Метаболическая оценка компенсаторно-приспособительных изменений при воздействии неблагоприятных факторов титано-магниевого производства

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Национальная академия наук Кыргызской Республики

Институт Биотехнологии

Диссертационный совет Д. 03.12.022

Автореферат диссертации

на соискание ученой степени доктора биологических наук

Метаболическая оценка компенсаторно-приспособительных изменений при воздействии неблагоприятных факторов титано-магниевого производства

Дакиева Кульзипа Жусуповна

Специальность 03.03.01 - Физиология

Бишкек

2013

Работа выполнена в Национальном центре гигиены труда и профессиональных заболеваний МЗ РК, Восточно-Казахстанском филиале РГКП «Национальный центр гигиены труда и профзаболеваний».

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор

Джангозина Д.М

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Хантурин Марат Рашидович

доктор медицинских наук, профессор Соколов Александр Дмитриевич

доктор биологических наук,

Каркобатов Хасен Джолдубаевич

Ведущая организация: Республиканское государственное предприятие «Институт физиологии человека и животных» КН МОН РК (050060, г.Алматы, пр. Аль-Фараби, д.93)

Защита состоится «___» _________2013г в ____ часов на заседании диссертационного Совета Д. 03.12.022 при Институте биотехнологии Национальной академии наук Кыргызской Республики по адресу: 720071, г.Бишкек, проспект Чуй, 265

С диссертацией можно ознакомиться в центральной научной библиотеке Национальной академии наук Кыргызской Республики, 720071, г.Бишкек, пр. Чуй, 265а

Автореферат разослан «___»________2013 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор биологических наук Худайбергенова Б.М.

Общая характеристика работы

Актуальность темы. На промышленном предприятии АО «Усть-Каменогорский титано-магниевый комбинат» (АО «УК ТМК») условия труда до сих пор остаются неудовлетворительными, несмотря на то, что в последние годы значительно совершенствуются технологические процессы [Сидоров К.К? Вишневская С.С., 1992? Павлов А.В. и соавт., 2002? Пальцев Ю.П.и соавт., 2003? Ерубаев Т.К.и соавт.2004].

Титан и его сплавы хорошо поддаются обработке давлением и сварке, сохраняют высокие механические свойства и при пониженных температурах. Другим важным достоинством титана является его исключительно высокая химическая стойкость по отношению к многим агрессивным средам неорганического и органического происхождения. Благодаря этим и другим качествам титан и его сплавы широко используются в современных сверхзвуковых самолетах и ракетах, подводных лодках и морских судах, в химической, пищевой промышленности, а также в других областях современной техники.

АО «УК ТМК» Казахстана является одним из крупнейших предприятий по производству титана и выпускающим одну из лучших в мире титановую губку. На комбинате обеспечены рабочими местами 5 тысяч человек. Реализуя титановую губку в страны Дальнего и Ближнего Зарубежья, тем самым комбинат пополняет бюджет республики и города Усть-Каменогорска. Но несмотря на выгодные экономические стороны, в процессе трудовой деятельности (при добыче, обогащении и переработке титановых руд, при получении различных титановых соединений, а также выбивке, переработке и сортировке титановой губки) работники могут подвергаться воздействию пыли металлического титана (Ti) и его диоксида (TiО2), высокотоксичных химических соединений - газообразного четыреххлористого титана (TiC14)), продуктов его гидролиза, паров хлора и фосгена, а также влиянию электромагнитных полей.

Многими авторами было изучено комбинированное действие продуктов гидролиза четыреххлористого титана и выявлены хронические заболевания легких у рабочих с длительным стажем работы в цехе по производству четыреххлористого титана и поражение нервной системы.

В таких производственных условиях у рабочих часто отмечались острые респираторные инфекции, хронические бронхиты и т.д. Течение хронического бронхита сопровождалось явлениями выраженной дыхательной недостаточности. Гипертрофические риниты и субатрофические фарингиты выявлены при действии четыреххлористого титана и продуктов его двуокиси [Белоскурская Г.И., 2001; Буданова Л.Ф., 2001; Султанбеков З,К., 2003; Карабалин С.К. и соавторы, 2005; Базарова Е.Л., 2007].

В последние годы появились научные сообщения о важности и необходимости исследований тканевых и клеточных процессов при воздействии комплекса неблагоприятных факторов в производстве губчатого титана на организм рабочего, высказывается роль калликреин-кининовой и симпато-адреналовой систем в защите клеточных структур от воздействия этих вредных веществ, ведется поиск критериев и информативных показателей - предвестников ранних нарушений. Однако же все эти литературные сведения фрагментарны и они не позволяют сделать определенные выводы о значимости этих систем в обеспечении адаптабельности организма в процессе длительного

воздействия комплекса вредных производственных факторов [Фейгин Б.Г., 1988? Бейсембаева С.К.,1998; Баянова М.Ф.,2004; Султанбеков З.К.,2004; Дюсембаева Н.К.,2006].

Целью работы явился поиск физиолого-биохимических показателей состояния организма рабочих, на основании которых можно разработать концептуальную модель метаболических аспектов к воздействию комплекса факторов в производстве губчатого титана и рекомендовать приоритетные тесты саногенеза.

Связь темы диссертации с научными программами, основанными научно-исследовательскими работами, проводимыми научным учреждением. Работа выполнена в рамках плановой НИР Национального центра гигиены труда и профзаболеваний МЗ РК «Научные основы оптимизации условий труда и состояние здоровья рабочих ТМП» (ГРН № 0103 РК 00366). Фрагмент «Изучение условий труда и состояние здоровья по биохимическим и цитогенетическим показателям у рабочих ТМП».

Цель и задачи исследования:

1. В экспериментах на животных изучить физиологические и биохимические механизмы инициации и прогрессирования патологического процесса на разных сроках воздействия пыли титанового шлака.

2. Выявить цито-морфологическую картину изменений (нарушений) в основных внутренних органах (легкие, печень, почки), участвующих в процессах защиты организма от действия титана и его производных.

3. Определить саногенетически и патогенетически значимые изменения и критерии, характеризующие как напряженность адаптации к комплексу производственных условий, так и дезадаптабельность организма животных к этим вредоносным факторам в натурном эксперименте.

4. Оценить физиолого-биохимический статус практически здоровых рабочих, подвергшихся воздействию комплекса вредных производственных факторов в процессе краткосрочной и долгосрочной деятельности на предприятии (до 3-х, 3-5 лет, 6-10 лет и свыше 10 лет).

5. Разработать патогенетическую схему влияния титана и его производных на организм человека и животных и предложить концептуальную модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих основных цехов с различным стажем работы.

Научная новизна работы.

1. Впервые на модели воздействия пыли титанового шлака, в натурных исследованиях на животных и на людях (здоровых рабочих) установлены закономерности формирования физиологических и биохимических механизмов стресс-реакции в условиях воздействия комплекса производственных факторов.

2. Установлено морфологическими исследованиями структурные изменения внутренних органов (легких, печени, почках), отвечающих и активно участвующих в физиологических и биохимических реакциях компенсации в остром эксперименте и при хроническом воздействии факторов титано-магниевого производства.

3. Доказано, что воздействие комплекса негативных факторов вызывают изменения физиологических показателей - уменьшение двигательной активности и увеличение эмоциональной реактивности. Выявлена регулирующая роль и значение КА и продуктов его взаимопревращения в процессе формирования защитных реакций.

4. Доказана однонаправленность изменений у животных и человека, однако выраженность биохимических реакций у рабочих была ниже, что объясняется более совершенными механизмами защиты, сформированными у людей в процессе онтогенеза.

5. На основании экспериментального исследования и натурных наблюдений на животных и рабочих, математического анализа с использованием межсистемных и внутрисистемных корреляционных связей, литературных данных, разработана концептуальная модель воздействия комплекса факторов производства губчатого титана на формирование механизмов стресса и защитных механизмов у «практически здоровых» стажированных рабочих. Выявленные комплексы физиологических и биохимических показателей рекомендованы и внедрены для раннего выявления донозологических состояний у стажированных рабочих, а также для характеристики мониторинга их здоровья.

Практическая значимость полученных результатов.

Разработана метаболическая концепция формирования и прогрессирования стресса у рабочих АО «Усть-Каменогорский титано-магниевый комбинат», позволяющая утверждать, что физиологические и биохимические механизмы нарушения гомеостаза, вызванных прямыми и опосредованными воздействиями комплекса производственных факторов, реализируются, как на организменном уровне, так и на уровне органов, активно участвующих в биохимических реакциях адаптации.

Рекомендованы в практику гигиенических исследований прогностические и диагностические тесты, как дополнительные, для выявления предпатологии, для уточнения процесса формирования патологии, при проведении периодических медицинских осмотров. Полученные материалы внедрены в работу поликлиники АО «УК ТМК», акт внедрения от 10.01.2005 г., ВК Областное Медицинское Объединение, акт внедрения от 25.09.2006 г., КГКП «Городская больница №1», акт внедрения от 25.06.2007 г., МСЧ-2, акт внедрения от 27.03.2007 г., учреждение «Амбулаторный центр», акт внедрения от 09.07.2008 г.? при чтении лекций, проведении практических занятий на кафедре экологии и безопасности жизнедеятельности ВКГУ им. С.Аманжолова, акт внедрения от 14.05.2010 г. и акт внедрения от 09.09.2010 г., на кафедре анатомии ВКГУ им. С.Аманжолова, акт внедрения от 27.06.2010 г.

Практические рекомендации вошли в патент «Способ донозологической диагностики состояния здоровья рабочих»(2009), монографию «Физиолого-биохимические аспекты воздействия неблагоприятных факторов в производстве губчатого титана» («Караганда», 2012)? Результаты работы изложены в 5 методических рекомендациях: в том числе «Биохимические показатели к оценке влияния на организм вредных производственных факторов» (Астана, 2007)? «Прогностические и диагностические методы исследования для выявления групп повышенного риска среди рабочих, контактирующих с комплексом токсических веществ и пылью» (Астана,2007)? «Методические подходы к морфологическому исследованию внутренних органов» (Астана, 2008)? «Биохимические методы определения катехоламинов при моделировании интоксикации тяжелыми металлами и при воздействии физической нагрузки» (Астана, 2009)? «Биохимические методы определения показателей калликреин-кининовой системы при воздействии тяжелых металлов и коррекции препараторами природного происхождения» (Астана, 2009)? в научном произведении (Авторское право) «Математические подходы к оценке биохимического статуса организма рабочих» (Астана, 2010)?

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Экспериментальные исследования в остром, подостром и хроническом опыте выявили изменение физиологических и биохимических показателей, показателей стадии резистентности и срыва адаптации к производственным условиям.

2. Анализ морфологических изменений во внутренних органах животных подтвердил физиологические и патофизиологические механизмы формирования стресса и дистресса на разных сроках воздействия вредных факторов производства титана.

3. У животных, находившихся на территории основных цехов титано-магниевого комбината, выявлены физиологические и биохимические показатели, характеризующие все стадии производственного стресса (удовлетворительная адаптация, резистентность, неудовлетворительная адаптация).

4. На основе сравнительного анализа у «практически здоровых» рабочих рекомендованы лабораторные тесты для мониторинга состояния здоровья и для раннего выявления «групп риска».

Личный вклад соискателя.

Соискателем были разработаны вопросы исследования и сформулирована проблема, проведен патентный поиск, литературный обзор, сформулирована научная гипотеза. Проведен набор биоматериала у лабораторных животных и у рабочих. Автором проведен анализ физиологических и биохимических данных и интерпретация полученных результатов, математическая обработка данных.

Апробация результатов исследования. Основные положения диссертации доложены на съездах и конференциях: на юбилейной конференции «Вопросы физиологии, гигиены труда и профпатологии» (Караганда, 2004); на международной конференции «Проблемы трансграничного загрязнения территорий» (Усть-Каменогорск, 2004); на республиканской научно-практической конференции «Актуальные вопросы профессиональной патологии» (Караганда, 2005); на международной конференции «Проблемы энергосбережения и экологии в промышленном и жилищно-коммунальном комплексах» (Пенза, 2006); на 2-ой международной конференции «Донозоология-2006» (Санкт-Петербург, 2006); на республиканской научно-практической конференции с международным участием «Проблемы медицины труда и промышленной токсикологии в Казахстане» (Караганда, 2006); на международной конференции «Медико-социальная реабилитация населения неблагоприятных регионов» (Семипалатинск, 2006); на III конгрессе евро-азиатского респираторного общества (Астана, 2007); на интернациональном конгрессе «EURO-ECO» (Германия, 2007); на VI съезде физиологов Казахстана с международным участием «Современные вопросы гигиены труда и профзаболеваний» (Караганда 2007); на республиканской научно-практической конференции с международным участием «Современные вопросы гигиены труда и профзаболеваний» (Караганда, 2007); на IV международной научно-практической конференции «Научни дни 2008» (Болгария, 2008); на республиканской научно-практической конференции «Актуальные вопросы охраны здоровья работающего населения» (Караганда, 2008); на международной научно-практической конференции «Наука и ее роль в современном мире» (Караганда, 2010); на международной научно-практической конференции «Наука и ее роль в современном мире» (Караганда, 2011), монография «Физиолого-биохимические аспекты воздействия неблагоприятных факторов в производстве губчатого титана» (Караганда, 2012).

Полнота отражения результатов диссертации в публикациях. По теме работы опубликовано 52 научных работ, из них 39 статей в научных журналах и сборниках (29 - единолично), 5 тезисов конференций, 5 методических рекомендаций, 1 монография, 1 инновационный патент, 1 авторское право.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 256 страницах, включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, главы собственного материала, заключение, выводы, указатель литературы, практические рекомендации, приложение. Диссертация иллюстрирована 59 таблицами, 107 рисунками. В указатели литературы 385 источников на русском (329) и иностранном языках (56).

Основное содержание диссертации

титан организм рабочий

Глава 1. Обзор литературы

Оценка здоровья на современном этапе настоятельно требует разработку научных подходов к выявлению ранних изменений состояния организма под влиянием окружающей среды, в том числе и негативных последствий производственных факторов. В литературе мало работ о влиянии на организм вредных компонентов производства магния, титана и их соединений.

В настоящее время условия труда и трудовой процесс титано-магниевого комбината имеют выраженную специфику и оказывают не до конца изученное воздействие на здоровье рабочих.

Глава 2. Материалы и методы исследования

Методы исследования в эксперименте. Физиологические показатели: Для изучения поведенческих реакций грызунов проводили тест «Открытое поле» по модификации Балыниной Е.С. Из физиологических показателей определяли локомоции и стойки (двигательная активность), груминг, дефекация, уринация (эмоциональная активность).

Биохимические методы в клинике и в эксперименте

1. Определение показателей симпато-адреналовой системы (адреналин, норадреналин, дофамин и ДОФА) методом Матлиной Э.Ш. и соавторов (1965). Определение показателей калликреин-кининовой системы по методу Пасхиной Т.С. и Егоровой Т.П. (1973): а) кининазная активность оценивалась по методу Пасхиной Т.С. и Егоровой Т.П. (1968). Калликреин и прекалликреин в крови по методу Пасхиной Т.С. и Яровая Г.А. (1970). Определение показателей ферментного спектра крови: активность гамма-глутамилтрансферазы (ГГТФ) по методу Кульганек и Димов (1996). Активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) определяли по методу Райтмана-Френкеля (1957).Активность креатининфосфокиназы (КФК) по методу Петровой Т.А. и соавторов (1989). Холинэстеразы по методу Хестерину в модификации Хуэгро, Весиник и Поппер (1949). Определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови по методу Бессеу, Лоури, Броку и альфа- амилаза по методу Каравея (1968).Определение показателей минерального спектра крови: определение содержания кальция по методу Уилкинсону в модификации Канторович А.С. и Белинской Л.А. (1973). Определение содержания магния с применением наборов реагентов фирмы «Лахема» (1985). Определение внеклеточного аниона - хлор-иона и фосфора по методу Архиповой О.Г. (1988) а сывороточного железа по методу Колб В.Г. и соавторов (1985). Определение показателей белково-зотистых компонентов крови: содержание мочевины по методу Фирона (1968). Остаточного азота крови колометрическим методом, определение креатинина по методу Поппера и соавторов (1937). Показатели метаболизма соединительной ткани. Определяли содержание оксипролина по методу Архиповой О.Г. (1982) в модификации Намазбаевой З.И., Джангозиной Д.М. и др. (А.С. №2024872 от 27.06.1991). Определение показателей углеводного обмена крови: содержание глюкозы по методу Гультмана в модификации Хивариненна-Никкила (1964). Определение уровня пировиноградной кислоты и молочной кислоты в крови по методу Умбрайта. Определение показателей липидного обмена: уровня общих липидов по методу Кнайт и соавторов (1962), уровня холестерола по иетоду Илька (1960) и триглицеридов по методу Буколо и Дэвида (1973). Определение в-липопротеидов по методу Брунштейна и Самая (1976). Определение пигментного спектра крови: уровня общего и прямого билирубина методом Йендрашика-Клеггорна- Грофа (1982).

Цито-морфологические исследования внутренних органов в эксперименте, которые включают гистологические методы исследования срезов органов , их окраску с помощью гемотоксилина - эозина по методу Ван-Гизону (Меркулов Г.А., 1969).

Полученные данные обработаны методами математической статистики по Гурману В.Е. (1977) с вычислением относительных и среднеарифметических величин (М), их ошибок (м), среднеквадратичных отклонений (у), критериев достоверности показателей (t) и их разницы (р) с определением межсистемных и внутрисистемных связей между изучаемыми показателями.

Глава 3. Результаты их обсуждения

Титано-магниевый комбинат в Усть-Каменогорске функционирует как один из самых передовых предприятий в Казахстане и как один из ведущих предприятий в странах СНГ по комплексному использованию сырья, степени извлечения металлов, качеству продукции.

Ввиду того, что в литературе отсутствуют материалы по физиологическому, биохимическому изучению механизма адаптации к профессиональному стрессу (механизмы адаптации, компенсации и предпатологических проявлений у здоровых рабочих) нами выполнена работа в этом аспекте в трех направлениях:

1) эксперимент на животных (белых крысах - самцах) с ингаляционным интратрахеальным введением сырья - титанового шлака;

2) натурный эксперимент с помещением клеток с животными (белые крысы) в основных цехах АО «Усть-Каменогорский титано-магниевый комбинат» (1-3 цеха);

3) апробация выявленных изменений (краткосрочного и длительного эксперимента) при обследовании здоровых рабочих.

3.1. Экспериментальное моделирование воздействия пыли титанового шлака на животных (50 мг) интратрахеально

Химический анализ титанового шлака выявил содержание двуокиси титана - 84,7%, окиси железа - 6,38%, двуокиси кремния - 10 - 12%, Мn - 1,0% и содержание микроэлементов - CaO, MgO, MnO, V2O5, P2O5, S, ZrO2, SC2O3, Ta2O3, Nb2O5.

Пыль вводилась животным в дозе 50 мг.

Метаболические показатели у животных в остром опыте (2 нед.) выявили изменения физиологических показателей (уменьшение двигательных - локомоции - на 15% и увеличение эмоциональных - груминга - на 35%) (рис.2). Выявлено увеличение адаптационного гормона - А в печени (в 3 раза), в надпочечниках - на 87% и медиатора, регулирующего кровообращение и функции сердца - норадреналина (в сердце - на 25%). Показателем раздражения соединительной ткани является увеличение уровня оксипролина - на 74%.

Активация системы катехоламинов (симпато-адреналовой системы) вызывала активацию калликреин-кининовой системы, о чем свидетельствует увеличение активности общих кининаз (на 44%), вызванное потребностью дезактивировать свободные кинины в плазме крови. В свою очередь, кинины являются одним из факторов, способных повышать проницаемость клеточных мембран и способствующих выводу в кровь ферментов (ЩФ - на 44%, АлАТ - на 29%, ГГТФ - на 23%).

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Рис 1. Метаболические изменения в организме животных при интратрахеальном введении 50 мг пыли титанового шлака, через 2 недели эксперимента (острый опыт)

Увеличение катехоламинов активирует все стороны обмена веществ: углеводный, липидный, минеральный. Изменения в углеводном обмене характеризуются накоплением недоокисленных продуктов гликолиза (молочной кислоты - увеличение в 2,3 раза) в результате гипоксии. Липидный обмен выявил увеличение атерогенных в-ЛП на 28%; минеральный обмен - накопление Р неорганического - в 2 раза, Fe - в 2,9 раза, Са - на 44%, Cl-иона - на 33%.

Кроме изменения ферментов, об участии печеночной ткани в процессе адаптации свидетельствует увеличение прямого билирубина - на 25%.

3.2. Цито - морфологические показатели внутренних органов при экспериментальном моделировании.

Результаты морфологических исследований подтверждали токсико-пылевое воздействие пыли титанового шлака на внутренние органы:

- в легких - общие реактивные изменения и сдвиги с продуктивным ответом иммунокомпетентных клеток (рис.2, рис.3);

Рис. 2. Стенка крупного бронха с резковыраженной продуктивной реакцией лимфоидной ткани. Дистрофические измения покровного эпителия с ослизнением (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)

Рис. 3. Продуктивно-деструктивный васкулит. Плазматическое пропитывание и некроз стенки сосудов (ув.280, окрашено гемотоксилином и эозином)

- в печени - субмассивные некрозы в паренхиме, резко выраженные нарушения в системе микроциркуляции (рис. 4, рис.5);



Рис. 4. Лимфолейкоцитарная инфильтрация некротизированных участков печени (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)

Рис. 5. Некроз гепатоцитов. Грапуляционная ткань замещающая очаги некроза (ув. 112, окарашено гемотоксилином и эозином)

- в почках - определялась полиморфная картина, отражающая острую стадию токсического тубулоинтерстициального нефрита. На фоне интерстициального отека, как коркового, так и мозгового вещества, обнаруживаются очагово-диссеменированные воспалительно-клеточные инфильтраты из мононуклеарных клеток, особенно во внутренних и средних кортикальных зонах (рис.6,рис.7).

Результаты подострого эксперимента (4 нед.) выявили нарастание физиологических изменений: двигательные (локомоции уменьшились на 39%), а эмоциональные характеризовались дальнейшим увеличением груминга (+61%) и присоединившимся к ним увеличением дефекации (на 40%) и уринации (на 29%). На системном уровне было выявлено уменьшение содержания адреналина в печени и надпочечниках, но увеличивался норадреналин в печени в 2,2 раза, оставаясь в сердце на уровне двухнедельного срока, что свидетельствует о компенсаторных изменениях сердечно-сосудистой системы. Активация симпато-адреналовой системы вызывает изменения показателей каликреин-кининовой системы; активность кининаз продолжает увеличиваться до 68% и присоединяется увеличение активности калликреина (на 60%) - фермента, активирующего свободные кинины, что также свидетельствует о компенсаторных изменениях сосудистой системы (в основном периферической). Активность ферментов в этот период значительно снижена, по сравнению с двухнедельным сроком.

Рис. 6. Очаговая лимфоидно-клеточная инфильтрация стромы. Дистрофические и некротические изменения канальцевого эпителия (ув.280, окрашено гемотоксилином и эозином)

Рис. 7. Воспалительно-клеточная инфильтрация гломерул (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)

Со стороны углеводного обмена - уровень молочной кислоты остается высоким и присоединяется увеличение уровня глюкозы (на 39%), что свидетельствует о сохраняющейся гипоксии тканей и накоплении недоокисленных продуктов. Со стороны липидного обмена уровень в-ЛП остается как при двухнедельном эксперименте и присоединяется увеличение общих липидов, что указывает на то, что энергетические потребности организма реализируются переходом с углеводного на липидный обмен. Кроме этого появляются метаболиты азотистого обмена: увеличение мочевины и креатинина на 21%, что свидетельствует о токсическом влиянии пыли титанового шлака не только на печень (изменения ферментов), но и на почки. Так, увеличение ЩФ указывает на поражение проксимальных канальцев почек.

Из показателей минерального обмена продолжал увеличиваться кальций (на 92%) и хотя уровень оксипролина несколько уменьшался, по сравнению с двухнедельным сроком, следует предполагать токсическое поражение соединительной ткани, в том числе костной.

На органном уровне в этот срок эксперимента следует отметить продолжительное увеличение прямого билирубина на 38% и присоединившееся к нему увеличение общего билирубина, что объясняется токсическим влиянием на печень. У экспериментальных животных с интратрахеальным введение пыли титанового шлака в подостром опыте (4 недели) выявлено морфологически:

- в легких - тяжелое поражение бронхов вплоть до облитерирующего бронхиолита, для которого были характерны изменения в виде продуктивной реакции лимфоидной ткани. Нарастание ателектазы (рис.8, рис.9);

Рис. 8. Облитерация просвета мелких бронхов с перибронхиальной лимфоцитарной продуктивной реакцией. Множественные очаги ателектазов (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)



Рис. 9. Продуктивно-деструктивный эндоваскулит. Облитерация просвета. Периваскулярный отёк (ув.280, окрашено гемотоксилином и эозином)

- в печени появились признаки перестройки печеночной ткани: в просвете расширенных и полнокровных синусоидов пролиферировали крупные печеночные макрофаги, балочное строение печени нарушалось; были выражены признаки анизоцитоза и анизокариоза (рис.10);

Рис. 10. Массивный коагуляционный некроз гепатоцитов. Пристеночная агрегация эритроцитов в центральной вене. Отёк стромы (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)

- в почках наблюдалось стихание острых процессов морфологических изменений и происходила трансформация последних в хронический тубулоинтерстициальный нефрит (рис.11).



Рис. 11. Очаговая лимфоидно-клеточная инфильтрация стромы. Склерозированние и сморщивание отдельных клубочков. Межкапиллярные спайки с фрагментацией гломерул (ув. 280, окрашено гемотоксилином и эозином)

У экспериментальных животных с интратрахеальным введением 50 мг пыли титанового шлака через 12 недель выявили дальнейшее уменьшение двигательной активности животных (на 54%) и увеличение эмоциональной напряженности по всем трем показателям, особенно по грумингу (до 86%). На системном уровне выявлена активность двух основных звеньев симпато-адреналовой системы (А и НА), особенно в ткани печени (А - в 4 раза, НА - в 2,5 раза) и в надпочечниках (А - на 46%, НА - на 77%), НА в сердце оставался на уровне четырехнедельного эксперимента. Эти изменения характеризуют компенсаторные сдвиги в организме животных на новом, патологическом уровне регуляции. Последующая активация калликреин-кининовой системы выявила увеличение фермента, активирующего данную систему (калликреина) в 2,2 раза, что свидетельствует о нарушении не только в общей системе кровотока (норадреналин), но и в периферической системе кровообращения. Продолжалась дальнейшая активация ферментной системы, что выражалось в дальнейшем увеличении ЩФ, ЛДГ и ГГТФ, имеющих диагностическое значение при поражениях печени и сердца. Последнее подкрепляется увеличением активности в этот период КФК на 64%.

Резкое увеличение в этот срок эксперимента б-амилазы (в 2,35 раза) свидетельствует о вовлечении в патологический процесс поджелудочной железы. Выявленные изменения закономерно вызывали нарушения обменных процессов: азотистого - дальнейшее увеличение мочевины (на 33%), креатинина (на 35%), что указывает на нарушения в аминокислотном обмене и функции почек. Со стороны углеводного обмена оставались высокими уровни глюкозы в крови (на 42% выше нормы), молочной кислоты (в 2 раза) и пировиноградной кислоты (на 27%). Уровень показателей общих липидов и в-липопротеидов несколько был уменьшен по сравнению с четырехнедельным сроком (увеличены на 18 и 17%). Показатель соединительнотканных белков - ОП - оставался увеличенным в 2,2 раза. Со стороны обмена микроэлементов продолжали увеличиваться Са до 2,4 раза, Р неорганический до 2,5 раза, оставался высоким уровень Fe (до 84%) и увеличивался Cl ион до 59%.

Морфологически через 12 недель интратрахеального введения пыли титанового шлака было выявлено дальнейшее прогрессирование гистологических изменений со стороны следующих органов:

- в легких - ранее выявленные изменения сочетались с все более усиливающимся пневмофиброзом, который приводил к тому, что структура легочной ткани на большинстве участков полностью или почти полностью утрачивалась. Преобладал тотальный фиброз, который чередовался с участками макро- и микрокистоза (рис.12);

Рис. 12. Диффузный перибронхиальный фиброз и пневмофиброз

- в печени - деструктивные изменения нарастали параллельно тканевой перестройке, это проявлялось гипоксемическим поражением паренхимы. Отмечалось сморщивание паренхимы печени и формирование очагов фиброза (рис.13);



Рис. 13. «Сморщивание» и фиброз стромы (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)

Рис. 14. Диффузная фибропластическая реакция в корковом слое почки с переходом в склерозирование и фиброз паренхимы (ув.112, окрашено гемотоксилином и эозином)

- в почках отмечалось истончение коркового слоя, атрофия и облитерация канальцев, особенно проксимальных (биохимически - увеличение ЩФ). Утолщение и сморщивание базальных мембран эпителиальных клеток, их гиалиновое перерождение и слущивание. Развивались диффузные склеротические изменения. Происходило рубцовое сморщивание интерстиция и массовая гибель канальцев (рис.14).

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Рис 15. Метаболические изменения в организме животных при интратрахеальном введении 50 мг пыли титанового шлака, через 12 недель эксперимента (хронический опыт)

Таким образом, интратрахеальное введение 50 мг пыли титанового шлака вызывало в организме экспериментальных животных физиологические, биохимические и морфологические изменения. Из физиологических показателей в остром периоде (2нед.) выявили уменьшение двигательной активности (локомоции) и увеличение эмоциональной напряженности (груминг). Патогенетическими из числа изученных являются: при остром эксперименте - увеличение А в печени, Fe, молочной кислоты, ЩФ, Р неорганического - в крови, ОП - в моче.

При подостром эксперименте (4 нед.) выявили нарастание эмоциональной активности (груминг, дефекация и уринация) и снижение двигательной активности (локомоции), патогенетически обоснованными биохимическими показателями, из числа изученных были: увеличение норадреналина в печени, Р неорганического, молочной кислоты в крови и ОП - в моче, а также Fе, ЩФ и активности калликреина в крови.

При хроническом эксперименте выявили дальнейшее уменьшение двигательной активности животных (локомоции на 54%) и увеличение эмоциональной напряженности по всем трем показателям, особенно по грумингу (до 86%), патогенетическими являются: увеличение А в печени, НА - в печени и надпочечниках, активности калликреина в крови и ОП в моче, а также увеличение активности б-амилазы, ЩФ, ЛДГ и содержания общих липидов.

Морфологически: введение пыли титанового шлака вызывало в легких - динамично развивающийся катарально-десквамативный эндобронхит и бронхиолит с последующей трансформацией в хронический атрофический бронхит склерозирующего типа. В печени - динамическое развитие асептического реактивного гепатита с трансформацией в постнекротический цирроз печени, со структурной перестройкой печеночной ткани - выраженными некротическими и дистрофическими изменениями гепатоцитов, с последующим снижением функциональной активности гепатоцитов.

В почках выявлено развитие острого токсического тубулоинтерстициального нефрита с последующей хронизацией процесса с исходом в диффузный нефросклероз.

Глава 4. Натурный эксперимент на животных, находившихся на территории цехов 1,2 и 3 АО «УК ТМК»

С целью приближения эксперимента к производственным условиям нами был поставлен натурный эксперимент на животных - с помещением экспериментальных животных (белых крыс) в основные цеха производства АО «УК ТМК»:

- цех №1 - по производству магния;

- цех №2 - по производству тетрахлорида титана;

- цех №3 - по производству титановой губки.

Сроки эксперимента 2, 4, и 12 недель. Животные помещались в специальные клетки, находящиеся на уровне дыхательного аппарата рабочих.

В цехе № 1, кроме пыли титанового шлака, на животных воздействовали повышенная температура, теплоизлучение, газовыделение. Физиологические и биохимические исследования, полученные при забивке экспериментальных животных в натурном эксперименте, проявляли однонаправленность с данными, полученными при интратрахеальном введении пыли титанового шлака, однако выраженность этих изменений была ниже в натурном эксперименте. В натурном эксперименте четко прослеживаются стадии адаптационного процесса: через 2 недели - стадия адаптации, через 4 недели - стадия резистентности и через 12 недель - неудовлетворительная адаптация (концепция общего адаптационного синдрома Селье и общая теория адаптации Баевского). Так, через 2 недели физиологические показатели изменились в сторону уменьшения двигательных (локомоции на 33%), а эмоциональная активность увеличивалась (груминг на 28%), катехоламины в печени увеличивались через 2 недели (А - в 2 раза, НА - на 62%) и в надпочечниках; через 4 недели - уровни их снижались до 50% (А в печени) и 54% (НА в печени) и через 12 недель опять резко увеличивались (адаптация на новом уровне регуляции). При этом А в печени увеличивался в 2,4 раза, НА - на 79%, в надпочечниках НА увеличивался на 51% и в сердце - на 17%.

Изменения катехоламинов вызывали активацию калликреинового звена ККС (увеличение КН на 12%), что в свою очередь вызывало лабилизацию клеточных мембран и увеличение в крови активности внутриклеточных ферментов (ЩФ - на 59%, ЛДГ - на 32%, КФК - на 39%).

Изменения уровня катехоламинов вызвало нарушение метаболизма всех видов обмена (углеводного - с увеличением глюкозы на 44% и молочной кислоты на 65%; липидного - с увеличением в-липопротеидов на 33% и ХС на 24%; азотистого обмена - с увеличением мочевины на 22% и креатинина на 19%, а также обмена микроэлементов - увеличение Р неорганического на 62%, CL иона на 47% и кальция на 28%).

Результаты натурного эксперимента сроком 4 недели, по сравнению с 2-х недельным сроком, выявили дальнейшее снижение физиологических показателей - кроме локомоции снижались и стойки - на 30%. Параллельно увеличивалась тревожность животных, что эмоционально выражалось в дальнейшем увеличении груминга в 1,7 раза, а также в этот период увеличивались уринации (на 50%) и дефекации (на 23%). На фоне уменьшения катехоламинов (стадия резистентности адаптации) происходила перестройка метаболических процессов, выражающихся в перестройке периферического кровообращения (увеличение КН на 35%, активности кининазы на 28% и ПКН на 22%), что вело к увеличению ферментов в крови - б-амилазы - в 2,6 раз, АсАТ - на 27%.

Со стороны показателей углеводного обмена - несколько уменьшился уровень глюкозы и молочной кислоты. Липидный обмен характеризовался некоторым уменьшением в-липопротеидов, но увеличением ХС (до 28%) и триглициродов (на 52%), что свидетельствует о переходе энергетических ресурсов с углеводного на липидный. Увеличивалось также содержание Р неорганического (до 2-х раз) и Са (до 89%) в крови.

Несколько уменьшился уровень оксипролина, но все - таки оставался выше контроля на 65%, что указывает на дистрофические изменения соединительно-тканных структур организма животных.

Через 12 недель эксперимента у животных, находившихся в 1 цехе, физиологические показатели несколько стабилизировались, по сравнению с 4-х недельным экспериментом - локомоции и стойки (двигательные показатели уменьшились до 12%), также как и эмоциональные показатели.

Повторный пик увеличения катехоламинов приводит к повторной активации ККС (увеличение активности кининаз и калликреина), что в свою очередь поддерживает лабилизацию клеточной мембраны и увеличение б-амилазы в 2 раза, АсАТ - на 71% и ГГТФ - на 52%.

Токсическое воздействие производственных факторов вызывает дальнейшее увеличение молочной кислоты (до 81%) и дальнейшее увеличение триглициридов (до 71%), Р неорганического и кальция.

Уровень оксипролина увеличен на 43%, то есть несколько меньше, чем у 4-х недельных животных, что, по-видимому, можно связать с нарастанием склерозирования в соединительной ткани (оксипролин из растворимой фракции переходит в нерастворимую).

У животных, находящихся в цехе № 2 (по производству тетрахлорида титана), через 2 недели эксперимента установлены однонаправленные, но несколько менее выраженные изменения нейро-гуморальной регуляции и метаболизма, по сравнению с цехом № 1. Физиологические показатели - уменьшение двигательной активности и увеличение эмоциональной реактивности были несколько меньше изменены. Однако, уровень адаптационного гормона - А в печени был также высок (в 2 раза) и для этого цеха характерно увеличение НА в сердце (на 18%) и АсАТ (на 14%). Активация углеводного и липидного обменов также была ниже, чем в 1 цехе. Характерным было увеличение триглициридов - легко мобилизированных липидов для энергетических нужд.

У животных, находившихся на территории цеха № 2 - 4 и 12 недель изменения были однонаправленными с данными в цехе № 1, но менее выраженными. Снижение двигательной активности (локомоции), увеличение эмоциональной активности (груминг, уринация ). Отличительной особенностью были изменения метаболизма НА в сердце, АсАТ в крови и увеличение креатинина, что указывало на то, что в данном цехе точками приложения производственных факторов являются сердце и почки.

У животных, находившихся в цехе № 3 (по производству титановой губки), выявлена однонаправленность физиологических и биохимических изменений в биологических жидкостях организма животных, но изменения были значительно меньшими, чем в цехе № 2. Отличительной особенностью через 2 недели было уменьшение двигательной активности, увеличение эмоциональной напряженности, увеличение молочной кислоты, ТГ, в-липопротеидов и Р неорганического больше и увеличение скринингового фермента почек - ГГТФ и ЛДГ по сравнению с животными, находившимися во 2 цехе, что, по-видимому, предполагает большую заинтересованность печеночной ткани при адаптивных перестройках.

У животных, находившихся на территории цеха № 3, в 4-х недельный эксперимент увеличивалась эмоциональная реактивность, особенно дефекация и уринация, А и НА в печени уменьшались, а в надпочечниках увеличивались, что указывает на интенсификацию синтеза КА. Продолжающееся увеличение ЛДГ и ГГТФ, увеличение общего билирубина указывает на токсическое поражение печени. Уменьшение показателей углеводного обмена и увеличение показателей липидного обмена (ТГ на 52%) подтверждает нарастающий переход энергообеспечения с углеводного на липидный. Из микроэлементов увеличивается Р неорганический - в 2 раза.

Через 12 недель от начала эксперимента, по сравнению с 4-х недельным сроком, выявлено увеличение эмоциональной напряженности. Увеличивался НА в сердце (+13%) и уменьшились А и НА в надпочечниках, что свидетельствует об опустошении депо КА, вследствие их повышенной потребности. Активируются все звенья ККС - КН в 2 раза, кининазы - на 40%, что ведет к уменьшению предшественника ПКН (на 41%) и повышенному образованию свободных кининов (уменьшение брадикининогена на 45%). Лабилизация мембран вызывает увеличение б-амилазы - в 2,1 раза, что свидетельствует о повышении функции поджелудочной железы. Из показателей углеводного обмена следует отметить нарастание молочной кислоты как следствие гипоксии тканей и незавершенного гликолиза, липидного - продолжающееся увеличение в-липопротеидов (на 21%). Увеличение показателей азотистого обмена (креатинина на 20%) свидетельствует о поражении почек у животных. Увеличение Р неорганического в 2,1 раз, Са - в 2 раза указывает на дистрофические процессы в костной ткани.

Таким образом, результаты натурного эксперимента (с помещением животных на территориях цехов № 1, № 2 и № 3) выявили общетоксическое действие промышленных факторов и действие пыли: наиболее выраженное в цехе № 1, менее выраженное в цехе № 2 и наименее выраженное в цехе № 3.

Из физиологических показателей у животных в цехе №1 через 2 недели снижаются локомоции, через 4 и 12 недель происходит дальнейшее снижение локомоций и стоек. Эмоциональная активность увеличивается через 2 недели (груминг), а через 4 и 12 недель не только груминг, но и уринация и дефекация. Патогенетическими показателями в цехе № 1 являются: через 2 недели - увеличение А и НА в печени, активация внутриклеточных ферментов, увеличение атерогенных липидов и изменение азотистого обмена и оксипролина. Через 4 недели - уменьшение НА в печени на фоне активации ККС и перестройка общего метаболизма (ферментного, углеводного, липидного, азотистого, пигментного). Через 12 недель отмечали повторную активацию А и НА - изменения КА соответствуют стадиям адаптационного процесса на фоне дальнейшей активации метаболизма.

В цехе № 2 однонаправленные изменения имели меньшую выраженность, но особенностями были снижение двигательной активности и увеличение эмоциональной напряженности, увеличение легко мобилизируемых липидов - ТГ. Через 4 и 12 недель - особенностями были изменения НА и ферментов в сердце и почечных ферментов.

У животных, находившихся в цехе № 3, изменения были меньше выражены, чем в цехе № 2, на ранней стадии особенностями явились изменения физиологических показателей - увеличение эмоциональной напряженности, увеличение скрининговых ферментов печени, молочной кислоты, атерогенных липидов. В более поздние стадии опыта (через 4 и 12 недель) стадия компенсации проявлялась уменьшением КА в надпочечниках и увеличением НА в сердце.

Увеличение ферментов и показателей ККС указывали на нарушение функции почек и поджелудочной железы.

Глава 5. Биохимические показатели у стажированных рабочих АО «УК ТМК»

Результаты выявленных в остром, подостром и хроническом экспериментах (при введении интратрахеально пыли титанового шлака), а также при натурном эксперименте (с помещением экспериментальных животных на территории цехов № 1, № 2 и № 3) приоритетных тестов выявили общую направленность адаптационных и компенсаторных показателей у здоровых рабочих. Так, если экскреция адаптационного гормона (А) и медиатора кровообращения (НА) тестировалась в пределах нормальных колебаний, но выявлялись существенные изменения в метаболизме КА: предшественник КА - Д был уменьшен на 24,5%, медиатор ЦНС - дофамин - на 23%, соответственно были нарушены превращения ДА в НА (-23%), Д/ДА (-16%) и отношение предшественника к общей сумме гормонов и медиаторов (-19%).

Таким образом, можно предположить, что симпато-адреналовая регуляция у рабочих АО «УК ТМК» функционирует в определенной напряженности, осуществляя и регулируя адаптацию к производственным факторам.

Однако параллельно наблюдали определенные изменения других регулирующих систем: калликреин-кининовой (КН +2,2 раза), ферментного профиля, характеризующего метаболизм в печеночной и сердечной тканях - увеличение ГГТФ на 63%, АсАТ на 57%. В печеночной ткани это подтверждается увеличением прямого билирубина (+26%).

Энергетический обмен характеризовался накоплением промежуточных продуктов - молочной (+54%) и пировиноградной (+25%) кислот, что свидетельствует о гипоксии тканей организма, когда гликолиз идет не до конечных стадий в виду кислородного голодания. Отмечается увеличение уровня общих липидов на 27%.

Деструктивные изменения в соединительно-тканных структурах характеризовались увеличением ОП (на 44%), в почечной ткани - появлением креатинина (+9%).

Увеличение Mg в крови на 24%, по-видимому, характеризовалось его повышенной концентрацией в рабочих помещениях.

Таким образом, общий анализ приоритетных тестов у рабочих выявил однонаправленность с данными эксперимента, но количество тестов значительно уменьшено ввиду того, что у здоровых рабочих более высокоорганизованные уровни адаптации и компенсации, чем у животных.

Для характеристики динамики адаптационных изменений у здоровых рабочих нами анализированы изучаемые комплексы показателей по стажу.

Так, при стаже до 3-х лет - экскреция КА в пределах нормы, но имеется тенденция к уменьшению Д, что свидетельствует о повышенном расходе КА, а также тенденция к увеличению образования А (гормона адаптации) из НА в процессе синтеза.

Адаптационные изменения в организме рабочих свидетельствуют об изменении периферического кровообращения (увеличение КН в 2 раза) и повышение его предшественника - ПКН на 19%.

О нагрузке на печень и сердце свидетельствуют изменения АсАТ (на 39%), на печень - прямого билирубина (на +22%).

О гипоксии внутренних органов говорят увеличение молочной (на 54%) и пировиноградной (на 22%) кислот.

О тенденции перехода энергообеспечения на липидный свидетельствует увеличение общих липидов на 15%, в-ЛП на 11%.

Из микроэлементов установлено увеличение Mg на 25%.

При стаже 3-5 лет, по сравнению с 3-х летним стажем, выявленные изменения несколько стабилизируются: КН увеличилась в 1,5 раза, хотя связанные с белком его формы ПКН увеличиваются на 34% на фоне снижения общей кининазной активности на 38%.

Из ферментного спектра наиболее увеличивалась активность АсАТ (на 89%) и продолжали увеличиваться прямой билирубин и магний.

Увеличивался креатинин. Эти изменения, по-видимому, характеризуют фазу резистентности стресса.

При стаже 6-10 лет выявленные изменения вторично активируются. Уменьшается предшественник КА - Д на 33%, что характеризует повышенную потребность организма в КА. Резко увеличивается переход Д в ДА (медиатор ЦНС). Вторично активируется ККС, что проявляется увеличением КН в 2,4 раза и активности кининаз на 20%.

Ферментный профиль характеризуется активностью ГГТФ в 2 раза, АсАТ на 72% и АлАТ на 21 %, что отражает активацию метаболизма в печени и сердечной мышце.

Значительно увеличивается молочная кислота (на 84%).

Активируется жировой обмен - общие липиды увеличиваются на 26%, в-ЛП - на 13%. Продолжает увеличиваться креатинин (на 12%).

Из микроэлементов увеличивается магний - на 30%.

Выявленные изменения свидетельствуют о компенсаторных изменениях в организме рабочих к факторам рабочей среды.

При стаже свыше 10 лет наблюдали значительное уменьшение предшественника КА - Д на 52% и ДА - на 25%.

Активность калликреина продолжает нарастать в 2,7 раз.

Резко увеличивается активность ГГТФ (в 3 раза), АсАТ (на 23%), прямой билирубин, молочная кислота - на 60%, креатинин - на 9%.

Деструктивные процессы отражались в увеличении ОП на 44%.

При данном стаже значительно увеличиваются общие липиды - на 57%.

Из микроэлементов увеличивалось соединение железа - на 26%.

Выявленные изменения, по-видимому, характеризуют переходную стадию от компенсаторных изменений к предпатологическим.

Анализ выявленных изменений у рабочих, работающих в цехах № 1, № 2 и № 3 выявил наибольшие изменения у рабочих в цехе № 1 (увеличение КН в 3,3 раза, ГГТФ - в 2 раза, молочной кислоты - на 68%, ОП в моче - на 74%, ОЛ - на 32%, в-ЛП - на 22%, билирубин прямой - на 37% и железа - на 33%).

Несколько меньшими были изменения показателей у рабочих в цехе № 3 (увеличение КН в 2,2 раза, ГГТФ - на 60%, АсАТ - на 36%, КФК - на 32%, молочной кислоты - на 53%, ОП в моче - на 43%, ТГ - на 29%) и в цехе № 2 (увеличение КН в 2 раза, ГГТФ - на 48%, АсАТ - в 2,4 раза, молочной кислоты - на 62%, Оп в моче - на 35%, ОЛ на 36%, увеличение магния - на 17%).

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Рис 17. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих производства титана

Рис 18. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих со стажем работы до 3-х лет

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Рис 19. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих со стажем работы от 3-х до 5-ти лет

Размещено на http://www.allbest.ru/

1

Рис 20. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих со стажем работы 6-10 лет

Рис 21. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих со стажем работы 10 и более лет

Рис 22. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих цеха № 1 (по производству магния)



Рис 23. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих цеха № 2 (по производству тетрахлорида титана)

Рис 24. Концептуальная модель формирования стресса и защитных механизмов у рабочих цеха №3 (по производству титановой губки)

Выводы

1. Экспериментальные исследования, проведенные на белых крысах - самцах путем интратрахеального введения 50 мг пыли титанового шлака, выявили физиологические и патогенетические биохимические тесты, из числа изученных:

- в остром опыте (2 недели) - уменьшение двигательных и увеличение эмоциональных показателей, увеличение адреналина в печени, в крови - молочной кислоты, железа, Р неорганического, активность ЩФ и в моче - оксипролина, что характеризовало фазу адаптации к стрессу;

- в подостром опыте - дальнейшее увеличение эмоциональных показателей и уменьшение двигательной активности, увеличение норадреналина в печени, в крови - Р неорганического, молочной кислоты и ОП в моче, а также увеличение Fе, щелочной фосфатазы и калликреина в крови, что характеризовало фазу компенсации стресса;