Размещено на http://www.allbest.ru/

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НИЖЕГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

«НИЖЕГОРОДСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ»

Методические рекомендации для студентов по специальности 31.02.03 «Лабораторная диагностика»

Раздел: «Общий анализ крови»

Тема: «Методы определения гемоглобина»

Автор: Огородникова А. А.

Нижний Новгород 2016

• Содержание
• Предисловие
• Введение
• 1. Алгоритм и техника взятия крови на исследование гемоглобина
• 2. Методы определения количества гемоглобина
• 3. Определение количества гемоглобина с помощью физраствора (NaCl)
• 4. Определение количества гемоглобина с помощью гемоглобинометра
• 5. Определение количества гемоглобина на ФЭК по Дарвизу-Воробьеву
• 6. Определение количества гемоглобина с помощью прибора миниГЕМ
• 7. Определение количества гемоглобина с помощью гемоанализатора
• 8. Повышенный гемоглобин. Причины и профилактика
• 9. Пониженный гемоглобин. Причины и профилактика
• Библиография

Предисловие

Способность врача любой специальности понимать и правильно интерпретировать результаты гематологических исследований, несомненно, имеет решающее значение для оценки состояния пациента и постановки диагноза.

Следует понимать, что в организме постоянно задействованы механизмы регуляции жизненных функций, работающие по принципу обратной связи. Это означает, что в ответ на изменение одного показателя, который регистрируется лабораторно, практически мгновенно активируется целая цепь компенсаторных механизмов, стремящихся нормализовать состояние.

В большинстве случаев любая патология подразумевает наличие каких-либо изменение лабораторных показателей.

Лабораторные методы исследования помогают врачу поставить диагноз, позволять следить за течением болезни, за правильностью лечения и составить прогноз об исходе болезни.

Здесь разработана литература по теме «Методы определения гемоглобина в крови», где отражены практические занятия по данной тематике.

Эти методические рекомендации рассчитаны для проведения практических занятий на 4-ом курсе отделения «Лабораторная диагностика», по предмету «Проведение лабораторных гематологических исследований», чтобы больше времени уделялось практической работе, отрабатывали навыки лабораторной диагностики.

Введение

Гемоглобин - это белок крови, в состав которого входит ион железа, который находится в эритроцитах крови. Именно он придает крови красный цвет.

Гемоглобин выполняет функцию переноса кислорода от легких ко всем клеткам организма, а углекислый газ выводит из клеток и тканей к легким. Чем выше показатель гемоглобина в крови, тем больше кислорода получают клетки и тем интенсивнее работают.

Норма Hb: женщины - 120-140 г/л, мужчины - 130-160 г/л. При беременности может опускаться до 110 г/л. У детей значения нормы меняются в соответствие с возрастом. Сразу после рождения 145-225 г/л, к 6 месяцам снижается до 110-135 г/л и до 18 лет постепенно увеличивается.

1. Алгоритм и техника взятия крови на исследование гемоглобина

1. Пациент сидит напротив лаборанта. Рука (обычно левая) лежит на столе.

2. Место прокола дезинфицируется спиртом.

3. Одноразовым скарификатором быстро делают прокол в подушечке безымянного пальца, погружая инструмент на всю глубину режущей части (примерно на 2-3 мм).

4. Первая капля крови снимается с помощью сухой ваты.

5. Для исследования используют вторую и следующие капли крови, которые набирают с помощью стеклянного переходника, затем помещают в пробирки и подписывают.

6. После того, как кровь взяли, место укола обрабатывают спиртом и зажимают ватным тампоном до полной остановки крови.

2. Методы определения количества гемоглобина

Принцип метода:

Гемоглобин окисляют в метгемоглобин железосинеродистым калием (красная кровяная соль); образующийся с ацетонциангидрином окрашенный гемиглобинцианид определяют колориметрически.

Реактивы:

В пробирку к 5 мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл крови (разведение в 251 раз). Содержимое пробирки тщательно перемешивают и оставляют стоять на 10 мин. Измеряют на ФЭК при длине волны 500-- 560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против холостой пробы (трансформирующий раствор). Измеряют при тех же условиях стандартный раствор.

Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору гемиглобинцианида, или по формуле:

С (Hb) = E (оп) Ч 416,6 г/л

3. Определение количества гемоглобина с помощью физраствора (NaCl)

Для этого метода в химическую пробирку наливают 5 мл физраствора + 0,02 мл крови капилляром Сали + 1-2 капли гемолитика 3% гипсофелина. Ждать 5 минут. Затем колорометрируют на ФЭК с зеленым светофильтром в кювете на 1 см. кровь гемоглобин физраствор

Контроль: физраствор или дистиллированная вода.

Снимают показания, выдают результат по формуле:

C (Hb) = E (оп) Ч 385, 1 г/л

Коэффициент получают, когда строят калибровочный график по стандартной шкале и рассчитывают F ср.

4. Определение количества гемоглобина с помощью гемоглобинометра

Принцип метода:

Гемоглобин окисляют в метгемоглобин железосинеродистым калием (красная кровяная соль); образующийся с ацетонциангидрином окрашенный гемиглобинцианид определяют колориметрически.

Ход определения:

В пробирку 5 мл трансформирующего раствора + 0,02 мл крови. Перемешать. Подождать 10 минут. Колорометрировать на гемоглобинометре.

Подготовка гемоглобинометра к работе:

1. включить тумблер «Сеть» - на табло загорается «Пуск».

2. прогреть прибор 30 минут.

3. установить «0». В кювету налить 2 мл трансформирующего раствора, поместить в кюветное отделение. Закрыть.

4. поворотом ручки потенциометра включить светодиод контроля «0», затем медленным вращением ручки в противоположную сторону добиться погасания светодиода, при этом после нажатия кнопки «Пуск» на цифровом табло должны загореться цифры: 001 - 002 - 003.

5. произвести сброс. Сначала повторным нажатием кнопки «Пуск» удалить холостую пробу из кюветы.

6. затем налить в кювету стандартный раствор гемоглобинцианида, не менее 2 мл. Закрыть крышку кюветного отделения. Повернуть ручку потенциометра калибровки и нажать «Пуск».

7. снять показания на цифровом табло не более чем через 10 секунд.

8. провести сброс нажатием «Пуск». Удалить контрольный раствор из кюветы.

9. взять опытную пробу и налить в кювету 2 мл. Зкрыть крышку кюветного отделения. Нажать «Пуск» и снять показания на цифровом табло.

10. произвести сброс нажатием «Пуск». Удалить пробу из кюветы.

Фотометр - гемоглобинометр MF-1020

5. Определение количества гемоглобина на ФЭК по Дарвизу-Воробьеву

Принцип метода:

Принцип основан на определении гемоглобина по окраске оксигемоглобина, полученного в результате гемолиза крови, разведенным раствором аммиака, который отличается сравнительно стойкой окраской.

Ход определения:

В пробирку наливают 4 мл 0,04% раствора аммиака + 0,02 мл крови капилляром Сали. Мешают. Ждут 5 минут. Затем колорометрируют на ФЭК при зеленом светофильтре, в кювете на 1 см.

Получают разведение крови в 200 раз (1:200).

Расчет гемоглобина ведут по таблице, ее составляют по калибровочному графику.

6. Определение количества гемоглобина с помощью прибора миниГЕМ

"МиниГЕМ 523" представляет собой малогабаритный портативный прибор. Его размеры - 178х128х43 мм, а масса - не более 300 грамм. Такой прибор практически не занимает места на лабораторном столе, его можно установить у койки больного, в отделении реанимации (в том числе неонатальном), в машине скорой помощи, в полевой лаборатории.

Измерение оптической плотности производится на длине волны 523 нм с использованием стандартной 10 мм фотометрической кюветы, в которую переносится приготовленная проба из пробирки.

Ход работы:

Для подготовки пробы необходимо перенести 20 мкл капиллярной крови с помощью пипетки Сали или высокоточного стеклянного капилляра в пробирку с 2 мл 0.04%-го раствора аммиака в дистиллированной воде.

Проба помещается в кювету, затем кювета с пробой отправляется в прибор, и через пару секунд на дисплее можно увидеть концентрацию гемоглобина в крови.

МиниГЕМ 523

7. Определение количества гемоглобина с помощью гемоанализатора

Гематологический анализатор -- прибор (комплекс оборудования), предназначенный для проведения количественных исследований клеток крови в клинико-диагностических лабораториях. Может быть автоматическим или полуавтоматическим. В настоящее время полуавтоматические анализаторы практически не выпускаются.

Автоматический гематологический анализатор представляет собой полностью автоматизированный прибор, в котором весь аналитический процесс выполняется автоматически.

Современные автоматические анализаторы способны обрабатывать десятки образцов (от 60 до 120) в час, с соответствующей спецификации точностью и воспроизводимостью, а также хранить результаты тестов во встроенной памяти и, при необходимости, распечатывать их на встроенном термопринтере или внешнем принтере.

Принцип работы: Любой современный гематологический анализатор, это комплекс механических, гидравлических, пневматических и измерительных систем. Гидравлическая и пневматическая системы отвечают за забор реагентов из емкостей, доставку образца и реагентов внутри анализатора, а так же вывод отходов за пределы анализатора. Механическая система отвечает за перемещение пробозаборника или автоподатчика в зависимости от модели, а так же за управление сдвижным клапаном и различного рода мешалками.

Ход работы: Метод определения гемоглобина общий для всех типов анализаторов. Заключается он в анализе оптической плотности на необходимой длине волны лизированной крови. Последовательность работы анализатора для измерения гемоглобина такова:

1. Разведение образца дельюэнтом (изотонический разбавитель).

2. Добавление в разбавленный образец лизирующего реагента (гемолитик). В результате его действия разрушается клеточная стенка эритроцитов, поэтому гемоглобин свободно растворяется в пробе.

3. Перемешивание образца для получения однородной смеси.

4. Фотометрическое измерение оптической плотности образца в специальной кювете.

Оптическая плотность лизированной пробы будет пропорциональна содержанию гемоглобина в исследуемой крови.

Анализатор гематологический ВС-2800

8. Повышенный гемоглобин. Причины и профилактика

Когда анализ крови выше нормы, то можно заподозрить такие заболевания:

· эритремия - заболевание, сопровождающиеся увеличением количества эритроцитов в крови;

· сгущение крови;

· врожденные пороки сердца;

· кишечная непроходимость;

· ожоги;

· сердечно-легочная недостаточность.

Симптомы высокого гемоглобина:

· быстрая утомляемость;

· сонливость;

· полная или частичная потеря аппетита;

· нарушение зрения;

· бледность кожных покровов;

· нарушение работы мочеполовых органов.

Лечение:

Для того, чтобы повышенный гемоглобин в крови начал снижаться, в первую очередь, необходимо пересмотреть рацион питания. Нужно исключить железосодержащие продукты, такие как красное мясо, крупы, мясные субпродукты, красные ягоды и фрукты.

Высокий гемоглобин также снижают путем назначения препаратов, которые разжижают кровь, такие как Кардиомагнил, Трентал, Курантил и др.

Иногда лечат эритрофорезом, процедурой, которая направлена на удаление из кровотока «лишних» эритроцитов, тем самым снижая уровень гемоглобина. Но к такой процедуре прибегают крайне редко и в случае невозможности применения других методов лечения.

9. Пониженный гемоглобин. Причины и профилактика

Когда анализ ниже нормы, то можно заподозрить такие заболевания:

· анемия;

· кровотечение;

· кадровое донорство.

Симптомы низкого гемоглобина:

· быстрая утомляемость;

· слабость;

· сонливость;

· головокружение, головные боли;

· учащенное сердцебиение;

· пониженное артериальное давление;

· возможны обмороки;

· сухость кожи, болезненные трещины в уголках рта;

· выпадение волос и их медленный рост.

Лечение:

Чтобы гемоглобин пришел в норму необходимо пересмотреть свой рацион. В потребляемой пище должно быть достаточное содержание железа и присутствие животного белка, основными источниками которых являются мясо и мясные продукты, особенно из говядины. Рекомендуется кушать больше овощей и фруктов. Будут полезны блюда, содержащие черную смородину, шиповник, киви, любые цитрусовые.

Низкий гемоглобин также повышают путем назначения препаратов, такие как Витамин В12 в ампулах, Фолиевая кислота, Фенюльс, Тотема.

Библиография

1. С. С. Вялов «Общая врачебная практика: диагностическое значение лабораторных исследований», Москва 2013г.

2. Е. Н. Панкова; И. В. Панова «О чем говорят анализы», Ростов-на-Дону 2008г.

3. О. А. Рукавицына «Гематология. Национальное руководство», Москва 2015г.

4. А. В. Литвинов «Норма в медицинской практике», Москва 2002г.

5. Ю. Я. Лея «Оценка результатов клинических анализов», Москва 2002г.

Размещено на Allbest.ru