Клинические и экспериментальные аспекты изучения молекулярно-биологических маркеров при злокачественных новообразованиях

По уровню экспрессии Flk-1 на стромальных клетках опухоли были разделены на опухоли с низкой экспрессией рецептора (менее 50%) - 4 из 11 (36%) и высокой степенью экспрессии (более 50%) - 7 из 11 (64%). В целом количество Flk-1-положительных клеток, по сравнению с Flt-1-положительными клетками, было выше (данные статистически значимые). Но при этом, высокая степень экспрессии Flk-1 коррелировала с экспрессией Flt-1 на стромальных клетках (р=0,048).

Стромальный компонент опухоли был единственным типом клеток, окрашивающихся на Ki-67. Гигантские остеокласт-подобные клетки были всегда отрицательными по Ki-67. По количеству положительных клеток опухоли были разделены на 2 группы с низкой (Ki-67 5%) и высокой (Ki-67 5%) пролиферативной активностью. Из 11 опухолей 4 (36%) обладали низкой пролиферативной активностью (Ki-67 5%), 7 (64%) - высокой пролиферативной активностью (Ki-67 5%).

Высокая степень экспрессии Flk-1 ( 50%) и экспрессия Flt-1 значимо коррелировала с высокой пролиферативной активностью ( 5%) (р=0,031, р=0,048, соответственно). Результаты представлены на рисунке 6.

Рисунок 6 Зависимость пролиферативной активности от уровня экспрессии Flk-1 и Flt-1 на стромальных клетках (все случаи имели сильную экспрессию VEGF)

Таким образом, показана высокая зависимость гигантоклеточной опухоли от VEGF рецептор-лигандной системы, что может быть в дальнейшем использовано для разработки режимов лечения больных, которым не показано хирургическое удаление опухоли, на основе Авастина.

Полученные результаты позволяют считать определение молекулярно-биологических факторов основополагающими в индивидуальном прогнозировании течения заболевания и эффективности противоопухолевой терапии. Только комплексный подход может дать клиницисту возможность по новому решать проблемы индивидуального прогнозирования для больных злокачественными опухолями, а следовательно оптимизировать подходы к терапии и улучшить послеоперационный мониторинг.

ВЫВОДЫ

1. Разработаны критерии оценки результатов иммуногистохимического анализа маркеров ангиогенеза, апоптоза и пролиферации (р53, Bcl-2, Bax, Ki-67, HER2/neu, CD95L, VEGF, Flt-1, Flk-1, bFGF, ЦОГ-2, тимидин фосфорилаза, тимидилат синтетаза, АГТ, PDGFR beta, c-Кit).

2. В результате многофакторного анализа при раке молочной железы установлено, что после операции при стадии I-IIА экспрессия ТС является независимым фактором прогноза укорочения безрецидивной выживаемости. При стадии III гиперэкспрессия Bcl-2 предсказывает улучшение безрецидивной выживаемости (Bcl-2+ - 69,2%, Bcl-2- - 33,3%). Гиперэкспрессия HER-2 существенно ухудшает безрецидивную выживаемость независимо от других маркеров (28,6% при HER-2+ и 63,3% при HER-2- случаях).

3. При колоректальном раке гиперэкспрессия ТС и VEGF предсказывают высокий риск развития метастазов после удаления первичной опухоли (68% и 41% для ТС+ и ТС- больных, 63% и 37% для VEGF+ и VEGF- больных, соответственно). Отмечено значительное увеличение медианы безрециливной выживаемости для группы больных c TC и VEGF отрицательными опухолями.

4. При меланоме глаза установлено, что высокая экспрессия Вах в сочетании с низкой экспрессией Bcl-2 предсказывает высокий риск развития метастазов при сходных клинических характеристиках (Bcl-2-/Bax+ - 75%; Bcl-2-/Bax- - 23,1%).

5. При метастазах меланомы кожи лечебная эффективность химиотерапии с включением нитрозопроизводных зависит от экспрессии АГТ в опухоли. При АГТ-отрицательных опухолях эффективность составила 70,6%, при АГТ-положительных - 14,3%.

6. При метастазах гастроинтестинальных сарком желудочно-кишечного тракта высокие результаты лечения Иматинибом достигнуты в случаях низкого количества Ki-67-положительных клеток, отсуствия экспрессии Bcl-2, Bax, PDGFR beta. Время до прогрессирования составляет более 2 лет.

7. При аденокистозном раке трахеи и полости носа установлена высокая экспрессия c-Kit (в 78,6% случаев) и VEGF (в 92,6% случаев), что создает перспективу использования таргетных препаратов.

8. При саркомах мягких тканей дана характеристика некторых молекулярно-биологических маркеров. Гиперэкспрессия HER-2 установлена при синовиальных саркомах (в 25% случаев) и рабдомиосаркомах (в 15% случаев). Гиперэкспрессия ТФ отмечена при синовиальное саркоме (65,6%) и лейомиосаркоме (77,8%). Злокачественные шванномы имеют экспрессию c-Kit в 25% случаев.

9. Доказано, что гигантоклеточная опухоли кости является природной моделью для изучения ангиогенеза. Экспрессия VEGF составляет 100%, рецепторов к VEGF: Flt-1 - 73% и Flk-2 - 100%. Стромальные клетки, составляющие основу гигантоклеточной опухоли, являются новой моделью для фундаментальных исследований в клинической онкологии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки экспрессии молекулярно-биологических маркеров в опухоли необходимо использовать разработанные критерии оценки результатов иммуногистохимического анализа маркеров ангиогенеза, апоптоза и пролиферации (р53, Bcl-2, Bax, Ki-67, HER2/neu, CD95L, VEGF, Flt-1, Flk-1, bFGF, ЦОГ-2, тимидин фосфорилаза, тимидилат синтетаза, АГТ, PDGFR beta, c-Кit).

2. Экспрессию молекулярно-биологических маркеров в ткани опухоли необходимо учитывать для определения риска метастазирования опухоли и выбора рациональной химиотерапии.

ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРАТЦИИ

1. Личиницер М.Р., Степанова Е.В., Перевощиков А.А., Яншин А.А. Избыточная экспрессия HER2/neu и новые лечебные возможности герцептина. // Международный журнал медицинской практики, 2000, №9, с.52-57.

2. А.Ю. Барышников, Е.В.Степанова, М.Р. Личиницер. Оценка ангиогенеза опухолей человека. // Успехи современной биологии. 2000, т. 120, № 6, с.599-604.

3. Lichinitser M., Garin A., Gorbunova V., Yakovlev V., E.V.Stepanova, Semenov N., Bazin I., Gutnik V., Besovа N., Reutovа E. Oxaliplatin (Oxa) combined with 4-hour 5-fluoro-uracil (5-FU) infusion and folinic acid (FA) every 2 weeks in patients with metastatic colorectal cancer (MCRC). // Proc Am S Clin Oncol, 2001, v. 20, p.143a. Abstract 569.

4. Степанова Е.В., Барышников А.Ю. Молекулярно-биологические маркеры рака яичников. // Сборник статей, приуроченный к Европейской школе по онкологии, посвященной раку яичников, Москва, 2001, с.24-30.

5. Лихванцева В.Г. Личиницер М.Р., Степанова Е.В., Третьяк Е.Б. Особенности ангиогенеза у больных увеальной меланомой при первично-множественных опухолях. // Достижения и перспективы офтальмоонкологии. Сборник трудов юбилейной научно-практической конференции, Москва. 2001, с.15-19.

6. Бровкина А.В., Лихванцева В.Г., Зиангирова Г.Г., Степанова Е.В., Каплина А.В., Жильцова М.Г. Первый опыт клинического применения рекомбинантного фактора некроза опухоли при увеальной меланоме. // Достижения и перспективы офтальмоонкологии. Сборник трудов юбилейной научно-практической конференции, Москва. 2001, с.89-94.

7. Дбар Ж.Н., Полушкина И.Н., Степанова Е.В., Шишкин Ю.В., Барышников А.Ю. Роль маркеров апоптоза, пролиферации и ангиогенеза в прогрессировании рака яичников. // Медицинская иммунология 2002, т.4, № 2, с.293-294.

8. Степанова Е.В., Дбар Ж.Н., Лихванцева В.Г., Давыдов А.А., Абрамов М.Е., Бровкина А.Ф., Барышников А.Ю. Личиницер М.Р. Экспрессия апоптоз-связанных белков в увеальной меланоме.// Медицинская иммунология, 2002, т.4, № 2, с.311.

9. Степанова Е.В., Полушкина И.Н., Дбар Ж.Н., Ермилова В.Д., Шишкин Ю.В., Барышников А.Ю., Личиницер М.Р.. Молекулярно-биологические маркеры рака яичников. // Российский биоте-рапевтический журнал, 2002, т. 1, № 4, с.14-20.

10. Степанова Е.В., Кешта Р.А., Бохян Б.Ю., Петровичев Н.Н., Дбар Ж.Н., Алиев М.Д., Барышников А.Ю., Личиницер М.Р.. Экспрессия c-kit в саркомах мягких тканей: перспективы использования Гливек. // Российский биотерапевтический журнал, 2002, №4, с.21-23.

11. Степанова Е.В., Харатишвили Т.К., Личиницер М.Р., Барышников А.Ю., Соловьев Ю.Н., Трапезников Н.Н.. Прогностическое значение экспрессии Р53, HER2/neu, Ki-67 и VEGF в хондросаркомах. // Архив патологии, 2002 №6, с.9-13.

12. Степанова Е.В. Антиангиогенная терапия: новые возможности лечения злокачественных заболеваний. // Практическая онкология, 2002, №4, с.246-252.

13. Ганьшина И.П., Степанова Е.В.. Герцептин: новые возможности в лечении рака. // Фарматека, 2002, №12, с.28-32.

14. Полушкина И.Н., Личиницер М.Р., Степанова Е.В., Дбар Ж.Н., Вышинская Г.В., Стенина М.Б. Изучение эффективности комбинации паклитаксела и карбоплатина при распространенном раке яичников в первой линии химиотерапии. Оценка прогностического значения молекулярно-биологических маркеров р53, Bcl-2 Bax. // Вестник РОНЦ им. Блохина РАМН, 2002, № 2, с.19-21.

15. Полушкина И.Н., Дбар Ж.Н., Степанова Е.В. Молекулярно-биологические маркеры, характеризующие апоптоз, пролиферацию и ангиогенез при раке яичников. // Вестник РОНЦ им. Блохина РАМН, 2002, № 4, с.10-17.

16. Степанова Е.В. Фундаментальные исследования в сфере создания новых лекарств для лечения солидных опухолей. // Фарматека, 2002, №12, с.4-9.

17. Способ прогнозирования клинического течения уве-альной меланомы Патент на изобретение №2192812, 2002 г

18. Кешта Р.А., Степанова Е.В. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров и их прогностическая значимость при синовиальной саркоме. // Современная онкология, 2002, т.4., №4., с.188-190

19. Степанова Е.В., Загрекова Е.И., Ермилова В.Д., Турбин Д., Петровичев Н.Н., Высоцкая И.В., Дбар Ж.Н., Пащенко Н.В., Барышников А.Ю., Личиницер М.Р. Молекулярно-биологические маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы I-IIА стадии. // Архив патологии, 2003, №3 с.14-17.

20. Ганьшина И.П., Степанова Е.В. Место Герцептина в онкологической практике. // Русский медицинский журнал, 2003, № 11, с.680-684.

21. Lichinitser M.R., Stepanova E.V., Polushkina I.N., Ermilova V., Dbar J., Meshcheryakov .A., Baryshnikov A.Yu. Molecular biomarkers of ovarian cancer. // Proc Am S Clin Oncol, 2003, v.22, p.898.

22. Stepanova E.V.., Dbar J.N., Y. Shishkin. Molecular biomarkers in ovarian cancer. // Eur J Cancer 2003, V1, Suppl.5, p. S56 #176.

23. Степанова Е.В. Стандартизация иммуногистохимического определения гиперэкспрессии HER2/neu при раке молочной железы. // Фарматека, 2003, №14, с.36-38.

24. Патютко Ю.И., Личиницер М.Р., Сагайдак И.В., Е.В. Степанова, Семенов Н.Н. Молекулярно-биологические маркеры как факторы прогноза у больных после хирургического лечения по поводу метастазов колоректального рака в печень. // Анналы хирургической гепатологии, 2003, т.8, №2, с.245-246.

25. Способ прогнозирования клинического течения увеальной меланомы. Патент на изобретение №2197731, 2003 г

26. Е.В.Целищева, Ж.Н.Дбар, Степанова Е.В. Молекулярные механизмы опухолевого неоангиогенеза. // Вопросы современной биологии, 2004, т.124, № 5, с.480-488.

27. Кортава М.А., Степанова Е.В., Суровой А.Ю., Стойлова Т.Б., Сапрыкина Н.С., Оборотова Н.А., Барышников А.Ю., Личиницер М.Р. Подходы к сравнительному анализу катионных и нейтральных липосом для выбора эффективной системы доставки лекарственных препаратов в эндотелиальные клетки опухолевых сосудов. // Российский биотерапевтический журнал, 2004, №2 с. 22.

28. Степанова Е.В., Абсалямова О.В., Личиницер М.Р. Значение уровня тимидилат синтетазы для прогноза и эффекта химиотерапии при колоректальном раке. // Современная онкология, 2004, т.6, № 4, с.12-14.

29. Юшкова А.В., Нечушкин М.И., Барышников А.Ю., Степанова Е.В., Вишневская Я.В. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при раке молочной железы с метастазами в парастернальную область. // Российский биотерапевтический журнал, 2005, №3 с.112-115.

30. Вартанян А.А., Степанова Е.В., Барышников А.Ю., Личиницер М.Р. Вовлечение апоптоза в становление васкулогенной мимикрии при злокачественных новообразованиях. // Доклады академии наук, 2005, т.402, №1, с.129-132.

31. Кузьминов А.А., Капуллер Л.Л., Обухов В.К., Степанова Е.В., Чубаров Ю.Ю., Сачков И.Ю., Савельева Т.А. Иммуногистохимическое исследование молекулярных особенностей семейного аденоматоза толстой кишки. // Колопроктология, 2005., Т.13. №3, с. 17-22.

32. Способ прогнозирования метастазирования увеальной меланомы на основе маркеров апоптоза Вах и Bcl-2. Патент на изобретение №2244934, 2005.

33. Трещалина Е.М., Андронова Н.В., Филоненко Д.В., Степанова Е.В., Барышников А.Ю., Деев С.М., Эдельвейс Э.Ф. Адаптация клеточных линий рака яичника SKOV3 и рака молочной железы человека SKBR3 с гиперэкспрессией HER2/neu к росту у nude мышей. // Российский биотерапевтический журнал, 2005, №1., с. 91.

34. Юшкова А.В., Нечушкин М.И., Барышников А.Ю., Степанова Е.В., Вишневская Я.В. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при раке молочной железы с метастазами в парастернальную область. // Российский биотерапевтический журнал, 2005, №1, с. 93.

35. Степанова Е.В., Полушкина И.Н., Первощиков А.А., Ермилова В.Д, Вишневская Я.В., Мещеряков А.А., Барышников А.Ю., Личницер М.Р. Экспрессия эпидермального фактора роста (EGFR) при раке яичников III-IV стадии. // Вопросы онкологии 2005, т.51, №3., с. 361-365.

36. Степанова Е.В., Бохян Б.Ю., Петривичев Н.Н., Личиницер М.Р. Экспрессия тимидилат синтетазы, тимидин фосфорилазы, дегидропиримидин дегидрогеназы при саркомах мягких тканей: преспективы использования Капецитабина. // Вопросы онкологии, 2005, т.51, №3., с.314-316.

37. Meshcheryakov AA., Stepanova E., Anurova A., Shubina D., Lichinitser M. Immunohistochemical markers as prognostic indicators for efficacy on imatinib therapy in GIST. // J Clin Oncol 2005, v. 23, №16S., p.9703.

38. Вартанян А.А., Степанова Е.В., Личиницер М.Р. Васкулогенная мимикрия при злокачественных новообразованиях. // Молекулярная медицина 2006 Т.1., с. 23-30.

39. Степанова Е.В. Методические рекомендации по проведению иммуногистохимического тестирования HER2 статуса у пациенток с раком молочной железы. Фарматека 2006. №5, 1-3.

40. Степанова Е.В., Личиницер М.Р. Применение Авастина при различных злокачественных опухолях: результаты клинических исследований. Фарматека, 2006 (спецвыпуск), с.38-39.

41. Bokhyan B., Stepanova E., Mekhtieva N., Kolokolov D., Burov D. The perspectives in com-bined treatment of soft tissue sarcomas. // Вестник Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН, 2006, т.17, прил. 1 , с.32.

42. Vartanian A., Stepanova E., Burova OS.,. Baryshnikov A. The involvement of apoptosis in melanoma vasculogenic mimicry. // Melanoma Res, 2007, v. 17, №1, p.1-8.

43. Пузанова О.П., Степанова Е.В., Бурова О.С., Морозова Л.Ф., Михайлова И.Н., Барышников А.Ю. Иммуноцитохимический анализ экспрессии фактора роста эндотелия сосудов VEGF и его рецепторов VEGF R1/Flt-1 и VEGF R2/Flk-1 перевиваемыми линиями меланомы человека. // Российский биотерапевтический журнал, 2008, т.7, №1, с.6.

Размещено на Allbest.ru