Главная Коллекция "Otherreferats" Медицина Влияние медикаментозной терапии на состояние внутреннего уха животных при экспериментальном моделировании сенсоневральной тугоухости

Влияние медикаментозной терапии на состояние внутреннего уха животных при экспериментальном моделировании сенсоневральной тугоухости

Изучение состояния внутреннего уха при моделировании шумовибрационной тугоухости у животных. Метод регистрации отоакустической эмиссии. Влияние медикаментозной терапии силденафилом на уменьшение выраженности морфологических изменений в структурах уха.

Рубрика Медицина
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 23.02.2021
Размер файла 1,6 M

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

Размещено на http://www.allbest.ru

Ростовский государственный медицинский университет

Дорожная клиническая больница на станции Ростов - Главный ОАО «РЖД»

Влияние медикаментозной терапии на состояние внутреннего уха животных при экспериментальном моделировании сенсоневральной тугоухости

Золотова Татьяна Викторовна доктор медицинских наук, профессор,

профессор кафедры болезней уха, горла, носа,

Овсянников Виктор Григорьевич доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой патологической физиологии,

Лобзина Елена Валериевна врач-оториноларинголог

Аннотация

Изучалось состояние внутреннего уха при моделировании шумовибрационной тугоухости у лабораторных животных и влияние медикаментозной терапии силденафилом. В экспериментальном исследовании участвовало 32 белые беспородные крысы. Выделена группа интактных животных - контрольная, группа животных, которых подвергали шумовибрационному воздействию на фоне иммобилизации без лечения и 2 группы крыс, которые получали препарат силденафил. В одной из этих групп силденафил применяли отсрочено, после окончания патологического воздействия, а в другой - одновременно с моделированием тугоухости. Формирование тугоухости подтверждали методом регистрации отоакустической эмиссии. После выведения животных из эксперимента готовили гистологические препараты улиток внутреннего уха крыс и исследовали их при световой микроскопии. У животных, подвергшихся шумовому и вибрационному воздействию на фоне иммобилизации, достигнуто формирование стойкой сенсоневральной тугоухости, что подтверждено данными регистрации отоакустической эмиссии. Результаты гистологического исследования улиток височных костей животных свидетельствовали о дистрофических и деструктивных изменениях в структурах спирального органа, признаках апоптоза клеток внутреннего уха и спирального ганглия. Медикаментозная терапия силденафилом оказалась эффективной при его использовании у лабораторных крыс, подвергнутых действию шумовибрационного раздражителя в условиях иммобилизации животного, особенно, при одновременном с моделированием применением силденафила. Лечение силденафилом приводит к уменьшению выраженности морфологических изменений в структурах спирального органа и спирального ганглия крыс по сравнению с животными с экспериментальной тугоухостью, не получавшими лечение.

Ключевые слова: сенсоневральная тугоухость, воздействие шума и вибрации, моделирование тугоухости, морфологические нарушения в спиральном органе, лечение тугоухости, силденафил.

ухо тугоухость медикаментозный терапия

Summary

Zolotova T.V.

Doctor of medical Sciences, Professor, Professor of Department of Ear, Throat, Nose Diseases, Rostov State Medical University Ovsyannikov V.G.

Doctor of medical Sciences, Professor, Head of Department of Pathological Physiology, Rostov State Medical University Lobzina E. V. otorhinolaryngologist Road Clinical Hospital at the Rostov-Main Station

THE EFFECT ОF DRUG THERAPY ОN THE INNER EAR ОF ANIMALS BY EXPERIMENTAL MODELING ОF SENSORINEURAL HEARING LOSS

The state of the inner ear was studied in the simulation of noise vibration hearing loss in laboratory animals and the effect of drug therapy with sildenafil. The experimental study involved 32 white outbred rats. A group of intact animals - control, a group of animals subjected to noise-vibration effects on the background of immobilization without treatment and 2 groups of rats that received the drug sildenafil. In one of these groups sildenafil was used delayed after the end of pathological exposure, and in the other - simultaneously with the simulation of hearing loss. Proved hearing loss during registration of otoacoustic emission. fistological preparations of rat inner ear snails were made and examined under light microscopy. In animals subjected to noise and vibration effects on the background of immobilization, the formation of persistent sensorineural hearing loss was achieved, which is confirmed by the data of registration of otoacoustic emission. The results of histological examination of animal temporal bone snails showed dystrophic and destructive changes in the structures of the spiral organ, signs of apoptosis of inner ear cells and spiral ganglion. Medical therapy with sildenafil proved to be effective when used in laboratory rats exposed to the action of a noise-vibration stimulus in the conditions of immobilization of the animal, especially, while simulating the use of sildenafil. Treatment with sildenafil leads to a decrease in the severity of morphological changes in the structures of the spiral organ and spiral ganglion of rats compared to animals with experimental hearing loss, not treated.

Keywords: sensorineural hearing loss, exposure to noise and vibration, simulation of hearing loss, morphological disorders in the spiral organ, treatment of hearing loss, sildenafil.

1. Постановка проблемы

Проблема сенсоневральной тугоухости (СНТ) и её лечения остаётся одной из наиболее сложных и не решённых в медицине, и сохраняет свою актуальность в современных условиях [1,2]. Между тем, число пациентов с нарушениями слуха, страдающих из-за снижения коммуникаций, работоспособности, ухудшения качества жизни, постоянно растёт. Такая тенденция к росту сохраняется по России и, в частности, по Ростовскому региону [3].

Анализ последних исследований и публикаций. Внутреннее ухо человека можно отнести к обособленным органам: оно расположено в толще височной кости, защищающей его от внешних воздействий, и относится к, так называемым, забарьерным органам, оберегаясь от внутреннего воздействия гаматолабиринтным барьером [4]. Именно поэтому улитка внутреннего уха труднодоступна не только для патологических агентов, но и для многих лекарственных средств, назначаемых при нарушениях её функции, характерных для СНТ. Указанные анатомо-физиологические особенности внутреннего уха и недостаточная результативность при фармакологическом воздействии при патологии спирального органа позволяют считать особо востребованным экспериментальное направление изучения действия лекарственных средств при моделировании тугоухости у животных. Лишь в последние годы это направление стало получать определённое развитие [5,6], преимущественно, в работах зарубежных авторов [7,8,9].

Выделение нерешенных ранее частей общей проблемы. К наиболее сложным вопросам СНТ относятся механизмы поражения внутреннего уха. Универсальным ведущим патологическим звеном в патогенезе заболевания выступает сосудистый фактор, который, несмотря на отсутствие прямого воздействия на субстрат поражения, приводит к апоптозу, дистрофии, гипоксии клеточного массива спирального органа и спирального ганглия [3,10] Именно с этим связана необходимость поиска способов профилактики и лечения СНТ с коррекцией сосудистого звена патогенеза при шумовибрационном воздействии, имеющего место, например, у работников железнодорожного транспорта. С этой целью возможно применение средств с положительным действием на микроциркуляцию. К таким препаратам относится силденафил, который изначально был предложен для регуляции микроциркуляторных расстройств. Фундаментальные исследования на лабораторных животных представляют на сегодняшний день особую актуальность, поскольку определить, какие именно изменения происходят при патологии внутреннего уха и её терапии у человека проблематично из-за его анатомо-физиологических особенностей и труднодоступности для исследований. Изучение патогенеза СНТ при её экспериментальном моделировании у животных и влияние медикаментозного воздействия при этом является сложной и чрезвычайно важной задачей, особенно в условиях, приближающихся к производственным у человека, таких, например, как воздействие шума и вибрации.

Цель исследования. Изучение влияния медикаментозной терапии (силденафилом) на внутреннее ухо крыс при моделировании шумовибрационной тугоухости у лабораторных животных.

Изложение основного материала. В экспериментальном исследовании были использованы 32 животных - белых беспородных половозрелых крыс в возрасте 2-х - 3-х месяцев, массой 180 - 220 граммов. Для моделирования сенсоневральной тугоухости и контроля были отобраны здоровые самцы, которые содержались в виварии, отвечающем необходимым условиям для лабораторных животных, используемых в научноисследовательских работах. Проводимые лабораторные опыты с участием животных соответствовали международными этическим принципам и нормам проведения биомедицинских исследований. Проводили моделирование сенсоневральной тугоухости у белых беспородных крыс, исследовали слуховую функцию животных,

изучали гистологические изменения во внутреннем ухе лабораторных животных при шумовибрационном воздействии и исследовали влияние препарата силденафил на слух и морфологию внутреннего уха.

Выделена контрольная группа животных - группа №1, включающая 6 здоровых белых беспородных крыс, не подвергающихся воздействию раздражителей, а также 3 группы лабораторных животных из 26 особей: группа №2 из 14 особей, подвергающаяся воздействию раздражителей по особой схеме для моделирования тугоухости и группы №3 и №4 по 6 крыс в каждой, которых подвергали воздействию раздражителей и проводили лечение препаратом силденафил, соответственно, одномоментно и после моделирования тугоухости. Силденафил вводили «per os» с питьевой водой (1,25 мг/кг). Распределение групп больных в соответствии с условиями эксперимента представлено в Таблице.

Таблица / Table 1 РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ЖИВОТНЫХ ПО ГРУППАМ И УСЛОВИЯМ ЭКСПЕРИМЕНТА DISTRIBUTION OF ANIMALS BY GROUPS AND EXPERIMENTAL CONDITION

Характеристики групп исследования Features of study groups

Группа №1 (контроль) Grope №1 (control)

Группа Grope №2

Группа Grope №3

Группа Grope №4

Всего животных/ушей Total animals / ears

Количество экспериментальных крыс/ ушей Number of experimental rats

6/ 12

14/ 28

6/ 12

6/ 12

32/ 64

Условия эксперимента/ Conditions experiment's

Здоровые интактные крысы/ Healthy intact rats

Воздействие звука, вибрации, иммобилизации по 15 мин. 10 дней. Забой на 3й, 10-й, 20-й день/ Exposure to sound, vibration, immobilization for 15 min. 10 days Bottom for 3-th, 10-th, 20-th day

Воздействие звука, вибрации, иммобилизации по 15 мин. 10 дней, затем отсроченное лечение 10 дней силденафилом. Забой на 20-й день/ Exposure to sound, vibration, immobilization for 15 minutes 10 days, then delayed treatment 10 days sildenafil. Slaughter on the 20th day

Воздействие звука, вибрации, иммобилизации по 15 мин. 10 дней и одновременно лечение силденафилом. Забой на 10-й день/ Exposure to sound, vibration, immobilization for 15 min. 10 days and at the same time treatment with sildenafil. Slaughter on the 10 th day.

Особенности воздействия по группам/ Features of impact by groups

У всех 32 лабораторных животных (64 уха) проводили оценку слуховой функции: изучали рефлекс Прейера и отоакустическую эмиссию путём регистрации задержанной вызванной отоакустической эмиссии (ЗВОАЭ) и отоакустической эмиссии на частоте продуктов искажения (ОАЭЧПИ) на портативной системе «OtoRead» («Шегасош!», Дания). В период формирования модели тугоухости и в процессе лечения ежедневно наблюдали за изменением рефлекса Прейера. при звуковой стимуляции и за изменением ЗВОАЭ и ОАЭЧПИ по результатам её регистрации.

Животных группы №1 (контрольной) воздействию не подвергали, им проводили определение слуховой функции, а после забоя и выделения височных костей осуществляли гистологическое исследование спирального органа.

Животных группы №2 в течение 10 суток ежедневно 1 раз в день подвергали следующему воздействию: белых беспородных крыс иммобилизировали (иммобилизационное стрессирование), помещая в одноместную тесную клетку, а затем в течение 15 минут проводили акустическое воздействие широкополосным шумом в частотном диапазоне 355-5000 Гц при уровне звука 90 дБ в свободном звуковом поле в соответствии со способом, предложенным Т.В.Золотовой и соавт. [11,12], но дополнительно одновременно подвергали вибрационному воздействию. Вибрационное воздействие проводили, помещая клетку с животным на вибрационный стенд - «Аппарат для встряхиваний АВУ-6С» (Россия). После окончания акустического и вибрационного воздействия иммобилизацию подопытного животного прекращали. Выводили из эксперимента по 6 крыс на 3-й и 10-й дни и по 2 крысы - на 20-й день, предварительно оценивая слуховую функцию.

Животных группы №3 в течение 10 суток ежедневно 1 раз в день подвергали такому же воздействию, как в группе №2, а затем проводили лечение силденафилом 10 дней, после чего выводили крыс их эксперимента.

Животных группы №4 в течение 10 суток ежедневно 1 раз в день подвергали такому же воздействию, как в группе №2, и одновременно проводили лечение силденафилом 10 дней, после чего выводили крыс их эксперимента.

После окончания воздействия в соответствии с условиями в представленных группах животных под наркозом производили забой выведенных из эксперимента крыс в соответствии с принципами Хельсинской декларации.

Височные кости крыс выделяли и обрабатывали по общепринятой методике В.Ф.Аничина [13], затем готовили срезы улиток внутреннего уха, окрашивали гематоксилином- эозином и проводили гистологическое исследование. Описывали состояние структур спирального органа при его оценке методом световой микроскопии. В исследовании оценивались результаты межгрупповых различий и внутригрупповая динамика.

Статистический анализ проводили с использованием непараметрических критериев, используемых для малых выборок, независящих от характера распределения - точного критерия Фишера, критерия Вилкоксона. Использовали пакет прикладных программ STASTISTICA 10,0 (StatSoft Inc., США), «Microsoft Excel».

По результатам проведенного исследования по группам лабораторных животных получены следующие данные.

Результаты исследования слуховой функции. У всех животных, включая контрольную группу 1, а также группы № 1, 2, 3, 4, 5 до начала воздействия раздражителей барабанные перепонки при отомикроскопическом исследовании были без воспалительных изменений, серые, бледные и слуховая функция соответствовала норме: зафиксирован живой, устойчивый рефлекс Прейера, а при исследовании отоакустической эмиссии (ОАЭЧПИ, ЗВОАЭ) нормальный слух имел место у всех 32 обследованных крыс (64 уха), то есть в 100% случаев.

В группе №1 (контрольной) при исследовании слуха у интактных белых беспородных крыс зафиксирован «живой» рефлекс Прейера, а результат регистрации отоакустической эмиссии (ЗВОАЭ, ОАЭЧПИ) был положительным («тест прошел») у всех крыс. В группе №2 результаты исследования слуха на 3 сутки от начала воздействия раздражителей (шумового и вибрационного на фоне иммобилизации) свидетельствовали об отсутствии отклонений слуховой функции от контроля у 6 животных; 2 из них были выведены из эксперимента для гистологического исследования височных костей. На 10 сутки у всех 8 оставшихся крыс имел место отрицательный рефлекс Прейера и отрицательный результат регистрации ЗВОАЭ и ОАЭЧПИ («тест не прошёл»), что объективно подтверждало факт тугоухости; 2 особи были выведены из эксперимента. На 20 сутки у оставшихся 2-х лабораторных животных рефлекс Прейера не вызывался и результат регистрации ЗВОАЭ и ОАЭЧПИ был отрицательным, что подтверждало формирование стойкой тугоухости у этих крыс, то есть в целом в группе№2 к окончанию комплексного шумового, вибрационного и иммобилизационного воздействия тугоухость сформировалась у всех (100%) подопытных животных.

В группе №3 у всех подопытных животных на 10 сутки после ежедневного шумового и вибрационного воздействия на фоне иммобилизации, то есть по окончании моделирования тугоухости, зафиксировано угасание рефлекса Прейера, а также отрицательный результат при регистрации ЗВОАЭ и ОАЭЧПИ. После отсроченного, «позднего лечения» лечения крыс силденафилом в течение 10 дней (с 10-х по 20е сутки) показатели исследования слуха свидетельствовали об отрицательных результатах отсроченного, «позднего лечения» у большинства крыс - 83,3%, лишь у 1 крысы слух улучшился - 16,7%. После окончания воздействия и

последующего лечения крыс выводили из эксперимента. В группе №4 животным на фоне шумового, вибрационного воздействия и иммобилизации одновременно проводили лечение силденафилом в течение 10 дней. В результате такого воздействия с одновременным, превентивным лечением слуховая функция оказалась нарушенной у 2-х крыс, на что указывало угасание рефлекса Прейера и результат «тест не прошел» при исследовании ЗВОАЭ и ОАЭЧПИ, что составило 33,3% случаев. У других 4-х животных, составивших 66,7% случаев, показатели исследования слуха свидетельствовали о положительных результатах «раннего лечения» и соответствовали контролю. После окончания воздействия и лечения крыс выводили из эксперимента.

Гистологическое исследование улиток височных костей белых беспородных крыс. В группе №1 - контрольной при гистологическом исследовании подготовленных препаратов улитки спиральный орган представлен внутренними (ВВК) и наружными волосковыми (НВК), а также опорными клетками, расположенными по разные стороны туннеля, сформированного опорными клетками-столбами. На апикальной поверхности волосковых клеток имеются стереоцилии, контактирующие с покровной мембраной. В отличие от опорных фаланговых клеток волосковые клетки имеют более мелкие ядра, в которых хорошо просматривается мелкозернистый хроматин и ядрышки. Сосудистая полоска занимает около 2/3 боковой стенки. В спиральном ганглии биполярные нейроны имеют крупное светлое центрально расположенное ядро с мелкими глыбками хроматина и четким ядрышком.

Таким образом, в группе №1 гистологическое строение органа слуха животных, его структурных составляющих, морфофункциональное состояние эпителиальных, соединительнотканных и нейрональных компонентов соответствуют норме и могут составить группу сравнения. У всех лабораторных животных, подвергшихся действию раздражителей, при гистологическом исследовании препаратов улиток височных костей отмечены патологические изменения в структурах спирального органа и в спиральном ганглии различной степени выраженности в зависимости от условий моделирования. В группе №2 лабораторных животных гистологические СНТ путем ежедневного воздействия шума и вибрации на фоне иммобилизации в течение 10 дней показали, что отдельные ВВК и большее количество НВК отличается наличием ранних признаков апоптоза: очаги маргинации хроматина, выраженный рельеф кариолеммы, гиперхроматоз ядер. Вдоль всей улитки встречаются очаги запустения, где единичные НВК отсутствуют. Сосудистая полоска несколько отечна. Сосуды неравномерно полнокровны, чаще расширены. Некоторые опорные клетки, эпителиоциты спиральной связки слущены и находятся в состоянии цитолиза с формированием оксифильных шаровидных масс. Спиральная связка резко отечна на большем протяжении, обнаруживаются участки, не содержащие клеток. Кроме того, имеет место, умеренная инфильтрация мононуклеарными лейкоцитами (Рисунок 1).

Рисунок 1. Гистологические изменения в спиральном органе белых беспородных крыс группы №2. Дистрофические изменения фибробластов спиральной связки. Отек. Инфильтрация мононуклеарными лейкоцитами. Окраска гематоксилином - эозином. Увеличение 1000

Figure 1. Histological changes in the spiral organ of white outbred rats of group 2. Dystrophic changes in fibroblasts of the spiral ligament. Edema. Infiltration by mononuclear leukocytes. Stained with hematoxilin

Однако наиболее тяжелые изменения отмечаются в спиральном ганглии (Рисунок 2).

Рисунок 2 Гистологические изменения в спиральном ганглии белых беспородных крыс группы №2. Дистрофические изменения и апоптоз нейронов спирального ганглия. Увеличение 1000. Figure 2. Histological changes in the spiral ganglia of white outbred rats of group 2. Degenerative changes and apoptosis of neurons in the spiral ganglion. Stained with hematoxilin-eosin. Increase 1000

Окраска гематоксилином-эозином, отличаются вакуолизированной цитоплазмой и резко гиперхромными ядрами. Встречаются клетки с фрагментацией клеточной оболочки, и только единичные нейроны имеют типичные светлые ядра с глыбками хроматина и ядрышками.

Таким образом, проведенные гистологические исследования спирального органа в группе №2 животных после моделирования СНТ свидетельствуют об изменениях морфологических показателей относительно группы 1 контроля с признаками повреждения спирального органа, являющимися морфологической основой сенсоневральной тугоухости. Основными выявленными нарушениями при этом являются: выраженные дистрофические изменения нейронов спирального ганглия и гибель их по типу апоптоза; на фоне сохранившихся, но в ряде случаев с ранними признаками апоптоза ВВК определяются одиночные бреши с отсутствием НВК; выраженные слущивание и лизис эпителиоцитов спирального выступа и спиральной связки; дистрофические изменения и гибель фибробластов в спиральной связке, увеличение площади бесклеточных пространств в ней и усиление мононуклеарной лейкоцитарной инфильтрации.

Влияние силденафила на внутреннее ухо белых беспородных крыс при экспериментальном моделировании тугоухости. При гистологическом исследовании в группе №3 лабораторных животных с отсроченным использованием per os силденафила после завершения моделирования СНТ (путем озвучивания и вибрации на фоне иммобилизации) выявлены следующие изменения: ВВК сохранны, не изменены, НВК сохранены, некоторые имеют ранние признаки апоптоза, такие как подчеркнутая четкость кариолеммы, маргинация хроматина, гиперхроматоз ядер на всем протяжении спирального органа. Межклеточные пространства между фаланговыми клетками несколько расширены. Опорные клетки Гензена, наружные поддерживающие клетки Клаудиуса

Покровная мембрана имеет обычное строение. Опорные и поддерживающие клетки не изменены, но межклеточные пространства между наружными фаланговыми клетками несколько расширены. В дистрофически изменены, вакуолизированы, некоторые в состоянии цитолиза. Сосудистая полоска без особенностей. Спиральная связка очагово отечна с уменьшением клеточности и с небольшой инфильтрацией мононуклеарными лейкоцитами. Эпителий спирального выступа и спиральной связки в состоянии лизиса. Нейроны спирального ганглия со слабо выраженным перицеллюлярным отеком, некоторые - набухшие, дистрофически изменены с вакуолизированной цитоплазмой и гиперхромным ядром. Однако в сравнении с группой №2 гораздо чаще встречаются нейроны с типичными светлыми ядрами и ядрышками. Просвет вестибулярной лестницы и улиткового канала свободны. В просвете барабанной лестницы встречаются эритроциты. Следовательно, отсроченное применение силденафила после шумовибрационного воздействия, хотя и не приводит к выраженному функциональному эффекту в отношении слуха, но уменьшает выраженность морфологических изменений в спиральном органе, сосудистой полоске, спиральном ганглии. В группе №4 лабораторных животных при моделировании СНТ с использованием шумового, вибрационного воздействия на фоне иммобилизации с одновременным введением животным «per os» силденафила в течение 10 дней получены следующие результаты: ВВК (внутренние

волосковые клетки) не изменены, НВК (наружные волосковые клетки) на протяжении всего улиткового канала сохранены, некоторые имеют признаки раннего апоптоза с подчеркнутым рельефом кариолеммы, иногда - маргинацией хроматина или гиперхромностью ядер (Рисунок 3).

Рисунок 3. Гистологические изменения в спиральном органе белых беспородных крыс группы №4 (одновременное применение силденафила). Сохранность спирального органа и волосковых клеток. Окраска гематоксилином - эозином. Увеличение - 100. Figure 3. - Histological changes in the spiral organ of white outbred rats of group 4 (simultaneous use of sildenafil). Preservation of the spiral organ and hair cells. Stained with hematoxilin-eosin. Increase-100

В сосудистой полоске отмечается слабо выраженный межклеточный отек. Сосуды расширены. Спиральная связка очагово отечна с некоторым уменьшением клеточности при слабо выраженных дистрофических изменениях отдельных фибробластов. Сосуды расширены. Отмечается слущивание и цитолиз эпителия спиральной связки и спирального выступа. В спиральном ганглии определяется небольшой отек просвете туннеля определяются нервные волокна.

Просвет вестибулярной лестницы чаще свободен. В улитковом канале в некоторых случаях встречаются небольшие скопления сетчатых эозинофильных масс. В барабанной лестнице определяются одиночные или небольшие скопления эритроцитов. Представленные данные свидетельствуют о менее выраженных альтерациях спирального органа при одновременном применении силденафила в сравнении с отсроченным его использованием.

Таким образом, проведенные гистологические исследования показали следующее:

• воздействие с применением шума и вибрации на фоне иммобилизационного стрессирования по предлагаемой схеме вызывает у лабораторных животных СНТ, что наряду с физиологическими тестами документировано гистологическими показателями: изменения волосковых клеток, особенно НВК, преимущественно по пути апоптоза, выраженные повреждения нейронов спирального ганглия (значительный перицеллюлярный отек, набухание нейронов, апоптоз);

• наличие ранних апоптотических признаков в НВК, иногда - выпадения единичных НВК;

• нарушение микроциркуляции с формированием сладж синдрома, нарушением проницаемости сосудистой стенки, развитием гипоксии и отеков;

• сладж, отек интерстиция, дистрофия фибробластов спиральной связки, слущивание, цитолиз поддерживающих клеток и эпителиоцитов спиральной связки;

• при развитии СНТ у крыс отмечена эффективность силденафила. стромы, набухание отдельных нейронов с вакуолизацией цитоплазмы и гиперхромностью ядер некоторых из них. Однако большинство нейронов имеют характерные для нервной ткани светлые ядра с небольшими глыбками хроматина и ядрышками. (Рисунок 4).

Рисунок 4 Гистологические изменения в спиральном ганглии белых беспородных крыс группы №4 (одновременное применение силденафила). Удовлетворительная сохранность нейронов спирального ганглия при небольшом перицеллюлярном отеке и некоторой гиперхромности отдельных ядер. Окраска гематоксилином -эозином. Увеличение 400. Figure 4. Histological changes in the spiral ganglia of white outbred rats of group 4 (simultaneous use of sildenafil). Satisfactory preservation of the neurons of the spiral ganglion with a small pericellular edema and some hyperchromicity of individual nuclei. Stained with hematoxilin-eosin. Increase 400

Улучшение микроциркуляторных показателей уменьшает выраженность патологических изменений в спиральном органе и степень поражения НВК и нейронов спирального ганглия в том числе, что позволит рекомендовать их использование для лечебно-профилактических целей.

Проведенное исследование доказывает эффективность предложенного способа моделирования сенсоневральной тугоухости у животных - белых беспородных крыс, основанного на комплексном воздействии шумового и вибрационного факторов на фоне иммобилизационного стрессирования по использованной схеме и параметрам (группа №2). Факт наступления тугоухости доказан двумя достоверными методами исследований: функциональным при регистрации различных видов отоакустической эмиссии и гистологическим при исследовании препаратов внутреннего уха височных костей животных с констатацией нарушений клеточных и мембранных структур спирального органа, достоверно подтверждающих сенсоневральные нарушения в 100 % случаев. Морфологические данные, полученные при изучении препаратов улиток внутреннего уха после примененных условий воздействия, отличались признаками микроциркуляторных расстройств, выраженностью отека, наличием сладжа, нарушенным морфофункциональным состоянием различных тканей и клеток спирального органа, особенно, нейронов спирального ганглия, что соответствует признакам вторичной транссинаптической нейродегенерации. Клеточные повреждения при применённых условиях шумовибрационного воздействия чаще наблюдались в виде апоптических изменений, подобно тому, как это происходит при моделировании ототоксической СНТ по данным ряда исследований [3,14,15]. Что касается полученных нами нетипичных данных о более выраженных морологических нарушениях спирального ганглия, а не волосковых клеток, то они также согласуются с результатами исследований некоторых других авторов о приоритетном поражении нейронов спирального ганглия [16]. Учитывая выявленные механизмы патогенеза СНТ, такие как апоптические изменения клеток, сосудистые нарушения в спиральном органе, поиск лекарственных препаратов для лечения СНТ может быть направлен именно на коррекцию этих звеньев при акустическом и вибрационном повреждении внутреннего уха человека. Апробация новых препаратов на доклиническом этапе может быть проведена с использованием предложенного способа моделирования СНТ у белых беспородных крыс. Используя препарат силденафил в настоящем исследовании, мы рассчитывали на его сосудистое действие. Лишь в единичных зарубежных исследованиях имеются данные об использовании силденафила при акустической травме и его влиянии на внутреннее ухо лабораторных мышей [17]. Проведенные гистологические исследования показали, что использование силденафила после моделирования СНТ несколько уменьшает выраженность патологических изменений в спиральном органе, уменьшая степень поражения НВК и нейронов, и, следовательно, оказывая некоторое протективное воздействие на различные структуры спирального органа, в том числе нейроны и НВК. Соответственно для предотвращения дальнейшего прогрессирования СНТ силденафил может быть использован с лечебно-профилактической целью. При этом гистологически отмечается: уменьшение отечности тканей спирального органа животных как показатель улучшенной микроциркуляции; лучшая сохранность НВК и нейронов с уменьшением частоты и степени выраженности апоптоза этих клеток на всем протяжении спирального органа; снижение выраженности дистрофических изменений опорных клеток и фибробластов спиральной связки спирального органа.

Более обнадёживает превентивное использование силденафила одновременно с моделированием шумовибрационной тугоухости у животных. Проведенные гистологические исследования показали, что одновременное с моделированием СНТ использование силденафила предупреждает развитие или уменьшает выраженность повреждения различных структур спирального органа, в том числе, хотя и в несколько меньшей степени, и нейронов спирального ганглия, что связано с более выраженным повреждением нейронов при моделировании. Этот фрагмент наших исследований доказывает некоторую эффективность сосудорасширяющего средства силденафил при развитии СНТ, протективные свойства которого можно связать с уменьшением микроциркуляторных расстройств: выраженностью отеков, наличием сладжа, морфофункциональным состоянием различных тканей и клеток спирального органа, но особенно нейронов спирального ганглия, как более повреждаемых и поэтому менее сохранившихся. Патология последних в нашем эксперименте при моделировании СНТ соответствует вторичной транссинаптической нейродегенерации. Анализ представленных данных позволяет отметить, наряду с обнаруженными нарушениями нейроэпителиальных клеток спирального органа, особую уязвимость нейронов спирального ганглия при предложенном способе моделирования СНТ и их важную роль в патогенезе этого заболевания; подчеркнуть свойство силденафила, препарата с сосудорасширяющим эффектом, как протектора в отношении различных структур спирального органа, в том числе и нейронов спирального ганглия, и возможность рекомендовать силденафил для использования в качестве лечебнопрофилактического средства при сверхпороговых или пограничных звуковых и вибрационных воздействиях на орган слуха.

Выводы из данного исследования и перспективы дальнейшего развития в этом направлении

Шумовибрационное воздействие на фоне иммобилизации вызывает у белых беспородных крыс в хроническом эксперименте изменения, характерные для сенсоневральной тугоухости, что подтверждается функциональными и морфологическими методиками.

Морфологические изменения во внутреннем ухе у лабораторных животных после моделирования шумовибрационного воздействия на фоне иммобилизации характеризуются признаками нарушения микроциркуляции в спиральном органе и спиральном ганглии, наличием кровоизлияний, отёка, дистрофическими нарушениями и признаками апоптоза.

Медикаментозная терапия силденафилом оказалась эффективной при его использовании у лабораторных крыс, подвергшихся действию шумовибрационного раздражителя в условиях иммобилизации, особенно, при одновременном с моделированием применением силденафила. Силденафил, как средство с сосудистым эффектом, проявляет в эксперименте при шумовибрационном воздействии на крыс свойства протектора в отношении различных структур спирального органа, в том числе волосковых клеток и нейронов спирального ганглия, приводя к уменьшению выраженности морфологических нарушений в них.

Полученные результаты позволяют надеяться на успешное применение силденафила во врачебной практике после проведения клинических исследований в качестве лечебнопрофилактического средства при звуковых и вибрационных воздействиях на орган слуха с целью предотвращения возникновения сенсоневральной тугоухости или её прогрессирования.

Список литературы

1. Пальчун В.Т. Клинические особенности острой нейросенсорной тугоухости, сопровождающейся головокружением / В.Т. Пальчун, А.Л. Гусева, Ю.В. Левина, С.Д. Чистов//Вестник оториноларингологии. - 2016.- №1. - С. 8-12. doi: 10.17116 /otorino 20168118-12. Андреева К. П. Основы менеджмента. Практическое обозрение терминологии / К. П. Андреева//Менеджмент и Управление. - 2014. - уч.- К-234 с.

2. Wu C.M. Recurrens of idiopatic sudden sensorineural hearing loss: a retrospective cohort study/C.M. Wu//Otol. Neurotol. - 2014 - 35(10): 17361741.

3. Золотова Т.В. Сенсоневральная тугоухость/ Т.В. Золотова - Ростов-на-Дону: ЗАО «Книга» - 2013. - 544 с.

4. Маерович И.М. Гематолабиринтный барьер / И.М. Маерович - Л.: Медицина. - 1973. - 126 с.

5. Кудеева Я.Ю. Токсическое поражение внутреннего уха под воздействием цисплатина. Экспериментальное исследование / Я.Ю. Кудеева,

Е.В. Байбакова, М.А. Чугунова, Н.В. Резакова//Российская оториноларингология. -2015- №2(75). - С. 43-47.

6. Паневин А.А. Увеличение отопротективного эффекта гидрокортизона в составе суспензии из наночастиц повидона / А.А. Паневин, С.Г. Журавский// Материалы XIX съезда оториноларингологов России. - СПб: 2016.- С. 328.

7. Beurg M. The mechanism of pneumolysin- induced cochlear hair cell death in the rat / M.Beurg, A.Hafidi, L. Skinner // Physiol. 2005 - 568(1) - Р. 211227.

8. Wong A.C.Y. Noise-induced hearing loss in the 21st century: A research and translational update / A.C.Y. Wong, K.E. Froud, Y.S.Y. Hsieh // World Journal of Otorhinolaryngology. - 2013. - 3(3). - Р. 5870.

9. Mьller M., Tisch M., Maier H. Lцwenheim Begrenzung chronischer Hцrverluste durch locale Glukokortikoidgabe Meerschweinchen mit akutem Lдrmtrauma / M. Mьller, M.Tisch, H. Maier//HN0. -2006- 64. - 831-840.

10. Овсянников В.Г. Патологические изменения во внутреннем ухе при экспериментальном моделировании сенсоневральной тугоухости у животных / В.Г. Овсянников, Т.В. Золотова, Е.В. Лобзина, Н.В. Дубинская // Кубанский научный медицинский вестник. - 2018. - 25(3). - С.82-87.

11. Способ моделирования сенсоневральной тугоухости. Патент № 2627155, ФГбОу ВО РостГМУ Минздрава России; заявка: 2016133837, 17.08.2016; публикация 03.08.2017. Бюл. № 22.

12. Золотова Т.В. Моделирование сенсоневральной тугоухости в эксперименте / Т.В. Золотова, В.Г. Овсянников, Н.В. Дубинская, Е.В. Лобзина // Российская оториноларингология. -2018- №2. - С.35-38.

13. Аничин В.Ф. Методы гистологической обработки ушного лабиринта / В.Ф. Аничин // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. - 1978. - Т.75 - №8. - С.77-83.

14. Золотова Т.В. Экспериментальная сенсоневральная тугоухость ототоксического генеза у животных: апоптический путь гибели клеток спирального органа / Т.В.Золотова, С.Н. Панченко // Вестник оториноларингологии. - 2010.№4. - С.29-32.

Страница:


Подобные документы

  • Артериальная гипертензия

    Современные аспекты патогенеза и клинического течения эссенциальной артериальной гипертензии, влияние возрастных эндокринных нарушений на клиническое течение болезни у женщин. Особенности современной медикаментозной терапии и медицинской реабилитации.

    дипломная работа [2,6 M], добавлен 31.03.2018

  • Заболевания и аномалия развития внутреннего уха

    Характеристика распространенных заболеваний и аномалий развития внутреннего уха. Проявление болезни Меньера и отосклероза. Описание кондуктивной и нейросенсорной тугоухости. Опыт Ринне, опыт Вебера и аудиограмма больных с нейросенсорной тугоухостью.

    контрольная работа [793,4 K], добавлен 03.04.2011

  • Профилактика и предупреждение нейрон сенсорной тугоухости для работников горного предприятия в условиях севера

    Профессиональная нейронная тугоухость. Дегенеративные изменения в вестибулярном анализаторе из-за действия шума и вибрации. Клиническая картина профессиональной тугоухости. Суть болезни Меньера. Анализ акуметрических и аудиологических показателей.

    курсовая работа [31,7 K], добавлен 07.12.2013

  • Хроническая обструктивная болезнь легких

    Изучение патогенеза хронической обструктивной болезни легких: воспалительного процесса, дисбаланса протеиназ и антипротеиназ в легких, окислительного стресса. Описания медикаментозной терапии, комбинированного лечения ингаляционными глюкокортикоидами.

    реферат [53,6 K], добавлен 23.06.2011

  • Особенности сестринского ухода за пациентами с сахарным диабетом

    Этиология, патогенез, стадии развития и симптомы заболевания. Методы лечения, профилактическая реабилитация, осложнения и неотложные состояния больных сахарным диабетом. Основные принципы дието- и медикаментозной терапии. Польза физической нагрузки.

    курсовая работа [637,3 K], добавлен 26.10.2014

  • Нейросенсорная тугоухость

    Этиология нейросенсорной тугоухости - формы снижения слуха, при которой поражается какой-либо из участков звуковоспринимающего отдела слухового анализатора. Степени тугоухости и глухота по уровню снижения слуха. Камертональные методы исследования.

    презентация [1,5 M], добавлен 15.04.2014

  • Влияние занятий лечебной гимнастикой на функциональное состояние пациентов с бронхиальной астмой

    Этиология и патогенез бронхиальной астмы. Особенности системы внешнего дыхания у лиц с бронхиальной астмой, методы медикаментозной и немедикаментозной коррекции. Методика лечебной гимнастики при бронхиальной астме, ее влияние на состояние здоровья.

    курсовая работа [50,5 K], добавлен 10.06.2014

  • Аллергические заболевания и беременность

    Рассмотрение особенностей применения элиминационных мероприятий и медикаментозной терапии при лечении бронхиальной астмы у беременных. Ознакомление с симптоматикой и методами лечения ринита, крапивницы, ангионевротического отека, анафилаксии у беременных.

    реферат [27,5 K], добавлен 13.05.2010

  • Гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь

    Этиология, патогенез и симптомы гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. Факторы, предрасполагающие к данному заболеванию. Основные причины возникновения гастроэзофагеального рефлюкса. Клинические стадии и осложнения. Принципы медикаментозной терапии.

    презентация [17,8 M], добавлен 05.01.2015

  • Тактика лечения гестоза

    Сущность медикаментозной терапии гестоза, включающей создание лечебно-охранительного режима. Назначение медикаментозных препаратов в зависимости от степени тяжести заболевания (валериана, реланиум, дроперидол). Показания к оперативному родоразрешению.

    реферат [15,1 K], добавлен 18.12.2011

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.

© 2000 — 2023, ООО «Олбест» Все права защищены