ИЗУЧЕНИЕ ДИНАМИКИ НАКОПЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ В ТРАВЕ МАНЖЕТКИ

Вегетативные и генеративные органы манжетки отличаются по общему качественному составу фенольных соединений. При этом наибольший спектр веществ отмечали на хроматограммах у цветков (до 21), наименьший у осевых органов растения (12). Это объясняется специфическими особенностями физиологических функций каждого из исследованных органов манжетки и согласуется с литературными данными по другим растениям.

Доля флавоноидов в общем качественном составе фенольных соединений в органах преобладала. В стеблях и черешках флавоноиды составили 91%, в цветках - 86%, в листьях - 63%. Из числа доминирующих компонентов на хроматограммах листьев и цветков идентифицировали рутин.

Во всех органах манжетки обыкновенной содержатся флавоноиды; наибольшее содержание их наблюдали в цветках (до 4,11%) и листьях (до 3,76%), наименьшее в стеблях (до 1%) и черешках (до 0,99%). Достоверные отличия в содержании флавоноидов в органах манжетки учтены нами при разработке числовых показателей проекта ФС.

Наблюдали сезонную зависимость качественного состава фенольных соединений по фазам вегетации растения.

В начале вегетации и в период бутонизации доля флавоноидов в качественном составе фенольных соединений практически не претерпевала изменений и составила 44, 43% соответственно. К цветению она достигала максимума - 56% и далее снижалась к фазе созревания плодов до 44%. На хроматограммах фаз вегетации в числе доминирующих веществ идентифицирован рутин.

Содержание флавоноидов в образцах манжетки, заготовленных в разные периоды вегетации растения, находилось в пределах от 2,00% до 3,82%. Концентрация флавоноидов по среднему показателю в фазу бутонизации (3,09 %) превышала незначительно аналогичный показатель в фазах начала вегетации (2,94%), цветения (2,51%) и плодоношения (2,74%). Статистически результаты не имеют достоверных отличий между собой, что позволяет вести заготовку сырья от растений, находящихся в различных фенологических фазах развития.

Наблюдали два цикла развития манжетки (рис. 3). Первый цикл - с мая до середины июля, когда растение проходило все фазы вегетации до увядания. Второй цикл с середины июля до конца вегетации характеризовался появлением молодых побегов, первоначально прикорневыми листьями и в дальнейшем развитием стеблей с листьями и соцветиями.

Содержание действующих веществ в образцах манжетки на фоне изменения морфометрических показателей (рис. 2), составило: флавоноидов от 2,49 до 4,01 %, полисахаридов от 6,99 до 8,76 %, суммы окисляемых веществ от 7,79 до 12,52 % (рис. 3 А).

Содержание аскорбиновой кислоты варьировало от 0,13 до 0,38 %, резкое снижение её содержания с 0,28 до 0,18 % наблюдали после заморозков (рис. 3 Б).

Рис. 2. Динамика массовой доли надземных органов манжетки в образцах сырья, заготовленного в течение вегетационного периода подекадно

В образцах с большей долей листовых пластинок и соцветий наблюдали увеличение содержания БАВ; при возрастании доли стеблей или черешков в сырье манжетки, их содержание снижалось.

Статистический анализ не выявил достоверных различий в содержании БАВ травы манжетки при подекадном сборе. Т.е. изменение доли соцветий и листьев, а также стеблей и черешков не оказывает существенного влияния на содержание флавоноидов, полисахаридов, окисляемых веществ, аскорбиновой кислоты, что благоприятно для заготовки сырья в любую декаду кроме периода заморозков.

В траве манжетки методом восходящей хроматографии на бумаге обнаружили 10 свободных аминокислот, в том числе валин, лейцин, изолейцин, метионин, треонин, аланин, глицин, серин, глутаминовая и аспарагиновая кислота. Присутствие в траве манжетки аланина, глутаминовой и аспарагиновой кислот согласуются с литературными данными.

Динамика содержания аминокислот в сырье манжетки в целом совпадает с таковой для ведущих групп БАВ. Но прослеживается более чётко.

В цветках манжетки накапливалось максимальное содержание свободных аминокислот (в среднем 0,89%). Далее оно уменьшалось в ряду листья (0,74%) > черешки (0,62%) > стебли (0,42%).

Прослеживали явную тенденцию к возрастанию концентрации аминокислот в траве манжетки от фазы начала вегетации к цветению. В период плодоношения наблюдали резкое снижение их концентрации почти вдвое.

При подекадной заготовке сырья в течение периода вегетации максимальные концентрации аминокислот манжетки отмечали в начале циклов развития: 2,41% - в первом цикле и 1,95% - во втором. Это связано с началом ростовых процессов, когда метаболизм аминокислот направлен главным образом на синтез белка (Рис. 3 В). Колебания содержания суммы свободных аминокислот в течение вегетационного периода манжетки были тесно связаны с развитием листовых пластинок. Причём, в первом цикле развития это стеблевые листья, по мере уменьшения их роста и доли в сырье с 21 до 6,5%, уменьшалось содержание аминокислот с 2,41 до 0,60%, во втором - листья прикорневой розетки, при их росте и увеличении доли в сырье количество аминокислот повышалось с 0,60 до 1,95%.

Дальнейшее развитие листьев манжетки второго цикла в осенний период сопровождалось снижением концентрации свободных аминокислот до 0,67% и последующим возрастанием их содержания до 0,97% в образце, заготовленном после заморозков.

Содержание флавоноидов в траве манжетки существенно зависело от условий места произрастания. Так, внутри зоны №1 наибольшее содержание данной группы соединений (5,48%) обнаружено в образце Юсьвенского района, характеризующегося дерново-сильноподзолистыми почвами и пихтово-еловой-травяно-кустарничковой растительностью; наименьшее (2,18%) в образце Соликамского района с дерново-кислыми почвами и сосновыми с берёзой лесами (табл. 3). Колебания содержания флавоноидов прослеживали в образцах внутри других ботанико-географических зон.

Варьирование показателей содержания полисахаридов, окисляемых веществ и аскорбиновой кислоты внутри каждой зоны находилось в пределах ошибки опыта и не имело существенных различий. Средние значения концентраций БАВ манжетки по зонам имеют близкие значения, что позволяет говорить об отсутствии зональной зависимости (табл. 4).

Таким образом, в образцах травы манжетки, заготовленных на территории Пермского края обнаружили значительный потенциальный запас групп активных соединений. В целом, содержание флавоноидов составило от 2,0 до 5,0%, полисахаридов - от 6,5 до 16,0%, окисляемых веществ - от 8,10 до 14,1 %, аскорбиновой кислоты - от 0,1 до 0,2%.

В исследованных образцах травы манжетки обнаружили эссенциальные и условно эссенциальные микроэлементы, их концентрации уменьшались в ряду: Mn (75,9-491,5 мг/кг)> Zn > Cu > V > Cr > Ni > Pb > Co > Mo > Sn (0,15-0,21 мг/кг). Содержание элементов, отражающих антропогенную нагрузку на растительные объекты, уменьшалось в ряду: Ti (113,7-515,0 мг/кг)>Sr >Ba >Zr >Y >Nb >W >Sc >Ga >Yb >Bi > Ag (0,01-0,08 мг/кг).

Содержание свинца (0,68-2,06мг/кг) в образцах не превышало предельно допустимые концентрации (ПДК), установленные СанПиНом 2.3.2.1078-01 и ЕФ5.

Рис. 3. Динамика содержания: А - БАВ в траве манжетки, заготовленной подекадно; Б - аскорбиновой кислоты в траве манжетки; В - свободных аминокислот в траве манжетки

Таблица 3

Среднее содержание БАВ в образцах травы манжетки, заготовленных в ботанико-географических зонах Пермского края

Примечание: * - отсутствие данныхВарьирование показателей содержания микроэлементов в образцах манжетки между зонами и внутри ботанико-географических зон отражает геохимические особенности почв мест произрастания. Вышеизложенное даёт основание считать микроэлементы биологически активными веществами травы манжетки, а их количество подтверждает экологическую чистоту сырья.

Ресурсоведческие исследования проводили в Пермском районе на конкретных зарослях, объективно представляющих типичные места произрастания и фитоценозы манжетки обыкновенной с различной степенью её участия и типом луга, характерных не только для зоны Урала, но и средней полосы России (луг 1 - злаково-манжетково-васильковый, 2 - разнотравно-злаковый, 3 - вейниково-разнотравный, 4 - клеверно-злаково-разнотравный).

Биологический запас воздушно-сухого сырья (БЗС) исследованных лугов составил от 1 до13 тонн; эксплуатационный запас сырья (ЭЗС) - от 0,6 до 9 тонн; возможный ежегодный объём заготовки (ВЕОЗ) - от 0,2 до 3 тонн.

На суммарной площади исследуемых зарослей в 11,6 га можно заготовить 4,4 тонны травы манжетки при однократном отчуждении надземной фитомассы.

На этих лугах проводилось сенокошение в двадцатых числах июня, в период цветения манжетки обыкновенной. Первое определение запаса сырья проведено после сенокошения, второе (в отаве) - в первых числах сентября. В отаве на луге №1 срезали надземную часть цветущих экземпляров манжетки в середине августа (отава 1) и аналогично другим лугам в начале сентября (отава 2). Плотность запаса сырья (ПЗС) манжетки увеличивалась с 390 кг/га при ранней заготовке в отаве (отава 1) до 700 кг/га в сентябре. Таким образом, отавность манжетки изменялась от 36 до 64%, в зависимости от срока повторного отчуждения фитомассы (табл. 5).

Таблица 4

Среднее содержание БАВ в образцах манжетки обыкновенной,заготовленных в ботанико-географических зонах Пермского края

В целом на исследуемых лугах, отавность манжетки находилась в пределах от 268 до 1294 кг/га, что составляло 56 - 67 % от фитомассы травы манжетки за первый укос. Прогноз запасов сырья манжетки на 4-х отавных лугах в сумме определён в 8,1 тонны (эксплуатационный запас), т.е. 62% дополнительно от массы сырья основного укоса.

Прогноз запасов травы манжетки на типичных местах обитания в Пермском районе Пермского края составляет 21 тонну ЭЗС.

Таким образом, сырьевая база манжетки обыкновенной в Пермском крае перспективна для промышленного сбора сырья.

При химической таксации образцов травы манжетки и статистической обработке данных установили, что содержание флавоноидов в образцах с генеративными побегами и без них, заготовленных во время основного укоса и в отаве, не имело существенных отличий (рис.4).

Содержание полисахаридов в цветущих экземплярах манжетки обыкновенной составило от 6,53 до 7,47%; окисляемых веществ - от 8,61 до 11,52%; аскорбиновой кислоты - от 0,15 до 0,16%. Достоверных различий между лугами по содержанию в траве манжетки полисахаридов, окисляемых веществ и аскорбиновой кислоты не обнаружено.

На основании выше изложенного, рекомендуем проводить заготовку сырья при первом укосе и с отавных лугов от цветущих и не цветущих экземпляров манжетки обыкновенной следующих вариантах: 1- в нескошенном фитоценозе, выбирая из травостоя траву манжетки;2 - из свежескошенного сена, выбирая траву манжетки; 3 - в отаве, срезая надземную часть.

Таблица 5

Ресурсоведческая характеристика лугов и запасы травы манжетки Пермского района

Рис. 4. Содержание флавоноидов в траве манжетки

Разработан проект «Инструкции по заготовке травы манжетки», регламентирующий сроки и приёмы заготовки сырья.

ИССЛЕДОВАНИЯ К РАЗРАБОТКЕ ПРОЕКТА ФАРМАКОПЕЙНОЙ СТАТЬИ «МАНЖЕТКИ ТРАВА»

Установили показатели качества по внешним и микроскопическим признакам. При определении подлинности сырья диагностическое значение имеют морфолого-анатомические характеристики листовой пластинки, цветка и стебля. Установлены числовые показатели; определена микробиологическая чистота травы манжетки. Установлена стабильность показателей качества травы манжетки в течение 3 лет.

Для раздела «Количественное определение» проекта ФС разработана и валидирована методика оценки качества травы манжетки по содержанию суммы флавоноидов в пересчёте на рутин. Дифференциальные спектры светопоглощения комплекса флавоноидов с 2% раствором алюминия хлоридом в извлечениях из травы 20 видов рода Alchemilla, травы манжетки смешанных образцов совпадают и характеризуются чётко выраженным максимумом поглощения при длине волны 405 ± 5 нм. Максимум поглощения дифференциальной кривой флавоноидов травы манжетки совпадает с одним из максимумов поглощения комплекса РСО рутина с AlCl3. Аналитическая длина волны 405 нм (рис. 7).

Рис. 5. Спектры комплекса флавоноидов извлечения травы манжетки и РСО рутина с AlCl3

Оптимальные условия извлечения флавоноидов: размер частиц сырья - ? 0,5 ? 1,0 мм, экстрагент- 70% этиловый спирт, трёхкратная экстракция по 30 мин. Соотношение объёмов извлечения и 2% раствора AlCl3 - 1 : 2. Образование устойчивого комплекса происходит 30 минут. Комплекс стабилен в течение часа. Относительная ошибка определения составила 2,59 % (табл. 6).

Таблица 6

Метрологическая характеристика методики количественного определения суммы флавоноидов в траве манжетки

Коэффициент корреляции линейного регрессионного графика составил r= 0,994, уравнение регрессии y = b•x + a, при b =0,015 , a = - 0,1074. Соблюдается линейная зависимость между величинами оптической плотности и содержанием флавоноидов в извлечениях из травы манжетки в интервале 25 - 150% от номинального значения определяемой величины.

Отсутствие систематической ошибки подтвердили методом добавок различных концентраций РСО рутина в извлечение из травы манжетки, результаты которого показали, что ошибка опыта находится в пределах ошибки единичного определения (табл. 7).

Испытания внутри и межлабораторной воспроизводимости валидируемой методики, проведённые в лабораториях кафедры фармакогнозии и РИЦ «Фарматест» ПГФА. указывают на прецизионность разработанной методики в условиях внутри и межлабораторной воспроизводимости результатов.

Таблица 7

Результаты количественного определения суммы флавоноидов в

траве манжетки с использованием метода добавок РСО рутина

Валидационная оценка методики, проведённая по характеристикам: специфичность, линейность, правильность и прецизионность (внутри и межлабораторная) в соответствии с проектом ОФС «Валидация фармакопейных методов», подтвердила её пригодность для стандартизации травы манжетки.

ЭКСТРАКЦИОННЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФОРМЫ ИЗ ТРАВЫ МАНЖЕТКИ

Настой 1:10 содержит больше БАВ (табл. 8) и проявляет достоверно высокую фармакологическую активность (табл. 13).

Таблица 8

Содержание флавоноидов, окисляемых веществ, полисахаридов и

аскорбиновой кислоты в настоях травы манжетки, %

Примечание. tк 2,2278.

В настое травы манжетки идентифицировали рутин из 8 обнаруженных веществ фенольной природы; свободные аминокислоты: лизин, гистидин, D,L-треонин, изолейцин, D,L-метионин, валин, глицин, глутаминовая и аспарагиновой кислоты.

Для сквозной стандартизации сырья и настоя предложена адаптированная для настоя методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчёте на рутин (табл. 9).

Таблица 9

Метрологические характеристики методики количественного

определения суммы флавоноидов настоя травы манжетки

Для получения экстракта травы манжетки сухого использовали параметры соотношения сырья и экстрагента, размера частиц установленные для настоя. Для экстракта дополнительно выбраны параметры: экстрагент (табл. 15); температура экстрагирования; продолжительность и кратность числа экстракций (равновесного состояния процесса настаивания).

Траву манжетки измельчают до размера частиц >1мм ? 3мм, экстрагируют водой очищенной в соотношении сырье : экстрагент - 1 : 10 методом ускоренной дробной мацерации в экстракторе при температуре 900± 50С в три этапа: в течение 1часа, 45 мин. и 30 мин. Объединенные извлечения отстаивают, фильтруют, декантируют, упаривают в вакууме до 1/10 объёма и высушивают в распылительной сушилке.

В составе экстракта идентифицировали рутин из 8 веществ фенольной природы и 9 из 11обнаруженных аминокислот, в их числе лейцин, изолейцин, метионин, треонин, лизин, аланин, глицин, аспарагиновая и глутаминовая кислоты.

Содержание эссенциальных и условно эссенциальных микроэлементов в экстракте уменьшалось в ряду: Mn (369,0мг/кг) > Cr = V > Ni = Cu = Zn > Co > Pb > Sn > Mo (0,74мг/кг). Концентрация микроэлементов, отражающих антропогенную нагрузку уменьшалась в ряду: Ti (822,0 мг/кг) > Ba > Sr > Zr > Y = Nb > Sc = Ga > Ge = Be > Bi = Yb > Ag (0,06мг/кг). Содержание тяжёлых металлов Pb (2,55 мг/кг) не превышает предельно допустимые концентрации (ПДК), установленные СанПиНом 2.3.2.1078-01 и ЕФ5.

Для сквозной стандартизации экстракта предложена адаптированная методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчёте на рутин. Методика обладает хорошей воспроизводимостью, относительная ошибка среднего измерения при доверительной вероятности 95% составила - 3,61% (табл. 10).

Таблица 10

Метрологическая характеристика спектрофотометрического метода количественного определения флавоноидов в экстракте манжетки сухом

Разработаны показатели качества и включены в проект ФСП «Экстракт травы манжетки сухой».

Содержание БАВ в экстракте манжетки сухом 5 серий составило: флавоноиды 3,7 - 4,1%, окисляемые вещества - 4,7 - 5,5%, полисахариды - 24,3- 33,4%, аскорбиновая кислота - 0,3 - 0,3% (табл. 11).

Таблица 11

Содержание биологически активных веществ в экстракте манжетки сухом, %

Определены технологические характеристики экстракта: содержание влаги- 3,72%, насыпную массу при свободном падении- 0,3 г/см3, насыпную массу при уплотнении- 0,4 г/см3. Определение сыпучести и угла естественного откоса экстракта с помощью метода вибрирующей воронки на приборе ВП-12А показало, что экстракт травы манжетки сухой не сыпучий.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НАСТОЯ И ЭКСТРАКТА ИЗ ТРАВЫ МАНЖЕТКИ

В максимально введенной перорально дозе настой травы манжетки каких-либо проявлений токсического действия не выявлено. ЛД 50 настоя травы манжетки превышает 11,7 г/кг. Максимально введенная перорально доза экстракта травы манжетки составляет 10 г/кг. Расчетная ЛД 50 экстракта травы манжетки равна 8 г/кг. Настой и экстракт травы манжетки относятся к малотоксичным (табл. 12).

Гипогликемическое действие у настоя и экстракта травы манжетки подтверждено на модели экспериментального диабета, индуцированного аллоксаном.

Таблица 12

Острая токсичность

Настой и экстракт травы манжетки не изменяли уровня глюкозы в крови у интактных крыс во все сроки наблюдения. Гипогликемический эффект проявлялся уменьшением глюкозы в крови по сравнению с фоном во все сроки наблюдения. О чём свидетельствуют достоверные отличия между уровнем глюкозы в крови контрольных (нагрузка глюкозы) и опытных (настой травы манжетки + нагрузка глюкозы, экстракт травы манжетки + нагрузка глюкозы) животных.

Таблица 13

Сравнительная оценка гипогликемической и гиполипидемической активности настоя травы манжетки и настоя черники

Примечание: * = p < 0,05; ** = p < 0,01; *** = p < 0,001; 1? по сравнению с контролем; 2- по сравнению с аллоксановым диабетом; 3 - по сравнению с настоем травы манжетки (в равных концентрациях)

О специфичности данного эффекта свидетельствует дозозависимый эффект настоя и экстракта. Принципиальное значение имеет их способность проявлять гипогликемическое действие независимо от тяжести химически вызванного нарушения углеводного обмена.

Поскольку аллоксановый диабет сопровождается также и нарушением липидного обмена, то выявленная способность настоя и экстракта травы манжетки снижать уровень общего холестерина и триглицеридов свидетельствует о наличии гиполипидемического действия. Таким образом, настой и экстракт травы манжетки обладают типичными фармакологическими свойствами, присущими антидиабетическим препаратам. Антидиабетическая активность настоя травы манжетки несколько уступала фитопрепарату сравнения - настою побегов черники (табл. 13).

Сравнительный анализ влияния фитопрепаратов на аллоксановый диабет показал, что экстракт травы манжетки сухой в дозе 50 мг/кг по выраженности гипогликемического действия достоверно уступает настою черники. Экстракт травы манжетки сухой в дозе 50 мг/кг достоверно превосходил настой черники по влиянию на уровень общего холестерина. Аналогичная ситуация наблюдалась и в отношении снижения уровня триглицеридов. В этом случае экстракт травы манжетки сухой в дозе 50 мг/кг превосходил настой черники. Так, если экстракт травы манжетки сухой снижал уровень триглицеридов в 3,2 раза, тогда как настой черники - лишь в 2,1 раза (p < 0,001) (табл. 14).

Установлено, что сухие спиртовые экстракты, полученные при использовании в качестве экстрагента этиловый спирт, в дозе 50 мг/кг не проявили существенной гипогликемической активности на модели аллоксанового диабета (табл. 14). Спиртоводные экстракты травы манжетки не перспективны в качестве гипогликемических средств.

Таблица 14

Влияние сухих спиртовых экстрактов травы манжетки

на уровень глюкозы в крови у крыс с аллоксановым диабетом

Примечание: *** = p < 0,001; 1 ? по сравнению контролем; 2 - по сравнению с водным экстрактом

Таблица 15

Влияние настоя травы манжетки на иммунодефицит

Примечание: ** = p < 0,01; *** = p < 0,001;

1? по сравнению с контролем; 2- по сравнению с циклофосфаном

В генезе сахарного диабета существенную роль играют и аутоиммунные процессы. На модели лекарственно индуцированного иммунодефицита установлено, что настою и экстракту травы манжетки присуще самостоятельное иммуномодулирующее действие. Об этом свидетельствовало устранение лейкопении, уменьшение патологических сдвигов морфологического состава крови, которые типичны для вызванного циклофосфаном иммунодефицита. Настой и экстракт травы манжетки устраняли иммунодепрессивное действие циклофосфана на Т- и В-лимфоциты (табл. 15).

По-видимому, данный эффект связан с прямым влиянием их на соответствующие популяции лимфоцитов. Гипотеза подтверждена влиянием фитопрепаратов на экспрессию рецепторов Т-лимфоцитов. Настой и экстракт травы манжетки устранял эффект трипсина в отношении Т-рецепторов (табл. 15).

Таблица 16

Влияние настоя травы манжетки на фагоцитоз на фоне иммунодефицита

Примечание: ** = p < 0,01; *** = p < 0,001;

1? по сравнению с контролем; 2- по сравнению с циклофосфаном

Иммунокорригирующее действие настоя и экстракта травы манжетки включает ещё и фагоцитозстимулирующий эффект. Фитопрепараты манжетки восстанавливали фагоцитоз у крыс с экспериментальным иммунодефицитом (табл. 16).

Таким образом, настой и экстракт травы манжетки сухой обладают типичными фармакологическими свойствами, присущими антидиабетическими препаратам и иммунокорректорам.

ВЫВОДЫ

1. Результаты исследований по морфологии, анатомии, химическому составу травы манжетки и литературные данные позволили объединить виды рода Alchemilla L. под названием Alchemilla vulgaris L., как производящего растения для заготовки сырья «Alchemillae herba».

2. На основании результатов эколого-ценотической характеристики, морфометрического анализа и динамики накопления БАВ, исследований по срокам и приёмам заготовки разработана «Инструкция по заготовке травы манжетки».

3. Сырьевая база манжетки обыкновенной в Пермском крае перспективна для промышленного сбора сырья. Прогноз запасов травы манжетки в Пермском районе Пермского края составил 21 т эксплуатационного запаса сырья.

4. Установлена возможность заготовки травы манжетки в 2 срока: основной укос в период массового цветения и в период отрастания в отаве. Сбор сырья на отавных лугах позволит увеличить объёмы заготовки травы манжетки до 62% дополнительно от массы сырья основного укоса.

5. Разработан проект ФС «Alchemillae herba - манжетки трава», регламентирующий качество сырья манжетки. Предложена валидированная методика количественного определения в траве манжетки суммы флавоноидов в пересчёте на рутин. Установлены показатели подлинности и доброкачественности сырья.

6. Определены условия получения экстракта травы манжетки сухого, обеспечивающие максимальное содержание флавоноидов, полисахаридов, аскорбиновой кислоты, суммы окисляемых веществ и фармакологическую активность. Разработан проект ФСП «Extractum herbae Alchemillae siccum» - «Экстракт травы манжетки сухой» и составлена технологическая схема получения экстракта травы манжетки сухого.

7. Выявлена гипогликемическая, гиполипидемическая и иммунокорригирующая активность настоя и экстракта травы манжетки сухого, что позволяет рассматривать траву манжетки как лекарственное средство и сырьё для получения новых антидиабетических средств и иммунокорректоров растительного происхождения.