Главная Коллекция "Otherreferats" Сельское, лесное хозяйство и землепользование Оксидативный стресс и система оксида азота при постнатальной адаптации и развитии заболеваний у сельскохозяйственных животных

Оксидативный стресс и система оксида азота при постнатальной адаптации и развитии заболеваний у сельскохозяйственных животных

Видовые и возрастные особенности функционирования антиоксидантной и NO-L-аргинин систем. Роль оксидативного стресса и системы оксида азота в постнатальной адаптации животных. Роль оксида азота в формировании колострального иммунитета у новорожденных.

Рубрика Сельское, лесное хозяйство и землепользование
Вид автореферат
Язык русский
Дата добавления 05.09.2010
Размер файла 247,1 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

49

Работа выполнена в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН

На правах рукописи

03.01.04 - биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Оксидативный стресс и система оксида азота при постнатальной адаптации и развитии заболеваний у сельскохозяйственных животных

Близнецова Галина Николаевна

Научный консультант:

доктор биологических наук, профессор

Рецкий Михаил Исаакович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Артюхов Валерий Григорьевич

доктор биологических наук, профессор

Пашков Александр Николаевич

доктор биологических наук, профессор

Шапошников Андрей Александрович

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова

Воронеж - 2010

Защита состоится «15» октября 2010 года в 10-00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 006.004.02 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии РАСХН (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-б).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИВИПФиТ.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор вет. наук, профессор А.Г. Нежданов

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Процессы свободнорадикального окисления (СРО), лежащие в основе метаболизма всех клеток и определяющие адаптивную состоятельность организма к действию повреждающих факторов, являются не только необходимым звеном жизнедеятельности клетки, но и выступают как универсальное неспецифическое звено в развитии многих патологических состояний (Владимиров Ю.А., 1987; Зенков Н.К., 2001).

Исследование состояния и механизмов нарушения регуляции кислородзависимых процессов позволяет выявить общие закономерности и уточнить патогенез различных заболеваний. Решение этих вопросов тесно связано с фундаментальными общебиологическими проблемами, такими как образование свободнорадикальных форм кислорода и азота, пероксидной модификацией липидов и белков, функционированием биомембран, компартментализацией биохимических реакций и может быть весьма полезным для выяснения сложных многоуровневых взаимоотношений различных метаболических звеньев при развитии патологических состояний.

Имеющиеся к настоящему времени данные позволяют считать, что, как в реакциях окислительного стресса, так и в механизмах антиоксидантной защиты принимает участие оксид азота (Klebanoff S.J., 1992; Маеда Х., Акаике Т., 1998; Dobashi K. et al., 1997; Ulker S. еt al., 2003). Физиологический эффект взаимодействия АФК и NO остается предметом активных дебатов. В ряде работ in vitro продемонстрировано, что NO может фактически замедлять пероксидное окисление липидов, действуя как скавенджер кислородных радикалов (Laskin J.D. et al., 2001; Серая И.П., Нарциссов Я.Р., 2002). Этот своеобразный “антиоксидантный" эффект NO позволил некоторым исследователям предположить, что взаимодействие между супероксиданионом и NO может быть биологически важным путем детоксикации потенциально опасных активных форм кислорода (Huie R.E., Padmaja S., 1993; Зенков Н.К. с соавт., 2000, 2001; Murphy M.P., 2009). В тоже время есть и противоположные данные, свидетельствующие о том, что оксид азота способен усиливать негативные эффекты супероксидного радикала и других активных форм кислорода, которые играют важную роль в патогенезе заболеваний животных (Epe B. et al., 1996; Greenacre S.A., Ischiropoulos H., 2001).

В последнее время появился ряд работ, в которых приводятся отдельные результаты изучения взаимосвязи состояния процессов пероксидного окисления липидов, антиоксидантной системы и интенсивности образования в организме оксида азота при патологиях различной этиологии (Laskin J.D. et al., 2001; Murphy M.P., 1999; Lee K.J. et al., 2004; Реутов В.П. с соавт., 2007). Однако полученные данные зачастую носят противоречивый характер, и у авторов нет единого мнения о роли и взаимосвязи антиоксидантного статуса, как совокупности про- и антиоксидантных процессов и системы оксида азота.

Помимо этого процессы свободнорадикального окисления и система оксида азота являются универсальными факторами регуляции стрессорных и адаптивных ответов организма (Малышев И.Ю., Манухина Е.Б., 1998; Stratakis C.A., Chrousos G.P., 1995). В настоящее время выдвинута гипотеза о том, что NO участвует в регуляции стресс-реакции, ограничивая ее чрезмерную активацию, и ее повреждающие эффекты, как на центральном, так и на периферическом уровне (Манухина Е.Б., Малышев И.Ю., 2000). Эта гипотеза предполагает наличие наряду с известными стресс-лимитирующими системами (ГАМК-ергической, пептидергической, антиоксидантной и др.) и NO - ергической стресс-лимитирующей системы (Малышев И.Ю., Манухина Е.Б., 1998). Один из защитных эффектов NO при стрессе связан с его способностью увеличивать активность антиоксидантных ферментов и экспрессию кодирующих их генов (Dobashi K. et al., 1997; Ulker S. et al., 2003).

Поэтому изучение окислительного и нитрозативного напряжения, а также локальных антиоксидантной и NO-ергической стресс-лимитирующих систем в норме, в процессе онтогенеза, при стрессе, адаптации и развитии патологических состояний является весьма актуальным и перспективным. Учитывая большую функциональную нагрузку данных метаболических систем, можно предполагать, что регуляция межклеточных и системных взаимодействий, связанных с изменением продукции NO и изменениями антиоксидантного статуса организма, окажется весьма эффективным способом предупреждения и лечения многих заболеваний.

Таким образом, всё выше изложенное подтверждает актуальность изучения роли и взаимодействия окислительного и нитрозативного напряжения в адаптивных ответах организма и при развитии различных патологических состояний.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является изучение роли системы оксида азота и её взаимосвязи с антиоксидантным статусом организма в возрастном аспекте и при развитии различных патологических состояний у разных видов сельскохозяйственных животных.

В соответствии с указанной целью на разрешение поставлены следующие задачи.

1. Изучить видовые и возрастные особенности функционирования антиоксидантной и NO- L-аргинин систем.

2. Определить роль оксидативного стресса и системы оксида азота в постнатальной адаптации животных.

3. Выявить роль оксида азота в формировании колострального иммунитета у новорожденных животных.

4. Изучить динамику свободнорадикального окисления и состояние ситемы NO- L-аргинин при различных патологиях сельскохозяйственных животных.

5. Выявить характер влияния модуляции продукции оксида азота на интенсивность пероксидного окисления липидов и белков, состояние АОС и образование NO и S-нитрозотиолов.

Научная новизна. Впервые изучены видовые и возрастные особенности состояния системы оксида азота, охарактеризована ее роль в формировании колострального иммунитета у новорожденных животных. Впервые комплексно изучены интенсивность процессов пероксидного окисления липидов и белков, состояние ферментативного звена антиоксидантной системы и образование оксида азота при развитии патологий различной этиологии. Определено влияние индукции синтеза оксида азота L-аргинином и ингибирования образования NO на динамику образования супероксиданиона в митохондриальной и микросомальной электрон-транспортной цепи (ЭТЦ) клеток печени, интенсивность пероксидного окисления липидов в крови и окислительной модификации плазменных белков как в норме, так и при иммобилизационном стрессе, токсическом повреждении печени тетрахлорметаном и ожоговой травме, а также характер реакции антиоксидантной системы в норме и при патологии.

Впервые комплексно изучено применение животным в преддверии стрессовых ситуациях различной этиологии и отличающихся по патогенетическим механизмам развития соединения ФБ-26, обладающего свойствами антиоксиданта и донора оксида азота. Новизна проведенных исследований подтверждена 4 патентами РФ.

Практическая значимость. Изучение характера течения процессов свободнорадикального окисления липидов и белков, функционирования антиоксидантной системы и системы оксида азота позволяют углубить и систематизировать современные представления о значении нитрозотивного и оксидативного стресса в развитии патологий разного генеза. Результаты исследования особенностей этих процессов в условиях модуляции образования оксида азота в организме, как в норме, так и патологии позволят предложить новые подходы в разработке способов и методов прогнозирования исхода, профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных разной этиологии.

На основании проведенных исследований разработаны и утверждены на федеральном уровне: Методические рекомендации по оценке и коррекции иммунного статуса животных (Воронеж, 2005); Методические рекомендации по диагностике, терапии и профилактике нарушений обмена веществ у продуктивных животных (М.: РАСХН, 2007); Методические рекомендации по определению стабильных метаболитов оксида азота в плазме (сыворотке) крови (М.: РАСХН, 2007); Методические рекомендации по определению субклеточной генерации супероксиданиона в тканях (М.: РАСХН, 2007); Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению омфалита у новорожденных телят (Воронеж, 2008); Методические рекомендации по диагностике, профилактике и терапии гепатопатий у крупного рогатого скота (Воронеж, 2009); Методические рекомендации по диагностике, профилактике и терапии гестоза у молочных коров и свиноматок (Воронеж, 2009); Методические рекомендации по оптимизации формирования колострального иммунитета у новорожденных животных (Воронеж, 2009).

Апробация работы. Основные результаты исследований были представлены на Международных научно-практических конференциях «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях (Воронеж, 2002); «Свободные радикалы, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2003); III съезде биофизиков России (Воронеж, 2004); «Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных» (Воронеж, 2004); XIX съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (Екатеринбург, 2004); «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (Воронеж, 2005); «Актуальные проблемы патологии, фармакологии и терапии» (Воронеж, 2006); съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов России (Воронеж, 2007); Международной научно-практической конференции, посвященной 125-летию ветеринарии Курской области (Курск, 2008); «Трансферт инновационных технологий в животноводстве» (Орел, 2008); «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2008); съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов России (Казань, 2009).

Публикации. Основные научные результаты, включенные в диссертацию, опубликованы в 57 печатных работах, в том числе в 26 статьях в ведущих научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ, 8 методических рекомендациях, 1 методическом пособии и 4 патентах.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Видовые и возрастные особенности функционирования антиоксидантной и NO- L-аргинин систем.

2. Роль оксидативного стресса и системы оксида азота в постнатальной адаптации животных.

3. Характер свободнорадикального окисления и состояние ситемы NO- L-аргинин при различных патологиях сельскохозяйственных животных.

4. Влияние модуляции продукции оксида азота на интенсивность пероксидного окисления липидов и белков, состояние АОС и образование NO и S-нитрозотиолов.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 285 страницах и включает введение, обзор литературы, материал, объем и методы исследований, результаты собственных исследований, их обсуждение, выводы, предложения и список литературы. Диссертационная работа проиллюстрирована 49 таблицами и 41 рисунками. Список литературы включает 449 источников, в том числе 298 иностранных авторов.

2. Объекты и методы исследования

Работа выполнена в 2005-2010 г.г. в отделе патобиохимии и патофизиологии ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН в соответствии с планом научно-исследовательских работ по заданиям 04.01.01 “Изучить на молекулярно-биохимическом, структурно-функциональном, системно-физиологи-ческом и экологическом уровнях и определить причины и механизмы перехода организма из нормального состояния в патологическое и на этой основе разработать средства, методы и технологии защиты здоровья и продуктивности животных” (№ гос. регистрации 01.200.117018) и 08.04.01 «Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высокопродуктивных животных» (№ гос. регистрации 15070.3666026906.06.8.001.2).

В проведении ряда исследований принимали участие сотрудники и аспиранты ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии А.Г. Нежданов, С.М. Сулейманов, А.И. Золотарев, Ю.Н. Масьянов, В.И. Шушлебин, Т.Г. Ермолова, Н.Н. Каверин, С.С. Артемьева, Н.В. Пасько, А.Е. Черницкий, Д.Б. Чусов и другие, а так же сотрудник института геохимии и аналитической химии им. В.И.Вернадского В.А.Сафонов, которым автор выражает искреннюю признательность за оказанную помощь и плодотворное сотрудничество.

В проведении экспериментальных и научно-производственных работ использовали: самцов белых беспородных крыс с массой тела 200,0±25,0 г (n=274); откормочных быков (n=18), коров (n=209) и телят красно-пестрой и симментальской породы (n=250); ягнят (n=25), поросят (n=30) и кровь новорожденных детей (n=14). Подробнее схемы проведения опытов и дозировки используемых веществ представлены в соответствующих разделах диссертации.

Токсическое повреждение печени у крыс вызывали путем двукратного внутрибрюшинного введения, один раз в сутки тетрахлорметана (CCl4) в виде 40% раствора в оливковом масле в дозе 0,2 мл/100 г массы тела. Исследования проводили через сутки после второго введения CCl4. О степени повреждения печеночной паренхимы судили по изменению активности в сыворотке крови маркерных ферментов: аланинаминотрансферазы (АлАт) и аспартатаминотрансферазы (АсАт).

Эмоционально-болевой стресс моделировали путём иммобилизации крыс на спине с жесткой фиксацией конечностей в течение 18 часов. В качестве контроля использовали животных, не подвергавшихся иммобилизации, но лишенных воды и пищи в течение 18 часов.

До экстремального воздействия и после иммобилизации животных взвешивали. Затем с соблюдением существующих норм отделяли и взвешивали надпочечники, тимус, селезенку, вычисляли относительную массу органов (мг/100 г массы тела животного). Для оценки стрессогенного ульцерогенеза желудок промывали, просматривали и подсчитывали в нём количество язв, измеряли их длину.

Нанесение ожоговой травмы у крыс осуществляли под хлороформным ингаляционным наркозом. Два дозированных симметричных ожога IIIA степени площадью по 300 мм2 наносили на обе стороны предварительно выбритой заднебоковой части тела с помощью специального приспособления при t =100С в течении 10 секунд. Общая площадь ожогов при этом составляла около 5% поверхности тела.

Кровь для проведения биохимических исследований у всех лабораторных животных получали под наркозом из сердца. В качестве антикоагулянта использовали ЭДТА-Na2 . Для получения гомогената печени ткань гомогенизировали в 0,05 М трис-буфере рН 7,4 в соотношении вес/объем 1:5.

При модуляции продукции оксида азота в качестве эндогенного индуктора синтеза использовали L-аргинин (L-Arg), который вводили животным в дозе 400 мг/кг внутрибрюшинно. Блокаторы синтеза NO аминогуанидин (AG) и метиловый эфир нитро-L-аргинина (L-NAME) вводили животным в одинаковой дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно. Животным контрольных групп вводили либо дистиллированную воду, либо 0,9% раствор хлорида натрия. Более подробные схемы применения модуляторов продукции NO, представлены в соответствующих разделах.

При изучении влияния соединения ФБ-26 - нитроксисукцинат 2-этил-6-метил-3-оксипиридина - на оксидантно-антиоксидантный статус и систему оксида азота, раствор исследуемого соединения вводили внутрибрюшинно в дозах 20 и 100 мг/кг массы тела при иммобилизационном стрессе и в дозе 100 мг/кг массы тела при токсическом повреждении печени тетрахлорметаном и ожоговой травме.

Содержание в сыворотке крови глюкозы, холестерина, креатинина, мочевины, кальция, неорганического фосфора, активность -глутамилтранс-феразы (-ГТ), аспартат- (АсАТ) и аланинтрансферазы (АлАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) определяли на биохимическом анализаторе «Hitachi-902» (Япония). В ряде опытов активность -ГТ, АлАТ и АсАТ, содержание -липопротеидов, показатель сулемовой пробы, общие липиды определяли с помощью наборов фирм «Vital Diagnostic» (Россия), «Lachema» (Чехия) и KONE (Финляндия), щелочной резерв в об.% СО2 - диффузным методом (Кондрахин И.П. с соавт., 2004).

Содержание общих иммуноглобулинов определяли по величине светорассеивания после преципитации сульфатом цинка (Костына М.А., 1997), а IgG - методом простой радиальной иммунодиффузии в геле по G. Mancini (1965).

Содержание лигандных форм (Hb, HbO2, MetHb) в растворе гемоглобина определяли при 500, 569 и 577 нм, используя для расчета эмпирическую систему уравнений, предложенную Zwart A. с соавторами (Zwart A. et. al., 1981).

Содержание белка (г/л) определяли биуретовым методом (Досон Р., 1991); активность глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы (Г6ФДГ) (мкМ НАДФ/минЧг Hb) по убыли НАДФН (Асатиани В.С., 1965).

Для оценки интенсивности процессов свободнорадикального окисления липидов и белков, состояния системы антиоксидантной защиты и функционирования системы L-аргинин-NO? в крови и сыворотке (плазме) крови животных определяли: содержание диеновых конъюгатов (ДК) (D232 /мг липидов) и кетодиенов (КД) (D278 /мг липидов) (Бузлама В.С. с соавт., 1997); содержание малонового диальдегида (МДА) (мкМ/л) (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г., 1977); содержание оснований Шиффа (ОШ) (отн. ед./мл сыв.) (Bidlack W.R., Tappel A.L., 1973); степень окислительной модификации белков (нМ/мг белка) (Reznick A.Z., 1994; Дубинина Е.Е., 1995); содержание молекул средней массы (ед.опт.пл.) (Гребнева О.Л. с соавт., 2006); потенциальную преимущественную генерацию супероксиданиона (нМоль О2 /гсек) (Близнецова Г.Н. с соавт., 2004); содержание НЭЖК (мкМ/л) (Прохоров М.Ю. с соавт., 1977); сорбционную способность эритроцитов (%) (Тогайбаев А.А. с соавт., 1988); содержание восстановленного глутатиона (мМ/л) (Sedlak J., Lindsay R.H., 1968); активность каталазы (мкМ Н2О2/лмин) (Королюк М.А., 1988); активность глутатионпероксидазы (мМ восстановленного глутатиона/лмин) (Кругликова Г.О., Штутман И.М., 1976); активность глутатионредуктазы (мкМ окисленного глутатиона /лЧмин) (Кругликова Г.О., Штутман И.М., 1976); активность супероксиддисмутазы (СОД) (усл.ед./мг Hb) (Сирота т.в., 1999); сумму стабильных метаболитов оксида азота (мкМ/л) (Близнецова Г.Н. с соавт, 2002); содержание S-нитрозотиолов (нМ/л) (Kubes P. et al., 1999; Moore K.P. et al., 2002).

Каждую пробу исследовали в 3-х аналитических повторностях. Обработку экспериментальных данных проводили методами математической статистики, принятыми в биологии и медицине. Достоверность различий оценивали методом парных сравнений, используя t-критерий Стъюдента. Статистически достоверными считали различия при уровне значимости р<0,05 (Лакин Г.Ф., 1990).

3. Результаты собственных исследований

3.1 Видовые и возрастные особенности функционирования NO- L-аргинин стресс-лимитирующей системы

Установлено, что для телят в первые часы жизни характерен очень высокий уровень стабильных метаболитов оксида азота в сыворотке крови (рис. 1А). Через сутки после рождения уровень стабильных метаболитов оксида азота (NOх) снижается на 33,4%, а через 2-3 дня их концентрация уменьшается более чем в 2 раза по сравнению с содержанием их в сыворотке крови через 30-60 минут после рождения (до получения первой порции молозива). Начиная с 10-суточного возраста, суммарная концентрация NOх продолжает снижаться и к месячному возрасту достигает величин, близких к уровню NOх у взрослых животных, составляющему у коров в зависимости от срока до или после отела от 40 до 150 мкМ/л.

Для поросят сразу после рождения (до приёма молозива) также характерен высокий уровень стабильных метаболитов оксида азота, отражающий степень его образования в организме новорожденного (рис. 1Б). На 2-е сутки после рождения содержание в плазме крови NOх уменьшается более чем в 3 раза, а в 3-дневном возрасте концентрация NOх практически снижается до уровня, зафиксированного в возрасте 2-3 недель.

Уровень стабильных метаболитов оксида азота у ягнят до первой выпойки молозива так же превышал таковой у взрослых животных более чем в 10 раз (рис. 1В). Далее интенсивность образование оксида азота статистически достоверно снижалась за 1 сутки на 37,9%, в течение вторых суток - на 32,5%, и третьих - на 54,4%. Как видно из представленных данных динамика изменения изучаемого показателя у ягнят в целом была идентична таковой у других видов животных, с той лишь разницей, что содержание оксида азота в крови ягнят менялось более резко и достигало уже к 15-м суткам жизни значений, характерных для взрослых овцематок, составляющих 19-25 мкМ/л.

Рис. 1. Содержание стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови: А-телят, Б-поросят, В-ягнят, Г-детей (мкМ/л)

При определении суммы стабильных метаболитов в плазме пуповинной крови у новорожденных детей (n=14) установлено, что её величина колеблется в пределах от 25,6 до 45,0 мкМ/л и составляет в среднем 34,38,52 мкМ/л (рис. 1Г). Полученные данные свидетельствуют об отсутствии статистически достоверных различий между показателями, определенными у детей на 1, 5 и 30 сутки жизни.

Таким образом, установлено, что для новороженных телят, поросят и ягнят в первые сутки жизни характерно высокое содержание стабильных метаболитов оксида азота (NO2Ї+NO3Ї), которое существенно снижается к месячному возрасту.

3.2 Система оксида азота в период ранней постнатальной адаптации телят

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что экзогенное поступление больших количеств нитратов и нитритов телятам с молозивом и молоком коров может быть исключено, поскольку у коров их содержание изменялось в пределах 37,8-145,0 мкМ/л в зависимости от периода исследования.

Высокая концентрация NOх в сыворотке крови телят не является следствием недостаточной элиминации нитратов и нитритов из плазмы у новорожденных, чем у животных более старшего возраста, так как с возрастом снижается не только уровень стабильных метаболитов оксида азота в крови, но и выделение их с мочой (рис. 2).

Можно было бы объяснить установленный феномен тем, что высокая концентрация NOх у новорожденных телят, по сравнению с животными более старшего возраста, является следствием поступления в организм высоких концентраций оксида азота вместе с вдыхаемым воздухом, но при этом, как известно, значительно возрастает содержание метгемоглобина в крови (Salguero K.L., Cummings J.J., 2002). Исследования содержания в крови различных лигандных форм гемоглобина показало, что уровень метгемоглобина в крови у телят сразу после рождения составляет 1,5% от общей концентрации гемоглобина и снижается к месячному возрасту до 0,9 %.

Рис.2. Сравнительная возрастная динамика содержания стабильных метаболитов оксида азота в сыворотке крови и моче телят

Другим потенциальным источником NO в сыворотке крови телят могут выступать S-нитрозотиолы. В связи с вышеизложенным представляло интерес изучить динамику их содержания в крови подопытных животных в течение первого месяца жизни.

Как показали проведенные исследования через 0,5-1 час после рождения для телят характерно довольно низкое содержание S-нитрозотиолов в сыворотке крови, но спустя 24 часа после рождения происходит резкое возрастание (в 4,2 раза) их уровня, по сравнению с уровнем сразу после рождения (табл. 1).

Таблица 1. Содержание S-нитрозотиолов в сыворотке крови клинически здоровых телят

Возраст телят

RSNO, нМ/л

До выпойки молозива

50920,6*

1 сутки

2122214,3*

2 суток

2108154,2*

3 суток

267098,6*

10-15 суток

3046284,4

25-30 суток

339756,3

Примечание: * -P<0,05-0,001 по сравнению с уровнем у телят в возрасте 25-30 суток

К 10-суточному возрасту концентрация S-нитрозотиолов еще более увеличивается, а к месячному - достигает величин, близких к уровню у взрослых животных, составляющего у коров около 3500 - 4000 нМ/л.

Следует отметить различия в динамике содержания метаболитов оксида азота и S-нитрозотиолов. Если содержание NO в первые часы жизни характеризуется очень высоким уровнем, то концентрация S-нитрозотиолов в данный период жизни достаточно низкая. В течение первого месяца жизни уменьшение концентрации NOх происходит на фоне роста уровня в сыворотке крови S-нитрозотиолов. При этом установлено наличие отрицательной корреляции между содержанием NOх и S-нитрозотиолов в сыворотке крови телят (r = - 0,918, P<0,001).

Вероятнее всего образование столь высоких количеств оксида азота происходит у телят еще в период внутриутробного развития. Это подтверждается и тем, что при исследовании содержания суммы стабильных метаболитов оксида азота в амниотической жидкости их матерей установлен весьма высокий уровень NOх, существенно превышающий уровень в плазме крови у коров в период родов (табл. 2).

Таблица 2. Содержание стабильных метаболитов оксида азота и S-нитрозотиолов в плазме крови и амниотической жидкости коров в период родов

Объект исследования

NOx, мкМ/л

RSNO, нМ/л

Плазма крови

108,6±19,44

3965161,6

Амниотическая жидкость

653,3±144,31*

550104,3*

Примечание:* - Р 0,05 по сравнению с показателями в плазме крови

Учитывая полученные экспериментальные данные, можно утверждать, что высокая концентрация суммы стабильных метаболитов оксида азота (NO2Ї + NO3Ї) в плазме крови новорожденных телят, формируется за счет интенсивного эндогенного образования NO еще во внутриутробный период, которое заметно уменьшается с возрастом.

3.3 Интенсивность процессов свободнорадикального окисления и система антиоксидантной защиты в период ранней постнатальной адаптации телят

Анализ содержания продуктов ПОЛ в крови телят свидетельствует об активации свободнорадикальных реакций в первые трое суток после рождения и наличие у новорожденных явления оксидативного стресса (табл. 3).

Таблица 3. Концентрация продуктов ПОЛ в крови у телят разного возраста

Показатели

Возраст животных, сутки

1

3

10

30

ДК, D232/мг липидов

0,2240,008*

0,217±0,011*

0,1750,006

0,1570,010

КД, D278/мг липидов

0,0630,003*

0,072±0,004*

0,0450,003

0,0360,001

МДА, мкМ/л

2,350,140*

2,17±0,125*

1,100,065*

0,900,052

ОШ, отн. ед./мл сыв.

0,150,011*

0,21±0,009*

0,300,047*

0,170,036

Примечание:* - Р 0,05 по сравнению с показателями у животных в возрасте 30 суток

К 10-суточному возрасту содержание конъюгированных диенов (ДК), которое отражает наличие гидроперекисей липидов в крови телят, снижалось на 21,9%. Более существенные изменения были отмечены для более “поздних” продуктов ПОЛ - кетодиенов (КД) и МДА, концентрация которых уменьшалась в данном возрасте на 28,6% и 53,3% соответственно. Наиболее низкий уровень первичных и вторичных продуктов ПОЛ был отмечен у телят в месячном возрасте.

Несколько иная возрастная динамика отмечена для интенсивности образования оснований Шиффа (ОШ), являющихся конечными продуктами пероксидации липидов. К третьим суткам жизни их концентрация увеличивалась на 40%, а уже к 10-суточному возрасту повышалась в 2 раза. По-видимому, это является следствием активно протекающих процессов СРО у телят в первые сутки после рождения, что закономерно отражалось в увеличении концентрации ОШ к концу первой декады постнатального развития.

Высокий уровень пероксидации липидов в первые сутки жизни, вероятнее всего, обусловлен изменением кислородного режима новорожденного и перестройкой его метаболизма в связи с переходом в новую среду обитания и легочное дыхание.

Развитие оксидативного стресса у животных в первые дни жизни отражалось на структурно-функциональном состоянии и устойчивости к повреждению эритроцитарных мембран. Так, сорбционная способность эритроцитов (ССЭ) у новорожденных телят до первой выпойки молозива и в конце первых суток жизни свидетельствовал о более высокой проницаемости их клеточных мембран по сравнению с взрослыми животными (рис. 3).

Рис.3. Изменение ССЭ у клинически здоровых телят разного возраста (в %)

Изучение степени окислительной модификации белковых молекул показало, что сразу (через 0,5-1 час) после рождения телят уровень карбонильных групп в белках в 1,7 раза превышает таковой, зарегистрированный для взрослых животных, составляющий от 1,20 до 1,30 нМ/мг белка. Через 24 часа после рождения уровень окислительной модификации снижается на 23,7%, а к концу первого месяца жизни приближается к показателям, характерным для взрослых животных.

Полученные результаты позволяют полагать, что сразу после рождения окислительной модификации в первую очередь подвергаются белки, а затем и липиды. Этот факт мы считаем весьма важным в связи с тем, что наиболее интенсивное всасывание колостральных иммуноглобулинов происходит именно в первые 24-48 часов жизни, в последующем скорость их пассивного транспорта резко снижается (Гончарук В.А., 1998; Weaver D.M. et al., 2000).

Существенные возрастные изменения происходят и в ферментативном звене системы АОЗ крови телят. В связи с тем, что антиоксиданты преимущественно работают в комплексе (Журавлев А.И., 1989) и действуют на разных этапах восстановления кислорода, особого внимания заслуживают синхронные изменения активности ключевых антиоксидантных ферментов, в частности СОД и каталазы.

Установлено, что наиболее высокую активность данные ферменты проявляют сразу после рождения животных, что полностью согласуется с данными о значительном повышении интенсивности пероксидного окисления липидов и белков в первые сутки жизни телят (рис. 4). При этом до выпойки молозива активность СОД составляла 214,7%, в первые сутки - 203,3%, а каталазы - 167,7% и 144,4%, соответственно, по отношению к уровню данных показателей у животных месячного возраста.

Рис. 4. Возрастная динамика активности супероксиддисмутазы и каталазы в крови телят (в % к уровню у 30-дневных животных)

Повышение активности антиоксидантных ферментов в период постнатальной адаптации животных, обусловлено, прежде всего, резко возрастающей обеспеченностью организма новорожденных атмосферным кислородом. При этом закономерно повышение в крови содержания супероксиданиона, который выступает по отношению к СОД в качестве индуцирующего и активирующего фактора (Fridovich I., 1989).

Таким образом, переход от антенатального к постнатальному периоду сопровождается явлениями окислительного стресса, которые выражаются в смещении оксидантно-антиоксидантного равновесия в сторону интенсификации свободнорадикального окисления липидов и белков, причем, в первую очередь окислительной модификации подвергаются белки.

3.4 Роль оксида азота в формировании колострального иммунитета у новорожденных телят

Формирование иммунитета у новорожденных телят происходит за счет пассивного переноса иммуноглобулинов (ИГ) с молозивом или молоком через стенку кишечника. Причем адекватность иммунитета достигается только в том случае, если иммуноглобулины попадают в кровь в неизменном виде в течение первых часов жизни.

Наиболее интенсивно колостральные ИГ у новорожденных телят всасываются в течение первых 3-х суток после рождения (рис. 5).

Проведенное исследование взаимосвязи содержания стабильных метаболитов оксида азота через 0,5-1,0 час после рождения (до выпойки молозива) и иммуноглобулинов в сыворотке крови через сутки после рождения у телят показало наличие высокой степени положительной корреляции исследуемых показателей, с коэффициентом r =+0,864, P<0,001.

Ретроспективный анализ зависимости между интенсивностью всасывания колостральных иммуноглобулинов и дальнейшей заболеваемостью новорожденных телят колибактериозом, показал, что животные с содержанием иммуноглобулинов менее 8 г/л, как правило, в течение первых 10 дней жизни заболевали энтеритной формой колибактериоза. Эти же телята имели и низкий уровень суммы стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови, но не в течение всего периода наблюдения, а только в первые дни жизни (рис. 6).

Сразу после рождения у оставшихся здоровыми телят уровень стабильных метаболитов оксида азота на 18,3% превышал их содержание у заболевших животных, в конце первых суток жизни эта разница составила 18,8%. К третьим суткам жизни содержание стабильных метаболитов оксида азота у оставшихся здоровыми животных на 27,1 % превышало показатели у заболевших телят.

На 10 сутки у здоровых телят содержание в сыворотке крови NOх продолжало снижаться, а у больных животных его уровень возрастал, что связано с развитием инфекционного заболевания, при котором продукция оксида увеличивается за счет активации макрофагальной NO-синтазы.

3.5 Тест для оценки пассивного переноса колостральных иммуноглобулинов у новорожденных телят

Поскольку -глутамилтрансфераза относиться макромолекулярным белкам, которые секретируются альвеолоцитами молочной железы (Lombardi P. et al., 2001; Maden M. et al., 2003) и содержится в большом количестве в молозиве и только в незначительном - в сыворотке у новорожденных и имеет молекулярную массу близкую к таковой IgG (молекулярная масса IgG составляет 140 кД, а -глутамилтрансферазы 90 кД) пассивный перенос этого ферментного белка в кишечнике новорожденного может быть косвенным показателем и переноса IgG из молозива.

Установлено, что если до выпойки молозива активность -глутамил-трансферазы в сыворотке крови новорожденных телят была минимальной, то в суточном возрасте (после 4-ой выпойки молозива) она в значительной степени возрастает и превышает исходную более, чем в 10 раз, а далее постепенно снижается (табл. 4).

Таблица 4. Возрастная динамика активности -глутамилтрансферазы и содержания иммуноглобулинов у телят

Показатели

Возраст

До 1-й выпойки молозива

1 сутки

2 суток

3 суток

15 суток

1 месяц

IgG, г/л

0,8±0,15*

10,42,47

16,32,26*

15,82,45*

7,200,96

9,541,06

-ГТ, мккат/л

0,70±0,22

7,2±0,80*

2,1±0,29*

1,4±0,20*

0,6±0,11

0,6±0,09

Примечание: *-P<0,05-0,001 по сравнению с показателями в месячном возрасте

При этом у телят в суточном возрасте коэффициент корреляции между уровнем IgG и активностью -ГТ составляет +0,86 (P<0,001), через 2-е суток - +0,82 (P<0,01) и 3-е суток - +0,75 (P<0,02).

Таким образом, наряду с определением уровня общих иммуноглобулинов преципитацией сульфатом цинка и общего белка в сыворотке крови достаточно информативным тестом для оценки интенсивности всасывания колостральных иммуноглобулинов можно считать определение активности -глутамилтрансферазы в сыворотке крови у новорожденных телят в 1-2 сутки после рождения. При этом активность -глутамилтрансферазы в сыворотке крови новорожденных телят в этом возрасте менее 3 мккат/л свидетельствует о недостаточности колострального иммунитета и риске развития неонатальных болезней инфекционной этиологии.

3.6 Свободнорадикальное окисление и состояние системы оксида азота при заболеваниях у сельскохозяйственных животных

3.6.1 Роль дисбаланса активных форм кислорода и азота в возникновении и течении бронхолегочной патологии у телят

Установлено, что развитие бронхолегочной патологии вызывало существенное повышение содержания первичных и вторичных молекулярных продуктов ПОЛ в крови телят (табл. 5).

Таблица 5. Интенсивность процессов ПОЛ при бронхопневмонии у телят

Показатели ПОЛ

Группы животных

Здоровые

Субклинический трахеобронхит

Бронхопневмония

0,139 ± 0,008

0,207 ± 0,015*

0,238 ± 0,029*

ДК, D232/мг липидов

0,044 ± 0,006

0,054 ± 0,009*

0,068 ± 0,013*

КД, D278/мг липидов

0,88 ± 0,071

1,18 ± 0,09*

1,94 ± 0,110*

МДА, мкМ/л

0,19 ± 0,025

0,24 ± 0,031*

0,33 ± 0,041*

ОШ, отн. ед./мл сыв.

Примечание:* - P<0,05 по сравнению с показателями у здоровых животных

При этом выявлены отличия в интенсивности накопления в крови первичных продуктов ПОЛ и продуктов более глубокой пероксидации у животных 2-ой (субклинический трахеобронхит) и 3-ей (бронхопневмония) групп.

Так, уровень ДК у телят, больных бронхопневмонией, выше на 71,2 %, кетодиенов - на 54,5 %, а более поздних продуктов ПОЛ: малонового диальдегида и оснований Шиффа в 2,2 и 1,7 раза соответственно по сравнению со здоровыми животными.

Содержание конъюгированных диенов и кетодиенов у телят, больных субклиническим трахеобронхитом, статистически достоверно возрастало в 1,5 и 1,2 раза соответственно по сравнению со здоровыми животными, но было ниже на 13% и 20,6 %, чем у телят с клиническими признаками заболевания. Такая же тенденция сохранялась для более поздних продуктов пероксидного окисления липидов - малонового диальдегида и оснований Шиффа.

У больных животных была значительно снижена мощность ферментативного звена системы АОЗ (табл. 6).

Таблица 6. Некоторые показатели системы антиоксидантной защиты в норме и при бронхолегочной патологии у телят

Показатели ПОЛ

Группы животных

1

2

3

Здоровые

Субклинический трахеобронхит

Бронхо-пневмония

СОД, усл.ед.

0,78 ± 0,142

1,29 ± 0,027*

1,01 ± 0,015*

Каталаза, мкМH2O2/(лмин)

31,5 ± 1,69

39,7 ± 1,19*

34,8 ± 1,59*

ГПО, мМ G-SH/(лмин)

14,73 ± 1,782

16,36 ± 1,133*

16,75 ± 0,21*

ГР, мкМ GH /(лмин)

323,615,4

347,1 ± 12,67*

399,8 ± 5,65*

Примечание:* - P<0,05 по сравнению с показателями у здоровых животных

Активность СОД у телят с субклиническим трахеобронхитом составляла 165,4%, с бронхопневмонией - 129,5% от таковой у здоровых животных. Активность каталазы так же возрастала. Наибольшее значение данного показателя было характерно для животных 2-ой группы, для телят 3-ей группы он был несколько ниже. Для ферментов глутатионового звена АОЗ была выявлена иная закономерность - активность глутатионпероксидазы у животных с бронхолегочной патологией возрастала, но незначительно. При этом статистически достоверных различий между изучаемым показателем у животных 2 и 3-ей группы зафиксировано не было. Самые высокие показатели активности глутатионредуктазы были характерны для телят, больных бронхопневмонией - на 23,6 % выше, чем у здоровых телят, и на 15,2 %, чем при субклиническом трахеобронхите.

Состояние системы ПОЛ-АОЗ у телят с субклиническим трахеобронхитом является метаболически более предпочтительным, поскольку сохраняется эффективный контроль со стороны АОС. При бронхопневмонии происходит повышение концентрации вторичных продуктов ПОЛ при практически неизменной активности основных биоантиоксидантов, по сравнению с телятами больными субклиническим трахеобронхитом, что косвенно может указывать на повышенное образование активных форм кислорода, а следовательно и более глубокие деструктивные изменениям пораженных тканей. Установлено так же, что уровень стабильных метаболитов оксида азота у животных с симптомокомплексом трахеобронхита составляет 152,2 % от такового у здоровых телят (рис. 7). Повышение содержания NOx в крови у телят может быть обусловлено либо активацией индуцибельной формы NO-синтазы под влиянием цитокинов, а также эндотоксинов и липополисахаридов (Tavaf-Motamen H. at al., 1998), либо за счет конститутивной формы этого изофермента. Закономерно было бы ожидать высоких концентрационных показателей для NOх при бронхопневмонии, учитывая глубокое поражение дыхательной системы, сопровождающееся воспалительным синдромом при данной патологии. Однако проведенные нами исследования показали, что содержание стабильных метаболитов оксида азота в сыворотке крови телят, больных бронхопневмонией, было лишь на 60,9% выше, чем у здоровых животных.

В целом, можно отметить, что в независимости от тяжести поражения дыхательной системы, происходит активация продукции NO. При этом, происходит истощение основного пула депо оксида азота - S-нитрозотиолов.

Учитывая современные литературные данные, позволяющие рассматривать NO в качестве медиатора, способствующего расширению бронхов и одновременно препятствующего их констрикции (Лев Н.С., 2000), поддержание гомеостаза системы L-аргинин - NO при бронхолегочной патологии является важной защитно-приспосо-бительной функцией организма при развитии патологии респираторной системы. Нарушение же адекватного функционирования систем антиоксидантной защиты и L-аргинин - NO является одним из существенных компонентов патогенеза бронхолегочной патологии у телят, и влечет за собой интенсификацию процессов пероксидного окисления липидов и избыточное накопление в организме его токсических продуктов.

3.6.2 Система оксида азота и оксидантно-антиоксидантный статус при гепатопатиях у сельскохозяйственных животных

Установлено, что жировая дистрофия печени у откормочных бычков сопровождается существенным (в 2-2,5 раза) повышением активностей АлАт и АсАт в сыворотке крови, что свидетельствовало о наличии выраженного цитолитического синдрома. Существенное повреждение печеночной паренхимы установлено и при гистологическом исследовании. При этом в печени происходит уменьшение на 60,6% активности ГПО и на 34,6% - витамина Е, увеличение на 62,6% активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ) и концентрации МДА на 76,6% (табл. 7).

Таблица 7. Показатели антиоксидантного статуса в крови и печени бычков при жировой дистрофии печени

Показатели

Здоровые

Жировая дистрофия

Кровь

МДА, нМ/мл

0,89±0,15

1,89±0,19*

Витамин Е, мкг/л

12,6±1,58

9,4±0,88*

ГПО, мкМ G-SH/минЧг Hb

180,3±18,76

171,9±20,37

Г6ФДГ, мкМ НАДФ/минЧг Hb

8,1±0,84

8,4±0,78

Печень

МДА, нМ/г

14,5±1,12

25,6±1,89*

Витамин Е, мкг/г

20,8±2,66

13,6±1,89*

ГПО, мкМ G-SH/минЧг белка

22,6±2,21

13,7±1,35*

Г6ФДГ, мкМ НАДФ/минЧг белка

2,4±0,22

3,9±0,41*

Примечание: * - P<0,05 к показателям у здоровых животных

С другой стороны, при жировой дистрофии печени в крови животных имелись лишь незначительные изменения активности ГПО и Г6ФДГ, но при этом у больных животных был в 2,1 раза выше уровень МДА и на 25,4 % снижено содержание витамина Е. Выявленные изменения в уровне МДА как в печени, так и в крови свидетельствуют об интенсификации процессов пероксидного окисления липидов и развитии в организме животных окислительного напряжения.

Изменения в ферментативном звене системы антиоксидантной защиты в печени в ответ на развитие жировой дистрофии являются свидетельством адаптивного повышения функциональной активности антиоксидантной системы в ответ на развитие окислительного стресса. Значительное уменьшение активности ГПО в печени при данной патологии может быть связано либо с увеличением уровня свободных радикалов в клетках печени, которые угнетают активность фермента, окисляя тиоловые группы или аминокислоты, входящие в структуру белка, либо может свидетельствовать о недостаточном синтезе этого фермента.

С другой стороны, отсутствие значительных изменений в активности ГПО и Г6ФДГ в крови при жировой дистрофии указывает на то, что в эритроцитах у крупного рогатого скота при данной патологии отсутствуют признаки окислительного напряжения.

Кроме того, роль активных форм кислорода в патогенезе жировой дистрофии может заключаться в снижении уровня эндогенных антиоксидантов в организме, о чем и свидетельствует более низкий уровень витамина Е в сыворотке крови больных животных. Истощение механизмов антиоксидантной защиты может ослаблять клеточные функции и делать гепатоциты более чувствительными к повреждающим эффектам эндогенных и экзогенных перекисей.

При патологии печени происходит более чем 3-кратное повышение содержания суммы стабильных метаболитов оксида азота (NO2Ї+NO3Ї) в плазме крови (рис. 8).

Увеличение образования оксида азота, вероятнее всего, происходит не столько за счет генерализованного повышения активности конститутивных изоформ NO-синтаз, сколько за счет активации индуцибельной NO-синтазы и экспрессии m-РНК данной изоформы de novo, стимулируемой цитокинами, концентрация которых в очаге воспаления резко возрастет.

Повышение содержания S-нитрозотиолов в плазме крови животных с жировой дистрофией печени отражает процессы депонирования избыточного количества NO. Наличие пула нитрозотиолов наиболее эффективно позволяет участвовать системе оксида азота в процессах репарации, делает возможным локальное расширение сосудов и капилляров в очаге воспаления, тем самым снижает вероятность попадания токсичных продуктов некроза в соседние участки и клетки.

Таким образом, при жировой дистрофии печени у крупного рогатого скота происходит усиление процессов пероксидного окисления липидов и снижение уровня эндогенных антиоксидантов в организме, а определение активности ГПО и Г6ФДГ в печени может быть использовано для диагностики жировой дистрофии печени у крупного рогатого скота.

Активация синтеза NO при патологии печени, видимо, обеспечивает быстрое выведение токсинов и поступление биологического материала для репаративных процессов, а также более точную направленность адаптивных перестроек метаболизма.

3.6.3 Антиоксидантный статус и система оксида азота при послеродовом эндометрите коров

Исследования проведены на 2-х группах коров, которые на основании акушерских исследований ретроспективно были разделены на клинически здоровых (n=22) и коров, в последующем заболевших эндометритом (n=13).

Установлено, что в период глубокой стельности у оставшихся здоровыми коров происходит интенсификация процессов СРО, о чем свидетельствует повышение содержание в крови МДА (табл. 8).

Выявленное изменение указывает на максимальное напряжение метаболических процессов, протекающих в организме беременных коров, а также может свидетельствовать об усилении стрессового состояния животных.

У животных с послеродовым эндометритом в предродовой период содержание МДА было выше на 17%, чем у коров, оставшихся в последствии здоровыми. Более высокая концентрация МДА в крови у животных с послеродовым эндометритом, превышающая данный показатель в 1,5 раза по сравнению со здоровыми животными, по-видимому, обусловлена резким увеличением макрофагальной продукции АФК, происходящим при развитии воспалительного процесса.

Таблица 8. Некоторые показатели системы ПОЛ-АОЗ у коров в норме

и при послеродовом эндометрите

Показатели

системы

ПОЛ-АОЗ

Группы животных

Оставшиеся здоровыми

Заболевшие эндометритом

Глубокая стельность

Две недели после родов

Глубокая стельность

Две недели после родов

МДА, (мкМ/л)

1,82±0,055

1,15±0,187*

2,13±0,074

1,72±0,060 Ў^

Каталаза, (мМ Н2О2/лмин)

38,7±0,92

29,7±2,05*

30,3±1,39

38,1±0,69 Ў^

ГПО, (мМ G-SН/лмин)

12,6±0,92

9,7±0,16*

9,5±0,62

16,5±0,66Ў^

ГР, (мкМ G-SS-G/лмин)

360,1±9,32

304,7±10,34*

307,5±8,19

337,1±9,99 Ў^

СОД, (усл.ед./мг Hb)

1,18±0,052

0,91±0,040*

1,00±0,032

1,07±0,052

Примечание: * - P1-2 < 0,05; - P1-3 < 0,05; Ў - Р3-4 < 0,05, ^ - Р2-4 < 0,05-0,00

Накопление промежуточного продукта ПОЛ - малонового диальдегида в период глубокой стельности у животных без послеродовых осложнений не связано с недостаточностью функционирования ферментативного звена антиоксидантной системы. В предродовой период у животных, оставшихся здоровыми, активность ферментов, обеспечивающих элиминацию активных форм кислорода - СОД и каталазы - повышалась в 1,3 раза, по сравнению с данными показателями через две недели после родов. Активность ГПО и ГР в предродовой период возрастала примерно в одинаковой степени (в 1,3 и 1,2 раза), что свидетельствовало о сбалансированном функционировании глутатионового звена системы АОЗ и адекватном восполнении общего пула восстановленного глутатиона.

У животных с послеродовой патологией матки в предродовой период изменения в системе антиоксидантной защиты организма были менее сбалансированы. Так, активность каталазы была ниже на 21,7%, а СОД - на 15,3%, ГПО - на 24,6%, а ГР - на 14,6% по сравнению с данными показателями у животных без патологии матки.

Таким образом, в предродовой период у коров, у которых впоследствии развивался эндометрит, была снижена мощность антиокислительной системы. Это говорит о том, что уже на этапе беременности создаются благоприятные условия для развития заболеваний, как вследствие стрессового характера самого родового акта, так и ввиду определенной недостаточности антиоксидантной системы.

Для выяснения роли оксида азота в патогенезе послеродового эндометрита проведено изучение содержаний его стабильных метаболитов, а также уровня S-нитрозотиолов (RSNO), выступающих в качестве соединений, способных потенцировать его биологические эффекты.

Установлено, что у здоровых животных перед отелом уровень стабильных метаболитов оксида азота возрастает почти в 3,3 раза (табл. 9).

Таблица 9. Содержание NOx и S-нитрозотиолов в сыворотке крови коров в норме и при послеродовом эндометрите

Показатели

системы оксида азота

Группы животных

Оставшиеся здоровыми

Заболевшие эндометритом

Глубокая стельность

Две недели после родов

Глубокая стельность

Две недели после родов

1

2

3

4

NOx, мкМ/л

158,2±4,37

47,8±0,291*

123,6±5,15

138,7±7,14 Ў^

Страница:


Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.

© 2000 — 2023, ООО «Олбест» Все права защищены