Клинико-диагностическое значение исследования активности аденозиндезаминазы, АМФ-дезаминазы и адениндезаминазы в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных системной склеродермией
Исследование активности энзимов адениловой ветви в процессе стационарного лечения. Выявление энзимологических особенностей крови больных системной склеродермией, способствующих раскрытию патогенетических механизмов, характера течения и стадии болезни.
Рубрика | Медицина |
Вид | автореферат |
Язык | русский |
Дата добавления | 24.07.2018 |
Размер файла | 52,8 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
1
Размещено на http://www.allbest.ru/
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ, АМФ-ДЕЗАМИНАЗЫ И АДЕНИНДЕЗАМИНАЗЫ В ЛИЗАТАХ ЛИМФОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И ПЛАЗМЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИЕЙ
14.00.39 - ревматология
Абрамов Николай Борисович
Волгоград - 2009
1. Общая характеристика работы
Актуальность проблемы. Системная склеродермия (ССД) или системный склероз (по МКБ-10:М34) является относительно редким заболеванием (первичная заболеваемость от 3,7 до 19,0 на 1 млн. населения в год). Но учитывая, что ССД развивается в наиболее трудоспособном возрасте (30-45 лет), поражает преимущественно женщин, характеризуется прогрессирующим, инвалидизирующим течением, значительным ухудшением качества жизни и сокращением ее продолжительности, высокими материальными затратами на лечение, борьба с этим заболеванием является значимой актуальной медико-социальной проблемой. Сложность борьбы усугубляется неясностью этиологии и патогенетических механизмов ССД, многообразием терапевтических подходов и их недостаточной эффективностью, отсутствием методов профилактики. Кроме того, даже при точно установленном диагнозе ССД нередко бывает сложно разграничить фазу клинической ремиссии и обострения процесса, так как довольно часто (40-50%) обострение заболевания течет субклинически на фоне малоизмененных лабораторных показателей, что приводит к запоздалому назначению адекватной терапии. Поэтому поиск и разработка новых параклинических методов, способствующих своевременному распознаванию минимальных проявлений активации «склеродермического» процесса, является также актуальной задачей практической ревматологии.
В патогенезе ССД важную роль играют нарушения метаболических и иммунологических процессов (В. Насонова, 1986; Д. Лебедев, 1988), и поэтому в решении диагностических и патогенетических проблем перспективным направлением является изучение пуринового метаболизма (ПМ) с помощью определения активности энзимов, катализирующих реакции метаболизма пуринов.
Пуриновые метаболиты участвуют в синтезе нуклеиновых кислот, созревании, пролиферации и дифференциации иммунокомпетентных клеток, регуляции многих жизненноважных функций организма, в том числе и иммунных, а энзимы, регулирующие обменные реакции пуринов, являются весьма чувствительными индикаторами изменений метаболизма и иммунного статуса (В. Уманский и др., 1989; Н. Дмитренко, 1990). Имеется много данных о нарушениях ПМ и изменениях активности энзимов этого цикла при остеоартрозе, ревматоидном артрите, системной красной волчанке в сыворотке крови, но отсутствуют сведения об изменениях активности энзимов ПМ при ССД. Учитывая это, нами были проведены исследования активности некоторых энзимов ПМ: аденозиндезаминазы (АДА), АМФ-дезаминазы (АМФДА) и адениндезаминазы (АД) параллельно в трех биологических средах: в лимфоцитах, эритроцитах и плазме крови больных ССД. Эти энзимы действуют на различных этапах ПМ, но являются звеньями одного цикла, и по их активности представляется возможным суждение об изменениях адениловых метаболитов при ССД.
Цель исследования. Повышение качества диагностики активности патологического процесса при ССД, характера течения и стадии болезни, объективизации контроля эффективности лечения больных ССД с использованием показателей активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови и выяснение особенностей пуринового метаболизма при ССД и бляшечной склеродермии (БСД), способствующих раскрытию патогенетических механизмов и дифференциации этих заболевания.
Задачи исследования.
1. Отработать методы выделения лимфоцитов и эритроцитов из венозной крови и методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови здоровых людей, установить референтные величины (условную норму) активности этих энзимов у здоровых, изучить зависимость энзимных показателей от пола и возраста.
2. Изучить активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в процессе стационарного лечения в зависимости от степени активности процесса, характера течения, стадии болезни при поступлении в стационар, через 10-12 дней лечения и по окончании стационарного лечения.
3. Выявить энзимологические особенности крови больных ССД, способствующие уточнению степени активности патологического процесса, характера течения и стадии болезни.
4. Изучить корреляционные связи между активностями изученных энзимов в плазме, лимфоцитах и эритроцитах больных ССД с различной активностью патологического процесса, а также корреляционные связи между активностью энзимов в лизатах лимфоцитов и иммунологическими показателями: иммуноглобулинами, ЦИК и АНФ.
5. Определить наиболее оптимальный набор энзимных показателей крови больных ССД, способствующий выявлению минимальной активности патологического процесса.
6. Оценить возможность использования энзимных показателей крови в качестве дополнительных объективных критериев эффективности проводимой терапии больных ССД.
7. Оценить степень влияния на энзимные показатели крови больных ССД активности процесса, характера течения и стадии болезни.
8. Исследовать активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных БСД и сравнить энзимные профили крови больных ССД и БСД на предмет выявления энзимных различий между ними.
Научная новизна. Впервые в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД было проведено параллельное комплексное исследование активности трех энзимов адениловой ветви ПМ: АДА, АМФДА и АД в процессе стационарного лечения и показано, что изученные энзимные показатели в комплексе с клиническими данными способствуют уточнению степени активности патологического процесса, характера течения, стадии болезни и объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД. Показано, что изменения активности ферментов обусловлены клиническими особенностями заболевания. Впервые изучены корреляционные связи между активностями энзимов в плазме, лимфоцитах и эритроцитах, а также связи между лимфоцитарными энзимами и иммунными показателями и показаны их взаимосвязи. Выявлены существенные энзимные нарушения в лимфоцитах, способные оказать негативное влияние на иммунокомпетентные клетки и регуляцию иммунных процессов при ССД. Выявлены энзимологические особенности крови больных ССД и БСД, способствующие их дифференциации.
Практическая значимость. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в комплексе с клиническими данными могут быть использованы в клинической практике для выявления и уточнения степени активности патологического процесса, характера течения, стадии болезни, что способствует назначению индивидуализированной, адекватной терапии. В процессе лечения контроль динамики энзимных показателей способствует объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД, прогнозированию ее длительности. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах клеток и плазме крови в комплексе с клиническими данными способствуют дифференциации ССД и БСД.
Основные положения, выносимые на защиту. Показатели активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД могут быть использованы в качестве дополнительных параклинических данных для ранней диагностики минимальных проявлений обострения заболевания, уточнения степени активности патологического процесса, характера течения, объективизации оценки эффективности проводимой терапии, дифференциации ССД и БСД.
Внедрение в практику. Методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови с целью выявления минимальной активации патологического процесса при ССД, уточнения степени активности процесса, контроля за эффективностью проводимой терапии внедрены в практику работы муниципального учреждения здравоохранения «Городская клиническая больница № 25» г. Волгограда. С результатами энзимных исследований, возможностями энзимной диагностики ССД, их перспективой и значимостью систематически знакомятся студенты Волгоградского государственного медицинского университета, аспиранты, клинические ординаторы, практические врачи на лекциях, научно-практических и клинических конференциях.
Публикации и апробация работы. Основные положения диссертации опубликованы в 13 печатных работах. Материалы диссертации ежегодно (2005, 2006, 2007, 2008 гг.) докладывались на научно-практических конференциях ГУ НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, Волгоградского государственного медицинского университета и заслушивались на заседаниях ученого совета ГУ НИИ КиЭР РАМН совместно с кафедрой госпитальной терапии Волгоградского государственного медицинского университета.
2. Материал и методы исследования
Под наблюдением в условиях стационара наблюдались 54 больных ССД, из которых 48 (88,9%) женщин и 6 (11,1%) мужчин. Средний возраст больных - 43,1±1,08 (у=7,9) лет, средняя продолжительность заболевания - 8,1±0,6 лет. Основную прослойку составили больные в возрасте 41-50 лет (51,8%), с длительностью болезни 6-10 лет (44,4%). В соответствии с диагностическими критериями (В. Насонова и др., 1989) I степень активности патологического процесса установлена у 18 (33,3%), II степень - у 29 (53,7%) и III степень - у 7 (13%) больных, хроническое течение заболевания - у 22 (40,7%), подострое - у 27 (50%) и острое течение - у 5 (9,3%) больных. I стадия болезни определялась у 18 (33,3%), II стадия - у 36 (66,7%) больных. При I степени преобладало хроническое течение (83,3%), при II степени - подострое (75,9%) и при III степени - острое течение (71,4%). При длительности болезни до 5 лет преобладала I стадия (84,6%), 6-10 лет - II стадия (70,8%), а при длительности свыше 10 лет у всех больных была II стадия болезни. При поступлении в стационар суставной синдром отмечался в 98,1% случаев, кожный -- в 96,3%, сосудистый -- в 94,4% и мышечный синдром -- в 79,6% случаев. Поражения легких наблюдались в 77,8%, желудочно-кишечного тракта -- в 79,6%, сердца -- в 74,1%, почек -- в 37% случаев. Чаще наблюдались сочетанные поражения внутренних органов.
В качестве группы сравнения были больные с бляшечной склеродермией, клиническая картина которой, особенно на дебютной стадии, весьма сходна с больными ССД. Под наблюдением в амбулаторных условиях наблюдались 15 больных БСД, из которых 12 (80%) женщин и 3 (20%) мужчин. Средний возраст больных -- 41,80,7 лет, длительность болезни -- 4,20,3 лет. У больных наиболее часто отмечались поражения кожи туловища (80%), конечностей (33,3%) и довольно редко (13,3%) -- кожные покровы лица. Количество очагов кожных поражений колебалось от 1 до 10-12. Некоторые очаги носили сливной характер. Большинство очагов поражения кожи находились в стадии эритемы и уплотнения (индурации), а в 1/3 очагов наблюдались стадии атрофии. Наиболее частые жалобы на чувство онемения, жжения, зуд в очагах поражения (86,7%), раздражительность (40%), боли в сердце (26,7%), артралгии (26,7%). Повышение СОЭ, количества лейкоцитов, гамма-глобулинов, СРБ выявлено у больных БСД в 20% случаев.
Контрольную группу составили 30 практически здоровых людей.
Выделение лимфоцитов, эритроцитов из венозной крови проводилось по методике Bцyum (1980) с использованием лимфосепа (JCN Biomedical) с плотностью раствора 1,077-1,079 г/мл. Лизаты клеток готовились путем замораживания-оттаивания и центрифугирования. Активность энзимов в лизатах клеток рассчитывалась для лимфоцитов в нмоль/мин на 1 мл, содержащий 1Ч107 клеток (до лизиса), для эритроцитов в нмоль/мин на 1 мл, содержащий 1Ч109 клеток. Определение активности АДА в лизатах клеток и плазме крови проводилось по методу R. Martinek (1963), АМФДА - с использованием цветной реакции Бертло (1984), АД - по методу T. Sakai et al. (1978). Энзимные исследования у больных ССД проводились при поступлении в стационар, через 10-12 дней лечения и перед выпиской, а у больных БСД -- однократно при поступлении. У всех больных определялись: общий анализ крови и мочи, фибриноген, общий белок и белковые фракции, СРБ, иммуноглобулины А, М, G, ЦИК, АНФ, антитела к н-ДНК, сиаловые кислоты. Использовались также инструментальные методы исследований (ЭКГ, УЗИ, рентген-исследования и др.). В лечении использовались НПВП, глюкокортикоиды, сосудорасширяющие препараты (трентал, курантил, кавинтон), антиаггреганты, метотрексат, лидаза, Д-пеницилламин, ЛФК, массаж.
Статистическая обработка данных проводилась с использованием программного пакета STATISTICA 6.0 для Windows с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней (m), стандартного отклонения средней (у), достоверности различий с использованием критериев Стьюдента, Вилкоксона, Манна-Уитни, коэффициента корреляции (r) по Пирсону. Различия считались достоверными при р<0,05.
3. Результаты исследований и их обсуждение
Существенных различий показателей активности АДА, АМФДА и АД у здоровых во всех трех биологических средах в зависимости от пола и возраста не выявлено, что позволило в дальнейших исследованиях у больных эти факторы не учитывать.
У больных ССД (всей группы) при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,042), АД (р=0,006), в лизатах эритроцитов (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001) и АД (р=0,038), в лизатах лимфоцитов (табл. 3) ниже активность АДА, АД (все р<0,001) и выше АМФДА (р<0,001). Через 10-12 дней лечения в плазме наметилась тенденция к повышению активности АДА, снижению АМФДА и АД (все р>0,05), в эритроцитах -- тенденция к снижению активности АДА и АМФДА (р>0,05), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р<0,001), АД (р=0,008) и снизилась активность АМФДА (р<0,001). По окончании курса стационарного лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзмных показателей (табл. 1-3): нормализовалась активность всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах, но остались сниженными активности АДА и АД в лимфоцитах и повышенными активности АДА в эритроцитах и АМФДА в лимфоцитах (все р<0,001).
У больных с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АДА (р=0,007) и АД (р=0,042), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с подострым течением, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АМФДА (р=0,007), АД (р=0,045), в эритроцитах (табл. 2) выше активности всех энзимов: АДА (р=0,038), АМФДА (р=0,046) и АД (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с острым течением, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,039), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р=0,005), выше АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).
Между всеми вариантами течения по большинству энзимных показателей выявлены существенные энзимные различия. Так, у больных с хроническим течением заболевания, по сравнению с подострым, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001); по сравнению с острым течением, в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001).
У больных с подострым течением, по сравнению с острым течением, в плазме выше активность АДА (р=0,004), ниже АМФДА (р=0,038) и АД (р=0,041), в эритроцитах ниже активность АМФДА (р<0,001) и АД (р<0,001), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже активность АМФДА (все р<0,001).
То есть, анализ энзимных показателей при различных вариантах течения заболевания показал, что чем острее течение, тем в плазме и эритроцитах ниже активность АДА, выше АМФДА и АД, в лизатах лимфоцитов выше активность АМФДА, ниже активности АДА и АД.
У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) существенных энзимных различий не выявлено, в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с II стадией, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АД (р=0,007) и АМФДА (р=0,042), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р=0,004) и АМФДА (р=0,048), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше активность АМФДА (все р<0,001).
Сравнительные исследования показали, что у больных ССД с I стадией, по сравнению с II стадией, в плазме выше активность АДА (р=0,038) и ниже АМФДА (р=0,037), в эритроцитах существенных энзимных различий не определялось, в лимфоцитах выше активность АДА (р=0,005), АД (р=0,006) и ниже АМФДА (р=0,032). Выявлена определенная закономерность: чем больше стадия болезни, тем в плазме и эритроцитах ниже активность АДА и выше АМФДА, АД, а в лимфоцитах ниже активности АДА, АД и выше АМФДА.
Таким образом, проведенные исследования показали, что на активность энзимов при ССД существенное влияние оказывают характер течения заболевания, стадия болезни и меняющееся клиническое состояние больных в процессе лечения. В то же время нами не учитывался такой фактор как интенсивность патологического процесса или степень его активности. Исходя из того, что в клинической практике очень важно четкое определение степени активности процесса, так как от этого зависит тактика и стратегия лечения больных, ниже нами представлен анализ энзимного профиля крови больных в зависимости от степени активности «склеродермического» процесса.
ССД - I степень активности процесса
При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, у больных в плазме (табл. 1) выше активность АДА (р=0,008) и АД (р=0,006), в лизатах эритроцитов (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), ниже активности АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лизатах лимфоцитов (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).
Таблица 1 Активность энзимов в плазме крови здоровых и больных ССД в процессе лечения
Контингент |
Кол-во чел. |
Стат. показатели |
При поступлении |
Перед выпиской |
|||||
АДА |
АМФДА |
АД |
АДА |
АМФДА |
АД |
||||
Здоровые |
30 |
M |
7,23 |
1,45 |
2,76 |
-- |
-- |
-- |
|
0,97 |
0,32 |
0,28 |
|||||||
m |
0,18 |
0,06 |
0,06 |
||||||
ССД, вся группа |
54 |
M |
7,27 |
1,57 |
2,92 |
7,55 |
1,48 |
2,81 |
|
0,54 |
0,18 |
0,12 |
0,21 |
0,07 |
0,03 |
||||
m |
0,07 |
0,02 |
0,02 |
0,03 |
0,01 |
0,005 |
|||
ССД, I степень активности |
18 |
M |
7,89 |
1,36 |
3,01 |
7,61 |
1,42 |
2,82 |
|
0,32 |
0,11 |
0,13 |
0,09 |
0,06 |
0,04 |
||||
m |
0,08 |
0,03 |
0,03 |
0,02 |
0,01 |
0,01 |
|||
ССД, II степень активности |
29 |
M |
7,03 |
1,65 |
2,85 |
7,58 |
1,49 |
2,81 |
|
0,26 |
0,07 |
0,05 |
0,21 |
0,04 |
0,02 |
||||
m |
0,05 |
0,01 |
0,01 |
0,04 |
0,01 |
0,004 |
|||
ССД, III степень активности |
7 |
M |
6,63 |
1,77 |
2,99 |
7,26 |
1,59 |
2,82 |
|
0,18 |
0,05 |
0,12 |
0,19 |
0,05 |
0,05 |
||||
m |
0,07 |
0,02 |
0,05 |
0,07 |
0,02 |
0,02 |
|||
CCД, хроническое течение |
22 |
M |
7,78 |
1,41 |
2,93 |
7,66 |
1,43 |
2,82 |
|
0,38 |
0,14 |
0,14 |
0,14 |
0,06 |
0,04 |
||||
m |
0,08 |
0,03 |
0,03 |
0,03 |
0,01 |
0,01 |
|||
CCД, подострое течение |
27 |
M |
6,98 |
1,66 |
2,90 |
7,50 |
1,50 |
2,80 |
|
0,26 |
0,09 |
0,10 |
0,22 |
0,04 |
0,03 |
||||
m |
0,05 |
0,02 |
0,02 |
0,04 |
0,01 |
0,005 |
|||
CCД, острое течение |
5 |
M |
6,56 |
1,78 |
3,03 |
7,22 |
1,61 |
2,84 |
|
0,17 |
0,05 |
0,12 |
0,22 |
0,04 |
0,04 |
||||
m |
0,08 |
0,02 |
0,05 |
0,10 |
0,02 |
0,02 |
|||
ССД, I стадия |
18 |
M |
7,64 |
1,45 |
2,88 |
7,63 |
1,43 |
2,81 |
|
0,57 |
0,20 |
0,08 |
0,15 |
0,08 |
0,03 |
||||
m |
0,14 |
0,05 |
0,02 |
0,04 |
0,02 |
0,007 |
|||
ССД, II стадия |
36 |
M |
7,21 |
1,59 |
2,94 |
7,53 |
1,48 |
2,81 |
|
0,61 |
0,20 |
0,13 |
0,24 |
0,09 |
0,04 |
||||
m |
0,10 |
0,03 |
0,02 |
0,04 |
0,01 |
0,006 |
Таблица 2 Активность энзимов в лизатах эритроцитов здоровых и больных ССД в процессе лечения
Контингент |
Кол-во чел. |
Стат. показатели |
При поступлении |
Перед выпиской |
|||||
АДА |
АМФДА |
АД |
АДА |
АМФДА |
АД |
||||
Здоровые |
30 |
M |
36,7 |
21,6 |
12,2 |
-- |
-- |
-- |
|
3,70 |
4,66 |
1,57 |
|||||||
m |
0,68 |
0,85 |
0,29 |
||||||
ССД, вся группа |
54 |
M |
49,2 |
23,0 |
13,3 |
41,6 |
22,1 |
12,9 |
|
16,2 |
4,26 |
2,18 |
6,00 |
2,13 |
0,91 |
||||
m |
2,21 |
0,58 |
0,30 |
0,82 |
0,29 |
0,12 |
|||
ССД, I степень активности |
18 |
M |
69,6 |
18,3 |
10,8 |
47,7 |
20,2 |
12,4 |
|
9,43 |
1,33 |
0,57 |
6,36 |
0,93 |
0,38 |
||||
m |
2,22 |
0,31 |
0,13 |
1,50 |
0,22 |
0,09 |
|||
ССД, II степень активности |
29 |
M |
40,6 |
24,1 |
14,0 |
38,5 |
22,3 |
12,7 |
|
5,22 |
1,51 |
0,78 |
2,74 |
0,85 |
0,49 |
||||
m |
0,97 |
0,28 |
0,15 |
0,51 |
0,16 |
0,09 |
|||
ССД, III степень активности |
7 |
M |
32,3 |
30,6 |
17,0 |
38,8 |
26,1 |
14,8 |
|
2,50 |
2,27 |
0,82 |
1,51 |
2,15 |
0,75 |
||||
m |
0,95 |
0,86 |
0,31 |
0,57 |
0,81 |
0,28 |
|||
CCД, хроническое течение |
22 |
M |
61,4 |
20,4 |
11,5 |
44,3 |
21,2 |
12,5 |
|
12,9 |
3,82 |
1,31 |
5,96 |
1,61 |
0,40 |
||||
m |
2,75 |
0,82 |
0,28 |
1,27 |
0,34 |
0,08 |
|||
CCД, подострое течение |
27 |
M |
42,5 |
23,6 |
14,1 |
40,0 |
22,1 |
12,9 |
|
13,0 |
2,06 |
1,33 |
5,78 |
1,25 |
0,68 |
||||
m |
2,50 |
0,40 |
0,26 |
1,11 |
0,24 |
0,13 |
|||
CCД, острое течение |
5 |
M |
31,2 |
31,7 |
17,2 |
38,3 |
26,8 |
15,0 |
|
2,02 |
1,60 |
0,76 |
1,39 |
1,94 |
0,80 |
||||
m |
0,90 |
0,72 |
0,34 |
0,62 |
0,87 |
0,36 |
|||
CCД, I стадия |
18 |
M |
54,1 |
21,6 |
12,5 |
42,8 |
21,5 |
12,7 |
|
14,1 |
4,27 |
2,38 |
4,54 |
1,82 |
0,84 |
||||
m |
3,33 |
1,01 |
0,56 |
1,07 |
0,43 |
0,20 |
|||
CCД, II стадия |
36 |
M |
46,7 |
23,8 |
13,4 |
41,0 |
22,4 |
13,0 |
|
16,8 |
4,11 |
3,00 |
6,58 |
2,23 |
0,94 |
||||
m |
2,80 |
0,69 |
0,50 |
1,10 |
0,37 |
0,16 |
Таблица 3 Активность энзимов в лизатах лимфоцитов здоровых и больных ССД в процессе лечения
Контингент |
Кол-во чел. |
Стат. показатели |
При поступлении |
Перед выпиской |
|||||
АДА |
АМФДА |
АД |
АДА |
АМФДА |
АД |
||||
Здоровые |
30 |
M |
44,8 |
3,21 |
1,96 |
-- |
-- |
-- |
|
2,98 |
0,53 |
0,18 |
|||||||
m |
0,54 |
0,10 |
0,03 |
||||||
ССД, вся группа |
54 |
M |
26,1 |
5,15 |
1,69 |
38,2 |
3,61 |
1,86 |
|
4,27 |
0,85 |
0,10 |
3,25 |
0,32 |
0,07 |
||||
m |
0,58 |
0,12 |
0,01 |
0,44 |
0,04 |
0,01 |
|||
ССД, I степень активности |
18 |
M |
27,4 |
4,22 |
1,80 |
41,4 |
3,29 |
1,91 |
|
1,22 |
0,42 |
0,05 |
2,37 |
0,13 |
0,05 |
||||
m |
0,43 |
0,10 |
0,01 |
0,56 |
0,03 |
0,01 |
|||
ССД, II степень активности |
29 |
M |
24,5 |
5,41 |
1,66 |
36,9 |
3,69 |
1,84 |
|
1,80 |
0,42 |
0,05 |
2,23 |
0,21 |
0,07 |
||||
m |
0,33 |
0,08 |
0,01 |
0,46 |
0,04 |
0,01 |
|||
ССД, III степень активности |
7 |
M |
21,0 |
6,46 |
1,52 |
35,5 |
4,11 |
1,77 |
|
0,48 |
0,26 |
0,03 |
2,63 |
0,19 |
0,06 |
||||
m |
0,18 |
0,10 |
0,01 |
1,00 |
0,07 |
0,02 |
|||
CCД, хроническое течение |
22 |
M |
29,9 |
4,4 |
1,78 |
39,5 |
3,36 |
1,91 |
|
3,83 |
0,52 |
0,06 |
3,4 |
0,18 |
0,05 |
||||
m |
0,82 |
0,11 |
0,01 |
0,77 |
0,04 |
0,01 |
|||
CCД, подострое течение |
27 |
M |
24,0 |
5,53 |
1,64 |
37,6 |
3,72 |
1,82 |
|
1,86 |
0,51 |
0,06 |
2,72 |
0,25 |
0,06 |
||||
m |
0,36 |
0,1 |
0,01 |
0,52 |
0,05 |
0,01 |
|||
CCД, острое течение |
5 |
M |
20,8 |
6,46 |
1,53 |
35,8 |
4,12 |
1,78 |
|
0,31 |
0,26 |
0,03 |
2,18 |
0,22 |
0,05 |
||||
m |
0,14 |
0,12 |
0,01 |
0,98 |
0,10 |
0,02 |
|||
CCД, I стадия |
18 |
M |
28,5 |
4,75 |
1,74 |
38,7 |
3,49 |
1,90 |
|
5,61 |
0,99 |
0,11 |
3,77 |
0,37 |
0,08 |
||||
m |
1,32 |
0,23 |
0,03 |
0,89 |
0,09 |
0,02 |
|||
CCД, II стадия |
36 |
M |
24,9 |
5,35 |
1,66 |
38,0 |
3,67 |
1,84 |
|
2,81 |
0,71 |
0,08 |
2,98 |
0,28 |
0,07 |
||||
m |
0,47 |
0,12 |
0,01 |
0,50 |
0,05 |
0,01 |
Если же ориентироваться не на среднестатистические величины активности ферментов, а на индивидуальные энзимные показатели, то за пределы условной нормы (референтные пределы) у здоровых, вычисленной по формуле М±2у (95% вероятность), в плазме не выходил ни один энзимный показатель, в лизатах эритроцитов только активность АДА у всех больных (100%) превышала верхние границы нормы, в лизатах лим-фоцитов активность АДА в 94,4% случаев была меньше нижней границы нормы, активность АМФДА была выше верхней границы в 50% случаев, а активность АД ни у одного больного не выходила за референтные пределы. В то же время у этих же больных среди общепринятых клинико-иммуно-биохимических показателей, отражающих активность иммуно-воспалительного процесса при ССД, отклонения от уровня здоровых лиц для СРБ, гамма-глобулинов, иммуноглобулинов G определялись в 44,4% случаев, сиаловых кислот -- в 38,9%, альфа-2-глобулинов, СОЭ, иммуноглобулинов М -- в 33,3%, фибриногена, ЦИК, иммуноглобулинов А -- в 27,8%, антител к н-ДНК и АНФ (+) -- в 22,2% случаев. То есть, показатели активности АДА в лизатах эритроцитов и лимфоцитов отличались более значительной чувствительностью и информативностью в отражении минимальной активности патологического процесса при ССД, чем самые демонстративные в этом аспекте вышеуказанные клинико-иммуно-биохимические показатели.
Корреляционный анализ показ наличие прямых умеренных связей в плазме между активностями АДА--АД (r=0,34), в эритроцитах -- умеренные прямые связи между АМФДА--АД и обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, в лимфоцитах -- обратные умеренные связи между АДА--АМФДА. Также определены обратные умеренные связи между активностью АДА и IgG (r=-0,33), АДА и АНФ (к=-0,34). Между активностью АМФДА и IgG (r=0,34), АМФДА и АНФ (r=0,29) выявлены прямые умеренные связи.
Через 10-12 дней лечения в плазме существенной динамики энзимных показателей не наблюдалось, в эритроцитах снизилась активность АДА (р=0,008) и повысилась ранее сниженная активность АД (р=0,039), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р<0,001) и снизилась активность АМФДА (р=0,033). После проведенного курса лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3): нормализовались активности всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах и лимфоцитах, но остались повышенной активность АДА в эритроцитах (р<0,001) и сниженной в лимфоцитах (р<0,001).
У больных с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р=0,007) и АД (р=0,008), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), ниже активность АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), АД (р=0,004) и выше активность АМФДА (р<0,001).
У больных с подострым течением, по сравнению со здоровыми (табл. 4), в плазме выше активность АД (р=0,006), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), АД (р=0,036) и выше АМФДА (р<0,001).
Сравнительные исследования показали, что у больных с хроническим течением, по сравнению с подострым, в плазме выше активность АДА (р<0,001) и ниже АМФДА (р=0,032), в эритроцитах ниже активность АМФДА (р=0,004) и АД (р=0,033), в лимфоцитах ниже активность АМФДА (р=0,039), но выше активность АД (р=0,003).
У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с II стадией (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р<0,001), ниже активности АМФДА (р<0,001) и АД (р=0,032), в эритроцитах ниже активность АДА (р=0,042), в лимфоцитах выше активность АДА (р=0,003), АД (р=0,041), ниже активность АМФДА (р=0,033). То есть, при одинаковой активности процесса между вариантами течения и стадиями болезни определяются статистически значимые энзимные различия.
Таблица 4 Активность энзимов у больных ССД в зависимости от клинических особенностей
Контингент |
Кол. б-ых |
Стат. пок-ли |
Плазма |
Эритроциты |
Лимфоциты |
|||||||
АДА |
АМФДА |
АД |
АДА |
АМФДА |
АД |
АДА |
АМФДА |
АД |
||||
I степень активности |
||||||||||||
-- хроническое течение |
15 |
M |
7,99 |
1,33 |
2,99 |
68,1 |
18,0 |
10,6 |
31,3 |
4,13 |
1,81 |
|
m |
0,07 |
0,03 |
0,03 |
2,48 |
0,29 |
0,14 |
0,97 |
0,10 |
0,01 |
|||
-- подострое течение |
3 |
M |
7,30 |
1,49 |
3,13 |
77,3 |
20,1 |
11,4 |
27,7 |
4,67 |
1,73 |
|
m |
0,07 |
0,007 |
0,03 |
1,19 |
0,40 |
0,07 |
0,21 |
0,07 |
0,01 |
|||
-- I стадия болезни |
9 |
M |
8,16 |
1,27 |
2,94 |
65,2 |
18,0 |
10,5 |
33,0 |
3,99 |
1,82 |
|
m |
0,06 |
0,02 |
0,02 |
3,19 |
0,40 |
0,20 |
1,36 |
0,16 |
0,01 |
|||
-- II стадия болезни |
9 |
M |
7,30 |
1,44 |
3,09 |
74,0 |
18,6 |
9,82 |
28,4 |
4,43 |
1,77 |
|
m |
0,06 |
0,02 |
0,05 |
2,45 |
0,49 |
1,23 |
0,22 |
0,09 |
0,02 |
|||
II степень активности |
||||||||||||
-- хроническое течение |
7 |
M |
7,33 |
1,58 |
2,79 |
47,1 |
25,6 |
13,2 |
26,73 |
4,94 |
1,71 |
|
m |
0,04 |
0,008 |
0,01 |
1,54 |
0,43 |
0,11 |
0,44 |
0,08 |
0,02 |
|||
-- подострое течение |
22 |
M |
6,94 |
1,68 |
2,87 |
38,5 |
23,7 |
14,2 |
23,73 |
5,56 |
1,64 |
|
m |
0,05 |
0,01 |
0,01 |
0,77 |
0,28 |
0,15 |
0,27 |
0,08 |
0,01 |
|||
-- I стадия болезни |
6 |
M |
7,32 |
1,58 |
2,76 |
47,1 |
23,2 |
13,6 |
25,3 |
5,08 |
1,73 |
|
m |
0,05 |
0,01 |
0,01 |
1,99 |
0,38 |
0,25 |
0,37 |
0,18 |
0,02 |
|||
-- II стадия болезни |
23 |
M |
6,96 |
1,56 |
2,86 |
38,9 |
24,4 |
14,1 |
24,2 |
5,50 |
1,64 |
|
m |
0,05 |
0,01 |
0,01 |
0,80 |
0,32 |
0,17 |
0,40 |
0,08 |
0,01 |
ССД - II степень активности процесса
При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,004), в эритроцитах (табл. 2) выше активности АДА (р=0,005), АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). Корреляционный анализ показал в плазме наличие прямых умеренных связей между АМФДА и АД, в эритроцитах -- прямых умеренных связей между АМФДА и АД, АДА и АД, в лимфоцитах -- прямых умеренных связей между АДА и АД, обратных умеренных -- между АДА--АМФДА, АМФДА--АД. Также выявлены обратные умеренные связи в лимфоцитах между активностью АДА и всеми изученными иммунными показателями, наиболее выраженные между АДА и IgG (r=-0,58). Между активностью АМФДА и иммунными показателями определялись прямые умеренные связи, наиболее выраженные между АМФДА и IgG (r=0,53). Между активностью АД и иммунными показателями выявлены умеренные, за исключением между АД и IgА, обратные связи, наиболее статистически значимые между АД и IgG (r=-0,51).
То есть, определяются некоторые закономерности: чем ниже в лимфоцитах активность АДА и АД, выше активность АМФДА, тем выраженнее изменения изученных иммунных показателей в негативную сторону.
Через 10-12 дней лечения в плазме повысилась активность АДА (р=0,005), снизилась АМФДА (р=0,043), в эритроцитах существенных изменений активности энзимов не произошло, в лимфоцитах повысилась активность АДА и снизилась АМФДА (все р<0,001).
По окончании курса стационарного лечения наблюдалась значимая положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3), нормализовались активности всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах, но осталась повышенной активность АДА в эритроцитах, АМФДА в лимфоцитах и сниженной активность АДА и АД в лимфоцитах.
У больных с хроническим течением, по сравнению с подострым (табл. 4), в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА и АД (все р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), АМФДА (р=0,004) и ниже активность АД (р=0,003), в лимфоцитах выше активности АДА (р<0,001), АД (р=0,004) и ниже активность АМФДА (р<0,001).
У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с II стадией (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р=0,003) и ниже АД (р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АМФДА (р=0,042) и выше активность АД (р<0,001). То есть, как при I степени, так и при II степени выявлены существенные энзимные различия между вариантами течения и стадиями болезни.
ССД - III степень активности процесса
При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) ниже активность АДА (р<0,001) и выше АД (р=0,037), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р=0,006), выше АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).
По сравнению с II степенью, в плазме все корреляционные связи между энзимами упрочились без изменения направлений, в эритроцитах поменялись направления связей между АДА--АМФДА и АДА--АД на обратные, в лимфоцитах направления связей остались прежними, но более упрочились. В лимфоцитах между активностью АДА, АД и всеми изученными иммунными показателями определялись умеренные обратные связи, наиболее выраженные между АДА и IgG (r=-0,72) и АД и IgG (r=-0,42); а между активностью АМФДА и иммунными показателями выявлены прямые умеренные связи, наиболее выраженные между АМФДА и IgG (r=0,56).
Через 10-12 дней лечения в плазме и эритроцитах наметилась тенденция к нормализации энзимных показателей, а в лимфоцитах повысились ранее сниженные активности АДА (р<0,001), АД (р=0,007) и снизилась активность АМФДА (р<0,001).
После проведенного курса лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3): в плазме отмечалась нормализация всех показателей, в эритроцитах нормализовалась активность АДА, но остались повышенными активности АМФДА и АД, в лимфоцитах остались сниженными активности АДА, АД и повышенной активность АМФДА.
Таким образом, проведенные исследования показали, что каждой степени активности «склеродермического» процесса свойственен определенный энзимный профиль крови.
У больных ССД с I степенью активности процесса, по сравнению с II степенью, в плазме выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001); по сравнению с III степенью, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). При II степени, по сравнению с III степенью, в плазме и эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). То есть, между всеми степенями активности процесса имеются существенные энзимные различия, способствующие их дифференциации.
Проведенные исследования свидетельствуют о том, что на энзимные показатели крови, помимо активности процесса, оказывают существенное влияние характер течения и стадии болезни. Для того чтобы выяснить, что же в большей степени влияет на энзимный профиль крови: степень активности процесса, характер течения или стадия болезни, мы провели сравнительные исследования энзимных показателей при одном варианте течения, одной стадии болезни, но разных степенях активности процесса. Результаты исследования показали, что у больных ССД с хроническим течением и I степенью, по сравнению с больными с хроническим течением и II степенью, в плазме выше активность АДА, АД и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). Примерно, такая же ситуация наблюдается и у больных с подострым вариантом течения при сравнении энзимных показателей с различной активностью процесса. То есть, независимо от характера течения, между сравниваемыми группами выявлены различия, свойственные различиям между I и II степенями активности процесса, а это доказывает, что влияние активности патологического процесса на энзимные показатели значительно более выражено, чем характера течения заболевания. Аналогичная ситуация наблюдалась и по отношению к стадиям болезни. Это имеет важное практическое значение, так как ни стадия, ни любой вариант течения заболевания не способны «маскировать» активность процесса, что позволяет в комплексе с клиническими данными четко определять степень активности патологического процесса при ССД и назначать адекватную терапию.
Больные бляшечной склеродермией
Больные БСД были выбраны для исследования в качестве группы сравнения. Выбор этой нозологической формы ограниченной склеродермии был обусловлен как близостью клинической картины заболевания с ССД, так и схожестью отдельных патогенетических звеньев ССД и БСД. При этих заболеваниях нарушены процессы фиброобразования в коже, микроциркуляции и иммунного статуса. Весьма похожи и гистоморфологические изменения кожи (А.И. Струков, 1969; Н.Г. Гусева, 1993; Ю.К. Скрипкин, 1996). До настоящего времени остается актуальной проблема возможности трансформации ограниченных форм склеродермии в ССД, и ее решение имеет важное значение в клинической практике. Наблюдения перехода БСД в ССД немногочисленны, но они есть (Е.В. Вербенко, 1966; В.А. Гребенников, А.Г. Чалинова, 1983; А.В.Смирнов, 1997). Поэтому были предприняты исследования энзимного профиля крови больных БСД с целью выявления особенностей энзимного статуса крови в сравнении с больными ССД.
У больных БСД, по сравнению со здоровыми (табл. 5), в плазме выше активность АДА (р<0,001) и ниже активность АД (р=0,004), в эритроцитах ниже активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), но выше АД (р<0,001) и АМФДА (р=0,044).
Таблица 5 Активность энзимов в крови больных бляшечной склеродермией
Среда исследования |
Кол-во больных |
Стат. пок-ли |
Активность энзимов |
|||
АДА |
АМФДА |
АД |
||||
Плазма |
15 |
М |
8,3 |
1,48 |
2,45 |
|
0,36 |
0,05 |
0,15 |
||||
m |
0,09 |
0,01 |
0,04 |
|||
Лизаты эритроцитов |
15 |
М |
33,0 |
20,6 |
11,7 |
|
1,81 |
1,52 |
0,46 |
||||
m |
0,47 |
0,39 |
0,12 |
|||
Лизаты лимфоцитов |
15 |
М |
40,4 |
3,53 |
2,29 |
|
2,54 |
0,20 |
0,18 |
||||
m |
0,66 |
0,05 |
0,05 |
Сравнительные исследования показали, что у больных БСД, по сравнению с больными ССД, в плазме выше активность АДА (р<0,001), ниже активность АМФДА (р=0,041) и АД (р<0,001), в эритроцитах ниже активность всех энзимов: АДА (р<0,001), АМФДА (р=0,043) и АД (р=0,007), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). Нами также были проведены сравнительные энзимные исследования у больных БСД с каждой степенью активности процесса при ССД и выявлены также энзимные различия. В результате сравнительных исследований выявлены некоторые особенности активности энзимов при БСД и ССД: 1. При ССД в плазме активность АД или в пределах нормы, или повышена, а при БСД активность АД всегда снижена. 2. При ССД в лимфоцитах не наблюдалось случаев повышения активности АД, а при БСД у всех больных активность АД повышена. 3. При ССД в эритроцитах чаще всего наблюдается повышение активности всех энзимов (за исключением I степени, где имеется снижение активности АМФДА и АД, но на фоне двукратного повышения активности АДА), а при БСД чаще всего наблюдается снижение активности всех энзимов или их норма.
С учетом этих особенностей в комплексе с клиническими данными представляется возможность более четкого дифференцирования ССД и БСД. Если же у больных БСД в плазме определяется повышение активности АД, в лимфоцитах снижение активности АД, в эритроцитах повышение активности изученных энзимов, то такие больные должны тщательно и регулярно наблюдаться как группа риска трансформации БСД в ССД.
Таким образом, проведенные нами исследования выявили существенные изменения активности АДА, АМФДА и АД во всех трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови, зависящие в большей степени от активности патологического процесса и в меньшей степени от характера течения и стадии болезни. Выявлены также определенные закономерности: чем выше степень активность патологического процесса, тем в плазме ниже активность АДА и выше АМФДА, в эритроцитах ниже активность АДА, выше активности АМФДА и АД, в лимфоцитах ниже активность АДА, АД и выше АМФДА.
Изученные нами ферменты являются звеньями энзимной системы аденилового пула пуринового метаболизма, и поэтому все они взаимосвязаны. В лизатах лимфоцитов больных ССД нами получено снижение активности АДА, АД и повышение активности АМФДА. Низкая активность АДА может быть обусловлена структурным дефектом молекулы фермента или частичной ингибицией энзима за счет появления в клетке различных метаболитов, супероксидных радикалов, ионов металлов, связывающих активный центр фермента, аллостерических ингибиторов, так как в лимфоцитах при ССД имеются нарушения не только ПМ, но и других видов обмена. Снижение активности АДА в лимфоците достаточно быстро может привести к повышенной концентрации аденозина в клетке, что в свою очередь может вызвать частичную блокаду рибонуклеотидредуктазы, замедление биосинтеза ДНК, РНК, гибель лимфоцитов или их усиленный апоптоз, особенно Т-лимфоцитов, нарушения процессов пролиферации клеток, угнетение некоторых функций лимфоцитов, в частности супрессорной и киллерной. Кроме того, повышенное содержание аденозина в лимфоците индуцирует повышение синтеза фактора некроза опухоли-альфа, ответственного за регуляцию иммунных процессов (Н.П. Дмитренко 1984; Л.И. Филановская, 1986; K. Flocke, 1991; A. Eigler, 1997). То есть, дефицит АДА в лимфоцитах, влекущий за собой нарушение их функциональных свойств, может обусловить дискоординацию иммунных процессов и составить один из патогенетических механизмов ССД. Повышенная активность АМФДА в лимфоцитах, вероятно, служит адаптационной, компенсаторной реакцией, уводящей часть АМФ с пути его превращения в аденозин, которого в клетке и так достаточно много. Низкая активность АД может быть обусловлена сниженным уровнем аденина вследствие низкой активности нуклеозидазы.
В лизатах эритроцитов активность АМФДА и АД повышена, что свидетельствует об интенсификации катаболизма адениловых производных при ССД. Это может отразиться на продолжительности жизни эритроцитов и развитии анемии, что и наблюдается у больных с высокой активностью процесса.
По активности энзимов в плазме крови судить о ПМ в клетках крови не представляется возможным, так как изученные ферменты локализуются не только в клетках крови, но и в клетках других тканей, и выход их в плазму по причине повышенной проницаемости клеточных мембран или по другим причинам чаще всего свидетельствует о наличии патологии в организме, воспалительных или дистрофических процессов. То есть, плазменная активность ферментов имеет диагностическое, а не патогенетическое значение. В то же время исследование комплекса ферментов параллельно в трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови позволяет не только оценить роль АДА, АМФДА и АД в патогенезе ССД, но и улучшить ее диагностику и наметить принципиально новые лечебные подходы в лечении больных ССД с использованием средств, нормализующих пуриновый метаболизм в клетках крови и, в первую очередь, в лимфоцитах.
Выводы
1. У больных ССД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови выявлены существенные изменения активности АДА, АМФДА и АД, зависящие от степени активности патологического процесса, характера течения и стадии болезни.
2. Чем выше степень активности патологического процесса, тем в плазме крови больных ССД ниже активность АДА и выше активность АМФДА, в лизатах эритроцитов -- ниже активность АДА и выше активности АМФДА и АД, в лизатах лимфоцитов -- ниже активности АДА, АД и выше активность АМФДА. Между всеми степенями активности процесса определяются существенные энзимные различия во всех трех средах исследований.
3. Чем острее течение заболевания, тем ниже активность АДА и выше АМФДА во всех трех биологических средах исследований, выше активность АД в плазме, эритроцитах и ниже в лимфоцитах. Между всеми вариантами течения заболевания определялись существенные энзимные различия.
4. У больных ССД с I стадией, по сравнению с II стадией болезни, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах существенных различий не определяется, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА.
5. На энзимные показатели крови наиболее выраженное влияние оказывает степень активности процесса и менее значительное -- характер течения и стадия болезни.
6. Показатели активности АДА в лизатах эритроцитов и лимфоцитов, АМФДА в лимфоцитах оказались значительно более информативными в индикации минимальной активности патологического процесса при ССД, чем общепринятые клинико-иммуно-биохимические показатели: СОЭ, СРБ, ЦИК, АНФ, сиаловые кислоты, белки сыворотки крови, иммуноглобулины различных классов.
7. В ранние сроки лечения (10-12 дней) наиболее информативными в отражении меняющегося клинического состояния больных при I степени являются показатели активности АДА и АД в эритроцитах, АДА, АМФДА в лимфоцитах, при II степени -- АМФДА и АДА в плазме и лимфоцитах, при III степени -- только показатели активности всех энзимов в лимфоцитах. Период наступающей клинической ремиссии при I степени ассоциируется с нормализацией активности всех энзимов в плазме, АД и АМФДА в эритроцитах, при II степени -- активности всех энзимов в плазме, АДА и АМФДА в эритроцитах, III степени -- активности всех энзимов в плазме и АДА в эритроцитах.
8. При I степени в плазме выявлены прямые умеренные корреляционные связи между активностями АДА--АД, в эритроцитах -- прямые умеренные связи между АМФДА--АД, обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, в лимфоцитах -- обратные умеренные связи между АДА--АМФДА; при II степени в плазме и эритроцитах -- прямые умеренные связи между АМФДА--АД, в эритроцитах -- между АДА--АД, в лимфоцитах -- прямые умеренные связи между АДА--АД, обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, АД--АМФДА; при III степени корреляционные связи между энзимами носили ту же направленность, что и при II степени, но они стали еще более прочными.
9. У больных ССД выявлены умеренные разнонаправленные корреляционные связи между активностью АДА, АМФДА и АД в лимфоцитах и некоторыми иммунными показателями: иммуноглобулинами А, М и G, ЦИК и АНФ. Чем ниже активность АДА, АД и выше активность АМФДА в лимфоцитах, тем более выраженнее отклонения иммунных показателей от уровня нормы в сторону увеличения их содержания.
10. Выявленное нами снижение активности АДА в лимфоцитах больных ССД, особенно выраженное при высокой активности процесса, может обусловить нарушения функциональных свойств лимфоцитов, процессы их пролиферации, дифференциации, синтеза ДНК, РНК, ослабить супрессорные свойства Т-клеток, ускорить их апоптоз и, таким образом, составить один из патогенетических механизмов ССД.
11. Между больными ССД и БСД определяются существенные энзимные различия: при ССД в лизатах эритроцитов активности АДА, АМФДА и АД повышены, при БСД -- снижены; при ССД в плазме крови активность АД повышена, при БСД -- снижена; при ССД в лимфоцитах активность АД снижена, при БСД -- повышена. У больных БСД, по сравнению с больными ССД (всей группы), в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в эритроцитах ниже активность всех энзимов, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже активность АМФДА.
12. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в комплексе с клиническими данными способствуют улучшению диагностики степени активности патологического процесса при ССД, характера течения, стадии болезни, уточнению роли энзимов пуринового метаболизма в патогенезе ССД и объективизации оценки эффективности проводимой терапии.
Практические рекомендации
1. При определении границ условной нормы (референтных пределов) активности энзимов в крови здоровых людей целесообразно ориентироваться на величины, вычисленные по формуле: М2 (95% вероятность). Исходя из этого, референтные пределы активности энзимов (нмоль/мл/мин) в плазме крови составили для АДА: 5,29-9,17; АМФДА: 0,81-2,09; АД: 2,2-3,32; в лизатах эритроцитов -- АДА: 28,8-44,0; АМФДА: 12,3-30,9; АД: 9,1-15,3; в лизатах лимфоцитов -- АДА: 38,8-50,8; АМФДА: 2,15-4,27; АД: 1,36-2,56.
2. Для выявления минимальной активности «склеродермического» процесса и ее разграничения с периодом клинической ремиссии рекомендуется определять активность АДА в лизатах эритроцитов, которая в случаях активации процесса в 100% случаев выше верхней границы нормы и (или) активность АДА в лизатах лимфоцитов, которая в 94,4% случаев ниже нижнего уровня здоровых людей.
3. Для уточнения степени активности процесса целесообразно ориентироваться на активность энзимов в лизатах лимфоцитов. При I степени активность АДА в пределах 21,6-28,5 нмоль/мл/мин, АМФДА -- 3,4-4,5 нмоль/мл/мин, АД -- 1,7-1,8 нмоль/мл/мин. За II степень свидетельствуют активность АДА в диапазоне: 20,4-21,5 нмоль/мл/мин, АМФДА: 4,6-6,1 нмоль/мл/мин, АД: 1,6-1,81 нмоль/мл/мин; за III степень -- активность АДА: 20,3 нмоль/мл/ин и менее, АМФДА: более 6,1 нмоль/ил/мин и АД: менее 1,6 нмоль/мл/мин.
4. Для контроля эффективности проводимой терапии больных ССД в первые 10 дней лечения целесообразно ориентироваться на динамику активности АДА и АД в лизатах лимфоцитов, которые в случае улучшения клинического состояния больных повышаются, а в случаях ухудшения -- понижаются. Период наступающей клинической ремиссии чаще всего сопровождается нормализацией активности всех энзимов в плазме и некоторых в эритроцитах.
склеродермия энзим патогенетический кровь
Публикации
Абрамов Н.Б., Морозова Т.А., Филимонова Ю.К., Шилова Л.Н. Активность адениндезаминазы в лимфоцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 5-6.
Абрамов Н.Б., Хортиева С.С., Бедина С.А., Мартемьянов В.Ф. Клиническое значение исследования активности АМФ-дезаминазы в лимфоцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 6-7.
Мартемьянов В.Ф., Зборовский А.Б., Абрамов Н.Б., Некрасова С.П. Активность аденозиндезаминазы (АДА) в лимфоцитах и плазме крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 87-88.
Абрамов Н.Б., Морозова Т.А., Мартемьянов В.Ф., Зборовская И.А. К исследованию активности АМФ-дезаминазы в лизатах эритроцитов и плазме крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 3-4.
Абрамов Н.Б., Трубенко Ю.А., Мартемьянов В.Ф., Белясникова Е.А. Клиническое значение определения активности адениндезаминазы в плазме и лизатах эритроцитов крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 4-5.
Мартемьянов В.Ф., Рогаткина Т.Ф., Абрамов Н.Б., Белясникова Е.А. Клиническое значение определения активности аденозиндезаминазы в плазме и лизатах эритроцитов крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 94-95.
Абрамов Н.Б., Бедина С.А. Активность аденозиндезаминазы, адениндезаминазы, АМФ-дезаминазы в эритроцитах и плазме крови при системной склеродермии // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: Мат. 64-й открытой итоговой науч. конф. молодых ученых и студентов ВолГМУ / Под ред. акад. РАМН В.И. Петрова. -- Волгоград, 2006. -- С. 97-98.
Абрамов Н.Б., Зборовский А.Б., Мартемьянов В.Ф. Активность адениловых энзимов у больных системной склеродермией (ССД) с различными вариантами течения заболевания // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIV. -- Волгоград, 2007. -- С. 3-4.
Абрамов Н.Б., Мартемьянов В.Ф., Бедина С.А. Особенности активности энзимов пуринового метаболизма в клетках крови больных системной склеродермией (ССД) при различных стадиях болезни // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIV. -- Волгоград, 2007. -- С. 4-5.
Мартемьянов В.Ф., Абрамов Н.Б., Бедина С.А., Шилова Л.Н. К исследованию активности энзимов адениловой ветви пуринового метаболизма у больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIV. -- Волгоград, 2007. -- С. 63-64.
Абрамов Н.Б., Зборовская И.А., Кудряков Р.Ш., Мартемьянов В.Ф. Активность энзимов аденилового пула пуринов в крови больных системной и бляшечной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXV. -- Волгоград, 2008. -- С. 3-4.
Зборовский А.Б., Абрамов Н.Б. Клинико-диагностическое значение активности энзимов аденилового пула пуринового метаболизма в лимфоцитах и эритроцитах больных системной склеродермией // Вестник ВолГМУ -- 2008. -- № 4. -- С. 71-74.
Абрамов Н.Б., Мартемьянов В.Ф. Активность энзимов адениловой ветви пуринового метаболизма при системной склеродермии //Альманах современной науки и образования -- Тамбов: «Грамота», 2007, № 6. -- С. 7-10.
Подобные документы
Применение дисперсионного анализа по проверки равенства нескольких средних и непараметрических раскладов согласно критериям Краскала-Уоллиса и Джонкхиера с целью определения зависимости уровня комплемента в крови больных системной красной волчанкой.
курсовая работа [74,2 K], добавлен 09.08.2010Формирование артериальной гипертензии. Прогрессирование ремоделирования сердца и сосудов, развитие эндотелиальной дисфункции артерий. Оценка содержания ростовых факторов в плазме крови больных. Оценка антигипертензивной активности телмисартана.
статья [137,0 K], добавлен 01.09.2013Динамика процессов в крови. Небелковые компоненты плазмы крови. Характеристика отдельных белковых фракций. Развитие тяжелого хирургического сепсиса у больных. Сепсис с гнойными метастазами. Содержание газов в крови человека. Исследование газов крови.
дипломная работа [3,0 M], добавлен 21.04.2016Состояние иммунологической реактивности пациенток с хламидийной инфекцией. Клинические проявления урогенитального хламидиоза. Оценка системы перекисного окисления липидов эритроцитов и плазмы крови. Содержание циркулирующих иммунных комплексов у больных.
диссертация [839,4 K], добавлен 09.08.2013Биохимические и клинические показатели сыворотки крови при заболеваниях почек. Динамика активности трансаминаз; концентрации креатинина, билирубина, электролитов и глюкозы у больных почечной недостаточностью в условиях применения метода гемосорбции.
дипломная работа [336,1 K], добавлен 03.11.2015Этиология, патогенез и лечение панкреонекроза. Нейтрофилы: жизненный цикл, морфология, функции, метаболизм. Биолюминесцентный метод определения активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах. Активность лактатдегидрогеназы нейтрофилов крови.
курсовая работа [175,0 K], добавлен 08.06.2014Изучение клеточного состава крови: эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. Строение, физико-химические свойства, функции крови. Физиологически активные вещества, принимающие участие в свертывании крови и находящиеся в плазме. Скорость оседания эритроцитов.
курсовая работа [146,8 K], добавлен 26.12.2013Состав плазмы крови, сравнение с составом цитоплазмы. Физиологические регуляторы эритропоэза, виды гемолиза. Функции эритроцитов и эндокринные влияния на эритропоэз. Белки в плазме крови человека. Определение электролитного состава плазмы крови.
реферат [1,4 M], добавлен 05.06.2010Исследование активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови кроликов при однократном введении четыреххлористого углерода и процессе лечения токсических поражений с использованием традиционных и нетрадиционных методов детоксикации организма.
дипломная работа [1,1 M], добавлен 15.07.2012Специальные методы исследования крови и мочи животных. Условия взятия крови и мочи, сохранность до начала лабораторных исследований. Скорость оседания эритроцитов и содержания гемоглобина. Определение времени свертываемости крови по способу Бюркера.
курсовая работа [34,0 K], добавлен 31.03.2011