Сравнительная оценка антибактериальной активности двух антисептиков in vivo и in vitro

Размещено на http://www.allbest.ru/

Сравнительная оценка антибактериальной активности двух антисептиков in vivo и in vitro

Нестерова С.В. Анохина Т.В. Шаповал О.Г. ФГБОУ ВО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского» Минздрава России

Резюме

Антисептические и дезинфицирующие средства имеют важное значение в предотвращении инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Их разнообразие на современном этапе вызывает вопрос о возможных различиях в антимикробной активности, несмотря на отсутствие избирательности действия. Методом двукратных серийных разведений при микробной нагрузке 5Ч105КОЕ/мл изучена антимикробная активность двух комплексных антисептиков на основе изопропилового спирта («Стериллиум» и «Изосепт») в отношении стандартных штаммов Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus FDA 209P, Pseudomanas aeruginosa ATCC 27853. Установлено, что «Стериллиум» не оказывал бактерицидного действия на опытные штаммы, бактериостатическое проявилось только в отношении штаммов E.coli ATCC 25922, S.aureus FDA 209P в максимально взятой концентрации 375000 мкг/мл. Изосепт проявил большую антимикробную активность в отношении опытных штаммов: минимальная подавляющая концентрация (бактериостатическая и бактерицидная) для P.aeruginosaATCC 27853 составила 5080мкг/мл, штаммы E.coliATCC 25922 и S.aureusFDA 209P не дали роста во всех опытных концентрациях (МПК ? 2540 мкг/мл). Количественная эффективность подавления роста микрофлоры кожи рук по результатам смывов, взятых до и после обработки антисептиками у 30 студентов, оказалась для обоих средств одинаковой.

Одним из важнейших элементов санитарно-эпидемиологического благополучия населения страны составляет ее национальная безопасность - организация и неуклонное проведение комплексных мер по неспецифической профилактике и борьбе с возникновением и распространением случаев инфекционных заболеваний, в т.ч. связанных с оказанием медицинской помощи. В комплексе профилактических и противоэпидемических мер по борьбе с упомянутыми инфекциями входят дезинфектологические технологии[2,3,4].

Усовершенствование качества медицинской помощи, увеличение спектра лечебно-профилактических и диагностических манипуляций, внедрение новых технологических подходов к сохранению здоровья людей одновременно приводит и к возникновению инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП). ИСМП представляют серьезную проблему общественного здравоохранения в силу своей распространенности, отрицательного влияния на показатели заболеваемости, смертности и степени тяжести состояния пациентов, а также опасности для медицинских работников и значительного экономического ущерба. В современных условиях проблема ИСМП достаточна актуальна, т.к. заболеваемость во многих странах значительна [1].

По данным государственных докладов “ О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2016 году по Саратовской области” и “ О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2016 году» в медицинских организациях Саратовской области зарегистрировано 43 случая ИСМП, что на 30,6% ниже уровня регистрации в 2015 г. (62 случая). Наибольшее число случаев инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи зарегистрировано в учреждениях родовспоможения 76,7%,что больше на 18,7% по сравнению с 2015г, в амбулаторно-поликлинических учреждениях - 9,3%,что отмечает снижение на 14,9% , в хирургических стационарах- 9,3%, прочих учреждениях - 4,6% [6]. В 2016 году в медицинских организациях Российской Федерации случаев ИСМП выявлено на 7,7 % больше, чем в 2015 году (24 771 и 23 006 случаев на 2016 и 2015 года соответственно). Официальная статистика, как правило согласно экспертным оценкам, занижает реальную заболеваемость госпитальными инфекциями. Такая разница возможна из-за несовершенства надзора и учета за ИСМП в большинстве российских медицинских учреждений, своевременного выявления случаев ИСМП и принятия адекватных мер в целях их предупреждения [5].

Наибольшее число случаев ИСМП регистрируется в учреждениях родовспоможения, хирургических стационарах. По данным, представленным в «Национальной Концепции РФ по профилактике инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи», разработанной в 2011 г., наблюдаемые в последние годы в России случаи регистрации и внедрения в практику здравоохранения неэффективных антисептических и дезинфекционных средств связаны с нарушениями в экспертной оценке новых средств, и подчеркивается необходимость создания новых методов определения чувствительности госпитальных патогенов к антимикробным препаратам[1,3].

Возникает формирование и широкое распространение в условиях ЛПУ полирезистентных внутрибольничных штаммов условно патогенных микроорганизмов, отличающихся повышенной устойчивостью к воздействию факторов окружающей среды, в том числе и к дезинфицирующим средством, что нашло отражение в СанПиНе 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность», разделе II «Организация дезинфекционных и стерилизационных мероприятий» ( в п. 1.9. указывается, что «в целях предупреждения возможного формирования резистентных к дезинфектантам штаммов микроорганизмов следует проводить мониторинг устойчивости госпитальных штаммов с последующей их ротацией при необходимости»), а также согласно МУ 3.5.1.3439-17 “Оценка чувствительности к дезинфицирующим средствам микроорганизмов, циркулирующих в медицинских организациях” высокой эффективностью мер по предупреждению ИСМП является необходимость проводить эпидемиологический надзор за уровнем и распространенностью ИСМП, микробиологическую диагностику ИСМП, санитарно-бактериологические исследования объектов внутрибольничной среды, оценку чувствительности микроорганизмов к ДС, организацию и проведение мер по повышению эффективности дезинфекционных мероприятий[7, 8].

В настоящее время существует большое количество антисептиков и дезинфектантов под разными торговыми названиям, в основе которых могут находиться химические соединения группы галогенов (в том числе соединения активного хлора), окислители, четвертичные аммониевые соединения (ЧАС), альдегиды, спирты (этанол, изопропиловый спирт).

В отличие от антибиотиков они не имеют избирательности действия на бактериальные клетки и эффективно воздействуют на покоящиеся формы.

Однако все чаще стали отмечаться случаи перекрестной резистентности к дезинфицирующим средствам и антибиотикам, что можно объяснить сходством воздействия на мишени в бактериальной клетке. Для предупреждения снижения эффективности дезинфекционных мероприятий необходимо проводить мониторинг устойчивости госпитальных штаммов с последующей их ротацией при необходимости[8].

Современный дезинфектант должен отвечать нескольким основным требованиям, без осуществления которых ни один препарат не может быть рекомендован к применению:

1. Микробиологическая эффективность;

2. безопасность в применении

3. совместимость с обрабатываемыми материалами (за "золотой стандарт" здесь принимается воздействие, которое оказывает на материалы глутаровый альдегид);

4. экономичность;

5. степень устойчивости к органической нагрузке (например, крови);

6. скорость действия (требуемая экспозиция);

7. наличие запаха;

8. отсутствие воспламеняемости и взрывоопасности;

9. 9.простотав использовании [9]

Факторы, оказывающие влияние на антимикробную активность растворов медицинских дезинфектантов:

§ достижимость бактерий - должен быть контакт дезинфицирующего средства с микроорганизмами;

§ температура - активность всех дезинфектантов повышается при повышение температуры;

§ концентрация - должна быть не ниже рекомендованной;

§ объем - при одинаковой концентрации антимикробная эффективность дезинфицирующего средства тем выше, чем больше его объем;

§ рН - некоторые дезинфектанты чувствительны к изменению рН, например, вещества на основе глутарового альдегида активны только в щелочной среде;

§ время - при одинаковых условиях грамположительные бактерии погибают быстрее грамотрицательных[1]

Целью исследования послужило:

1) определение чувствительности стандартных штаммов бактерий к двум антисептикам - «Стериллиуму», содержащему в качестве действующих веществ пропанол в концентрации 75%, и «Изосепту», в составе которого 65% изопропиловый спирт и 0,2%дидецилдиметиламмония хлорид (ЧАС);

2) сравнение эффективности обратоки рук двумя антисептиками (“Стериллиум” и “Изосепт”).

Материалы и методы: 1)чувствительность 3 штаммов (EscherichiacoliATCC 25922, StaphylococcusaureusFDA 209P, Pseudomanasaeruginosaa ATCC 27853) определяли методом двукратных серийных разведений в бульоне Мюллера-Хинтона при микробной нагрузке 5Ч10⁵КОЕ/мл. Посевы инкубировали при 37°С в течение суток, после чего при наличии видимого роста в контроле (питательная среда без антисептика) определяли минимальную подавляющую концентрацию (МПК), для установления характера которой (бактерицидная или бактериостатическая) осуществляли высев на мясо-пептонный агар.

2) у 30 студентов стерильными ватными тампонами, смоченными в физиологическом растворе, тщательно протирали околоногтевые и межпальцевые пространства обеих рук. После отбора проб засевали чашки Петри с мясопептонным агаром. Спустя 15 минут брали повторный смыв с рук испытуемого. Посевы инкубировали при температуре 37°С в течение 24 ч и затем подсчитывали количество выделенных колоний.

антисептик медицинский бактерия чувствительность

Выводы

Установлено, что: 1) «Стериллиум» во всех разведениях не оказывает бактерицидного действия на штаммы E.coli ATCC 25922, S.aureus FDA 209P, что не исключает его наличие при отсутствии разведения. Бактериостатическое действие его в отношении упомянутых штаммов проявилось только в первом двукратном разведении (концентрация 375000 мкг/мл). Бактерицидного и бактериостатического действия на штамм P.aeruginosa ATCC 27853 данный антисептик во взятых разведениях не оказал. Антисептик «Изосепт» проявил большую антимикробную активность в отношении опытных штаммов: его МПК (бактериостатическая и бактерицидная) для P.aeruginosa ATCC 27853 составила 5080мкг/мл, что соответствует разведению в 128раз. На штаммы кишечной палочки и золотистого стафилококка все опытные разведения оказали бактериостатическое и бактерицидное действие, т.е. МПК ? 2540 мкг/мл.

Согласно данным литературы концентрация антисептика - хлоргексидина составляет 8мкг/мл, что значительно меньше значений, полученных нами.[1] Это можно объяснить тем, что антисептические растворы, взятые в опыт, имеют иную химическую структуру и комплексный состав, т.е. кроме действующего агента содержат отдушки, смягчающие средства для кожи, которые могут нарушать действие препарата при испытании invitro.

2) Установлено, что до проведения обработки количество микроорганизмов - представителей микрофлоры кожи указанных биотопов у разных студентов различно, что во многом связано с соблюдением правил личной гигиены, состоянием противомикробной резистентности. Следует отметить, что правая рука у большинства обследуемых-правшей оказалась более контаминированной по сравнению с левой, что, очевидно, связано с большим содержанием транзиторной микрофлоры на ней как на «рабочей». После обработки дезинфицирующими средствами смывы, взятые у всех обследуемых, не дали видимого роста или показали рост единичных колоний. Несмотря на то, что в условиях опыта in vitro антисептики проявили разную активность, по количественной эффективности обработки рук они не уступали друг другу.

Таким образом, согласно полученным результатам «Изосепт» в условиях нашего опыта проявил большую антимикробную активность в отношении стандартных штаммов бактерий, чем «Стериллиум». Однако результаты могут измениться при тестировании химически чистых веществ, а не комплексных препаратов.

Таким образом, дезинфектанты и антисептики - неотъемлемая часть клинической медицины и широко используются для предотвращения распространения внутрибольничных патогенов в условиях стационара.

Литература

1. Детушева Е.В. Моделирование биопленки у бактерий на плотной питательной среде и изучение закономерностей формирования устойчивости к тризоклану: дис. ... кандидата биологических наук / Е.В. Детушева; Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии. Оболенск,2016 г. 157с.

2. Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности. Р 4.2.2643-10. Введ. 2010-06-01. URL:http://docs.cntd.ru/document/1200086231

3. Национальная Концепция профилактики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи.Введ.2011-11-06. URL:http://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/70000121/#70000121

4. О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения: Федер.закон [принят Гос.Думой12.03.1999]

URL:http://www.consultant.ru/cons/cgi/online.cgi?req=doc&base=LAW&n=219307&fld=134&dst=1000000001,0&rnd=0.21031415003995663#0.

5. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в России в 2016 году: Государственный доклад.-М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека,2017

URL:http://niisg.ru/files/gosudarstvennyy-doklad-2016.pdf

6. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2016 году по Саратовской области: М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2017 URL: http://64.rospotrebnadzor.ru/documents/10156/115123/О+санитарно-эпидемиологической +обстановке+ в+Саратовской+области+в+2016+г.

7. Оценка чувствительности к дезинфицирующим средствам микроорганизмов, циркулирующих в медицинских организациях. МУ 3.5.1.3439-17.Введ. 2017-03-13

8. Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность. СанПиН2.1.3.2630-10. Введ. 2010-05-18. URL:http://docs.cntd.ru/document/902217205.

9. Современный подход к выбору дезинфицирующих средств в системе профилактики ВБИ) / И.Ф. Веткина [и др.] // ФАРМиндекс-Практик. 2005. Вып.7. С.13-20

Размещено на Allbest.ru