Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите у коров

Однократное воздействие. Установлено, что при однократной аппликации на кожные покровы кролика при плотности нанесения от 0,020 до 0,10 г./см² препараты доксимаст и неодоксимаст не вызывают повреждение кожи в виде эритемы или её отёков.

Не выявлено изменений температуры тела, частоты пульса и количества дыхательных движений.

При визуальной оценке состояния конъюнктивы, роговицы и век опытных животных установлено, что препарат вызывает слабое раздражение конъюнктивы спустя два часа после инстилляции препарата, которое исчезало уже к 4 часу.

Многократное воздействие. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что длительное накожное применение основы и препаратов не вызывают повреждение кожи в виде эритемы или её отёков.

Выполненные нами исследования показали, что в разрабатываемых и реализуемых программах по снижению воспалительных заболеваний молочной железы у коров должны учитываться особенности всех технологических процессов эксплуатации животных и степень заболеваемости коров маститом.

По степени заболеваемости коров маститом мы предлагаем разделить сельхозпредприятия (молочные фермы) на три группы: первая - заболеваемость превышает 30%, вторая - заболеваемость составляет 10-30%, третья - заболеваемость не превышает 10%.

Наиболее сложно решается проблема в хозяйствах первой группы, так как основной причиной высокой заболеваемости коров маститом в них являются, как правило, грубые погрешности в технологии ведения молочного скотоводства. Поэтому в данных хозяйствах оздоровление поголовья от мастита необходимо проводить в три этапа.

На первом этапе устанавливается основная причина высокой заболеваемости маститом. Как правило, это использование неисправной доильной техники (отсутствие вакуумрегуляторов, неисправные манометры, недостаточная производительность вакуумного насоса, при этом величина вакуума может составлять от 0,42 до 0,9 кгс/см²); нарушения технологии доения (преждевременное или запоздалое подключение доильного аппарата, передержка его на вымени, нерегулярная замена сосковой резины); низкий уровень гигиены содержания (высокая влажность воздуха в коровнике, отсутствие или загрязнённая подстилка) и санитарии при доении (подмывание вымени всех коров группы из одного ведра, использование одной салфетки для обсушивания вымени, отсутствие дезинфицирующих средств). При этом данные погрешности имеют место в каждом хозяйстве, но степень их выраженности различна. Как правило, в хозяйствах с таким уровнем заболевания маститом коров время доения превышает в 2-2,5 раза физиологические нормы (5-6 минут) и составляет 9 - 12 минут, что обусловлено как вызовом неполноценного рефлекса молокоотдачи (нарушение технологии доения) так и нефизиологичным доением (неисправная доильная техника).

Устранение выявленных причин позволяет снизить количество коров, заболевших маститом до 20% и перевести сельхозпредприятие (молочную ферму) во вторую группу. Только после выполнения первого этапа следует приступать ко второму этапу реализации программы по снижению заболеваемости коров маститом.

На втором этапе мероприятия по оздоровлению коров от мастита аналогичны мероприятиям для молочных стад второй группы (заболеваемость 10-30%) которая является самой многочисленной. Они должны включать:

- выполнение операторами требований к машинному доению коров - соблюдение очередности доения - сначала первотелки, затем здоровые коровы, затем животные, больные маститом; санитарную подготовку вымени и высушивание сосков вымени; сдаивание перед доением первых струек молока из каждого соска, сбор и утилизацию молока с видимыми изменениями; подключение доильных стаканов через 40-60 секунд от начала подготовки вымени с исключением подсоса воздуха; контроль выполнения процесса молокоотдачи, проверку на полноту выдаивания до снятия доильных стаканов; на линейных доильных установках проведение машинного додоя и одновременное снятие всех доильных стаканов только после отключения вакуума; после окончания доения обработку сосков вымени антисептическим средством;

- обеспечение исправности доильного оборудования: параметров величины вакуума, его запаса, параметров работы пульсаторов, учёт продолжительности эксплуатации сосковой резины и регулярной её замены, мытье и дезинфекция доильного оборудования;

- обеспечение полноценного кормления и соблюдения требований гигиены содержания;

- проведение специальных ветеринарных мероприятий: ежемесячное исследование молока коров с экспресс-диагностикумом (масттест, мастидин, альфа-тест и др.), клиническое обследование молочной железы всех животных, давших положительную реакцию с диагностикумумом, и регистрацию данных каждого исследования в журнале; ежеквартальный отбор проб секрета из пораженных долей вымени для лабораторного исследования (наличие, вид и чувствительность микрофлоры к антимикробным средствам); изолирование и немедленное лечение коров с клиническим маститом путем интрацистернального введения антимикробных препаратов с учетом чувствительности микрофлоры и их последующей ротации; выделение коров с хроническим и субклиническим маститом в отдельную группу (или внедряют промежуточную дезинфекцию доильных стаканов), лечение таких животных проводят в основном во время запуска препаратами для лечения мастита в период лактации; при переводе коров в сухостой после последнего доения всем животным интрацистернально вводят противомаститные препараты с длительным сроком сохранения в молочной железе; постепенно выбраковывают коров, лечение которых не даёт положительного результата.

Полное внедрение вышеперечисленных мероприятий позволяет в течение года снизить заболеваемость коров маститом до 7-8% и перевести данное сельхозпредприятие в третью группу и получать молоко высокого санитарного качества.

Основной задачей для хозяйств третьей группы является сохранение или улучшение достигнутого уровня по заболеваемости коров маститом. Кроме полного обеспечения всех технологических параметров разведения и доения животных в этих хозяйствах проводятся следующие мероприятия:

- ежедневное выявление и лечение коров с клинически выраженным маститом (диофур, диеномаст и линдомаст);

- ежедекадная проверка коров на субклинический мастит (масттест, мастидин) и лечение больных маститом (диофур, диеномаст, линдомаст);

- лечение коров с хроническим маститом в период запуска (диофур, диеномаст, линдомаст, из зарубежных препаратов мастиет-форте, синулокс LC, и др.) и выбраковка не поддающихся лечению животных, как источника инфекции;

- решение о широком использовании препаратов с длительным сроком нахождения в вымени (доксимаст, неодоксимаст, орбенин ДС, нафпензал ДС и др.) принимать в зависимости от уровня заболеваемости коров маститом в послеродовый период (выше 10-15%) и молочной продуктивности (более 4500 кг);

- ввод в основное стадо клинически здоровых коров - первотелок проводить после двукратного обследования молочной железы и проведения курса лечения, больных маститом коров.

Внедрение данной системы оздоровления молочных стад от мастита в ООО «Жито», ЗАО «Манино» Воронежской области, ОАО «Роговатовская Нива», Белгородской области, АОНП «Успенское» и ОАО «ПЗ «Сергиевский» Орловской области позволило в течение года снизить заболеваемость коров маститом с 55,0-25,7% до 12,6-5,8%.

4. Выводы

1. Заболеваемость коров маститом в различных хозяйствах Центрального Региона Российской Федерации колеблется от 7,1% до 60,3%. В сельхозпредприятиях с уровнем молочной продуктивности свыше 6500 кг заболеваемость составляет 15,26%, а с уровнем продуктивности менее 4500 кг 46,78%. У коров черно-пестрой породы мастит регистрируется в 32,51% случаев, симментальской - 41,23%. На долю субклинического мастита приходится 79,1%, на долю клинически выраженного 20,9%.

2. В сельхозпредприятиях с уровнем заболеваемости коров маститом менее 10% из секрета пораженных долей вымени в 100% случаев выделена патогенная микрофлора, которая представлена в монокультурах Str. agalactiae -46,7%, Staph. aureus -13,3%, Staph. haemolyticus -13,3% и в ассоциациях Staph. aureus + Str. agalactiae в 26,7%.

В стадах с заболеваемостью коров от 10 до 30% выделенная из 90,5% проб секрета микрофлора в 73,8% случаев представлена патогенными культурами (Str. agalactiae -35,7%, Staph. aureus - 30,9%, Staph. haemolyticus -2,4%, в ассоциациях - 4,8%) и в 16,7% - условно-патогенными (Str. dysgalactiae -9,5%, Micrococcus -4,8%, Enterococcus faecalis -2,4%).

При уровне заболеваемости коров маститом свыше 30% патогенная микрофлора (Staph. аureus, E. сoli) выделена в 32,7% случаев, условно-патогенная (Citrobacter, Enterococcus faecium, - в 23,6%, и сапрофитная (Staph. saprophyticus, Staph. epidermidis, Enterococcus aerogenes, Pseudomonas aeruginosa) в 20,0% случаев. В 5,5% случаев выделены грибы (Сandida).

3. В развитии воспалительного процесса в молочной железе независимо от действия технологических факторов основную роль играют изменения во взаимосвязи систем неспецифической резистентности данного органа и патогенной микрофлоры окружающей среды. У клинически здоровых лактирующих коров индекс бактерицидности кожи составляет 87,8±2,4 - 91,8±2,0%, а её микробная обсемененность 337,6±19,1 тыс. КОЕ.

У больных субклиническим маститом индекс бактерицидности кожи снижен в 1,5 раза (54,5±15,3%), а микробная обсемененность возрастает до 985,0±150,0 тыс. КОЕ или в 2,9 раза. Явление снижения бактерицидности кожи вымени и увеличения её бактериальной обсемененности регистрируется уже за семь дней до проявления заболевания.

4. При комплексном применении больным субклиническим маститом коровам общестимулирующих патогенетических средств (ПДЭ, АСД_2Ф на тетрагидровите) отмечается увеличение в сыворотке крови общего белка на 9,5%, в-глобулинов на 16,3%, снижение эозинофилов на 39,1%, и увеличение индекса бактерицидности кожи вымени до 86,2±2,4 или в 1,4 раза. Терапевтический эффект составляет 83,7%.

5. Созданные сочетания антимикробных средств: диоксидин-фурациллин, диоксидин-гентамицина сульфат, диоксидин-линкомицина гидрохорид обладают синергидным действием в отношении грамположительной и грамотрицательной микрофлоры, а разработанные на их основе антимикробные препараты диофур, диеномаст и линдомаст обладают высокой активностью в отношении основных возбудителей мастита у коров. Минимальная ингибирующая их концентрация составляет 0,98-7,8; 0,39-3,1 и 3,1-25,0 мкг/мл.

6. Препараты диофур, диеномаст и линдомаст относятся к IV классу опасности (малоопасные вещества по ГОСТу 12. 1.007-76). ЛД₅₀ при внутрижелудочном их введении превышает 30000 мг/кг массы тела. При однократном подкожном введении ЛД₅₀ для белых мышей составляет соответственно 61462,2; 11108,3 и 15170,1 мг/кг, для белых крыс - 61330,6; 12015,1 и 14017,5 мг/кг массы тела.

7. Препараты не оказывают аллергенного и кожно-резорбтивного действия. Не вызывают раздражения при нанесении на кожу. Проявляют слабое раздражающее действие при нанесении на слизистую оболочку глаз. Длительное применение комплексных препаратов на основе диоксидина (диофур, диеномаст и линдомаст) не оказывает отрицательного влияния на морфологические и биохимические показатели крови лабораторных животных. Относительные массы внутренних органов крыс не выходят за границы физиологической нормы. Коэффициенты кумуляции составляют 5,0 и более. Данные препараты в терапевтических дозах не оказывают отрицательного влияния на физиологические и биохимические показатели крови коров.

8. При пятикратном интрацистернальном введении коровам диофура его компоненты (диоксидин и фурацилин) выводятся из молочной железы и организма животных через 24 часа, диеномаста (диоксидин и гентамицина сульфат) - через 7 суток и линдомаста (диоксидин и линкомицина гидрохлорид) - через 5 суток.

9. Терапевтическая эффективность диофура при субклиническом мастите у лактирующих коров составляет 88,6%, при клинически выраженном катаральном мастите 82,1%, гнойно-катаральном 75,0% и серозном 76,5%, диеномаста соответственно 90,8%; 81,8%; 73,1%; 76,6% и линдомаста 93,7; 92,4, %; 85,5% и 83,3%.

10. Разработанные на основе доксициклина антибактериальные препараты длительного действия доксимаст и неодоксимаст для профилактики мастита у коров относятся к IV классу опасности - вещества малоопасные по ГОСТу 12.1.007-76. ЛД50 при внутрижелудочном введении превышает 30000 мг/кг массы тела.

ЛД50 при однократном подкожном введении доксимаста для белых мышей составляет 12706,1 мг/кг, для белых крыс - 13841,9 мг/кг массы тела. ЛД50 неодоксимаста для белых мышей -14437,9 и для белых крыс 15497,8 мг/кг массы тела соответственно.

11. Препараты доксимаст и неодоксимаст не обладают раздражающим и кожно-резорбтивным действием, у препаратов отсутствуют аллергенные свойства. Длительное применение комплексных препаратов на основе доксициклина (доксимаст и неодоксимаст) не оказывает отрицательного влияния на морфологические и биохимические показатели крови лабораторных животных. Относительные массы внутренних органов крыс не выходят за границы физиологической нормы. Коэффициенты кумуляции составляют 5,0 и более. Данные препараты в терапевтических дозах не оказывают отрицательного влияния на физиологические и биохимические показатели крови коров.

12. Однократное интрацистернальное введение коровам, переводимым в сухостой, доксимаста и неодоксимаста обеспечивает сохранение препарата в молочной железе в бактериостатической концентрации до 6 недель. Антимикробные компоненты препаратов (доксициклин) и (доксициклин + неомицина сульфат) в секрете молочной железы перед и после отела не обнаруживаются.

13. Внутрицистернальное введение коровам в период запуска доксимаста или неодоксимаста снижает заболеваемость коров маститом после родов 2,5-4,5 раза. По своей профилактической эффективности, разработанные отечественные препараты приближаются к уровню зарубежных аналогов (орбенин ДС).

14. Экономический эффект при лечении мастита у коров препаратами диеномаст и линдомаст составляет на 1 животное 2604,2-4026,3 руб. и 6,9-9,9 руб. на один рубль затрат. Экономический эффект при профилактике мастита препаратом доксимаст составляет 609,48 руб. и 81,2 руб. на один рубль затрат.

15. Разработанная и предложенная производству схема поэтапной фармакопрофилактики и фармакотерапии мастита у коров в комплексной системе оздоровления молочных стад от мастита позволяет в течение года снизить заболеваемость коров воспалением вымени до 7-8% и поддерживать её на этом уровне.

5. Практические предложения

1. Для оценки уровня естественной резистентности молочной железы и выявления риска развития воспалительного процесса использовать показатели бактерицидности и микробной обсемененности кожи вымени. У клинически здоровых лактирующих коров индекс бактерицидности кожи сосков вымени составляет 87,8±2,4 - 91,8±2,0%, и микробная обсемененность - 337,6±19,1 тыс. КОЕ.

Критериями риска развития мастита является снижение индекса бактерицидности кожи до 66,4±6,9% и увеличения обсемененности до 670,0±150,0 тыс. КОЕ.

2. Для терапии субклинического мастита у коров в период лактации использовать способ лечения, включающий подкожное введение тканевого препарата ПДЭ в дозе 20 мл трехкратно на 1_й, 3_й и 5_й дни лечения и АСД_2Ф в 15% концентрации на тетрагидровите в дозе 10 мл на 2_й, 4_й и 6_й дни лечения.

3. Для терапии коров, больных субклиническим и клинически выраженным маститом, в период лактации применять диофур, диеномаст и линдомаст согласно наставлениям по их применению.

4. Для профилактики мастита у коров после отела путем введения в конце запуска в каждую долю вымени антибактериальных препаратов использовать доксимаст и неодоксимаст в дозе 10 мл.

5. При оздоровлении молочных стад крупного рогатого скота от мастита использовать разработанную схему проведения поэтапных технологических, фармакопрофилактических и фармакотерапевтических мероприятий.

6. Научные результаты работы использовать в учебном процессе студентов и специалистов зооветеринарного профиля по акушерству, гинекологии и биотехнологии репродукции животных, по фармакологии и токсикологии.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Перспективные пути решения проблемы мастита у коров / В.А. Париков, В.И. Слободяник, А.Н. Савостин, Н.Т. Климов // Вопросы ветеринарной фармации и фармакотерапии» / Тезисы докл. Всес. н. - практ. конф. - Сигулда, Упр. н.-тех. информации, 1990. - С. 21-22.

2. Экономическая эффективность мероприятий при борьбе с маститом коров / В.А. Париков, А.Н. Савостин, Н.Т. Климов, А.И. Романенко, В.В. Перегудов, Н.Н. Калуцкий // Научные основы профилактики и лечения незаразных болезней с._х. жив. / Сб. научн. тр. ВНИВИПФиТ, Воронеж, 1991. - С. 98-100.

3. Климов Н.Т. Бактерицидность и обсемененность кожи вымени при заболевании маститом / Н.Т. Климов, В.А. Париков, В.И. Слободяник // Важнейшие итоги исследований по изучению заболеваний с._х. жив. незаразной этиологии, их профилактика и лечение / Сб. науч. тр. ВНИВИПФиТ, Воронеж, 1992. - С. 67-68.

4. Перспективы экологически безопасной системы профилактики мастита у коров при машинном доении / В.А. Париков, В.И. Слободяник, А.Н. Савостин, Н.Т. Климов, Л.В. Смирнова, Н.А. Сапожникова, Е.М. Князева // Тез. докладов VIII (1 Всероссийский симпозиум по машинному доению сельскохозяйственных животных). - Оренбург, 1995. - С. 8 -9.

5. Патент №2048805 С1, 6 А 61 К 31/00 Препарат для лечения мастита у коров / В.А. Париков, В.И. Слободяник, А.И. Романенко, Н.Т Климов, В.А. Антипов, Ю.А. Козырев, В.И. Моргунов; -5045934/15; Заявл.30.06.1992; Опубл. 27.11. 1995; Бюл. №33 // ИСМ. -1995.

*6. Мастит у коров (профилактика и терапия) / В.А. Париков, Н.Т. Климов, А.И. Романенко, О.Г. Новиков, Д.М. Пониткин, И.В. Игнатов // Ветеринария. - 2000. - №11. - С. 34-38.

7. Этиологические и патогенетические аспекты мастита у коров, методы и средства его профилактики и терапии / В.А. Париков, В.И. Слободяник, Н.Т. Климов, О.Г. Новиков // Эколого-адаптационная стратегия здоровья и продуктивности животных в современных условиях: Монография - Воронеж. 2001. - С. 105-113.

8. Париков В.А. Проблема мастита у коров в свете современных достижений ветеринарной науки и практики / В.А. Париков, В.И. Слободяник, Н.Т. Климов // Матер. Международной научно-практ. конф., «Проблемы акушерско-гинекологической патологии и воспроизводства сельскохозяйственных животных» посвященной 100_летию А.П. Студенцова, Казань, 2003. - (часть 2) - С. 79-85.

9. Мастит коров (диагностика, профилактика и терапия) / В.А. Париков, Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, В.М. Грязнов, А.Я. Петров, Д.М. Пониткин // Матер. Международной научно-практ. конф., посвящ. 35_летию организации ВНИВИПФиТ «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных». Воронеж, 2005. - С. 367-371.

10. Эффективные отечественные препараты для профилактики и терапии мастита у коров / В.А. Париков, Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, Д.М. Пониткин // Матер. Международной научно-практ. конф., посвящ. 35_летию организации ВНИВИПФиТ «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных», Воронеж, 2005. - С. 375-378.

11. Климов Н.Т. Мастит и современное доильное оборудование / Н.Т. Климов, Н.Ф. Курило // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных. Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100_летию профессора Авророва А.А., Воронеж, 2006. - С. 901-905.

12. Мастит коров - основная проблема молочного скотоводства / В.А. Париков, Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, Д.М. Пониткин // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных. Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 100_летию профессора Авророва А.А., Воронеж, 2006. - С. 963-966.

13. Антимикробная активность и раздражающее действие нового препарата для лечения и профилактики мастита у коров в сухостойный период / В.А. Париков, Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, Г.А. Востроилова, Л.И. Ефанова, А.Ю. Алиев // Материалы республиканской научно-производственной конф., посвященной 90_летию со дня рождению профессора И.Ф. Заянчковского «Актуальные проблемы физиологии и патологии размножения животных». - Уфа, 2007. - С. 38-42.

*14. О нозологии скрыто протекающих патологий в молочной железе коров / В.А. Париков, Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, Д.М. Пониткин, А.Ю. Алиев, В.И. Зимников, А.М. Модин, А.В. Чурсин // Российский ветеринарный журнал. - 2007. - Специальный выпуск. - С. 29.

*15. Предупреждение мастита у коров - основа повышения продуктивности и качества молока / Д.М. Пониткин, Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, А.Ю. Алиев, В.И. Зимников, А.М. Модин, А.В. Чурсин // Зоотехния. - 2007. - №7. С. 21-23.

16. Антимикробная активность и раздражающее действие нового препарата для терапии мастита у коров в период лактации / С.В. Шабунин, Н.Т. Климов, В.А. Париков, Н.В. Притыкин, А.В. Чурсин, Г.А Востроилова, Л.И. Ефанова, А.М. Модин, В.И. Зимников // Материалы первого съезда ветеринарных фармакологов России. Воронеж, 2007. - С. 651-655.

17. Климов Н.Т. Система ранней диагностики, комплексной терапии и групповой профилактики акушерско-гинекологических болезней коров. / Н.Т. Климов, В.И. Михалев, Н.В. Притыкин // Проблемы повышения продуктивного долголетия животных / Материалы научно-практической конференции. - Курган, 2007. - С. 43-52.

18. Климов Н.Т. Эффективность применения антисептических препаратов для профилактики мастита у коров / Н.Т. Климов // Материалы Международной научно-практ. конф., посвящ. 125_летию ветеринарии Курской области «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» - Курск, 2008. - С. 177-179.

*19. Малозатратная и эффективная методика дифференциации кокковой микрофлоры при мастите у коров / Н.Т. Климов, Д.М. Пониткин, В.А. Париков, В.И. Слободяник, Е.Е. Шевелева // Ветеринарная патология, 2008. - №1 (24) - С. 45-47.

*20. Климов Н.Т. Мониторинг мастита у коров и его этиологическая структура в разные периоды репродукции / Н.Т. Климов // Ветеринарная патология, 2008. - №1 (24) - С. 42-45.

*21. Климов Н.Т. Бактерицидность и обсемененность кожи вымени у здоровых и больных маститом коров / Н.Т. Климов // Международный вестник ветеринарии, 2008. - №3 - С. 48.

*22. Климов Н.Т. Этиология мастита у коров в разные периоды их физиологического состояния / Н.Т. Климов // Международный вестник ветеринарии. - 2008. - №3. - С. 49-50.

*23. Климов Н.Т. Бактерицидность кожи вымени - показатель резистентности молочной железы коров / Н.Т. Климов // Международный вестник ветеринарии, 2008. - №3 - С. 51.

24. Роль нарушения технологии доения в возникновении мастита у коров в современных доильных залах / Н.Т. Климов, В.А. Париков, В.И. Михалев, А.Н. Модин, В.И. Зимников, А.В. Чурсин, Д.М. Пониткин // Матер. международ. научно-практ. конф. «Актуальные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса». - Курск, 2008. - Ч. 3. - С. 219-221.

25. Рациональные подходы борьбы с маститом коров. / Н.Т. Климов, В.А. Париков, В.И. Михалев, А.Н. Модин, В.И. Зимников, А.В. Чурсин, Д.М. Пониткин // Матер. международ. научно-практ. конф. «Актуальные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса». - Курск, 2008. - Ч. 3. - С. 221-224.

*26. Роль микробного фактора в возникновении и развитии мастита у коров / Н.Т. Климов, В.А. Париков, В.И. Слободяник, Е.Е. Шевелева, В.И. Зимников А.Н. Модин, А.В. Чурсин, Д.М. Пониткин // Ветеринария, 2008. - №12. - С. 33-36.

27. Микрофлора молока и половых путей коров, больных маститом и эндометритом / Л.И. Ефанова, Н.Т. Климов, В.В. Давыдова, Ю.А. Рубцова, Ю.Ю. Крутских // Матер. Международной научно-практ. конф., посвященной 100_летию со дня рождения профессора В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных». Воронеж, 2009. - С. 168-172.

28. Климов Н.Т. Доксимаст - препарат для профилактики мастита у сухостойных коров / Н.Т. Климов // Матер. Международной научно-практ. конф., посвященной 100_летию со дня рождения профессора В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных». Воронеж, 2009. - С. 207-210.

29. Климов Н.Т. Линдомаст и диеномаст - эффективные препараты для терапии мастита у коров в период лактации / Н.Т. Климов, И.Т. Шапошников // Матер. Международной научно-практ. конф., посвященной 100_летию со дня рождения профессора В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных». Воронеж, 2009. - С. 210-212.

30. Климов Н.Т. Эффективный комплекс мероприятий в борьбе с маститом коров / Н.Т. Климов, В.А. Париков, В.И. Зимников // Матер. Международной научно-практ. конф., посвященной 100_летию со дня рождения профессора В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных». Воронеж, 2009. - С. 212-215.

31. Першин С.С. Требования технического регламента на молоко и значение профилактики болезней молочной железы у коров в его выполнении / С.С. Першин, Н.И. Шумский, Н.Т. Климов // Матер. Международной научно-практ. конф., посвященной 100_летию со дня рождения профессора В.А. Акатова «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного и продуктивного здоровья животных». Воронеж, 2009. - С. 212-215.

*32. Климов Н.Т. Рациональные пути оздоровления молочных стад от мастита / Н.Т. Климов // Труды Кубанского государственного аграрного университета. Серия: ветеринарные науки, 2009. - №1. - Ч. 2. - С. 183-185.

33. Слободяник В.И. Иммунологические аспекты физиологии и патологии молочной железы / В.И. Слободяник, Н.Т. Климов, В.В. Подберезный // под ред. д-ра вет. наук, проф. В.И. Слободяника. - Таганрог: Изд. центр Таганрог. гос. пед. ин-та, 2009. -276 с.

34. Патент №2350332 С1. А61К 31/65 Препарат для лечения и профилактики мастита у коров в период сухостоя / Н.Т. Климов, Н.В. Притыкин, С.В. Шабунин - 2007135675/15; Заявл. 26.09.2007; Опубл. 27.03.2009; Бюл. №9.

35. Патент №2367433 МПК А61К 31/4025, 31/498, 15/00, 15/14, 31/04 Препарат для лечения мастита у коров в период лактации / С.В. Шабунин, Н.Т. Климов, В.А Париков, Н.В. Притыкин и др. - 2008109150/15; Заявл. 07.03.2008; Опубл. 20.09.2009; Бюл. №26. - 9 с.