Экспериментальная и клиническая фармакология органических и неорганических препаратов селена и эффективность применения их в ветеринарии

- 2 -

На правах рукописи

БАЛЫМ ЮРИЙ ПЕТРОВИЧ

Экспериментальная и клиническая фармакология органических и неорганических препаратов селена и эффективность применения их в ветеринарии

16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Воронеж - 2009

Работа выполнена в отделе фармакологии и токсикологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» РАСХН.

Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор Шабунин Сергей Викторович.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Слободяник Виктор Иванович, доктор ветеринарных наук Уразаев Дмитрий Николаевич, доктор ветеринарных наук, профессор Турченко Алексей Николаевич.

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Белгородская государственная сельскохозяйственная академия 309103, Белгородская обл., пос. Майский, ул. Вавилова, 24

Защита состоится «23» октября 2009 г. в 10 часов на заседании совета
ДМ 006.004.01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН по адресу: 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИВИПФиТ.

Автореферат разослан «___» __________ 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Т.И. Ермакова

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Создание широкой сети промышленных животноводческих комплексов поставило перед ветеринарной наукой ряд проблем, связанных с совершенствованием технологических систем сельскохозяйственных предприятий, обеспечивающих получение здорового приплода с высокой резистентностью и реактивностью, с одной стороны, разработкой более эффективных средств и способов общей неспецифической и специфической профилактики и терапии болезней животных, особенно молодняка, с другой (В.С. Шипилов с соавт., 1987; С.М. Сулейманов, 2000; А.Г. Шахов с соавт., 1997, 2000 и др.). Вместе с тем, очевидно, что применение лекарственных средств специфического этиопатогенного действия не может устранить основную причину патологического состояния, являющегося в большинстве случаев следствием нарушения метаболизма - высокоинтегрированного и целенаправленного процесса, обеспечивающего обмен веществ и энергии между клеткой и средой (Г.А. Востроилова, 2007; Рецкий М.И. с соавт. 2008).

Одной из причин замедления роста, дегенеративных изменений мышечной ткани и печени, кардиомиопатии, нарушений эмбриогенеза и репродуктивной функции может служить дефицит селена в рационе питания сельскохозяйственных животных (В.Т. Самохин, 2003).

Негативные изменения в функционировании органов, систем органов и организма как единого целого при низком содержании селена обусловлены тем, что на клеточном уровне данный микроэлемент играет ключевую роль в поддержании целостности мембран, формирует активные центры таких ферментов, как глутатионпероксидаза, глицинредуктаза, формиатдегидрогеназа препятствует накоплению внутриклеточного кальция, участвует в метаболизме аминокислот и кетокислот, а так же целого ряда энергопродуцирующих превращений (Тутельян В.А. с соавт., 2002; Барабой В.А. с соавт., 2004; В.В. Ермаков, 2004). Указанные свойства свидетельствуют об участии селена в первой и второй фазе биохимической адаптации: окисление чужеродных веществ с образованием органических окисей и перекисей, связывание и выведение активных метаболитов (Обольский О.Л. с соавт, 1998; В.И. Коржов с соавт., 2007).

В последние годы разработаны и предложены для практического применения комплексные препараты на основе селенита натрия (селерол, Е-селен, селевит, седимин и др.) и органические соединения селена: селенофилы, биоселен, дрожжевой селен, селенопиран, ДАФС-25. Вместе с тем, перечень селенсодержащих лекарственных средств не так велик, а некоторые из них обладают целым рядом недостатков, таких как, высокая токсичность, быстрый срок выведения из организма и некоторые др. В связи с чем, разработка новых комплексных селенсодержащих препаратов, проведение исследования по выяснению их фармакологических и токсикологических свойств, оценка эффективности органических и неорганических соединений селена является весьма перспективным для ветеринарии.

С учетом вышеизложенного, были определены общая направленность исследований, выбор методических подходов и объектов исследований, объем и разнообразие экспериментальных работ и клинической апробации новых препаратов.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы было исследование токсических свойств и фармакологического действия новых селенсодержащих препаратов: селемаг (комплексный неорганический препарат селена), селеноорганического - селеданта и его субстанции - диметилдипиразолилселенида, оценка профилактической и лечебной эффективности селеданта и селемага при акушерско-гинекологических болезнях коров и свиней, заболеваниях новорожденных телят и поросят, и их влияние на продуктивность и качество продукции.

Для достижения данной цели на разрешение были поставлены следующие задачи:

ѕ изучить биологическую активность и токсикологические свойства комплексного неорганического препарата селена - селемага;

ѕ определить токсикологические параметры 4,4-ди-[3-(5-метилпиразо-лил)]селенид (ДМДПС) и препарата на его основе - селеданта;

ѕ изучить биологическую активность ДМДПС;

ѕ изучить фармакологическое действие селемага и селеданта на гомеостаз и репродуктивную функцию крупного рогатого скота и свиней;

ѕ выявить влияние селеданта и селемага на рост, развитие, молочную и мясную продуктивность и качество молока и мяса крупного рогатого скота и свиней;

ѕ изучить эффективность применения селеданта и селемага для профилактики болезней телят и поросят;

ѕ разработать нормативную документацию и наставления по применению ДМДПС, селеданта и селемага.

Научная новизна. Впервые экспериментально разработаны и клинически оценены новые высокоэффективные препараты на основе неорганических и органических соединений селена для профилактики и лечения заболеваний продуктивных животных, улучшения роста и развития молодняка.

Изучены фармакологические свойства и определены параметры токсичности препаратов селена: селемага, селеданта и субстанции - диметилдипиразолилселенида.

В опытах на лабораторных и сельскохозяйственных животных установлено, что данные препараты обладают выраженными адаптогенными и антиоксидантными свойствами; их применение нормализует гомеостаз, повышает продуктивность, качество молозива, молока и мяса, репродуктивные функции коров и свиноматок, рост и развитие телят и поросят.

Конкретизированы и систематизированы данные о механизме действия препаратов селена. Установлено, что направленность биологической активности селенсодержащих препаратов зависит от химической природы соединений, входящих в состав лекарственного средства (неорганическая и органическая формы).

Показано, что применение селеданта, препарата органической природы, в большей степени способствует коррекции гомеостаза: снижению дисбаланса про- и антиоксидантных процессов, нормализации морфологических и биохимических показателей крови у крупного рогатого скота и свиней, чем использование селенита натрия и селемага. установлено более выраженное положительное действие селеданта, чем селемага на рост и развитие телят и поросят, молочную и мясную продуктивность, воспроизводительную способность животных, профилактику и лечение болезней коров, свиноматок, телят и поросят.

Результаты проведенных исследований вносят определенный вклад в развитие теории рационального использования различных форм микроэлемента селена для профилактики заболеваний, повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и качества получаемого молока и мяса.

Научная новизна исследований подтверждена двумя патентами РФ №2321414 и №2301535.

Практическая значимость. Полученные результаты послужили основанием для разработки технологии получения, контроля качества и инструкции по применению субстанции ДМДПС для производства лекарственных средств для животных, которые вошли в разработанную и утвержденную нормативную документацию на 4,4-ди-[3-(5-метилпиразолил)]селенид (СТО 10590965-0008-2006) и инструкцию, утвержденную Россельхозназдором РФ (ПВР-2-1.7/01907 от 03.04.2007).

Разработаны технология производства, контроль качества и инструкция по применению лекарственного средства селеданта для регуляции окислительно-восстановительных процессов, нормализации обмена веществ, регуляции репродуктивной функции и профилактики послеродовых патологий, повышения резистентности животных к заболеваниям, которые вошли в нормативно-техническую документацию на препарат (СТО 10590965-0005-2007) и инструкцию, утвержденную Россельхозназдором РФ (ПВР-2-1.7/01895 от 03.04.2007).

Разработаны технология производства, контроль качества и инструкция по применению лекарственного средства селемаг для профилактики и лечения заболеваний, развивающихся на фоне недостаточности витамина Е и селена, которые вошли в нормативную документацию на препарат селемаг
(ТУ 9353-030-18009711-04 от 24.11.2005 г.) и инструкцию по применению, утвержденную Россельхознадзором РФ (ПВР -2-4.3/01388 от 06.12.2005).

Разработаны и научно обоснованы показания к применению селемага и селеданта для повышения воспроизводительных функций коров и свиноматок, профилактики послеродовых заболеваний коров, свиноматок и желудочно-кишечных болезней телят и поросят, повышения молочной и мясной продуктивности, качества молока и мяса, роста и развития телят и поросят.

Апробация результатов исследований. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на ежегодных отчетных конференциях и заседаниях Ученого совета ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии (Воронеж, 2004-2008гг.); Российском ветеринарном конгрессе, XV Московском международном ветеринарном конгрессе (2007); Всероссийской научно-практической конференции «Молочное и мясное скотоводство: состояние и перспективы развития в южном федеральном округе» (г. Черкесск, 2007); X Международной научно-практической конференции, посвященной 40-летию образования кафедры крупного животноводства и переработки животноводческой продукции и кафедры свиноводства и мелкого животноводства Белорусской ГСХА «Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства» (Республика Беларусь, г.Горки, 2007); научно-практической конференции «Научное обеспечение ветеринарного обслуживания животноводства в условиях реформирования сельскохозяйственного производства» (г. Вологда, 2007); первом съезде ветеринарных фармакологов России (г. Воронеж, 2007); 16-й Всероссийской научно-методической конференции по патологической анатомии животных
(г. Ставрополь, 2007); XIV Международной научно-практической конференции «Современные проблемы интенсификации производства свинины» (г. Ульяновск, 2007); Международной научно-практической конференции «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного и продуктивного здоровья животных» (г. Воронеж, 27-29 мая 2009 г.).

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликована 1 монография, 35 печатных работ, из них 12 в журналах, рекомендованных ВАК РФ, 2 патента.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 350 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 217 отечественных и 117 иностранных авторов и приложения. Работа содержит 130 таблиц, иллюстрирована 14 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту:

ѕ токсикометрические параметры ДМДПС, селеданта и селемага;

ѕ фармакологические свойства ДМДПС, селеданта и селемага;

ѕ состояние гомеостаза, продуктивность и качество продукции крупного рогатого скота и свиней при применении селеданта и неорганических препаратов селена;

ѕ клиническая эффективность применения различных препаратов селена для профилактики послеродовых заболеваний коров, свиноматок и желудочно-кишечных болезней новорожденных телят и поросят.

2. Материал и методы исследования

Работа выполнена в 2001-2008 гг. в отделе фармакологии и токсикологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Россельхозакадемии в соответствии с планами НИР по Государственной теме: "Изучить на молекулярно-биохимическом, структурно-функциональном, системно-физиологическом и экологическом уровнях и определить причины и механизмы перехода организма из нормального состояния в патологическое и на этой основе разработать средства, методы и технологии защиты здоровья и продуктивности животных" (№ гос. регистрации 01.200.117018).

Отдельные исследования по определению параметров токсичности изучаемых препаратов и по их влиянию на животных проведены при участии сотрудников ГНУ ВНИВИПФиТ Востроиловой Г.А., Беляева В.И., Ермаковой Т.И., Сулейманова С.М., Золототрубова А.П., Ческидовой Л.В., Сафонова В.В. В проведении научно-хозяйственных экспериментов принимали участие Алехин Ю.Н. (ГНУ ВНИВИПФиТ), Курило Н.Ф. (ООО «Зооветцентр») и другие, которым автор выражает искреннюю признательность за оказанную помощь и плодотворное сотрудничество.

Научно-производственные опыты проведены на базе хозяйств Харьковской области: ЗАТ «Шебелинское» Балаклевского района; ПСП «Родина» Двуречанского района; ЗАСТ «Украина» Чугуевского района, с/комплекса «Слобожанский» Чугуевского района.

Экспериментальные и научно-производственные опыты проведены в соответствие с требованиями к врачебно-биологическому эксперименту по подбору аналогов, постановке контроля, соблюдению одинаковых условий кормления и содержания животных в период проведения работы и учета результатов (И.Т. Фролов, 1965).

Для оценки биологической активности и изучения фармакотоксиколгических свойств диметилдипиразолилселенида, селеданта и селемага использовали культуру Paramecium caudatum, 660 белых мышей, 1316 белых крыс, 35 кроликов, 134 поросенка, 74 теленка и 20 морских свинок.

Для определения фармакологических свойств изучаемых препаратов в научно-хозяйственных опытах материалом для исследований служили 60 дойных и 96 сухостойных коров, 60 новорожденных телят, 45 телят на откорме, 60 свиноматок, 1400 новорожденных поросят, 45 поросят на откорме.

С целью выявления адаптогенных свойств ДМДПС проводили иммобилизацию белых крыс, являющуюся интегральной моделью острого стресса (Волчегорский В.А. с соавт, 2000).

Стресс-корректорные свойства ДМДПС оценивали на модели эмоционально-физической нагрузки в условиях плавания мышей с грузом 5 % от веса тела (Бузлама В.С. с соавт., 1997).

Оценку антиоксидантных свойств препаратов селена проводили на модели «оксидативного стресса» путем введения животным 5,6-диоксиурацил-моногидратом (ДОУМГ), механизм общетоксического воздействия, которого реализуется посредством образования активных форм кислорода и запуском в клетке цепи свободнорадикальных реакций (Николаева М. И. с соавт.,1986). ДОУМГ компании «Sigma» (коммерческое название - аллоксан) вводили в дозе 140,0 мг/кг однократно подкожно, длительность эксперимента - 14 дней. Массу тела животных определяли до введения ДОУМГ и на 14-е сутки эксперимента. Оценку эффективности защитного действия ДМДПС проводили на основании сравнения выживаемости и динамики изменения массы тела животных опытных групп по отношению к контрольной группе.

Токсические свойства препаратов оценивали методом определения острой и хронической токсичности, а отдаленных последствий - изучением аллергенной, эмбриотоксической, тератогенной и мутагенной активности в соответствии с «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (ГУВ СССР, 1991) и руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (Москва, 2000).

Для оценки общего действия препаратов в крови определяли: количество эритроцитов (1012/л) и лейкоцитов (109/л) на счетчике частиц Культер-Каунтер, гемоглобина (г/л) - гемоглобинцианидным методом и с помощью гемометра Сали, глюкозу (мМ/л) ортотолуидиновым методом Гультмана в модификации Хиваринена-Никкила (О.Д. Кушманова, 1983); в сыворотке крови: общий белок (г/л) рефрактометрически, белковые фракции электрофорезом в агаровом геле (И.П. Кондрахин,1985), содержание мочевины (мМ/л) по цветной реакции Фирона в модификации В.Г. Колб (1976), общий кальций (мМ/л) комплексометрическим способом по Уилкинсону (И.П. Кондрахин, 1985), неорганический фосфор (мМ/л), активность щелочной фосфотазы, активность АЛАТ и АСАТ (мМ/лч) - колориметрическим методом с использованием спектрометра Specol 211, содержание общих липидов (г/л) - по цветной реакции с сульфофосфованилиновым реактивом (Кнайт с соавт., 1972), содержание холестерина (мМ/л) с помощью наборов фирмы «Lachema» на спектрофотометре СФ-46, содержание меди, цинка, марганца (мкМ/л), железа, магния, натрия (мМ/л) на атомно-абсорбционном спектрометре РЕ-703 фирмы «Perkin Elmer».

Для определения интенсивности процессов перекисного окисления липидов и состояния системы антиоксидантной защиты организма в крови определяли: содержание малонового диальдегида (мМ/л) (И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили, 1977), диеновых конъюгатов и кетодиенов (ед.опт.пл./мг липидов) (И.К. Шилина с соавт., 1978); активность глутатионпероксидазы (мк МG-SH/л х мин х 103 (Г.О. Кругликов, И.М. Штутман, 1976); в сыворотке крови: содержание флуоресцирующих оснований Шиффа (опт.ед./мл) (W.R. Bidlack,A.L. Tappel,1973), витамина Е (мкМ/л) (Р.Ш. Кисилевич, С.И. Скварко, 1972), витамина А (мкМ/л) по Бессею в модификации А.А. Анисимова (1969); в плазме крови - содержание витамина С (мкМ/л) (И.П. Кондрахин, 1985).

Для изучения неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма животных в сыворотке крови определяли бактерицидную активность (БАСК) по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) - по К. Кагромановой, З.В. Ермольевой (1966), комплементарную (КАСК) - по Г.Ф. Вагнеру (1963), классы иммуноглобулинов G, M, А (мг/мл) - методом иммунодиффузии в агаровом геле по Манчини (1965); в крови: фагоцитарную активность лейкоцитов с антигеном Staph. аureus по В.С. Гостеву (1950).

Молочную продуктивность коров учитывали путем проведения ежемесячных контрольных доек в течение двух смежных дней. Состав и свойства молозива и молока изучались в соответствии с методическими рекомендациями по технике анализа молока и молочных продуктов (ВИЖ, 1983) и по методике П.В. Кугенева и Н.В. Барабанщикова (1988) с использованием следующих стандартов: органолептическая оценка, ГОСТ Р52054-2003; определение чистоты молока, ГОСТ 8218-89; определение белка - методом формольного титрования, ГОСТ 23327-78; количество жира - стандартным сернокислым способом, ГОСТ 5867-90; плотность - с помощью ареометра типа АМ, ГОСТ 3625-84; кислотность - титрометрическим методом, ГОСТ 3624-92; размер и количество жировых шариков - подсчетом в камере Горяева.

Для изучения роста и развития подопытных животных проводили взвешивание их при рождении, а затем ежемесячно. На основании этих данных вычисляли абсолютную и относительную скорость роста по периодам выращивания по формуле С. Броди.

Для изучения мясной продуктивности проводили контрольной убой по методике ВИЖ (1977). У трех животных из каждой группы определяли: морфологический и химический состав туши, выход мышечной, жировой и костной ткани, проводили органолептическую оценку мяса.

Для характеристики клинического состояния животных при проведении экспериментов, определяли температуру тела, частоту пульса и дыхания, поедаемость кормов. Учитывали продолжительность беременности, характер течения родов, количество новорожденных телят и поросят, их массу при рождении и динамику роста, заболеваемость коров и свиноматок послеродовыми, а телят и поросят - желудочно-кишечными болезнями.

Расчет экономической эффективности проводили по Н.Н. Никитину в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ» (М.,1988).

Все полученные данные подвергали статистической обработке, с определением достоверности различий между соответствующими показателями контрольных, опытных и интактных групп животных, с использованием общепринятых методов математической статистики (Лакин Г.Ф., 1990; Гланц С., 1999) и прикладных программ «Statistica 5.5», «Excel» на РС «Celeron 2000».

3. Результаты собственных исследований

В экспериментах использовали: неорганическое соединение - селенит натрия, комплексный препарат на его основе - селемаг и органическое - субстанция - 4,4-ди-[3(5-метилпиразолил)] селенид (диметилдипиразолилселенид, ДМДПС) и препарат, созданный на основе ДМДПС - селедант.

3.1 Токсикометрическая и фармакологическая оценка 4,4-ди[3(5-метилпиразолил)] селенида

3.1.1 Острая и хроническая токсичность ДМДПС

При анализе результатов определения острой токсичности ДМДПС (табл. 1) установлено, что при внутрижелудочном введении его ЛД50 для белых мышей составляет 5800 мг/кг, белых крыс - 8079 мг/кг, а при внутрибрюшинном - соответственно 527,5 и 912,0 мг/кг массы тела, что позволило отнести ДМДПС к IV классу опасности - малоопасные вещества (ГОСТ 12.1.007-76).

Таблица 1 Параметры острой токсичности ДМДПС при однократном введении для лабораторных животных (мг/кг)

Вид животных	Параметры токсичности	Ошибка, SLD50
	МПД	LD16	LD50	LD84	LD100
Per os
Белые мыши	4850,0	5474,4	5800,0	6172,2	6650,0	±67,9
Белые крысы	4000,0	5803,0	8079,0	10150,0	13000,0	±463,9
Внутрибрюшинно
Белые мыши	440,0	494,1	527,5	585,9	640,0	±8,70
Белые крысы	450,0	686,0	912,0	1087,0	1350,0	±44,6

Симптомы отравления дмдпсом были однотипны и проявлялись пугливостью, адинамией, снижением роговичного рефлекса и реакции на внешние раздражители. Движения животных становились нескоординированными, учащенное дыхание сменялось редким. Они принимали боковое положение и погибали в глубокой коме. Латентный период отравления длился 15-90 минут в зависимости от введенной дозы. Смерть наступала в течение первых суток, а при введении высоких доз - через 1,5-2 часа.

Хроническую токсичность ДМДПС оценивали при его многократном (в течение 30 дней) пероральном введении в дозах 162 и 810 мг/кг массы тела (1/50 и 1/10 дозы от LD50). Применение ДМДПС в указанных дозах не вызывало существенных изменений в клиническом состоянии животных: поведение, груминг, аппетит, частота дыхания крыс, как в период применения препарата, так и в течение одной недели после были в норме. Случаев гибели подопытных животных не было, они не отличались от контрольных по приросту массы тела и относительной массе внутренних органов (рис. 1).

Рис.1. Динамика массы тела белых крыс при многократном применении ДМДПС рer os

При исследовании крови животных, которым вводили ДМДПС перорально в дозе 162,0 мг/кг массы тела, не отмечено существенных изменений в морфологических, биохимических показателях крови, по сравнению с таковыми у контрольных животных. Наиболее характерным изменением крови крыс, получавших ДМДПС в дозе 810 мг/кг, на 30-й день была незначительная гипопротеинемия и гипербетаглобулинемия, увеличение в сыворотке крови активности АлАТ, АсАТ - на 26,2 и 23,0 % соответственно, и на 20,0% -уровня билирубина, однако средние значения этих показателей не выходили за верхние границы нормы для данного вида животных.

При гистологическом исследовании органов подопытных, животных получавших перорально ДМДПС в дозах 162,0 и 810,0 мг/кг в течение 30 дней, и павших в остром эксперименте при определении ЛД50 установлено следующее:

В печени отмечены слабо выраженные дистрофические изменения гепатоцитов, которые сохранялись и спустя 15 дней после окончания введения препарата.

В почках выявлено малокровие, в эпителии околоклубочковых канальцев слабо выраженные дистрофические изменения. В строме отмечена очаговая лимфоцитарная инфильтрация, клубочки разной величины, просвет капсулы либо сужен, либо отсутствует, в эпителии канальцев мутное набухание, дистрофические изменения. Однако, спустя 15 дней после окончания введения ДМДПС, в почках остаются лишь незначительные дистрофические изменения.

В селезенке у всех видов опытных животных отклонения от контроля однотипны и сохраняются без динамики вне зависимости от сроков исследования. Селезенка полнокровна, ее фолликулы округлые, разной величины, зародышевые центры крупные, в крупных фолликулах светлые, в мелких - темные, перифолликулярный пояс широкий и рыхлый, богат малыми лимфоцитами, лимфобластами, эозинофилами, сегментоядерными нейтрофилами. В межфолликулярной зоне умеренное количество клеток, среди которых встречаются плазматические.

Патологические изменения в остальных органах (миокард, легкие, тонкий кишечник, мозг и надпочечники) характеризовались полнокровием, кровоизлиянием, чаще периваскулярного характера, отложением гематогенного пигмента вокруг сосудов и прилежащей к ним ткани, незначительными дистрофическими изменениями.

Изучение общекомпенсаторных реакций при действии на организм животных ДМДПС проведено на белых мышах при пероральном и внутримышечном способах введения препарата в пробе плавания с грузом 5% от массы тела. Установлено, что однократное введение ДМДПС не оказывает влияния на работоспособность мышей. Длительное же 20-кратное введение ДМДПС в дозе 1/10 ЛД50 снизило работоспособность белых мышей в разной степени в зависимости от способа введения. При одинаковой массе животных в опытной и контрольной группах продолжительность плавания в первой группе (580,0 мг/кг - внутрь) уменьшилась почти в 2,3 раза, во второй (53,0 мг/кг - в/м) - 1,7 раза. препарат в дозах 10,0 (в/м) и 116,0 (внутрь) мг/кг.

При определении коэффициента кумуляции дробное введение ДМДПС белым крысам в возрастающих дозах в начале первых четырех периодов не влияло значительно на прирост массы тела животных по сравнению с контрольной группой. К началу 6-го периода (0,75 ЛД50) отмечено снижение интенсивности роста крыс по сравнению с контролем, которое продолжалось до конца опыта.

Таблица 2 Влияние ДМДПС на выносливость белых мышей при динамической нагрузке

Кратность введения препарата	Продолжительность плавания животных (сек), доза, мг/кг
	11,0 (в/м) (n=10)	116,0 (внутрь) (n=10)	53,0 (в/м) (n=10)	580,0 (внутрь) (n=10)
Контроль	217,1±10,3	217,1±10,3	217,1±10,3	217,1±10,3
Однократное	224,7±10,3	213,8±10,3	216,5±10,3	215,3±10,3
20-кратное	204,1±7,4	199,4±11,7	126,7±8,1*	94,5±4,2*

*- Р < 0,05 по отношению к контролю

Суммарная доза, при которой было отмечено начало падежа животных, составила 26244 мг/кг. При дальнейшем введении препарата гибель белых крыс продолжалась до 23-го дня от начала опыта, когда погибли все подопытные животные, получавшие ДМДПС. Коэффициент кумуляции составил 5,42 и на основании этого ДМДПС может быть отнесен к слабо кумулирующим веществам (Каган Ю.С., 1981). Об этом также свидетельствует и относительно большая продолжительность жизни животных при его повторном введении.

Оценка раздражающего действия ДМПСД проведена при нанесении его на слизистую оболочку глаза и на кожу кроликов.

В первом опыте (контроль) под конъюнктиву правого глаза кролика вводили 3 капли стерильного физиологического раствора, опытным животным -раствор ДМДПС в концентрациях: 0,01 %; 0,1 %; 1,0 % по 1 разу в день в течение 5 дней. Клиническое состояние кроликов, при введении ДМДПС под конъюнктиву глаз, оставалось в пределах нормы, т.е. не выявлялись изменения температуры тела, частоты пульса и количестве дыхательных движений. ДМДПС в концентрациях 0,01 % и 0,1 % не вызывал изменений общего состояния животных и слизистой глаза по сравнению с контрольными кроликами. Применение 1,0%-го раствора препарата сопровождалось более выраженным, чем в контроле беспокойством, кратковременным (до 30 минут) слезотечением и слабым покраснением слизистой оболочки. Однако эти признаки наблюдаются только в течение первых 30 минут после введения препарата.

При изучении раздражающего действия ДМДПС на кожу установлено, что однократная аппликация на кожные покровы кроликам 0,1 и 1,0%-ного раствора ДМДПС, при плотности нанесения от 0,020 до 0,12 мл/см2, не приводила к повреждению кожи в виде эритемы или ее отеков, т.е. вещество не обладало раздражающим действием. Двадцатикратная аппликация 5%-го раствора ДМДПС при плотности нанесения 0,1 мл/см2 также не вызывал явлений сенсибилизации.

Выявление и количественная оценка потенциальной цитогенетической активности ДМДПС, его способности к индукции хромосомных аберраций, изучена на клетках костного мозга белых крыс, которым ДМДПС вводили внутримышечно однократно в дозе 92,0 мг/кг и четырехкратно в этой же дозе.

Установлено, что ДМДПС ни в одном из вариантов не вызвал увеличения уровня хромосомных аберраций в клетках костного мозга крыс, т.е. диметилдипиразолилселенид в изученной дозе не обладал мутагенной активностью.

3.1.2 Субхроническая токсичность ДМДПС для сельскохозяйственных животных

Субхроническая токсичность диметилдипиразолилселенида изучена на поросятах 2-месячного возраста при введении внутримышечно в дозах 18,2 и 91,2 мг/кг в течение 14 дней.

Установлено, что ДМДПС в изученных дозах не оказывал существенного влияния на клинический статус, скорость роста, поведение и аппетит поросят, а его многократное применение в тех же дозах существенно не влияло на морфологические и биохимические показатели крови животных. лишь при применении ДМДПС в дозе 91,2 мг/кг отмечена тенденция повышения в сыворотке крови уровня мочевины, креатинина, билирубина и активности АсАТ, что свидетельствовало о несколько возросшей нагрузке на почки ипечень.

Изучение субхронической токсичности ДМДПС на телятах месячного возраста при введении диметилдипиразолилселенида внутримышечно в дозах 18,2 или 91,2 мг/кг массы тела показало, что в изученных дозах он также не оказывает существенного влияния на рост, клинический статус, поведение, аппетит, функции пищеварения и мочеотделения телят, морфологические и биохимические показатели их крови. Так же, как и в опыте на поросятах, была выявлена тенденция повышения в сыворотке крови уровня мочевины и креатинина, количества билирубина и активности АсАТ и АлАТ при введении препарата дозе 91,2 мг/кг массы тела.

3.1.3 Адаптогенная активность, стресс-корректорное действие и антиоксидантная активность диметилдипиразолилселенида

При оценке биоцидных свойств ДМДПС установлено, что данное органическое соединение селена не проявляет биоцидного действия в разведениях 1?10-3 и ниже, а в разведениях 1?10-1, 1?10-6, 1?10-7 не оказывает существенного влияния на устойчивость инфузорий к изменению осмолярности среды. В концентрации 1?10-4 индекс биологической активности составил 1,138, что указывает на защитное влияние препарата для инфузорий при действии на них неблагоприятного фактора, в данном случае 15% раствора натрия хлорида (табл. 3).

Таблица 3 Действие ДМДПС при повреждении инфузорий Р. Caudatum гипертоническим раствором NaCl

Испытуемый образец	Индекс биологической активности объекта в разведениях, мг/мл
	1?10-1	1?10-2	1?10-3	1?10-4	1?10-5	1?10-6	1?10-7
Контроль	1,000	1,000	1,000	1,000	1,000	1,000	1,000
ДМДПС	1,000	1,000	1,000	1,138	1,012	1,000	1,000

При определении влияния ДМДПС на интенсивность размножения инфузорий установлено, что он повышает интенсивность размножения свободноживужих одноклеточных. Максимальная интенсивность размножения (МИР) парамеций наблюдается при применении ДМДПС в концентрации 1?10-3, что проявляется повышением МИР в 1,5 раза по сравнению с контролем.

Адаптогенные свойства ДМДПС далее оценены на модели острого иммобилизационного стресса в опыте на 120 самцах белых крыс. Животные были разделены на 4 групп по 30 в каждой, из которых три являлись опытными, но различавшимися по вводимой дозе вещества (5,0; 10; 50 мкг/кг); крысам четвертой группы вводили соответствующий объем стерильного физиологического раствора. Иммобилизация проводилась через 6 часов после введения ДМДПС.

Иммобилизация животных контрольной группы сопровождалась развитием у них симптомов острого стресса - снижением массы тела, развитием эрозивно-язвенных поражений слизистой оболочки желудка, гипертрофией надпочечников и инволюцией тимуса и селезенки.

У животных подопытных групп ДМДПС во всех дозах обеспечивал предупреждение стрессогенного снижения массы тела животных на 15,0-45,2%. максимальная эффективность выявлена при применении ДМДПС в дозе 10,0 мкг/кг (табл. 4).

Таблица 4 Влияние ДМДПС при иммобилизационном стрессе на изменение массы тела крыс и язвообразование

Показатели	Контроль	Доза, мкг/кг
		5,0	10,0	50,0
Масса тела до опыта, г	138,7±7,5	137,5±4,1	138,9±5,3	141,7±4,9
Масса тела после иммобилизации, г	126,3±6,8	129,2±4,0*	132,1±4,5*	130,9±3,8*
Снижение массы, %	8,94	6,0	4,9	7,6
Кол-во животных с язвами, %	75,0	60,0	60,0	80,0
Суммарная длина язв, мм	6,96±1,89	1,40±0,58*	1,20±0,61*	4,04±1,55

* - Р < 0,05 по отношению к контрольной группе

Ульцеропротективные свойства выявлены при введении ДМДПС во всех испытанных дозах. Это проявлялось снижением количества животных с язвенными поражениями слизистой оболочки желудка в среднем на 15% и уменьшением суммарной длины язв в 1,7-5,8 раза.

Наиболее выраженное снижение интенсивности язвообразования было при введении диметилдипиразолилселенида в дозах 5,0 и 10,0 мкг/кг массы тела.

Стрессогенная гипертрофия надпочечников при иммобилизации в контрольной группе составила 124,0%, в опытных - лишь 104,0; 96,0; 108,0 % соответственно, а по отношению к контролю степень гипертрофии их снижалась на 16,2; 22,6 и 12,9 %. Наиболее эффективно применение диметилдипиразолилселенида в дозе 10,0 мкг/кг, о чем свидетельствует снижение гипертрофии надпочечников в 1,3 раза по сравнению с контрольными животными.

ДМДПС в дозах 5,0; 10,0; 50,0 мкг/кг не оказывал существенного влияния на изменение массы селезенки и тимуса, выявлена лишь тенденция к проявлению защитного эффекта соответственно на 8,8-15,0; 8,0-9,4% и 6,9-9,4-7,3% в зависимости от дозы.

Оценку антиоксидантных свойств ДМДПС проводили на белых беспородных крысах-самцах на модели «оксидативного стресса» при введении 5,6-ди-оксиурацилмоногидрата (ДОУМГ). Животные были разделены на четыре группы. Первая группа - интактные животные. Животным 2-ой группы вводили ДОУМГ (отрицательный контроль). Крысам 3-ей группы за 7, 5, 3 и 1 сутки до интоксикации применяли, внутримышечно ДМДПС в дозе 10,0 мкг/кг раз в сутки. Животным 4-ой группы двукратно, внутримышечно вводили ДМДПС в дозе 10,0 мкг/кг через 1 час и 24 часа после применения ДОУМГ. Об антиоксидантных свойствах ДМДПС судили по накоплению в крови продуктов пероксидного окисления липидов (ПОЛ).

Установлено, что ДОУМГ вызывает гибель 57,1% животных. При профилактическом введении диметилдипиразолилселенида выживаемость животных повышается на 34,2% по сравнению с контролем. На фоне действия ДМДПС, введенного после ДОУМГ, гибель животных снижается на 28,5% по сравнению с группой отрицательного контроля.

При введении ДОУМГ в группе отрицательного контроля масса тела крыс снижалась на 19,9%. Применение ДМДПС до и после введения ДОУМГ предотвращало снижение массы тела на 14,2 и 12,6% соответственно.

Профилактическое введение ДМДПС животным, которым в последующем вводили ДОУМГ, снижало уровень диеновых конъюгатов на 24,9%, кетодиенов на 32,0% и малонового диальдегида на 34,7%, по сравнению с животных, которым вводили только ДОУМГ (табл. 5).

Таблица 5 Влияние профилактического применения ДМДПС на показатели ПОЛ в крови крыс в норме и при ввведении ДОУМГ

№	Группа животных	Диеновые конъюгаты, D232/мг липидов	Кетодиены, D278/мг липидов	МДА, мкМ/л
1	Контроль	0,1220,010	0,0300,021	1,390,015
2	ДОУМГ	0,3050,024*	0,0750,030*	2,220,041*
3	ДМДПС + ДОУМГ (профилактика)	0,2290,036*	0,0510,034*	1,450,057*
4	ДОУМГ +ДМДПС (лечение)	0,2350,012	0,0490,015	1,550,010

*-P1-2,3,4 < 0,05; - P2-3,4 <0,05

Применение ДМДПС после интоксикации так же ограничивало интенсивность свободнорадикального окисления (СРО).

В целом применение ДМДПС в меньшей степени отражается на содержании первичных продуктов ПОЛ - конъюгированных диенов и в большей степени на концентрации малонового диальдегида.

Это может объясняться, вероятно, тем, что его применение способствует ограничению ПОЛ на более поздних этапах СРО и блокирует дальнейшее развитие цепных реакций СРО.

Таким образом, проведенными исследованиями установлено наличие стресс-корректорного, адаптогенного и антиоксидантного действия у ДМДПС.

3.2 Токсикометрическая и фармакологическая оценка селеданта

3.2.1 Острая и хроническая токсичность селеданта

Эксперименты по определению острой токсичности селеданта выполнены в двух повторностях на белых мышах и белых крысах обоего пола при введении препарата однократно внутрь в дозах от 5,0 до 30,0 г/кг и 10,0-60,0 г/кг массы тела и внутрибрюшинно (дозы выше 15,0 г/кг вводили в два приема с интервалом в 2 часа). Гибели животных при всех дозах в период опыта на протяжении 14 дней не установлено.

Среднелетальную дозу - LD50 определить не удалось, так как при введении селеданта внутрь в дозе 30,0 г/кг или 60 г/кг м.т. внутрибрюшинно гибели животных не отмечалось.

Патоморфологическое изучение, по окончании эксперимента, не выявило нарушений в структурной организации внутренних органов.

При изучении подострой токсичности селеданта установлено, что семикратное введение селеданта внутримышечно в дозах (по ДВ) 10 и 100 мкг/кг не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии животных - поведение, аппетит, частота дыхания у всех животных опытных групп в период опыта и в течение месяца после они оставались в пределах нормы.

Рис.2. Среднесуточные привесы крыс при многократном введении селеданта в дозе 10 и 100 мкг/кг массы тела (в % к исходному)

Характер динамики роста крыс под влиянием селеданта в дозе 10 мкг/кг в период наблюдений существенно не отличался от животных контрольной группы, но при этом интенсивность набора массы тела была устойчиво выше на 3,7-9,1% (рис. 2). Такое действие было равномерным и стабильным и наблюдалось еще 30 дней после опыта. Селедант в дозе 100 мкг/кг проявил такое же, но менее выраженное влияние на рост белых крыс.

Относительная масса внутренних органов крыс, которым применяли препарат, морфологические и биохимические показатели крови существенно не отличались от таковых у крыс контрольной группы.

Эмбриотоксическое и тератогенное действие селеданта изучено на самках белых крыс. Животным опытных групп на пятый день беременности (период имплантации) и второй на 10-й день беременности (период органогенеза) вводили внутримышечно селедант в дозе 100 мкг/кг, третья группа - контрольная.

Результаты изучения эмбриотоксического действия селеданта в дозе 100 мкг/кг показали, что у крыс опытных групп наблюдалась определенная тенденция положительного влияния селеданта на эмбриогенез (табл. 6).

Таблица 6 Эмбриотоксическое и тератогенное действие селеданта
в дозе 100 мг/кг (по ДВ)

Показатели	Контроль	Через
		5 дней	10 дней
Количество желтых тел на 1 самку	11,9±0,5	11,7±0,4	11,6±0,5
Количество живых эмбрионов на 1 самку	9,5±0,3	10,8±0,3*	9,9±0,4
Количество мертвых эмбрионов на 1 самку	1,0±0,3	0,9±0,4	1,0±0,3
Общая эмбриональная смертность, %	13,5±0,5	12,9±0,4	12,7±0,5
Доимплантационная гибель, %	4,5±0,5	4,12±0,09*	4,0±0,15*
Постимплантационная гибель, %	9,2±0,7	9,0±0,4	8,9±0,4
Выживаемость,%	86,2±9,1	88,9±10,5	88,9±0,4
Средний вес 1 крысенка, г	6,03±0,184	6,14±0,169	6,19±0,217
Средняя длина туловища 1 крысенка, мм	46,2±0,4	48,3±0,9	48,9±0,5
Средняя масса плаценты, мг	295,6±40,2	312,4±28,4	309,6±27,7

* - Р<0,01 по сравнению с контролем

Количество живых эмбрионов у животных опытных групп, по сравнению с контролем, через 5 дней было выше на 13,7%, через 10 дней - на 4,2%. При этом общая эмбриональная смертность в опытных группах была ниже, чем в контроле, доимплантационная - на 8,4% и 11,1% на 5-й и 10-й дни соответственно. Не установлено и тератогенного действия селеданта. Его применение способствовало увеличению веса крысят опытной группы, средней длины туловища и массы плаценты.

Крысята, рожденные от самок опытных групп, не отличались от крысят самок контрольной группы. Морфологические исследования показали отсутствие аномалий развития внутренних органов и скелета плодов.

При изучении раздражающего действия селеданта установлено, что клиническое состояние кроликов, после нанесения препарата на конъюнктиву глаза, оставалось в пределах нормы, не было отмечено изменений температуры тела, частоты пульса, количества дыхательных движений и раздражения роговицы, конъюнктивы и век. однократная аппликация селеданта на кожу кроликов с плотностью нанесения от 0,020 до 0,12 мл/см2 не вызывала раздражения и повреждения кожи в виде эритемы или отеков.

Определение раздражающих свойств селеданта при внутрикожной инъекции проведено на кроликах. препарат вводили в объеме 0,3 см3. Через 20 минут после введения препарата внутривенно вводили 1% раствор трипанового синего в дозе 1 см3/кг массы тела. Установлено, что селедант оказывает слабое раздражающее действие через 30 минут после введения, которое проходило через час.

Изучение кожно-резорбтивного действия селеданта проводили на белых крысах, препарат наносили на предварительно подготовленные участки кожи при плотности нанесения 50-60 мг/см2 и экспозиции 2 часа, 6 раз в неделю. Установлено, что 20-кратная аппликация селеданта на кожу крыс не вызывает гибели животных, нарушения её целостности на месте нанесения.

При изучении аллергизирующих свойств селеданта на белых крысах, препарат наносили на кожу по 0,5 мл на площадь 5 см2 (плотность 0,1 мл/см2) в течение трех недель по 6 раз в неделю. Первое тестирование селеданта, путем нанесения в дозе в 5 раз превышающую сенсибилизирующую, проводили после 10 аппликаций, затем - через 14 и 20 суток от начала аппликации. Животным контрольной группы применяли только разрешающие дозы. установлено, что 20-кратная аппликация препарата не вызывает явлений сенсибилизации.

3.2.2 Субхроническая токсичность селеданта для сельскохозяйственных животных

Определение субхронической токсичности селеданта проводили на телятах. Препарат вводили в дозах 10, 20, 40 и 60 мкг/кг в течение 5 дней, животным 5-й группы (контроль) применяли селенит натрия в дозе 100 мкг/кг, 6-я группа телят служила отрицательным контролем.

Применение селеданта в указанных дозах существенно не влияло на клинико-физиологические показатели подопытных телят (поведение, аппетит, заболеваемость, признаки токсикоза, температура тела, частота пульса, дыхания и т.д.). Животные группы отрицательного контроля за 35 дней опыта дали среднесуточный прирост массы тела 400,0±47,5 г. В группе, где телятам применяли селенит натрия, среднесуточный прирост массы тела составил 436,0±27,9 г. наибольшие среднесуточный прирост массы тела (475,0±47,1 г) был у животных, получавших селедант в дозе 10 мкг/кг, что на 18,8% выше, чем у телят контрольной группы.

При изучении влияния селеданта на интенсивность СРО липидов установлено, что наиболее существенно применение селеданта снижает содержание кетодиенов на 14,4 и 15,1%, малонового диальдегида - на 22,1 и 18,0% в дозах 10 и 20 мкг/кг соответственно. Наряду с этим После применения селенита натрия в дозе 100 мкг/кг в крови подопытных телят, по сравнению с контролем, статистически достоверного снижения уровня кетодиенов не зафиксировано, а концентрация МДА была ниже на 12,6%.

Определение субхронической токсичности на поросятах, получавших селедант в дозах 20, 40 и 60 мкг/кг в течение 5 дней, показало, что препарат в указанных дозах не оказывает отрицательного влияния на аппетит, общее состояние, поведение. В дозе 20 мкг/кг массы тела селедант более заметно оптимизирует показатели гомеостаза за счет повышения содержания эритроцитов и гемоглобина.

3.3 Токсикометрическая и фармакологическая оценка селемага

3.3.1 Острая и хроническая токсичность селемага

установлено, что по параметрам острой токсичности на лабораторных животных селемаг согласно ГОСТ 12.1.007-76 относится к IV классу опасности - веществам малоопасным (табл. 7).

Таблица 7 Параметры острой токсичности селемага для лабораторных животных (мг/кг) при однократном внутрижелудочном введении

Вид животных	Параметры токсичности	SLD50
	МПД	LD16	LD50	LD84	LD100
Белые мыши	4000,0	4926,0	7671,3 (6500-8840)	10515,1	11912,4	±574,7
Белые крысы	4000,0	4848,5	8313,3 (7180-9440)	11913,7	13680,1	±563,4

Изучение хронической токсичности показало, что многократное пероральное введение селемага в дозах 166,3 и 831,3 мг/кг на 7, 14 и 21-й дни опыта не вызывало существенных изменений в клиническом состоянии животных: поведение, частота дыхания животных контрольной и опытных групп в период применения препарата, оставались в пределах нормы, нарушений функций пищеварения и мочеотделения и гибели животных зафиксировано не было.

Относительная масса органов крыс, которым 21 день вводили селемаг, морфологические и биохимические показатели крови существенно не отличались от таковых у животных контрольной группы на 7, 14 и 21 дни его применения.

Раздражающие свойства селемага были изучены на кроликах. Нанесение препарата на слизистую глаз или однократная аппликация на кожу, при плотности нанесения 0,020-0,12 мл/см3 поверхности не вызывает изменения кровенаполнения конъюнктивы, лакримаций, повреждений кожи, эритемы или отёков.

При оценке аллергизирующих свойств селемага на морских свинках и белых крысах, с помощью конъюнктивальной пробы, реакции непрямой дегрануляции тучных клеток (РДТК), реакции специфической агломерации лейкоцитов (РСАЛ) и реакции специфического лизиса лейкоцитов установлено отсутствие аллергенного действия селемага.

Оценку эмбриотоксического и тератогенного действия препарата проводили на самках белых крыс, разделенных на три группы: контрольную и две опытные. Крысам первой опытной группы на пятый день беременности (период имплантации) и второй на 10 день беременности (период органогенеза) вводили селемаг в дозе 0,05 мл/кг внутримышечно. Половину самок убивали на 19-20 день беременности.

Существенных различий в плодовитости крыс опытных и контрольной групп не установлено. Число мертвых эмбрионов и желтых тел на самку было одинаково во всех группах, доимплантационная гибель на 5-й день в опыте была ниже, чем в контроле на 6,1%, к 10-му дню - 9,4%, а постимплантационная - на 6,8% и 5,3% соответственно. Общая эмбриональная смертность крысят из подопытной группы также была ниже, чем в контроле на 5 и 10 дни на 21,6 и 9,0%. Следовательно, селемаг в дозе 0,05 мл/кг не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием.

Изучение субхронической токсичности селемага, показало, что его введение поросятам в дозе 0,05 мл/кг (терапевтическая доза) в течение 10 дней не влияет на клинико-физиологическое состояние животных.

Рис. 3. Влияние селемага на динамику массы тела поросят

В течение опыта поросята были энергичными, имели хороший аппетит, рефлексы сохранены, нарушений функций пищеварения и мочеотделения не было установлено. Прирост массы тела поросят опытной группы был несколько выше, чем в контроле на 7,14 и 21 день (рис.3). Существенных изменений морфологических и биохимических показателей крови и мочи поросят, получавших селемаг, не установлено.

Данные о функциональном состоянии печени, почек, других систем и органов, показатели, характеризующие белковый, углеводный, жировой и минеральный обмены, а также активность ферментных систем находились в пределах физиологической нормы.

Изучение защитных свойств селемага на белых крысах при «оксидативном стрессе», при профилактическом применении препарата в дозе 0,05 мл/кг за 7, 5, 3 и 1 сутки до введения ДОУМГ (профилактическая эффективность) и через 1 час и 24 часа после введения ДОУМГ (лечебная эффективность), показало, что препарат достаточно выраженными защитными свойствами, связными с наличием у него антиоксидантной активности.

Установлено, что введение ДОУМГ вызывает гибель 55,6% животных в контрольной группе. Введение селемага за сутки до применения ДОУМГ повышало выживаемость животных на 11,2%, а за 7 дней - до 88,9%. Применение ДОУМГ животным контрольной группы снижало массу тела крыс, оставшихся живыми на 19,9%, тогда как при введении селемага за 7, 5 и 3 дня до применения токсиканта наблюдалась тенденция к уменьшению потери массы тела крыс опытных групп на 1,2; 2,0 и 3,8%, а при введении препарата за сутки или через один час после введения ДОУМГ - на 8,9% и 9,3% соответственно.

3.4 Влияние препаратов селена на клинико-физиологические показатели и продуктивность крупного рогатого скота

3.4.1 Влияние препаратов селена на гомеостаз и систему ПОЛ-АОЗ у коров в период сухостоя

В опыте использовали клинически здоровых коров, которым на 1-ой неделе сухостойного периода однократно внутримышечно вводили селедант в дозе 10 мкг/кг (1-я группа), второй - 0,5% раствор селенита натрия в дозе 10 мл, третья группа коров была контрольной.

Установлено, что у животных подопытных групп через 30 дней после введения препаратов, в сравнении с контролем (рис. 4), содержание гемоглобина повышалось: при применении селеданта на 14,6%, селенита натрия - на 7,2%, эритроцитов - на 16,6 % и на 10,9 % соответственно. У коров первой группы в крови, по сравнению с животными, получавшими селенит натрия, уровень глюкозы был выше на 5,6%, а витамина А - на 10,9%. В то же время при применении селенита Na у животных в крови, по сравнению с селедантом, было выше содержание витаминов С и Е соответственно на 18,2 и 25,0%.

При введении сухостойным коровам селеданта уровень иммуноглобулинов класса G в сыворотке крови увеличивается на 13,7 %, а селенита Na - на 9,5 %, что может свидетельствовать об их меньшей окислительной модификации при интенсификации процесса СРО в этот период. Это подтверждается тем, что при введении коровам селенита Na уровень вторичных продуктов ПОЛ - кетодиенов снижается на 16,4 %, селеданта - на 25,6 %, малонового диальдегида - на 11,6 и 23,3 % соответственно при сохранении общего пула основных эндогенных атиоксидантов, который снижается у животных контрольной группы.

Рис.4. Содержание эритроцитов, гемоглобина, витаминов А, Е и С, глюкозы в крови сухостойных коров, получавших препараты селена (в % к контролю)

3.4.2 Воспроизводительная способность, молочная продуктивность коров и качество молозива

Изучение действия препаратов селена на репродуктивную функцию коров и состояние полученных от них телят, проведено на стельных сухостойных коровах, которым за 35-40 и 5-7 дней до отела вводили внутримышечно вводили: 10 мл 0,5% раствор селенита натрия (1-я опытная группа) и селедант в дозе 10 мкг/кг (2-я опытная группа). Коровы контрольной группы препаратов селена не получали.

Установлено, время отделения последа у коров 1-й и 2-й групп было меньше, чем в контроле на 40 минут и 50 минут, а инволюционные процессы в матке завершались быстрее на 4 и 6 дней соответственно (табл. 8).