Определение литической активности бактериофагов Providencia

Размещено на http://www.allbest.ru/

Определение литической активности бактериофагов Providencia

Благодерова В.В.,

Евина Д.А.

Работа посвящена определению спектра литической активности бактериофагов Providencia. Используя метод нанесения капель бактериофагов на газон исследуемой культуры авторами установлено, что изученные фаги обладали разным диапазоном литической активности, от 10-5 до 10-10 по Аппельману и от 108 до 109 по Грациа.

Введение

Литическая активность бактериофага оценивается по его способности вызывать лизис бактериальной культуры в жидких или плотных питательных средах. Активность по методу Аппельмана выражается максимальным разведением, в котором испытуемый бактериофаг проявил свое литическое действие. Более точным методом оценки литической активности бактериофага является определение количества активных корпускул фага в единице объема по методу Грациа.

Материалы и методы исследований. В качестве исследуемых культур использовали 28 (2 референс штамма и 26 выделенных нами "полевых") штаммов бактерий рода Providencia.

На поверхность МПА в чашках Петри пипеткой наносили 3-4 капли 18-24 часовой бульонной культуры исследуемых микроорганизмов. Затем равномерно распределяли по поверхности среды стерильным шпателем. Чашки ставили в термостат для подсушивания на 15-20 минут. После чего размечали чашки маркером на три сектора: на два сектора засеянного агара легким прикосновением пипетки, наносили каплю исследуемого фага; на третий сектор по центру в качестве контроля наносили стерильный МПБ, наклоняли чашку так, чтобы капли стекли, а затем инкубировали при температуре 37 °С. Выявление лизиса бактериального газона проводили через 18-24 часа. бактериофаг литический питательный

Результаты исследований и их обсуждение. В результате проведенных исследований нами установлено, что изученные фаги обладали разным диапазоном литической активности (табл. 1). Широким диапазоном по отношению к изучаемым культурам обладают фаги F-73 УГСХА и F-17 УГСХА - 60,7 %, F-20 УГСХА, F-1 УГСХА и F-28 УГСХА - 64,3 %, F- 9 УГСХА и F-41 УГСХА - 53,6 %, F-67 УГСХА - 85,7%, F-87 УГСХА - 82,1%.

Таблица 1 - Спектр литической активности бактериофагов Providencia

Для дальнейшего изучения отобрали два бактериофага с наибольшим диапазоном по отношению к изучаемым культурам - фаг F-87 УГСХА, который лизировал 82,1 % и фаг F-67 УГСХА - 85,7 % штаммов бактерий рода Providencia, а в сумме фаги проявили литическое действие в отношении 96,4 % всех исследованных культур (табл. 2).

Таблица 2 - Спектр литической активности фагов F - 67 УГСХА и F - 87 УГСХА

Заключение

Проведенные исследования показали, что наибольшим спектром литической активности обладали два бактериофага Providencia, это F - 67 УГСХА и F - 87 УГСХА. Данные штаммы фагов были отобраны для конструирования диагностического биопрепарата.

Список литературы

1. Адамс М. Бактериофаги (перевод с английского) // - М., - 1961. -521С.

2. Барт Н.Г. Биологические свойства бактериофагов Providencia / Н.Г. Барт, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Актуальные вопросы аграрной науки и образования: Материалы Международной научно-практической конференции. - Ульяновск, 2009. - С. 6-8.

3. Барт Н.Г. Спектр литической активности бактериофагов Providencia / Н.Г. Барт, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Актуальные вопросы аграрной науки и образования: Материалы Международной научно-практической конференции. - Ульяновск, 2013. - С. 12-15.

4. Васильев, Д.А. Характеристика биологических свойств бактериофагов вида Bacillus subtilis / Д.А. Васильев Д.А., Н.А. Феоктистова М.А. Юдина [и др.] // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2011. - № 1. - С. 79-83.

5. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии // Учебное пособие - Ульяновск. - 1988. - С.45.

6. Гольдфарб Д.М. Бактериофагия.// -М.: Медгиз. -1961. - С.297.

7. Барт Н.Г. Исследование бактериофагов рода Providencia на наличие в составе их генетического аппарата профага / Н.Г. Барт, С.Н. Золотухин, Д.А. Васильев // Аграрная наука и образование развития: опыт, проблемы и пути их решения на современном этапе: Материалы VII Международной научно-практической конференции. - Ульяновск, 2016. - С. 196-203.

Размещено на Allbest.ru