Действие препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы головного мозга и сердца после хирургической овариэктомии (экспериментальное исследование)

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Действие препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы головного мозга и сердца после хирургической овариэктомии (экспериментальное исследование)

14.03.06- фармакология, клиническая фармакология

Файзуллина Гульнара Исламовна

Уфа - 2010

Работа выполнена на кафедре фармакологии №2 Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Валеева Лилия Анваровна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Ларионов Леонид Петрович

доктор медицинских наук, профессор Зарудий Феликс Срульевич

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из важнейших задач фармакологии является повышение эффективности и безопасности лекарственных средств, в том числе и препаратов женских половых гормонов, которые применяются для заместительной гормональной терапии в период менопаузы и после хирургической овариэктомии. В последние годы отмечен рост гинекологических операций и «омоложение» контингента оперируемых женщин. Овариэктомия, проведенная в детородном возрасте, сопровождается необратимой утратой репродуктивной функции, изменениями в нейроэндокринной системе. Резко возникающий дефицит половых гормонов способствует возникновению системных изменений в органах и тканях.

До наступления менопаузы у женщин в 3 раза реже встречаются заболевания коронарных артерий, чем у мужчин. После наступления менопаузы частота сердечно-сосудистых заболеваний становится у них одинаковой, а еще позднее женщины даже опережают мужчин. Течение ИБС и структура осложнений этого заболевания у женщин имеет ряд особенностей. Так по данным Доценко, Ю.В., у женщин инфаркт миокарда чаще бывает безболевым либо отмечаются атипичные его симптомы, что нередко затрудняет диагностику. Женщины после инфаркта миокарда чаще страдают психическими расстройствами, хуже поддаются реабилитации, у них позже восстанавливается трудоспособность. Поэтому после овариэктомии и в период менопаузы показана гормонозаместительная терапия. Существует целый ряд высокоэффективных препаратов женских половых гормонов. Наиболее широкое распространение получили комбинированные препараты, в состав которых входят эстрогены и гестагены. Одним из таких препаратов является фемостон-10 («Solvay Pharma), содержащий микронизированный 17в-эстрадиол и дидрогестерон. Однако в нашей стране заместительную гормональную терапию принимают лишь менее 4% женщин с овариэктомическим синдромом. Это обусловлено наличием противопоказаний и повышением риска тромботических, онкологических, сердечно-сосудистых осложнений [Аккер Л.В., 2004]. Все это определяет необходимость поиска новых направлений коррекции постовариэктомического синдрома, исследования молекулярных механизмов действия женских половых гормонов.

Одним из важнейших нейромедиаторов организма является серотонин, который оказывает свое действие, связываясь с 7 типами и не менее 15 подтипами серотониновых рецепторов, присутствующих во всех органах и тканях [Сергеев П.В., 1999].

Серотонин, связываясь с серотониновыми рецепторами сердца и сосудов определяет тонус сосудов, влияет на коронарный кровоток, сердечный ритм, а взаимодействуя с рецепторами мозга, участвует в формировании настроения, полового, пищевого поведения, восприятии боли, когнитивных функций, регуляции цикла сон-бодрствование. Нарушения в серотонинергической системе приводят к возникновению аритмий сердца, нарушений сосудистого тонуса, тромботических нарушений, депрессии, психозов ожирения, мигрени, нарушений мозгового кровообращения, диссомнии [Попова Н.К., 2005, Сергеев П.В., 1999, Bardin L., 2001, Egashira N., 2002].

Однако влияние препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы в период менопаузы и после удалении яичников изучены недостаточно.

Цель исследования. Определить характер действия фемостона и его компонентов на серотониновые рецепторы сердца и мозга крыс после хирургической овариэктомии и при экспериментальном инфаркте миокарда.

Задачи исследования:

1. Определить уровень специфического связывания [³Н]-серотонина с мембранной фракцией гомогената сердца (МФГС) при вытеснении креатинин-серотонином, 5-НТ₁-агонистом - суматриптаном и 5-НТ₃-антагонистом-ондансетроном у крыс после ложной и истинной овариэктомии в сравнении.

2. Оценить влияние 17в-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на уровень специфического связывания меченного лиганда с МФГС овариэктомированных крыс.

3. Определить количество сайтов связывания [³Н]-серотонина в сердце ложновариэктомированных и овариэктомированных крыс в разные сроки экспериментального инфаркта миокарда и после введения препаратов женских половых гормонов.

4. Изучить динамику уровня специфического связывания [³Н]-серотонина с мембранными фракциями гомогенатов мозга (МФГМ) при вытеснении креатинин-серотонином, суматриптпном и ондансетроном у самок крыс после ложной и истинной овариэктомии.

5. Определить уровень специфического связывания [³Н]-серотонина с МФГМ у овариэктомированных крыс на фоне заместительной терапии препаратами женских половых стероидов.

6. Изучить динамику специфического связывания [³Н]-серотонина с серотониновыми рецепторами головного мозга ложноовариэктомированных и овариэктомированных крыс в разные сроки после экспериментального инфаркта миокарда и после введения препаратов женских половых гормонов.

Научная новизна. Изучено специфическое связывание [³Н]-серотонина с МФГС и МФГМ при вытеснении лигандом серотониновых рецепторов серотонин-креатинином, 5НТ₁-агонистом - суматриптаном, 5НТ₃-антагонистом - ондансетроном у крыс с ложной и истинной овариэктомией. Установлено, что после ложной и истинной овариэктомии общее количество мест связывания [³Н]-серотонина и число 5НТ₃-рецепторов в сердце и головном мозге самок крыс увеличивается, а количество 5НТ₁-рецепторов уменьшается. Выявлено модулирующее действие препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы мозга и сердца у овариэктомированных самок. Исследовано состояние серотонинергической системы головного мозга и сердца у ложнооперированных и овариэктомированных крыс в разные сроки инфаркта миокарда. Установлено модулирующее действие 17в-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на серотониновые рецепторы сердца и мозга у кастрированных животных после инфаркта миокарда.

Научно-практическая значимость. Получены новые сведения о влиянии истинной и ложной овариэктомии, экспериментального инфаркта миокарда на серотониновые рецепторы сердца и головного мозга. Полученные данные расширяют представление о роли серотониновых рецепторов в регуляции деятельности сердца и головного мозга в норме и патологии, обосновывают возможность применения средств, действующих на серотонинергические синапсы, для фармакологической регуляции деятельности сердца и мозга в период менопаузы.

Выявлено модулирующее действие препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы сердца и головного мозга после хирургической овариэктомии, экспериментального инфаркта миокарда на фоне хирургической менопаузы, что вносит вклад в теоретическую фармакологию, раскрывая неизвестные аспекты механизма их действия.

Полученные данные могут быть использованы для преподавания фармакологии, кардиологии и гинекологии.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Ложная и истинная овариэктомии увеличивают количество мест связывания серотонина в сердце и мозге крыс, увеличивают количество 5-НТ₃-рецепторов и уменьшают количество 5-НТ₁-рецепторов.

2. Препараты женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на серотониновые рецепторы сердца и головного мозга кастрированных самок с неоднозначным влиянием на различные подтипы рецепторов.

3. При экспериментальном инфаркте миокарда у крыс-самок изменяется уровень специфического связывание [³Н]-серотонина с МФГС и МФГМ. Динамика уровня связывания [³Н]-серотонина отличается у ложнооперированных и овариэктомированных крыс.

4. Препараты женских половых гормонов модулируют уровень специфического связывание [³Н]-серотонина с МФГС и МФГМ при экспериментальном инфаркте миокарда.

Внедрение результатов работы в практику. Полученные данные используются в учебном процессе на кафедрах фармакологии № 1 и № 2 Башкирского государственного медицинского университета. По результатам исследований зарегистрирован патент РФ № 2009138813/14 с приоритетом от 20.10.2009 г. «Средство для модуляции серотониновых рецепторов мозга при посткастрационном синдроме».

Публикации. По материалам исследований опубликовано 8 работ, в том числе 1 публикация в журнале, рекомендуемом ВАК.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на XII Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии». Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 31 мая-9 июня, 2004., 69-й республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины», Уфа, 2004, 71-й республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины», Уфа, 2006

Апробация работы состоялась на межкафедральном заседании кафедр фармакологии № 1 с курсом клинической фармакологии, фармакологии № 2 и ЦНИЛ ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава» в декабре 2009 г.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 138 страницах компьютерного набора текста, состоит из введения, обзора литературы, глав, отражающих результаты собственных исследований, обсуждения полученных результатов и выводов. Работа иллюстрирована 48 рисунками. Библиогафия представлена 56 отечественными и 161 иностранными источниками.

Материалы и методы исследования

Опыты проводили на 500 беспородных крысах-самках массой 140-160 г, содержавшихся в обычных условиях вивария.

Овариэктомию у крыс вызывали путем кастрации под легким эфирным наркозом. Для контроля за эффективностью кастрации у группы крыс в течение 3-х недель ежедневно брали влагалищные мазки (Киршенблат Я. Д., 1989). В качестве контроля были использованы самки, подвергшиеся ложной овариэктомии (разрез, извлечение придатков матки с последующим погружением, швы на мышцы и кожу).

Инфаркт миокарда у крыс вызывали путем перевязки передней нисходящей ветви левой коронарной артерии на 1,5 мм ниже ушка левого предсердия под эфирным наркозом (Коган А. Х., 1979). Для подтверждения ИМ у животных регистрировали ЭКГ в трех стандартных отведениях при скорости движения бумажной ленты 50 мм/с, 1 мВ - 10 мм до начала экспериментов, сразу после воспроизведения ИМ и в динамике. Измерение размеров зоны некроза миокарда после коронароокклюзии производили макрогистохимически по методике Коган А. Х. (Коган А. Х., 1984). Контрольных животных оперировали аналогичным способом, но коронарную артерию не перевязывали, а лишь подводили под нее лигатуру.

Препараты вводились per os с первого дня овариэктомии, ежедневно, в течение 2-х недель. 17в-эстрадиол в дозе 20 мкг/сутки, дидрогестерон 100 мкг/сутки, фемостон в тех же дозах [Femoston, Dufaston, Solvay Farmaceuticals]. Животные, использованные в качестве контроля, получали плацебо по той же схеме.

Животных забивали путем декапитации под легким эфирным наркозом. Выделяли сердце и головной мозг, гомогенезировали, выделяли мембранную фракцию гомогената сердца и мозга путем дифференциального ультрацентрифугирования. Все манипуляции проводились быстро, строго на холоде. Серотониновые рецепторы определяли радиолигандным методом. Связывание [³H]-cеротонина было проведено методами K. B. Asarch, T. M. Shin (1987) и M. W. Hamblin et al. (1987). Для определения уровня общего связывания [³H]-серотонина мембранный препарат с конечным содержанием белка 0,3 - 1 мг/ мл инкубировали в триплете с [³H]-серотонином в концентрации 6 нМ. Неспецифическое связывание определяли точно также, но в присутствии 1000-кратного избытка немеченных лигандов (креатинин-серотонина - для определения общего количества серотонина, 5-НТ₁-агониста - суматриптана - для определения количества 5-НТ₁-рецепторов, 5-НТ₃-антагониста - ондансетрона - для определения количества 5-НТ₃-рецепторов). Реакция была остановлена путем фильтрации проб через фильтры GFC. Фильтры просушивались и помещались во флаконы с 5 мл сцинтиляционной жидкости на основе диоксана. Специфическое связывание вычисляли как разницу между общим и неспецифическим связыванием. Содержание мест связывания выражали в фемтомолях лиганда, связавшегося с 1 мг белка. Белок определяли по Лоури (Lowry et al., 1951).

Статистическую обработку полученных результатов проводили c помощью пакета программ STATISTICA 6.0. Данные представлены в виде среднего значения ± стандартная ошибка среднего (М±SE).

Результаты и их обсуждение

В результате проведенных исследований было установлено, что ложная овариэктомия оказывает влияние на уровень специфического связывания [³H]-серотонина с МФГС. Через 7 и 14 суток общее количество серотониновых рецепторов повышалась более чем в 3 раза по сравнению с интактными животными, число 5-НТ₁-рецепторов уменьшилась через 1 неделю на 50%, а через 2 недели - в 4 раза, количество 5-НТ₃-рецепторов увеличилось через неделю более чем в 10 раз, а через 2 недели возвратилось к исходному уровню (рис. 1).

* - достоверно по сравнению с интактными крысами (р < 0,05). (М±m) из 10 опытов

Рис. 1. Уровень специфического связывания [³H]-серотонина при вытеснении серотонин-креатинином, суматриптаном и ондансетроном с МФГС у крыс после ложной (2 недели) и хирургической овариэктомии (2 недели).

Таким образом, оперативное вмешательство оказывает влияние на серотониновые рецепторы сердца. Характер действия ложной овариэктомии зависит от типа рецепторов сердца. Если общее количество мест связывания, серотонина в сердечной мышце стойко повышается, число 5-НТ₁-рецепторов прогрессивно уменьшается, 5-НТ₃ - после кратковременного повышения возвращается к норме.

После истинного удаления яичников уровень специфического связывания [³H]-серотонина с разными подтипами рецепторов также изменялся неоднозначно. Характер изменений зависел от срока овариэктомии. Если через 1 неделю после удаления яичников количество всех исследуемых рецепторов уменьшалось, то через 2 недели общее количество серотониновых и 5-НТ₃-рецепторов увеличивалось, а 5-НТ₁-рецепторов оставалось пониженным. По данным литературы 5-НТ₁-рецепторы в предсердных миоцитах связаны с мускариновыми К⁺ каналами, а 5-НТ₃-рецепторы через афферентные пути блуждающего нерва регулируют тонус сосудов и ЧСС. Выявленные нами изменения, по-видимому, носят адаптивный характер, они могут лежать в основе патогенетических механизмов развития нарушения сердечного ритма, колебаний АД, сосудистого тонуса в период адаптации после овариэктомии.

Введение 17в-эстрадиола в течение 2 недель овариэктомированным крысам приводило к уменьшению повышенного количества серотониновых и 5-НТ₃-рецепторов, и еще более снизило число 5-НТ₁-рецепторов сердца (рис. 2).

* - достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами, получавшими плацебо (р < 0,05)

Рис. 2. Изменение уровня специфического связывания [³H]-серотонина с МФГС у овариэктомированных крыс под действием препаратов женских половых стероидов

Назначение дидрогестерона возвращало к исходным показателям количества повышенных серотониновых и 5-НТ₃-рецепторов и не влияло на количество 5-НТ₁-рецепторов.

Фемостон также уменьшал общее количество серотониновых рецепторов в сердце, при этом число 5-НТ₁-рецепторов значительно увеличивалось, а количество 5-НТ₃-рецепторов не изменялось.

Таким образом, все изученные препараты оказывают модулирующее действие на серотониновые рецепторы сердца, уменьшая общее количество мест связывания серотонина в сердечной мышце, увеличенное вследствие хирургической овариэктомии. Эстрадиол и дидрогестерон снижают также количество 5-НТ₃-рецепторов_, число которых повышается после овариэктомии. Комбинация эстрадиола и дидрогестерона (препарат фемостон) приводит к потере модулирующего действия на 5-НТ₃-рецепторы. Однако фемостон увеличивает количество 5-НТ₁-рецепторов, сниженное после овариэктомии.

В целом ни один из исследованных препаратов не способен полностью компенсировать те нарушения серотонинергической системы сердца, которые возникают при овариэктомии.

После моделирования экспериментального инфаркта миокарда путем перевязки передней нисходящей ветви левой коронарной артерии у ложноовариэктомировааных крыс общее количество серотониновых рецепторов сердца уменьшилось во все сроки наблюдения. Минимальный уровень отмечен через 7 суток. Инфаркт миокарда вызывал также уменьшение числа 5-НТ₁-рецепторов, с минимумом через 7 суток, а количество 5НТ₃ рецепторов уменьшалось в острейшем периоде (1 сутки) и повышалось в последующие сроки (рис. 3).

Таким образом, экспериментальный инфаркт миокарда влияет на серотонинергическую систему сердца. После перевязки коронарной артерии у крыс с сохраненными яичниками уменьшается общее количество серотониновых и 5-НТ₁ - рецепторов и повышается число 5-НТ₃-рецепторов в сердечной ткани.

* - достоверно по сравнению с ложноовариэктомированными крысами (р?0,05)

Рис. 3. Влияние экспериментального инфаркта миокарда на уровень специфического связывания [³H]-серотонина с МФГС у ложноовариэктомированных крыс в динамике

серотониновый рецептор головной мозг

У крыс с удаленными яичниками общее количество мест связывания серотонина в сердце увеличивалось через 1 сутки, уменьшалось через 3 и 7 суток и вновь повышалось через 14 дней. Для сравнения: в группе ложноовариэктомированных крыс, перенесших окклюзионный инфаркт миокарда, на протяжении всего периода наблюдения общее количество серотониновых рецепторов уменьшалось. Число 5-НТ₁-рецепторов у кастрированных крыс повышалось во все сроки экспериментального инфаркта миокарда. Между тем у крыс с сохраненными яичниками количество 5-НТ₁-рецепторов уменьшалось во все сроки наблюдения. Количество 5-НТ₃-рецепторов у крыс с истинной овариэктомией резко повышалось в 1 сутки с последующим стойким спадом в течение всего срока наблюдения, у ложнооперированных крыс - наоборот, снижение в 1 день коронарооклюзии сменяется подъемом уровня связывания с максимальным значением на 14 день исследования (рис. 4).

* - достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами (р?0,05). M±m, n=10

Рис. 4. Динамика уровня специфического связывания [³H]-серотонина с МФГС у овариэктомированных крыс в разные сроки после коронароокклюзии.

Итак, нами установлено, что при инфаркте миокарда изменяется количество мест связывания серотонина в сердце как у крыс с функционирующими яичниками, так и у кастрированных самок. Изменения носят противоположенный характер.

В ходе дальнейших исследований было выявлено, что заместительная терапия 17в-эстрадиолом снижает повышенную числосеротониновых рецепторов сердца через 1 и 14 суток после коронароокклюзии, 5-НТ₁-рецепторов через 1, 3 и 7 суток, однако существенно его повышает на поздних сроках инфаркта миокарда, уменьшает количество 5-НТ₃-рецепторов через 1 сутки, коррегирует сниженный уровень на 3 сутки, и повышает пониженный на 7 сутки и еще более снижает в поздние сроки экспериментального инфаркта миокарда.

Дидрогестерон практически не влияет на динамику общего количества серотониновых рецепторов сердца во все сроки после коронарооклюзии. Препарат снижает повышенную плотность 5-НТ₁-рецепторов на 7 сутки, но в то же время еще больше повышает повышенный уровень на 1 и 14 сутки экспериментального инфаркта миокарда. Дидрогестерон уменьшает повышенное количество 5-НТ₃-рецепторов в 1 сутки, практически не влияет на 3 день и повышает сниженный уровень на 7 и 14 сутки исследования.

Фемостон уменьшает общее количество серотониновых рецепторов сердца на 1 и 14 сутки и повышает сниженный уровень на 3 и 7 сутки коронарооклюзии, снижает плотность 5-НТ₁-рецепторов в 1, 3 и 14 сутки исследования, еще более повышает на 7 день экспериментального инфаркта миокарда. Фемостон снижает плотность 5-НТ₃-рецепторов сердца в 1 сутки, практически не влияет на 3 сутки, повышает пониженное количество рецепторов на 7 сутки и еще более снижает их на 14 сутки экспериментального инфаркта миокарда.

Таким образом наибольшее модулирующее действие на серотониновые рецепторы сердца в течение инфаркта миокарда оказывает заместительная терапия эстрадиолом и фемостоном. Наиболее чувствительно к препаратам женских половых стероидов общее количество серотониновых рецепторов (рис. 5).

Изучение серотониновых рецепторов головного мозга у самок крыс после ложной овариэктомии показало, что общее количество серотониновых рецепторов через 1 и 2 недели увеличилось более чем 2 раза по сравнению с интактными крысами, число 5-НТ₁-рецепторов в первую неделю снизилось до 64,2%, далее до 27,6%, количество 5-НТ₃-рецепторов повысилось до 139,3% через 1 неделю, с дальнейшим увеличением до 185,9% через 2 недели. Необходимо отметить, что характер изменений плотности серотониновых рецепторов в мозге был сходен с таковым в сердце.

Истинная овариэктомия еще более увеличивает плотность с серотониновых и 5-НТ₃-рецепторов в головном мозге и уменьшает количество 5-НТ₁-рецепторов. Сходная картина отмечалась и в сердце. Однако увеличению общего количества серотониновых рецепторов в сердечной мышце предшествовало их снижение.

* - достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами, получавшими плацебо (р?0,05).(М±m), n=10

Рис. 5. Динамика специфического связывания [3H]-серотонина с МФГС в разные сроки инфаркта миокарда под действием фемостона.

Выявленное нами увеличение количества серотониновых и 5-НТ₃-рецепторов мозга после овариэктомии по-видимому носят адаптивный характер, способствуя изменению полового, пищевого поведения, снижению либидо в период менопаузы. Однако, по данным литературы уменьшение количества 5-НТ₁-рецепторов головного мозга способствует снижению двигательной активности, развитию депрессии, агрессии, ослаблению мнестических функций, а резкое увеличение количества 5-НТ₂-и 5-НТ₃-рецепторов - расстройствам психики.

Далее было исследовано действие препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы головного мозга. Так как хирургическая овариэктомия увеличивала общее количество серотониновых рецепторов, то 17в-эстрадиол и фемостон, уменьшая её, оказывали модулирующее действие. Что касается дидрогестерона, то он еще более увеличивал число серотониновых рецепторов. Уменьшенное, после хирургической овариэктомии количество 5-НТ₁-рецепторов головного мозга 17в-эстрадиол и фемостон еще более снижали, а дидрогестерон его компенсировал. Однако он уменьшал количество 5-НТ₃-рецепторов (рис. 6).

* - достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами, получавшими плацебо (р < 0,05)

Рис. 6. Изменение уровня специфического связывания [³H]-серотонина с МФГМ у овариэктомированных крыс под действием препаратов женских половых стероидов

Таким образом, препараты женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на отдельные типы серотониновых рецепторов, но не способны полностью восстановить серотонинергическую систему мозга, нарушенную вследствие овариэктомии.

Исследование уровня специфического связывания [³H]-серотонина с МФГМ ложноовариэктомированных крыс выявило влияние коронарооклюзии на серотониновые рецепторы мозга. Экспериментальный инфаркт миокарда приводит к уменьшению общего количества серотониновых рецепторов в головном мозге крыс через 1 и 7 дней после коронароокклюзии. Количество 5-НТ₁-рецепторов мозга повышается через 1 и 7 суток. Уменьшение количества 5-НТ₃-рецепторов в первые дни экспериментального инфаркта миокарда через две недели сменяется их резким подъемом.

Итак, экспериментальный инфаркт миокарда у крыс с функционирующими яичниками изменяет плотность серотониновых рецепторов головного мозга. При этом, общее количество мест связывания и число 5-НТ₃-рецепторов преимущественно уменьшается, а плотность 5-НТ₁-рецепторов увеличивается.

У кастрированных крыс резкий подъем общего количества серотониновых рецепторов через 1 день после коронароокклюзии сменяется спадом на 3 и 7 день, с последующим значительным подъемом на 14 день экспериментального инфаркта миокарда.

Плотность 5-НТ₁-рецепторов головного мозга у овариэктомированных крыс повышается во все сроки экспериментального инфаркта миокарда с максимальным значением на 14 день. Максимальное количество 5-НТ₃-рецепторов головного мозга отмечается в 1-й день инфаркта миокарда, минимальное - на 3 день, с возвращением к уровню овариэктомированных крыс без инфаркта миокарда к 7 и 14 дню.

Таким образом, дефицит женских половых гормонов значительно влияет на динамику серотонинергической системы головного мозга в течение экспериментального инфаркта миокарда.

Обращает на себя внимание, тот факт, что у кастрированных крыс с инфарктом миокарда характер изменений количества серотониновых рецепторов в мозге совпадает с таковым в сердце.

Заместительная гормональная терапии оказала влияние на серотониновые рецепторы головного мозга кастрированных крыс с инфарктом миокарда 17в-эстрадиол снижаел повышенный уровень серотониновых рецепторов мозга в 1 и 14 день инфаркта миокарда, повышал сниженный уровень на 3 день, и еще более снижал низкий уровень специфического связывания на 7 день инфаркта миокарда. Препарат снижал повышенный уровень 5-НТ₁-рецепторов головного мозга у кастрированных крыс лишь на 14 день инфаркта миокарда, еще более повышая количество рецепторов в 1, 3 и 7 день инфаркта миокарда. Препарат снижает повышенный уровень 5-НТ₃-рецепторов головного мозга в 1 день инфаркта миокарда, повышает пониженный уровень на 3 день и снижает на 7 и 14 день инфаркта миокарда.

Дидрогестерон снижает повышенный уровень серотониновых рецепторов мозга в 1 и 14 день инфаркта миокарда и повышает сниженный уровень на 3 и 7 день. Повышенный уровень 5-НТ₁-рецепторов под действием препарата снижается в 1 и 14 день инфаркта миокарда, еще более повышается на 3 день коронарооклюзии. Повышенный уровень 5-НТ₃-рецепторов головного мозга снижается в 1 день инфаркта миокарда, пониженный повышается на 3 день, снижается на 7 и повышается на 14 день экспериментального инфаркта миокарда.

Заместительная терапия фемостоном снижает плотность серотониновых рецепторов головного мозга во все сроки экспериментального инфаркта миокарда. Препарат снижает повышенный уровень 5-НТ₁-рецепторов в 1 и 7 день инфаркта миокарда, еще более повышает высокий уровень на 3 день и практически не изменяет его на 14 день экспериментального инфаркта миокарда. Он также снижает повышенную плотность 5-НТ₃-рецепторов головного мозга у овариэктомированных крыс в 1 день инфаркта миокарда, повышает пониженный уровень на 3 день, повышает на 7 день и снижает на 14 день инфаркта миокарда.

В целом гормонозаместительная терапия препаратами женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на серотониновые рецепторы головного мозга крыс с инфарктом миокарда. Наилучшее действие оказывают дидрогестерон и 17в-эстрадиол.

ВЫВОДЫ

1. Ложная овариэктомия увеличивает уровень специфического связывания [³Н]-серотонина с мембранной фракцией гомогената сердца при вытеснении серотонин-креатинином, уменьшает при вытеснении суматриптаном и не влияет при вытеснении ондансетроном. Овариэктомия увеличивает общее количество серотониновых и 5-НТ₃-рецепторов и уменьшает плотность 5-НТ₁-рецепторов сердца.

2. 17в-эстрадиол, дидрогестерон и фемостон оказывают модулирующее действие на серотониновые рецепторы сердца кастрированных крыс. 17в-эстрадиол и дидрогестерон модулируют плотность 5-НТ₃-рецепторов, а фемостон - 5-НТ₁-рецепторов.

3. В течение экспериментального инфаркта миокарда у ложноовариэктомированных крыс уменьшается уровень связывания [³Н]-серотонина с тканями сердца при вытеснении серотонин-креатинином и суматриптаном и повышается при вытеснении ондансетроном. После овариэктомии изменения носят противоположный характер. Препараты женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на серотониновые рецепторы сердца овариэктомированных животных, но не полностью компенсируют возникающие изменения

4. Ложная овариэктомия увеличивает уровень специфического связывания [³Н]-серотонина с мембранной фракцией гомогената мозга при вытеснении серотонин-креатинином и ондансетроном, уменьшает при вытеснении суматриптаном. Овариэктомия способствует еще большему увеличению связывания меченного лиганда с серотониновыми и 5-НТ₃-рецепторами мозга и уменьшению - с 5-НТ₁-рецепторами.

5. 17в-эстрадиол и фемостон оказывают модулирующее действие на уровень связывания [³Н]-серотонина при вытеснении серотонин-креатинином, а дидрогестерон - при вытеснении суматриптаном и ондансетроном.

6. Экспериментальный инфаркт миокарда оказывал влияние на серотониновые рецепторы мозга у ложнооперированных и овариэктомированных крыс. У кастрированных животных уровень связывания [³Н]-серотонина при вытеснении серотонин-креатинином повышался через 1 и 14 суток и снижался через 3 и 7 суток, при вытеснении суматриптаном - повышался во все сроки наблюдения, а ондансетроном - через сутки после коронароокклюзии. Препараты женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на серотониновые рецепторы головного мозга кастрированных крыс. Наилучшее действие оказали дидрогестерон и 17в-эстрадиол.

Практические рекомендации

1. Изменения серотонинергической системы организма при постовариэктомическом синдроме и при инфаркте миокарда рекомендуется учитывать при прогнозировании развития патологических симптомов и при назначении серотонинергических средств.

2. Характер действия препаратов женских половых гормонов на серотониновые рецепторы сердца и мозга необходимо учитывать при их совместном назначении с агонистами и антагонистами серотониновых рецепторов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Валеева, Л.А. Влияние фемостона на серотониновые рецепторы сердца. / Л.А. Валеева, Л.Ф. Максютова, Г.И. Файзуллина // Фармация. - 2009.- № 3 - С.47-49.

2. Файзуллина, Г.И. Изменение уровня связывания 3Н-серотонина с мембранной фракцией гомогената сердца у крыс с овариэктомией при гормонозаместительной терапии. / Г.И. Файзуллина, О.М. Харчилава, Н.В. Кокина // Материалы 69 Республиканской Итоговой Научно-практической Конференции студентов и Молодых ученых РБ с международным участием “Вопросы теоретической и практической медицины.- Уфа, 2004 г.- С. 52.

3. Файзуллина, Г.И. Изменение уровня связывания 3Н-серотонина с мембранной фракцией гомогената мозга при гормонозаместительной терапии у крыс с овариэктомией. / Г.И. Файзуллина, О.М. Харчилава, Н.В. Кокина.// Материалы 69 Республиканской Итоговой Научно-практической Конференции студентов и Молодых ученых РБ с международным участием “Вопросы теоретической и практической медицины” - Уфа, 2004 г.- С. 52-53.

4. Влияние овариэктомии на плотность серотониновых рецепторов головного мозга и коррекция этих изменений фемостоном./ Л.А. Валеева, Г.И. Файзуллина, О.М. Харчилава, Н.В. Кокина.// Материалы III Российской Научной Конференции “Роль природных факторов и туризма в формировании здоровья населения. Иремель-2005” - Уфа, 2005.- С.26-27.

5. Файзуллина, Г.И. Действие препаратов женских половых гормонов на 5НТ серотониновых рецепторов сердца крыс, подвергшихся овариэктомии. / Л.А. Валеева, Г.И. Файзуллина // Материалы 71 Республиканской Итоговой Научно-практической Конференции студентов и Молодых ученых РБ “Вопросы теоретической и практической медицины” - Уфа, 2006.

6. Файзуллина, Г.И. Роль 5НТ3 рецепторов сердца в менопаузальном синдроме и механизм действия женских половых гормонов. / Л.А. Валеева, Г.И. Файзуллина // Материалы 71 Республиканской Итоговой Научно-практической Конференции студентов и Молодых ученых РБ “Вопросы теоретической и практической медицины” - Уфа, 2006.

7. Влияние женских половых гормонов на серотониновые, гистаминовые и адренорецепторы сердца и головного мозга овариэктомированных крыс. /Л.А. Валеева, З.А. Стрижкова, О.М. Харчилава, Н.В. Кокина, Г.И. Файзуллина// XII Международная конференция «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии».Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 31 мая - 9 июня. - 2004. - С. 64-65.

8. Валеева, Л.А. Изменение плотности серотониновых рецепторов сердца при хирургической овариоэктомии. / Л.А. Валеева, Г.И. Файзуллина.// Приоритеты фармацевтической науки и практики, Москва, 31 октября 2005 - 2006.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

5-НТ - 5-гидрокситриптамин

ЦНС - центральная нервная система

ИМ - инфаркт миокарда

МФГС - мембранная фракция гомогената сердца

МФГМ - мембранная фракция гомогената мозга

ЭКГ - электрокардиограмма

Размещено на Allbest.ru