Особенности изготовления влажных анатомических и патологоанатомических препаратов, используемых при проведении патологоморфологических исследований

Размещено на http://allbest.ru

Размещено на http://allbest.ru

ОСОБЕННОСТИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВЛАЖНЫХ АНАТОМИЧЕСКИХ И ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ПАТОЛОГОМОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

трупы животные органы ткани патологоанатом учебный процесс

WAYS OF LONG-TERM PRESERVATION OF DRUGS USED IN THE CONDUCT OF ANATOMICAL AND PATHOMORPHOLOGICAL TRIAL

Abstract. The preservation of organs and tissues of animal corpses is a necessary part of the work of anatomists and pathologists with the obligatory use of these drugs in the educational process, including for independent work of students.

The method that we have optimized for the preparing of wet anatomical and pathological specimens, which have a high visibility, close to the natural color and shape of eviscerated organs and tissues, while being stored longer.

Keywords: pathological, anatomical specimens, organs, tissues, natural color, sodium acetate, biological and toxicological safety, demonstrativeness.

Ведение

Наряду с традиционными способами изготовления влажных анатомических и патологоанатомических препаратов ведется непрерывная экспериментальная работа, поиск оригинальных методик.

Поэтому целью нашей работы является разработка способа изготовления влажных анатомических и патологоанатомических препаратов, обладающих высокой наглядностью, близкими к естественной окраске и форме бальзамируемых органов и тканей, представляющих больший интерес ввиду наибольшей информативности, с длительным сроком службы [2, 3, 5, 6].

Аналогичными способами изготовления влажных патологоанатомических препаратов, которыми мы пользовались ранее и на основе которых разработали новый доступный и дешевый способ, являются:

1. Способы изготовления препаратов в жидкостях без сохранения естественной окраски.

Наиболее распространенным фиксатором является формалин. Обычно первые несколько дней орган фиксируется в 5%-ном растворе формалина с 2-3-кратной его сменой, после чего переносится в 10%-ный раствор. Для равномерной фиксации органа его можно подвесить в растворе или расправить на палочках или распорках. Во избежание всплывания очень легких органов их следует фиксировать с помощью небольшого груза или путем прикрепления препарата к стеклянной пластинке. Во время перерыва в работе орган следует хранить в консервирующей жидкости или завернутым в пропитанную соответствующим раствором ткань и накрытым клеенкой.

Серьезным недостатком этого способа изготовления влажных патологоанатомических препаратов является то, что формалин - очень токсичное вещество, которое обладает выраженным канцерогенным свойством. Вместо формалина для фиксации органов мы использовали и другие консерванты.

Наиболее доступные составы фиксирующих жидкостей:

• модифицированный раствор П.А. Минакова: формалин - 100 мл, этиловый спирт - 100 мл, вода - 800 мл;

• раствор А.И. Казанцева: горячий насыщенный раствор поваренной соли - 1000 мл, карболовая кислота - 30 г;

• раствор, рекомендуемый кафедрой топографической анатомии и оперативной хирургии I ММИ им И.М. Сеченова (в настоящее время - ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)»): глицерин - 1000 мл, 10%-ный раствор формалина - 200 мл, 5%-ный раствор хлористого натрия - 1000 мл, 96%-ный спирт - 500 мл, карболовая кислота - 500 г.; перед заливкой раствор подогревают до 40-45°С.

Существенным недостатком этих способов изготовления влажных патологоанатомических препаратов является то, что не сохраняется естественная окраска органов и тканей. Под воздействием спирта, кислот, формалина они обесцвечиваются.

2. Способы изготовления препаратов в жидкостях с сохранением естественной окраски по Мельникову-Разведенкову.

Методика состоит из трех фаз:

1 - фаза фиксации материла в солевом формалине;

2 - фаза восстановления цвета в крепких спиртах;

3 - фаза сохранения препарата в глицериново-уксусном растворе.

Фаза фиксации заключается в погружении препарата в следующий раствор, состоящий из: формалина - 100 мл, уксуснокислого калия (натрия) - 30 г, хлористого калия - 5 г, воды кипяченой - 1000 мл.

Объем жидкости должен в 5-8 раз превышать объем препарата. Препарат находится в этой жидкости до тех пор, пока не примет грязно-ржавую окраску.

На это уходит от 1 до 15 суток (в зависимости от строения и величины органа). Так, необходимая фиксация желудка, кишки, мочевого пузыря достигается через одни сутки, сердца - почти через 3-4 суток, мозга, печени - через 15 суток.

Не рекомендуется допускать передержку препарата в фиксирующей жидкости, так как гемоглобин при длительном действии формалина переходит в стойкий кислый гематин, который спиртом не восстанавливается.

Следует брать только свежие органы из трупа, не обмывая их водой и не вытирая. Запрещается удалять кровь, т.к. от ее количества зависит интенсивность окраски. Для более быстрого проникновения формалина в ткани рекомендуется делать глубокие разрезы по задней стороне препарата.

По завершению фиксации препарата в первом растворе его извлекают, дают стечь, высушивают полотенцем и погружают в 80-95%-ный спирт (денатурат непригоден). Восстановление окраски наступает через 1-2 часа для мелких и плоских органов и через 3-6 часов - для крупных паренхиматозных органов. Пребывание препарата в спирте более 12 часов недопустимо, так как наступает его обесцвечивание и сморщивание.

Когда цвет препарата восстановлен, его переносят в солевой раствор глицерина, в котором он может храниться неопределенно долгое время. Состав этого раствора:

• глицерин чистый - 600 мл,

• уксуснокислый калий - 400 г,

• вода дистиллированная - 1000 мл (вода может быть и кипяченая).

Закрывать препарат в банке сразу нельзя, так как иногда жидкость буреет, и ее следует заменить. Для предупреждения появления плесени рекомендуется класть в банку несколько кристаллов тимола.

Недостатком этого способа является то, что не всем органам и тканям после изготовления препаратов по Мельникову-Разведенкову удается сохранить свой цвет. По нашим наблюдениям, при хранении в консервирующем растворе, органы и ткани постепенно тускнеют, происходит их обесцвечивание. Это происходит потому, что в составе фиксирующего раствора содержится большое количество формалина.

Наиболее востребованными являются влажные препараты, которые очень демонстративны, долго хранятся в герметично закрытых емкостях. Но их недостаток заключается в том, что предложенные фиксирующие и консервирующие растворы несмотря на то, что обеспечивают длительное хранение препаратов, часто обесцвечивают органы и ткани, если не сразу, то со временем.

Поэтому мы разработали способ изготовления влажных патологоанатомических препаратов, которые сохраняют свою естественную окраску и представляют больший интерес, так как они наиболее информативны и достаточно демонстративны [5, 6].

Материал и методы исследования

Источником необходимого материала обычно служат органы убойных животных, трупы павших животных [1, 8, 9].

В нашей работе мы использовали имеющиеся на кафедре незаразной патологии факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВО Белгородский ГАУ ингредиенты, учитывая их свойства.

Метод включает в себя три фазы изготовления препарата.

При изготовлении патологоанатомических препаратов надо еще до фиксации органу, особенно полому, или ткани придать демонстрационную форму с помощью ваты, марли, которыми заполняются полости.

Первая фаза - фиксация органа или ткани в растворе, содержащем: формалин - 35 г, уксуснокислый натрий - 80 г, хлористый калий - 10 г, вода дистиллированная - 1000 г.

Объем жидкости должен в 4 раза превышать объем фиксируемого препарата. В этой жидкости препарат выдерживается до тех пор, пока ткани равномерно не уплотнятся, и кровь не перестанет экстрагироваться в раствор.

Время выдержки составляет от нескольких часов до 2-х недель. Это зависит от размера, плотности, строения органа.

Передерживать препарат в фиксирующей жидкости категорически не рекомендуется, так как гемоглобин при длительном воздействии формалина переходит в стойкий кислый гематин, и в этом случае восстановление спиртом не представляется возможным.

Следует отметить, что уменьшение количества формалина при фиксации (в первой фазе) до 30 г на 1000 г воды, позволило сохранить окраску органа близкой к естественной. Обязательным условием является то, что температура воздуха не превышает +5°С, и экспозиция достаточно длительная с заменой раствора на новый 1 раз в 5 дней.

Помещение, в котором фиксируется препарат, должно быть темным, или контейнеры не должны быть прозрачными. При завершении фиксации препарат извлекают из первого раствора, дают ему полностью стечь.

Во второй фазе - (восстановление цвета) зафиксированный материал переносят в 95%-ный этиловый спирт. Экспозиция в нем составляет от нескольких минут до 1 часа в зависимости от размера, плотности органа или ткани. Передерживать препарат в спирте нежелательно, так как происходит его обесцвечивание.

После восстановления цвета органы переносят в емкости с консервирующим раствором.

Третья фаза - необходимо предварительно погрузить препарат в емкость (не демонстрационную) и выдержать в консервирующем растворе несколько дней (на случай, если будет происходить дальнейшее экстрагирование крови в раствор), а затем перенести препарат в анатомическую посуду, зафиксировать его и залить новым консервирующим раствором, состоящим из: глицерина - 880 г, уксуснокислого натрия - 500 г, воды - 1000 г, тимола - 10 г.

Условия приготовления консервирующего раствора: в воде растворить уксуснокислый натрий и довести до кипения, после чего туда добавить глицерин и дать раствору хорошо закипеть. После того, как раствор остынет, добавить к нему тимол и залить препарат в демонстрационную посуду, которую следует герметично закупорить силиконовым герметиком. Раствор должен полностью покрывать органы и ткани.

На рисунках 1-4 представлены влажные анатомические и патологоанатомические препараты, полученные разработанным нами способом.

Рис. 1 - Половой член крупного рогатого скота

Рис. 2 - Матка собаки

Рис. 3 - Семенники крупного рогатого скота

Рис. 4 - Плод крупного рогатого скота

Заключение

По сравнению с традиционными методами, препараты, изготовленные таким способом, обладают значительными преимуществами: они нетоксичны, лишены запаха и не оказывают вредного воздействия на организм человека даже при испарении; обладают высокой наглядностью, близки к естественной окраске и форме бальзамируемых органов и тканей; хранятся десятки лет и при необходимости легко реставрируются.

Биологическая, токсическая безопасность и эстетичность этих препаратов делает их удобными в обращении не только в учебном процессе, но и предполагает участие в музейных патологоанатомических экспозициях просветительного характера, даже для неподготовленной аудитории.

Библиография

1. Воробиевская С.В. Эндокринные и экзокринные органы убойных животных как источник медицинских и ветеринарных препаратов. // Проблемы и перспективы инновационного развития агротехнологий: материалы XX Международной научно-производственной конференции. 2016. С. 69-70.

2. Пикалюк В.С., Мороз Г.А., Кутя С.А. Методическое пособие по изготовлению анатомических препаратов. Симферополь, 2004. 76 с.

3. Кузнецов Л.Е., Хохлов В.В., Фадеев С.П., Шигеев В.Б. Бальзамирование и реставрация трупов: Руководство. М. : 1999. 496 с.

4. Атлас-альбом: патоморфологическая диагностика болезней животных / под ред. Б. Белкин, А. Жаров, В. Прудников и др. М. : Аквариум, 2013. 232с.

5. Помещикова Д.А., Нуралиева М.С., Воробиевская С.В., Кулаченко И.В. Изучение и оптимизация способов изготовления мягких анатомических препаратов: материалы международной студенческой научной конференции. 2015. С. 57.

6. Привес М.Г. Методы консервирования анатомических препаратов. Медгиз, Ленинградское отделение, 1956. 128 с.

7. Стаценко М.Д., Воробиевская С.В. Реставрация музейных патологоанатомических препаратов: материалы международной студенческой научной конференции. Т. 1. 2017. С. 57.

8. Эзугвори О. Дж. Традиционные методы бальзамирования Нсукки, Игбо и Идомы // Журнал экспериментальной и клинической анатомии. 2001.

9. Фредерик Л.Г., Струб К.Г. Принципы и практика бальзамирования. 5-е изд. Даллас. 1989.

Размещено на Allbest.ru