Изучение нейроспецифических антигенов и антител к ним у пациентов с депрессивными проявлениями

Размещено на http://www.allbest.ru

Размещено на http://www.allbest.ru

Изучение нейроспецифических антигенов и антител к ним у пациентов с депрессивными проявлениями

Б.К. Еркинбекова, Б.В. Каральник, Ж.Т. Айтбаева, С.М. Хван, Т.П. Ветлугина

В сыворотке крови больных с депрессией в структуре органических, аффективных, невротических расстройств, а также у больных шизофренией (группа сравнения) и здоровых людей (контроль) исследовали уровень суммарного мозгового антигена (МА) и противомозговых антител (ПМА) в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА); концентрацию нейроспецифической енолазы (НСЕ) определяли методом ИФА. Установлено, что у депрессивных больных ПМА обнаруживается в 2 раза чаще, чем МА, а у больных шизофренией ПМА и МА обнаруживаются с одинаковой частотой. Концентрация НСЕ в общей группе депрессивных больных достоверно превышала аналогичный показатель групп сравнения и контроля. Ключевые слова: больные депрессией, шизофренией, мозговой антиген, противомозговые антитела, нейроспецифическа енолаза.

STUDYING OF NEUROSPECIFIC ANTIGENS AND ANTIBODIES TO THEM AT THE PATIENTS WITH DEPRESSIVE APPEARANCES. B. K. Yerkinbekova, B. V. Karalnik, Zh. T. Aitbayeva, S. M. Chvan, T. P. Vetlugina. In the blood's serum from the patients with depression in the structure of organic, affective, neurotic disorders, and also from the patients with schizophrenia (group of comparison) and healthy persons (control) the level of total brain antigen (BA) and anti brain antibodies (ABAB) in passive hemagglutination reaction was researched; concentration of neurospecific enolase (NSE) by immune-enzyme analysis was determined. It was established, that ABAB at the depressive patients were detected twice as often, than BA; and at the patients with schizophrenia ABAB and BA were detected equally often. Concentration of NSE in the group of depressive patients authentically exceeded the similar parameter in the groups of comparison and control. Key words: patients with depression and schizophrenia, brain antigen, antibrain antibodies, neurospecific enolase.

Выявление и оценка формирования аутоим-мунного ответа, в частности к мозгоспецифическим антигенам, при психической патологии всегда привлекали внимание исследователей. Особенно активно изучались мозгоспецифи-ческие антигены и противомозговые антитела при различных психических расстройствах в 60--70-е гг. прошлого столетия [1--5]. В исследованиях выявлены наибольшие иммунопатологические нарушения с достоверным повышением уровня противомозговых антител в сыворотке крови у больных с затяжным течением реактивной депрессии, наименьшие - при невротическом уровне реактивной депрессии [6]. Актуальность таких исследований не утрачена и в настоящее время, и этому способствует расширение методических возможностей изучения конкретных нейроспецифических антигенов и антител к ним.

В исследованиях ряда авторов продемонстрирована связь различных нейротропных антител и состояния обменных процессов с глубиной депрессии, ее типологическими вариантами и длительностью заболевания [7, 8, 9]. При изучении уровня аутоантител и их антиидиотипов к белкам нервной ткани S100b, GFAP (глиальному фибриллярному кислому белку), MP65 (мембранному белку) и фактору роста нервов у женщин с психогенными невротическими депрессиями было установлено, что изменения уровней аутоантител к указанным белкам нервной ткани соответствуют различным соматовегетативным проявлениям, а также коррелируют с уровнем (глубиной) депрессии, ее типологическими вариантами, длительностью заболевания.

Среди нейроспецифических белков (НСБ) особый интерес исследователей вызывает нейроспецифическая енолаза (НСЕ) - фермент, локализованный в нервных клетках и используемый в настоящее время в качестве маркера различных патологических состояний, сопровождающихся гибелью нейронов или их антигенной дивергенцией. Диагностические подходы с использованием НСЕ освещены в ряде работ [10, 11, 12]. В разработанных высокочувствительных иммуноферментных методах анализа в качестве основы для двуцентровой аналитической системы используются F(ab')2-фрагменты молекул антител к НСЕ, иммобилизованные на твердых носителях, которые позволяют определять количество этого антигена в сыворотке крови и судить о нарушениях гематоэнцефалического барьера (ГЭБ).

Задачей настоящей работы является изучение в крови больных с депрессивными расстройствами содержания суммарного мозгового антигена и НСЕ, а также активности антител к суммарному мозговому антигену.

Материалы и методы. В группу обследования включены 118 стационарных больных с психическими расстройствами (64,5 % мужчин и 35,5 % женщин) в возрасте от 18 до 68 лет. Средний возраст обследованных больных составил 44,7±1,3 года. Диагностику и клиническую квалификацию психических расстройств проводили в соответствии с МКБ-10 и рассматривали в рамках шифров F0 «Органические, включая симптоматические, психические расстройства», F2 «Шизофрения», F3 «Аффективные расстройства настроения», F4 «Невротические, связанные со стрессом и сомaтоформные расстройства».

В таблице 1 приведена клиническая характеристика больных обследованных групп.

Таблица 1. Характеристика обследованных больных с психическими расстройствами

Из 118 пациентов 64 составили больные с депрессивными проявлениями в рамках органических (группа 0), аффективных (группа 3) и невротических (группа 4) расстройств. В группу сравнения включены больные шизофренией (группа 2), проживающие в г. Алмате (20 человек) и в г. Кызылорде (34 человека). Контрольную группу составили 12 и 27 психически и соматически здоровых лиц из этих же городов соответственно.

Суммарный мозговой антиген (МА) и противомозговые антитела (ПМА) выявляли в сыворотке крови в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) при помощи антительного и антигенного эритроцитарных диагностикумов [13]. Диагностические иммунореагенты для РПГА получали путем сенсибилизации фиксированных эритроцитов барана суммарным мозговым антигеном из мозговой ткани погибших здоровых людей группы 0 крови или глобулином, извлеченным из гипериммунной сыворотки, полученной против данного антигена. Реагенты обладали достаточной чувствительностью и специфичностью. За условно диагностический принимали титр 1:50 (УДТ). Концентрацию нейроспецифической енолазы (НСЕ) определяли при помощи иммуноферментного анализа (ИФА) на полуавтоматическом иммунологическом анализаторе «Мультискан-ЕХ». Результаты исследований обрабатывали с применением методов статистического анализа [14]. Различия между группами считали значимыми при Р?0,05.

Результаты и обсуждение. Определение ПМА и суммарного МА в одной и той же пробе провели у всех 64 больных с депрессивными проявлениями различного генеза, из которых 12,5 % пациентов составили группу 0, 10,9 % пациентов - группу 3 и 76,6 % пациентов - группу 4. Результаты обнаружения ПМА и МА приведены в таблице 2.

Анализ полученных данных показал, что наиболее часто ПМА выявлялись у пациентов с депрессивными проявлениями. При тестировании сыворотки крови всех больных психическими расстройствами гомологичные антитела и антиген выше УДТ регистрировали у больных депрессивными проявлениями в 93,8 и 46,2 % случаев, у больных шизофренией - в 55,0 и 60,0 %.

Таблица 2. Частота положительных находок противомозговых антител и мозгового антигена в обследуемых группах

Примечание. a - Число исследуемых проб; b - число положительных находок; c - % положительных находок.

В группе контроля ПМА выявить не удалось, МА определялись у 2 из 12 обследованных (16,7 %). У всех пациентов частота выявления мозгоспецифического антигена была сопоставима, несколько чаще - у больных шизофренией. Средний геометрический титр противомозговых антител в группах 0, 3, 4, 2 составил 4550, 5900, 3380 и 57 соответственно; в общей группе депрессивных больных - 3730. Доверительные интервалы при Р=0,05 имели значения: 786--19300, 2900--12000, 1770--6460, 2200--6320 и 52--62 соответственно.

В результате сравнения частоты находок антител и антигена было показано, что в общей группе больных с депрессивными проявлениями антитела обнаружены в 2 раза чаще, чем антиген (Р=1,16•10-9). При этом подобное различие (в 2,1 раза) обнаружено только в группе больных с невротическими расстройствами (Р=3,57•10-8). В других группах больных с депрессивной симптоматикой такое различие выявить не удалось, возможно, из-за небольшой численности групп. Характерно, что у больных шизофренией частота обнаружения антигена, по крайней мере, столь же велика, как и антител. Дисперсионный анализ полученных результатов позволил документировать не только влияние особенностей психической патологии (депрессивные проявления или шизофрения) на частоту обнаружения суммарного мозгового антигена и антител к нему, но и существенное (Р<0,001) взаимодействие особенностей патологии и особенностей ее иммунологического индикатора на частоту обнаружения последнего (табл. 3).

Таблица 3. Результаты дисперсионного анализа влияния особенностей психической патологии и определяемого иммунологического показателя на частоту обнаружения антигена и антител

Примечание. C - мера варьирования, К - число степеней свободы, S2 - дисперсия, F - дисперсионное отношение, P - величина нуль-гипотезы.

Это отражает совершенно различный баланс обнаружения суммарного мозгового антигена и антител к нему в крови больных с психическими расстройствами, что может быть следствием многих причин (например, длительность заболевания до момента обследования и, следовательно, неодинаковый уровень повреждения тканей мозга; уровень супрессии иммунного ответа в связи с особенностями заболевания и применяемых психотропных средств; степень проницаемости гематоэнцефалического барьера для мозговых антигенов при психической патологии и т. п.). Выяснение роли этих и других возможных причин должно явиться предметом специальных исследований.

Полученные результаты и их возможная интерпретация подтверждаются также тем, что обнаружение антигена при шизофрении, как минимум, не реже, чем при депрессивных проявлениях (Р=0,114), а антител - реже (Р=1,70*10--4) в 1,7 раза.

Важно отметить, что антитела к мозговому антигену выше УДТ не обнаружены ни у 1 из 11 обследованных здоровых, а антиген выявлен только у 2 из 14, что существенно реже, чем у пациентов с депрессивными проявлениями (Р=2,79*10--10) и больных шизофренией (Р=0,043). Это отражает специфичность примененных тестов обнаружения суммарного мозгового антигена и антител к нему.

Уровень исследуемых антител и антигенов в различных группах представлен в таблице 4.

Концентрацию НСЕ определяли у 41 больных, которые по группам 0, 3, 4 распределились следующим образом: 14,6, 7,1 и 68,3 % соответственно.

По содержанию МА различий между группами и при их сравнении с группой 2 обнаружить не удалось. В общей группе депрессивных больных активность МА достоверно превышала соответствующий показатель контрольной группы (0,02>Р>0,01), но не в группе больных шизофренией. По данным проведенного обследования также не удалось выявить различие по этому показателю между контролем и группой сравнения.

Таблица 4. Противомозговые антитела, суммарный мозговой антиген и нейроспецифическая енолаза у обследованных

Примечание. * - Статистически достоверные различия показателей по сравнению с контролем (Р?0,05); ** - статистически достоверные различия показателей по сравнению с группой сравнения (Р?0,05).

Несколько иная картина наблюдается при анализе активности ПМА. Хотя различие этого показателя внутри группы депрессивных больных также не выявлено (Р>0,05), они обнаружены как при сравнении данных общей группы депрессивных больных с группой 2 - при депрессии титр выше в 66 раз (Р<0,001), а также с контрольной группой - при депрессии титр выше, чем у здоровых, почти в 340 раз (0,05>Р>0,01), так и при сравнении группы 2 с контрольной группой (0,05>Р>0,01): при шизофрении титр ПМА выше, чем у здоровых, в 5 раз.

По содержанию НСЕ показатели общей группы депрессивных больных достоверно превышают аналогичный показатель как у здоровых (0,05>Р>0,01) - в 4,4 раза, так и у больных шизофренией (Р<0,001) - в 6,4 раза. Различие содержания НСЕ у больных шизофренией и здоровых выявить не удалось (0,4>Р>0,3). Таким образом, наиболее высокий уровень НСЕ обнаруживается у больных депрессивными проявлениями, у этих же пациентов чаще выявляются ПМА, а МА - достоверно чаще у больных шизофренией. Это может быть обусловлено неодинаковыми функциональными характеристиками суммарного мозгового антигена и конкретного нейроспецифического белка. Повышенные концентрации НСЕ могут свидетельствовать о формировании аутоиммунного ответа к антигенам нейронов, в связи с чем использование антигенных маркеров определенного типа нервных клеток дает возможность судить о преимущественной направленности аутоиммунных процессов.

Таким образом, обследование больных с применением иммунологических методов выявления суммарного МА, НСЕ и антител к суммарному МА позволяет констатировать особенности деструктивно-органических процессов и аутоиммунного компонента при различной психической патологии.

Литература

психический нейроспецифический фермент патологический

1. Семенов С. Ф. Изучение аутоиммунных процессов в психиатрии // Актуальные проблемы невропатологии и психиатрии / под ред. Н. К. Боголепова, И. Темкова. - М., 1978. - 286 с.

2. Глебов В. С. Зильберштейн А. А. Сравнительное изучение реакции связывания комплемента и реакции гемагглютинации для выявления противомозговых антител в сыворотке крови больных шизофренией // Журн. невропатологии и психиатрии. - 1975. - Вып. 1. - С. 82--87.

3. Кузнецова Н. И. Иммунологическое исследование мозга : автореф. дис. … д.б.н. - М., 1970. - 45 с.

4. Семенов С. Ф., Назаров К. Н., Чуприков А. П. Аутоиммунные процессы при врожденных энцефалопатиях, эпилепсии и шизофрении. - М., 1973. - 335 с.

5. Ганнушкина И. В. Иммунологические аспекты травмы и сосудистых поражений головного мозга. - М., 1974. - 102 с.

6. Осколкова С. Н. Клинико-иммунологические сопоставления у больных реактивными депрессиями : автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 1981. - 25 с.

7. Морозов Г. В., Асанова Л. М., Лаврова Т. Н., Давыдов Д. М., Полетаев А. Б., Морозов С. Г. Особенности гуморального иммунитета у женщин с невротическими депрессиями // Журн. неврологии и психиатрии. - 2000. - Вып. 9. - C. 39--44.

8. Александровский Ю. А., Чехонин В. П. Клиническая иммунология пограничных психических расстройств. - М., 2005. - 256 с.

9. Бурбаева Г. Ш. Физиологически активные белки мозга как возможные маркеры психических заболеваний // Вестник РАМН. - 1992. - № 7. - С. 51--54.

10. Полетаев А. Б., Карлов В. А., Помочаева М. В., Селифанова О. П. Иммуноферментный анализ антигенной направленности антимозговых антител сыворотки крови больных эпилепсией // Журн. невропатологии и психиатрии. - 1985. - Вып. 6. - С. 831--833.

11. Чехонин В. П., Гурина О. И., Лебедев С. В. Нейроспецифические белки в мониторинге функций гематоэнцефалического барьера // Патогенез. - 2006. - № 1. - С. 5--15.

12. Чехонин В. П., Дмитриева Т. Б., Жирков Ю. А. Иммунохимический анализ нейроспецифических антигенов. - М., 1999. - 416 с.

13. Каральник Б. В., Царевский Ю. П., Шамардин В. А. Эритроцитарные белковые диагностикумы. - Алма-Ата, 1982. - 150 с.

14. Урбах В. Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях. - М., 1975. - 295 с.

Размещено на Allbest.ru