Исследование гепатопротекторной активности водных эктрактов трав Cymbopogon Proximus, Acacia Nilotica, Trigonella Foenumgraecum на модели токсического гепатита, вызванного четыреххлористым углеродом у белых крыс линии Wistar
Изучение гепатопротекторных эффектов водных экстрактов трав Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum на модели острого токсического гепатита, индуцированного четырёххлористым углеродом. Их эффективность в отношении некроза печени.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | статья |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 13.12.2021 |
| Размер файла | 4,1 M |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Исследование гепатопротекторной активности водных эктрактов трав Cymbopogon Proximus, Acacia Nilotica, Trigonella Foenumgraecum на модели токсического гепатита, вызванного четыреххлористым углеродом у белых крыс линии Wistar
В.И. Инчина, М.А. Абдалхамид Хуссейн
Аннотация
экстракт водный травы гепатит печень
Актуальность и цели. Изучение гепатопротекторных эффектов водных экстрактов трав Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum на модели острого токсического гепатита, индуцированного четырёххлористым углеродом.
Материалы и методы. В эксперименте на 40 белых крысах линии Вистар исследовано влияние водных экстрактов трав. Водные экстракты исследуемых трав в концентрации 1:10 вводили внутрибрюшинно в течение 4 дней после моделирования острого гепатита. Через 4 дня от начала эксперимента производили биохимические исследования крови и гистологические исследования печени.
Результаты. Фитопрепараты корригируют рост триглицеридов сыворотки крови и не устраняют развитие гиперферментемии, увеличения креатинина и снижения мочевины сыворотки крови. Результаты гистологического исследования печени более информативны для оценки эффектов экстрактов исследуемых трав. Показано, что применение водных экстрактов предотвращает развитие выраженных деструктивных изменений в гепатоцитах и паренхимы печени в виде некроза, жировой дистрофии, воспалительных изменений.
Выводы. Полученные результаты свидетельствуют об эффективности применения водных экстрактов Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum при острых токсических повреждениях печени. Предполагаемыми областями применения полученного материала являются экспериментальная гастроэнтерология, токсикология, фитотерапия.
Ключевые слова: острый токсический гепатит, водные экстракты Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum, морфологические изменения в печени.
V. I. Inchina, M. A. AbdulkhamidKhusseyn
Abstract
A STUDY OF THE HEPATOPROTECTIVE ACTIVITY OF WATER EKTRACTS OF HERBS CYMBOPOGON PROXIMUS, ACACIA NILOTICA, TRIGONELLA FOENUMGRAECUM ON THE MODEL
OF TOXIC HEPATITIS CAUSED BY FOUR-CHLORINE CARBON IN WHITE RATS OF WISTAR LINE
Background. The work is aimed at studying hepatoprotective effects of water extracts of herbs Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, and Trigonella foenumgrae- cum on the model of acute toxic hepatitis induced by carbon tetrachloride.
Materials and methods. In an experiment on 40 white Wistar rats, the effect of water extracts of herbs was studied. Water extracts of the studied herbs at a concentration of 1:10 were administered intraperitoneally within 4 days after modeling acute hepatitis. After 4 days from the beginning of the experiment, biochemical blood tests and liver histological studies were performed.
Results. Phytopreparations correct the growth of serum triglycerides and do not eliminate the development of hyperfermentemia, increased creatinine and a decrease in serum urea. The results of histological examination of the liver are more informative for evaluating the effects of extracts of the studied herbs. It is shown that the use of aqueous extracts prevents the development of pronounced destructive changes in hepatocytes and liver parenchyma in the form of necrosis, fatty degeneration, and inflammatory changes.
Conclusions. The obtained results testify to the effectiveness of the use of aqueous extracts of Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, and Trigonella foenumgrae- cum in acute toxic liver damage. The proposed fields of application of the material obtained are experimental gastroenterology, toxicology, phytotherapy.
Key words: acute toxic hepatitis, aqueous extracts of Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum, morphological changes in the liver.
Введение
Прогрессивное увеличение ксенобиотиков как в структуре питания, так и в применении лекарственных препаратов характерно для жизни современного человека, что является фактором, повышающим негативную метаболическую нагрузку на печень и вызывает рост ее токсических поражений. В свою очередь, учитывая многогранную роль печени в организме, повреждение печени является триггерным фактором в инициации целого каскада патологических процессов - дисметаболических, иммунопатологических, токсических, гематологических и др., приводя к развитию системной патологии.
Фармакологическая коррекция является основой терапевтического процесса токсических поражений печени. В подавляющем большинстве лекарственные препараты, проявляющие гепатопротекторную активность, - растительного происхождения; стандартом в экспериментальных исследованиях является препараты карсил, силибрп, легалон, эссенциале [1]. В связи с большим разнообразием представителей флоры в различных географических зонах мира понятен и обоснован интерес фармацевтов к поиску новых, более эффективных фитогепатопротекторов. Значительное количество опубликованных научных исследований в данной области подтверждает интенсивный поиск гепатопротекторных соединений среди представителей растительного мира. Стимулирующим фактором в данных исследованиях является и позиция Всемирной организации здравоохранения в области народной медицины, а также многовековая традиция фитотерапии в различных странах - как в развивающихся, так и развитых [2]. Кроме того, современный уровень научных исследований позволяет выявить новые активные фармакологические соединения в растительном сырье и расширить представления о фармакине- тике и фармакодинамике традиционно применяющихся фитокомпонентов.
Целью настоящего исследования явилось исследование гепатопротек- торной активности водных экстрактор трав Cymbopogonproximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum, произрастающих и собранных в Африке (провинция Acacia, Судана) на модели токсического гепатита, вызванного четыреххлористым углеродом у белых крыс линии Wistar.
1. Материалы и методы исследования
Исследование проведено на 40 половозрелых крысах-альбиносах линии Wistar массой 250-300 г в весенне-летнее время на базе вивария Национального исследовательского Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева. Животные получены из питомника «Столбовая» Научного центра биомедицинских технологий РАМН. Все эксперименты, уход и содержание осуществлялись в соответствии с Директивой № 63 от 22 сентября 2010 г. Президиума и Парламента Европы «О защите животных, используемых для научных исследований», «Санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник от 06.04.1993 и приказом Минздрава РФ № 267 от 19.06.2003 «Об утверждении правил лабораторной практики». В соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (2005) максимально допустимое внутривенное введение жидкости белым нелинейным крысам составляет 2,0 мл/кг.
Лабораторные животные случайным образом были разделены на 8 групп по 5 особей. Первая группа - интактные животные. Для моделирования острого токсического поражения печени животным подкожно вводили 50 % СС14 по 0,6 мл, 0,3 мл и 0,2 мл в разных сериях (серии контроля - 2, 3, 4). С целью изучения гепатопротекторных свойств в четырех сериях (5, 6, 7 и 8) после введения СС14 внутрибрюшинно вводили по 2 мл водного раствора исследуемых трав Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum в концентрации 1:10 ежедневно в течение 5 сут. По окончании эксперимента животных выводили из опыта эфирным наркозом в камере с последующей декапитацией. Биохимические исследования проводили в сыворотке крови на автоматическом биохимическом анализаторе фирмы HUMASTAR 600 (Германия). В сыворотке крови крыс определяли содержание общего белка, альбуминов, активность трансаминаз - аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), общего холестерина, триглицеридов, мочевины и креатинина.
Для гистологического исследования забирали кусочки печени, фиксировали в 10 % нейтральном формалине, обезвоживали в серии спиртов и толуола, заливали в парафин, готовили срезы толщиной 5 мк, окрашивали гематоксилином и эозином. Гистологические исследования проводили на микроскопе МИК-МЕД «ЛОМО», микрофотографии получали с помощью цифровой камеры Canon.
Результаты исследования обработаны статистически с использованием Т-критерия Стьюдента. Значимыми считали различия при р < 0,05. По ходу изложения статистические показатели обозначены следующими символами: М - среднее значение; m - ошибка среднего, ри - отличие от аналогичного показателя интактных животных; рк - отличие от аналогичного показателя контрольной группы.
2. Результаты и их обсуждение
Из исследуемых биохимических показателей не все оказались чувствительны к острому токсическому воздействию (табл. 1). Лишь у крыс в серии с 0,2 мл СС14 уровень общего белка в сыворотке крови был достоверно повышен, что, вероятно, является реакцией печени на токсическое воздействие.
В остальных сериях изменения данного показателя были недостоверны. Аналогичны изменения концентрации альбуминов в сыворотке крови. Более чувствительна к токсическому воздействию оказалась активность цитолитических ферментов: показатели АЛТ возросли в среднем на 13 % в разных сериях контроля по сравнению с интактными животными. Применение Acacia nilotica предотвращало рост данного показателя. Напротив, острая интоксикация вызывает значительный рост активности АСТ - максимально на 153 % в контроле. Применение водных растворов исследуемых трав не корригирует рост АСТ.
Динамика уровня общего холестерина не претерпевала значимых изменений в контроле и при введении экстрактов трав. Содержание триглицеридов в контроле увеличивалось максимально в 2 раза.
Все экстракты исследуемых трав корригировали гипертриглицеридемию. Содержание мочевины сыворотки крови понижалось в группах контроля максимально на 22 %, что указывает на снижение мочевиносинтетической функции печени как свидетельство нарушения ее детоксикационных свойств. Применяемые фитопрепараты не устраняют данные нарушения. О токсическом повреждении почек свидетельствует рост в контрольной серии креатинина максимально на 36 %. Исследуемые водные извлечения трав не корригируют рост креатинина.
При гистологическом исследовании найдено, что на 5-е сут наблюдались выраженная жировая дистрофия гепатоцитов, очаговый некроз гепатоцитов, расширение портальных вен, синусоидов, отек портальных трактов, в гепатоцитах - белковая дистрофия. Выявлены проявления венозной дилатации с гемостазом, некротические гепатоциты присутствуют преимущественно вокруг центральных вен, очаги поврежденных гепатоцитов с полиморфноядерной инфильтрацией. Очаги интралобулярного некроза (рис. 1,б) сопровождались воспалительной реакцией с гранулематозной агрегацией, окруженной периваскулярным макровезикулярным стеатозом.
Введение водных экстрактов исследуемых трав уменьшало выраженность некротических и дистрофических изменений гепатоцитов. В подавляющем большинстве наблюдались малоизмененные гепатоциты с умеренно выраженной белковой дистрофией. Клетки округлой или полигональной формы с большим ядром, хорошо дифференцируемым ядерным хроматином, ядрышками (рис. 2,б). Цитоплазма клеток гомогенная, клетки расположены плотно в пределах правильно ориентированных трабекул, наблюдается реакция клеток Купфера как проявление активации ретикуло-эндотелиальной системы. Не выявлено очагов некроза и выраженной лейкоцитарной инфильтрации.
В отдельных случаях встречаются гепатоциты с признаками жировой дистрофии, расширение пространств Диссе (рис. 2,б).
Размещено на http://www.allbest.ru/
Рис. 1. Печень нормальных животных (а): нормальные печеночные клетки с хорошо сохранившимися цитоплазмой, ядрами, ядрышками и центральной веной; массовые жировые изменения (б): некроз, баллонная, дегенерация гепатоцитов печени крыс с CCl4. Окраска гематоксилином и эозином, /200
Рис. 2. Печень белой крысы с острым токсическим гепатитом на фоне введения экстрактов Trigonella foenumgraecum (а); Cymbopogon proximus: нормальный лобулярный рисунок с умеренной степенью жирового изменения, без некроза, умеренно выраженная белковая дистрофия гепатоцитов (б).
Окраска гематоксилином и эозином, /200
Таким образом, морфологические изменения печени более значимо, чем функциональные показатели, выявляют гепатопротекторные свойства исследуемых трав, что проявляется в предотвращении развития выраженных деструктивных изменений в гепатоцитах, особенно признаков некроза и жировой дистрофии и реактивных воспалительных изменений, инициирующих развитие фиброзных изменений в печени с последующей трансформацией в цирроз печени.
О наличии гепатопротекторной активности фитопрепаратов свидетельствуют многочисленные исследования как отечественных, так и зарубежных авторов [3-5]. Гепатотропные свойства исследуемых нами трав широко освещены в зарубежной литературе. Пероральное введение водно-спиртового экстракта Acacia. indica (250 и 500 мг/кг) эффективно ингибировали CCl и парацетамол, индуцированные изменения в ферментах маркеров цитолиза сыворотки, холестерина, сывороточного белка и альбумина дозозависимым образом по сравнению со стандартным силимарином. Печеночный стеатоз, жировая инфильтрация, гидродная дегенерация и некроз, наблюдаемые в группах CCl4 и парацетамола, полностью отсутствуют [6].
Терапевтическая активность экстрактов акации обусловлена наличием в них высокоактивных биологических компонентов: фитохимическая составляющая растений выглядит следующим образом: дубильные вещества (0,180,21 мг/мл), фенолы (0,03-1,01 мг/мл), сапонины (0,11-0,23 мг/мл) и флавоноиды (0,02-0,24 мг/мл) [7].
В состав растения входят такие компоненты, как алкалоиды, летучие эфирные масла, фенолы и фенольные гликозиды, смолы, олеозины, стероиды, танины и терпены. A. nilotica - лекарственное растение, признанное богатым фенолами, состоящее из конденсированного танина и флобатанина, галловой кислоты, протокатехиновой кислоты, пирокатехина, катехина, эпигалогена- техин-7-галлата и эпигаллокатехина-5,7-дигаллат. Различные части этого растения, такие как листья, корни, семена, кора, фрукты, камедь и незрелые стручки, обладают противораковым, антимутагенным, спазмогенным, сосудосуживающим, антипиретическим, антиастматическим, цитотоксическим, антидиабетическим, антитромбоцитарным, моллюскицидным, противогрибковым, антиВИЧ и антиоксидантным действием, обладают также антибактериальной, антигипертензивной и противосудорожной активностью, широко используются в лечении различных заболеваний в народной медицине [8].
В Acacaia nilotica значение калия, железа и цинка, меди и марганца составляет 2,1, 203,1, 108,7, 322,7 и 1,09 мг на 100 г в пересчете на сухой вес соответственно. Масло, сырой протеин и содержание сырых волокон в этих съедобных семенах составляют 4,1, 25,3 и 28,4 % соответственно. Acacaia ni- lotica содержит алкалоиды, флаваноиды, смолы, жирные кислоты и танины, арабин, соединение аравийской кислоты с кальцием, магнием и калием. Экстракты A. Nilotica проявляют значительное противомикробное, антиоксидантное, противодиарейное, противоопухолевое и антимутагенное действие, обладают антигельминтный, противодиабетической и противовоспалительной активностью [5].
Водные экстракты листьев A. nilotica проявляют антидиабетическую активность, при этом было установлено, что внутрибрюшинный путь введения растительных экстрактов более эффективен, чем пероральный.
Качественный и количественный фитохимический скрининг водных листовых экстрактов A. nilotica показал наличие фенолов, алкалоидов, флавоноидов, танинов и сапонинов [6].
Фармакологическая эффективность Trigonella foenumgraecum обусловлена наличием уникальных химических составляющих: кверцетин, диосге- нин, trignolline, galactomanin и необычные аминокислоты 4-гидроксиизолей- цин [7].
Муцилагиновое волокно, присутствующее в семенах пажитника, может связывать желчные кислоты и уменьшать холестерин и жир в крови. Растительный белок в пажитнике способен оказывать гиполипидемическое действие. Стероидные сапонины, алкалоиды и 4-гидроксиизолейцин могут способствовать метаболизму глюкозы и ингибируют поглощение холестерина. Кроме того, некоторые химические составляющие пажитника могут непосредственно стимулировать секрецию инсулина из В-клеток, приводя к снижению уровня сахара в крови. Эти эффекты объясняют его модулирующее действие на уровень липидов в крови и антиоксидантные свойства. В ряде исследований экстракты семян Trigonella foenumgraecum показали антиканцерогенную активность. Гистопатологические исследования печени и головного мозга выявили, что водный экстракт семян пажитника (Trigonellafoe- numgraecum) обеспечивает защиту от этанола [8]. Лечебные свойства и их роль в клинической области могут быть обусловлены тремя основными химическими компонентами - галактоманнаном, 4-ОНизолейцином и стероидным сапонином [9].
Были выявлены сорок компонентов, составляющих 98,5 % от общего объема компонентов эфирного масла: сесквитерпеновые углеводороды (70,2 %), кислородсодержащие sesquitepenes (16,5 %), монотерпены кислорода (3,5 %) и моноуглеводороды (0,5 %); Germacrene-д (33,0 %), bicycloger- macrene (26,0 %) и viridiflorol (5,3 % [4]. Полученные результаты позволили выявить 32 фенольных соединения, среди которых предварительно выявлены различные флавоноидные гликозиды и фенольные кислоты. Изучение полученных спектров масспектроскопии показало, что большинство из указанных соединений были ацилированные и неацилированные производные флавоноидов с апигенином, лютеолином и кемпферолом. Также были обнаружены гидроксикоричные кислоты в основном в виде производных кофеиновой кислоты [10].
Анализ литературных источников свидетельствует о наличии в исследуемых травах биологически активных компонентов, которые могут обеспечить их гепатопротекторное действие при острых токсических повреждениях печени и являются перспективным сырьем для создания новых лекарственных препаратов.
Заключение
Из исследуемых биохимических параметров сыворотки крови наиболее чувствительны к токсическому воздействию активность ферментов АЛТ, АСТ, значения триглицеридов, мочевины и креатинина. Введение водных экстрактов Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum в концентрации 1:10 не корригирует изменения исследуемых биохимических показателей в сыворотке крови крыс при остром токсическом гепатите, кроме роста уровня триглицеридов.
В оценке гепатопротекторной активности водных экстрактов исследуемых трав при моделировании острого токсического гепатита тетрахлормета- ном наиболее значимы морфологические изменения в печени.
Введение водных экстрактов Cymbopogon proximus, Acacia nilotica, Trigonella foenumgraecum в концентрации 1:10 предотвращает развитие некротических изменений в гепатоцитах, воспалительной инфильтрации, проявления жировой дистрофии и сохраняет архитектонику дольки печени.
Библиографический список
1. Хабриев, Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р. У. Хабриев. - М. : Медицина, 2005. - 832 с.
2. Acacia nilotica: A plant of multipurpose medicinal uses / Atif Ali, Naveed Akhtar, Bar- kat Ali Khan, Muhammad Shoaib Khan, Akhtar Rasul, Shahiq-UZ-Zaman, Nayab Khalid, Khalid Waseem, Tariq Mahmood and Liaqat Ali // Journal of Medicinal Plants Research. - 2012. - Vol. 6 (9). - P. 1492-1496. - DOI 10.5897/JMPR11.1275.
3. Banso, A. Phytochemical and antibacterial investigation of bark extracts of Acacia nilotica / A. Banso // J. Med. Plants Res. - 2009. - № 3. - Р. 082-085.
4. Haliem, E. A. Correlation of genetic variation among wild Trigonella foenum-graecum L. accessions with their antioxidant potential status / E. A. Haliem, A. A. Al-Huqail // Genet Mol Res. - 2014. - № 13 (4). - Р. 10464-10481. - DOI 10.4238/2014. December.12.8.
5. Abbasian, К. Chemical Composition profile of Acacia nilotica Seed Growing Wild in South of Iran / Karim Abbasian, Jinous Aasgarpanah and Parisa Ziarati // Griental Journal of Chemistry. - 2015. - Vol. 31, № 2. - P. 1027-1033.
6. Antidiabetic Effects of Aqueous Leaf Extracts of Acacia nilotica in Alloxan Induced Diabetic Mice / Mukundi et al. // J Diabetes Metab. - 2015. - Vol. 6, is. 7. - Р. 1000568.
7. Omi, L. Fenugreek: А treasure of bioactive compounds with promising antidiabetic potential / Omi Laila and Imtiyaz Murtaza // International journal of food and nutrition. AL SCIENCES. - 2015. - Vol. 4, is. 1.
8. Herbal Extract as Hepatoprotective-A. Review / Sanjay Kumar Jain, Sourabh Rajvaidy, Prashant Desai, G. K. Singh, B. P. Nagori // Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. - 2013. - Vol. 2 (3). - Р. 170-175.
9. Thirunavukkarasu, V. Protective effect of fenugreek (Trigonella foenum graecum) seeds in experimentalethanol toxicity / V. Thirunavukkarasu, C. V. Anuradha, P. Viswanathan // Phytother Res. - 2003. - Vol. 17. - Р. 737-743.
10. Zakia, B. Characterization of flavonoid glycosides from fenugreek (Trigonella foe- num-graecum) crude seeds by HPLC-DAD-ESI/MS analysis Mol Sci / Zakia Benayad, Carmen Gomez-Cordoves and Nour Eddine Es-Safi // Int. J. Mol. Sci. - 2014. - Vol. 11, № 15 (11). - Р. 20668-20685.
Размещено на Allbest.ru
Подобные документы
Описания заболевания печени острого или хронического течения. Изучение причин возникновения, симптомов и осложнений токсического гепатита. Обзор особенностей диагностики и методов лечения заболевания. Диета и противопоказания при токсическом гепатите.
презентация [255,3 K], добавлен 30.10.2013Инфекционное заболевание печени. Пути передачи вирусного гепатита В. Технология производства и особенности введения вакцин. Экстренная профилактика острого гепатита с желтухой, бессимптомного вирусоносительства до острой печеночной недостаточности.
презентация [271,1 K], добавлен 23.10.2014Описания воспалительного заболевания печени, возбудителем которого является вирус гепатита C. Исследование источников вируса, инкубационного периода. Клинические особенности гепатита. Лабораторная диагностика. Лечение и профилактика вирусных гепатитов.
презентация [61,8 K], добавлен 19.11.2014Классификация, основные типы, признаки и формы хронического гепатита. Профилактика хронического гепатита и цирроза печени. Гормональная терапия при ранних формах хронического гепатита. Гепатолентикулярная дегенерация (болезнь Коновалова — Вильсона).
реферат [2,4 M], добавлен 11.09.2010Эпидемиология гепатита А (болезни Боткина), В (сывороточного гепатита), D (дельта-инфекции), С ("ни А ни В" гепатита). Новые вирусы гепатита. Источники инфекций и механизмы заражения. Микробиологическая диагностика, лечение и профилактика гепатита.
презентация [6,8 M], добавлен 23.09.2013Исследование активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови кроликов при однократном введении четыреххлористого углерода и процессе лечения токсических поражений с использованием традиционных и нетрадиционных методов детоксикации организма.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 15.07.2012Гепатит C как инфекционное заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита С. Особенности заражения, распространения и течение начальной стадии болезни. Симптомы желтушного и безжелтушного периода гепатита С. Группа риска, методы лечения и профилактики.
презентация [56,8 K], добавлен 03.04.2014Разграничительные признаки цирроза и гепатита. Глубокая методическая скользящая топографическая пальпация по Образцову-Строжеско. Лечение цирроза печени. Основные симптомы констриктивного перикардита, эхинококкоза печени и хронического гепатита.
история болезни [25,5 K], добавлен 28.10.2009Изучение особенностей распространения вируса гепатита В, его устойчивости во внешней среде. Исследование механизма развития инфекции, обусловленной вирусом гепатита. Характеристика общих симптомов заболевания, методов профилактики и защиты от вируса.
презентация [1022,5 K], добавлен 22.05.2012Современное лечение хронических гепатитов и циррозов печени. Использование различных схем при лечении хронического гепатита (на примере клиник г. Подольска). Динамика показателей активности аминотрансфераз в разных группах больных до и после лечения.
курсовая работа [41,0 K], добавлен 28.09.2015
