Изучение выживаемости бактериальных культур в транспортных средах
Проблемы микробиологической диагностики гнойно-воспалительных заболеваний, связанные с возможностью потери нестойких возбудителей на долабораторном этапе. Определение уровней выживаемости микробных культур в транспортной среде Amies; материалы и методы.
Рубрика | Медицина |
Вид | статья |
Язык | русский |
Дата добавления | 14.03.2019 |
Размер файла | 14,6 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Изучение выживаемости бактериальных культур в транспортных средах
Калипарова М.П.,
Кайнова Е.П.,
Маслов Ю.Н.
Актуальность исследования. Проблемы микробиологической диагностики гнойно воспалительных заболеваний, связанные с возможностью потери нестойких возбудителей на долабораторном этапе, остаются актуальными для современной медицины [2]. В целях сохранения численности и жизнеспособности микробов на этапе транспортировки материала (от постели больного до лаборатории) в лечебной практике широко используются транспортные среды (чаще всего, среда Amies) [3]. Считается, что их состав подобран таким образом, что среды предупреждают гибель микробных клеток, сохраняют их жизнеспособность, но при этом не способствуют росту и размножению. Последнее очень важно при необходимости количественного учета присутствующих в клиническом материале микробов, когда их концентрация имеет диагностическое значение. Однако, поскольку среди гноеродных микроорганизмов имеются как весьма устойчивые во внешней среде (например, стафилококки, энтеробактерии), так и очень чувствительные к внешним воздействиям (стрептококки) варианты, создание универсальной транспортной среды представляется весьма трудной задачей. Поэтому врачам-клиницистам, как и специалистам-бактериологам важно представлять реальные показатели выживаемости основных клинически значимых микробов в транспортных средах.
Цель настоящей работы - определение уровней выживаемости микробных культур в транспортной среде Amies.
Материалы и методы. В эксперименте использовали культуры 7 видов:
- Staphylococcus aureus;
- Streptococcus pyogenes;
- Enterococcus faecalis;
- Escherichia сoli;
- Pseudomonas aeruginosa;
- Acinetobacter lwoffi; - Candida albicans.
Все культуры имели клиническое происхождение и были выделены из биоматериала от пациентов детского соматического стационара. Из суточных культур указанных микроорганизмов готовили взвеси в физиологическом растворе с помощью стандарта мутности № 0.5 по Мак-Фарланду. В полученные взвеси погружали тампоны из наборов транспортной среды Amies на 10 сек., моделируя процесс забора материала, после чего тампоны вносили в транспортную среду [3]. Пробирки со средой Amies хранили при комнатной температуре до 2-х суток. Концентрацию жизнеспособных микроорганизмов, сохранившихся в тампонах, оценивали в следующие сроки: микробиологический гнойный воспалительный
- непосредственно после постановки;
- через 1 час; - через 24 часа;
- через 48 часов.
Для этого извлекали тампон из среды, энергично прополаскивали его в стандартном количестве физиологического раствора (1 мл), после чего готовили последовательные десятикратные разведения получившейся взвеси в стерильном физиологическом растворе до 10-5 включительно. Из каждого разведения производили количественные высевы на питательный либо кровяной агар капельным методом [1]. Посевы инкубировали 24 часа, после чего подсчитывали количество выросших колоний. Исходя из этих показателей, вычисляли количество выживших клеток в пробирке с транспортной средой. Эксперименты с каждой из культур выполняли в 3-х повторностях.
Результаты и обсуждение. Прежде всего, при анализе результатов исследования мы оценивали пары показателей: сразу после постановки - через 1 час. Во всех экспериментах внутри этих пар различия не превышали 40%, что свидетельствовало, на наш взгляд, об адекватности избранного методологического подхода и позволяло считать результаты эксперимента в целом достоверными. При анализе последующей динамики концентрации микроорганизмов на тампонах при их хранении в среде Amies было выяснено, что концентрация большинства изученных культур существенно возрастает уже через 24 часа, а тем более - через 48 часов по сравнению с исходной. Так, прирост концентрации в 1,5-2 раза после 24 часов пребывания в среде Amies мы наблюдали у культур St.aureus, E.сoli, Ent. faecalis, Ps.aeruginosa, A. lwoffi и C. albicans. Эту динамику трудно связать с сохранением запаса энергетических и пластических субстратов в микробных клетках или растворе, поскольку в эксперименте использовали суточные агаровые культуры (то есть, находящиеся в поздней стационарной фазе), а для приготовления микробных взвесей применяли физиологический раствор. Через 48 часов повышение концентрации в 3-4 раза отмечено у культур St.aureus, Ent. faecalis, Ps.aeruginosa, A. lwoffi. Культуры E.сoli и C. albicans размножались еще более энергично, поэтому их показатели отличались от исходных более чем в 10 раз. Что же касается культуры Str.pyogenes, то ее исходная концентрация сохранялась лишь в течение 1-го часа, после чего содержание жизнеспособных бактерий резко падало и составляло через сутки менее 1% от исходного.
Безусловно, проведенное исследование является модельным, и его результаты следует осторожно переносить в реальные условия клинической микробиологии. Однако, если даже взвеси культур в физиологическом растворе способны давать существенный прирост своей концентрации при пребывании в транспортной среде, то при внесении в транспортную среду трофических компонентов (белки, полисахариды, клеточный детрит и т.п.), неизбежно присутствующих в биоматериале, результаты могут оказаться еще более неожиданными.
Выводы
1. Длительное хранение микробных культур в транспортной среде Amies способно приводить к существенным изменениях их концентрации. Так, виды, характеризующиеся высокой устойчивостью во внешней среде и нетребовательностью к питательным средам, способны размножаться в транспортной среде Amies.
2. Жизнеспособность культуры Str.pyogenes сохраняется в транспортной среде Amies в течение нескольких часов, а к 24 часам хранения концентрация микроба резко падает.
3. Для эффективной и достоверной микробиологической диагностики даже при использовании транспортных сред необходима оперативная доставка биоматериала в лабораторию. Только в этом случае можно получить достоверные, неискаженные результаты.
Литература
1. Маслов Ю.Н., Одинцова О.В. Экономичный метод количественного учета микроорганизмов // Пермский медицинский журнал, 1997. - № 1. - С. 99.
2. Маслов Ю.Н., Пегушина О.Г., Суханов С.Г., Фельдблюм И.В. Михайлова Т.И. Актуальные проблемы инфекции в кардиохирургии // Внедрение инновационных технологий в хирургическую практику (фундаментальные и прикладные аспекты). Международная дистанционная научно-практическая конференция. Пермь, 2010.
3. МУ 4.2.2039-05 Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории.
Размещено на Allbest.ru
Подобные документы
Инфаркт миокарда: понятие и причины. Оценка выживаемости по методу Каплана-Майера. Оценка различия выживаемости между группами больных при помощи кривых Каплана-Мейера и логрангового критерия. Однофакторный дисперсионный анализ и логистическая регрессия.
курсовая работа [1,1 M], добавлен 20.12.2012Морфология, культуральные свойства и исследование стрептококков, стафилококков, пневмококков и менингококков. Практическое применение методов микробиологической диагностики заболеваний, вызванных патогенными кокками. Бактериологическое исследование крови.
дипломная работа [460,7 K], добавлен 14.06.2014Определение понятий абсцесса и флегмона. Классификация гнойно-воспалительных процессов по их локализации, характеру изменений в кости и в зависимости от источника инфекции. Клиника и диагностика заболеваний. Дренирование гнойно-воспалительного очага.
презентация [1,9 M], добавлен 08.06.2015Заболевания, вызываемые представителями рода Streptococcus. Морфологические особенности стрептококков, их классификация. Основные этапы инфекционного процесса. Резистентность и эпидемиология стрептококков. Серодиагностика стрептококковых инфекций.
реферат [4,3 M], добавлен 10.06.2013Классификация и причины воспалительных заболеваний половых органов у женщин, их симптомы и проявления. Этиология и патогенез, клиническая картина, методы диагностики и лечение воспалительных заболеваний нижних отделов половых путей, органов малого таза.
реферат [37,9 K], добавлен 15.06.2014Проблема внутрибольничных инфекций (ВБИ). Причины роста заболеваемости ВБИ. Особенности циркуляции условно-патогенных микроорганизмов как возбудителей оппортунистических инфекций. Методы микробиологической диагностики выявления и схемы профилактики ВБИ.
курсовая работа [96,1 K], добавлен 24.06.2011Изучение гнойно-воспалительных заболеваний как одних из актуальных проблем современного акушерства. Характер течения беременности. Исследование причины материнской заболеваемости эндометритом и смертности. Оказание медицинской помощи женщинам и детям.
контрольная работа [503,5 K], добавлен 16.06.2015Этиология, клиника, классификация, гнойно-воспалительных заболеваний органов брюшной полости, принципы и подходы к их диагностике. Организация работы хирургического отделения. Предоперационная подготовка при гнойном перитоните, роль медицинской сестры.
курсовая работа [36,5 K], добавлен 16.06.2015Экскреторная урография - ведущий метод исследования почек, мочеточников и мочевого пузыря. Изучение почечного кровотока и состояния сосудов почки с помощью допплеровского цветового картирования. Обзор этапов обследования органов мочевыделительной системы.
презентация [583,5 K], добавлен 19.04.2015Виды возбудителей хламидийной инфекции, формы их существования, источники заражения. Эпидемиологическая характеристика, симптомы и течение болезни. Принципы микробиологической диагностики хламидиоза, методы комплексного лечения и профилактики заболевания.
курсовая работа [35,9 K], добавлен 05.04.2010