Морфологическая оценка состояния лимфомикроциркуляторного русла и лимфатических узлов в динамике регидратации организма инфузией эмульсии перфторана

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

14.00.02 - анатомия человека

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Морфологическая оценка состояния лимфомикроциркуляторного русла и лимфатических узлов в динамике регидратации организма инфузией эмульсии перфторана

Ханахмедова К.Ш.

Москва - 2007

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Дагестанская государственная медицинская академия ФАЗ и СР РФ»

Научный руководитель:

кандидат медицинских наук, профессор М.А.Магомедов

Официальные оппоненты:

Член-корр.РАМН, профессор, доктор медицинских наук В.В.Банин,

Член-корр.РАМН, доктор медицинских наук, профессор Д.В.Баженов

Ведущая организация:

Московский государственный медико-стоматологический университет

Защита состоится «8» октября 2007г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета

Д. 208.072.04 при ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1

Автореферат разослан « 28 » августа 2007г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор А.И.Щеголев

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Изучение диапазона адаптивных потенций различных систем организма в условиях обезвоживания, являющегося важным компонентом многих заболеваний, и поиск оптимальных средств регидратации организма является актуальной научно - практической задачей. Вода в организме выполняет несколько функций: универсального биологического растворителя, среды, в которой совершаются метаболические реакции, основного пластического материала тела. Ее количество варьирует в разных тканях и органах от 55% до 65% от общей массы тела (Т.Н.Цыбуляк, 1976). Благодаря движению биологических жидкостей (крови, интерстициальной жидкости, ликвора, лимфы) достигается перенос энергии, веществ и обмен информацией между всеми структурными элементами, входящими в состав ткани. Система микроциркуляции как совокупность процессов транспорта биологических жидкостей интегрирует взаимодействия тканевых структур и, следовательно, ее необходимо рассматривать в качестве решающего условия поддержания гомеостаза, в том числе, и баланса жидкости (Я.Л.Караганов, В.В.Банин, 1978, В.В.Банин, 2000). Поддержание интерстициальных градиентов белка и эвакуация избытка фильтрующейся жидкости невозможны без участия лимфатической системы. Как и почки, лимфатическая система может рассматриваться как эффекторный орган, регулирующий постоянство объема плазмы и межклеточной жидкости.

Вышесказанное определяет исключительный интерес к анализу реакции лимфатического отдела микроциркуляторной системы на дисбаланс водно-солевого обмена в организме, являющийся закономерным следствием дегидратации последнего. Тесная функциональная связь лимфатических сосудов и лимфатических узлов диктует необходимость сочетанного исследования особенностей реакции различных компонентов этого комплекса в условиях сублетального обезвоживание организма. Известно, что структурно-функциональная организация лимфатических узлов подвергается существенным преобразованиям при воздействии широкого спектра внутрисредовых и внешнесредовых факторов (М.Р.Сапин, Л.Е. Этинген, 1997; Т.С.Гусейнов, 2002; Э.М.Аль-Хусейн, 2005), что позволяет предполагать возможность сопряженного поражения лимфомикроциркуляторной и иммунной систем в данной патологической ситуации.

Другим важным аспектом проблемы является поиск оптимальных путей коррекции проявлений «дегидратационного синдрома». Установлено, что, если на ранних этапах дегидратации патологические изменения еще обратимы, то более длительное обезвоживание требует обязательной инфузионной терапии (Х.М. Малачилаева 1998, 2000). В этом контексте заслуживают внимания данные о позитивном эффекте отечественного плазмозаменителя - перфторана (Н.Л.Крылов и др., 1985; А.М.Голубев, 1998). Благодаря содержанию проксанола, этот препарат корригирует гемореологические расстройства, способствуя уменьшению вязкости крови, снижению агрегации форменных элементов и др., что обеспечивает нормализацию условий микроциркуляции (В.В.Мороз, 1995; S.Sekidachi, 1997; Д.М.Рагимова, 1998; Х.М.Малачилаева, 2001). Важную роль играет и структура перфторана, субмикронные частицы которого глубоко проникают в «гипоксическую» ткань, а также свойство препарата переносить и освобождать кислород при контакте с поверхностью эндотелия (Н.А.Онищенко с соавт., 1998; А.Ю.Ковеленов, 2001; А.Г.Жукова, Т.Г.Сазонтова, 2006).

Следует отметить, что вопросы комплексной оценки диапазона структурно-функциональной перестройки сосудов лимфомикроциркуляторного русла и лимфатических узлов при клинически значимой дегидратации организма, а также влияния перфторана на ход течения восстановительных процессов при регидратации, до настоящего времени не получили должного освещения. Изучению данных вопросов и посвящено настоящее исследование.

Цель работы. Анализ структурно-функциональных преобразований лимфомикроцируляторного русла и лимфатических узлов в условиях длительной дегидратации организма и характеристика развития восстановительных процессов при инфузии эмульсии перфторана.

Задачи исследования.

1. Изучить особенности функциональной морфологии лимфатического русла брыжейки тонкой кишки и фиброзной капсулы почки крыс при длительной (сублетальной - 10 дней) дегидратации организма.

2. Выявить специфику реакции лимфатического русла указанных образований при регидратации организма инфузией физиологического раствора (контрольная группа) и эмульсии перфторана (опытная группа).

3. Исследовать воздействие длительного (сублетального) обезвоживания на структурную организацию регионарных (брыжеечных и поясничных) лимфатических узлов крыс.

4. Провести сравнительную оценку динамики морфологических изменений в брыжеечных и поясничных лимфатических узлах у животных контрольной и опытной групп в условиях регидратации длительно обезвоженного организма.

Научная новизна. Впервые установлена сочетанная реакция лимфомикроциркуляторного русла исследованных оболочечных структур и регионарных лимфатических узлов на длительное (сублетальное) обезвоживание организма.

Положения, выносимые на защиту.

1. При длительном обезвоживании организма в брыжейке тонкой кишки и фиброзной капсуле почки регистрируются существенные расстройства лимфомикроциркуляции, являющиеся следствием нарушения архитектоники лимфатического русла, изменения ширины просвета и деформации контуров сосудов, а также проницаемости сосудистой стенки.

2. Длительная дегидратация организма сопровождается уменьшением размеров лимфатических узлов, снижением количества лимфоидных узелков, сужением и деформацией синусов лимфатических узлов, изменением цитокомпозиции лимфоидного аппарата. Изменения в висцеральных (брыжеечных) лимфатических узлах более выразительны.

3. Регидратация организма с использованием физиологического раствора и перфторана приводит к прогрессирующему, по мере увеличения продолжительности инфузионной терапии, развитию компенсаторно-восстановительных процессов с постепенной реабилитацией конструкции лимфатического русла и условий лимфоциркуляции, восстановлению анатомо-гистологических и функциональных параметров лимфатических узлов.

4. Инфузия эмульсии перфторана, по сравнению с инфузией физиологического раствора, гарантирует ускоренную и более глубокую коррекцию патологических явлений.

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в научно-исследовательскую деятельность ЦНИЛ ДГМА, используются в лекционном курсе на кафедрах анатомии человека, патологической анатомии и гистологии ДГМА

Апробация материалов диссертации

Материалы диссертации доложены и обсуждены на III-й научно-практической конференции «Новые технологии в медицине» (г. Махачкала, 2006 г.), международной научно-практической конференции «Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы» (г. Махачкала, 2006г.)., совместном заседании кафедр нормальной анатомии, патологической анатомии, патологической физиологии и ЦНИЛ ДГМА.

Основные положения работы изложены в 6 научных публикациях.

Структура и объем диссертации. Текст диссертации изложен на 143 страницах и состоит из введения, 5 глав (обзор литературы, материал и методы исследования, результаты и их обсуждение, заключение), выводов, практических рекомендаций, библиографического списка (119 отечественных и 39 зарубежных авторов). Диссертация иллюстрирована 9 таблицами, 6 диаграммами и 31 рисунком.

Настоящая работа является частью комплексных исследований, проводимых на базе ЦНИЛ Дагестанской государственной медицинской академии.

2. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

Экспериментальное исследование проведено на 85 крысах - самцах массой 180-200 г с использованием морфологических и морфометрических методов исследования, статистического анализа полученных данных.

Модель сублетального обезвоживания организма достигалась алиментарным путем (полным лишением животных доступа к воде в течение 10 дней) по методике описанной М.А.Магомедовым (1979), А.Н.Тихомировым (1996), Э.М. Аль-Хусейн (2005). Согласно поставленным задачам экспериментальные животные распределены по 4 группам: 1) интактные животные -10 крыс; 2) - модель сублетального обезвоживания организма - 15 крыс; 3) регидратация инфузией физиологического раствора в течение 3, 6 и 10дней (контрольная группа) - 30 крыс; 4) регидратация инфузией перфторана в течение тех же сроков (опытная группа) - 30 крыс.

Комбинированная (внутривенная и лимфотропная) регидратация проводилась перфтораном (10% эмульсия) или физиологическим раствором (контроль), которые вводились ежедневно однократно после 10-тидневного обезвоживания в бедренную вену крыс из расчета 30 мг на 100 г массы тела. Одновременно эти растворы вводились лимфотропно в количестве 0,2 - 0,4 мл в межпальцевые промежутки задних конечностей с последующим массажем конечности и пассивными движениями в суставах, т.е. моделированием действия фактора лимфотока.

Животные первых двух групп умерщвлялись одновременно путем передозировки нембуталового наркоза на 10-е сутки эксперимента, контрольной и опытной групп - на 3, 6, и 10 день после введения плазмозаменителей. Выделенные тотальные фрагменты брыжейки тонкой кишки (БТК) и фиброзной капсулы почки (ФКП) фиксировали в 12% нейтральном формалине с последующей импрегнацией серебром. Для выявления лимфатических сосудов в работе использовалась безинъекционная окраска пленчатых препаратов азотнокислым серебром по В.В.Куприянову (1965). Морфометрический анализ лимфатического русла изучаемых объектов проводился на импрегнированных препаратах путем измерения диаметра различных звеньев лимфатического русла с помощью окуляр-микрометра «МОВ - 15» при увеличении объектив 20, окуляр 15. Количество измерений по звеньям в вариационном ряду составило не менее 50 (А.Н.Тихомиров, 1995; Э.М.Аль-Хусейн, 2005). Брыжеечные лимфатические узлы (БЛУ) и поясничные лимфатические узлы (ПЛУ) фиксировались в 12% нейтральном формалине, формол-спирте. Гистологические срезы лимфатических узлов толщиной 5-7 мкм, выполненные на уровне ворот, окрашивали гематоксилин-эозином и по Ван-Гизону (Zuppa, 1980). Морфометрия лимфатических узлов включала определение площади и клеточного состава структурных компонентов методом точечного счета (Г.Г.Автандилов, 1973, 1990; А.А.Гуцал и Б.Ю.Кондратьев, 1988) с использованием бинокулярного микроскопа «МБС-9» с окулярным микрометром и сеткой, МБИ-1 с морфометрической сеткой С.Б.Стефанова (1974), вмонтированной в окуляр (10), при использовании объектива 90 и гематологического счетчика. Произведено измерение продольных и поперечных диаметров лимфатических узлов. С помощью окулярной сетки, методом точечного счета, определяли количество узловых точек сетки, попадающих на каждую структуру лимфатического узла. При расчетах относительной площади капсулы, краевых синусов, лимфоидных узелков с центрами размножения, межузелковой зоны, мякотных тяжей и мозговых синусов за 100% принимали всю площадь на срезе. Клетки подсчитывались на срезах в 5 полях зрения в различных функциональных зонах узла. Для достоверного отражения действительного соотношения различных типов клеток в последующем был произведен перерасчет показателей на 1 кв. мм площади среза (М.Р.Сапин с соавт., 1988).

Все полученные количественные данные подвергались статистической обработке с использованием пакета статистических программ Biostat. Средние значения морфометрических показателей представлены в работе в виде средней арифметической (Х) и ее ошибки (Sх). Достоверность разницы между пятью группами (интактной, после дегидратации, через 3, 6 и 10 дней после регидратации) оценивалась по критерию Крускала - Уоллиса. Для сравнительного анализа эффективности использования различных плазмозаменителей был использован непараметрический критерий Манна - Уитни, позволяющий оценить достоверность различий анализируемых показателей при эксикозе и в процессе регидратации организма.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1.При сублетальном обезвоживании организма животных регистрируется стереотипная перестройка лимфатического русла брыжейки тонкой кишки и фиброзной капсулы почки - выраженная трансформация ангиоархитектоники сопряжена с резкой деформацией контуров и изменением просвета всех типов микрососудов на фоне выключения из лимфооттока значительного числа капилляров. Редукция размеров поперечного сечения сосудистых трубок и появление бессосудистых зон в оболочечных структурах предполагает снижение емкостных параметров русла и нарушение процесса лимфомикроциркуляции. Функционирующие лимфатические капилляры имеют неровные («изъеденные») внешние контуры, локально расширены, в их просвете обнаруживаются эритроциты, что указывает на повышение проницаемости сосудистой стенки. Пикноз ядер эндотелиоцитов может отражать развитие дистрофических процессов. Характерно выраженное уменьшение просвета микрососудов всех звеньев русла, максимальное в лимфатических капиллярах (см. диаграмму 1), а также появление популяции атипичных микрососудов с очень узким просветом, не встречающихся у интактных животных. Необходимо подчеркнуть обнаруженную нами более высокую степень сосудистых изменений в брыжейке тонкой кишки, по сравнению с фиброзной капсулой почки, что, по-видимому, объясняется структурно-функциональными различиями этих образований и, как следствие, вариацией адаптационных ресурсов и резистентности к режиму критического обезвоживания организма.

Лимфатические узлы, как часть лимфатической и иммунной системы, обладающей транспортной потенцией и депонирующей способностью, включены в систему регуляции водного баланса организма (В.В.Куприянов, В.И.Козлов, 1976; Н.Ноуеr, 1934). Анализ структурных изменений в различных группах лимфоузлов в динамике длительного обезвоживания животных выявил, что общим проявлением патологического процесса являются уменьшение их размеров, изменение корково-мозгового индекса, снижение количества лимфоидных узелков и площади, занимаемой ими. Примечательны и признаки перестройки цитоархитектоники узлов с выраженным изменением их клеточного состава на фоне нарушения композиции ретикулярной стромы и строения синусов, что знаменует типичную реакцию органа на воздействие различных экстремальных факторов (М.Р.Сапин с соавт., 1981; Ю.И.Бородин, В.Н.Григорьев, 1986; Т.С.Гусейнов с соавт., 2000).

В данных условиях эксперимента деформация синусов лимфатических узлов сопровождается сужением их просветов, что является структурной основой нарушения транспортной и депонирующей функций лимфатических узлов (Ю.И.Бородин и П.М.Трясучев, 1974; А.Е.Тауlor, 1973). Уменьшение как продольных, так и поперечных, размеров лимфатических узлов при эксикозе, по-видимому, свидетельствует о «срыве» адаптации органа к изменившимся условиям функционирования и отражает включение атрофического компонента в развитие патологического процесса. Необходимо отметить, что уменьшение размеров лимфатических узлов происходит вне зависимости от их регионарной принадлежности. По сравнению с интактными показателями, размеры БЛУ достоверно уменьшаются и составляют: длина 1,70±0,27мм, ширина 1,23±0,94мм, р<0,05 (в интактной группе - 3,80±0,50мм и 2,57±0,21мм соответственно); в ПЛУ эти изменения менее значимы: длина узлов уменьшается до 0,97±0,12 мм, ширина - до 0,84±0,29 мм (в интактной группе - 1,85±0,25мм и 1,1±0,11мм соответственно).

Характерно утолщение капсулы и трабекул лимфатических узлов с частичным их склерозом; в заметно расширенных синусах практически постоянно обнаруживаются форменные элементы крови. Обращает внимание изменение клеточного состава лимфоидных узелков (см. табл. 1,3). Так, в центрах размножения лимфоидных узелков БЛУ число малых лимфоцитов на единицу площади уменьшается с 14,1±0,11Ч103мм2 до 9,12±0,21Ч103мм2, р<0,05; средних - с 8,13±0,10Ч103мм2 до 2,1±0,04Ч103мм2; р<0,05. В ПЛУ количество малых лимфоцитов снижается до 8,8±2,07Ч103мм2, р < 0,05 (в интактной группе 18,9±0,39Ч103мм2), средних до 4,0±0,31Ч103мм2, р<0,05 (в интактной группе 11,27±0,3Ч103мм2). Редукция лимфоцитарного пула служит указанием на возможность угнетения иммуногенеза при эксикозе. При этом, достоверно (практически десятикратно) растет число клеток, находящихся в состоянии деструкции на фоне некоторой активизации макрофагальной реакции.

Таким образом, наши исследования продемонстрировали, что при создании модели сублетальной дегидратации организма в лимфатическом русле и лимфатических узлах разной локализации возникают глубокие морфофункциональные изменения всех звеньев лимфоносного русла и структурных элементов лимфатических узлов. Характер и степень развития указанных изменений зависит от регионарной принадлежности лимфатических микрососудов и узлов подопытных животных.

2. При обосновании подходов к выбору оптимального способа регидратации организма мы исходили из постулата, что в основе развития дегидратационного синдрома лежит сложный ансамбль патологических сдвигов в гомеостазе организма. К важнейшим патогенетическим факторам следует отнести, помимо водно-солевого дисбаланса, закономерное возникновение ишемии органов. Это основные причины смерти при длительной дегидратации, поэтому восполнение только жидкой составляющей и солей не всегда является эффективным средством (Х.М.Малачилаева, 2000). Соответственно, при регидратации организма в комплекс лечебных мероприятий необходимо включать и те средства, которые, параллельно с восполнением объема жидкости, корригируют ишемизацию органов. лимфатический кишка почка дегидратация

Оценка хронологии преобразований лимфатического русла брыжейки тонкой кишки и фиброзной капсулы почки при регидратации организма показала, что увеличение длительности лечебных процедур интенсифицирует позитивную перестройку архитектоники лимфатического русла с нормализацией калибра и строения всех звеньев внутриорганного лимфооттока на фоне прогрессивного снижения дистрофических изменений стенок сосудов.

В частности, сопоставление показателей степени перестройки лимфатического русла в ходе регидратации организма, позволяет заключить, что максимальная степень восстановления диаметров наблюдается в капиллярном звене и более выразительна при инфузии перфторана (диаграмма 1). При этом лимфатическое русло БТК отличает большая активность реконструктивных процессов при регидратации.

Диаграмма 1

Примечание: ; ИГ - интактная группа; СО - сублетальное обезвоживание;

ЛК - лимфатический капилляр; ЛПК - лимфатический посткапилляр; ЛС -собирательный лимфатический сосуд.

Заслуживает внимания предположительный механизм реконструкции архитектоники лимфатического русла в процессе регидратации, очевидно, связанный с активацией ангиогенеза в системе лимфатических капилляров, инициальных отделов лимфотока, непосредственно реагирующих на любые изменения параметров интерстициального гомеостаза. Можно полагать, что включение в капиллярное звено новообразованных микрососудов лежит в основе более быстрого, по сравнению с другими микрососудами, темпа нормализации средних значений диаметров капилляров.

Примечание: ; ИГ - интактная группа; СО - сублетальное обезвоживание;

ЛК - лимфатический капилляр; ЛПК - лимфатический посткапилляр; ЛС -собирательный лимфатический сосуд

Диаграмма 2

Уже к 3-м суткам инфузионной терапии обнаруживались «почки» роста капиллярных сосудов, а в последующие сроки отмечался значительный рост числа новообразованных сосудов, заполнявших преимущественно малососудистые зоны. Примечательно, что анализ импрегнированных микропрепаратов особенно наглядно свидетельствует, что при инфузии перфторана формирование новых капилляров происходит более активно, чем в контрольной группе. Новообразование капилляров и восстановление лимфотока в ранее «выключенных» капиллярных сосудах индуцирует улучшение условий микроциркуляции. Уже на раннем этапе регидратации в ФКП и БТК крыс выявлены заметные признаки прогрессивной перестройки структуры лимфатических микрососудов в обеих группах эксперимента. Так, прослеживалась очевидная тенденция к восстановлению конфигурации микрососудов, средние значения их диаметров увеличивались. Данные морфометрии диаметров микрососудов лимфатического русла БТК и ФКП в динамике регидратации отражают диаграммы 1, 2, иллюстрирующие более позитивную динамику показателей в опытной группе. Лимфатические капилляры изученных объектов приобретали более прямолинейный ход, существенно снижалось число капилляров с участками локальных сужений, уменьшалось число капилляров с явлениями повышенной проницаемости сосудистой стенки (наличие эритроцитов в просвете). Следует подчеркнуть, что при инфузии эмульсии перфторана явления реабилитации строения русла и структуры микрососудов носили более выраженный и распространенный характер (по сравнению с контролем - регидратация физиологическим раствором).

На 6-е сутки регидратации обнаруживаются качественно новые морфологические признаки коррекции лимфообращения в виде значительного уменьшения или отсутствия атипичных лимфатических капилляров во всех объектах, особенно четко это выявляется после использования перфторана. При инфузии физиологического раствора количество атипических лимфатических капилляров снижается в БТК с 40% (показатель предыдущего этапа) до 7%, а в ФКП - с 33% до 14%. Сосуды приобретают характерные ровные, четкие контуры, диаметры просветов лимфатических микрососудов и собирательных сосудов достоверно возрастают. Характерно, что на этом сроке отмечены максимальные темпы увеличения метрических показателей лимфатических микрососудов, более высокие при регидратации перфтораном.

Можно констатировать, что на 10-е сутки после регидратации перфтораном в лимфатических капиллярах изученных объектов выявлены наибольшие реконструктивные изменения по сравнению с предыдущими сроками наблюдения и контролем. Общим для всех объектов было возрастание количества функционирующих лимфатических капилляров, имеющих прямолинейный или слегка извитой ход, резкое сокращение площади бессосудистых зон. Детальный анализ структуры стенок лимфатических микрососудов под большим увеличением микроскопа обнаружил отсутствие признаков дистрофических и деструктивных изменений. Так лимфатические капилляры имели ровные, четкие контуры стенок. Ядра эндотелия стенок также были с четкими контурами, явления пикноза наблюдались лишь эпизодически.

На заключительном этапе наблюдения становится правилом отсутствие атипичных сосудов и относительная нормализация основных структурно-функциональных показателей. В БТК на фоне использования перфторана это явление особенно демонстративно. В частности, диаметры всех звеньев лимфатического русла достигают физиологических значений. В ФКП при регидратации перфтораном диаметры обменных микрососудов лишь приближаются к интактным. В контрольной группе (использование физиологического раствора) изменения средних показателей диаметров микрососудов менее демонстративны, диаметры всех звеньев лимфатического русла изученных объектов через 10 дней после регидратации остаются сниженными по сравнению с интактными животными.

Расширение просвета лимфоносных путей, возрастание плотности ангиосетей, нормализация конфигурации микрососудов способствует притоку лимфы с систему лимфомикроциркуляции, обеспечивая коррекцию гомеостаза в тканевом регионе. В целом, результаты морфологического анализа свидетельствуют о предпочтительном использовании перфторана для полноценной коррекции сосудистых расстройств, индуцированных дегидратацией организма.

Анализ реакции лимфатических узлов на регидратацию организма показал, что независимо от вида плазмозаменителя, уже к 3-му дню наблюдается купирование патологических сдвигов и обнаруживаются признаки активизации компенсаторно-восстановительных процессов. Так, при использовании перфторана размеры БЛУ увеличиваются: длина до 2,50±0,23 мм, ширина до 1,97±0,55 мм, а ПЛУ - длина 0,97±0,15 мм, ширина 1,0±0,12 мм; при использовании физиологического раствора эти показатели соответственно равняются: БЛУ- 1,96±0,21 мм и 1,56±0,77мм; ПЛУ- 0,97±0,12 мм и 0,88±0,19 мм. Эти данные позволяют говорить о сравнительно более эффективном влиянии перфторана на анатомические параметры лимфоузлов и, косвенно, о более выраженном купировании атрофических процессов в БЛУ. Намечается тенденция к нормализации соотношения коры и мозгового вещества, увеличению количества лимфоидных фолликулов, расширению мозговых синусов, более отчетливо регистрируемая при инфузии перфторана, что, по-видимому, свидетельствует об определенной активации дренажной функции лимфатических узлов.

Изменение клеточного состава исследованных зон лимфоузлов демонстрируют лишь некоторый позитивный вектор к увеличению объема пулов лимфоцитов. Представление о динамике этих преобразований, в целом общих для всех зон, дают таблицы №№ 1-4, иллюстрирующие изменение показателей в центрах размножения лимфоидных узелков БЛУ и ПЛУ при различных способах регидратации организма.

Наиболее яркой чертой действия плазмозаменителей на этом сроке наблюдения является стимуляция макрофагальной реакции, более выраженной в брыжеечных лимфатических узлах, и, как следствие, снижение масштаба клеточной деструкции.

Таблица 1 Клеточный состав лимфоидной ткани брыжеечных лимфатических узлов крыс в динамике регидратации организма перфтораном (Х±Sх)

Примечание: П.3 - 3-х суточная регидратация перфтораном

П.6 - 6-ти суточная регидратация перфтораном

П.10 - 10-ти суточная регидратация перфтораном

* - р<0,05 - по сравнению с интактной группой для критерия Крускала-Уоллиса

* * - р<0,05 - по сравнению с обезвоженной группой для критерия Манна-Уитни

Таблица 2 Клеточный состав лимфоидной ткани брыжеечных лимфатических узлов крыс в динамике регидратации организма физиологическим раствором (контроль) (Х±Sх) (в тысячах на 1 кв. мм среза)

Примечание: Ф.3 - 3-х суточная регидратация физиологическим раствором

Ф.6 - 6-ти суточная регидратация физиологическим раствором

Ф.10 - 10-ти суточная регидратация физиологическим раствором

* - р<0,05 - по сравнению с интактной группой для критерия Крускала-Уоллиса

* * - р<0,05 - по сравнению с обезвоженной группой для критерия Манна-Уитни

Выявленные на 3 сутки регидратации организма изменения в различных группах лимфатических узлов, по-видимому, отражают инициальную стадию включения компенсаторно-адаптационных механизмов. Увеличение количества лимфоидных клеток говорит об активизации лимфопоэза иммунной системы в целом, что повышает сопротивляемость организма к повреждающему фактору.

К 6-му дню эксперимента отмеченные ранее позитивные преобразования функциональной морфологии лимфатических узлов приобретают очевидный характер. В частности, при инфузии перфторана размеры лимфатических узлов увеличиваются особенно заметно (длина БЛУ достигает 2,96±0,36мм, ширина - 2,83±0,51мм, в ПЛУ - 1,87±0,20мм и 1,2±0,10мм соответственно), корригируется соотношение площадей коры и мозгового вещества, увеличиваются площадь, занимаемая фолликулярным аппаратом, количество узелков с реактивными центрами. Существенной реконструкции подвергается и цитокомпозиция лимфоидного аппарата узлов, что особенно ярко проявляется при регидратации перфтораном. В частности, в В-зоне (см.табл. 1- 4) значительно возрастает количество лимфоцитов. Так, в БЛУ число средних лимфоцитов составляет 6,4±0,24Ч103мм2, малых- 13,4±0,92Ч103мм2 (при дегидратации 2,1±0,04Ч103мм2 и 9,12±0,21Ч103мм2 соответственно); наряду с выраженным ростом количества макрофагов снижается представительство дистрофически-измененных клеток. В ПЛУ количество больших и малых лимфоцитов увеличивается менее значимо, равно как и показатели уровня макрофагальной реакции и клеточной деструкции.

Соответственно, сравнительный анализ состояния лимфопоэза на этом этапе наблюдения при использовании 2-видов плазмозаменителей подтвердил раннее заключение о преимуществах действия перфторана. Так, при инфузии последнего показатели представительства различных клеточных форм в брыжеечных узлах приближаются к нормальным, тогда как при регидратации организма физиологическим раствором остаются сниженными. Обращает внимание существенное, более чем двукратное, по сравнению с условиями дегидратации, сокращение уровня клеточной дистрофии в опытной группе на фоне четырехкратного подъема количества макрофагов; на препаратах постоянно определяются макрофаги, захватывающие продукты клеточного распада или частицы перфторана. Поясничные лимфатические узлы проявляют меньшую степень «чувствительности» к корригирующей терапии. Характерной чертой состояния ПЛУ является также отсутствие продвинутой макрофагальной реакции у животных контрольной и опытной групп и менее отчетливая редукция популяции дистрофически - измененных клеток.

Таблица 3 Клеточный состав лимфоидной ткани поясничных лимфатических узлов крыс в динамике регидратации организма перфтораном (Х±Sх) (в тыс. на 1 кв. мм среза)

Примечание: П.3 - 3-х суточная регидратация перфтораном

П.6 - 6-ти суточная регидратация перфтораном

П.10 - 10-ти суточная регидратация перфтораном

* - р<0,05 - по сравнению с интактной группой для критерия Крускала-Уоллиса

** - р<0,05 - по сравнению с обезвоженной группой для критерия Манна-Уитни

Таблица 4 Клеточный состав лимфоидной ткани поясничных лимфатических узлов крыс в динамике регидратации организма физиологическим раствором (контроль) (Х±Sх) (в тысячах на 1 кв. мм среза)

Примечание: Ф.3 - 3-х суточная регидратация физиологическим раствором

Ф.6 - 6-ти суточная регидратация физиологическим раствором

Ф.10 - 10-ти суточная регидратация физиологическим раствором

* - р<0,05 - по сравнению с интактной группой для критерия Крускала-Уоллиса

* * - р<0,05 - по сравнению с обезвоженной группой для критерия Манна-Уитни

Пролонгированное исследование особенностей функциональной морфологии лимфатических узлов позволяет оценить в целом динамику восстановительных процессов при регидратации организма, определить общие тенденции в их развитии и специфику реакции в условиях использования различных плазмозаменителей.

Установлено, что при 10-ти суточной регидратации организма наблюдается дальнейший рост размеров лимфатических узлов, вне зависимости от их регионарной принадлежности и способа терапии. Однако, предположение о более действенном влиянии перфторана находит свое подтверждение. Так, в опытной группе размеры обоих видов лимфатических узлов достигают нормальных значений, тогда как в контрольной эти показатели остаются сниженными. Увеличиваются размеры и число лимфоидных узелков, в особенности с центрами размножения, что более выражено в брыжеечных лимфатических узлах при регидратации перфтораном. При 10-ти суточной регидратации организма значительно возрастает число лимфоцитарных клеток, восстанавливаются характерные межклеточные ассоциации (расположение лимфоцитов рядами), нормализуется клеточный состав лимфоидных структур наряду на фоне значительного снижения (или отсутствием) явлений клеточной деструкции. Примечательно, что на этом сроке эксперимента демонстрируется радикальность действия перфторана, более отчетливо проявляющаяся в брыжеечных лимфатических узлах, что, по-видимому, указывает на более полное восстановление адаптивных, репаративных ресурсов организма. Так, если инфузия физиологического раствора индуцирует выраженное снижение уровня патологических сдвигов и лишь определенную степень нормализации морфологических показателей, то перфторан обеспечивает практически полную реабилитацию структурно-функционального статуса органа.

Таким образом, наши исследования продемонстрировали определенную синхронность изменений, происходящих в лимфатическом русле и лимфатических узлах разной локализации при регидратации организма крыс.

Использование перфторана в комплексе мероприятий, направленных на купирование последствий эксикоза, на наш взгляд, является вполне оправданным, поскольку он более эффективно (по сравнению с физиологическим раствором) обеспечивает физиологическую реорганизацию строения лимфатического русла и лимфатических узлов разной локализации в ходе регидратации организма.

ВЫВОДЫ

1. Длительное обезвоживание организма провоцирует глубокие расстройства лимфомикоциркуляции в брыжейке тонкой кишки и фиброзной капсуле почки в комплексе с развитием атрофических процессов в регионарных лимфатических узлах. Лимфатическое русло брыжейки тонкой кишки и брыжеечные лимфатические узлы демонстрируют большую выраженность морфо-функциональных преобразований.

2.Расстройства лимфообращения обусловлены нарушением архитектоники лимфатического русла (снижение плотности сосудистых сетей, появление бессосудистых зон), выраженным сужением диаметров всех типов микрососудов, повышением проницаемости стенки лимфатических капилляров.

3.Реакция лимфатических узлов на длительное обезвоживание организма проявляется в значительном уменьшении их размеров, изменении корково-мозгового индекса, сокращении количества лимфоидных узелков и популяции лимфоидных клеток, деформации и сужении синусов.

4.Регидратация организма с использованием физиологического раствора и перфторана приводит к прогрессирующему, по мере увеличения продолжительности инфузионной терапии, развитию компенсаторно-восстановительных процессов с постепенной реабилитацией конструкции лимфатического русла и условий лимфоциркуляции, восстановлению анатомо-гистологических и функциональных параметров лимфатических узлов.

5.При инфузии эмульсии перфторана к 10-му дню наблюдения регистрируется, особенно явно в брыжейке тонкой кишки, практически полное восстановление морфо - физиологических характеристик лимфомикроциркуляторного русла, сопряженное с активацией ангиогенеза; темпы реконструктивных процессов при использовании физиологического раствора сравнительно замедлены.

4. Результаты сравнительного анализа реакции лимфатических узлов на регидратацию организма различными плазмазаменителями подтвердили более высокую эффективность перфторана в плане коррекции патологических сдвигов, обусловленных эксикозом. Так, если инфузия физиологического раствора к 10 дню эксперимента индуцирует лишь выраженное снижение уровня патологических сдвигов, то перфторан обеспечивает практически полную реабилитацию структурно-функционального статуса органов. Брыжеечные лимфатические узлы отличает большая активность восстановительных процессов.

5.Одним из механизмов позитивного влияния перфторана на функциональную морфологию лимфатических узлов является выраженная стимуляция макрофагальной реакции, сочетающаяся с достоверной редукцией явлений клеточной деструкции.

6. Перспективность использования перфторана в комплексе мероприятий, направленных на купирование последствий эксикоза, обоснована его более эффективным (по сравнению с физиологическим раствором) влиянием на процессы восстановления морфофизиологических параметров системы лимфомикроциркуляции и лимфатических узлов в ходе регидратации организма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Информация о высокой эффективности перфторана при коррекции нарушений гомеостаза, индуцированных длительным обезвоживанием организма, позволяет рекомендовать использование этого плазмозаменителя в комплексе противошоковых мероприятий при критических состояниях данного профиля. Материалы исследования могут быть востребованы трансфузиологами, хирургами, инфекционистами и педиатрами.

Результаты исследований рекомендуется использовать при составлении учебно-методических пособий, в лекциях по нормальной и патологической анатомии, патологической физиологии для студентов медицинских вузов и слушателей ФПО.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. К.Ш.Ханахмедова, М.А.Магомедов. Морфология брыжеечных лимфатических узлов при сублетальной дегидратации организма и коррекция ее инфузией перфторана. //Сборник научных трудов, посвященный 15-летию со дня организации ЦНИЛ «ЦНИЛ - вчера, сегодня, завтра», Махачкала, 2005. - с. 17-19.

2.К.Ш.Ханахмедова, М.А.Магомедов.Состояние лимфомикроциркуляторного русла при дегидратации организма и его лимфотропная коррекция перфтораном (в эксперименте). // Сборник научных трудов, посвященный 15-летию со дня организации ЦНИЛ «ЦНИЛ - вчера, сегодня, завтра», Махачкала, 2005. - с. 20-24.

3.К.Ш.Ханахмедова,М.А.Магомедов.Изменение лимфомикроциркуляторного русла экспериментальных животных при сублетальной дегидратации организма. // Материалы III-й научно-практической конференции «Новые технологии в медицине», Махачкала, 2006. - с. 396-398.

4. К.Ш.Ханахмедова, М.А.Магомедов. Морфологическая и морфометрическая характеристика лимфатических узлов крыс на этапах регидратации организма инфузией перфторана. // Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы. Махачкала, 2006. - с. 252-254.

5. К.Ш.Ханахмедова. Морфологическая оценка лимфомикроциркуляторного русла при длительной дегидратации и коррекция перфтораном. //Экология человека. Материалы всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные аспекты жизнедеятельности человека на Севере». Архангельск, 2006. Приложение 4/2 - с. 424.

Размещено на Allbest.ru