Морфофункциональная характеристика капилляров головного мозга при черепно-мозговой травме

Размещено на http://www.allbest.ru

Размещено на http://www.allbest.ru

Введение

Актуальность проблемы. Проблема тяжелой черепно-мозговой травмы привлекает внимание исследователей в течение многих лет. Гигантские масштабы современного травматизма сделали ее не только медицинской, но и острой социальной (Бабаян Е.Б., Зельман В.Л., Полушин Ю.С., 2005). Это обусловлено массовостью ее распространения среди лиц молодого и младшего среднего возраста, высокой летальностью и инвалидизацией пострадавших (Коновалов А.Н. и соавт., 2002).

В процессе развития травматической болезни головного мозга, в области его поражения возникает сложный комплекс анатомических и патофизиологических процессов как со стороны ткани мозга, так и сосудистой системы, что ведет к нарушениям его функций (Шевцов В.И., 2003, Armin, S.S., 2006; Dorsch, N.W., 1993). Эти нарушения провоцируются не только прямым (первичным) травматическим воздействием, но и вторичными факторами, среди которых важную роль играют ишемические осложнения, обусловленные влиянием вазоактивных веществ (Стороженко И.Н, Вахницкая В.В., 2001, Крылов В.В., 2005; Ромодановский П.О., 1994).

Нарушение микроциркуляции и, как следствие, гипоксия головного мозга, возникают при дискоординации физиологического цикла (сокращение - расслабление) гладкой мускулатуры микрососудов, которое происходит при нарушении баланса между констрикторными и вазодилататорными факторами, секретируемыми эндотелием сосудов (Рябов Г.А., 1988, 1994; Ананин В.Ф., 1996; Георгиева С.А., Бабиченко Н.Е., Пучиньян Д.М., 1993). Важнейшими патогенетическими звеньями травматического повреждения головного мозга являются эндотелиальная дисфункция и нарушение целостности гематоэнцефалического барьера. Учитывая важную биорегуляторную роль оксида азота (NO) в организме, нарушения, возникающие в нитроксидергической системе представляют собой ключевое звено в патогенезе эндотелиальной дисфункции и, как следствие, нарушения микроциркуляции (Гомазков О.А., 1998; Денисов Е.Н., 2008).

Одним из важнейших трансмиттеров, участвующих в регуляции местного сосудистого тонуса, выступает оксид азота, но в момент травмы он может оказывать токсическое действие и на ткань мозга, усиливая ее повреждение (Семченко В.В., 2002, Голиков П.П., 2003).

В настоящее время одним из маркеров нейронального повреждения является белок S-100, выброс которого в кровеносное русло связывают лишь с нарушением целостности ГЭБ (Marchi N., Rasmussen P., 2003). Однако роль его в прогнозировании тяжести черепно-мозговой травмы и определении степени повреждения мозговой ткани до конца не ясна.

Несмотря на многочисленность проведенных исследований, следует признать, что в связи со сложностью происходящих в ЦНС процессов, большим многообразием патофизиологических, биохимических и морфофункциональных изменений, работа по изучению патогенеза черепно-мозговой травмы и роли нитроксидергической системы в этом процессе далека от полного клинического завершения.

Цель исследования: Выявить закономерности морфо-функциональных преобразований капилляров головного мозга в остром периоде черепно-мозговой травмы.

Задачи исследования:

1. Изучить качественные и количественные показатели, характеризующие капилляры коры головного мозга в остром периоде черепно-мозговой травмы у экспериментальных животных.

2. Исследовать нитроксидпозитивные капилляры головного мозга в динамике развития черепно-мозговой травмы у крыс.

3. Определить количественное содержания конечных метаболитов оксида азота в плазме крови у животных и человека в остром периоде черепно-мозговой травмы.

4. Изучить динамику маркера нейронального повреждения (белка S-100) при черепно-мозговой травме с целью оценки состояния ГЭБ и степени тяжести травмы.

Научная новизна. Впервые получены данные о качественной и количественной перестройке микроциркуляторного русла коры головного мозга в остром периоде тяжелой черепно-мозговой травмы. Установлено, что реакция микроциркуляторного русла в значительной степени зависит от активности NO в стенке капилляра. Это косвенно подтверждается уровнем его стабильных метаболитов в крови.

Показана зависимость количественного содержания маркера нейронального повреждения (белка S-100) в крови человека с черепно-мозговой травмой от сроков острого периода, характера повреждения головного мозга, прогноза течения заболевания.

Теоретическое и практическое значение работы. Полученные материалы о структурно-функциональной организации и компенсаторных возможностях капиллярного русла головного мозга при ЧМТ являются частью фундаментальных исследований в области нейробиологии, которые служат теоретической базой для изучения патогенеза ЧМТ.

Сведения о динамике нитрита и белка S-100 представляют интерес для специалистов экспериментальной и практической медицины в диагностике степени повреждения головного мозга при ЧМТ.

На основании полученных результатов лабораторных и клинических исследований могут быть разработаны рекомендации для практического здравоохранения (врачей анестезиологов-реаниматологов, нейрохирургов) по совершенствованию диагностики травматического повреждения головного мозга путем дифференцированного подхода к оценке степени и характера его повреждения.

Положения, выносимые на защиту:

1. В процессе развития травматической болезни головного мозга происходят качественные и количественные изменения морфометрических показателей капилляров коры, выраженность которых зависит от времени, прошедшего после нанесения травмы.

2. При травматической болезни головного мозга, наряду с локальными процессами (нарушение образования NOS в эндотелии), происходит также повышение экспрессии оксида азота в кровоток.

3. При отрицательной динамике течения тяжелой черепно-мозговой травмы, происходит массивный выброс в кровеносное русло белка S - 100, что свидетельствует о продолжающемся патологическом процессе в головном мозге и возникновении вторичных реперфузионных повреждений.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на VIII Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием (Владивосток, 2007), На IX Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием, посвященной 50-летию ГОУ ВПО ВГМУ Росздрава (Владивосток, 2008), на V Дальневосточном региональном конгрессе с международным участием «Человек и лекарство» (Владивосток, 2008), на X Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием (Владивосток, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ.

1. Материал и методы исследования

Для решения поставленных задач в настоящей работе использован комплекс морфологических, гистохимических, фотометрических экспериментальных и статистических методов исследования.

При проведении экспериментов на лабораторных животных руководствовались приказом № 755, Министерства здравоохранения СССР от 12 августа 1977 года “О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных”, и стандарта отрасли «Правила проведения качественных клинических испытаний в Российской Федерации» ОСТ 42 5П 99 (утв. Минздравом РФ 29.02. 1998 г.). Животные содержались в виварии в соответствии с «Санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник» от 6.04.1993. Кормление осуществлялось в соответствии с нормами, утвержденными МЗ СССР от 10.03.1996 г., №163. Все исследования проводили согласно разрешению этического комитета протокол № 1 от 04.10.2010 г.

Экспериментальная часть работы выполнена на половозрелых белых крысах линии Вистар, массой 180-300 г (n =54). Животные были разделены на контрольную и экспериментальную группы. Эти группы были разделены на 4 подгруппы в зависимости от метода идентификации микроциркуляторного русла. У первой подгруппы мозг исследовался на NADPH-диафоразу по методу Hope, Vinsent (1989), который позволяет судить не только о гистохимической локализации нейрональной NO-синтазы (NOS), но и об активности этого фермента в клетках. У второй подгруппы микроциркуляция исследовалась методом заливки тушью сосудистой системы. Инъекцию сосудисто-капиллярной сети мозга осуществляли смесью тушь-желатин. Также срезы мозга окрашивались гематоксилин-эозином и по методу Ниссля.

Объектом исследования служила кора больших полушарий головного мозга лабораторных животных. Использована модель нанесения дозированной тяжелой ЧМТ по методике Соколовой Т.Ф. (1986г.), обеспечивающей получение у разных животных одинаковой по степени тяжести ЧМТ. Все исследования проводились в динамике: без патологии, через 24, 72 часа и 7 суток после травмы. У каждого животного сравнивали участки мозга в зоне поражения (в зоне так называемой пенумбры) и аналогичные участки в интактном полушарии. Оценивался диаметр капилляров (мкм), объемная плотность микроциркуляторного русла (мм), площадь обменной поверхности (мм2) и активность фермента (NADPH-диафоразы). В эти же сроки проводился забор крови у экспериментальных животных для исследования метаболитов NO.

Клиническое исследование проводилось на базе отделения реанимации и интенсивной терапии МУЗ ГКБ № 2 г. Владивостока.

В работе представлены результаты обследования 30 пациентов в возрасте 18 - 60 лет с острой изолированной тяжелой черепно-мозговой травмой. Исключение больных из дальнейшего исследования проводили в следующих случаях:

- сочетание черепно-мозговой травмы с тяжёлым повреждением опорно-двигательного аппарата;

- указание в анамнезе и выявленная при обследовании грубая сопутствующая соматическая или неврологическая патология;

- из исследования также исключались беременные женщины и дети младше 18 лет.

В основную группу вошли пациенты, у которых за время пребывания в отделении реанимации производился 3-кратный забор крови в первые 12 часов, через 24 часа и на 7 сутки с момента травмы. Эта группа была разделена на две подгруппы по исходу травмы: в первую вошли 14 человек с благоприятным исходом (выжившие), во вторую - 16 пациентов с неблагоприятным исходом.

Иммуноферментный анализ уровня белка S100 в плазме крови проводился с применением системы Eleksys S-100. Анализ ELECSYS S100 - это сэндвич-метод, основанный на иммуноферментном анализе, предназначенный для использования на автоматических анализаторах и способный выявлять В-субъединицу S100 в сыворотке крови.

Оценку состояния нитроксидергической системы у человека и экспериментальных животных проводили путем определения ближайшего стабильного метаболита оксида азота(II) - нитрита в плазме крови по методу Грисса на спектрофотометре при длине волны 546 нм. В качестве стандарта использовался нитрит натрия.

Полученные в результате исследования данные обрабатывали методом вариационной статистики с определением средней арифметической, стандартной ошибки средней арифметической, критерия достоверности. Для оценки значимости цифровых данных применяли t-критерий Стьюдента. Значения доверительного интервала, p < 0,05, считалось статистически достоверным.

2. Результаты исследований и их обсуждение

На МРТ-томограммах головного мозга подопытных животных выявились следующие изменения: средний размер очага повреждения после нанесения травмы составил в среднем 5,3 мм куб., был локализован в правой теменно-височной области и распространялся на кору, а в ряде случаев и на нижележащие структуры. Зона травмы в первые часы была представлена очагом размозжения (занимающим 2/3 от всего объема повреждения) с небольшим контуром перифокального отека (так называемая пенумбра). Изменение объема пенумбры у крыс на МРТ отражает степень выраженности вторичного повреждения головного мозга.

Спустя 24 часа происходило нарастание отека, и соотношение их менялось: зона пенумбры составила 2/3 от объема повреждения и превысила размеры гематомы в 2 раза. Объем гематомы имел тенденцию к снижению, начиная с 24 часов. Это соответствует принятой на сегодняшний день концепции о том, что нарастание отека происходит к концу первых суток после получения травмы с пиком на 3 сутки.

Макроскопически травматический очаг размозжения определялся в правой теменно-височной области, имел неправильную форму, с размерами 1,00,50,5 см. Ушиб головного мозга тяжелой степени характеризовался разрушением ткани мозга с разрывом мягких мозговых оболочек. Первичный очаг травматического некроза захватывал кору и субкортикальную зону. В ткани мозга наблюдалось скопление свернувшейся крови буровато-красного цвета, с разрушенным веществом мозга (детрит), желтовато-красного цвета. Вокруг была видна тонкая полоска диффузного геморрагического пропитывания. Окружающая мозговая ткань белесоватого цвета. Целостность мягкой мозговой оболочки над описанным участком была нарушена. Локализация очага совпадала с локализацией, описанной по МР-томограммам.

Морфологические исследования при окраске гематоксилин-эозином и методом Ниссля показали, что у экспериментальных животных наблюдались обширные ушибы, представленные бесструктурными массами, с геморрагическим инфарцированием, захватывающие кору теменно-височной области большого мозга справа. В большинстве случаев ушиб мозга был представлен компактным очагом, имбибированным кровью. Нередко встречающиеся внутримозговые кровоизлияния были больших размеров по объему повреждения и площади распространения - до 6,0 мм куб.

Кровоизлияние было представлено скоплением в ткани мозга гемолизированных и частично сохранившихся эритроцитов. На периферии его видны макрофаги, нагруженные бурым пигментом - гемосидерином.

В мозговом веществе перифокальной зоны отмечались отек, гиперемия мелких сосудов коры и подкоркового белого вещества: прекапилляров и капилляров, формирующих сети, перикакапиллярный отек. В нервных клетках наблюдались выраженные деструктивно-дистрофические изменения: хроматолиз и гибель нейронов, появление ишемических нейронов, признаками первичного аксонального раздражения (транснейрональные изменения).

В сером веществе появлялись очаги ганглиозноклеточных запустений, в белом веществе - деструктивные изменения в нервных волокнах и нервных пучках.

К 7 суткам происходило очищение очагов первичного травматического некроза, гиперплазия микроглиоцитов, размножение фагоцитов, появление новообразованных сосудов.

Описанные выше морфологические изменения были наиболее выраженными в непосредственной близости от очага ушиба, т.е. в перифокальной зоне, и постепенно ослабевали по мере удаления от него

Экспериментальные изучения капилляров больших полушарий позволило установить, что микроциркуляторное русло головного мозга в остром периоде черепно-мозговой травмы претерпевает выраженные качественные и количественные изменения, затрагивающие как травмированное, так и интактное полушарие.

Проведенные нами исследования не выявили достоверных различий в диаметре, плотности капилляров и в площади обменной поверхности обоих полушарий у интактных животных. Однако диаметр капилляров при заливке тушью был достоверно меньше, чем при окраске на NADPH-диафоразу (табл.1). По всей вероятности такая разница в диаметре капилляров при различных методах их идентификации обусловлена тем, что тушь заполняет только просвет капилляра, а NО-синтаза, вырабатываемая в эндотелиоцитах, визуализируется в стенке, и верифицирует его наружный диаметр. Здесь следует отметить, что при инъекции сосудистого русла мозга тушью капилляры коры головного мозга, выявляются с большей полнотой (в 3 раза больше), чем гистохимическим методом на NADPH-диафоразу. Объяснение кроется в том, что синтез эндотелий-зависимого релаксирующего фактора оксида азота сосредоточен в резистивных сосудах, и по мере уменьшения диаметра микрососудов, количество фермента постепенно уменьшается. Не исключено также, что гистохимический метод позволяет выявлять лишь функционально активные капилляры, эндотелий которых в момент фиксации секретирует NO. Этим можно объяснить более низкую плотность при гистохимическом методе.

В первые сутки после травмы в поврежденном полушарии головного мозга происходит выраженная редукция микроциркуляторного русла. Выявляется неравномерное “обеднение” сосудистого рисунка. Образование мало- и бессосудистых зон при наливке тушь-желатином сосудистого русла, является одним из основных ранних признаков тяжелого травматического повреждения головного мозга. Размеры и форма очагов гипоперфузии значительно варьируют, характерно их ассиметричное расположение. При наливке сосудистого русла тушью выяснено, что к концу первых суток реакцией на повреждение является значительное достоверное сужение капилляров как на стороне травмы (на 36%), так и на интактной стороне (на 28%) и уменьшение относительной плотности капилляров на травмированной стороне на 38% от исходного. В тоже время на симметричном участке в интактном полушарии наблюдался значительный рост плотности капилляров - на 35% от исходных величин. Площадь обменной поверхности капилляров сократилась в 2,5 раза на стороне травмы.

При окраске на NADPH-диафоразу на интактной и на травмированной стороне диаметр достоверно не отличался от исходного, но имел тенденцию к сужению диаметра на стороне травмы. Кроме того, в поврежденном полушарии стенка капилляра была неравномерной, имела выраженные углубления и выпячивания. Такие изменения, возможно, связаны либо с неоднородным распределением фермента, либо с отеком и деформацией эндотелиоцитов, описанных в литературе. Плотность NADPH-диафораза-позитивных капилляров достоверно возрастала как на стороне травмы (на 21%), так и на противоположной стороне (на 12%). Несмотря на уменьшение их диаметра, происходило возрастание площади обменной поверхности с обеих сторон по сравнению с нормой (на 29% в интактном и на 25% в травмированном). Активность NADPH-диафоразы в стенке капилляров коры к концу первых суток течения травматического процесса значительно возрастала практически в 2 раза от исходной величины (табл. 1).

Через 72 часа сохранялась тенденция к сужению диаметра нитроксидергических капилляров от исходных величин, как на стороне травмы (на 14%), так и на интактной стороне (на 11%). Отмечалось достоверное повышение плотности капилляров с положительной реакцией на NADPH-диафоразу в травмированном полушарии (в 1,7 раз), и на противоположной стороне (в 2,1 раза). К концу 3 суток, по мере прогрессирования патологического процесса, наступает незначительный спад активности NO-cинтазы, что выражается в снижении активности NADPH-диафоразы в травмированном полушарии на 12 % (табл.1).

При инъекции тушью в обоих полушариях визуализировалось множество узких капилляров, диаметр которых достоверно отличался от исходных величин в 1,5 раза. На третьи сутки отмечались увеличение плотности капилляров и площади обменной поверхности на стороне травмы в 2 раза по сравнению с предыдущим этапом исследования. При этом величины достоверно не отличались друг от друга в обоих полушариях. Снижение плотности капилляров маркированных тушью в травмированном полушарии возможно связано с феноменом "no reflow", когда реперфузия после травмы на нормальном уровне АД не может восстановить кровоток: после полного или почти полного прекращения кровообращения в очаге повреждения замедляется циркуляция крови в неповрежденных сосудах (в зоне так называемой пенумбры), расположенных около очага. Учитывая выявленное к концу первых суток сужение просвета капилляра (как при инъекционном методе, так и при гистохимическом), можно предположить, что происходит «закрытие» капилляра из-за отека структурных образований его стенки (набуханием клеток эндотелия) и окружающих капилляр тканей мозга и формированием эндотелиальной дисфункции [Иванов В.С. с соавт., 1993].

В сравнении с предыдущим этапом исследования к 7 суткам происходило достоверное увеличение диаметра NADPH-диафораза-позитивных капилляров как на травмированной, так и на интактной стороне. При этом диаметр капилляров на стороне травмы восстанавливался до исходных величин, а в контралатеральном полушарии диаметр капилляров превышал контрольные значения пока зателя на 14%. Достоверно снижалась плотность нитроксидергических капилляров, которая составила на травмированной стороне 114%, а на интактной - 109% от исходных величин.

сосудистый мозговой травма гематоэнцефалический

Таблица 1. Морфологические показатели капилляров в коре больших полушарий головного мозга крысы при черепно-мозговой травме

Достоверность: * - различия значимы по сравнению с контрольной группой (р < 0,05), ** - с предыдущими сутками (р < 0,05)

Менее выражено изменялась площадь обменной поверхности, оставаясь, тем не менее, на 30% выше, чем у интактных животных с обеих сторон. На 7 сутки течения патологического процесса происходит значительное уменьшение активности фермента до 7,45±0,42 ЕОП в клетках эндотелия капилляров, что соответствует нормальным значениям. При инъекционном методе также имело место достоверное расширение просвета капилляров, как на стороне травмы, так и на интактной стороне в сравнении и с предыдущим этапом исследования и с исходными данными. Тенденция к нормализации величины диаметра капилляров в обоих полушариях при различных методах их идентификации может свидетельствовать о включении компенсаторных механизмов, способствующих уменьшению отека и деформации эндотелия. При этом плотность русла в травмированном полушарии была достоверно больше, чем в интактном (разница с нормой составила 26% и 1% соответственно). Аналогичные изменения коснулись площади обмена (табл.1).

При исследовании уровня оксида азота в крови отмечалась сходная динамика NO в плазме крови, как в эксперименте, так и в клиническом течении ЧМТ. Сразу после травмы наблюдалось увеличение уровня оксида азота в крови. Средние величины NO были самыми высокими в первые часы и за 7-дневный контрольный период возвращались к нормальным. Отмечалось резкое падение количества NO в крови к концу первых суток. К 3 суткам уровень NO в крови находился уже в пределах нормальных величин. Через 7 суток течения травматической болезни головного мозга значения NO в крови экспериментальных животных и человека не выходили за пределы референсных значений (рис. 1, 2).

Мы наблюдали, что в течении травматической болезни существует 2 временных промежутка, когда происходит выброс NО: в первые часы после травмы и на 3 сутки. Это согласуется с результатами ряда исследователей [Ziaja M., Pyka J., Machowska A.at al, 2007].

Рис. 1. Уровень NO в сыворотке крови пациентов с ТЧМТ

Рис. 2. Уровень NO в сыворотке крови экспериментальных животных

Начальный непосредственный пик NO в крови после травмы происходит, вероятно, из-за деятельности эндотелиальной NO-синтазы и нейрональной NO-синтазы как физиологическая реакция на травму. Вполне вероятно, что очень быстрое снижение NO к концу 1 суток происходит через его преобразования в другие продукты реакции, такие как пероксинитрит, которые далее неблагоприятно влияют на поврежденную ткань. Возможно также, что снижение NO к концу 1 суток связано со снижением мозгового кровотока и, как следствие, наблюдается уменьшение диаметра капилляров, снижение плотности капиллярной сети поврежденном полушарии к концу первых суток. Второй пик NO на 3 сутки, по-видимому, происходит в результате активации NO-синтазного пути образования оксида азота, и прежде всего прежде всего деятельностью iNOS, поскольку увеличение уровня нитрита почти в 2 раза выходящее за пределы нормальных значений вряд ли возможно в результате активации нейрональной и эндотелиальной NO-синтаз [Bayir H., Kagan V.E., 2005]. Уровень метаболитов NO в крови, повышенный при ЧМТ, согласуется с уровнем NO в поврежденной ткани мозга.

Таким образом нарушение продукции оксида азота эндотелием сосудов головного мозга можно рассматривать как проявление эндотелиальной дисфункции, усугубляющейся при отрицательной динамике течения тяжелой черепно-мозговой травмы. Изменения проницаемости гематоэнцефалического барьера могут возникать уже с первых минут травмы. Первичное повышение проницаемости капилляров головного мозга происходит в результате повреждения клеточных мембран эндотелия, повреждения соединений между эндотелиальными клетками.

Возникновение неадекватной проницаемости барьера способствует проникновению нейроспецифических белков в кровь. Поскольку эндотелиальная дисфункция и нарушение целостности ГЭБ являются важнейшими патогенетическими звеньями травматического повреждения головного мозга, нарушения в нитроксидергической системе являются ключевым звеном в патогенезе эндотелиальной дисфункции. В свою очередь экспрессия белка S-100 в кровеносное русло происходит лишь при нарушении целостности ГЭБ.

При исследовании уровня белка S-100 в крови пациентов с тяжелой черепно-мозговой травмой были получены следующие результаты. В первые часы после травмы отмечалась достоверная разница между уровнями белка S-100 в группах выживших и умерших пациентов. Уровень белка в группе умерших пациентов в этот временной промежуток был в 3,3 раза выше, чем в группе выживших (рис. 3). У всех выживших пациентов имело место достоверное снижение уровня белка S - 100 к 24 часам в среднем на 75% с последующим более плавным снижением вплоть до нормализации к 7 суткам. В группе умерших пациентов к концу первых суток снижение носило недостоверный характер. На 7 сутки уровень S-100 был в группе пациентов с летальным исходом в 3,2 раза выше нормы.

Рис. 3. Динамика белка S 100 в зависимости от исхода травматического повреждения головного мозга

Это объясняется тем, что при отрицательной динамике течения тяжелой черепно-мозговой травмы, нарушение ГЭБ наблюдается в течение длительного времени, следовательно, поступление S-100 в кровь может быть более продолжительным. В таких случаях уровень белка S - 100 снижается незначительно, остается неизменным или же может повышался. Такое волнообразное изменение уровня белка свидетельствует о продолжающемся патологическом процессе в головном мозге и возникновении вторичных реперфузионных повреждений. А в случае благоприятного исхода ЧМТ, тенденция к значительному достоверному снижению уровня белка S - 100 наглядно прослеживается уже на 2 сутки болезни.

Поскольку всем пациентам КТ головного мозга проводилось на 2е сутки и при необходимости на более поздних сроках, характер повреждения головного мозга был известен (табл. 2).

Таблица 2. Уровень белка S-100 в зависимости от вида травматического повреждения головного мозга (по данным КТ)

* - различия значимы по сравнению с контрольной группой (р < 0,05).

В случае диагностирования у пациентов эпидуральной гематомы, уровень маркера при поступлении был в 4,5 раз больше нормы, который к концу первых суток снижался недостоверно, но уже к 7 суткам происходил достоверный регресс показателя до нормальных цифр. При диффузном аксональном повреждении, исходный уровень маркера был достоверно выше, чем в случае с эпидуральной гематомой в 7 раз по сравнению с нормальными значениями, но на 7 сутки нормализации показателя не наблюдалось и составляла 2 нормы). Такая длительная экспрессия маркера в циркуляторное русло обусловлена продолжающимся патологическим процессом. В группе пациентов со сдавлением головного мозга внутримозговыми гематомами различной локализации уже в первые часы после поступления наблюдались более высокие цифры белка, чем в предыдущих группах, в среднем в 70 раз по сравнению с нормальными величинами. К 7 суткам, они значительно уменьшались, оставаясь повышенными в 3 раза от нормы. Такая же динамика получена при обследовании пациентов с множественными контузионными очагами различной локализации.

Анализируя полученные данные, обращает на себя внимание различие в исходных уровнях белка S-100 в зависимости от характера повреждения. Быстрая нормализация показателя и отсутствие значимых подъемов в последующие сутки объясняется тем, что после хирургического устранения причины, которое проводилось в первые 2 суток с момента травмы, не происходило выраженного разрушения ткани мозга, что клинически выражалось в восстановлении сознания до оглушения в среднем на 9 сутки и благоприятном исходе. При массивном повреждении ткани мозга возникает более выраженное и продолжительное нарушение ГЭБ, которое проявляется нарушением физиологических механизмов регуляции микроциркуляции, и нарушением образования NO в стенке капилляров. Это приводит к неадекватной проницаемости барьера, что способствует проникновению нейроспецифических белков в кровь.

Таким образом, мы получили данные, подтверждающие возникновение эндотелиальной дисфункции при ТЧМТ, что выражается в нарушении нарушении целостности ГЭБ. Дискоординация эндотелий-зависимых механизмов регуляции тонуса сосудов сопровождаются нарушением продукции NO в стенке сосуда. Микроскопически наблюдаются выраженные качественные и количественные изменения микроциркуляторного русла головного мозга в остром периоде черепно-мозговой травмы. Обнаруженный в ранние сроки ЧМТ выброс в кровеносное русло маркера повреждения головного мозга подтверждает нарушение целостности ГЭБ.

Заключение

1. При тяжелой черепно-мозговой травме у экспериментальных животных возникает выраженное расстройство кровообращения в зоне первичного и вторичного повреждения коры головного мозга, которое выражается в отеке стенок микрососудов, уменьшении их просвета, изменении плотности сосудистого русла.

2. Реакция капиллярного русла коры больших полушарий в острый период травмы начинается с уменьшения диаметра капилляров и их плотности, а также площади обменной поверхности.

3. В формировании ответной реакции капилляров коры головного мозга на травму вовлекается капиллярная сеть и интактного полушария, что проявляется в нарастании показателя плотности капилляров при снижении их диаметра, при этом площадь обмена остается на прежнем уровне.

4. Течение травматической болезни головного мозга сопровождается увеличением активности NO-синтазы в стенке капилляра, которая возрастает на 46% в течение первых суток.

5. При тяжелой черепно-мозговой травме, существует 2 временных промежутка, в течение которых происходит выброс NО в кровеносное русло: в первые часы и на 3 сутки после травмы, когда уровень метаболитов NO в крови повышается в 1,5 раза по сравнению с нормальными величинами.

6. При тяжелой черепно-мозговой травме происходит массивный выброс в кровеносное русло маркера повреждения головного мозга (белка S-100), что доказывает нарушение целостности ГЭБ. На основании результатов мониторинга содержания белка S-100 возможен ранний прогноз течения и исхода травмы. Содержание белка S100 в плазме крови пациентов с тяжелой черепно-мозговой травмой зависит от характера и тяжести повреждения головного мозга. При благоприятном течении, начиная с конца 1 суток болезни отмечается постепенное снижение количества белка.

Литература

1. Характеристика нитроксидергических капилляров в экспериментальной модели черепно-мозговой травмы у крыс / Полещук А.В., Дроздов К.А., Тарасенко В.Е. и др. // Материалы VIII-й Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины».- Владивосток, 2007. - С. 30.

2. Реакция микроциркуляторного русла в экспериментальной модели черепно-мозговой травмы у крыс / Тарасенко В.Е, Полещук А.В., Молдованов М.А. и др. // Вестник интенсивной терапии. - 2008. - N5 (приложение). - С. 36.

3. Церебропотекторная терапия у больных с изолированной тяжелой черепно-мозговой травмой / Тарасенко В.Е., Полещук А.В., Молдованов М.А. и др. // Вестник интенсивной терапии. - 2008. - N5 (приложение). - С. 27.

4. Анализ экстенивных, интенсивных показателей и сроков нахождения в стационаре пациентов с изолированной ТЧМТ по данным МУЗ ГКБ №2 г. Владивостока / Патлай И. В., Молдованов М.А., Тарасенко В.Е., Полещук А.В. // Материалы IX-й Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием, посвященной 50-летию ГОУ ВПО «ВГМУ» Росздрава «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины». - Владивосток, 2008. - С. 222 223.

5. Молдованов М.А., Тарасенко В.Е., Полещук А.В. Анализ экстенивных, интенсивных показателей и сроков нахождения в стационаре пациентов с изолированной ТЧМТ по данным МУЗ ГКБ №2 г. Владивостока // Материалы V Дальневосточного регионального конгресса с международным участием «Человек и лекарство». - Владивосток, 2008. - С. 101.

6. Молдованов М.А., Тарасенко В.Е., Полещук А. В. Анализ экстенивных, интенсивных показателей и сроков нахождения в стационаре пациентов с изолированной ТЧМТ по данным МУЗ ГКБ №2 г. Владивостока // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2008. - №4. - С. 89.

7. Молдованов М.А., Тарасенко В.Е., Полещук А.В. Диагностика и мониторинг нейронального повреждения у пациентов с изолированной тяжелой черепно-мозговой травмой // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2008. - №4. - С. 70-72.

8. Клименко В.Е., Молдованов М.А., Полещук А.В. Реакция нитроксидергических капилляров головного мозга при черепно-мозговой травме в эксперименте.

9. Клименко В.Е., Молдованов М.А., Полещук А.В. Реакция микроциркуляторного русла головного мозга при черепно-мозговой травме в эксперименте // Материалы X-й Тихоокеанской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины». - Владивосток, 2009. - С. 187-188.

10. Диагностика и мониторинг нейронального повреждения при тяжелой черепно-мозговой травме / Молдованов М.А., Клименко В.Е., Полещук А.В. и др. // Общая реаниматология. - 2010. - №1. - С.17-21.

11. Состояние капилляров микроциркуляторного русла головного мозга в остром периоде экспериментальной черепно-мозговой травмы / Клименко В.Е., Молдованов М.А., Полещук А.В. и др. // Общая реаниматология. - 2010. - №2. - С. 10-14.

12. Исследование динамики повреждения мозга крыс при черепно-мозговой травме методом магнитно-резонансной томографии / Дроздов К.А., Полещук А.В., Клименко В.Е., Молдованов М.А. // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2011. - №1. - С. 94-96.

Размещено на Allbest.ru