Конденсированные производные бензимидазола – новый класс антитромбогенных средств

Рис. 11. Влияние соединений РУ-891, РУ-254, РУ-185 и препаратов сравнения в дозе 100 мкМ на прирост уровня внутриклеточного кальция индуцированный тромбином

*-p<0,05-данные статистически значимы относительно контроля, критерий Манна-Уитни

Препарат сравнения АСК оказалась не эффективной, так как снижала прирост внутриклеточного кальция всего на 1,7 % по сравнению с контролем. Полученные данные, свидетельствуют о способности производных бензимидазола и верапамила снижать суммарный прирост ионов Са2+ за счет его входа в клетку и мобилизации из внутренних источников. ED50 соединений при этом составила для РУ-891 - 3,6 мкМ, для РУ-254 - 34 мкМ и для РУ-185 - 100 мкМ (рис.12).

На втором этапе было изучено влияние соединений на уровень внутриклеточного кальция, высвобождаемого из внутриклеточных депо (эксперименты в бескальциевой среде). Антагонист ионов кальция верапамил, соединения РУ-254 и РУ-185 в данном исследовании показали свою неэффективность. Напротив, соединение РУ-891 проявило высокую активность на предмет ингибирования кальция, высвобождаемого из внутриклеточных депо тромбоцитов. ED50 вещества РУ-891 при этом составила 5,1 мкМ (рис.13).

Таким образом, проведенные исследования по влиянию производных бензимидазола на уровень внутриклеточного кальция в тромбоцитах, позволяют полагать, что соединение РУ-891 обладает выраженной ингибирующей активностью в отношении данного показателя.

Рис. 12. Влияние соединений РУ-891, РУ-254 и РУ-185 на прирост уровня внутриклеточного кальция в тромбоцитах, индуцированного тромбином (Д % ингибирования) в кальциевой среде

Рис. 13. Влияние соединения РУ-891 на уровень внутриклеточного кальция в тромбоцитах, индуцированный тромбином (без кальциевая среда)

* -p<0,01 * * -p<0,001-данные статистически значимы относительно контроля, критерий Манна-Уитни.

Повышение содержания ионизированного кальция в плазме крови вызывает увеличение доли мембраносвязанного кальция. Он способен связываться с мембранными анионами (главным образом с карбоксильными группами белков и кислыми фосфолипидами )[ Xander, 2005]. Мембраносвязанный кальций участвует в агрегатообразовании тромбоцитов, а также способен значительно изменять не только поверхностный заряд, но и свойства и структуру клеточной мембраны. Также повышается вероятность входа ионов в клетку [Stefanini, 2010]. При изучении влияния производных бензимидазола на уровень мембраносвязанного кальция в тромбоцитах было показано, что из трех изученных соединений, только вещество РУ-185 статистически значимо в дозе 100 мкМ ингибирует данный данный показатель (табл.7).

Таблица 7. Влияние соединений РУ-254, РУ-185, РУ-891 на уровень мембраносвязанного кальция в тромбоцитах (опыты in vitro) (М±m)

*-p<0,001- данные статистически значимы по отношению к контролю, критерий Манна-Уитни

В виду того, что соединение РУ-891 проявило высокую активность при влиянии на уровень внутриклеточного Са2+, представилось необходимым выяснить, не связан ли этот эффект вещества с действием на потенциал-зависимые кальциевые каналы. В связи с этим производные бензимидазола были изучены на модели гиперкалиевой контрактуры. В результате проведенных экспериментов на изолированной портальной вене было показано, что вещества РУ-891, РУ-254 и РУ-185 в диапазоне доз от 1 до 100 мкМ не снижали статистически значимо гиперкалиевую контрактуру. В отличие от них, препарат сравнения верапамил практически полностью подавлял ее. Полученные результаты, подтверждают, что ингибирование соединением РУ-891 внутриклеточного кальция в тромбоцитах не связано с его влиянием на потенциал-зависимые кальциевые каналы.

Учитывая важную роль дисфункции эндотелия при повышении тромбогенного потенциала крови, также необходимо было выяснить, не влияют ли производные бензимидазола на функцию эндотелия. В результате проведенных исследований показано, что изученные соединения, не оказывают какого-либо влияния на эндотелиальную функцию сосудов интактных животных. Учитывая, что важным составляющим микроангиопатий при сахарном диабете является ослабление эндотелий-зависимой релаксации, было исследовано действие веществ РУ-891, РУ-254 и РУ-185 на функцию эндотелия сосудов при семидневном введении крысам с экспериментальным аллоксановым диабетом. Коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД) у крыс с экспериментальным аллоксановым диабетом составил 3,1, что достоверно превышало контрольные значения в 2,6 раза. Данная разница в показателях свидетельствует о существенном нарушении функции эндотелия сосудов у животных с аллоксановой интоксикацией. Соединения РУ-891, РУ-254 и РУ-185 достоверно снижали КЭД относительно разницы контрольных значений, полученных на животных с аллоксановой интоксикацией по сравнению с контрольными значениями интактных крыс на 87, 94 и 99% соответственно (рис. 14).

Рис. 14. Влияние соединений РУ-891, РУ-254 и РУ-185 при курсовом введении на коэффициент эндотелиальной дисфункции крыс с аллоксановым диабетом в дозах, равных ED50 , полученных на модели внутрисосудистой агрегации тромбоцитов

*- p<0,05 - данные статистически значимы относительно интактных животных.

**-p<0,001-данные статистически значимы относительно животных с экспериментальным диабетом.

При изучении действия производных бензимидазола на параметры свертывания крови статистически значимых изменений получено не было, что указывает на связь антитромбогенного действия изученных соединений с их влиянием на тромбоцитарно-сосудистый гемостаз.

Изучение возможных механизмов действия с использованием методов in silico. С целью более детального анализа особенностей взаимодействия производных бензимидазола с различными мишенями патогенеза агрегации тромбоцитов, был выполнен анализ сходства структур изученных соединений со структурами 13 стандартных препаратов сравнения, проявляющих различные механизмы антиагрегантного действия. В результате проведенного анализа, было выявлено сходство молекулярной структуры соединений РУ-891 и РУ-254 с молекулярными структурами ФДЭ цАМФ III типа и ТХА2-синтетазы, что позволяет предположить возможное влияние производных бензимидазола на данные биомишени. Структура вещества РУ-185 в большей степени была схожа со структурами препаратов с антикальмодулиновым действием и структурами ингибиторов ФДЭ цАМФ III типа.

Также для анализа предполагаемого механизма взаимодействия изученных соединений с выбранными мишенями, был выполнен докинг их молекулярных моделей в сайты связывания молекулярных моделей кальмодулина, аденилатциклазы I типа, ФДЭ цАМФ III типа и ТХА2-синтетазы. При докировании соединения РУ-891 в сайты связывания кальмодулина, аденилатциклазы I типа и ФДЭ цАМФ III типа было показано, что максимальные значения расчетной величины энергии связывания РУ-891 (7,1) выше, чем у препаратов сравнения хлорпромазина, форсколина и пентоксифиллина. При докировании в сайт связывания ТХА2-синтетазы значения энергии докинга соединения РУ-891 и препарата сравнения ридогреля были равны. В результате докинга соединения РУ-254 в структуры выбранных мишеней, наибольшая энергия связывания была получена для сайта ТХА2-синтетазы (6,1) уступающая, однако, значениям энергии связывания препарата сравнения ридогрела (7,9). При докировании соединения РУ-185 в сайты связывания выбранных молекул-мишеней были получены более высокие значения энергии докинга данного вещества в сравнении с энергиями докинга ингибиторов кальмодулина, ФДЭ цАМФ III типа и ТХА2-синтетазы. Анализируя результаты данного исследования, можно только предполагать, что возможный механизм действия изученных производных бензимидазола может быть реализован через взаимодействие с данными белками - мишенями.

Таким образом, на основании полученных экспериментальных данных возможный антиагрегантный механизм действия соединения РУ-891 может реализовываться через блокирование P2Y12 рецепторов тромбоцитов, ингибирование синтеза тромбоксана А2 и снижения уровня внутриклеточного кальция в тромбоцитах. На способность данного соединения снижать синтез тромбоксана А2, помимо снижения уровня МДА в тромбоцитах крыс, индуцированных тромбином ex vivo, указывает способность вещества РУ-891 выражено ингибировать агрегацию тромбоцитов in vitro, вызванную арахидоновой кислотой, коллагеном и агонистом тромбоксановых рецепторов U46619.

Механизм антиагрегантного действия гипогликемического соединения РУ-254 связан со снижением синтеза ТХА2. Нарушение тромбоцитарной реактивности при СД связывают именно с нарушением баланса простагландинов, т.е. с повышением уровня проагреганта и вазоконстриктора ТХА2 и снижением концентрации антиагреганта и вазодилататора простациклина. Ингибирующее влияние соединения РУ-254 на синтез ТХА2, восстановление им антиагрегационной активности сосудистой стенки при патологии, подтверждает способность данного вещества уменьшать гиперадгезивность и гиперагрегацию тромбоцитов, что может стать важным преимуществом в терапии сахарного диабета II типа.

Механизм действия антиоксидантного соединения РУ-185 также может реализовываться через ингибирование кальмодулин-зависимой ФДЭ цАМФ и снижение синтеза ТХА2. Кроме того, все три соединения проявляют выраженное антитромботическое действие на различных моделях артериальных тромбозов и при экспериментальном сахарном диабете, превосходя по своей активности препарат сравнения ацетилсалициловую кислоту. Изученные вещества в отличие от аспирина не влияют на синтез простациклина сосудистой стенкой и в меньшей степени удлиняют время кровотечения, что является их важным преимуществом перед последним.

Фармокинетические исследования. На доклиническом этапе исследования соединения РУ-254 была разработана и изучена фармакокинетика субстанции таблетированной лекарственной формы при пероральном использовании (Дудченко, 2001; Смирнова, 2004). Данный путь введения является наиболее оптимальным для исследуемого соединения, однако, учитывая наличие высокой антитромбогенной активности у гипогликемического соединения РУ-254 и, в связи с этим, возможность использования его при острых осложнениях сахарного диабета II типа, возникла необходимость изучения фармакокинетики и общетоксикологических свойств его внутривенной лекарственной формы. Тем более, что внутрисосудистый путь введения веществ является наиболее удобным для изучения процессов распределения и экскреции препарата, поскольку тот сразу и полностью попадает в системный кровоток.

Были исследованы основные фармакокинетические параметры соединения РУ-254 и установлены закономерности распределения, экскреции данного вещества в организме крыс при внутрисосудистом введении. Соединение РУ-254 после внутривенного введения крысам в дозе 25 мг/кг, имеет максимальную концентрацию на 5 минуте эксперимента как в цельной крови (24,609мкг/мл), так и в плазме (21, 01мкг/мл). После этого наблюдается быстрое снижение концентраций. Соединение РУ-254 определяется в цельной крови и плазме до 12 часов. За это время концентрация вещества снижается в среднем более чем в 20 раз (на пятой минуте определяется 21,006 мкг/мл, на 12 часу - 0,972 мкг/мл плазмы крови). Некоторые различия в определяемых концентрациях исследуемого вещества в цельной крови, по сравнению с плазмой, по-видимому, предполагает возможность его связывания с форменными элементами крови.

В организме соединение РУ-254 начинает обнаруживаться во всех органах и тканях с 5-ой минуты эксперимента, в то время как максимальные его концентрации фиксируются в них в различное время. Так, быстрее всего вещество достигает максимальных значений в сердце, печени и почках. Максимальное содержание исследуемого вещества в жировой и мышечной ткани отмечается к 30-ой минуте эксперимента. Наиболее высокие уровни содержания вещества были выявлены в органах с высоким уровнем кровотока - селезенке (тканевая доступность - 9,79) и легких (тканевая доступность - 6,02), а также органам элиминации - печени (тканевая доступность - 3,52) и почках (тканевая доступность - 3,89).

Полученные данные, позволяют сделать вывод, что концентрация соединения в тканях превышает его содержание в плазме крови в несколько раз. При этом отмечается четкая зависимость между содержанием соединения и уровнем органного кровотока: наибольшие количества определяются в органах с сильной васкуляризацией - легких, селезенке, сердце. Одновременно высокие концентрации отмечаются в печени и почках, что свидетельствует об интенсивных процессах элиминации вещества в организме крысы. При изучении экскреции вещества РУ-254 с мочой было выявлено, что оно определяется в моче уже на первом часу исследования, выделение достигает максимального уровня к 8 часу и продолжается более 48 часов.

Изучение общетоксических свойств. По результатам исследований острой токсичности вещества РУ-254 при внутривенном введении крысам рассчитаны величины LD50 LD17, LD84 и определен уровень его токсичности. LD50 для самок составила 230,4 мг/кг, а для самцов 271,0 мг/кг. Как видно из полученных данных, исследуемые величины зависят от пола животных. При этом пороги летальности (LD50, LD17, LD84) у вещества РУ-254 оказались выше для самок, чем для самцов. Обращает на себя внимание и факт незначительной корреляции доз в величинах (LD50, LD17, LD84). Таким образом, по установленным величинам токсичности вещество РУ-254 можно отнести к малотоксичным.

На основании результатов, полученных при изучении хронической токсичности можно заключить, что вещество РУ-254, вводимое крысам внутрибрюшинно в течение 1 месяца в дозах 1/50; 1/10 и 1/3 от ЛД50 не вызывает патологических изменений со стороны ЦНС, сердечно сосудистой и выделительной систем. Выявлено, что токсикологический профиль вещества РУ-254 зависит как от его дозы, так и пола животных. Установленные изменения в состоянии и поведении, экскреторной, поглотительно-выделительной и обезвреживающей функциях почек и печени у крыс, получавших вещество в дозе 1/3 от ЛД50, были обратимыми и нивелировались после отмены.

Заключение

1. Конденсированные производные бензимидазола являются новым химическим классом антитромбогенных веществ.

2. Из 14 классов гетероциклических азотсодержащих соединений наиболее перспективными по антиагрегантному действию in vitro и in vivo являются производные N9_2,3-дигидро-имидазо[1,2-a]бензимидазола и N1,N3-имидазола. При этом способность веществ данных классов ингибировать процессы агрегации тромбоцитов зависит от типа и характеристик гетероциклического ядра, липофильных, стерических и электронных параметров заместителей.

3. Наиболее активное соединение РУ-891 по способности ингибировать процессы агрегации тромбоцитов превосходит препарат сравнения АСК в 5,5 раза, а по терапевтическому индексу в 10 раз. Антидиабетогенное соединение РУ-254, по антиагрегантному действию активнее препарата сравнения в 2,7 раза, а по условному терапевтическому индексу в 2,6 раза, а антиоксидантное соединение РУ-185 в 2,2 и в 2,6 раз соответственно.

4. Производные бензимидазола РУ-891, РУ-254 и РУ-185 оказывают выраженное антитромботическое действие на различных моделях артериальных тромбозов. На моделях тромбозов, индуцированных аппликацией хлорида железа и электрического тока на сонную артерию крыс, соединение РУ -891 превосходит по активности АСК, соединение РУ-254 - гипогликемическое средство гликлазид, а соединение РУ-185- антиоксидантный препарат мексидол. Соединение РУ-891 и РУ-185 предотвращают гибель 90% , а соединение РУ-254 - 70% животных на модели генерализованного адреналин-коллагеновый тромбоза на мышах.

5. Вещества РУ-891, РУ-254 и РУ-185 при пероральном курсовом введении животным с экспериментальным диабетом оказывают антитромботическое действие на модели артериального тромбоза, вызванное повреждением стенки артерий электрическим током, восстанавливают сниженную функцию эндотелия и снижают вязкость крови, превосходя препарат сравнения пентоксифиллин. Антитромбогенная активность антидиабетогенного соединения РУ-254 доказана в клинических испытаниях у больных с сахарным диабетом II типа.

6. В исследованиях in silico показано, что вещество РУ-891 может снижать уровень внутриклеточного кальция в тромбоцитах, ингибировать ФДЭ цАМФ и наряду с соединениями РУ-254 и РУ-185 ингибировать синтез ТХА2. Кроме того, вещество РУ-185 может обладать антикальмодулиновым действием.

7. Соединения РУ-891 и РУ-185 в различной степени выраженности блокируют агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ, коллагеном, адреналином, арахидоновой кислотой, тромбином, агонистом тромбоксановых рецепторов U46619. В отличие от данных веществ соединение РУ-254 оказывает слабое ингибирующее действия на агрегацию тромбоцитов, вызванную тромбином и U46619. Вещество РУ-891 блокирует агрегацию тромбоцитов, вызванную активацией P2Y12 рецепторов тромбоцитов.

8. Вещества РУ-254, РУ-185 и РУ-891 не оказывают влияние на антиагрегационную активность сосудистой стенки в норме, однако восстанавливают данную активность, сниженную адреналином.

9. Соединения РУ-891, РУ-254 и РУ-185 снижают уровень проагреганта и вазоконстриктора ТХА2, что подтверждается снижением количества МДА в условиях патологии ex vivo, вызванной тромбином. Механизм снижения уровня внутриклеточного кальция в тромбоцитах, индуцированных тромбином, под влиянием соединения РУ-891 не связан с влиянием на потенциал-зависимые кальциевые каналы. Вещество РУ-185 через ингибирование кальмодулин-зависимой ФДЭ цАМФ уменьшает уровень общего и мембраносвязанного кальция в тромбоцитах.

10. В результате проведенного фармакокинетического исследования, были установлены закономерности распределения и экскреции соединения РУ-254 в организме крыс при внутривенном введении.

11. В соответствии с классификацией И.В. Саноцкого соединение РУ-254 при внутривенном введении относится к малотоксичным веществам. Изучение хронической токсичности соединения РУ-254 при данном способе введения в дозах 1/50; 1/10 и 1/3 от ЛД50 не выявило патологических изменений со стороны органов и систем у животных. Установленные изменения в поведении, экскреторной, поглотительно-выделительной и обезвреживающей функциях почек и печени, у крыс, получавших вещество в дозе 1/3 от ЛД50, были обратимыми и проходили после отмены вещества.

12. Доклиническое изучение безопасности соединения РУ-254 при внутривенном введении не выявило проявлений, препятствующих проведению клинических испытаний данной лекарственной формы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. Созданная методология поиска соединений с выраженной антиагрегантной активностью может быть использована при синтезе новых веществ и для проведения направленного поиска соединений, снижающих тромбогенный потенциал крови.

2. Рекомендовано проведение фармакокинетических, токсикологических и фармацевтических исследований соединений РУ-891 с целью завершения формирования пакета документов для получения разрешения на проведение клинических испытаний нового антитромботического средства.

3. Включить в протоколы клинических исследований нового противодиабетического средства диабенол изучение его влияния на тромбогенный потенциал крови.

4. Антитромбогенное действие соединения РУ-185 вносит вклад в его антиишемическую активность. Поэтому при составлении протоколов клинических испытаний антиишемического действия соединения РУ-185, необходимо включить исследование показателей тромбогенного потенциала крови.

Литература

1. Cпасов А.А., Кучерявенко А.Ф., Чепурнова М.В., Ленская К.В. Антитромботическая активность гипогликемических средств// Журнал. Регионарное кровообращение и микроциркуляция.-2011.-2(38).-C.95-98.

2. Cпасов А.А., Анисимова В.А., Петров В.И., Кучерявенко А.Ф. Средство, проявляющее антиагрегантную активность (sbt-828)//положительное решение о выдаче патента на изобретение по заявке № 2011131915/20(046992) от 2.08. 2011.

3. Анисимова В.А., Спасов А.А., Косолапов В.А., Кучерявенко А.Ф. Синтез и фармакологическая активность солей 3-ацетил-2-R-9-диалкиламиноэтилимидазо[1,2-a] бензимдазолов //Хим.-фарм. журнал, 2010.-Т.44.-№3.-С.8-13.

4. Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А. Влияние гипогликемических средств на гемостаз // Экспериментальная и клиническая фармакология.-2010.-№ 8.-С.26-28.

5. Cпасов А.А., Анисимова В.А., Петров В.И., Кучерявенко А.Ф., Толпыгин И.Е., Минкин В.И Средство, проявляющее антитромбогенную активность (РУ-891)// положительное решение о выдаче патента на изобретение по заявке № 2010145884(066152) от 10.11.2010.

6. Cпасов А.А., Анисимова В.А., Петров В.И., Кучерявенко А.Ф., Толпыгин И.Е., Минкин В.И.Средство, проявляющее антитромбогенную активность (Ру-185) // положительное решение о выдаче патента на изобретение по заявке № 2010145885(066153) от 10.11.2010.

7. Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф., Майстренко Б.П. Антиагрегантная активность гипогликемических средств//Журнал Экспериментальная и клиническая фармакология.-2009.- Т.72.- № 6.- С.27-29.

8. Анисимова В.А., Спасов А.А., Толпыгин И.Е., Кучерявенко А.Ф. и др. Синтез и фармакологическая активность дигидрохлоридов 3-(2,2,2-трихлор-1-гидроксиэтил)имидазо [1,2-a]-бензимидазола // Хим-фарм. журнал.- 2009.- Т.43.-№9.-С 9-12.

9. Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А. Влияние гипогликемических средств на гемореологические параметры крови //Журнал Экспериментальная и клиническая фармакология.- 2009.-Т. 72.- №5.- С.31-34.

10. Анисимова В.А., Толпыгин И.Е., Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф.и др. Синтез и биологическая активность N-ацилметил-замещенных 9Н-2,3 дигидроимидазо- и 10Н-2,3б 4,10-тетрагидропиримидо (1,2-а) бензимидазолов и продуктов их восстановления //Хим.-фарм. журнал.- 2006.-Т.40.-№5 С.27-33.

11. Анисимова В.А., Спасов А.А., Косолапов В.А., Кучерявенко А.Ф. и др. Фармакологическая активность 2-метоксифенил-замещенных 9-диалкиламиноэтилимидазо (1,2-a) бензимидазолов// Хим.-фарм. журнал.- 2005.- Т.36.- N9.-С.26-32.

12. Анисимова В.А., Островский О.В., Дудченко Г.П. Кучерявенко А.Ф. и др.Синтез и фармакологическая активность 3-(ароил)- и 3-(гетароил) имидазо (1,2-а) бензимидазолов // Хим.-фарм. журнал.- 2002.-36.(12б).-C.3-8.

13. Анисимова В.А., Панченко Т.И., Островский О.В. Кучерявенко А.Ф. и др Синтез и фармакологическая активность 2-(гетарил) имидазо (1,2-a)-,бензимидазолов// Хим.-фарм. журнал.- 2002.-36(10).-C.12-17.

14. Анисимова В.А. М.М.Осипова А.Ф.Кучерявенко, Г.П.Дудченко, Н.П.Ларионов, С.Г.Ковалев Синтез и фармакологическая активность 1 и 10-N-замещенных 1(10), 2,3,4-тетрагидропиримидо1,2-а-бензимидазолов // Хим.-фарм. журн.-2002.- 36( 9).- С.11-15.

15. Спасов А.А., Дудченко Г.П., Гаврилова Е.С., Кучерявенко А.Ф. и др Диабенол - новое противодиабетическое средство с гемобиологическими свойствами// Вестник ВМА .-1997.-№3.- С.38-42.

16. Спасов А.А., Анисимова В.А., Кучерявенко А.Ф. и др Перспективы создания препаратов на основе конденсированных производных бензимидазола для лечения сахарного диабета, осложненного ангиопатиями// Вестник ВМА .- №3.- 1997.- С.32-38.

17. Дудченко Г.П., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф., Ковалев С.Г., Балаболкин М.И., Анисимова В.А. Создание гипогликемических препаратов с антиагрегантными свойствами на основе конденсированных производных бензимидазола // Вестник ВМА - юбил. сб. науч. тр., 1995, т.51, №1, с.36-38.

18. Спасов А.А., Дудченко Г.П., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. Перспективы поиска антиагрегантных и гипогликемических веществ, среди конденсированных производных бензимидазола // Вестник ВМА . - 1995.- №1.- С.33-36.

19. Кучерявенко А.Ф., Cпасов А.А., Анисимова В.А. и др. Влияние антиоксидантного соединения на внутрисосудистую агрегацию тромбоцитов крыс // Тез. Докладов XVIII Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.- 2011.- С.456.

20. Кучерявенко А.Ф., Cпасов А.А., Анисимова В.А. и др. Влияние гипогликемического вещества диабенол на агрегацию тромбоцитов, вызванную различными индукторами // Тез. Докладов XVIII Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.- 2011.- С.456.

21. Кучерявенко А.Ф., Майстренко Б.П., Салазникова О.А. и др. Антитромботические свойства нового гипогликемического средства диабенол// Тез. Докладов XVII Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.- 2010.- С.660.

22. Кучерявенко А.Ф., Майстренко Б.П., Салазникова О.А. и др. Влияние нового антиагрегантного соединения на летальность белых беспородных мышей, вызванную тромботическими агентами// Тез. Докладов XVII Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.- 2010.- С.659-660.

23. Кучерявенко А.Ф. Антитромботическая активность антиоксидантного соединения РУ-185//Тез. Докладов 57-й региональной научно-практической ВолгГМУ «Инновационные достижения фундаментальных и прикладных медицинских исследований в развитии здравоохранения Волгоградской области».-2010.- C.29-31.

24. Кучерявенко А.Ф., Cпасов А.А., Анисимова В.А., Лебедева С.А. Антитромботические свойства диабенола и гликлазида//Тез. Докладов V диабетологического конгресса.-Москва.- 2010.- C.334.

25. Кучерявенко А.Ф., Cпасов А.А., Анисимова В.А., Лебедева С.А. Сравнительное изучение антитромботических свойств диабенола и гликлазида на модели артериального тромбоза у крыс с экспериментальным сахарным диабетом//Тез. Докладов V диабетологического конгресса, Москва 23-26 мая 2010 c.333.

26. Anisimova V.A., Tolpygin I.E., Kosolapov V.A, Kucheryavenko A.F., Gurova N.A еt al. Synthesis and pharmacological activity of 1-dialkyl(alkyl)aminoetyl-2,3-dihydroimidazo[1,2-a] benzimidazoles // Pharmaceutical chemistry jornal - Vol. 44, Num. 3, pp. 117-122, Translated from Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal.-2010.- Vol.44.- No.3.-P. 8-13.

27. Cпасов А.А., Васильев П.М., Кучерявенко А.Ф. и др.Скрининг in silico производных конденсированных азолов с высокой фармакологической активностью// Тез. Докладов 2 Международного Конгресс-Партнеринга и Выставки по биотехнологии и биоэнергетике «ЕвразияБио-2010.- Москва.- С.176.

28. Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А., Спасов А.А. Влияние гипогликемических средств на систему фибринолиза // Тез. Докладов XVI Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.-2009.-С.690.

29. Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А., Спасов А.А. Влияние нового гипогликемического средства диабенол на продукцию тромбоксана А2 //VII конференция «Гемореология и микроциркуляция (от функциональных механизмов в клинику) Ярославль.- 2009.- C.24.

30. Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А., Майстренко Б.П., Спасов А.А.Антиагрегантная активность нового гипогликемического средства диабенол на экспериментальной модели in vivo // VII конференция «Гемореология и микроциркуляция.-Ярославль.-2009.- C.84.

31. Кучерявенко А.Ф., Анисимова В.А., Cтуковина А.Ю., Майстренко Б.П Антитромботическая активность конденсированных производных бензимидазола/.//Материалы 56-й региональной научно-практической конференции «Инновационные достижения фундаментальных и прикладных медицинских исследований в развитии здоавоохранения Волгоградской области.-2009.-С.242-244.

32. Васильев П.М., Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф. 3D-QSAR-анализ азотсодержащих гетероциклических соединений с высокой антиагрегантной активностью // Тез. Докладов XV Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.- С.2008.

33. Васильев П.М., Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А., Анисимова В.А. Компьютерный поиск гетероциклических соединений с высокой антиагрегантной активностью//Фармакология-практическому здравоохранению: Матер. III съезд фармакологов России.-Санкт-Петербург.-2007.- Т. 7.-Ч. 1.-С.1760.

34. Спасов А.А., Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А. Влияние гликлазида на гемореологические параметры крови лабораторных крыс//Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН.- 2008.- №4.-С.17-19.

35. Васильев П.М., Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А., Анисимова В.А. Компьютерный прогноз и экспериментальная проверка антиагрегантной активности производных бензимидазола//Тез. Докладов XIV Российского Национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.-2007.-С.235.

36. Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А. Влияние гипогликемических препаратов при однократном введении на коагуляционное звено гемостаза крыс со стрептозотоциновым диабетом// Материалы I межрегиональной научно-практической конференции с международным участием.-Санкт-Петербург.-2001.-С.28.

37. Спасов А.А., Салазникова О.А., Кучерявенко А.Ф., Дегтярев А.Н. Влияние гипогликемических соединений на реологические свойства крови доноров и больных сахарным диабетом II типа// Международный сборник научных трудов научно-практической конференции по созданию и апробации новых лекарственных средств:”Лекарства-человеку”.-Харьков.-2000.-C.171-177.

38. Спасов А.А., Анисимова В.А., Островский О.В., Кучерявенко А.Ф. и др. Производные бензимидазола как основа создания лекарственных препаратов, влияющих на реологические свойства крови// Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии». - 1999.-Санкт-Петербург.- С.120.

39. Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А. Изучение антикоагулянтных свойств новых конденсированных производных бензимидазола с гипогликемической активностью// Тез. Докл.V Российского национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.- 1998.- C.234.

40. Cпасов А.А., Дудченко Г.П., Кучерявенко А.Ф, Новочадов В.В. Изучение влияния нового гипогликемического препарата диабенол на некоторые показатели системы гемостаза//Тез. Докл.IV Российского национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.- 1997.- C.254.

41. Cпасов А.А., Островский О.В., Кучерявенко А.Ф. и др. Влияние антиоксидантных веществ на агрегационную активность тромбоцитов крыс// Тез. Докл.IV Российского национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.-1997.-С.295.

42. Кучерявенко А.Ф., Салазникова О.А. Антикоагулянтные свойства новых конденсированных производных бензимидазола// Тез Республиканской научно-практической конференции «Проблемы диагностики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний».-Саратов.-1997.-C.238.

43. Кучерявенко А.Ф., Гаврилова Е.С., Новочадов В.В. и др. Влияние на функциональную активность тромбоцитов и свертывающую систему крови гипогликемического препарата диабенол//Тез. Республиканской научно-практической конференции «Проблемы диагностики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний».-Саратов.-1997.- C.12.

44. Кучерявенко А.Ф., Спасов А.А., Салазникова О.А. Влияние гипогликемических соединений на реологические свойства крови больных сахарным диабетом// Тез. Докл.V Российского национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.-1997.-С.235.

45. Cпасов А.А., Анисимова В.А., Кучерявенко А.Ф. и др. Перспективы создания гипогликемических препаратов на основе конденсированных гетероциклических структур//Тез. Докл.III Российского национального конгресса «Человек и лекарство».- Москва.-1996.- C.275.

46. Cпасов А.А., Дудченко Г.П., Кучерявенко А.Ф. и др. Диабенол - новое противодиабетическое вещество с гемобиологическими свойствами// Тез. Докл.III Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.-1996.-C.276.

47. Cпасов А.А., Ковалев С.Г., Дудченко Г.П., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. Конденсированные производные бензимидазола-ингибиторы агрегации тромбоцитов/ // Тез. Докл.II Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.- 1995.-С.216.

48. Дудченко Г.П., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. Влияние новых конденсированных производных бензимидазола на продукцию тромбоксана А2// Сборник научных статей, «Новые материалы и методы в медицине».-Волгоград.- 1995.- Т.51.- вып.2.- C.22.

49. Анисимова В.А., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф., Степанченко Е.А. Изучение действия новых конденсированных производных бензимидазола на функциолнальную активность тромбоцитов// Сборник научных статей, «Новые материалы и методы в медицине».- Волгоград.- 1995.- Т.51.- вып.2.- C.21.

50. Дудченко Г.П., Анисимова В.А., Балаболкин М.И., Ковалев С.Г.,.Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. и др Экспериментальное изучение фармакологических свойств нового гипогликемического вещества диабенол// I съезд Рос. научн. общ. фармакологов «Фундаментальные исследования как основа создания лек. средств» - тез. докл.-Волгоград.-1995.-С.150.

51. Дудченко Г.П., Анисимова В.А., Балаболкин М.И., Ковалев С.Г.,.Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. и др Изучение антиагрегантных свойств нового гипогликемического препарата диабенол// Тез. Докл.II Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.-1995.-С. 235.

52. Спасов А.А., В.А.Анисимова, Кучерявенко (Кучерявенко) А.Ф. и др. Экспериментальное изучение фармакотоксикологических свойств нового гипогликемического препарата диабенол// Тез. I съезда Российского общества фармакологов «Фундаментальные исследования, как основа создания лекарственных средств».- Волгоград.- 1995.-C.89.

53. Дудченко Г.П., Cпасов А.А., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. Антиагрегантные свойства гипогликемического соединения диабенол// Тез. Докл.II Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.-1995.-C.254.

54. Cибирякова Т.Б., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф., Беседина Э.В. Изучение антиагрегационной активности новых конденсированных гетероциклических соединений// Актуальные вопросы медицины: Тез. Докл. 49-й научной сессии.- Волгоград.- 1994.-C.79-80.

55. Ковалев С.Г., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. Антиишемическое влияние двух производных бензимидазола на модели тромбоза коронарных сосудов, вызванного введением АДФ// Актуальные вопросы медицины: Тез.докл. 47-научной сессии.-Волгоград.- 1992.- C.57.

56. Cибирякова Т.Б., Ковалев С.Г., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. и др. Антиагрегационная активность новых ингибиторов кальмодулина// Экспериментальная фармакология-клинике:Тез.докл. Международного симпозиума.- Винница.- 1992.-С.76.

57. Ковалев С.Г., Турчаева (Кучерявенко) А.Ф. Изучение влияния пяти производных бензимидазола на антиагрегационную акивность сосудистой стенки// Актуальные вопросы медицины: Тез. Докл. 46-й научной сессии. - Волгоград.- 1991.- С.24.

Размещено на Allbest.ru