% при применении препарата в дозе 1202,0 мг/кг массы тела по сравнению с контролем (рис. 2).
	Рис. 2. Динамика изменения массы тела белых крыс при многократном подкожном введении диеномаст (% к исходной массе тела)
	Линдомаст. Скорость роста крыс опытных групп существенно не отличалась от скорости роста крыс контрольной группы. Среднесуточный прирост массы тела за весь период наблюдения (31 день) составил 104,0% при применении препарата в дозе 280,0 мг/кг и 100,5% при применении препарата в дозе 1400 мг/кг массы тела по сравнению с контролем (рис. 3).
Рис. 3. Динамика изменения массы тела белых крыс при многократном подкожном введении линдомаста (% к исходной массе тела)

Таким образом, в течение курса применения диофура, диеномаста и линдомаста подопытные животные не отличались от контрольных животных по приросту массы тела. По окончании эксперимента статистически достоверных различий по массе тела животных контрольных и опытных групп также не обнаружено.

Коэффициенты массы внутренних органов крыс, которым применяли диофур и диеномаст, не отличались существенно от контроля. На 21 день применения линдомаста была отмечена тенденция увеличения коэффициента массы почек на 5,7% (доза 280,0 мг/кг) и на - 7,1% (доза 1400,0 мг/кг). Однако среднее значение этих показателей у крыс опытной группы не выходило за верхние границы нормы для данного вида и возраста животных.

При исследовании крови животных, получавших диофур в дозе 1227,0 и 6133 мг/кг массы тела, диеномаст - в дозе 240,0 и 1202 мг/кг и линдомаст - в дозе 280,0 и 1400,0 мг/кг, не отмечено достоверных изменений в морфологическом составе крови, биохимических показателях по сравнению с показателями в крови животных контрольной группы.

Местно-раздражающее действие лекарственных препаратов

Установлено, что при однократной аппликации на кожные покровы кролика при плотности нанесения от 0,020 до 0,10 г./см² диофур, диеномаст и линдомаст не вызывают повреждение кожи в виде эритемы или её отёков.

После инстилляции каждого препарата в отдельности не выявлено изменений в клиническом состоянии организма кроликов (температуры тела, частоты пульса и количества дыхательных движений), а также изменения кровенаполнения конъюнктивы, состояния роговицы и век, не отмечено лакримации и выделений.

При визуальной оценке состояния конъюнктивы, роговицы и век опытных животных установлено, что препараты вызывают слабое раздражение конъюнктивы спустя два часа после инстилляции, которое исчезало уже к 3 часу.

Длительное воздействие. Установлено, что длительное накожное применение основы и препаратов не приводит к изменению поведения и аппетита животных. Не отмечено различий температуры тела и живой массы во всех группах кроликов. Толщина складки выстриженной и выбритой кожи животных контрольной и опытной групп на протяжении 20_ти дневного срока наблюдения не отличалась. Накожное нанесение препарата и основы приводило к незначительному увеличению толщины кожной складки в пределах 0,5-1,9% по отношению к контролю и исходному состоянию.

Таким образом, разработанные нами препараты не оказывают раздражающего действия на кожу.

Аллергенные свойства диеномаста и линдомаста

В результате проведенных исследований аллергенных свойств диофура, диеномаста и линдомаста при наружном, конъюнктивальном и парентеральном способе применения установлено, что 20_кратная аппликация диофура, диеномаста и линдомаста не вызывает контактного дерматита, отсутствует реакция конъюнктивы сенсибилизированных и интактных морских свинок на инстилляцию препаратов, следовательно реакция гиперчувствительности к препаратам отсутствует.

Влияние препаратов на организм и молочную железу лактирующих коров

Проведенными исследованиями установлено, что интрацистернальное введение препаратов диофур, диеномаст и линдомаст в дозе 10 мл вызывает незначительное, проходящее в течение 48 часов раздражение тканей молочной железы у лактирующих коров, а в дозах 10 и 20 мл не оказывает существенного влияния на биохимические и морфологические показатели крови.

Фармакинетические параметры препаратов диофур, диеномаст и линдомаст

Опыты проведены на 18 лактирующих коровах симментальской породы в условиях опытной станции ВГАУ. Коровам опытных групп интрацистернально вводили один из препаратов (диофур, диеномаст, линдомаст) по 10 мл пятикратно каждые 24 часа, животным контрольных групп препараты не вводили, они служили контролем.

Диофур. Остаточные количества препарата диофур в молоке определяли на спектрофотометре (СФ_46) при длине волны 475 нм.

Установлено, что активнодействующие компоненты диофура (диоксидин и фурациллин) не накапливаются в секрете молочной железы и выводятся из организма в течение 24 часов.

Диеномаст. Определение содержания диоксидина в молоке, крови и моче проводили спектрофотометрически с использованием калибровочных кривых, а гентамицина сульфата бактериологическим методом с использованием тест-культуры Bacillus pumilus NСТС_8241.

	Установлено, что через 7 суток после пятикратного интрацистернального введения диеномаста в исследуемых биологических жидкостях (молоке, крови и моче) активнодействующие компоненты препарата диоксидин и гентамицина сульфат не обнаруживаются (рис. 4). Таким образом, молоко в пищевых целях можно использовать на 7 сутки после последнего применения
Рис. 4. Содержание диоксидина и гентамицина в молоке коров

Диеномаста при условии полного исчезновения признаков мастита, подтвержденного диагностическими тестами.

Линдомаст. У коров опытной и контрольной групп брали молоко, кровь и мочу для определения остаточных количеств диоксидина и линкомицина гидрохлорида через 1, 3, 5, 7 суток после последнего введения линдомаста.



Определение содержания диоксидина в молоке, крови и моче проводили спектрофотометрическим методом с использованием калибровочных кривых, содержание линкомицина гидрохлорида ? бактериологическим методом с использованием тест-культуры Bacillus subtillis ATCC 6633, после пятикратного введения линдомаста. Установлено, что через 5 суток
	Рис. 5. Содержание диоксидина и линкомицина в молоке коров

После пятикратного интрацистернального введения линдомаста в исследуемых биологических жидкостях (молоке, крови и моче) активнодействующие вещества диоксидин и линкомицина гидрохлорид не обнаруживаются.

Таким образом, молоко в пищевых целях можно использовать на 5 сутки после последнего применения линдомаста при условии полного исчезновения признаков мастита, подтвержденного диагностическими тестами.

Результаты клинических данных по применению препаратов для терапии больных маститом коров

Диофур. Опыт проведен на коровах 36 коровах с субклиническим и 36 с клинически выраженным катаральным маститом, которых в каждом случае разделили по принципу аналогов на три группы. Животным первой группы вводили мастисан А, второй - 1% раствор диоксидина, согласно наставления по применению и третьей группы - диофур интрацистернально один раз в сутки, в течение 3-4 дней в дозе 10 мл. Эффективность определяли после курса лечения по количеству выздоровевших животных (табл. 10).

Таблица 10. Терапевтическая эффективность диофура при мастите у лактирующих коров

Препараты	Подвергнуто лечению	Выздоровело	Осталось больных
	коров	долей	коров	%	долей	%	коров	%	долей	%
Субклинический мастит
Мастисан А	12	14	7	58,3	7	50,0	5

Страница:

•  1 
•  2 

автореферат "Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите у коров" скачать

Подобные документы

• Профилактика и лечение мастита у коров

  Этиология, патогенез и диагностика маститов у коров. Основные принципы лечения и терапии коров, больных маститом. Комплекс мероприятий по профилактике заболевания. Анализ заболеваемости животных учхоза "Тулинское", оценка полученных результатов.
  
  курсовая работа [34,3 K], добавлен 17.11.2010
  

• Изучение терапевтической эффективности различных схем лечения маститов у коров

  Особенности проявления маститов у коров. Причины возникновения заболевания. Особенности терапии маститов и терапевтическая эффективность различных схем лечения острых катаральных маститов у коров. Экономическая эффективность новой схемы лечения.
  
  контрольная работа [88,7 K], добавлен 26.09.2019
  

• Эффективность препарата "Офлоксамаст" при лечении коров, больных маститом в условиях СПК "Барсеево" Лиозненского района Витебской области

  Определение частоты проявления мастита у коров в СПК "Барсеево". Изучение фармако-токсикологического свойства и влияния на молочную железу препарата "Офлоксамаст". Определение эффективности препарата "Офлоксамаст" при лечении коров, больных маститом.
  
  дипломная работа [550,0 K], добавлен 01.05.2013
  

• Профилактическая эффективность фитопрепаратов при патологии послеродового периода у высокопродуктивных молочных коров

  Проблема коррекции послеродового периода. Распространение послеродовых осложнений. Анализ воспроизводства стада коров в хозяйствах Ульяновской области. Влияние фитопрепаратов на течение послеродового периода и на воспроизводительную функцию коров.
  
  диссертация [375,2 K], добавлен 05.05.2009
  

• Организация и техника раздоя

  Комплекс мероприятий по подготовке коров к раздою, своевременный и правильный их запуск. Содержание коров в сухостойный период. Массаж вымени у нетелей и приучение к работе доильных аппаратов. Кормление новотельных коров в первые дни после отела.
  
  курсовая работа [716,6 K], добавлен 03.08.2015
  

• Морфологические признаки и функциональные свойства вымени коров-первотелок

  Форма вымени, основные морфологические особенности вымени и сосков, их связь с продуктивностью, молокоотдачей, состоянием и приспособленностью к эффективной дойке. Влияние конструкций и режимов работы доильного аппарата на молочную продуктивность коров.
  
  контрольная работа [24,1 K], добавлен 28.04.2010
  

• Оценка коров по собственной продуктивности

  Молочная продуктивность коров. Химический состав молока. Факторы, влияющие на уровень молочной продуктивности. Оценка качеств вымени, воспроизводительных способностей. Исследование продуктивности коров чёрно-пёстрой породы в племсовхозе "Первомайский".
  
  курсовая работа [27,2 K], добавлен 29.06.2012
  

• Породы коров

  Описание внешнего вида, особенности и основные характеристики молочных и мясных пород крупного рогатого скота. Средний удой полновозрастных коров в племенных хозяйствах. Средний суточный прирост. Молочная продуктивность коров, скорость молокоотдачи.
  
  реферат [6,3 M], добавлен 13.02.2014
  

• Особенности кормления высокопродуктивных коров

  Необходимость повышения качества кормов. Особенности кормления стельных сухостойных коров и лактирующих коров. Повышение эффективности использования кормов. Рациональное использование концентратов. Потребность в кормах для высокопродуктивных коров.
  
  курсовая работа [118,7 K], добавлен 30.11.2011
  

• Эффективность линейного разведения коров черно-пестрой породы

  Понятие, задачи и необходимые условия чистопородного разведения, его цели и виды. Принципы линейного разведения и разведения по семействам. Влияние типа подбора на молочную продуктивность коров. Отличия в молочной продуктивности коров по 1-3-й лактациям.
  
  курсовая работа [230,8 K], добавлен 23.05.2016
  

Другие документы, подобные "Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите у коров"

• главная
• рубрики
• по алфавиту
• вернуться в начало страницы
• вернуться к началу текста
• вернуться к подобным работам