Размещено на http://www.allbest.ru/

14.00.25 фармакология, клиническая фармакология

Волгоград, 2007

Работа выполнена на кафедре фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей Волгоградского государственного медицинского университета

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Тюренков Иван Николаевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Резников Константин Михайлович

доктор биологических наук, Бугаева Любовь Ивановна Ведущая организация: Саратовский государственный медицинский университет

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Волгоградского государственного медицинского университета по адресу: 400131, Россия, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1

Ученый секретарь Диссертационного Совета А.Р. Бабаева

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

Со времени получения Ф. Тиманном в 1884 году первого представителя оксадиазолов - 3,5-дифенил-1,2,4-оксадиазола [Tiemann F., 1884]и до начала 40-х годов ХХ века, фармакологическая активность этого класса соединений не изучалась. Первые исследования были предприняты в 1942 году, когда у 3-арилсульфонилимино-5-метил-1,2,4-оксадиазола была обнаружена антимикробная активность против стафилококка и пневмококка, сравнимая с известным препаратом сульфопиридином [Anderson G.W., Faith H.W., Marson H.E, 1942]. Позднее были исследованы другие сульфопроизводные содержащие оксадиазольное кольцо [Trenner U.D., 1973; Seng F., Ley K., 1974]. В 1960 фармакологический скрининг выявил у трех представителей оксадиазолов: оксаламина, ирригора и либексина терапевтическую активность - у ирригора была обнаружена коронарная вазодиляторная функция [Harsanyi K., Kiss P., Korbonits D., Malyacta J., 1966]. С целью поиска в ряду аминопроизводных оксадиазолов соединений с более широким спектром фармакологической активности Б. Сильвестрини с сотрудниками [Silvestrini B., Pozzatti C., 1960; Palazzo G., Tavella M., Strani G., 1961] протестировав более 100 соединений, обнаружили вещества с антиспазмалитической, анальгетической, противосудорожной и анестетической активностями. Однако, несмотря на широкий спектр протестированных соединений, авторами не была исследована токсичность и не прослежена корреляционная зависимость "активность-структура". Позднее для других аминопроизводных оксадиазола был проведен фармакологический скрининг, который выявил у производных 5-[2-(R-амино)алкиламино]-3-R-фенил-1,2,4-оксадиазола коронарную вазодиляторную и спазмолитическую активности [Aron-Samuel J.M.D., Demande Fr., 1973]. В разные годы для оксадиазолов была найдена антиконвульсивная [Palazzo G., Silvestrini B., 1962], противосудорожная, транквилизирующая [Cavalleri B. Et al., 1974] активности. Позднее у 1,2,4-оксадиазолов была установлена и в настоящее время успешно изучается б- и -адреноблокирующая активность [Соколов, Виноградов С.М. и др., 1995]. Также было проведено изучение корреляционной зависимости "структура-активность" с использованием компьютерной программы PASS и выявлены перспективные соединения с выраженной гипертензивной и психотропной активностью. Представленные данные свидетельствуют о широком спектре фармакологической активности производных 1,2,4-оксадиазола. Проведенный патентный поиск также свидетельствует о том, что некоторые N-арил- и гетарилкарбаматы, проявляют психотропную активность. В связи с вышеизложенным, представляется целесообразным изучение фармакологической активности вновь синтезированных химиками Астраханского государственного университета д.х.н. А. Тырковым и А. Великородовым производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арилкарбаматов, которые по данным компьютерного прогноза по программе PASS могут обладать кардио- и психотропным действием.

Цель планируемого исследования

Изучить спектр фармакологической активности производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов.

Задачи исследования

Провести компьютерный прогноз биологической активности производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов.

Провести скрининг среди производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов веществ, обладающих кардиоваскулярным действием.

а. Изучить влияние производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов на артериальное давление, частоту сердечных сокращений и основные показатели кардио- и гемодинамики;

б. Изучить противоаритмическую активность производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов;

в. Изучить противоишемическую активность производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов;

Изучить психотропную и нейротропную активности производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов:

а. ноотропное действие;

б. седативное, антифобическое и транквилизирующее действие;

в. противосудорожную активность;

г. антигипоксическую активность;

д. снотворное действие.

Изучить кардио- и гемодинамический механизм действия веществ, оказывающих выраженное влияние на артериальное давление.

Провести анализ влияния вещества с выраженным кардиоваскулярным действием на механизмы регуляции сосудистого тонуса.

Новизна исследования

Впервые выполнено комплексное изучение кардиоваскулярной, нейро- и психотропной активности 10 производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов. гемодинамический артериальный давление

Впервые установлено, что производные N-арил- и гетарилкарбаматов соединение под лабораторным шифром АУВ-114, хлороводородная соль, содержащая в параположении к метоксикарбониламиногруппе оксиалкиаминогруппу, имеющую в качестве амина морфолиновый остаток проявляет слабое анксиолитическое и выраженное гипертензивное действие, натриевые соли 1-гидроксибензимидазол-3-оксида соединение АУВ-87 (содержащее фенильный заместитель при атоме С-2 и метоксикарбониламиногруппу при атоме С-6 бензимидазольного ядра) и соединение АУВ-92 (содержащее 3-нитрофенильный заместитель при атоме С-2 и метоксикарбониламиногруппу при атоме С-6 бензимидазольного ядра) обладают слабым антигипоксическим действием, незначительно улучшают функциональное состояние очага ишемии миокарда, кратковременно снижают АД, что и предсказывалось на основе компьютерного прогноза.

Среди новых производных 1,2,4-оксадиазолов соединение АУТ-12, имеющее в положении 5 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла нитроэтановый фрагмент, замещенный в положении 1 этоксикарбонильной группой, а в положении 2 пиперидиновым циклом и метильной группой (электронодонорный заместитель) и положение 3 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла замещенное фенильным кольцом, улучшает когнитивную функцию (что подтверждает компьютерный прогноз), оказывает гипертензивное действие (не предсказанное прогнозом); соединение АУТ-11, имеющее в положении 5 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла нитроэтановый фрагмент, замещенный в положении 1 этоксикарбонильной группой (электроноакцепторный заместитель), а в положении 2 пиперидиновым циклом (электронодонорный заместитель), в положении 3 1,2,4-оксадиазольный цикл содержит фенильное кольцо (электроноакцепторный заместитель) оказывает седативное, анксиолитическое, что согласуется с данными компьютерного анализа и не выявленное им гипертензивное действие.

Вещество АУТ-14 имеющее в положении 5 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла нитроэтановый фрагмент, замещенный в положении 1 нитрогруппой (электроноакцепторный заместитель), а в положении 2 пирролидиновым фрагментом (электронодонорный заместитель), положение 3 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла замещенное фенильным кольцом), проявившее, согласно прогнозу седативное действие и выраженное гипо- и антигипертензивное действие, что прогнозом не предсказывалось. Данное соединение оказывает выраженное симпатолитическое действие, чем и объясняется его гипо- и антигипертензивное действие.

Научно-практическая ценность исследования

Выполненное исследование по изучению спектра фармакологической активности производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов может явиться обоснованием целесообразности дальнейшего углубленного изучения их кардиоваскулярной, нейро- и психотропной активности веществ.

Полученные данные о зависимости между химическим строением и фармакологическим действием позволят химикам-синтетикам продолжить целенаправленный поиск веществ с определенными фармакологическими свойствами.

Соединение АУТ-14 (этил-[2-нитро-2-(3-фенил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)]-3-пиперидинопропаноат), оказывающее выраженное симпатолитическое и, вследствие этого, гипо- антигипертензивное действие перспективно для дальнейшей разработки в качестве лекарственного препарата для лечения гипертонической болезни.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Производные 1,2,4-оксадиазолов вещество под лабораторным шифром АУТ-11 и АУТ-12 обладают выраженным психотропным действием. Первое оказывает седативное и анксиолитическое действие, второе улучшает когнитивную функцию.

2. Производные N-арил- и гетарилкарбаматов соединение АУВ-114 обладает слабым седативным и анксиолитическим действием.

3. Паразамещенные производные N-арил- и гетарилкарбаматов натриевые соли таутомерных 5(6)-метоксикарбониламинопроизводных 2-(4-арил)-1-гидроксибензи-мидазол-3-оксидов с лабораторным шифром АУВ-87 и АУВ-92 оказывают антигипоксическое, противоишемическое действие в условиях 30 минутной окклюзии нисходящей ветви левой коронарной артерии, гипотензивное действие.

5. Соединение АУТ-14 обладает выраженным гипо- и антигипертензивным действием, которое обусловлено его симпатолитическим действием.

Апробация работы

По результатам исследования опубликовано восемь работ. Материалы диссертации представлены на X Всероссийской научной конференции "Карбонильные соединения в синтезе гетероциклов" (Саратов, 2004), XIII Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 2006), 2-й Российско-Китайской научной конференции по фармакологии "Фундаментальная фармакология и фармация - клинической практике" (Пермь, 2006), конференциях молодых ученых Волгоградского государственного медицинского университета 2005-2006 гг.

Объем и структура работы

Материалы диссертации изложены на 126 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, главы: материалы и методы, главы собственных исследований, обсуждение, выводы и список литературы, включающий 67 отечественных и 59 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 27 таблицами и 31 рисунком.

Основное содержание работы

Материалы и методы исследования

Исследование выполнено на 217 крысах обоего пола линии Вистар и беспородных массой 180-220 г, 216 беспородных мышах-самцах массой 25-30 г, 70 кошках массой 3,400-4,200 кг и 10 крысах-самцах со спонтанной гипертензией. Крысы и мыши получены из Филиала "Столбовая" ГУ НЦБМТ РАМН г. Чехов Московская область; крысы со спонтанной гипертонией получены из НПП "Питомник лабораторных животных" ФИБХ РАН.

В настоящем исследовании изучена психотропная и кардиоваскулярная активность 5 новых производных N-арил- и гетарилкарбаматов, соединений с лабораторными шифрами АУВ-2, АУВ-87, АУВ-92, АУВ-93 и АУВ-114 и 5 производных 1,2,4-оксадиазолов, соединений с лабораторными шифрами АУТ-11, АУТ-12, АУТ-13, АУТ-14 и АУТ-15, которые по данным компьютерного прогноза по системе PASS могли оказывать отмеченное действие. Субстанции изучаемых химических соединений были получены с кафедры органической химии Астраханского государственного университета (Астрахань, Россия)*^* Выражаем глубокую признательность за предоставленные соединения, совместно проведенные исследования и компьютерный прогноз д.х.н. Тыркову А.Г. и д.х.н. Великородову А.В., Астраханский государственный педагогигческий университет, г. Астрахань.

При изучении психотропной активности использовали вещества в дозе 1/20 мг/моль/кг, вводимые внутрибрюшинно за 20 минут до регистрации исследуемых показателей.

Контрольной группе животных вводился физиологический раствор или димексид (диметилсульфоксид), которая рассматривалась как контрольная группа для веществ, растворяющихся в димексиде. Второй контрольной группе вводился физиологический раствор.

Для изучения психотропной активности соединений использовались следующие психофармакологические тесты: тест "открытое поле" (ОП) (Хаунина Р.А., Лапин И.П. 1976 г., Воронина Т.А. 1982; Гельман В.Я., Кременевская С.И., 1990); тест "приподнятый крестообразный лабиринт" (ПКЛ) (Pellow S. et al., 1985); тест "условная реакция пассивного избегания" (УРПИ) (Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П., 1991; Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000), "тест экстраполяционного избавления" (ТЭИ) (Бондаренко Н.А., 1992.).

Снотворное действие изучалось на модели сна, вызванного введением барбитуратов - тиопентала натрия в дозах 60 мг/кг и 40 мг/кг (Воронина Т.А., Неробокова Л.Н., 2000).

Противосудорожное действие изучалось на модели хемоиндуцированного эпилептогенеза вызванного введением пикротоксина (5 мг/кг) и коразола (90 мг/кг), (Воронина Т.А., Неробокова Т.Н., 2000).

Для изучения антигипоксического действия использовали модели нормобарической гипоксии с гиперкапнией и гемической гипоксии, вызванной нитритной интоксикацией (нитрит натрия 250 мг/кг подкожно) (Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000);

Изучение влияния новых производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арилкарбаматов на артериальное давление (АД), частоту сердечных сокращений (ЧСС) проводилось на бодрствующих крысах и наркотизированных этаминалом натрия (40 мг/кг внутрибрюшинно) кошках. АД и ЧСС регистрировалось прямым методом в сонной артерии с помощью компьютерного гемодинамического анализатора на базе программы BEAT.

Противоишемическая активность исследуемых веществ оценивалась по динамике функционального состояния очага ишемии при 5 и 30 минутной окклюзии нисходящей ветви левой коронарной артерии (ОНВЛКА).

Эксперименты проводились на наркотизированных (этаминал-натрия 40 мг/кг) кошках. Вещества вводились в наружную яремную вену за 10 минут до окклюзии нисходящей ветви левой коронарной артерии в дозе 5 и 20 мг/кг.

Антиаритмическое действие новых производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арилкарбаматов изучалось на аконитиновой и хлоридкальциевой моделях.

При изучении влияния исследуемых веществ на артериальное давление бодрствующих крыс и антигипертензивного действия на крысах со спонтанной гипертонией (SHR) измерение АД производилось непрямым способом - фотоплетизмографическим методом с хвоста крысы с помощью плетизморецептора (датчика), который располагается непосредственно на основании хвоста, монитора давления и компьютера Pentium с использованием оригинального пакета программ [Мошкевич, 1970].

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием параметрического t-критерия Стьюдента, непараметрического U-критерия Манна-Уитни, точного критерия Фишера, методом однофакторного дисперсионного анализа, критерия Стьюдента с поправкой Бонферони для множественных сравнений, а также критериев Ньюмена-Кейлса и Данна для множественных сравнений. Обработка данных производилась с помощью пакетов программ Microsoft Excel XP, STATISTICA 5.0, Biostatistics 4.03. Статистически значимыми расценивались эффекты при p<0,05.

Результаты исследований и их обсуждение

Изучение нейро- и психотропной активности

Данные о влиянии исследуемых веществ на двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность животных представлены на рис. 1.

Соединения АУТ-11, АУВ-93 и АУВ-114 снижали горизонтальную двигательную активность, а вещество АУТ-11 и ориентировочно-исследовательское поведение. Соединение АУВ-114 увеличивало также число выходов и время нахождения в центре площадки, что также можно интерпретировать как анксиолитическое действие этого химического соединения.

Рис 1. Влияние однократного введения соединений на параметры поведения животных в тесте "открытое поле"

Обозначения: * - p<0,05- достоверность различий по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Данна для множественных сравнений). Соединения под шифром АУТ - производные 1,2,4-оксадиазолов, АУВ - N-арилкарбаматов

В тесте УРПИ у животных, получавших соединение АУТ-12 через 24 часа после обучения, отмечалось большее увеличение латентного периода захода в темный отсек, чем у животных контрольной группы, что может свидетельствовать об улучшении памяти и обучения (рис. 2). Другие исследуемые соединения выраженного влияния на память и обучение не оказывали.

Рис 2. Влияние соединений на латентный период первого захода животных в темный отсек в тесте УРПИ

Обозначения как на рис. 1

В тесте приподнятого крестообразного лабиринта вещества АУТ-11 и АУВ-114 увеличивали время пребывания и количество выходов в открытые рукава, что подтверждает наличие у них анксиолитического действия (рис. 3).

Рис. 3. Влияние соединений на продолжительность пребывания животных в открытых рукавах в тесте "приподнятый крестообразный лабиринт"

Обозначения как на рис. 1

В тесте экстраполяционного избавления животные, получавшие соединения АУТ-12, АУТ-13 и АУВ-92 быстрее решали задачу экстраполяционного избавления, чем животные контрольной группы (рис. 4).

Рис. 4. Влияние соединений на продолжительность времени, решения задачи экстраполяционного избавления

Обозначения как на рис. 1

При изучении влияния исследуемых веществ на снотворное действие тиопентала натрия установлено, что соединения АУТ-11 и АУВ-114 достоверно укорачивали продолжительность латентного периода до наступления сна и увеличивали длительность сна до пробуждения (восстановление рефлекса переворачивания), что позволяет сделать вывод о наличии у этих соединений потенцирующего действия на снотворный эффект тиопентала натрия, что согласуется с их седативным, анксиолитическим действием. Соединения АУТ-12 и АУВ-92, наоборот, препятствовали снотворному эффекту тиопентала натрия: увеличивали латентный период наступления сна, уменьшали его продолжительность и снижали процент заснувших животных в группе, что согласуется с выводом о наличии у них психоактивирующего действия, сделанного на основании предыдущих экспериментов. Остальные вещества практически не влияли на действие барбитуратов.

Рассматривая в совокупности полученные данные, можно сделать выводы о том, что соединения АУТ-12 и АУВ-92 оказывают психоактивирующее действие (активируют поведение в открытом поле, препятствуют снотворному эффекту тиопентала натрия), улучшают память и обучение (тест УРПИ), ускоряют решение задачи в тесте экстраполяционного избавления, а соединения АУТ-11 и АУВ-114 оказывают седативное, анксиолитическое действие (снижают двигательную активность и ориентировочно-исследовательское поведение, отчетливо не влияют на память и обучение, на решение задачи экстраполяционного избавления, но увеличивают количество выходов в открытые рукава, достоверно продлевая время нахождения в них, потенцируют действие барбитуратов). Остальные соединения отчетливого психотропного действия не оказывали.

Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что соединения АУТ-11, АУТ-12, АУВ-92 и АУВ-114 перспективны для дальнейшего углубленного изучения их психотропных свойств.

При изучении возможной противосудорожной активности исследуемые соединения практически не изменяли латентного периода наступления судорог, продолжительности клонической и тонической фазы, а также общей длительности судорожного синдрома у животных по сравнению с контролем, исходя из чего можно сделать вывод, что данные вещества не обладают противосудорожной активностью.

На моделях гиперкапнической и острой генерализованной гемической гипоксии соединения под лабораторным шифром АУТ-13, АУВ-87 и АУВ-92 увеличивали продолжительность жизни животных. Остальные вещества на продолжительность жизни животных в условиях гипоксии не влияли (рис. 5).

Рис. 5. Влияние соединений на продолжительность жизни животных в условиях гипоксии

Обозначения как на рис. 1

Суммируя данные, полученные по результатам проведенных экспериментов, можно говорить о наличии умеренной антигипоксической активности только у двух производных N-арилкарбаматов - соединений АУВ-87 и АУВ-92.

Изучение кардиоваскулярного действия N-арил- и гетарилкарбаматов и 1,2,4-оксадиазолов.

Ряд исследуемых веществ: АУВ-2, АУВ-114, АУТ-11 и АУТ-12 вызывают выраженное и продолжительное повышение артериального давления, превышающее таковое препарата сравнения - мидодрина; соединения АУВ-87, АУВ-92 и АУВ-93 вызывали выраженное, но кратковременное снижение артериального давления, тогда как соединение АУТ-14 оказывало медленно развивающееся, но продолжительное снижение артериального давления. Так к концу 120 минуты артериальное давление снижалось в среднем на 20% и оставалось сниженным по отдельным опытам на кошках более 6-ти часов наблюдения (таблица 1).

При изучении влияния исследуемых веществ на функциональное состояние очага ишемии миокарда, выявлено, что соединения АУВ-87 и АУВ-92 в дозах 5 и 20 мг/кг, соответственно, обладают незначительным противоишемическим действием, наиболее выраженным в условиях 30-ти минутной ОНВЛКА, но по этому эффекту существенно уступают обзидану (рис 6).

Рис. 6. Влияние АУВ-87 и АУВ-92 в/в на устойчивость миокарда к гипоксии (по данным динамики суммарной величины сегмента ST эпикардиальной электрограммы при 30-минутной ОНВЛКА и последующей реперфузии)

* р<0,05 по сравнению с контрольной группой животных (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса).

При изучении противоаритмического действия новых производных 1,2,4-оксадиазолов и N-арил- и гетарилкарбаматов, на аконитиновой и хлоридкальциевой модели аритмии установлено, что лишь соединение АУВ-114 проявило отчетливое противоаритмическое действие при нарушениях сердечного ритма, вызванных введением аконитина и хлорида кальция, но уступающее по действию препаратам сравнения верапамилу и обзидану.

Рис. 7. Влияние соединения АУТ-14 в дозе 10 мг/кг на уровень АД у спонтанно-гипертензивных крыс (n=10)

* р<0,05, # р<0,01, + р<0,001 по сравнению с исходным уровнем (двухфакторный дисперсионный анализ, тест Тьюке с повторениями)

При изучении антигипертензивного действия в опытах на спонтанно-гипертензивных крысах (SHR) соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг при пероральном введении вызывало постепенно нарастающее снижение АД, достигающее максимума к концу третьих суток. В последующие дни (4 и 5 день) дальнейшего снижения АД не отмечалось. После отмены АД восстанавливалось постепенно, возвращаясь к исходному только через 3-4 дня после прекращения его введения (рис. 7).

При изучении гемодинамического механизма гипотензивного действия соединения АУТ-14, установлено, что в дозе 5 мг/кг снижение АД было обусловлено уменьшением сосудистого сопротивления, при этом отмечалось урежение сердечного ритма и увеличение ударного выброса. Увеличение дозы до 20 мг/кг приводит к еще большему снижению АД. Уменьшению ОПС, урежению сердечного ритма (рис. 8).

Рис. 8. Влияние соединения АУТ-14 в дозе 5 мг/кг (А) и в дозе 20 мг/кг (Б) на основные показатели кардио- и гемодинамики через 120 минут после введения веществ.

Таким образом, в результате проведенных экспериментов среди производных N-арил- и гетарилкарбаматов и 1,2,4-оксадиазолов было выявлено одно, наиболее активное производное 1,2,4-оксадиазолов - Этил-[2-нитро-2-(3-фенил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)]-3-пиперидинопропаноат - соединение под лабораторным шифром АУТ-14 вызывающее медленно развивающееся, выраженное и продолжительное снижение уровня артериального давления.

Для изучения возможного влияния нового производного 1,2,4-оксадиазолов соединения АУТ-14 на механизмы регуляции сосудистого тонуса мы выполнили эксперименты, в которых изучалось влияние этого соединения на сосудистые ответы, вызванные введением различных агонистов рецепторов, влияющих на тонус сосудов: -адреномиметика - норадреналина в дозе 2 мкг/кг ("Здоровье", Украина) [Кола, Сыропятов Б.Я., 1998], 1- и в2-адренорецепторов - изадрина (DL-изопротеринол гхл) (5 мг/кг) (Sigma, Германия), М- и Н-холинорецепторов - ацетилхолина гидрохлорид (0,01 мг/кг) (Acros Organics, США), дофаминовых рецепторов - дофамина (20 мкг/кг) (Феррейн, Россия), ангиотензиновых рецепторов - ангиотензинамида (1 мкг/кг) (Олайнфарма, Латвия) [Кудрин, Ряженов В.В., 1989].

Соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг не изменяло реакции АД и сердца (ЧСС), вызванных введением норадреналина, изопротеренола, дофамина, ацетилхолина и ангиотензинамида. Такие результаты позволяют считать, что гипо- и антигипертензивный эффект этого вещества не связаны с его периферическим действием вещества, т.е. с блокадой - и -адренорецепторов, с блокадой ангиотензиновых рецепторов, а также не связано с периферическими дофамино- и холинергическими рецепторами.

Учитывая данные прогноза по программе "PASS" можно было предполагать наличие у соединения АУТ-14 ГАМКА-миметического действия, что может лежать в основе его гипотензивного действия. Предварительное введение бикукуллина никак не отражалось на развитии гипотензивной реакции, вызванной введением этого вещества. Эти данные, а также отсутствие действия соединения АУТ-14 на течение судорог, вызванных пикротоксином, позволяют считать, что гипотензивное и антигипертензивное действие этого вещества, очевидно не обусловлено ГАМК-ергическим действием.

Характер развития гипо- и антигипертензивного эффекта - мягкое постепенное, но продолжительное, а также отсутствие "синдрома отмены" позволяет предполагать, что исследуемое вещество обладает симпатолитической активностью, так как по скорости и длительности антигипертензивного действия более всего сходно с известными препаратами: резерпином и октадином, являющихся симпатолитиками.

Предварительная резерпенизация (2 мг/кг, внутрибрюшинно за 24 часа до опыта) значительно ослабляет гипотензивное действие соединения АУТ-14, как у нормотензивных, так и у спонтанно-гипертензивных крыс, что позволяло предположить периферическое симпатолитическое действие. Предварительная резерпенизация вызывала выраженное снижение артериального давления. Известно, что гипотензивный эффект многих ЛС зависит от исходного уровня артериального давления. В этой связи можно предполагать, что слабый гипотензивный эффект возможно обусловлен исходно низким уровнем артериального давления.

Поэтому для уточнения возможного симпатолитического действия нами было выполнено исследование с раздражением симпатической нервной цепочки и с введением тирамина.

В контроле раздражение поясничной симпатической цепочки с частотой 5, 10 и 20 имп/с вызывает уменьшение кровотока в мышце бедра задней конечности, соответственно на 12,3%, 18,5% и 23,9%. У животных, получавших предварительно в течение трех дней АУТ-14 в дозе 10 мг/кг такая же стимуляция поясничной симпатической цепочки уже вызывало падение кровотока только на 4,2%, 6,2% и 8,7%, т.е. практически втрое меньше (рис. 9). Эти данные позволяют считать, что исследуемое вещество оказывает симпатолитическое действие. По изменению в таких опытах падения кровотока, вызванного раздражением ПСЦ, у животных контрольной группы в сравнении с животными, получавшими исследуемое вещество в течение 3-х дней в дозе 10 мг/кг и судили о его пресинаптическом, т.е. о симпатолитическом действии. При этом принималось во внимание, что соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг заметно не подавляло прессорные реакции, вызванные введением норадреналина, ангиотензинамида, а наоборот, незначительно увеличивало их. У животных, которым соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг вводилось в течение 3-х дней усиливалось действие изадрина - увеличивался гипотензивный эффект и отмечалось более выраженное учащение сердечного ритма. Увеличение эффектов -адреномиметика норадреналина и 1- и 2-адреномиметика изадрина в этом примере можно расценивать как эффект денервированного органа.

Рис. 9. Изменение кровотока в мышце бедра, вызванное раздражением поясничной симпатической цепочки у животных контрольной группы и у животных, которым в течение 3-х суток (раз в день) вводилось соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг

* р<0,05 по сравнению с контрольной группой животных (t-критерий Стьюдента).

Дополнительным подтверждением пресинаптического (симпатолитического) действия АУТ-14 являются опыты с тирамином. Введение тирамина, усиливающего высвобождение медиатора, у контрольной группы вызывало выраженное, в среднем на 29,3±3,6 мм рт.ст. повышение АД. У животных, предварительно за 24 часа получавших внутрибрюшинно соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг введение тирамина в той же дозе вызывало повышение АД на 11,1±4,0 мм рт.ст.

Таким образом, постепенное развитие гипотензивного эффекта и сохранение его после отмены исследуемого вещества, значительное ослабление гипотензивного эффекта предварительной резерпенизацией, значительное уменьшение степени падения кровотока в мышце бедра, вызванного стимуляцией поясничной симпатической цепочки, у животных, получавших в течение 3-х дней соединение АУТ-14 в дозе 10 мг/кг, ослабление прессорного действия тирамина позволяет считать, что гипо- и антигипертензивное действие соединения АУТ-14 обусловлено его симпатолитическим действием.

Выводы

1. Используемый нами компьютерный прогноз с помощью программы PASS психотропного и кардиоваскулярного действия производных N-арил- и гетарилкарбаматов и 1,2,4-оксадиазолов в большей части оправдался.

2. Среди производных N-арил- и гетарилкарбаматов найдены вещества: соединение под лабораторным шифром АУВ-114 содержащее в параположении к метоксикарбониламиногруппе оксиалкиаминогруппу, имеющую в качестве амина морфолиновый остаток проявляющее анксиолитическое, умеренное гипертензивное действие и противоаритмическое действие, что согласуется с данными компьютерного прогноза; соединение АУВ-87, содержащее фенильный заместитель при атоме С-2 и метоксикарбониламиногруппу при атоме С-6 бензимидазольного ядра, и соединение АУВ-92, в отличие от АУВ-87 при атоме С-2 содержащее 3-нитрофенильный заместитель бензимидазольного ядра, обладают слабым антигипоксическим действием, незначительным противоишемическим, значительным, но кратковременным гипотензивным действием, которое и предсказывалось на основе компьютерного прогноза. Все отмеченные эффекты производных N-арил- и гетарилкарбаматов были предсказаны компьютерным прогнозом с помощью программы PASS.

3. Среди новых производных 1,2,4-оксадиазолов соединение АУТ-12, имеющее в положении 5 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла нитроэтановый фрагмент, замещенный в положении 1 этоксикарбонильной группой, а в положении 2 пиперидиновым циклом и метильной группой положение 3 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла замещенное фенильным кольцом, оказывает выраженное психоактивирующее и незначительное гипертензивное действие, последнее не предсказывалось компьютерным прогнозом. Соединение АУТ-11, в отличие от АУТ-12, имеющее в положении 5 1,2,4-оксадиазольного гетероцикла нитроэтановый фрагмент, оказывает седативное, анксиолитическое и гипертензивное действие, что подтверждает данные анализа.

4. Соединение АУТ-14 (этил-[2-нитро-2-(3-фенил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)]-3-пиперидинопропаноат) вызывает выраженное дозозависимое снижение АД на наркотизированных и бодрствующих крысах и кошках, что не предсказывалось прогнозом. Введение соединения АУТ-14 спонтанно-гипертензивным крысам 1 раз в день в дозе 10 мг/кг в течение 5 дней вызывало постепенно развивающееся, но стабильное и длительное снижение АД, которое после отмены постепенно возвращалось к исходному уровню постепенно, достигая исходного уровня только через 2-3 дня после прекращения приема соединения АУТ-14.

5. Соединение АУТ-14 не влияло на эффекты, вызванные введением норадреналина, изадрина, дофамина, ангиотензинамида, ацетилхолина. Гипотензивный эффект соединения АУТ-14 предупреждался предварительным введением резерпина. Предварительное введение соединения АУТ-14 ослабляло констрикторные реакции сосудов, вызванные раздражением поясничной симпатической цепочки и прессорные реакции АД, вызванные введением тирамина. Такие данные свидетельствуют о пресинаптическом, симпатолитическом действии соединения АУТ-14.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Психотропные свойства замещенных 2-нитро-2-(3-фенил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)этанов / Сборник научных трудов X Всероссийской научной конференции "Карбонильные соединения в синтезе гетероциклов" / под ред. проф. Кривенько А.П. Саратов. 2004. С. 281-284 (соавт. А.Г. Тырков, И.Н. Тюренков).

2. Изучение психотропных свойств 1,2,4-оксадиазолов. // 63-я открытая научно-практическая конференция молодых ученых, посвященная 70-летию ВолГМУ "Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины". 26-29 апреля 2005 года. Волгоград. - 2005.

3. Изучение психотропных свойств производных N-арилкарбаматов. // Х региональная научно-практическая конференция молодых исследователей Волгоградской области, - Волгоград. - 2005. - С. 45.

4. Гипер- и гипотензивная активность О-алкиламинопроизводных N-арилкарбаматов // Хим.-фарм. журн. - 2005. - № 7. - С. 17-19 (соавт. А.В. Великородов, И.Н. Тюренков, В.Н. Перфилова).

5. Изучение кардиоваскулярных свойств производных N-арилкарбаматов. / Материалы III Международная медико-фармацевтическая конференция студентов и молодых ученых (Юбилейный 80-й научный форум студентов и молодых учёных БГМУ) // "Хист". - вып. 8. - 2006 г. - С. 159.

6. Противоишемическая активность N-арилкарбаматов. // // Тез. докл. ХШ Российского национального конгресса "Человек и лекарство". - М.- 2006.- С. 241.

7. Синтез и сердечно-сосудистая активность некоторых азагетероциклов с карбаматной функцией // Хим.-фарм. журн. - 2006. - № 4, с. 9-11, (соавт. А.В. Великородов, И.Н. Тюренков, В.Н. Перфилова).

Размещено на Allbest.ru