Естественная резистентность кроликов при действии высокой температуры

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

Искандарова Элеонора Дамировна

ЕСТЕСТВЕННАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ КРОЛИКОВ ПРИ ДЕЙСТВИИ ВЫСОКОЙ ТЕМПЕРАТУРЫ

03.00.13 - Физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Казань 2009



Работа выполнена на кафедре физиологии и этологии животных ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Гарипов Талгат Валирахманович.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Гильмутдинов Рустам Якубович кандидат биологических наук, доцент Семенова Людмила Михайловна.

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия»

Защита состоится 2 марта 2009 года в 14.00 ч. на заседании диссертационного совета Д 220.034.02 при ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана» по адресу: 420074, г. Казань, ул. Сибирский тракт, 35, КГАВМ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана».

Автореферат разослан 30 января 2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, доцент Мухаметгалиев Н.Н.



1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Стресс не без основания привлекает пристальное внимание исследователей различных отраслей биологии, медицины и ветеринарии. Это объясняется главным образом тем, что стресс, с одной стороны, предопределяет поддержание гомеостаза организма, с другой - обуславливает развитие адаптации и, наконец, является причиной возникновения заболеваний.

Физиологами внесен огромный вклад в изучение проблемы влияния стрессовых воздействий на организм (И.П. Павлов, П.К. Анохин, П.Д. Горизонтов (1973, 1976, 1981, 1983), Г.Н. Кассиль (1975, 1976), Ф.З. Меерсон (1981), Ф.И. Фурдуй (1986), М.Г. Пшенникова (1987, 1991), К.В. Судаков (1997) и другие).

Установлено, что изменение активности иммунной системы при стрессе, как и других органов и систем организма, зависит от трёх основных факторов: силы, продолжительности действия стрессора и резистентности организма к стрессорному воздействию. В то же время мало данных о продолжительности периода и степени восстановлении показателей неспецифической резистентности организма животных после прекращения воздействия острого и многократно повторяющегося стресс-фактора.

В исследовании проблемы влияния факторов внешней среды на организм особую значимость приобретает изучение острого стрессового воздействия, так как для человека и животных самую большую опасность на протяжении эволюции представляли внезапность и интенсивность воздействия факторов окружающей среды.

Внимание исследователей привлекает также проявление адаптивных возможностей организма в зависимости от возраста животного.

Таким образом, актуально изучение влияния острого и многократно повторяющегося стресс-фактора на естественную резистентность в зависимости от возраста животного и восстановления морфологических и биохимических параметров организма в постстрессовый период.

Исходя из этого, целью нашей работы явилось изучение адаптационных реакций организма кроликов разных возрастов на одно- и многократное действие теплового стресс-фактора.

Исходя из цели исследования, перед нами стояли следующие задачи:

1. Изучить реакцию функциональной системы, обеспечивающей постоянство температуры тела кроликов на одно- и многократное воздействие теплового стресс-фактора.

2. Изучить реакции функциональных систем кроликов, обеспечивающих постоянство клеточного и биохимического состава крови на одно- и многократное действие теплового стресс-фактора.

3. Изучить состояние естественной резистентности кроликов на одно- и многократное воздействие теплового стресс-фактора

4. Изучить морфологический и биохимический состав крови, состояние неспецифической резистентности в постстрессовый период.

Научная новизна. Научная новизна исследований состоит в том, что впервые дана сравнительная характеристика поведению функциональной системы, обеспечивающей постоянство температуры тела при однократном и ежедневном в течение двадцати дней действии теплового стресс-фактора на организм кроликов разного возраста. Изучен морфо-биохимический состав крови кроликов, подвергавшихся ежедневному в течение двадцати дней воздействию температурного стресс-фактора.

Установлены стадии повышения и угнетения естественного иммунитета, сроки восстановления функциональных систем после прекращения действия критической температуры.

Теоретическая и практическая значимость. Результаты исследований вносят новое и дополняют известное о физиологии систем адаптации кроликов. Впервые в сравнительном плане изучено поведение функциональных систем кроликов, обеспечивающих постоянство температуры тела, морфо-биохимического состава крови и естественной резистентности. Полученные результаты являются новыми и отвечают современным требованиям промышленного выращивания кроликов. Они могут быть использованы в кролиководстве, составлении справочников, монографий, учебников и научно-методических разработок и в учебном процессе в профильных учебных заведениях при чтении лекции по физиологии, центрах подготовке и переподготовке специалистов, занимающихся разведением кроликов.

Основные положения, выносимые на защиту. 1. Воздействие температуры воздуха +42 єС как однократно, так и многократно является стресс-фактором, вызывающим изменения состава крови и естественной резистентности кроликов, выраженность которых зависит от кратности действия раздражителя. 2. Приспособительные реакции организма кроликов на действие теплового стресс-фактора имеют особенности в зависимости от возраста животного.

Апробация материалов диссертации. Материалы диссертации доложены на межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых (Воронеж, 30-31 октября, 2007 г.), на Всероссийской научно-практической конференции (Казань, 25 мая 2007 г.).

Публикации. По материалам исследований опубликовано 4 научные работы, из них одно - в издании, входящим в перечень рецензируемых научных изданий, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 164 страницах компьютерного текста, включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, приложение. Список использованной литературы включает 197 источников, из них 158 источников на русском языке и 39 иностранных авторов. Работа содержит 20 таблиц, 15 рисунков.



2. Материалы и методы исследований

Исследования выполнены в 2004-2008 гг. на кафедре физиологии и этологии животных ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана». В опытах использованы по 12 кроликов самцов 3-х, 6-ти и 36-ти месячного возраста. Условия содержания и кормления кроликов соответствовали установленным нормам.

Животным тепловой стресс продолжительностью 1 час создавали в камере, имеющей температуру воздуха +42 єС и относительную влажность 76% однократно и ежедневно в течении 20 дней. У животных всех групп определяли температуру тела до и сразу после воздействия теплового стрессора. Кровь для исследований брали из краевой ушной вены до и через 5 минут, 8 и 24 часа после однократного теплового воздействия. Затем после трех, семи-, четырнадцати и двадцатикратного теплового воздействия. В постстрессовый период исследования крови проводили на 7, 14, 20, 30, 37, 44 дни в зависимости от восстановления функциональных систем.

О состоянии функциональной системы, обеспечивающей постоянство клеточного состава крови судили по количеству эритроцитов и лейкоцитов, определенных по общепринятым методикам (А.А. Кудрявцев, 1974). Процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов определяли в мазках крови, окрашенных по Романовскому. Функциональное состояние естественной резистентности организма кроликов на действие теплового стресс-фактора определяли по числу нейтрофилов с числом сегментов в ядре 4 и более согласно методике Антонишкис, (2006). Фагоцитарную активность лейкоцитов определяли методом Е.А. Кост и М.И. Стенко, (1974).

Бактерицидную активность сыворотки крови к бактериям эталонных штаммов Е. Coli и Staphyloсоccus aureus определяли по Л. З. Скала. (1997). Содержание общего белка в сыворотке крови устанавливали биуретовой реакцией (В.Я. Антонов, П.Н. Блинов, 1971). Уровень белковых фракций определяли унифицированным методом электрофоретического разделения на плёнках из ацетата целлюлозы (В.В. Меньшиков, 1987). Глюкозу в сыворотке крови определяли глюкозооксидазным методом.

Цифровой материал результатов исследования обрабатывали методом вариационной статистики с использованием компьютерной программы Microsoft Excel.



3. Результаты исследований

3.1. Общее состояние и динамика температуры тела у кроликов на одно- и многократное действие теплового стресс-фактора

Установлено, что общая реакция кроликов на однократное тепловое воздействие проявляется экзофтальмом, боязливостью, усиленной саливацией (3-х месячные кролики). Животные всех групп искали прохладное место, ложились, растянувшись на животе, имели учащенное дыхание.

Через 25-30 минут после прекращения действия стрессора взрослые кролики начинали поедать корм. Кролики 3- и 6-месячного возраста охотно потребляли воду (30?60 мл за 1 прием) и неохотно корм. При многократном воздействии пищедобывающие и оборонительные реакции ослабевали, животные становились малоподвижными, прятались в дальний угол клетки.

На однократное воздействие критической температуры организм 3-месячных кроликов отвечает повышением температуры тела до 39,5±0,2 єС (р<0,01), 6-месячных ? до 39,1±0,1 єС, 36-месячных ? до 39,3±0,15 єС (р<0,01). Функциональная система, поддерживающая постоянство температуры тела восстанавливалась в течение 8 часов после однократного воздействия.

Ответная реакция кроликов на многократное воздействие температуры +42 єС в зависимости от возраста имеет отличия. Так, 36-ти месячные кролики отвечают нарастанием подъема температуры тела до 4-кратного воздействия, затем до 17-го воздействия ответная реакция стабилизируется и вновь наблюдается повышение температуры тела с последующим снижением. Средняя температура тела за весь период тепловых нагрузок повышалась до 39,3 єС, в то время как у контрольных животных она была на уровне 38,5 єС.

Ответная реакция 3-х месячных кроликов характеризовалась трех фазным подъемом температуры тела: первая фаза ? на 3-х ? 5-ти кратное воздействие (+39,5 39,0 єС), вторая ? на 6-ти кратное (максимальный подъем температуры тела до 39,8±0,4 єС), третья фаза - на 12-ти кратное воздействие (+39,4±0,1 єС).

Колебания температуры тела у 6-месячных кроликов в ответ на тепловую нагрузку носили волнообразный характер. Трехкратное воздействие раздражителя вызывало подъем температуры тела до 39,4±0,2 єС, затем наступал спад до 39,0 єС, новый подъем до 39,4 єС (7-е и 8-е воздействия), вновь спад до 38,9±0,36 єС и повторное повышение после 10-го - 12-ти кратного воздействий (39,8±0,1 єС) с последующим снижением и стабилизацией на уровне 38,9 - 39,0 єС.

3.2. Ответная реакция функциональной системы кроликов, обеспечивающей постоянство клеточного состава крови на одно- и многократное действие высокой температуры (+42 єС)

У кроликов всех трёх опытных групп количество эритроцитов и содержание гемоглобина снижалось как после однократного, так и многократного теплового воздействия.

После однократного действия критической температуры количество эритроцитов у 3-х месячных кроликов было ниже контроля на 20,7 %, у 6-ти и 36-ти месячных на 25,5 %, гемоглобина соответственно ниже на 10,4 %, 2% и 4,5 %. СОЭ повышалось у 3-х месячных кроликов на 13,1 %, а у других не имело существенных отклонений от нормы.

Содержание эритроцитов и гемоглобина восстанавливалось после однократной тепловой нагрузки у 3-х месячных кроликов в течение 48 часов, у 6-ти и 36-ти месячных в течение 24 часов, что, видимо, связано с более совершенными механизмами системы регуляции.

На многократное действие критической температуры содержание эритроцитов и гемоглобина за весь период воздействий снижалось у 3-х месячных кроликов, соответственно на 19,2 % и 16,7 %. У 6-ти месячных кроликов снижение уровня эритроцитов и гемоглобина происходило, соответственно на 19,2 % и 10,8 %, 36-ти месячных - на 18,3 % и 7,3 % (таблица 1).

Восстановление содержания эритроцитов и гемоглобина после 20-кратной тепловой нагрузки наступало в группе трёх- и шестимесячных кроликов на 14-е сутки, у 36-ти месячных ? на 20-е сутки.

На однократное тепловое воздействие организм трех и шести месячных кроликов реагировал повышением содержания лейкоцитов на 32,1 % (р<0,05) и на 34,4 % (р<0,01). Взрослые кролики на однократную тепловую нагрузку отвечали снижением количества лейкоцитов в крови на 20,8 % с последующим восстановлением до нормы в течение 24 часов после действия стрессора. У трехмесячных кроликов нормализация количества лейкоцитов до исходного уровня наступало в течение 8 часов после воздействия, а у 6-ти месячных, как и у взрослых через 24 часа.

На 3-х кратное воздействие 3-х месячные кролики отвечали достоверным увеличением количества лейкоцитов в крови до 6,7±0,2 Ч109/л, что выше контроля на 21,8 %, а после последующих тепловых воздействий уровень лейкоцитов в крови снизился в среднем на 24,9 % от уровня контрольной группы.

В организме 6-ти месячных кроликов содержание лейкоцитов в крови было повышенным во все сроки исследования: максимальное - после 3-го воздействия (+65,5 % от контроля), с 14-го по 20-е - на 18,5 % - 22,2 %. Организм взрослых кроликов на многократные тепловые нагрузки реагировал повышением содержания лейкоцитов в крови только после 3-х кратного и 14-ти кратного воздействий, соответственно на 16,6 % и 9,2 % от уровня в контроле.

Восстановление количества лейкоцитов в крови трех месячных кроликов наступало на третьи сутки, у шести ? на 14-е, у 36-ти ? на 20-е сутки после прекращения действия стресс-фактора.

Таблица 1 ? Содержание эритроцитов, уровень гемоглобина, скорость оседания эритроцитов у кроликов при многократном действии критической температуры +42 єС

показатели	Исходное содержание	Кратность воздействий	Возраст кроликов, месяцы
		3	7	14	20
Эритроциты (1012/л)	5,3±0,1 (5,3±0,2)	4,3±0,5 (5,5±0,2)	4,3±0,2** (5,3±0,2)	4,1±0,1** (5,3±0,3)	4,2±0,1** (5,2±0,3)	3
Гемоглобин (г %)	11,3±0,4 (11,5±0,6)	10,2±1,1 (12,0±0,0)	10,2±0,4*** (11,7±0,4)	8,7±0,4* (11,7±0,4)	9,8±0,2** (11,3±0,4)
СОЭ (мм/ч)	1,6±0,0	2,0±0,0	2,3±0,4 (2,0±0,0)	1,8±0,2	1,8±0,2 (1,5±0,0)
Эритроциты (1012/л)	4,5±0,5 (4,7±0,1)	3,8±0,1* (4,9±0,1)	3,9±0,1* (4,8±0,2)	3,9±0,2 (4,7±0,5)	3,9±0,1 (4,8±0,2)	6
Гемоглобин (г %)	10,0±0,0	9,5±0,9 (10,5±0,4)	9,5±0,9 (11,3±0,4)	8,5±0,3** (10,0±0,0)	10,0±0,7 (10,3±0,4)
СОЭ (мм/ч)	1,7±0,2 (1,8±0,2)	2,3±0,4 (1,8±0,2)	2,3±1,0 (1,5±0,3)	1,7±0,4 (1,5±0,0)	1,7±0,2 (1,8±0,2)
Эритроциты (1012/л)	5,4±0,2 (5,5±0,2)	4,1±0,1* (5,4±0,2)	4,1±0,2** (5,5±0,2)	4,9±0,5 (5,5±0,2)	4,9±0,2** (5,6±0,2)	36
Гемоглобин (г %)	11,0±0,7	10,7±0,4 (11,0±0,0)	9,8±0,2* (11,3±0,4)	10,5±0,4 (11,5±0,0)	10,7±0,4 (11,2±0,5)
СОЭ (мм/ч)	1,8±0,2 (2,0±0,0)	1,7±0,2 (2,0±0,0)	2,3±0,4 (1,7±0,2)±	2,2±0,2 (1,7±0,2)	2,2±0,2 (1,8±0,2)

Примечание: в скобках указаны показатели в контрольной группе, *?Р<0,01, **?Р<0,05, ***?Р>0,05

В лейкоцитарной формуле, как после однократного, так и многократного воздействия критической температуры достоверно повышалось количество юных и палочкоядерных нейтрофилов, снижался уровень лимфоцитов во всех возрастных группах. Лимфопения у 36-месячных кроликов характеризовалась повышением процента малых лимфоцитов на фоне снижения больших и средних лимфоцитов. На многократное действие теплового стресс-фактора в крови кроликов всех опытных групп снижалось количество эозинофилов в среднем за весь период опыта: у 3-х месячных ? на 46 %, 6-ти - на 42,8 %, 36-ти ? на 64,7 %. В крови молодых кроликов снижался уровень моноцитов, в среднем: у 3-х месячных ? на 19,9 %, у 6-ти месячных - на 58,4 %. Процентное соотношение лейкоцитов в крови восстанавливалось после однократного действия теплового стресс-фактора в течение 24 часов. Система крови 36-месячных кроликов для сохранения гомеостаза в ответ на внешнее воздействие высокой температуры реагировала повышением уровня базофилов в крови после 3-х кратного воздействия до 2,1±0,3 % (р<0,05), после 20-ти кратного до 2,3±0,2 % (р<0,01). В контроле содержание базофилов составляло 1,1 %- 1,3 %. У трех месячных кроликов нормализация процентного соотношения лейкоцитов наступало на 20-е сутки, у 6-месячных на 37-е сутки, у 36-месячных на 30-е сутки после последнего воздействия.

Содержание нейтрофилов с числом сегментов в ядре 4 и более в крови интактных животных составляло: 3-х месячных ? 2,5 % - 3,5 %, 6-ти - 4,3 % - 5,2 %, 36-ти - 4,3 % - 5,1 %. У 3-х и 36-ти месячных кроликов достоверное повышение процента высоко сегментированных нейтрофилов происходило после 7-кратного теплового воздействия, а у 6-ти месячных после 3-х кратного (рисунок 1). Во всех трех группах содержание высоко сегментированных нейтрофилов происходило на фоне повышения общего уровня сегментоядерных нейтрофилов. Возможно, в эти сроки процесс сегментации ядер нейтрофилов служит проявлением компенсаторно-восстановительных процессов в организме при неблагоприятных воздействиях. При дальнейшем тепловом воздействии достоверно снижалось содержание высоко сегментированных нейтрофилов и сохранялось повышенным содержание юных и палочкоядерных, что свидетельствует о повышенной регенерации миелоидного ростка. Восстановление высоко сегментированных нейтрофилов до значений контрольной группы наступало на 20-е сутки у 3-месячных кроликов, на 30-е ? у 6-месячных и на 14-е сутки у взрослых кроликов.

Рисунок 1 - Содержание в крови нейтрофилов с числом сегментов в ядре 4 и более (%) при многократном действии критической температуры (+42є С)

3.3. Биохимический состав крови на одно- и многократное действие высокой температуры (+42 єС)

На однократное действие критической температуры (+42 єС) концентрация глюкозы в крови кроликов повышалась: у 3-х месячных ? на 44,4 %, 6-ти ? на 33,3 %, а у 36-ти месячных ? на 21,9 % от уровня в контроле. Во всех трех группах повышенное содержание глюкозы после однократной тепловой нагрузки сохранялось в течение 8 часов после действия стресс-фактора, затем снижалось до нормы в течение 24 часов.

На 3-х кратное действие теплового стресс-фактора у 3-месячных кроликов содержание глюкозы в крови повышалось на 44,3 %, после 7-, 14- и 20-кратного воздействия, соответственно, на 38 %, 33 % и 31,5 %, соответственно. У 6-ти и 36-ти месячных кроликов опытной группы содержание глюкозы в крови в эти сроки было несколько ниже, но превышало уровень контроля на 13 % ? 29 %. Восстановление уровня глюкозы в крови всех групп животных наступало в течение 3-х суток постстрессового периода.

Однократное действие теплового стресс-фактора вызывало снижение уровня общего белка в крови только у трех месячных кроликов (-14,5 %). Пониженная концентрация общего белка в крови (на 9,3 % ниже, чем в контроле) сохранялась в течение 8 часов и восстанавливалась до нормы в течение 24 часов после действия стресс-фактора. Это коррелируется с повышенным уровнем глюкозы в крови и свидетельствует о сохранении адаптационного эффекта в течение 8 часов после действия стрессора. Уровень белковых фракций во всех трех опытных группах не менялся.

На многократное действие теплового стресс-фактора организм 3-х и 36-ти месячных кроликов реагировал снижением общего белка в крови. У 3-х месячных кроликов уровень общего белка после 3-го и 7-го воздействий снижался, соответственно на 6 % и 9,4 % после 14-го и 20-го - на 4,4 % и 5,3 %. У 36-ти месячных кроликов содержание общего белка снижалось после 3-го и 7-го воздействий на 8,1 % и 9,8 %, после 14-го и 20-го воздействий - на 16,0 % и 15,1 %. Шести месячные кролики на трех кратное воздействие стрессора отвечали снижением общего белка в крови на 4,5 %. Затем в противоположность 3-х и 36-ти месячным кроликам у них с седьмого по двадцатое воздействия содержание общего белка в крови повышалось на 2,8 % и 4,3 % (рисунок 2). Восстановление содержания общего белка в крови 3-х и 6-ти месячных кроликов наступало в течение 30 дней, 36-ти месячных - через 37 дней после последнего воздействия.

Многократное воздействие высокой температурой на организм кроликов вызывало перераспределение белковых фракций в крови. В группе 3-месячных кроликов содержание альбуминовой фракции снижалось на 5 % (Р<0,01) до 3-кратного воздействия, после 14-кратного воздействия содержание альбуминов повышалось на 3 %, а после 20-го воздействия снижалось до уровня в контроле - (69,1±1,8 %).

Рисунок 2 ? Содержание общего белка в крови (г/л) у кроликов при многократном действии критической температуры (+42є С)

У 6-месячных кроликов содержание альбуминовой фракции в крови до 14-кратного воздействия в среднем снижалось на 4,2 %, а к 20-кратному воздействию концентрация альбуминов повышалась до уровня в контрольной группе (71,7±0,9 %).

В организме 36-ти месячных кроликов многократное действие критической температуры вызывало увеличение концентрации фракции альбуминов в крови в среднем на 10,6 %. В постстрессовый период содержание альбуминовой фракции в крови опытных кроликов достигало значений контрольной группы на 30-е сутки.

У 3-х месячных кроликов повышается фракция б1-глобулинов на 35,7 % и снижаются б2-глобулины (?46,5 %). В постстрессовый период в крови животных опытной группы фракция б1-глобулинов быстро стабилизировалась уже на 3-й день. Фракция б2-глобулинов достигала значений контрольной группы на 14-й день после последнего теплового воздействия.

У 6-месячных кроликов снижение б-глобулинов происходило только после 20-го воздействия: б1-глобулинов на 43,5 %, б2-глобулинов на 13,6 % от контроля. Их содержание восстанавливалось на третьи сутки после прекращения тепловых воздействий.

У 36-ти месячных кроликов в ответ на многократное тепловое воздействие отмечались достоверные колебания в содержании б1- и б2-глобулинов. На 3- и 7-кратное воздействия повышалось содержание б2-глобулинов, соответственно на 42,8 % и 78,6 % (р<0,01), снижался уровень б1-глобулинов - на 19 % и 9,7 %. На 14- и 20-кратное воздействия повышалась фракция б1-глобулинов, соответственно на 30,2 % и 19,5 % и снижалась фракция б2-глобулинов - на 39 % и 46,5 %. У 36-ти месячных кроликов все фракции альфа-глобулинов достигали уровня контрольной группы в течение 20 дней.

У 36-месячных кроликов на многократные воздействия критической температуры содержание в2-глобулинов в крови было стабильным; концентрация в1-глобулинов максимально повышалась после 7-кратного воздействия на 55,8 %. В постстрессовый период содержание в-глобулинов в крови стабилизировалось на 44-е сутки.

Многократное воздействие высокой температуры на организм кроликов вызывали значительные сдвиги в содержании гамма-глобулиновой фракции у животных всех трех опытных групп (рисунок 3).

У трех и шести месячных кроликов уровень гамма-глобулинов повышался за весь период эксперимента в среднем на 14,9 % и 15,3 %. У шести месячных кроликов после 20-го воздействия концентрация гамма-глобулинов снижалась до уровня в контроле. У трех месячных кроликов контрольной и опытной группы концентрация г-глобулинов в крови к концу эксперимента повышалась, по сравнению с начальными исследованиями. Это возможно связано с естественным ростом и совершенствованием функциональных систем в постнатальном периоде онтогенеза.



Рисунок 3 ? Содержание фракции гамма-глобулинов (%) в крови кроликов при многократном действии критической температуры (+42єС)

У 36-месячных кроликов на многократные тепловые нагрузки происходило значительное понижение концентрации г-глобулинов в крови в среднем за эксперимент на 37,9%, с максимальным снижением после 20-го воздействия на 47,4% от уровня в контрольной группе. Содержание фракции г-глобулинов у 36-месячных кроликов достигает уровня контрольной группы к 44-му дню после последнего воздействия.

3.4. Состояние естественной резистентности кроликов при одно- и многократном воздействии высокой температуры (+42 єС)

Однократное воздействие критической температуры (+42єС) вызывало снижение поглотительной способности нейтрофилов у трех и шести месячных кроликов, соответственно на 4,3 % и 22,6 %, восстановление ее происходило в течение 24 часов. Многократное воздействие критической температуры приводило к снижению числа активных нейтрофилов и угнетению их поглотительной способности во всех опытных группах. В постстрессовый период у 3-х и 36-ти месячных кроликов восстановление фагоцитарной активности нейтрофилов наступало в течение 20-30 суток, а в группе 6-ти месячных ? 37 суток.

Результаты наших исследований показывают, что в норме бактерицидные свойства сывороток крови в отношении золотистого стафилококка и кишечной палочки неодинаковы у кроликов разных возрастных групп. Так, в сыворотке крови молодых кроликов рост золотистого стафилококка значительно ниже, в то же время сыворотка крови взрослых кроликов активнее ингибирует рост кишечной палочки.

После однократного действия критической температуры бактерицидная активность сыворотки крови 3-х месячных кроликов по отношению к золотистому стафилококку понизилась на 78,4 % (Р<0,01), а по отношению к кишечной палочке возросла на 22,1 % (Р<0,01) и сохранялась такой в течение 8 часов, а через 24 часа возвращались к исходному уровню. Бактерицидная активность сыворотки крови 6-ти и 36-ти месячных кроликов существенно не менялась. Бактерицидная активность сыворотки крови 3-х месячных кроликов в отношении кишечной палочки повысилась после 3-го, 7-го воздействий в среднем на 42,3 %, а к золотистому стафилококку на 35,7 % (Р<0,05). После последующих воздействий бактерицидная активность сыворотки крови к золотистому стафилококку резко снизилась (таблица 2). Восстановление бактерицидной активности сыворотки к кишечной палочки происходило на третьи сутки, а к золотистому стафилококку на 14-е сутки после последнего воздействия.

Антимикробные свойства сыворотки крови 6-ти месячных кроликов находились на повышенном уровне как в ходе эксперимента (таблица 2), так после него в течение 20 суток.

Бактерицидная активность сыворотки крови 36-ти месячных кроликов по отношению к кишечной палочке находилась на уровне контроля, а к золотистому стафилококку возросла в среднем на 36,2 % (после 3-го ? 14-го воздействия).



Таблица 2 ? Рост тест-культуры золотистого стафилококка и кишечной палочки в сыворотке крови кроликов при многократном действии на организм критической температуры (+42єС)

Тест-культуры	Кратность воздействий
	3	7	14	20
	3-х месячные
St. aureus	81,7±5,1 (69,3±5,4)	54,0±4,6** (84,0±7,4)	107,0±2,5** (73,7±5,1)	121,3±7,3** (73,3±7,4)
E. coli	64,3±4,3** (116,3±6,4)	67,7±6,2** (115,0±3,5)	118,7±6,6 (117,3±5,9)	136,0±3,7** (124,0±3,7)
6-ти месячные
St. aureus	62,3±4,7 (82,7±4,9)	84,0±7,1 (81,7±8,2)	47,3±7,5** (78,0±6,0)	61,7±3,9** (78,7±3,5)
E. coli	76,0±6,2** (113,0±6,2)	96,7±9,5 (95,0±4,9)	48,0±8,6* (115,3±3,6)	40,7±4,1* (120,3±8,4)
36-ти месячные
St. aureus	75,3±6,7** (123,0±10,7)	79,3±6,4** (125,3±8,5)	80,7±6,4** (120,7±4,5)	119,3±7,7 (122,0±5,3)
E. coli	65,0±3,5 (60,3±6,0)	64,3±6,9 (60,7±6,4)	72,7±6,6 (61,7±7,8)	66,7±2,5 (72,7±5,7)

Примечание: *Р<0,01,**Р<0,05,***Р>0,05; в скобках указаны значения в контрольной группе.

кролик резистентность стафилокок стресс

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что адаптивные механизмы кроликов на воздействие теплового стресс-фактора реагируют в целом однотипно. Но выраженность их больше зависит от возраста животного и выражается снижением уровня естественной резистентности, изменением морфо - биохимического состава крови. Активно эти изменения проявляются у 6-ти месячных кроликов, менее у 3-х и 36-ти месячных.



Выводы

1. Температура воздуха +42 єС как при однократном, так и многократном воздействии является серьезным стресс-фактором, вызывающим изменения питьевого и пищевого поведения, соотношения компонентов крови и естественной резистентности кроликов, выраженность которых зависит от кратности действия раздражителя.

2. Питьевое и пищевое поведение кроликов, подвергавшихся воздействию температуры воздуха +42 єС в течение 1 часа выражается частым потреблением воды от 30 до 60 мл за 1 раз и неохотным приемом корма, продолжающимся в течение 8?10 часов. При многократном воздействии пищедобывающие, оборонительные реакции ослабевают, животные становятся малоподвижными, больше времени проводят в дальнем углу клетки.

3. На однократное пребывание в камере при температуре +42 єС в течение 1 часа функциональная система, обеспечивающая постоянство температуры тела отвечает у 3-х месячных кроликов повышением температуры тела на 1,4 єС, у 6-ти ? на 0,7 єС и у 36-месячных ? на 0,8 єС, которые до исходных норм возвращается в течение 8 часов, после прекращения действия стрессора.

4. Механизмы регуляции температуры тела кроликов на многократные воздействия высокой температуры отвечают периодическими максимальными и минимальными подъемами температуры тела. Приспособительные реакции к высокой температуре окружающей среды наиболее выражены у 6-ти месячных кроликов, чем у 3-х и 36-ти месячных. Функциональная система, поддерживающая оптимальную температуру тела полностью восстанавливается в течение 24 часов после 20-ти кратного воздействия стрессора.

5. На однократное воздействие в течение 1 часа температуры воздуха +42 єС приспособительная реакция функциональной системы кроликов, поддерживающей постоянство морфологического состава крови, проявляется:

5.1. Снижением общего количества эритроцитов на 20,7 - 25,5 %, гемоглобина на 10,4 - 4,5 % в зависимости от возраста. Увеличением количества лейкоцитов у 3-х и 6-ти месячных (+32,1 - 34,4 %), снижением их числа (-20,8 %) у 36-ти месячных кроликов. Морфологический состав крови кроликов восстанавливается в течение 24 - 48 часов.

5.2. На многократное воздействие - снижением числа эритроцитов и уровня гемоглобина у всех групп животных. Восстановительный период продолжается у 3-х и 6-ти месячных кроликов 14 суток, у 36-ти месячных 20 суток.

Повышением по сравнению с контролем содержания лейкоцитов в крови в ответ на 3-х кратное воздействие на 21,8 %, 68,5 % и 16,6 % соответственно у 3-х, 6-ти и 36-ти месячных кроликов.

У кроликов развивается нейтрофилез, лимфопения и эозинопения, (признаки развития стресс-реакции). У 3-х и 6-ти месячных кроликов снижается уровень моноцитов соответственно на 34,7 % и 58,4 %, у 36-ти месячных лимфопения характеризуется относительным повышением количества малых лимфоцитов, на фоне снижения средних и больших лимфоцитов. Система крови 36-ти месячных кроликов для сохранения гомеостаза реагирует повышением уровня базофилов в крови.

Нормализация лейкоцитарной формулы наступает у 3-х месячных кроликов на 20-е сутки, у 6-ти месячных ? на 37-е, у 36-ти ? на 30-е сутки после последнего воздействия.

6. Функциональная система, обеспечивающая постоянство биохимического состава крови отвечает:

6.1. На однократное действие критической температуры повышением концентрации глюкозы в крови в среднем на 33,2 % и сохраняющимся в течение 8 часов. Уровень общего белка в крови снижается на 14,4 % только у 3-х месячных кроликов. При ежедневном воздействии концентрация глюкозы в крови становится выше уровня контроля на 36,7 % у 3-х месячных и на 20 % у 6-ти и 36-ти месячных.

6.2. Многократное действие теплового стресс-фактора сопровождается снижением в среднем уровня общего белка в сыворотке крови кроликов на 4,5 % - 12,3 %; у 3-х и 6-ти месячных снижением соотношения фракции альбуминов соответственно на 5,1 % - 4,2 % и повышением уровня гамма-глобулинов на 14,9 % и 15,3 %. Организм 36-ти месячных кроликов реагирует повышением уровня альбуминов (+10,6 %) и снижением гамма-глобулинов (-37,9 %) по сравнению с контролем.

Концентрация общего белка и его фракций полностью восстанавливается у молодых кроликов через 20, а 36-ти месячных в течение 44 суток после 20-ти кратного воздействия.

7. Однократное пребывание кроликов в атмосфере +42 єС в течение 1 часа сопровождается негативным действием на естественную резистентность. У трех и шести месячных кроликов снижается поглотительная способность нейтрофилов, соответственно на 4,3 % и 22,6 %. У 3-х месячных кроликов снижается бактерицидная активность сыворотки крови по отношению к золотистому стафилококку на 78,4 % и возрастает активность в отношении кишечной палочке на 22,1 %.

Восстановление факторов естественной резистентности до исходного уровня осуществляется в течение 24 часов.

Многократное тепловое воздействие приводит к снижению числа активных нейтрофилов и их поглотительной способности, соответственно: у 3-х месячных кроликов на 8,6 % и 35,8 %, у 6-ти - на 6 % и 30,6 %, у 36-ти - на 12,5 % и 48 %. Восстановление фагоцитарной активности нейтрофилов наступает у 3-х и 36-ти месячных кроликов на 20 - 30-е сутки, у 6-ти месячных на 37-е сутки постстрессового периода.

У 3-х и 36-ти месячных кроликов бактерицидная активность сыворотки крови после 7-го и 14-ти кратного воздействия теплового стресс-фактора повышается с последующим снижением.

У 6-ти месячных на многократное действие критической температуры бактерицидная активность сыворотки крови повышается и остается повышенной в течение 20-ти суток постстрессового периода.

5. Практические предложения

Результаты исследований могут быть использованы в кролиководстве, составлении справочников, монографий, учебников и научно-методических разработок, в учебном процессе в профильных учебных заведениях при чтении лекции по физиологии, центрах по подготовке и переподготовке специалистов, занимающихся разведением кроликов.



Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Искандарова, Э.Д. Влияние многократного теплового воздействия на динамику нейтрофилов и сегментацию их ядер в периферической крови кроликов / Э.Д. Искандарова // Матер. Всерос. науч.-практич. конф. ? Казань, 2007. ? С. 73-76.

2. Искандарова, Э.Д. Влияние многократного теплового воздействия на фагоцитарную активность нейтрофилов у кроликов / Э.Д. Искандарова // Матер. Всерос. науч.-практич. конф. ? Казань, 2007. ? С. 76-78.

3. Искандарова, Э.Д. Влияние многократного теплового воздействия на динамику нейтрофилов и сегментацию их ядер в крови кроликов разных возрастных групп / Э.Д. Искандарова // Достижения молодых ученых - будущее в развитии АПК: Матер. межрегион. науч.-практич. конф. молодых ученых (Воронеж, 30-31 октября 2007 г.). ? Воронеж, 2007. ? С.221-223.

4. Искандарова, Э.Д. Содержание лейкоцитов в крови кроликов при действии высокой температуры / Э.Д. Искандарова, Т.В. Гарипов // Ученые записки Казан. гос. акад. ветеринар. мед. им. Н.Э. Баумана. ? Казань: КГАВМ. ? 2008. ?Т. 195. ? С. 109-113.

Размещено на Allbest.ru