Клинико-диагностическое значение исследования активности аденозиндезаминазы, АМФ-дезаминазы и адениндезаминазы в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных системной склеродермией

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ, АМФ-ДЕЗАМИНАЗЫ И АДЕНИНДЕЗАМИНАЗЫ В ЛИЗАТАХ ЛИМФОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И ПЛАЗМЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИЕЙ

14.00.39 - ревматология

Абрамов Николай Борисович

Волгоград - 2009

1. Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Системная склеродермия (ССД) или системный склероз (по МКБ-10:М34) является относительно редким заболеванием (первичная заболеваемость от 3,7 до 19,0 на 1 млн. населения в год). Но учитывая, что ССД развивается в наиболее трудоспособном возрасте (30-45 лет), поражает преимущественно женщин, характеризуется прогрессирующим, инвалидизирующим течением, значительным ухудшением качества жизни и сокращением ее продолжительности, высокими материальными затратами на лечение, борьба с этим заболеванием является значимой актуальной медико-социальной проблемой. Сложность борьбы усугубляется неясностью этиологии и патогенетических механизмов ССД, многообразием терапевтических подходов и их недостаточной эффективностью, отсутствием методов профилактики. Кроме того, даже при точно установленном диагнозе ССД нередко бывает сложно разграничить фазу клинической ремиссии и обострения процесса, так как довольно часто (40-50%) обострение заболевания течет субклинически на фоне малоизмененных лабораторных показателей, что приводит к запоздалому назначению адекватной терапии. Поэтому поиск и разработка новых параклинических методов, способствующих своевременному распознаванию минимальных проявлений активации «склеродермического» процесса, является также актуальной задачей практической ревматологии.

В патогенезе ССД важную роль играют нарушения метаболических и иммунологических процессов (В. Насонова, 1986; Д. Лебедев, 1988), и поэтому в решении диагностических и патогенетических проблем перспективным направлением является изучение пуринового метаболизма (ПМ) с помощью определения активности энзимов, катализирующих реакции метаболизма пуринов.

Пуриновые метаболиты участвуют в синтезе нуклеиновых кислот, созревании, пролиферации и дифференциации иммунокомпетентных клеток, регуляции многих жизненноважных функций организма, в том числе и иммунных, а энзимы, регулирующие обменные реакции пуринов, являются весьма чувствительными индикаторами изменений метаболизма и иммунного статуса (В. Уманский и др., 1989; Н. Дмитренко, 1990). Имеется много данных о нарушениях ПМ и изменениях активности энзимов этого цикла при остеоартрозе, ревматоидном артрите, системной красной волчанке в сыворотке крови, но отсутствуют сведения об изменениях активности энзимов ПМ при ССД. Учитывая это, нами были проведены исследования активности некоторых энзимов ПМ: аденозиндезаминазы (АДА), АМФ-дезаминазы (АМФДА) и адениндезаминазы (АД) параллельно в трех биологических средах: в лимфоцитах, эритроцитах и плазме крови больных ССД. Эти энзимы действуют на различных этапах ПМ, но являются звеньями одного цикла, и по их активности представляется возможным суждение об изменениях адениловых метаболитов при ССД.

Цель исследования. Повышение качества диагностики активности патологического процесса при ССД, характера течения и стадии болезни, объективизации контроля эффективности лечения больных ССД с использованием показателей активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови и выяснение особенностей пуринового метаболизма при ССД и бляшечной склеродермии (БСД), способствующих раскрытию патогенетических механизмов и дифференциации этих заболевания.

Задачи исследования.

1. Отработать методы выделения лимфоцитов и эритроцитов из венозной крови и методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови здоровых людей, установить референтные величины (условную норму) активности этих энзимов у здоровых, изучить зависимость энзимных показателей от пола и возраста.

2. Изучить активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в процессе стационарного лечения в зависимости от степени активности процесса, характера течения, стадии болезни при поступлении в стационар, через 10-12 дней лечения и по окончании стационарного лечения.

3. Выявить энзимологические особенности крови больных ССД, способствующие уточнению степени активности патологического процесса, характера течения и стадии болезни.

4. Изучить корреляционные связи между активностями изученных энзимов в плазме, лимфоцитах и эритроцитах больных ССД с различной активностью патологического процесса, а также корреляционные связи между активностью энзимов в лизатах лимфоцитов и иммунологическими показателями: иммуноглобулинами, ЦИК и АНФ.

5. Определить наиболее оптимальный набор энзимных показателей крови больных ССД, способствующий выявлению минимальной активности патологического процесса.

6. Оценить возможность использования энзимных показателей крови в качестве дополнительных объективных критериев эффективности проводимой терапии больных ССД.

7. Оценить степень влияния на энзимные показатели крови больных ССД активности процесса, характера течения и стадии болезни.

8. Исследовать активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных БСД и сравнить энзимные профили крови больных ССД и БСД на предмет выявления энзимных различий между ними.

Научная новизна. Впервые в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД было проведено параллельное комплексное исследование активности трех энзимов адениловой ветви ПМ: АДА, АМФДА и АД в процессе стационарного лечения и показано, что изученные энзимные показатели в комплексе с клиническими данными способствуют уточнению степени активности патологического процесса, характера течения, стадии болезни и объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД. Показано, что изменения активности ферментов обусловлены клиническими особенностями заболевания. Впервые изучены корреляционные связи между активностями энзимов в плазме, лимфоцитах и эритроцитах, а также связи между лимфоцитарными энзимами и иммунными показателями и показаны их взаимосвязи. Выявлены существенные энзимные нарушения в лимфоцитах, способные оказать негативное влияние на иммунокомпетентные клетки и регуляцию иммунных процессов при ССД. Выявлены энзимологические особенности крови больных ССД и БСД, способствующие их дифференциации.

Практическая значимость. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в комплексе с клиническими данными могут быть использованы в клинической практике для выявления и уточнения степени активности патологического процесса, характера течения, стадии болезни, что способствует назначению индивидуализированной, адекватной терапии. В процессе лечения контроль динамики энзимных показателей способствует объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД, прогнозированию ее длительности. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах клеток и плазме крови в комплексе с клиническими данными способствуют дифференциации ССД и БСД.

Основные положения, выносимые на защиту. Показатели активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД могут быть использованы в качестве дополнительных параклинических данных для ранней диагностики минимальных проявлений обострения заболевания, уточнения степени активности патологического процесса, характера течения, объективизации оценки эффективности проводимой терапии, дифференциации ССД и БСД.

Внедрение в практику. Методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови с целью выявления минимальной активации патологического процесса при ССД, уточнения степени активности процесса, контроля за эффективностью проводимой терапии внедрены в практику работы муниципального учреждения здравоохранения «Городская клиническая больница № 25» г. Волгограда. С результатами энзимных исследований, возможностями энзимной диагностики ССД, их перспективой и значимостью систематически знакомятся студенты Волгоградского государственного медицинского университета, аспиранты, клинические ординаторы, практические врачи на лекциях, научно-практических и клинических конференциях.

Публикации и апробация работы. Основные положения диссертации опубликованы в 13 печатных работах. Материалы диссертации ежегодно (2005, 2006, 2007, 2008 гг.) докладывались на научно-практических конференциях ГУ НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, Волгоградского государственного медицинского университета и заслушивались на заседаниях ученого совета ГУ НИИ КиЭР РАМН совместно с кафедрой госпитальной терапии Волгоградского государственного медицинского университета.

2. Материал и методы исследования

Под наблюдением в условиях стационара наблюдались 54 больных ССД, из которых 48 (88,9%) женщин и 6 (11,1%) мужчин. Средний возраст больных - 43,1±1,08 (у=7,9) лет, средняя продолжительность заболевания - 8,1±0,6 лет. Основную прослойку составили больные в возрасте 41-50 лет (51,8%), с длительностью болезни 6-10 лет (44,4%). В соответствии с диагностическими критериями (В. Насонова и др., 1989) I степень активности патологического процесса установлена у 18 (33,3%), II степень - у 29 (53,7%) и III степень - у 7 (13%) больных, хроническое течение заболевания - у 22 (40,7%), подострое - у 27 (50%) и острое течение - у 5 (9,3%) больных. I стадия болезни определялась у 18 (33,3%), II стадия - у 36 (66,7%) больных. При I степени преобладало хроническое течение (83,3%), при II степени - подострое (75,9%) и при III степени - острое течение (71,4%). При длительности болезни до 5 лет преобладала I стадия (84,6%), 6-10 лет - II стадия (70,8%), а при длительности свыше 10 лет у всех больных была II стадия болезни. При поступлении в стационар суставной синдром отмечался в 98,1% случаев, кожный -- в 96,3%, сосудистый -- в 94,4% и мышечный синдром -- в 79,6% случаев. Поражения легких наблюдались в 77,8%, желудочно-кишечного тракта -- в 79,6%, сердца -- в 74,1%, почек -- в 37% случаев. Чаще наблюдались сочетанные поражения внутренних органов.

В качестве группы сравнения были больные с бляшечной склеродермией, клиническая картина которой, особенно на дебютной стадии, весьма сходна с больными ССД. Под наблюдением в амбулаторных условиях наблюдались 15 больных БСД, из которых 12 (80%) женщин и 3 (20%) мужчин. Средний возраст больных -- 41,80,7 лет, длительность болезни -- 4,20,3 лет. У больных наиболее часто отмечались поражения кожи туловища (80%), конечностей (33,3%) и довольно редко (13,3%) -- кожные покровы лица. Количество очагов кожных поражений колебалось от 1 до 10-12. Некоторые очаги носили сливной характер. Большинство очагов поражения кожи находились в стадии эритемы и уплотнения (индурации), а в 1/3 очагов наблюдались стадии атрофии. Наиболее частые жалобы на чувство онемения, жжения, зуд в очагах поражения (86,7%), раздражительность (40%), боли в сердце (26,7%), артралгии (26,7%). Повышение СОЭ, количества лейкоцитов, гамма-глобулинов, СРБ выявлено у больных БСД в 20% случаев.

Контрольную группу составили 30 практически здоровых людей.

Выделение лимфоцитов, эритроцитов из венозной крови проводилось по методике Bцyum (1980) с использованием лимфосепа (JCN Biomedical) с плотностью раствора 1,077-1,079 г/мл. Лизаты клеток готовились путем замораживания-оттаивания и центрифугирования. Активность энзимов в лизатах клеток рассчитывалась для лимфоцитов в нмоль/мин на 1 мл, содержащий 1Ч10⁷ клеток (до лизиса), для эритроцитов в нмоль/мин на 1 мл, содержащий 1Ч10⁹ клеток. Определение активности АДА в лизатах клеток и плазме крови проводилось по методу R. Martinek (1963), АМФДА - с использованием цветной реакции Бертло (1984), АД - по методу T. Sakai et al. (1978). Энзимные исследования у больных ССД проводились при поступлении в стационар, через 10-12 дней лечения и перед выпиской, а у больных БСД -- однократно при поступлении. У всех больных определялись: общий анализ крови и мочи, фибриноген, общий белок и белковые фракции, СРБ, иммуноглобулины А, М, G, ЦИК, АНФ, антитела к н-ДНК, сиаловые кислоты. Использовались также инструментальные методы исследований (ЭКГ, УЗИ, рентген-исследования и др.). В лечении использовались НПВП, глюкокортикоиды, сосудорасширяющие препараты (трентал, курантил, кавинтон), антиаггреганты, метотрексат, лидаза, Д-пеницилламин, ЛФК, массаж.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием программного пакета STATISTICA 6.0 для Windows с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней (m), стандартного отклонения средней (у), достоверности различий с использованием критериев Стьюдента, Вилкоксона, Манна-Уитни, коэффициента корреляции (r) по Пирсону. Различия считались достоверными при р<0,05.

3. Результаты исследований и их обсуждение

Существенных различий показателей активности АДА, АМФДА и АД у здоровых во всех трех биологических средах в зависимости от пола и возраста не выявлено, что позволило в дальнейших исследованиях у больных эти факторы не учитывать.

У больных ССД (всей группы) при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,042), АД (р=0,006), в лизатах эритроцитов (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001) и АД (р=0,038), в лизатах лимфоцитов (табл. 3) ниже активность АДА, АД (все р<0,001) и выше АМФДА (р<0,001). Через 10-12 дней лечения в плазме наметилась тенденция к повышению активности АДА, снижению АМФДА и АД (все р>0,05), в эритроцитах -- тенденция к снижению активности АДА и АМФДА (р>0,05), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р<0,001), АД (р=0,008) и снизилась активность АМФДА (р<0,001). По окончании курса стационарного лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзмных показателей (табл. 1-3): нормализовалась активность всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах, но остались сниженными активности АДА и АД в лимфоцитах и повышенными активности АДА в эритроцитах и АМФДА в лимфоцитах (все р<0,001).

У больных с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АДА (р=0,007) и АД (р=0,042), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с подострым течением, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АМФДА (р=0,007), АД (р=0,045), в эритроцитах (табл. 2) выше активности всех энзимов: АДА (р=0,038), АМФДА (р=0,046) и АД (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с острым течением, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,039), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р=0,005), выше АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).

Между всеми вариантами течения по большинству энзимных показателей выявлены существенные энзимные различия. Так, у больных с хроническим течением заболевания, по сравнению с подострым, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001); по сравнению с острым течением, в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001).

У больных с подострым течением, по сравнению с острым течением, в плазме выше активность АДА (р=0,004), ниже АМФДА (р=0,038) и АД (р=0,041), в эритроцитах ниже активность АМФДА (р<0,001) и АД (р<0,001), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже активность АМФДА (все р<0,001).

То есть, анализ энзимных показателей при различных вариантах течения заболевания показал, что чем острее течение, тем в плазме и эритроцитах ниже активность АДА, выше АМФДА и АД, в лизатах лимфоцитов выше активность АМФДА, ниже активности АДА и АД.

У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) существенных энзимных различий не выявлено, в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). У больных ССД с II стадией, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активности АД (р=0,007) и АМФДА (р=0,042), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АДА (р=0,004) и АМФДА (р=0,048), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше активность АМФДА (все р<0,001).

Сравнительные исследования показали, что у больных ССД с I стадией, по сравнению с II стадией, в плазме выше активность АДА (р=0,038) и ниже АМФДА (р=0,037), в эритроцитах существенных энзимных различий не определялось, в лимфоцитах выше активность АДА (р=0,005), АД (р=0,006) и ниже АМФДА (р=0,032). Выявлена определенная закономерность: чем больше стадия болезни, тем в плазме и эритроцитах ниже активность АДА и выше АМФДА, АД, а в лимфоцитах ниже активности АДА, АД и выше АМФДА.

Таким образом, проведенные исследования показали, что на активность энзимов при ССД существенное влияние оказывают характер течения заболевания, стадия болезни и меняющееся клиническое состояние больных в процессе лечения. В то же время нами не учитывался такой фактор как интенсивность патологического процесса или степень его активности. Исходя из того, что в клинической практике очень важно четкое определение степени активности процесса, так как от этого зависит тактика и стратегия лечения больных, ниже нами представлен анализ энзимного профиля крови больных в зависимости от степени активности «склеродермического» процесса.

ССД - I степень активности процесса

При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, у больных в плазме (табл. 1) выше активность АДА (р=0,008) и АД (р=0,006), в лизатах эритроцитов (табл. 2) выше активность АДА (р<0,001), ниже активности АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лизатах лимфоцитов (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).

Таблица 1 Активность энзимов в плазме крови здоровых и больных ССД в процессе лечения

Контингент	Кол-во чел.	Стат. показатели	При поступлении	Перед выпиской
			АДА	АМФДА	АД	АДА	АМФДА	АД
Здоровые	30	M	7,23	1,45	2,76	--	--	--
			0,97	0,32	0,28
		m	0,18	0,06	0,06
ССД, вся группа	54	M	7,27	1,57	2,92	7,55	1,48	2,81
			0,54	0,18	0,12	0,21	0,07	0,03
		m	0,07	0,02	0,02	0,03	0,01	0,005
ССД, I степень активности	18	M	7,89	1,36	3,01	7,61	1,42	2,82
			0,32	0,11	0,13	0,09	0,06	0,04
		m	0,08	0,03	0,03	0,02	0,01	0,01
ССД, II степень активности	29	M	7,03	1,65	2,85	7,58	1,49	2,81
			0,26	0,07	0,05	0,21	0,04	0,02
		m	0,05	0,01	0,01	0,04	0,01	0,004
ССД, III степень активности	7	M	6,63	1,77	2,99	7,26	1,59	2,82
			0,18	0,05	0,12	0,19	0,05	0,05
		m	0,07	0,02	0,05	0,07	0,02	0,02
CCД, хроническое течение	22	M	7,78	1,41	2,93	7,66	1,43	2,82
			0,38	0,14	0,14	0,14	0,06	0,04
		m	0,08	0,03	0,03	0,03	0,01	0,01
CCД, подострое течение	27	M	6,98	1,66	2,90	7,50	1,50	2,80
			0,26	0,09	0,10	0,22	0,04	0,03
		m	0,05	0,02	0,02	0,04	0,01	0,005
CCД, острое течение	5	M	6,56	1,78	3,03	7,22	1,61	2,84
			0,17	0,05	0,12	0,22	0,04	0,04
		m	0,08	0,02	0,05	0,10	0,02	0,02
ССД, I стадия	18	M	7,64	1,45	2,88	7,63	1,43	2,81
			0,57	0,20	0,08	0,15	0,08	0,03
		m	0,14	0,05	0,02	0,04	0,02	0,007
ССД, II стадия	36	M	7,21	1,59	2,94	7,53	1,48	2,81
			0,61	0,20	0,13	0,24	0,09	0,04
		m	0,10	0,03	0,02	0,04	0,01	0,006

Таблица 2 Активность энзимов в лизатах эритроцитов здоровых и больных ССД в процессе лечения

Контингент	Кол-во чел.	Стат. показатели	При поступлении	Перед выпиской
			АДА	АМФДА	АД	АДА	АМФДА	АД
Здоровые	30	M	36,7	21,6	12,2	--	--	--
			3,70	4,66	1,57
		m	0,68	0,85	0,29
ССД, вся группа	54	M	49,2	23,0	13,3	41,6	22,1	12,9
			16,2	4,26	2,18	6,00	2,13	0,91
		m	2,21	0,58	0,30	0,82	0,29	0,12
ССД, I степень активности	18	M	69,6	18,3	10,8	47,7	20,2	12,4
			9,43	1,33	0,57	6,36	0,93	0,38
		m	2,22	0,31	0,13	1,50	0,22	0,09
ССД, II степень активности	29	M	40,6	24,1	14,0	38,5	22,3	12,7
			5,22	1,51	0,78	2,74	0,85	0,49
		m	0,97	0,28	0,15	0,51	0,16	0,09
ССД, III степень активности	7	M	32,3	30,6	17,0	38,8	26,1	14,8
			2,50	2,27	0,82	1,51	2,15	0,75
		m	0,95	0,86	0,31	0,57	0,81	0,28
CCД, хроническое течение	22	M	61,4	20,4	11,5	44,3	21,2	12,5
			12,9	3,82	1,31	5,96	1,61	0,40
		m	2,75	0,82	0,28	1,27	0,34	0,08
CCД, подострое течение	27	M	42,5	23,6	14,1	40,0	22,1	12,9
			13,0	2,06	1,33	5,78	1,25	0,68
		m	2,50	0,40	0,26	1,11	0,24	0,13
CCД, острое течение	5	M	31,2	31,7	17,2	38,3	26,8	15,0
			2,02	1,60	0,76	1,39	1,94	0,80
		m	0,90	0,72	0,34	0,62	0,87	0,36
CCД, I стадия	18	M	54,1	21,6	12,5	42,8	21,5	12,7
			14,1	4,27	2,38	4,54	1,82	0,84
		m	3,33	1,01	0,56	1,07	0,43	0,20
CCД, II стадия	36	M	46,7	23,8	13,4	41,0	22,4	13,0
			16,8	4,11	3,00	6,58	2,23	0,94
		m	2,80	0,69	0,50	1,10	0,37	0,16

Таблица 3 Активность энзимов в лизатах лимфоцитов здоровых и больных ССД в процессе лечения

Контингент	Кол-во чел.	Стат. показатели	При поступлении	Перед выпиской
			АДА	АМФДА	АД	АДА	АМФДА	АД
Здоровые	30	M	44,8	3,21	1,96	--	--	--
			2,98	0,53	0,18
		m	0,54	0,10	0,03
ССД, вся группа	54	M	26,1	5,15	1,69	38,2	3,61	1,86
			4,27	0,85	0,10	3,25	0,32	0,07
		m	0,58	0,12	0,01	0,44	0,04	0,01
ССД, I степень активности	18	M	27,4	4,22	1,80	41,4	3,29	1,91
			1,22	0,42	0,05	2,37	0,13	0,05
		m	0,43	0,10	0,01	0,56	0,03	0,01
ССД, II степень активности	29	M	24,5	5,41	1,66	36,9	3,69	1,84
			1,80	0,42	0,05	2,23	0,21	0,07
		m	0,33	0,08	0,01	0,46	0,04	0,01
ССД, III степень активности	7	M	21,0	6,46	1,52	35,5	4,11	1,77
			0,48	0,26	0,03	2,63	0,19	0,06
		m	0,18	0,10	0,01	1,00	0,07	0,02
CCД, хроническое течение	22	M	29,9	4,4	1,78	39,5	3,36	1,91
			3,83	0,52	0,06	3,4	0,18	0,05
		m	0,82	0,11	0,01	0,77	0,04	0,01
CCД, подострое течение	27	M	24,0	5,53	1,64	37,6	3,72	1,82
			1,86	0,51	0,06	2,72	0,25	0,06
		m	0,36	0,1	0,01	0,52	0,05	0,01
CCД, острое течение	5	M	20,8	6,46	1,53	35,8	4,12	1,78
			0,31	0,26	0,03	2,18	0,22	0,05
		m	0,14	0,12	0,01	0,98	0,10	0,02
CCД, I стадия	18	M	28,5	4,75	1,74	38,7	3,49	1,90
			5,61	0,99	0,11	3,77	0,37	0,08
		m	1,32	0,23	0,03	0,89	0,09	0,02
CCД, II стадия	36	M	24,9	5,35	1,66	38,0	3,67	1,84
			2,81	0,71	0,08	2,98	0,28	0,07
		m	0,47	0,12	0,01	0,50	0,05	0,01

Если же ориентироваться не на среднестатистические величины активности ферментов, а на индивидуальные энзимные показатели, то за пределы условной нормы (референтные пределы) у здоровых, вычисленной по формуле М±2у (95% вероятность), в плазме не выходил ни один энзимный показатель, в лизатах эритроцитов только активность АДА у всех больных (100%) превышала верхние границы нормы, в лизатах лим-фоцитов активность АДА в 94,4% случаев была меньше нижней границы нормы, активность АМФДА была выше верхней границы в 50% случаев, а активность АД ни у одного больного не выходила за референтные пределы. В то же время у этих же больных среди общепринятых клинико-иммуно-биохимических показателей, отражающих активность иммуно-воспалительного процесса при ССД, отклонения от уровня здоровых лиц для СРБ, гамма-глобулинов, иммуноглобулинов G определялись в 44,4% случаев, сиаловых кислот -- в 38,9%, альфа-2-глобулинов, СОЭ, иммуноглобулинов М -- в 33,3%, фибриногена, ЦИК, иммуноглобулинов А -- в 27,8%, антител к н-ДНК и АНФ (+) -- в 22,2% случаев. То есть, показатели активности АДА в лизатах эритроцитов и лимфоцитов отличались более значительной чувствительностью и информативностью в отражении минимальной активности патологического процесса при ССД, чем самые демонстративные в этом аспекте вышеуказанные клинико-иммуно-биохимические показатели.

Корреляционный анализ показ наличие прямых умеренных связей в плазме между активностями АДА--АД (r=0,34), в эритроцитах -- умеренные прямые связи между АМФДА--АД и обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, в лимфоцитах -- обратные умеренные связи между АДА--АМФДА. Также определены обратные умеренные связи между активностью АДА и IgG (r=-0,33), АДА и АНФ (к=-0,34). Между активностью АМФДА и IgG (r=0,34), АМФДА и АНФ (r=0,29) выявлены прямые умеренные связи.

Через 10-12 дней лечения в плазме существенной динамики энзимных показателей не наблюдалось, в эритроцитах снизилась активность АДА (р=0,008) и повысилась ранее сниженная активность АД (р=0,039), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р<0,001) и снизилась активность АМФДА (р=0,033). После проведенного курса лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3): нормализовались активности всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах и лимфоцитах, но остались повышенной активность АДА в эритроцитах (р<0,001) и сниженной в лимфоцитах (р<0,001).

У больных с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р=0,007) и АД (р=0,008), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), ниже активность АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), АД (р=0,004) и выше активность АМФДА (р<0,001).

У больных с подострым течением, по сравнению со здоровыми (табл. 4), в плазме выше активность АД (р=0,006), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), АД (р=0,036) и выше АМФДА (р<0,001).

Сравнительные исследования показали, что у больных с хроническим течением, по сравнению с подострым, в плазме выше активность АДА (р<0,001) и ниже АМФДА (р=0,032), в эритроцитах ниже активность АМФДА (р=0,004) и АД (р=0,033), в лимфоцитах ниже активность АМФДА (р=0,039), но выше активность АД (р=0,003).

У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с II стадией (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р<0,001), ниже активности АМФДА (р<0,001) и АД (р=0,032), в эритроцитах ниже активность АДА (р=0,042), в лимфоцитах выше активность АДА (р=0,003), АД (р=0,041), ниже активность АМФДА (р=0,033). То есть, при одинаковой активности процесса между вариантами течения и стадиями болезни определяются статистически значимые энзимные различия.

Таблица 4 Активность энзимов у больных ССД в зависимости от клинических особенностей

Контингент	Кол. б-ых	Стат. пок-ли	Плазма	Эритроциты	Лимфоциты
			АДА	АМФДА	АД	АДА	АМФДА	АД	АДА	АМФДА	АД
I степень активности
-- хроническое течение	15	M	7,99	1,33	2,99	68,1	18,0	10,6	31,3	4,13	1,81
		m	0,07	0,03	0,03	2,48	0,29	0,14	0,97	0,10	0,01
-- подострое течение	3	M	7,30	1,49	3,13	77,3	20,1	11,4	27,7	4,67	1,73
		m	0,07	0,007	0,03	1,19	0,40	0,07	0,21	0,07	0,01
-- I стадия болезни	9	M	8,16	1,27	2,94	65,2	18,0	10,5	33,0	3,99	1,82
		m	0,06	0,02	0,02	3,19	0,40	0,20	1,36	0,16	0,01
-- II стадия болезни	9	M	7,30	1,44	3,09	74,0	18,6	9,82	28,4	4,43	1,77
		m	0,06	0,02	0,05	2,45	0,49	1,23	0,22	0,09	0,02
II степень активности
-- хроническое течение	7	M	7,33	1,58	2,79	47,1	25,6	13,2	26,73	4,94	1,71
		m	0,04	0,008	0,01	1,54	0,43	0,11	0,44	0,08	0,02
-- подострое течение	22	M	6,94	1,68	2,87	38,5	23,7	14,2	23,73	5,56	1,64
		m	0,05	0,01	0,01	0,77	0,28	0,15	0,27	0,08	0,01
-- I стадия болезни	6	M	7,32	1,58	2,76	47,1	23,2	13,6	25,3	5,08	1,73
		m	0,05	0,01	0,01	1,99	0,38	0,25	0,37	0,18	0,02
-- II стадия болезни	23	M	6,96	1,56	2,86	38,9	24,4	14,1	24,2	5,50	1,64
		m	0,05	0,01	0,01	0,80	0,32	0,17	0,40	0,08	0,01

ССД - II степень активности процесса

При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) выше активность АМФДА (р=0,004), в эритроцитах (табл. 2) выше активности АДА (р=0,005), АМФДА (р=0,007) и АД (р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активности АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001). Корреляционный анализ показал в плазме наличие прямых умеренных связей между АМФДА и АД, в эритроцитах -- прямых умеренных связей между АМФДА и АД, АДА и АД, в лимфоцитах -- прямых умеренных связей между АДА и АД, обратных умеренных -- между АДА--АМФДА, АМФДА--АД. Также выявлены обратные умеренные связи в лимфоцитах между активностью АДА и всеми изученными иммунными показателями, наиболее выраженные между АДА и IgG (r=-0,58). Между активностью АМФДА и иммунными показателями определялись прямые умеренные связи, наиболее выраженные между АМФДА и IgG (r=0,53). Между активностью АД и иммунными показателями выявлены умеренные, за исключением между АД и IgА, обратные связи, наиболее статистически значимые между АД и IgG (r=-0,51).

То есть, определяются некоторые закономерности: чем ниже в лимфоцитах активность АДА и АД, выше активность АМФДА, тем выраженнее изменения изученных иммунных показателей в негативную сторону.

Через 10-12 дней лечения в плазме повысилась активность АДА (р=0,005), снизилась АМФДА (р=0,043), в эритроцитах существенных изменений активности энзимов не произошло, в лимфоцитах повысилась активность АДА и снизилась АМФДА (все р<0,001).

По окончании курса стационарного лечения наблюдалась значимая положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3), нормализовались активности всех энзимов в плазме, АМФДА и АД в эритроцитах, но осталась повышенной активность АДА в эритроцитах, АМФДА в лимфоцитах и сниженной активность АДА и АД в лимфоцитах.

У больных с хроническим течением, по сравнению с подострым (табл. 4), в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА и АД (все р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), АМФДА (р=0,004) и ниже активность АД (р=0,003), в лимфоцитах выше активности АДА (р<0,001), АД (р=0,004) и ниже активность АМФДА (р<0,001).

У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с II стадией (табл. 4), в плазме выше активность АДА (р=0,003) и ниже АД (р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АМФДА (р=0,042) и выше активность АД (р<0,001). То есть, как при I степени, так и при II степени выявлены существенные энзимные различия между вариантами течения и стадиями болезни.

ССД - III степень активности процесса

При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (табл. 1) ниже активность АДА (р<0,001) и выше АД (р=0,037), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р=0,006), выше АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р<0,001).

По сравнению с II степенью, в плазме все корреляционные связи между энзимами упрочились без изменения направлений, в эритроцитах поменялись направления связей между АДА--АМФДА и АДА--АД на обратные, в лимфоцитах направления связей остались прежними, но более упрочились. В лимфоцитах между активностью АДА, АД и всеми изученными иммунными показателями определялись умеренные обратные связи, наиболее выраженные между АДА и IgG (r=-0,72) и АД и IgG (r=-0,42); а между активностью АМФДА и иммунными показателями выявлены прямые умеренные связи, наиболее выраженные между АМФДА и IgG (r=0,56).

Через 10-12 дней лечения в плазме и эритроцитах наметилась тенденция к нормализации энзимных показателей, а в лимфоцитах повысились ранее сниженные активности АДА (р<0,001), АД (р=0,007) и снизилась активность АМФДА (р<0,001).

После проведенного курса лечения наблюдалась существенная положительная динамика всех энзимных показателей (табл. 1-3): в плазме отмечалась нормализация всех показателей, в эритроцитах нормализовалась активность АДА, но остались повышенными активности АМФДА и АД, в лимфоцитах остались сниженными активности АДА, АД и повышенной активность АМФДА.

Таким образом, проведенные исследования показали, что каждой степени активности «склеродермического» процесса свойственен определенный энзимный профиль крови.

У больных ССД с I степенью активности процесса, по сравнению с II степенью, в плазме выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001), в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД (все р<0,001), в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001); по сравнению с III степенью, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). При II степени, по сравнению с III степенью, в плазме и эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). То есть, между всеми степенями активности процесса имеются существенные энзимные различия, способствующие их дифференциации.

Проведенные исследования свидетельствуют о том, что на энзимные показатели крови, помимо активности процесса, оказывают существенное влияние характер течения и стадии болезни. Для того чтобы выяснить, что же в большей степени влияет на энзимный профиль крови: степень активности процесса, характер течения или стадия болезни, мы провели сравнительные исследования энзимных показателей при одном варианте течения, одной стадии болезни, но разных степенях активности процесса. Результаты исследования показали, что у больных ССД с хроническим течением и I степенью, по сравнению с больными с хроническим течением и II степенью, в плазме выше активность АДА, АД и ниже АМФДА, в эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). Примерно, такая же ситуация наблюдается и у больных с подострым вариантом течения при сравнении энзимных показателей с различной активностью процесса. То есть, независимо от характера течения, между сравниваемыми группами выявлены различия, свойственные различиям между I и II степенями активности процесса, а это доказывает, что влияние активности патологического процесса на энзимные показатели значительно более выражено, чем характера течения заболевания. Аналогичная ситуация наблюдалась и по отношению к стадиям болезни. Это имеет важное практическое значение, так как ни стадия, ни любой вариант течения заболевания не способны «маскировать» активность процесса, что позволяет в комплексе с клиническими данными четко определять степень активности патологического процесса при ССД и назначать адекватную терапию.

Больные бляшечной склеродермией

Больные БСД были выбраны для исследования в качестве группы сравнения. Выбор этой нозологической формы ограниченной склеродермии был обусловлен как близостью клинической картины заболевания с ССД, так и схожестью отдельных патогенетических звеньев ССД и БСД. При этих заболеваниях нарушены процессы фиброобразования в коже, микроциркуляции и иммунного статуса. Весьма похожи и гистоморфологические изменения кожи (А.И. Струков, 1969; Н.Г. Гусева, 1993; Ю.К. Скрипкин, 1996). До настоящего времени остается актуальной проблема возможности трансформации ограниченных форм склеродермии в ССД, и ее решение имеет важное значение в клинической практике. Наблюдения перехода БСД в ССД немногочисленны, но они есть (Е.В. Вербенко, 1966; В.А. Гребенников, А.Г. Чалинова, 1983; А.В.Смирнов, 1997). Поэтому были предприняты исследования энзимного профиля крови больных БСД с целью выявления особенностей энзимного статуса крови в сравнении с больными ССД.

У больных БСД, по сравнению со здоровыми (табл. 5), в плазме выше активность АДА (р<0,001) и ниже активность АД (р=0,004), в эритроцитах ниже активность АДА (р<0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р<0,001), но выше АД (р<0,001) и АМФДА (р=0,044).

Таблица 5 Активность энзимов в крови больных бляшечной склеродермией

Среда исследования	Кол-во больных	Стат. пок-ли	Активность энзимов
			АДА	АМФДА	АД
Плазма	15	М	8,3	1,48	2,45
			0,36	0,05	0,15
		m	0,09	0,01	0,04
Лизаты эритроцитов	15	М	33,0	20,6	11,7
			1,81	1,52	0,46
		m	0,47	0,39	0,12
Лизаты лимфоцитов	15	М	40,4	3,53	2,29
			2,54	0,20	0,18
		m	0,66	0,05	0,05

Сравнительные исследования показали, что у больных БСД, по сравнению с больными ССД, в плазме выше активность АДА (р<0,001), ниже активность АМФДА (р=0,041) и АД (р<0,001), в эритроцитах ниже активность всех энзимов: АДА (р<0,001), АМФДА (р=0,043) и АД (р=0,007), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р<0,001). Нами также были проведены сравнительные энзимные исследования у больных БСД с каждой степенью активности процесса при ССД и выявлены также энзимные различия. В результате сравнительных исследований выявлены некоторые особенности активности энзимов при БСД и ССД: 1. При ССД в плазме активность АД или в пределах нормы, или повышена, а при БСД активность АД всегда снижена. 2. При ССД в лимфоцитах не наблюдалось случаев повышения активности АД, а при БСД у всех больных активность АД повышена. 3. При ССД в эритроцитах чаще всего наблюдается повышение активности всех энзимов (за исключением I степени, где имеется снижение активности АМФДА и АД, но на фоне двукратного повышения активности АДА), а при БСД чаще всего наблюдается снижение активности всех энзимов или их норма.

С учетом этих особенностей в комплексе с клиническими данными представляется возможность более четкого дифференцирования ССД и БСД. Если же у больных БСД в плазме определяется повышение активности АД, в лимфоцитах снижение активности АД, в эритроцитах повышение активности изученных энзимов, то такие больные должны тщательно и регулярно наблюдаться как группа риска трансформации БСД в ССД.

Таким образом, проведенные нами исследования выявили существенные изменения активности АДА, АМФДА и АД во всех трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови, зависящие в большей степени от активности патологического процесса и в меньшей степени от характера течения и стадии болезни. Выявлены также определенные закономерности: чем выше степень активность патологического процесса, тем в плазме ниже активность АДА и выше АМФДА, в эритроцитах ниже активность АДА, выше активности АМФДА и АД, в лимфоцитах ниже активность АДА, АД и выше АМФДА.

Изученные нами ферменты являются звеньями энзимной системы аденилового пула пуринового метаболизма, и поэтому все они взаимосвязаны. В лизатах лимфоцитов больных ССД нами получено снижение активности АДА, АД и повышение активности АМФДА. Низкая активность АДА может быть обусловлена структурным дефектом молекулы фермента или частичной ингибицией энзима за счет появления в клетке различных метаболитов, супероксидных радикалов, ионов металлов, связывающих активный центр фермента, аллостерических ингибиторов, так как в лимфоцитах при ССД имеются нарушения не только ПМ, но и других видов обмена. Снижение активности АДА в лимфоците достаточно быстро может привести к повышенной концентрации аденозина в клетке, что в свою очередь может вызвать частичную блокаду рибонуклеотидредуктазы, замедление биосинтеза ДНК, РНК, гибель лимфоцитов или их усиленный апоптоз, особенно Т-лимфоцитов, нарушения процессов пролиферации клеток, угнетение некоторых функций лимфоцитов, в частности супрессорной и киллерной. Кроме того, повышенное содержание аденозина в лимфоците индуцирует повышение синтеза фактора некроза опухоли-альфа, ответственного за регуляцию иммунных процессов (Н.П. Дмитренко 1984; Л.И. Филановская, 1986; K. Flocke, 1991; A. Eigler, 1997). То есть, дефицит АДА в лимфоцитах, влекущий за собой нарушение их функциональных свойств, может обусловить дискоординацию иммунных процессов и составить один из патогенетических механизмов ССД. Повышенная активность АМФДА в лимфоцитах, вероятно, служит адаптационной, компенсаторной реакцией, уводящей часть АМФ с пути его превращения в аденозин, которого в клетке и так достаточно много. Низкая активность АД может быть обусловлена сниженным уровнем аденина вследствие низкой активности нуклеозидазы.

В лизатах эритроцитов активность АМФДА и АД повышена, что свидетельствует об интенсификации катаболизма адениловых производных при ССД. Это может отразиться на продолжительности жизни эритроцитов и развитии анемии, что и наблюдается у больных с высокой активностью процесса.

По активности энзимов в плазме крови судить о ПМ в клетках крови не представляется возможным, так как изученные ферменты локализуются не только в клетках крови, но и в клетках других тканей, и выход их в плазму по причине повышенной проницаемости клеточных мембран или по другим причинам чаще всего свидетельствует о наличии патологии в организме, воспалительных или дистрофических процессов. То есть, плазменная активность ферментов имеет диагностическое, а не патогенетическое значение. В то же время исследование комплекса ферментов параллельно в трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови позволяет не только оценить роль АДА, АМФДА и АД в патогенезе ССД, но и улучшить ее диагностику и наметить принципиально новые лечебные подходы в лечении больных ССД с использованием средств, нормализующих пуриновый метаболизм в клетках крови и, в первую очередь, в лимфоцитах.

Выводы

1. У больных ССД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови выявлены существенные изменения активности АДА, АМФДА и АД, зависящие от степени активности патологического процесса, характера течения и стадии болезни.

2. Чем выше степень активности патологического процесса, тем в плазме крови больных ССД ниже активность АДА и выше активность АМФДА, в лизатах эритроцитов -- ниже активность АДА и выше активности АМФДА и АД, в лизатах лимфоцитов -- ниже активности АДА, АД и выше активность АМФДА. Между всеми степенями активности процесса определяются существенные энзимные различия во всех трех средах исследований.

3. Чем острее течение заболевания, тем ниже активность АДА и выше АМФДА во всех трех биологических средах исследований, выше активность АД в плазме, эритроцитах и ниже в лимфоцитах. Между всеми вариантами течения заболевания определялись существенные энзимные различия.

4. У больных ССД с I стадией, по сравнению с II стадией болезни, в плазме выше активность АДА и ниже АМФДА, в эритроцитах существенных различий не определяется, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже АМФДА.

5. На энзимные показатели крови наиболее выраженное влияние оказывает степень активности процесса и менее значительное -- характер течения и стадия болезни.

6. Показатели активности АДА в лизатах эритроцитов и лимфоцитов, АМФДА в лимфоцитах оказались значительно более информативными в индикации минимальной активности патологического процесса при ССД, чем общепринятые клинико-иммуно-биохимические показатели: СОЭ, СРБ, ЦИК, АНФ, сиаловые кислоты, белки сыворотки крови, иммуноглобулины различных классов.

7. В ранние сроки лечения (10-12 дней) наиболее информативными в отражении меняющегося клинического состояния больных при I степени являются показатели активности АДА и АД в эритроцитах, АДА, АМФДА в лимфоцитах, при II степени -- АМФДА и АДА в плазме и лимфоцитах, при III степени -- только показатели активности всех энзимов в лимфоцитах. Период наступающей клинической ремиссии при I степени ассоциируется с нормализацией активности всех энзимов в плазме, АД и АМФДА в эритроцитах, при II степени -- активности всех энзимов в плазме, АДА и АМФДА в эритроцитах, III степени -- активности всех энзимов в плазме и АДА в эритроцитах.

8. При I степени в плазме выявлены прямые умеренные корреляционные связи между активностями АДА--АД, в эритроцитах -- прямые умеренные связи между АМФДА--АД, обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, в лимфоцитах -- обратные умеренные связи между АДА--АМФДА; при II степени в плазме и эритроцитах -- прямые умеренные связи между АМФДА--АД, в эритроцитах -- между АДА--АД, в лимфоцитах -- прямые умеренные связи между АДА--АД, обратные умеренные связи между АДА--АМФДА, АД--АМФДА; при III степени корреляционные связи между энзимами носили ту же направленность, что и при II степени, но они стали еще более прочными.

9. У больных ССД выявлены умеренные разнонаправленные корреляционные связи между активностью АДА, АМФДА и АД в лимфоцитах и некоторыми иммунными показателями: иммуноглобулинами А, М и G, ЦИК и АНФ. Чем ниже активность АДА, АД и выше активность АМФДА в лимфоцитах, тем более выраженнее отклонения иммунных показателей от уровня нормы в сторону увеличения их содержания.

10. Выявленное нами снижение активности АДА в лимфоцитах больных ССД, особенно выраженное при высокой активности процесса, может обусловить нарушения функциональных свойств лимфоцитов, процессы их пролиферации, дифференциации, синтеза ДНК, РНК, ослабить супрессорные свойства Т-клеток, ускорить их апоптоз и, таким образом, составить один из патогенетических механизмов ССД.

11. Между больными ССД и БСД определяются существенные энзимные различия: при ССД в лизатах эритроцитов активности АДА, АМФДА и АД повышены, при БСД -- снижены; при ССД в плазме крови активность АД повышена, при БСД -- снижена; при ССД в лимфоцитах активность АД снижена, при БСД -- повышена. У больных БСД, по сравнению с больными ССД (всей группы), в плазме выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в эритроцитах ниже активность всех энзимов, в лимфоцитах выше активности АДА, АД и ниже активность АМФДА.

12. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в комплексе с клиническими данными способствуют улучшению диагностики степени активности патологического процесса при ССД, характера течения, стадии болезни, уточнению роли энзимов пуринового метаболизма в патогенезе ССД и объективизации оценки эффективности проводимой терапии.

Практические рекомендации

1. При определении границ условной нормы (референтных пределов) активности энзимов в крови здоровых людей целесообразно ориентироваться на величины, вычисленные по формуле: М2 (95% вероятность). Исходя из этого, референтные пределы активности энзимов (нмоль/мл/мин) в плазме крови составили для АДА: 5,29-9,17; АМФДА: 0,81-2,09; АД: 2,2-3,32; в лизатах эритроцитов -- АДА: 28,8-44,0; АМФДА: 12,3-30,9; АД: 9,1-15,3; в лизатах лимфоцитов -- АДА: 38,8-50,8; АМФДА: 2,15-4,27; АД: 1,36-2,56.

2. Для выявления минимальной активности «склеродермического» процесса и ее разграничения с периодом клинической ремиссии рекомендуется определять активность АДА в лизатах эритроцитов, которая в случаях активации процесса в 100% случаев выше верхней границы нормы и (или) активность АДА в лизатах лимфоцитов, которая в 94,4% случаев ниже нижнего уровня здоровых людей.

3. Для уточнения степени активности процесса целесообразно ориентироваться на активность энзимов в лизатах лимфоцитов. При I степени активность АДА в пределах 21,6-28,5 нмоль/мл/мин, АМФДА -- 3,4-4,5 нмоль/мл/мин, АД -- 1,7-1,8 нмоль/мл/мин. За II степень свидетельствуют активность АДА в диапазоне: 20,4-21,5 нмоль/мл/мин, АМФДА: 4,6-6,1 нмоль/мл/мин, АД: 1,6-1,81 нмоль/мл/мин; за III степень -- активность АДА: 20,3 нмоль/мл/ин и менее, АМФДА: более 6,1 нмоль/ил/мин и АД: менее 1,6 нмоль/мл/мин.

4. Для контроля эффективности проводимой терапии больных ССД в первые 10 дней лечения целесообразно ориентироваться на динамику активности АДА и АД в лизатах лимфоцитов, которые в случае улучшения клинического состояния больных повышаются, а в случаях ухудшения -- понижаются. Период наступающей клинической ремиссии чаще всего сопровождается нормализацией активности всех энзимов в плазме и некоторых в эритроцитах.

склеродермия энзим патогенетический кровь

Публикации

Абрамов Н.Б., Морозова Т.А., Филимонова Ю.К., Шилова Л.Н. Активность адениндезаминазы в лимфоцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 5-6.

Абрамов Н.Б., Хортиева С.С., Бедина С.А., Мартемьянов В.Ф. Клиническое значение исследования активности АМФ-дезаминазы в лимфоцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 6-7.

Мартемьянов В.Ф., Зборовский А.Б., Абрамов Н.Б., Некрасова С.П. Активность аденозиндезаминазы (АДА) в лимфоцитах и плазме крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 87-88.

Абрамов Н.Б., Морозова Т.А., Мартемьянов В.Ф., Зборовская И.А. К исследованию активности АМФ-дезаминазы в лизатах эритроцитов и плазме крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 3-4.

Абрамов Н.Б., Трубенко Ю.А., Мартемьянов В.Ф., Белясникова Е.А. Клиническое значение определения активности адениндезаминазы в плазме и лизатах эритроцитов крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 4-5.

Мартемьянов В.Ф., Рогаткина Т.Ф., Абрамов Н.Б., Белясникова Е.А. Клиническое значение определения активности аденозиндезаминазы в плазме и лизатах эритроцитов крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 94-95.

Абрамов Н.Б., Бедина С.А. Активность аденозиндезаминазы, адениндезаминазы, АМФ-дезаминазы в эритроцитах и плазме крови при системной склеродермии // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: Мат. 64-й открытой итоговой науч. конф. молодых ученых и студентов ВолГМУ / Под ред. акад. РАМН В.И. Петрова. -- Волгоград, 2006. -- С. 97-98.

Абрамов Н.Б., Зборовский А.Б., Мартемьянов В.Ф. Активность адениловых энзимов у больных системной склеродермией (ССД) с различными вариантами течения заболевания // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIV. -- Волгоград, 2007. -- С. 3-4.

Абрамов Н.Б., Мартемьянов В.Ф., Бедина С.А. Особенности активности энзимов пуринового метаболизма в клетках крови больных системной склеродермией (ССД) при различных стадиях болезни // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIV. -- Волгоград, 2007. -- С. 4-5.

Мартемьянов В.Ф., Абрамов Н.Б., Бедина С.А., Шилова Л.Н. К исследованию активности энзимов адениловой ветви пуринового метаболизма у больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIV. -- Волгоград, 2007. -- С. 63-64.

Абрамов Н.Б., Зборовская И.А., Кудряков Р.Ш., Мартемьянов В.Ф. Активность энзимов аденилового пула пуринов в крови больных системной и бляшечной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXV. -- Волгоград, 2008. -- С. 3-4.

Зборовский А.Б., Абрамов Н.Б. Клинико-диагностическое значение активности энзимов аденилового пула пуринового метаболизма в лимфоцитах и эритроцитах больных системной склеродермией // Вестник ВолГМУ -- 2008. -- № 4. -- С. 71-74.

Абрамов Н.Б., Мартемьянов В.Ф. Активность энзимов адениловой ветви пуринового метаболизма при системной склеродермии //Альманах современной науки и образования -- Тамбов: «Грамота», 2007, № 6. -- С. 7-10.