Главная Коллекция "Otherreferats" Медицина Клинико-патогенетическое значение исследования активности ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ревматоидным артритом

Клинико-патогенетическое значение исследования активности ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ревматоидным артритом

Повышение качества диагностики активности патологического процесса, выявление особенностей пуринового метаболизма в лимфоцитах, эритроцитах, плазме крови у больных при ревматоидном артрите. Объективизация контроля эффективности терапии больных РА.

Рубрика Медицина
Вид автореферат
Язык русский
Дата добавления 21.07.2018
Размер файла 49,8 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Клинико-патогенетическое значение исследования активности ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ревматоидным артритом

14.00.39 - ревматология

На правах рукописи

Ушакова Ирина Сергеевна

Волгоград - 2007

Работа выполнена в ГУ «НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН» и ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ

Научный руководитель: академик РАМН, заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор ЗБОРОВСКИЙ Александр Борисович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор ЧИЖОВ Петр Александрович Ярославская государственная медицинская академия

доктор медицинских наук, профессор КУЛИЧЕНКО Людмила Леонидовна Волгоградская государственная медицинская академия

Ведущая организация: Оренбургская государственная медицинская академия

Защита состоится 2007 г. в ____ часов на заседании диссертационного совета Д 208.008.02 в ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ (400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ.

Автореферат разослан ____ ______________ 2007 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор А.Р. Бабаева.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Болезни костно-мышечной системы (БКМС), на борьбу с которыми направлена «Декада костей и суставов», инициированная ВОЗ, имеют достаточно широкую распространенность и проявляют четкую тенденцию к увеличению их удельного веса среди других заболеваний (А.И. Вялков и др., 2001). В России за период 1999-2003 гг. заболеваемость БКМС на 100 000 населения выросла на 23,9%, в то время как общая заболеваемость -- на 11,3% (О.М. Фоломеева и др., 2005). Ревматоидный артрит (РА) -- типичный представитель БКМС занимает особое место среди других ревматических заболеваний суставов, и, хотя его распространенность (от 0,5 до 1,5%) относительно небольшая, он считается одним из самых тяжелых заболеваний суставов. Согласно официальной статистике в 2002 году зарегистрировано 280 000 больных достоверным РА
(Е.Л. Насонов и др., 2005). Медико-социальная значимость РА обусловлена его неуклонно прогрессирующим течением, быстро приводящим к нарушению функции суставов, их анкилозированию, длительной и стойкой потере трудоспособности, ранней инвалидизации, выраженными экономическими затратами на лечение как со стороны государства, так и самих пациентов, сокращением продолжительности жизни на 5-10 лет, что делает борьбу с РА значимой медико-социальной проблемой.

Борьба с РА значительно осложняется неясностью многих аспектов этиопатогенеза заболевания. Нередко возникают сложности в распознавании активного ревматоидного процесса, часто приобретающего хроническое, субклиническое течение с нормальными параклиническими показателями, что приводит к несвоевременной и неадекватной терапии.

Участие иммунных механизмов в патогенезе РА не вызывает сомнений, но в то же время используемые в лечении больных РА различные иммуномодуляторы не достигают желаемого эффекта. Не исключено, что это может быть связано с тем, что иммунные нарушения являются не единственным патогенетическим механизмом РА или иммунные нарушения являются не первопричиной, а следствием каких-то других процессов, инициирующих иммунную дисрегуляцию.

В основе нарушений координации иммунных процессов лежат функциональные расстройства иммунокомпетентных клеток -- лимфоцитов, метаболизм которых при РА изучен недостаточно. В то же время достаточно хорошо известно, что некоторые пуриновые нуклеозиды (аденозин, гуанозин) принимают непосредственное участие в метаболизме лимфоцитов, их созревании, пролиферации, дифференциации и, следовательно, имеют прямое отношение к иммунорегуляторным процессам в организме (В.Ю. Уманский и др., 1989; Н.П. Дмитренко, 1990).

Содержание пуриновых нуклеозидов в лимфоцитах регулируется соответствующими ферментами, по их активности представляется возможность суждения о концентрации пуриновых метаболитов в клетках. Поэтому изучение активности энзимов, участвующих в метаболизме пуриновых соединений, влияющих на функции лимфоцитов, представляется нам достаточно актуальным и перспективным направлением, способствующим пониманию отдельных звеньев патогенеза РА с иммунобиохимических позиций. Кроме того, энзимы являются весьма чувствительными индикаторами воспалительных процессов, имеющих место при РА.

Исходя из этого, нами в работе были изучены активности трех энзимов адениловой ветви пуринового метаболизма (ПМ): аденозиндезаминазы (АДА), адениндезаминазы (АД) и АМФ-дезаминазы (АМФДА) в трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных РА. Выбор этих ферментов обусловлен их важной ролью в метаболизме пуринов.

Цель исследования. Повышение качества диагностики активности патологического процесса, выявление особенностей пуринового метаболизма в лимфоцитах, эритроцитах и плазме крови больных РА и объективизации оценки эффективности лечения больных РА с использованием показателей активности АДА, АМФДА и АД.

Задачи исследования.

1. Изучить активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови практически здоровых людей в зависимости от пола и возраста, установить референтные пределы активности энзимов у здоровых лиц.

2. Изучить активность АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных РА в процессе стационарного лечения: при поступлении, через 10-12 дней лечения и перед выпиской из стационара.

3. Изучить активность АДА, АМФДА и АД в плазме, лизатах лимфоцитов, эритроцитов больных РА в зависимости от степени активности ревматоидного процесса, клинико-анатомических форм, характера течения, стадии поражений суставов, их функционального класса (ФК), наличия или отсутствия ревматоидного фактора (РФ).

4. Изучить корреляционные связи между активностями энзимов в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови здоровых людей и больных РА.

5. Оценить информативность энзимных показателей в индикации минимальной активности ревматоидного процесса в сравнении с общепринятыми острофазовыми клинико-иммуно-биохимическими показателями, используемыми для выявления активности процесса: СОЭ, СРБ, сиаловые кислоты, гамма-глобулины и другие.

6. Оценить возможность использования энзимных показателей в объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных РА.

Научная новизна. Впервые у больных РА в трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови были проведены исследования активности трех ферментов адениловой ветви ПМ: АДА, АМФДА и АД и проведен анализ зависимости активности энзимов от степени активности процесса, характера течения, клинико-анатомических форм, стадии поражения суставов, наличия ревматоидного фактора, ФК суставов и показано влияние этих клинических факторов на своеобразие энзимного профиля крови. Доказано, что наибольшее влияние на энзимные показатели, особенно в клетках крови, оказывает выраженность активного ревматоидного процесса. Показана более высокая информативность отдельных энзимных показателей в отражении минимальной активности патологического процесса, по сравнению с общепринятыми острофазовыми лабораторными показателями (СОЭ, СРБ и др.). Показано, что выявленные изменения активности АДА, АМФДА и АД в лимфоцитах способны вызвать нарушения функциональных свойств лимфоцитов и обусловить дискоординацию иммунных процессов при РА. Установлено, что энзимные показатели крови в комплексе с клиническими данными способствуют объективизации контроля эффективности проводимой терапии больных РА.

Практическая значимость. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных РА в комплексе с клиническими данными способствуют уточнению степени активности патологического процесса, характера течения заболевания и назначению своевременной адекватной терапии. В процессе лечения энзимные показатели способствуют объективизации оценки эффективности проводимой терапии и прогнозированию ее длительности.

Внедрение в практику.

Методы определения активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови с целью уточнения степени активности патологического процесса у больных РА внедрены в практику работы муниципального учреждения здравоохранения «Городская клиническая больница № 25» г. Волгограда.

С результатами проведенных энзимных исследований, возможностями энзимной диагностики в ревматологии, их перспективой систематически знакомятся студенты Волгоградского государственного медицинского университета, аспиранты, клинические ординаторы и практические врачи на семинарах, научно-практических и клинических конференциях.

Основные положения, выносимые на защиту.

Показатели активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови у больных РА в комплексе с клиническими данными способствуют выявлению минимальной активности ревматоидного процесса, уточнению степени активности, характера течения заболевания и объективизации оценки эффективности проводимой терапии у больных РА.

Публикации и апробация работы.

Основные положения диссертации опубликованы в 8 печатных работах. Материалы диссертации докладывались в 2005-2006 гг. на научно-практических конференциях Волгоградского государственного медицинского университета, ГУ НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 201 страницах компьютерного текста и состоит из введения, части I -- обзора литературы, представленного одной главой, содержащей основные сведения о медико-биологическом значении пуринового метаболизма и отдельных его ферментов; части II -- собственных исследований, состоящей из 4 глав, включающих клиническую характеристику больных, методы исследований, результаты исследований, их обсуждение, выводы и практические рекомендации.

Диссертация иллюстрирована 35 таблицами, 12 рисунками, 3 выписками из историй болезни. Библиографический указатель содержит 395 источников, из которых 130 отечественных и 265 зарубежных.

пуриновый метаболизм ревматоидный артрит

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Под наблюдением в условиях стационара находились 77 больных РА, из которых 20 (26%) мужчин и 57 (74%) женщин. Средний возраст больных - 42,3±1,03 (?=9,0) лет, средняя продолжительность заболевания - 8,79±0,38 (?=3,37) лет.

Диагностика РА осуществлялась в ходе всестороннего клинического обследования с использованием диагностических критериев АРА (F. Arnett et al., 1988) и уточнялась в процессе лечения. Инструментальные (рентгенография, УЗИ, ЭКГ), лабораторные (общий анализ крови, мочи, СОЭ, СРБ, сиаловые кислоты, белки сыворотки, РФ и др.) методы исследований использовались в качестве дополнительных. Степень активности ревматоидного процесса определялась в соответствии с диагностическими критериями АРА, рабочей классификацией, индексом DAS28 (В.А. Насонова и др., 1997; I. Smolen et al., 2003), на основании которых I (минимальная) степень установлена у 15 (19,5%) больных, II (умеренная) - у 50 (64,9%) и III (высокая) степень - у 12 (15,6%) больных, медленно прогрессирующее течение (МПТ) - у 50 (64,9%), быстро прогрессирующее (БПТ) - у 27 (35,1%) больных, преимущественно суставная форма - у 51 (66,2%), системные поражения - у 26 (33,8%), серопозитивная форма РА - у 59 (76,6%), серонегативная - у 18 (23,4%) больных. У всех наблюдаемых больных РА определялось ограничение функциональных возможностей суставов: у 33 (42,9%) больных установлен ФК-2 (ФНС-1), у 38 (49,4%) - ФК-3 (ФНС-2) и у 6 (7,8%) больных -- ФК-4 (ФНС-3). На основании рентгенологических исследований суставов I стадия (по Штейнброкеру) определялась у 7 (9,1%) больных, II стадия - у 40 (51,9%), III стадия - у 24 (31,2%) и IV стадия - у 6 (7,8%) больных.

Из внесуставных поражений наиболее часто отмечалась патология мышечной системы (49,4%), желудочно-кишечного тракта (32,5%), сердца (27,3%) и легких (26%).

Контрольную группу составили 33 практически здоровых людей (доноры станции переливания крови) в возрасте 18-55 лет. Средний возраст - 35,9±2,1 (=12,0) лет.

Выделение лимфоцитов и эритроцитов из венозной крови проводилось по методу Boyum (1980) с использованием лимфосепа (фирма "JCN Biomedical") с градиентом плотности 1,077-1,079 г/мл. Количество клеток крови подсчитывалось под микроскопом с использованием камеры Горяева. Лизаты лимфоцитов и эритроцитов готовили путем замораживания, оттаивания и центрифугирования.

Определение активности АДА в лизатах клеток и плазме крови проводилось по методу R. Martinek (1963), АМФДА - с использованием цветной реакции Бертло (1984), АД - по методу T. Sakai et al. (1978). Активность всех энзимов выражалась в нмоль/мин/мл, причем, для лимфоцитов учитывалось, что в 1 мл лизата (до лизиса) содержится 1?107 клеток, а для эритроцитов - 1?109 клеток.

У всех больных РА в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови проводились исследования активности АДА, АМФДА и АД трижды: при поступлении, через 10-12 дней лечения и перед выпиской из стационара, в стадии начинающейся клинической ремиссии.

Статистическая обработка данных проводилась на ПК JBM PC/XT с использованием программы «STATISTICA 6.0» с вычислением средней арифметической (М), среднеквадратического отклонения (?), средней ошибки среднеарифметической (m). При сравнении групп по количественному признаку использовались критерии Стьюдента, Уилкинсона, Мак-Уитни. Взаимосвязи между активностями энзимов оценивались методом линейной корреляции по Пирсону (r). Статистическая значимость различий принималась при р<0,05.

В лечении больных РА использовались НПВП (индометацин, найз, диклофенак, мовалис, ксефокам), преднизолон, метотрексат, сульфасалазин, УФО крови, массаж, физиотерапия, ЛФК.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Существенных различий показателей активности АДА, АМФДА и АД у здоровых во всех трех биологических средах исследований в зависимости от пола и возраста не выявлено.

У больных РА (всей группы) при поступлении в стационар, по сравнению со здоровыми, определялось в плазме (табл. 1) снижение активности АД (р0,001), в эритроцитах (табл. 2) повышение активности АМФДА и АД (р0,001), в лимфоцитах (табл. 3) снижение активности АДА, АД и повышение АМФДА (все р0,001).

Через 10-12 дней лечения, по сравнению с исходным фоном, в эритроцитах снизилась активность АМФДА (р0,05), в лимфоцитах повысилась ранее сниженная активность АДА (р0,001) и снизилась активность АМФДА (р0,001).

По окончании курса стационарного лечения, по сравнению с начальным этапом, в плазме (табл. 4) снизилась активность АД (р0,001), в эритроцитах (табл. 5) снизилась активность АМФДА и АД (р0,001), в лимфоцитах (табл. 6) повысилась активность АДА, АД (р0,001) и снизилась активность АМФДА (р0,001).

Перед выпиской из стационара, учитывая среднестатистические величины активности энзимов, практически, нормализовалась активность всех энзимов в плазме, АДА и АД - в эритроцитах, АМФДА - в лимфоцитах. Но активность других энзимов имела отличия от здоровых.

Далее анализ энзимных показателей был проведен в зависимости от клинических особенностей заболевания.

У больных РА с системными поражениями, по сравнению с больными РА с суставной формой, в плазме (табл. 1) ниже активность АДА (р0,05), АМФДА и выше активность АД (все р0,001), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА и выше АД (все р0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (р0,001).

У больных РА с БПТ, по сравнению с МПТ, в плазме (табл. 1) ниже активность АДА (р0,05) и АД (р0,01), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р0,05), но выше АМФДА (р0,05) и АД (р0,01), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА (р0,05), АД (р0,001) и выше АМФДА (р0,05).

У больных с серопозитивной формой (по РФ) РА, по сравнению с серонегативной, в плазме (табл. 1) ниже активность АДА (р0,001) и выше АД (р0,01), в эритроцитах (табл. 2) ниже активность АДА (р0,001), выше АМФДА (р0,01) и АД (р0,01), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р0,01).

Таким образом, проведенные исследования выявили определенную зависимость энзимных показателей от характера течения заболевания, клинико-анатомических форм и наличия или отсутствия РФ. В то же время в анализируемой группе были больные с различной активностью процесса, которая могла оказать существенное влияние на энзимную активность крови. Исходя из этого, ниже приведены результаты энзимных исследований в зависимости от степени активности ревматоидного процесса.

Таблица 1. Активность энзимов в плазме крови здоровых и больных РА при поступлении

Контингент

Кол-во б-ых

Стат. пок.

Энзимы

АДА

АМФДА

АД

Здоровые

33

M

m

7,3

0,25

1,42

0,07

2,75

0,08

РА, группа в целом

77

M

m

7,01

0,15

1,38

0,04

3,17

0,06

РА, I степень активности

15

M

m

9,16

0,28

1,09

0,05

2,5

0,04

РА, II степень

активности

50

M

m

6,81

0,06

1,6

0,03

3,14

0,04

РА, III степень

активности

12

M

m

5,16

0,08

0,83

0,04

4,15

0,11

С системными

поражениями

26

M

m

6,36

0,26

1,11

0,03

3,48

0,04

Суставная форма

51

M

m

7,28

0,21

1,42

0,05

3,02

0,07

БПТ

27

M

m

6,5

0,17

1,4

0,08

3,43

0,1

МПТ

50

M

m

7,28

0,21

1,38

0,05

3,04

0,07

Стадия I

7

M

m

9,13

0,63

1,33

0,1

2,74

0,04

Стадия II

40

M

m

7,04

0,19

1,39

0,06

3,06

0,09

Стадия III

24

M

m

6,49

0,18

1,33

0,08

3,4

0,12

Стадия IV

6

M

m

6,2

0,17

1,58

0,05

3,48

0,08

ФК-2

33

M

m

7,9

0,23

1,42

0,04

2,81

0,04

ФК-3

38

M

m

6,44

0,15

1,39

0,07

3,35

0,08

ФК-4

6

M

m

5,73

0,38

1,12

0,19

4,08

0,22

Серопозитивная форма

59

M

m

6,73

0,15

1,35

0,05

3,28

0,07

Серонегативная форма

18

M

m

7,92

0,39

1,47

0,07

2,84

0,1

Таблица 2. Активность энзимов в эритроцитах здоровых и больных РА при поступлении

Контингент

Кол-во б-ых

Стат. пок.

Энзимы

АДА

АМФДА

АД

Здоровые

33

M

m

37,0

0,72

22,1

0,81

13,2

0,35

РА, группа в целом

77

M

m

39,2

1,3

38,2

1,14

19,6

0,87

РА, I степень активности

15

M

m

58,0

0,64

24,1

0,48

9,5

0,27

РА, II степень

активности

50

M

m

37,0

0,85

38,4

0,72

19,6

0,64

РА, III степень

активности

12

M

m

24,9

0,56

54,7

0,76

32,1

0,39

С системными

поражениями

26

M

m

36,2

0,36

39,1

1,03

22,3

0,96

Суставная форма

51

M

m

42,2

0,47

37,3

0,88

17,1

0,79

БПТ

27

M

m

34,8

1,77

41,5

1,81

23,0

1,34

МПТ

50

M

m

41,6

1,67

36,4

1,41

17,7

1,05

Стадия I

7

M

m

57,8

1,65

28,2

1,11

10,8

1,44

Стадия II

40

M

m

39,3

1,67

38,6

,68

19,7

1,18

Стадия III

24

M

m

35,1

2,07

40,2

2,07

22,1

1,64

Стадия IV

6

M

m

33,1

0,51

38,8

0,98

18,8

1,22

ФК-2

33

M

m

46,6

1,79

31,6

1,03

14,6

0,88

ФК-3

38

M

m

34,6

1,44

42,4

1,55

22,1

1,13

ФК-4

6

M

m

27,6

1,91

48,1

3,71

30,9

0,94

Серопозитивная форма

59

M

m

36,5

1,31

40,0

1,26

21,0

0,97

Серонегативная форма

18

M

m

48,1

2,67

32,2

2,15

14,9

1,57

Таблица 3. Активность энзимов в лимфоцитах здоровых и больных РА при поступлении

Контингент

Кол-во б-ых

Стат. пок.

Энзимы

АДА

АМФДА

АД

Здоровые

33

M

m

45,6

1,07

3,19

0,08

1,95

0,04

РА, группа в целом

77

M

m

31,3

0,48

3,9

0,04

1,69

0,02

РА, I степень активности

15

M

m

36,7

0,52

3,39

0,05

1,91

0,02

РА, II степень

активности

50

M

m

31,4

0,28

3,93

0,03

1,68

0,01

РА, III степень

активности

12

M

m

24,1

0,27

4,46

0,06

1,44

0,01

С системными

поражениями

26

M

m

29,3

0,27

4,12

0,07

1,6

0,04

Суставная форма

51

M

m

33,4

0,23

3,68

0,05

1,78

0,03

БПТ

27

M

m

29,7

0,73

4,05

0,06

1,63

0,02

МПТ

50

M

m

32,1

0,59

3,83

0,06

1,72

0,02

Стадия I

7

M

m

36,7

1,36

3,44

0,1

1,89

0,03

Стадия II

40

M

m

28,0

1,82

3,43

0,14

1,69

0,02

Стадия III

24

M

m

29,3

0,85

4,05

0,07

1,63

0,03

Стадия IV

6

M

m

31,3

0,44

4,02

0,07

1,66

0,02

ФК-2

33

M

m

34,3

0,43

3,62

0,04

1,8

0,02

ФК-3

38

M

m

29,5

0,59

4,09

0,05

1,62

0,02

ФК-4

6

M

m

25,8

1,1

4,32

0,07

1,52

0,05

Серопозитивная форма

59

M

m

30,4

0,5

3,99

0,05

1,66

0,02

Серонегативная форма

18

M

m

34,0

0,98

3,65

0,08

1,79

0,03

РА, I степень активности процесса. При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме крови (табл. 1) выявлено повышение активности АДА (р0,001), снижение активности АМФДА (р0,01) и АД (р0,05); в эритроцитах (табл. 2) - повышение активность АДА (р0,001) и снижение АД (р0,01); в лимфоцитах (табл. 3) - снижение активность АДА (р0,001).

Наиболее информативными в отражении минимальной (I степени) активности патологического процесса оказались показатели АДА в эритроцитах, где ее активность у всех больных (100%) превышала верхние границы референтных пределов (условную ному) активности энзима у здоровых людей. В то же время у этих же больных из общепринятых иммуно-биохимических показателей, используемых для уточнения степени активности патологического процесса, отклонения от уровня здоровых лиц определялись для СОЭ, СРБ, гамма-глобулинов, сиаловых кислот в 33,3% случаев, альфа-2-глобулинов -- в 40% и ЦИК -- в 20% случаев. То есть, показатели активности АДА в лизатах эритроцитов у больных РА являются значительно более чувствительными и информативными в индикации минимальной активности ревматоидного процесса, чем самые демонстративные в этом аспекте общепринятые иммуно-биохимические показатели.

Результаты анализа корреляционных связей между ферментами свидетельствуют о наличии в большинстве случаев умеренных связей во всех трех средах между активностями всех энзимов и активностью одного энзима в разных средах, из которых следует, что снижение активности АДА в лимфоцитах сопровождалось повышением ее активности в эритроцитах и плазме, снижение активности АМФДА в плазме -- повышением активности энзима в лимфоцитах и эритроцитах, а маломеняющаяся активность АД в лимфоцитах -- снижением ее активности в эритроцитах и плазме.

Через 10-12 дней лечения, по сравнению с исходным фоном, существенных изменений активности энзимов в плазме не наблюдалось, в эритроцитах снизилась активность АДА (р0,001), в лимфоцитах повысилась активность АДА (р0,05).

По окончании курса лечения, по сравнению с начальным этапом, наблюдалась положительная динамика всех энзимов во всех средах исследований (табл. 4-6), и перед выпиской из стационара отмечалась, практически, нормализация активности всех энзимов, за исключением активности АДА в эритроцитах, которая хотя и снизилась значительно, но осталась повышенной (р0,01). Индекс DAS28 за период стационарного лечения уменьшился на 43,5% (р0,001) и составил 1,61±0,05 (=0,19) баллов, что соответствует фазе клинической ремиссии.

У больных РА с системными поражениями, по сравнению с суставной формой, в плазме ниже активность АДА (р0,01) и АМФДА (р0,05), в эритроцитах выше активность АД (р0,01), в лимфоцитах выше активность АМФДА (р0,01) и ниже АД (р0,001).

Таблица 4. Активность энзимов в плазме крови здоровых и больных РА по окончании лечения

Контингент

Кол-во б-ых

Стат. пок.

Энзимы

АДА

АМФДА

АД

Здоровые

33

M

m

7,3

0,25

1,42

0,07

2,75

0,08

РА, группа в целом

77

M

m

7,16

0,06

1,34

0,02

2,86

0,03

РА, I степень активности

15

M

m

7,51

0,06

1,32

0,02

2,68

0,02

РА, II степень

активности

50

M

m

7,29

0,04

1,38

0,02

2,83

0,02

РА, III степень

активности

12

M

m

6,15

0,1

1,22

0,04

3,23

0,07

Таблица 5. Активность энзимов в эритроцитах здоровых и больных РА по окончании лечения

Контингент

Кол-во б-ых

Стат. пок.

Энзимы

АДА

АМФДА

АД

Здоровые

33

M

m

37,0

0,72

22,1

0,81

13,2

0,35

РА, группа в целом

77

M

m

36,7

0,32

27,8

0,54

14,4

0,24

РА, I степень активности

15

M

m

40,5

0,69

23,1

0,17

12,1

0,15

РА, II степень

активности

50

M

m

36,6

0,13

27,2

0,39

14,4

0,2

РА, III степень

активности

12

M

m

32,7

0,67

36,4

0,69

17,5

0,55

Таблица 6. Активность энзимов в лимфоцитах здоровых и больных РА по окончании лечения

Контингент

Кол-во б-ых

Стат. пок.

Энзимы

АДА

АМФДА

АД

Здоровые

33

M

m

45,6

1,07

3,19

0,08

1,95

0,04

РА, группа в целом

77

M

m

42,0

0,29

3,4

0,02

1,87

0,01

РА, I степень активности

15

M

m

44,3

0,25

3,15

0,03

1,96

0,01

РА, II степень

активности

50

M

m

42,3

0,24

3,4

0,02

1,87

0,01

РА, III степень

активности

12

M

m

37,6

0,49

3,71

0,04

1,76

0,02

У больных РА с БПТ, по сравнению с МПТ, в плазме ниже активность АДА (р0,05), в эритроцитах различий не выявлено, в лимфоцитах ниже активность АД (р0,001).

У больных с серопозитивной формой РА, по сравнению с серонегативной, в плазме ниже активность АДА (р0,001) и выше АД (р0,01), в эритроцитах ниже активность АДА (р0,001), выше АМФДА (р0,001) и АД (р0,01), в лимфоцитах ниже активность АДА (р0,001).

У больных РА с I стадией поражения суставов, по сравнению с II стадией, в плазме выше активность АДА (р0,01) и АД (р0,01), в эритроцитах выше активность АДА (р0,001), АМФДА (р0,05) и ниже АД (р0,01), в лимфоцитах выше активность АДА (р0,001), ниже АМФДА (р0,05); по сравнению с III стадией, в плазме выше активность АДА (р0,001) и АД (р0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р0,05) и АМФДА (р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА (р0,01) и ниже АМФДА (р0,05). Между II и III стадиями существенных энзимных различий не определялось.

Вследствие отсутствия в группе больных РА с ФК-1 и ФК-4, сравнительные исследования были проведены только между больными с ФК-2 и ФК-3: при ФК-2, по сравнению с ФК-3, в плазме выше активность АДА (р0,05) и АМФДА (р0,01), в эритроцитах выше активность АМФДА (р0,01), в лимфоцитах выше активность АД (р0,01).

Таким образом, проведенные исследования у больных РА с I степенью активности показали, что минимальная активность ревматоидного процесса характеризуется повышением активности АДА в плазме и эритроцитах на фоне снижения активности АМФДА и АД в плазме, АД в эритроцитах и АДА в лимфоцитах. Наиболее информативна в отражении минимальной активности ревматоидного процесса активность АДА в эритроцитах, которую целесообразно определять у больных РА с подозрением на активацию процесса. Наиболее чувствительными показателями меняющегося в ранние сроки лечения клинического состояния больных оказались показатели активности АДА в эритроцитах и лимфоцитах. Выявлены существенные энзимные различия между вариантами течения заболевания, клинико-анатомическими формами, серопозитивной и серонегативной формами, ФК суставов. Наименьшие энзимные различия определялись между стадиями поражения суставов. То есть, на энзимный профиль крови, даже при одной и той же степени активности процесса, клинические особенности заболевания оказывают довольно значительное влияние.

РА, II степень активности процесса. При поступлении, по сравнению со здоровыми, в плазме крови (табл. 1) определялось снижение активности АДА (р0,05) и повышение АМФДА (р0,01) и АД (р0,001), в эритроцитах (табл. 2) - повышение активности АМФДА и АД (р0,001), в лимфоцитах (табл. 3) - снижение АДА, АД и повышение АМФДА (все р0,001).

Результаты корреляционного анализа свидетельствовали о наличии прямых средней силы связей между активностями АМФДА--АД в плазме и эритроцитах, между активностями АДА--АД в лимфоцитах и обратных умеренных связей между АДА--АМФДА, АДА--АД в плазме и эритроцитах, между АМФДА--АД в лимфоцитах. Выявлены прямые умеренные связи между АМФДАпл.--АМФДАэр., АДпл.--АДэр., АДАпл.--АДАлимф., АМФДАпл.--АМФДАлимф., АМФДАэр.--АМФДАлимф., высокопрочные связи между АДпл.--АДэр., обратные умеренные связи между АДпл.--АДлимф. и АДэр.--АДлимф. То есть, снижение активности АДА в лимфоцитах сопровождалось снижением активности энзима в плазме на фоне нормальной активности в эритроцитах. Повышение активности АМФДА в лимфоцитах сопровождалось ее повышением в плазме и эритроцитах, а снижение активности АД в лимфоцитах -- повышением в плазме и эритроцитах.

Через 10-12 дней лечения, по сравнению с исходным фоном, в плазме снизилась активность АМФДА и АД (р0,05), в эритроцитах снизилась активность АМФДА (р0,001) и АД (р0,05), в лимфоцитах повысилась ранее сниженная активность АДА (р0,001), АД (р0,001) и снизилась активность АМФДА (р0,001).

После проведенного курса стационарного лечения наблюдалась положительная динамика активности всех энзимов во всех трех средах (табл. 4-6), и произошла нормализация активности всех энзимов в плазме, активности АДА и АД в эритроцитах, но осталась повышенной активность АМФДА в эритроцитах, лимфоцитах и сниженными активности АДА и АД в лимфоцитах.

Индекс DAS28 за период стационарного лечения уменьшился на 40,5% (р0,001) и составил 2,37±0,12 (=0,86) баллов, что соответствует периоду наступающей клинической ремиссии.

У больных РА с системными поражениями, по сравнению с суставной формой, в плазме и эритроцитах ниже активность АДА (р0,001), но выше АД и АМФДА (р0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р0,001).

При серопозитивной форме РА, по сравнению с серонегативной, в плазме ниже активность АДА и выше АД (все р0,001), в эритроцитах ниже активность АДА, выше АД и АМФДА (все р0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р0,001).

У больных РА с БПТ, по сравнению с МПТ, в плазме выше активность АД (р0,001), в эритроцитах ниже активность АДА (р0,01), выше АМФДА и АД (все р0,001), в лимфоцитах ниже активность АДА (р0,01) и выше АМФДА (р0,001).

У больных РА с I стадией поражения суставов, по сравнению с больными РА с II стадией, в плазме ниже активность АД (р0,05), в эритроцитах выше активность АДА (р0,001), ниже АМФДА и АД (р0,05), в лимфоцитах выше активность АД (р0,05); по сравнению с III стадией, в плазме выше активность АДА (р0,01) и ниже АД (р0,01), в эритроцитах выше активность АДА (р0,001), ниже АМФДА (р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА (р0,05), АД (р0,01) и ниже АМФДА (р0,05); по сравнению с IV стадией, в плазме выше активность АДА (р0,05) и ниже АД (р0,01), в эритроцитах выше активность АДА (р0,001), ниже АМФДА (р0,01), в лимфоцитах выше активность АД (р0,001) и ниже АМФДА (р0,05).

При II стадии, по сравнению с III стадией, в плазме ниже активность АД (р0,001), в эритроцитах энзимных различий нет, в лимфоцитах выше активность АДА (р0,05) и ниже АМФДА (р0,05); по сравнению с IV стадией, в плазме ниже активность АД (р0,001), в эритроцитах и лимфоцитах энзимных различий не выявлено.

При III стадии, по сравнению с IV стадией, в плазме ниже активность АД (р0,05), а в эритроцитах и лимфоцитах энзимных различий не выявлено.

У больных РА с ФК-2, по сравнению с ФК-3, в плазме крови выше активность АДА (р0,001), ниже АД (р0,001) и АМФДА (р0,05), в эритроцитах выше активность АДА (р0,001), ниже АМФДА (р0,001) и АД (р0,01), в лимфоцитах выше активность АДА (р0,001), АД (р0,001) и ниже АМФДА (р0,001); по сравнению с ФК-4, в плазме выше активность АДА (р0,05), ниже АМФДА (р0,05) и АД (р0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р0,05), ниже АМФДА (р0,05) и АД (р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА и ниже АМФДА (р0,001). При ФК-3, по сравнению с ФК-4, в плазме выше активность АДА (р0,05) и ниже АД (р0,001), в эритроцитах выше активность АДА (р0,05) и АД (р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА (р0,05).

Таким образом, проведенные исследования показали, что для II степени активности ревматоидного процесса характерно повышение активности АМФДА во всех трех средах исследований, активности АД в эритроцитах и плазме на фоне снижения активности АДА в лимфоцитах и плазме, АД в лимфоцитах. Выявлены существенные энзимные различия между клинико-анатомическими формами РА, вариантами течения, серопозитивной и серонегативной формами, ФК суставов и между некоторыми стадиями поражения суставов, что доказывает значимость влияния клинических особенностей заболевания на энзимный профиль крови и при одной и той же степени активности ревматоидного процесса.

Достаточно четко прослеживается и определенная закономерность: чем тяжелее клинические проявления заболевания (наличие висцеритов, БПТ, серопозитивность, высокие ФК и стадии поражения суставов), тем в плазме, эритроцитах и лимфоцитах ниже активность АДА, выше АМФДА, а активность АД выше в плазме и эритроцитах, но ниже в лимфоцитах.

РА, III степень активности процесса. При поступлении в стационар, по сравнению со здоровыми, в плазме крови (табл. 1) значительно ниже активность АДА, АМФДА и выше АД (все р0,001), в эритроцитах (табл. 2) выше активность АМФДА, АД и ниже АДА (все р0,001), в лимфоцитах (табл. 3) ниже активность АДА, АД и выше АМФДА (все р0,001).

Анализ корреляционных связей между энзимами показал наличие в плазме обратных высокопрочных связей между АДА--АД, умеренной прочности связей между АМФДА--АД и прямых умеренных связей между АДА--АМФДА; в эритроцитах -- прямых высокопрочных связей между АМФДА--АД, обратных высокопрочных связей между АДА--АД и умеренных между АДА--АМФДА; в лимфоцитах -- прямых умеренных связей между АДА--АД, обратных умеренных связей между АДА--АМФДА, АМФДА--АД.

Через 10-12 дней лечения, по сравнению с исходным фоном, в плазме повысилась ранее сниженная активность АДА (р0,05), АМФДА (р0,05), в эритроцитах повысилась активность АДА (р0,05), снизилась активность АМФДА и АД (р0,001), в лимфоцитах повысилась активность АДА, АД и снизилась АМФДА (все р0,001).

По окончании курса стационарного лечения наблюдалась дальнейшая положительная динамика всех энзимных показателей, и перед выпиской из стационара нормализовалась в плазме активность АМФДА. Остальные энзимные показатели в плазме, лимфоцитах и эритроцитах, хотя и претерпели значительную положительную динамику, уровня здоровых лиц так и не достигли (табл. 4-6). Индекс DAS28 снизился на 47,1% (р0,001) и составил 3,24±0,18 (=0,6) баллов, что соответствует I степени активности ревматоидного процесса.

У больных РА с системными поражениями, по сравнению с суставной формой, в плазме ниже активность АМФДА (р0,05) и выше АД (р0,05), в эритроцитах ниже активность АДА (р0,01), в лимфоцитах ниже активность АД (р0,001).

У больных РА с БПТ, по сравнению с МПТ, в плазме ниже активность АДА (р0,05), в эритроцитах существенных энзимных различий не определялось, в лимфоцитах ниже активность АДА (р0,05) и АД (р0,05).

У больных РА с II стадией, по сравнению с III стадией, в плазме выше активность АДА (р0,05), в лимфоцитах выше активность АД (р0,01), в эритроцитах различий не выявлено.

У больных с ФК-3, по сравнению с ФК-4, в плазме крови ниже активность АД (р0,05), а в эритроцитах и лимфоцитах энзимных различий не определялось.

Таким образом, проведенные энзимные исследования у больных РА показали, что на выраженность изменений энзимных показателей оказывают влияние как степень активности процесса, так и такие факторы как характер течения, системность поражений, наличие РФ, стадии поражения и ФК суставов.

С целью определения возможности использования энзимных показателей для уточнения и дифференциации степени активности ревматоидного процесса нами был проведен сравнительный анализ энзимной активности крови.

Результаты анализ свидетельствуют о том, что у больных РА с I степенью активности процесса, по сравнению с II степенью, в плазме и эритроцитах выше активность АДА, но ниже активность АМФДА и АД (все р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р0,001); по сравнению с III степенью, в плазме крови выше активность АДА, АМФДА и ниже АД (все р0,001), в эритроцитах выше активность АДА, но ниже АМФДА и АД (все р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р0,001).

У больных РА с II степенью, по сравнению с III степенью, в плазме выше активность АДА, АМФДА и ниже АД (все р0,001), в эритроцитах выше активность АДА, но ниже АМФДА и АД (все р0,001), в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА (все р0,001).

То есть, для каждой степени активности ревматоидного процесса свойственен определенный энзимный профиль крови, на основании которого в комплексе с клиническими данными представляется возможность четко установить степень активности патологического процесса.

Выявлена также определенная закономерность: чем выше степень активности ревматоидного процесса, тем в плазме ниже активность АДА, АМФДА и выше АД, в эритроцитах ниже активность АДА, выше АД и АМФДА, в лимфоцитах ниже активность АДА, АД и выше АМФДА.

Для того чтобы выявить, что же в большей степени влияет на энзимные показатели: степень активности процесса или характер течения, системность поражений, ФК и стадии поражения суставов, нами были проведены сравнительные исследования энзимных показателей при одном и том же клиническом факторе, но при различной активности процесса. Сравнения были проведены у больных с I и II степенями активности.

Результаты сравнения показали, что у больных РА с I степенью и системными поражениями, по сравнению с больными РА с II степенью и системными поражениями, в плазме и эритроцитах выше активность АДА, но ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА.

У больных РА с I степенью и серопозитивной формой, по сравнению с больными РА с II степенью и серопозитивной формой, в плазме и эритроцитах выше активность АДА, ниже АМФДА и АД, в лимфоцитах выше активность АДА, АД и ниже АМФДА.

То есть, определялись те же различия, которые характерны для различий между I и II степенями активности процесса, и, следовательно, системность поражений, серопозитивность не мешают в дифференциации активности процесса по энзимным показателям крови.

Аналогичные различия были выявлены и при сравнительной оценке других клинических факторов: БПТ, МПТ, ФК и стадии поражения суставов, что позволило сделать заключение о том, что, несмотря на значительное влияние клинических особенностей заболевания на энзимный профиль крови при РА, воздействие активности патологического процесса на энзимные показатели более выраженное, и наличие клинических особенностей не «маскирует» активность процесса и не дезориентирует врача в уточнении степени активности ревматоидного процесса по энзимным показателям.

Ситуация, сложившаяся при РА в лимфоцитах, характеризуется сниженной активностью АДА, АД на фоне повышенной активности АМФДА. Исходя из биохимической логики, можно предположить, что низкая активность АДА связана с малым количеством аденозина и высокой активности энзима не требуется для его превращения в инозин. Но в наших исследованиях in vitro активность АДА в клеточных лизатах определялась с оптимальной концентрацией аденозина и, тем не менее, активность АДА была низкой. Следовательно, можно предположить, что при РА в лимфоцитах синтезируется малое количество АДА (возможно депрессия энзима) или нормальное количество, но сам энзим функционально неполноценен вследствие какого-то структурного дефекта. Если же содержание аденозина в лимфоците нормальное, то при низкой активности АДА или его дефиците будет происходить накопление непереработанного энзимом аденозина, и это может привести к блокаде рибонуклеотидредуктазы, которая ингибируется высокой концентрацией аденозина, что влечет замедление биосинтеза РНК, ДНК, гибель лимфоцитов или усиленный апоптоз, особенно Т-лимфоцитов, нарушения процессов пролиферации лимфоцитов и угнетение их функций. Кроме того, повышенные концентрации аденозина способствуют повышению синтеза фактора некроза опухоли-альфа, ответственного за регуляцию иммунных процессов (И.Н. Пуни, 1977; Н.П. Дмитренко, 1984; Г.И. Потапова и др., 1993; V.S. Chakravarti et al, 1991).

Но, учитывая, что при РА в лимфоцитах существенно повышена активность АМФДА, то исходя из схемы метаболизма пуринов, можно предположить, что значительная часть АМФ (субстрата АМФДА) будет уводиться из аденозинового пути катаболизма и по логике -- количества АМФ не будет хватать для продукции нормального количества аденозина. Но если даже АМФ будет достаточно, то многое будет зависеть от 5?-нуклеотидазы (5?-НТ), которая катализирует превращение АМФ в аденозин. Данные литературы свидетельствуют о значительном снижении активности 5?-НТ в лимфоцитах при РА (Н.Л. Агафонова, 2006). Исходя из этого, логично предположить, что в лимфоцитах при РА за счет повышения активности АМФДА и низкой активности 5?-НТ действительно может иметь место дефицит аденозина. Низкое содержание в клетке аденозина может служить причиной и низкой концентрации аденина, продуцируемого за счет катаболизма аденозина. Как следствие этого, может быть и низкая активность АД, выявленная нами в лимфоцитах при РА.

Исходя из полученных нами данных и данных литературы о снижении активности 5?-НТ в лимфоцитах при РА, можно с большой степенью вероятности предположить наличие дефицита аденозина в лимфоцитах у больных РА. Низкие концентрации аденозина в клетке могут оказывать цитотоксический эффект на лимфоциты, тормозя их созревание, пролиферацию за счет блокирования Т-клеток в G-фазе, а В-лимфоцитов в S-фазе клеточного цикла, подавлять супрессорную функцию лимфоцитов (Л.И. Филановская, 1986; S. Kato, 1990; K. Floske, 1991; E. Gatruli et al, 1991). Подобный феномен и может являться одной из основных причин иммунных нарушений при РА и составить один из патогенетических механизмов РА. То есть, в основе иммунных расстройств при РА могут лежать нарушения пуринового метаболизма в иммунокомпетентных клетках -- лимфоцитах.

Исходя из этого, коррекция нарушений пуринового метаболизма может оказаться достаточно перспективным направлением в лечении больных РА.

ВЫВОДЫ

1. У больных РА в фазе клинического обострения в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови выявлены существенные изменения активности АДА, АД и АМФДА, зависящие от клинических особенностей заболевания.

2. У больных РА с I степенью активности процесса, по сравнению со здоровыми, в плазме выше активность АДА и ниже активности АМФДА и АД, в эритроцитах выше, а в лимфоцитах ниже активность АДА. Чем выше степень активности ревматоидного процесса, тем в плазме ниже активности АДА, АМФДА и выше АД, в эритроцитах ниже активность АДА, выше АМФДА и АД, в лимфоцитах ниже активности АДА, АД и выше АМФДА. Между всеми степенями активности процесса определяются выраженные энзимные различия, способствующие их дифференциации.

3. Наиболее информативными в отражении минимальной активности ревматоидного процесса оказались показатели АДА в лизатах эритроцитов, активность которой у всех больных превышала верхние границы референтных величин активности здоровых людей. У этих же больных за границы нормы показатели СОЭ, СРБ, сиаловых кислот, гамма-глобулинов выходили в 33,3% случаев, альфа-2-глобулинов -- в 40% случаев.

4. Выявлены существенные энзимные различия в плазме, эритроцитах и лимфоцитах больных РА между различными вариантами течения заболевания, клинико-анатомическими формами, ФК суставов и некоторыми стадиями поражения суставов, что способствует уточнению диагноза и назначению адекватной терапии.

5. У больных с серопозитивной формой РА, по сравнению с серонегативной, в плазме ниже активность АДА и выше АД, в эритроцитах ниже активность АДА, выше АМФДА и АД, в лимфоцитах ниже активность АДА, АД и выше АМФДА.

6. На активность энзимов значительное влияние оказывают характер течения, системность поражений, наличие РФ, ФК и стадии поражения суставов. Но наибольшее воздействие на энзимные показатели крови оказывает выраженность активности ревматоидного процесса. Вследствие этого, вышеуказанные клинические особенности заболевания не затрудняют диагностику степени активности процесса.

7. Чем тяжелее течение заболевания, тем ниже активность АДА в лимфоцитах, эритроцитах, плазме крови, АД в лимфоцитах и выше активность АД в эритроцитах, АМФДА в лимфоцитах и эритроцитах.

8. Результаты корреляционного анализа между активностями энзимов при I степени активности ревматоидного процесса свидетельствовали о наличии в большинстве случаев умеренных связей во всех трех средах исследований, и, что снижение активности АДА в лимфоцитах сопровождается повышением ее активности в эритроцитах и плазме, снижение активности АМФДА в плазме -- повышением активности энзима в лимфоцитах и эритроцитах. При II степени определялись прямые умеренные связи между АМФДА--АД в плазме и эритроцитах, АДА--АД в лимфоцитах, обратные умеренные между АДА--АМФДА, АДА--АД в плазме и эритроцитах, АМФДА--АД в лимфоцитах. При III степени -- обратные высокопрочные связи в плазме между АДА--АД, умеренные между АМФДА--АД и прямые умеренные между АДА--АМФДА, в эритроцитах -- прямые высокопрочные между АМФДА--АД, обратные между АДА--АД и умеренные между АДА--АМФДА, в лимфоцитах -- прямые умеренные между АДА--АД, обратные умеренные между АДА--АМФДА, АМФДА--АД.

9. В процессе лечения больных РА активность большинства энзимов во всех средах исследований изменялась уже в первые 10 дней лечения в соответствии с меняющимся клиническим состоянием больных, что свидетельствует о возможности использования энзимных показателей в объективизации оценки эффективности проводимой терапии.

10. Значительно сниженные активности АДА, АД и повышенная активность АМФДА в лимфоцитах больных РА, выявленные нами, свидетельствуют о выраженных нарушениях ПМ в иммунокомпетентных клетках, что может привести к расстройству процессов созревания, пролиферации и дифференциации лимфоцитов, нарушению их функциональных свойств, дискоординации иммунной регуляции и составить один из наиболее важных патогенетических механизмов РА.

11. Исследования активности АДА, АМФДА и АД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных РА в комплексе с клиническими данными способствуют выявлению и уточнению степени активности ревматоидного процесса, клинико-анатомической формы, характера течения, фазы клинической ремиссии, роли энзимов ПМ в патогенезе РА, назначению своевременной адекватной терапии и объективизации оценки ее эффективности.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Следует ориентироваться на следующие референтные пределы величин активности энзимов у здоровых людей (условную норму), вычисленные по формуле: М±2 (95% вероятность):

- плазма крови (нмоль/мл/мин) -- активность АДА: 4,6-10,2; АМФДА: 0,66-2,18; АД: 1,8-3,67;

- лизаты эритроцитов (нмоль/мл/мин - 109 клеток) -- активность АДА: 28,8-45,2; АМФДА: 12,8-31,4; АД: 9,2-17,2;

- лизаты лимфоцитов (нмоль/мл/мин - 107 клеток) -- активность АДА: 33,3-57,9; АМФДА: 2,3-4,1; АД: 1,5-2,4.

2. Для выявления минимальной активности ревматоидного процесса, разграничения фаз ремиссии и обострения процесса целесообразно определять активность АДА в эритроцитах, которая даже при минимальных проявлениях активности патологического процесса в 100% случаев выше верхней границы нормы -- 45,2 нмоль/мин/мл.

3. II степень активности процесса характеризуется повышением активности АМФДА в плазме, эритроцитах и лимфоцитах, АД в плазме и эритроцитах на фоне снижения активности АДА в плазме и лимфоцитах, АД в лимфоцитах; III степень -- повышением активности АД в плазме и эритроцитах, АМФДА в эритроцитах и лимфоцитах на фоне снижения активности АДА в трех средах, АМФДА в плазме и АД в лимфоцитах.

4. В первые 7-10 дней для контроля эффективности назначенной терапии целесообразно ориентироваться у больных РА с I степенью на динамику активности АДА, которая в случаях улучшения клинического состояния снижается в эритроцитах и повышается в лимфоцитах; у больных РА с II степенью на положительную динамику активности АМФДА и АД в эритроцитах (снижение) и активности АДА и АД в лимфоцитах (повышение); у больных РА с III степенью на положительную динамику активности АДА и АМФДА в плазме (повышение), АМФДА и АД в эритроцитах (снижение) и АДА, АД в лимфоцитах (повышение).

Публикации

Зборовская И.А., Ушакова И.С., Некрасова С.П., Филимонова Ю.К. Активность адениндезаминазы в лимфоцитах крови больных ревматоидным артритом // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 54-55.

Мартемьянов В.Ф., Ушакова И.С., Емельянов Н.И., Зборовская И.А. Активность аденозиндезаминазы в лимфоцитах крови больных ревматоидным артритом // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 96-97.

Ушакова И.С., Морозова Т.А., Фофанова Н.А., Трубенко Ю.А. Активность АМФ-дезаминазы лимфоцитов крови при ревматоидном артрите Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXII. -- Волгоград, 2005. -- С. 150-151.

Ушакова И.С., Мозговая Е.Э., Зборовская И.А., Мартемьянов В.Ф., Бедина С.А. Клинико-патогенетическое значение исследования активности энзимов аденилововго пула пуринового метаболизма в эритроцитах и плазме крови больных ревматоидным артритом // Состояние здоровья населения Волгоградской области и современные медицинские технологии его коррекции : Мат. науч-практич. конф.. -- Волгоград, 2005. -- С. 162-163.

Мартемьянов В.Ф., Ушакова И.С., Бедина С.А. К исследованию активности аденозиндезаминазы в плазме и лизатах эритроцитов у больных ревматоидным артритом // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 97-98.

Ушакова И.С., Мартемьянов В.Ф., Бедина С.А., Девятаева Н.М. Исследование активности адениндезаминазы в плазме и лизатах эритроцитов у больных ревматоидным артритом // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 149-150.

Бедина С.А., Некрасова С.П., Ушакова И.С., Мартемьянов В.Ф. Клинико-диагностическое значение исследования активности АМФ-дезаминазы в лизатах эритроцитов и плазме больных ревматоидным артритом // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. -- Вып. XXIII. -- Волгоград, 2006. -- С. 18-19.

Зборовский АБ., Ушакова И.С. Клинико-диагностическое значение исследования активности ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма при ревматоидном артрите // Вестник ВолГМУ -- 2007. -- № 3. С. 53-57.

Размещено на Allbest.ur


Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.

© 2000 — 2023, ООО «Олбест» Все права защищены