Порівняльна характеристика видового складу порожнини піхви жінок із безпліддям I та II типів

Размещено на http://www.allbest.ru/

Вищий державний навчальний заклад України «Буковинський державний медичний університет»

Порівняльна характеристика видового складу порожнини піхви жінок із безпліддям I та II типів

В.В. Бендас, Н.Д. Яковичук, В.Д. Мойсюк, С.В. Мойсюк

Чернівці, Україна

Резюме

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВОГО СОСТАВА ПОЛОСТИ ВЛАГАЛИЩА ЖЕНЩИН С БЕСПЛОДИЕМ I И II ТИПОВ

В. В. Бендас, Н.Д. Яковичук,

В.Д. Мойсюк, С.В. Мойсюк

Высшее государственное учебное заведение Украины «Буковинский государственный медицинский университет»

(г. Черновцы,Украина)

Вступление. Бесплодие - это не только медицинская, но и социальная проблема, которая стоит на первом месте в условиях экономической кризы, понижения рождаемости и высокого уровня общей смертности. В мире процент бесплодных пар составляет от 8-12 %, в Украине - 15-18 %, то есть каждая 4-5 пара не в состоянии реализовать свои планы, чтобы иметь детей природным путем. Состав микробиоты вульвовагинального содержимого женщин с бесплодием I и II типа зависит от множества экзогенных и эндогенных причин, и в основном этиологическими агентами могут быть как патогенные, так и условно-патогенные аэробные (S. aureus, S. epidermitis, N. Gonorrhoae, E. Coli, C. albicans) и анаэробные микроорганизмы.

Материалы и методы. Всего было обследовано 89 женщин репродуктивного возраста с бесплодием I типа, средний возраст которых составил 27,00 ± 2,37 лет.

Также проведено бактериологическое и микологическое обследование вульвовагинального содержимого 67 женщин с бесплодием II типа возрастом от 18 до 34 лет (средний возраст 26,00 ± 1,12) лет.

У всех женщин для бактериологического и микологического обследования в стерильных условиях производили забор вульвовагинального содержимого в стерильные центрифужные пробирки. К исследуемому материалу додавали десятикратный объем стерильного физиологического раствора натрию хлорида, при этом получали разведения 1:10 (10-1). Из полученной смеси готовили титрационный ряд от 10-2 до 10-7, из которого производили высев 0,01 мл на сектора оптимальных питательных сред для каждого вида, равномерно распределяя по поверхности твердых сред или в толще полужидких сред.

Факультативные анаэробные и аэробные бактерии выращивали в термостате при температуре 37 °С, 1824 часа, дрожжеподобные грибы рода Саndida - при температуре 30 °С, 48-72 часа. Облигатные анаэробные бактерии выращивали в стационарном анаэростате (СО2 incubator Т-125 Medicin - Швеция) на протяжении 5-7 дней, иногда до 14 суток. Идентификацию выделенных видов производили по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим свойствам, при необходимости определяли признаки патогенности и антигенную структуру.

Результат. Нами выявлено, что у женщин с бесплодием I типа S. aureus был выделен у 56 (62,9 %) обследуемых, S. epidermidis - у 11 (12,3 %) обследуемых,

N. gonorrhoeae - у 8 (8,9 %) обследуемых, E. соН - 10 (11,4 %) обследуемых, C.albicans - у 66 (74,1 %) обследуемых, Lactobacillus - у 28 (31,4 %) обследуемых, Bifidobacterium - у 13 (14,6 %) обследуемых,

Peptostreptococcus - у 23 (25,8 %) обследуемых,

Propionibacterium - у 3 (3,3 %) обследуемых, T. vaginalis - у 52 (58,4 %) обследуемых.

В вульвовагинальном содержимом женщин с бесплодием II типа преобладают условно-патогенные дрожжеподобные грибы рода Саndida, золотистый стафилококк, вагинальные трихомонады, пептострептокок- ки и энтеробактерии.

Выводы. Одной из причин развития бесплодия I и II типов есть колонизация вульвовагинального содержимого условно-патогенными микроорганизмами рода Саndida, бактериями рода Staphylococcus, вагинальными трихомонадами, пептострептококка- ми, энтеробактериями, гонококком, бактероидами и другими микроорганизмами. У женщин с бесплодием I и II типов отмечается колонизация представителями патогенных и условно-патогенных аэробных и анаэробных микроорганизмов, как в монокультуре, так и в ассоциациях с двумя, тремя, и больше видами. В вульвовагинальном содержимом женщин с бесплодием I типа аутохтонные облигатные анаэробные микроорганизмы родов Lactobacillus и Bifidobacterium выделяются у 46,0 %, а в женщин с бесплодием II типа только у 28,2 % женщин (Р < 0,05), что обуславливает уменьшение контаминации и колонизации биотопа в 2,27 раза энтеробактериями (E. Coli, K. pneumoniae) у женщин с первичным бесплодием. В этих женщин увеличивается колонизация вульвовагинального содержимого дрожжеподобными грибами рода Cаndida на (10,43 %), простейшими (T. vaginalis) на 26,41 % и микроорганизмами рода Peptostreptococcus - на 91,96 %. Разница в обнаружении других условно-патогенных бактерий (S. aureus, N. gonorrhoeae и др.) незначительная (Р > 0,05).

Ключевые слова: микробиота; бесплодие I типа; бесплодие II типа; вульвовагинальное содержимое.

Summary

COPMPERATIVE CHARECTERISTICS OF SPECIES COMPOSITION OF VAGINAL CAVITY OF WOMEN WITH INFERTILITY OF TYPE I AND II

V. V. Bendas, N.D. Yakovychuk,

V.D. Moysyuk, S. V. Moysyuk

Higher educational establishment of Ukraine "Bukovinian State Medical University"

(Chernivtsi, Ukraine)

Introduction. The problem of infertility is not only medical but also social one that comes to the fore in times of economic crisis, reduced fertility and a high level of total mortality.. The world percentage of infertile couples is 8-29%, in Ukraine - 15-18%, or each 4-5 pair is unable to realize their plans to have children naturally. The composition of the microbiota of vulvovaginal content in women with infertility of types I and II depends on many exogenous and endogenous factors, mainly etiological agents can be as pathogenic, and so opportunistic aerobic (S.aureus, S.epidermidis, N.gonorrhoae, E. coli, C.albicans) and anaerobic microorganisms. The article compared the species composition of the microbial vulvovaginal content of women with infertility types I and II, which may be involved in the formation of certain dysbiotic disorders.

Materials and methods. There were examined 89 women of reproductive age with type I of infertility.

The average age was 27.00 ± 2,37 years. Also there was conducted bacteriological and mycological examination of vulvovaginal content of 67 women with infertility of type II aged from 18 to 34 years (average age - 26,00 ± 1,12 g.).

For bacteriological and mycological examination in all women it was taken vaginal content in sterile test tubes in sterile conditions. It was added tenfold volume of sterile isotonic sodium chloride solution to the material in order to get 1:10 (10-¹) dilution. On a base of the resulting mixture there was prepared titration series (10-2 to 10-7), from which it was seeded 0.01 ml to sectors of the optimal culture media fer each taxon evenly distributing on the surface of solid media or semisolid media.

Facultative anaerobic and aerobic bacteria were grown in a thermostate (temperature - 37 °C, 18-24 hours, yeast-like fungi of the genus Candida - 30 °C). Obligate anaerobic bacteria were grown in a stationary anaerostate (CO2 incubator T-125 Medicin - Sweden) for 5-7 days, sometimes up to 14 days. Identification of selected taxons was conducted by morphological, tinctorial, cultural, biochemical properties, according to necessity there were determined signs of pathogenicity and antigenic structure.

Results. We found that in women with infertility of type I

S. aureus was isolated in 56 (62,9 %) patients, S.epidermidis - in

11 (12,3 %) patients, N.gonorrhoeae - in 8 (8,9 %) patients, E.coli - in 10 (11,4 %) patients, C.albicans - 66 (74,1 %) patients, Lactobacillus - in 28 (31,4 %) patients, Bifidobacterium - in 13 (14,6 %) patients, Peptostreptococcus - in 23 (25,8%) patients, Propionibacterium - in 3 (3,3 %) patients,

T. vaginalis - in 52 (58,4 %) patients.

In vulvovaginal content of women with infertility of type II there dominated conditionally pathogenic yeast-like fungi of the genus Candida, Staphylococcus aureus, vaginal Trichomonas, Peptostreptococci and Enterobacteria.

Conclusions. One of the causative agents development of infertility is a colonization of vulvovaginal content by opportunistic pathogens of genus Candida, bacteria of the genus Staphylococcus, vaginal Trichomonas, Peptostreptococci, Enterobacteria, N. gonococcus, Bacteroides and other microorganisms as well as their associations. In the vulvaginal content of women with type I infertility, autochthonous obligate anaerobic microorganisms of the genera Lactobacillus and Bifidobacterium are isolated in 46.0% of cases, and in women with type II infertility only in 28.2% of women (P <0.05), which causes a decrease in contamination and colonization of the biotope by 2.27 times by enterobacteria (E. coli,

K. pneumoniae) in women with primary infertility. These women has the colonization of vulvovaginal contents by yeast-like fungi of the genus Candida increases (by 10.43%), protozoa (T. vaginalis) by 26.41% and microorganisms of the genus Peptostreptococcus - by 91.96%. The difference in the detection of other opportunistic bacteria (S. aureus,

N. gonorrhoeae, etc.) is insignificant (P> 0.05).

Keywords: microbiota; infertility of type I; infertility of type II vulvovaginal content.

Вступ

Актуальність проблеми непліддя подружніх пар на сьогодні зберігається, про що свідчать багато публікацій в медичній періодиці [1, 2, 3]. Проблема безпліддя є не тільки медичною, але й соціальною проблемою, яка виходить на перший план за умов економічної кризи, зниження народжуваності та високого рівня загальної смертності. У світі відсоток безплідних пар складає 8-29 %, в Україні - 15-18 %, тобто кожна 4-5 пара не в змозі реалізувати свої плани, щоб мати дітей природним шляхом [2]. Якщо ще декілька років тому вважалося, що частота жіночого безпліддя суттєво переважає над чоловічим, то на сьогодні їх частки в структурі безплідного шлюбу практично рівні. Переважно підвищений інтерес до стану мікробіоти пов'язаний зі зростанням кількості хворих на гінекологічні захворювання та кількості неплідних шлюбних пар

У більшості публікацій останніх десятиліть спостерігається тенденція зміни збудників захворювань репродуктивної системи жінки. Так, у 40-50 роки ХХ століття провідне місце займали стрептококи (31,4 %), у 60-70 роки - стафілококи (54,5 %). З 80-х років провідну роль стали відігравати збудники інфекцій, що передаються статевим шляхом, а також асоціації грамнегативних та грампозитивних аеробних та анаеробних мікроорганізмів [4, 5]. Склад мікробіоти вульвовагінального вмісту жінок з непліддям I та II типів залежить від безлічі екзогенних та ендогенних чинників, і в основному етіологічними агентами можуть бути як патогенні, так й умовно-патогенні аеробні (S.aureus, S.epideimidis, N.gonorrhoae, E.coli, C.albicans) та анаеробні мікроорганізми. Бактерії, які беруть участь у формуванні екологічного бар'єру і забезпечують тим самим резистентність вагінально- го біотопу за рахунок здатності до кислотоутворення (Lactobacillus, Bifidobacterium, Propionibacterium), найчастіше виділяють у складі асоціантів. Разом з лактобацилами вони відіграють певну роль для підтримки нормобіоти та оптимізації фізіологічних функцій. Часто вказується на асоціацію декількох мікроорганізмів. До складу нормального вульвовагі- нального вмісту входять різноманітні анаеробні або аеробні грампозитивні і грамнегативні мікроорганізми, сумарний титр яких складає 108 - 1012 КУО/ мл. Серед них факультативно-анаеробні бактерії зустрічаються в концентрації 105 - 109 КУО/мл [6, 7].

При неплідності доводиться мати справу переважно з наслідками перенесених запальних захворювань, які є поліетіологічними та поширені в усіх країнах світу (Westrom L., Eschenbach B., 1999). Значення уро- генітальних інфекцій у патології людини визначається безпосередніми багатовогнещевими ураженнями сечостатевих органів та їх наслідками, що впливають на репродуктивну функцію [8].

Мета дослідження

Провести порівняльну характеристику видового складу мікробіоти вульвовагінального вмісту жінок із непліддям I та II типів.

Матеріал та методи досліджень

Усього було обстежено 89 жінок репродуктивного віку з непліддям I типу середній вік яких становив 27,00 ± 2,37 років. Також проведено бактеріологічне і мікологічне обстеження вульвовагінального вмісту 67 жінок з неплідністю II типу віком від 18 до 34 років (середній вік 26,00 ± 1,12 р.).

У всіх жінок для бактеріологічного і мікологічного обстеження в стерильних умовах забирали вульвовагінальний вміст у стерильні центрифужні пробірки. До матеріалу додавали десятикратний об'єм стерильного фізіологічного розчину натрію хлориду, одержували розведення 1:10 (10-¹). На одержаній суміші готовили титраційний ряд від 10-2 до 10-7, із якого робили висів 0,01 мл на сектори оптимальних поживних середовищ до кожної пробірки роду рівномірно розподіляючи на поверхні твердих середовищ або в товщі напіврідких середовищ для одержання ізольованих колоній.

Факультативні анаеробні та аеробні бактерії вирощували в термостаті (температура 37 °С, 18-24 години, дріжджоподібні гриби роду Candida - при температурі 30 °С 48-72 години). Облігатні анаеробні бактерії вирощували в стаціонарному анаеростаті (СО2 incubator T-125 Medicin - Швеція) протягом 5-7 днів, інколи до 14 діб. Ідентифікацію виділених таксонів проводили за морфологічними, тинкторіальними, культуральними, біохімічними властивостями, за необхідності визначали ознаки патогенності та антигенну структуру.

Результати дослідження

Нами виявлено, що в жінок з неплідністю I типу S.aureus був виділений у 56 (62,9 %) обстежених, S.epidermidis - в 11 (12,3 %) обстежених,

N.gonorrhoеae - у 8 (8,9 %) обстежених, E.coli - у 10 (11,4 %) обстежених, C.albicans - у 66 (74,1 %) обстежених, Lactobacillus spp. - у 28 (31,4 %) обстежених, Bifidobacterium spp. - у 13 (14,6 %) обстежених, Peptostreptococcus spp. - у 23 (25 %) обстежених, Propionibacterium spp. - у 3 (3,3 %) обстежених, T.vaginalis - у 52 (58,4 %) обстежених.

Результати проведеного дослідження наведені в табл. 1.

Таблиця 1 Мікробіологічний склад видового вмісту жінок із непліддям I типу

Таблиця 2 Мікробіологічний склад вульвовагінального вмісту жінок із непліддям I типу

Як видно з наведених даних у вульвовагінальному вмісті жінок з неплідністю ІІ типу переважають умовно-патогенні дріжджоподібні гриби роду Candida, золотистий стафілокок, вагінальні трахимонади, пептострептококи та ентеробактерії.

Таким чином, неплідність її типу в жінок дітородного віку супроводжуються елімінацією із вульвовагінального вмісту лактобактерій і біфідобактерій, за рахунок чого в жінок з неплідністю ІІ типу створюються сприятливі умови для контамінації вульвовагінального вмісту патогенними та умовно-патогенними дріжджоподібними грибами роду Candida, вагінальними трихомонадами, золотистим стафілококом, пептострептококами, ентеробактеріями, гонококом, бактероїдами та іншими мікроорганізмами.

Однак, у 38 обстежених жінок з неплідністю I типу були виділені асоціації умовно-патогенних мікроорганізмів, що складалися з двох видів, у 37 жінок асоціація умовно-патогенних мікроорганізмів складалась із трьох видів, в 11 обстежених - із чотирьох видів. Усього було виділено та ідентифіковано 234 культури умовно-патогенних мікроорганізмів. У 76 випадках виділено двох збудників, у 111 - трьох збудників, у 44 - випадках асоціація складалася із чотирьох збудників.

Формування асоціації патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів у вульвовагінальному вмісті жінок із неплідністю І типу наведено в табл. 3. непліддя мікробіологічний вульвовагінальний

Таблиця 3 Асоціації патогенних мікроорганізмів у вульвовагінальному вмісті жінок із неплідністю І типу

А у вагінальному вмісті 67 жінок із неплідністю ІІ типу виділено та ідентифіковано 181 штам патогенних та умовно патогенних мікроорганізмів, які свідчать, що у вульвовагінальному вмісті жінок з неплідністю ІІ типу персистує один і більше (асоціація) штамів, що важливо не тільки для діагностики запального процесу. Але це є особливо важливим

моментом у формуванні патогенезу захворювання та в лікувальній тактиці. Тому наступним етапом було встановлення кількісних та якісних показників асоціативних взаємовідношень умовно патогенних мікроорганізмів, що персистують у вульвовагінальному вмісті жінок з неплідністю ІІ типу, результати вивчення яких наведені у табл. 4.

Таблиця 4 Кількісні асоціації патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів у вульвовагінальному вмісті жінок з неплідністю ІІ типу

Висновки

1. Однією із причин розвитку неплідності є колонізація вульвовагінального вмісту умовно-патогенними мікроорганізмами роду Candida, бактеріями роду Staphylococcus, вагінальними трихомонадами, пептострептококами, ентеробактеріями, гонококом, бактероїдами та іншими мікроорганізмами, а також їхня асоціація.

2. При обстежені жінок репродуктивного віку з неплідністю І та II типів, більшу увагу слід приділяти мікробіологічним чинникам, що спричиняють розвиток з початку гострих, а в подальшому хронічних неспецифічних запальних процесів урогені- тального тракту, які можуть призвести до розвитку непліддя.

3. У вульвовагінальному вмісті жінок із безпліддям I типу автохтонні облігатні анаеробні бактерії родів Lactobacillus і Bifidobacterium виділяються у 45 % , а в жінок з неплідністю II типу тільки у 28,2 % жінок (Р < 0,05), що обумовлює зменшенню контамінації і колонізації біотопу у 2,87 рази ентеробактеріями (E. coli, K. pneumoniae), у жінок з первинною неплідністю. У цих жінок підвищується колонізація вульвовагінальногог вмісту дріжджоподібними грибами роду Candida (на 10,43 %), і найпростішими (Т. vaginalis) на 26,41 % і бактеріями роду Peptostreptococcus - на 91,96 %. Різниця у виявленні інших умовно-патогенних бактерій (S. aureus, N. gonorrheae, та інш.) незначна (Р > 0,05).

Перспективи подальших наукових досліджень

Одержані результати є підставою для проведення медикаментозної деконтамінації патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів з наступною корекцією мікробіоцинозу вульвовагінального вмісту порожнини піхви пробіотиками в жінок із неплідністю I та ІІ типів.

Література

1. Кулаков ВИ, Маргиани ФА, Назаренко ТА, Дубницкая ЛВ, Габуния ТГ. Структура женского бесплодия и прогноз восстановления репродуктивной функции при использовании современных эндоскопических методов. Акушерство и гинекология. 2001;3:33-6.

2. Джораєва СК, Гончаренко ВВ, Щербакова ЮВ, Щоголева ОВ. Вивчення стану вагінальної мікробіо- ти при вульвовагінітах полімікробної етіології з визначенням домінуючих рівнів антибіотикочутливості. Дерматологія та венерологія. 2016;2:25-33.

3. Медведев БИ, Зайнетдинова ЛФ, Теплова СН. Микрофлора органов репродуктивной системы у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2008;3:58-62.

4. Виноград НО, Ковальська ОР, Челак ОВ. Мікробіценоз нижніх відділів генітального тракту у хворих з неплідністю. Експериментальна та клінічна фізіологія і біохімія. 2001;3:92-4.

5. Ghiasi M, Fazaeli H, Kalhor N, Sheykh-Hasan M, Tabatabaei-Qomi R. Assessing the prevalence of bacterial vaginosis among infertile women of Qom city. Iran J Microbiol. 2014 Dec; 6(6):404-8.

6. Mastromarino P, Hemalatha R, Barbonetti A, Cinque B, Cifone MG, Tammaro F, et al. Biological control of vaginosis to improve reproductive health. Indian J Med Res. 2014 Nov;140:91-7.

7. Franasiak JM, Scott RT Jr. Introduction: Microbiome in human reproduction. Fertil Steril. 2015 Dec;104(6):1341-3. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.10.021.

8. Green KA, Zarek SM, Catherino WH. Gynecologic health and disease in relation to the microbiome of the female reproductive tract. Fertil Steril. 2015 Dec;104(6):1351-7. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.10.010.

Размещено на Allbest.ru