44

Размещено на http://allbest.ru

На правах рукописи

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук

Особенности патогенеза и терапии хронических дерматозов при бластоцистной инвазии

14.00.11 - кожные и венерические болезни

Нестеров Алексей Сергеевич

Санкт-Петербург - 2009

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет»

Научный консультант - доктор медицинских наук профессор САМЦОВ Алексей Викторович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор ГОРЛАНОВ Игорь Александрович

доктор медицинских наук профессор КОРОЛЬКОВА Татьяна Николаевна

доктор медицинских наук профессор КЛЮЧАРЕВА Светлана Викторовна

Ведущее учреждение - ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени акад. И.П.Павлова»

Защита диссертации состоится «__ » _________ 2009 г. в ____ часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 215.002.01 при ФГОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова (194044, г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, дом 6).

Автореферат разослан «___» ___________ 2009 года.

Ученый секретарь совета

доктор медицинских наук профессор

Пономаренко Геннадий Николаевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время отмечается значительное увеличение показателей заболеваемости хронических дерматозов. По данным Ю.К. Скрипкина, Ю.С. Бутова (2009) у 48-67% дерматологических больных патологический процесс носит хронический характер. Наиболее часто в структуре кожных нозологий регистрируются состояния, ассоциированные с аллергическим статусом (аллергические контактные дерматиты, атопический дерматит, истинные и микробные экземы), патологией дифференциации клеток кожи (псориаз, красный плоский лишай).

Изучению этиологии и патогенеза хронических кожных заболеваний уделяется большое внимание во всем мире, так как от решения этих вопросов зависит правильная тактика их терапии. Несмотря на все успехи в диагностике и терапии дерматозов данные заболевания крайне трудно поддаются лечению. До настоящего времени нет единой точки зрения на причины возникновения и механизмы хронизации этих патологий. На фоне процессов, развивающихся в коже больного отмечается выраженная пролиферативная активность эпителиоцитов, которая регулируется большим количеством различных факторов, являющихся сложными звеньями патогенеза.

В настоящее время большое значение в механизмах формирования дерматозов отводят наследственным, нейрогенным, иммунным факторам, эндотоксемии и др. (Черешнев В.А., Гусев Е.Ю., 2001; Симбирцев А.С., 2004). Согласно одной из ведущих теорий развития кожных заболеваний - инфекционной, основное внимание уделяется бактериальным и вирусным агентам. Только в последние годы появились единичные сообщения о влиянии паразитарных инвазий на хронические воспалительные процессы. В течение последних лет получены данные о значительной роли в патогенезе хронических кожных процессов паразитарных инвазий кишечника (гельминтоз, лямблиоз), которые инициируют или поддерживают хронические дерматозы.

Известна роль некоторых гельминтозов в развитии дисбиоза, сопровождающегося нарушением биоценотических взаимоотношений между патогенными бактериями и нормальной кишечной микрофлорой, что является одним из важнейших факторов, влияющих на развитие многих заболеваний, особенно, имеющих хроническое течение. Ситуация усугубляется тем, что помимо классических паразитарных болезней появляются новые паразитозы, в частности бластоцистоз. В связи с этим, особую актуальность приобретает широко распространенная протозойная инвазия, обусловленная паразитированием в толстом кишечнике простейших Blastocystis hominis. Показано, что B. hominis обладают способностью продуцировать токсические продукты метаболизма, которые всасываются в слизистой кишечника и поступают в кровоток вызывая системную интоксикацию (Moe K.T., 1998). Однако эта проблема до сих пор остается практически не изученной.

В силу неполной изученности механизмов развития дерматозов, сложности понимания этих процессов, а также вследствие их клинико-патогенетической неоднородности, создание универсальной схемы патогенеза данных патологий оказалось трудно выполнимой задачей (Бойцов С.А., 2004). Показано, что обязательным компонентом развития дерматозов является эндотелиальная дисфункция, но механизмы, лежащие в ее основе, изучены недостаточно (Monis P.T. et al., 2002). Предполагают, что основная роль в развитии данного явления принадлежит «окислительному стрессу», развивающемуся на фоне дисфункции фагоцитов, антиоксидантной защиты, возможного дисбаланса цитокиновой сети (Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И., 2003; Черешнев В.А., Лебединская О.В., Родионов С.Ю., 2006). Для адекватной оценки состояния цитокинового звена иммунитета и его вклада в патогенез дерматозов требуется комплексное представление о его роли в развитии патологического процесса при хронических дерматозах (Сергеев А.Ю., Караулов А.В., Сергеев Ю.В., 2001; Тимашева Я.Р., 2006). Цитокины могут рассматриваться как возможные диагностические и прогностические маркеры, так и для выбора, в случае необходимости, иммунотропной терапии и оценки ее эффективности (Ковальчук Л.В., Сайгитов Р.Т., 2000; Хаитов Р.М., Манько В.М., 2005; Gamonal J. et al., 2000). Однако авторами, как правило, рассматривается одно из звеньев патогенеза дерматозов, в то время как, в их развитии тесно взаимодействуют различные системы организма человека, и поэтому для изучения механизмов развития кожных заболеваний необходим системный подход.

Цель работы. Установить особенности клинического течения и патогенеза хронических дерматозов при бластоцистной инвазии для оптимизации их диагностики и лечения.

Основные задачи исследования:

1. Определить частоту встречаемости бластоцистной инвазии у больных хроническими дерматозами.

2. Выявить особенности клинических проявлений хронических дерматозов, коморбидных с бластоцистной инвазией.

3. Изучить состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы крови у больных дерматозами в зависимости от нозологических форм, распространенности кожного процесса, продолжительности обострения и фазы заболевания.

4. Определить взаимосвязь между характером иммунных нарушений у больных хроническими дерматозами, коморбидными с бластоцистозом, и характером их клинического течения.

5. Установить особенности микроценоза кишечника и кожи при наличии у больных хроническими дерматозами бластоцистной инвазии.

6. Предложить системную модель патогенеза хронических дерматозов для разработки схемы патогенетически обоснованной терапии и провести анализ ее эффективности при лечении ХД на фоне бластоцистной инвазии.

Научная новизна. Получены данные, свидетельствующие о влиянии бластоцистной инвазии на характер течения хронических дерматозов, а также о наличии зависимости между показателями инвазированности и периодом заболевания. Показана коррелятивная зависимость клинических проявлений хронических дерматозов от степени колонизации и вирулентности простейших, которые способны инициировать процесс аутоинтоксикации.

Разработана модель патогенеза хронических дерматозов, учитывающая взаимосвязи многих компонентов формирования кожных заболеваний.

Установлено, что бластоцистная инвазия сопровождается дисбиозом кишечника и кожи, при котором отмечалось расширение спектра условно-патогенных и патогенных видов микроорганизмов с появлением их в не типичных биотопах и повышением вирулентности в период обострения дерматозов. Выделяемые микроорганизмами токсические метаболиты усиливают явления аутоинтоксикации и способствуют повышению проницаемости эндотелия кишечника.

Проведена сравнительная оценка системы «оксиданты-антиоксиданты» при наиболее часто встречающихся хронических дерматозах. Выявлен дисбаланс ПОЛ-АОС, сопровождающийся увеличением уровня R-белков, свидетельствующих о деструкции клеточных мембран. Изменение уровня этих показателей коррелирует с активностью кожного процесса, в связи с чем изучение состояния этой системы возможно использовать для характеристики степени тяжести дерматологических заболеваний, прогноза течения и эффективности проводимого лечения.

Впервые у больных хроническими дерматозами установлена коррелятивная зависимость между инвазированностью бластоцистами и изменениями клеточного, гуморального звеньев иммунитета, а также цитокиновой и фагоцитарной систем. Впервые установлена фазность изменения функциональной активности лимфоцитов и нейтрофильных гранулоцитов, проявляющееся в повышении показателей активности в первые годы заболеваний, сменяющейся депрессией, что позволяет объяснить подчас противоречивые литературные данные, получаемые при изучении состояния иммунитета при дерматозах.

Практическая значимость работы. Высокая выявляемость бластоцист при хронических дерматозах диктует необходимость паразитологического обследования больных, особенно тяжелыми, часто рецидивирующими и резистентными к проводимой терапии формами заболеваний. Для повышения его эффективности рекомендуется применять, помимо микроскопического, культуральный метод, значительно повышающий эффективность диагностики.

Выявленные изменения микроценоза кишечника и кожи, проявляющиеся в колонизационной экспрессии условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, а также их транслокация в нетипичные биотопы позволили разработать и внедрить в практику комплексную программу терапии хронических дерматозов. Она включает в себя помимо стандартных схем лечения антипаразитарные средства, бактериофаги, энтеросорбенты, пре- и пробиотики, которые способствуя восстановлению нормоценоза повышают эффективность лечения.

Обнаруженный дисбаланс системы ПОЛ-АОС, коррелирующий с тяжестью течения хронических дерматозов, позволяет использовать определение показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты для прогнозирования характера течения (частота рецидивов, тяжесть клинических проявлений) этих заболеваний, осуществления дифференцированного подхода при выборе тактики лечения.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Простейшие B. hominis, паразитирующие у больных хроническими дерматозами, являются одним из тригеррных факторов воспалительного процесса, дестабилизации микроценоза кишечника и аутоинтоксикации. Существует прямая корреляция между бластоцистной инвазией и тяжестью течения дерматозов, характеризующейся частотой и длительностью обострений, а также выраженностью клинических проявлений.

2. При хронических дерматозах развиваются изменения иммунной системы, сопровождающиеся повреждением клеточных мембран. На фоне постоянной эндогенной интоксикации отмечается дисбаланс окислительно-антиоксидантной системы, приводящий к повышению липопероксидации в тканях. Изменения в системе перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты, клеточного, гуморального и цитокинового звеньев иммунной системы, а также системы фагоцитоза являются важными механизмами развития хронических дерматозов.

3. Выявленные у больных хроническими дерматозами паразитарная инвазия и повышение патогенного потенциала участников микроценоза позволили обосновать необходимость включения в программу лечебных мероприятий для повышения их эффективности патогенетически обоснованную терапию хронических дерматозов, включающую комплекс из антипаразитарных средств, энтеросорбентов, пре- и пробиотиков.

Реализация результатов работы. Материалы работы используются в диагностической и лечебной работе на базе Ульяновского областного клинического кожно-венерологического диспансера (Акт о внедрении от 2009 г.) и внедрены в учебно-педагогический процесс преподавания дерматовенерологии и микробиологии студентов медицинского и педиатрического факультетов ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» (Акт о внедрении от 2009 г.), а также слушателей клинической ординатуры и интернатуры факультета последипломного образования и научно-исследовательской лаборатории ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет».

На основании полученных результатов оформлена заявка на изобретение «Способ получения чистой культуры Blastocystis hominis на питательной среде» (Приоритетная справка на патент РФ, 2004, №2003135444).

Изданы учебно-методические пособия для студентов, интернов и ординаторов: «Современное состояние проблемы клиники, диагностики и лечения атопического дерматита» (г. Ульяновск: УлГУ, 1999), «Микрофлора кишечника при бластоцистной инвазии» (г. Ульяновск: УлГУ, 2003). Изданы практические рекомендации: «Клинико-эпидемиологическая карта больного атопическим дерматитом» (г.Ульяновск: УлГУ, 1999), «Биология простейших Blastocystis hominis» (г.Ульяновск: УлГУ, 2000), «Простейшие Blastocystis hominis в патологии человека» (г.Ульяновск: УлГУ, 2000), «Особенности микроэкологии кишечника больных псориазом» (г.Ульяновск: УлГУ, 2004).

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Всероссийской научной конференции «Проблема инфекции в клинической медицине» VIII съезда Итало-Российского общества по инфекционным болезням (Санкт-Петербург, 2002), II Международной научно-практической конференции «Медицинская экология» (г.Пенза, 2003), Региональной научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы современного здравоохранения и экологии» (г.Ульяновск, 2003), Научно-практической межрегиональной конференции врачей «Медицинские аспекты охраны и укрепления здоровья» (г.Ульяновск, 2004), Седьмой Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2004), 5-й Международной конференции молодых ученых и студентов «Актуальные проблемы современной науки» (г.Самара, 2004), XI научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики, лечения и реабилитации больных» (г.Пенза, 2004), Выездном пленуме НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» (г.Новосибирск, 2004), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы здоровья и среды обитания современного человека» (г.Ульяновск, 2005), Falk Symosium 147 «Colitis: Diagnosis and Therapeutic Strategies» (Birmingham, 2005), 1-ом Международном форуме молодых ученых «Актуальные проблемы современной науки» (Самара, 2005), Санкт-Петербургских научных чтениях «Международный молодежный медицинский конгресс» (Санкт-Петербург, 2005), Международной научной конференции «Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для людей и животных» (г.Ульяновск, 2006), 41-й научно-практической межрегиональной конференции врачей «Модернизация здравоохранения и совершенствование охраны здоровья населения» (г.Ульяновск, 2006), Юбилейной научно-практической конференции «Патология желудочно-кишечного тракта с позиции терапевта, хирурга и инфекциониста» (г.Ульяновск, 2006), 42-й научно-практической межрегиональной конференции врачей «Модернизация здравоохранения и современные вопросы практической медицины» (г.Ульяновск, 2007), I конференции молодых ученых медико-биологической секции Поволжской ассоциации государственных университетов (г.Ульяновск, 2007), Falk Symposium «Intestinal Disorders» (Budapest (Hungary, 2008), 43-й научно-практической межрегиональной конференции врачей «Год семьи. Механизмы реализации приоритетного национального проекта и демографической политики в системе здравоохранения» (г.Ульяновск, 2008), 44-й межрегиональной научно-практической медицинской конференции врачей (г.Ульяновск, 2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 78 печатных работ, в том числе 11 в рецензируемых журналах ВАК РФ, 6 учебно-методических пособий и 3 монографии.

Личный вклад автора. Тема и план диссертации, ее основные идеи и содержание разработаны совместно с научным консультантом на основании целенаправленных исследований. Автор принимал непосредственное участие в клиническом обследовании и лечении больных, а также различных лабораторных и инструментальных исследованиях. Лично проводил оценку клинического течения хронических дерматозов и мониторинг эффективности проводимой многокомпонентной терапии.

Автором подробно исследованы особенности микробиоценоза кишечника и кожи у больных хроническими дерматозами на фоне бластоцистной инвазии, изучена вирулентность выделенных штаммов бластоцист и характер изменений иммунной и окислительно-атиоксидантной систем в зависимости от нозологической формы дерматоза, тяжести течения и периода заболевания. на фоне и без бластоцистной инвазии. Автор применил оригинальный метод выявления простейших B. hominis у больных хроническими кожными заболеваниями с помощью культивирования получаемых материалов на питательной среде, что позволило значительно повысить точность результатов.

Автором планировалось настоящее исследование, формировалась база данных и обобщение полученных результатов. Материал был проанализирован с помощью современных методов статистического анализа.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 298 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, 7 глав собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 396 библиографических наименования, из которых 171 - зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 43 таблицами и 65 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Общая характеристика материала и методов исследования

Обследовано 624 пациента, больных хроническими дерматозами, в возрасте от 16 до 79 лет, находившихся на лечении в Областном клиническом кожно-венерологическом диспансере г. Ульяновска в период 2004-2006 г.г. Среди обследованных больные вульгарным псориазом составили 29,3% (183 человека), псориазом артропатическим - 10,4% (65 пациента), истинной экземой - 15,9% (99 больных), микробной экземой - 27,2% (170 пациента), атопическим дерматитом - 12,2% (76 человек) и красным плоским лишаем - 5,0% (31 больной). Группу сравнения составили 52 практически здоровых человека, репрезентативных по полу и возрасту. Все обследования проводили с письменного согласия пациентов.

Из всех обследованных мужчины составили 62,8% (392 человек), женщины - 37,2% (232 человека). При вульгарном псориазе (ВП) на долю лиц женского пола приходилось 37,7%, мужского - 62,3%, псориазе артропатическом (ПА) - 41,5% и 58,5%, истинной экземе (ИЭ) - 44,4% и 55,6%, микробной экземе (МЭ) - 31,2% и 68,8%, атопическом дерматите (АтД) - 31,6% и 68,4%, красном плоском лишае (КПЛ) - 48,4% и 51,6% соответственно. Согласно демографической классификации возрастов все обследуемые были разделены на 4 возрастные групп (табл.1): 1 группа (16-24 года), 2 группа (25-44 года), 3 группа (45-59 лет), 4 группа (60 лет и более).

Длительность течения хронических дерматозов у обследованных характеризовалась большой вариабельностью, поэтому при проведении исследований больных по этому признаку делили на следующие группы: до 1 года, 1-5 лет, 5-10 лет и более 10 лет.

Таблица 1

Возрастной состав больных с различными нозологическими формами хронического дерматоза

Нозологии	Возраст
	16-24 года	25-44 года	45-59 лет	60 лет и более	Всего
	%	%	%	%	абс.
Вульгарный псориаз	31,1	27,9	28,4	12,6	183
Псориаз артропатический	4,6	29,2	46,2	20,0	65
Истинная экзема	16,2	26,3	33,3	24,2	99
Микробная экзема	10,0	24,1	34,7	31,2	170
Атопический дерматит	53,9	26,3	11,9	7,9	76
Красный плоский лишай	16,1	12,9	45,3	25,7	31

Клинические методы исследования

В соответствии с задачами работы обследование пациентов включало: дерматологический осмотр больных, общий анализ крови и мочи, при необходимости определение биохимических параметров крови, исследование иммунного статуса и перекисного окисления липидов крови. Кроме указанных исследований больным проводили бактериологическое и паразитологическое изучение микробиоценоза кишечника и определение микробиоты кожи.

Диагностику дерматозов, их клиническую форму и стадию кожного процесса, степень выраженности, а также частоту рецидивов, резистентность к проводимой терапии производили с использованием общеклинических методов обследования, по стандартам диагностики, разработанных Минздравом РФ для каждого дерматоза в соответствии с международной классификацией болезней десятого пересмотра (МКБ-10, 2001). Дерматологический осмотр включал в себя оценку характера и площади высыпаний, а при повторных осмотрах динамику клинических проявлений процесса. патогенез кожный дерматоз терапия

Для анализа динамики кожного статуса у больных до, во время и после лечения применяли стандартизованный метод - индекс PASI (Psoriasis Area And Severity Index) (Fredriksson Т., Pettersson U., 1978). Значение индекса PASI <10 баллов указывало на легкое течение заболевания; 20-30 баллов - среднюю тяжесть процесса; >30 - тяжелое течение.

Диагностика атопического дерматита основывалась на стандартных клинических критериях согласно классификации К.Н. Суворовой и соавт., (1995) с оценкой степени тяжести по международной шкале SCORAD (Scoring atopic dermatitis). Значение индекса SCORAD равное 0-20 баллам указывало на легкое течение заболевание, 20-40 баллов - среднюю тяжесть процесса и более 40 баллов - тяжелое течение.

Паразитологические методы

Изучение паразитоценоза у больных хроническими дерматозами проводили в соответствии с Методическим указанием МУК 4.2.735-99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов», утвержденных главным государственным санитарным врачом РФ 25.02.1999 г. Анализ паразитоценоза кишечника проводили микроскопическим и культуральным методами (Clark, Diamond, 2002). При изучении протоценоза использовали методы консервирования, обогащения исследуемого материала (Генис Д.Е., 1991). При выделении культуры B. hominis использовали среду Suresh СЕМ (Сахарова, Гордеева, Сергиев, 1997).

Выявление бластоцист в препаратах проводили путем микроскопии нативных или окрашенных мазков (x10 x40) (Clark C.G., Diamond L.S., 2002). Окрашивание препаратов проводили по Романовскому-Гимзе и железным гематоксилином по Гейденгайну (Аврех и соавт., 1973; Генис, 1991; MacPherson, MacQueen, 1994), кроме того, для изучения бластоцист использовали электронную сканирующую микроскопию.

Вирулентность бластоцист определяли путем внутрибрюшинного заражения белых мышей. Через сутки у каждого штамма определяли величину LD₅₀. В соответствии с результатами проведенных экспериментов к высоковирулентным относили штаммы с LD50 от 10¹ до 10³ КОЕ/мл, к умеренновирулентным - от 10³ до 10⁶ КОЕ/мл, а штаммы c LD50 свыше 10⁶ КОЕ/мл считали слабовирулентными (Костюкова и соавт., 1996).

Бактериологические методы

Включали выявление дисбиоза кишечника, синдрома избыточного роста бактерий тонкой кишки и изучение микробиоты кожи, а также свойств выделенных культур. Выявление дисбиоза проводили с использованием метода количественного выделения видов и вариантов микроорганизмов согласно приказу Минздрава России от 09.06.2003 г. №231 «Об утверждении отраслевого стандарта «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (Ост 91500.11.0004-2003). При изучении микробного пейзажа кишечника определяли, как частоту высеваемости отдельных видов, так и их количественные показатели в пересчете на 1 г фекалий (Багрянцева О.В., 2002; Ефимов Б.А., 2002).

Культуры, выросшие на питательных средах, подвергали групповой (анаэробные, не спорообразующие бактерии), родовой (лактобациллы, бифидобактерии, стафилококки) и видовой идентификации (стафилококки, эшерихий).

Синдром избыточного бактериального роста в тонком отделе кишечника выявляли путем бактериологического исследования содержимого тонкой кишки больных хроническими дерматозами на фоне кишечного бластоцистоза, забираемое эндоскопически с помощью тонкокишечного зонда с немедленным посевом на питательные среды. Присутствие бактерий в аспирате тонкой кишки в количестве более 10⁵ КОЕ у обследованных свидетельствовало о наличии синдрома избыточного бактериального роста (Циммерман, 2005). Количество бактерий рассчитывали по числу колоний и перевода их в lg колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 мл аспирата.

Состав микробиоты кожи, частоту встречаемости отдельных видов изучали по методике А.Б. Покатилова (1993). Материал брали у больных с пораженных участков кожи в период разгара заболевания и его ремиссии. Посевы осуществляли на дифференциально-диагностические и элективные среды, такие как Эндо, Плоскирева, Левина, Сабуро, Блаурокка. Количество бактерий рассчитывали по числу колоний и перевода их в lg колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 см² кожи.

Чувствительность микроорганизмов к химиопрепаратам определяли диффузионным методом, а также методом серийных разведений. По чувствительности к химиопрепаратам, основываясь на клиническом подходе, микроорганизмы делили на три группы - чувствительные, среднечувствительные и устойчивые. Для выявления чувствительности микроорганизмов определяли минимальную ингибирующую концентрацию препарата - МИК в ЕД/мл или мкг/мл (Сбойчаков В.Б., Сиволодский Е.П., Акользин В.В. и соавт., 1999).

Иммунологические методы

Определение субпопуляций лимфоцитов и их функциональной активности

У больных исследовали мембранные маркеры субпопуляций лимфоцитов (CD3⁺, CD4⁺, CD8⁺, CD20⁺ лимфоциты) с помощью моноклональных антилимфоцитарных антител к дифференцировочным антигенам поверхности клеток в реакции непрямой иммунофлюоресценции в модификации на поли-Д-лизине («Sigma», Германия). Использовали диагностикумы института иммунологии МЗ (Россия) ЛТ-1 (пан-Т-клеточная популяция функционально зрелых Т-лимфоцитов, экспрессирующих мембранассоциированные детерминанты СD-3 антигенов), ЛТ-4 (субпопуляции хелперно/индукторных Т-клеток, экспрессирующих антигены СD-4) и ЛТ-8 (субпопуляции супрессорно/цитотоксических Т-клеток, экспрессирующих антигены СD-8). С целью изучения функциональной активности иммуноцитов применяли реакцию торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) in vitro (Артемова, 1973), реакцию бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) (Чернушенко, Когосова, 1978).

Для оценки цитопатогенного действия лимфоцитов использовали определение ЦПД по их действию на первично трипсинизированную культуру ткани (Федосеева и соавт., 1993).

Определение ЦИК производили в реакции преципитации иммунных комплексов (Гриневич, Алферов, 1981).

Определение количества Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Еа-РОК) проводили по методике M. Jondal et al., 1997. (Еа - эритроцит, РОК - розеткообразующая клетка). За РОК принимают лимфоцит, присоединивший 3 и более эритроцита. Количество Еа-РОК соответствует количеству зрелых Т-лимфоцитов.

Количественное определение сывороточных иммуноглобулинов классов A, M, G осуществляли по G. Mancini et al. (1965), основанное на иммунологическом феномене преципитации. Уровень Ig Е определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Объем проведенных иммунологических исследований представлен в табл. 2.

Таблица 2

Объем проведенных иммунологических исследований

Методы исследований	Количество исследований
1. Определение лейкоцитарной формулы	156
2. Определение количества Т- и В-лимфоцитов	312
3. Определение уровня иммуноглобулинов (А, М, G)	408
4. Определение цитопатогенного действия лимфоцитов	156
5. Определение субпопуляций Т-лимфоцитов	312
6. Определение уровня иммуноглобулина Е	156
7. Определение уровня ЦИК	156
8. Реакция бластной трансформации лимфоцитов	225
9. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов	156
10. Реакция торможения миграции лейкоцитов	166
11. Аффинность Еа-РОК Т-лимфоцитов	152

Количественное определение уровня цитокинов проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-систем «Цитокиновый контур» (г. Санкт-Петербург), «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Изучали спонтанную и индуцированную способность лейкоцитов цельной крови секретировать IL-1б, IL-1в, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, фактор некроза опухоли-б (ФНО-б), б- и г-IFN. В качестве мутагена использовали ФГА. Результаты исследования регистрировали на анализаторе «УНИПЛАН» АИФР-01 фирмы «ПИКОН».

Оценку функциональной активности полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови проводили в реакции с микробной тест-культурой (Маянский, 1993). Поглотительную способность фагоцитов оценивали по фагоцитарному индексу и фагоцитарному числу.

Активность кислородзависимых и кислорднезависимых антимикробных систем нейтрофильных гранулоцитов изучали путем определения активности миелопероксидазы, катионных белков (Карпищенко, 1999) и тестом восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) (Герасимов И.К., Калуцкая В.С., 2000; Нагаева М.Х., 2004).

Для характеристики гидролитической активности фагоцитов определяли щелочную (ЩФ) и кислую (КФ) фосфатазы (Карпищенко, 1999).

Активность окислительно-антиоксидантной системы изучали по определению уровеня малонового диальдегида (МДА), глутатионредуктазы и каталазы эритроцитов крови (Андреева и соавт., 1988, Карпищенко, 1999).

Методы статистической обработки

Результаты исследований составили базу данных первичных показателей, заложенных в компьютер. Обработка и анализ данных выполнялся на IBM совместимых компьютерах с использованием статистического программного пакета Statistica версии 6.0. Для всех параметров при статистической обработке вариационных рядов вычислялись значения средней арифметической (М-Mean), среднеквадратического отклонения (а=Std. Dev.) и стандартная ошибка (t=Std. Error). Достоверность различий между показателями оценивалась t-критерием Фишера-Стьюдента, но в силу того, что значительная часть параметров распределялась «не нормально» оценка уровней значимых (р<0,05) и достоверных (р<0,001) межгрупповых различий по количественным (метрическим) и порядковым (балльным или полуметрическим) признакам производилась с использованием непараметрических методов статистической обработки, в том числе U-критерия Манна-Уитни. Использованы также частотный и корреляционный виды анализа, оценка ч²-квадрат 2x2 и тесты расхождения между двумя усреднениями.

Значения качественных и количественных показателей оценивали при сравнении со здоровыми лицами (p₁) и больными хроническими дерматозами без бластоцистной инвазии (p₂).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

В ходе выполнения работы были определены показатели заболеваемости хроническими дерматозами у населения Ульяновской области. Они составили при АтД - 4,13±1,51‰; ВП - 2,51±2,04‰; ИЭ - 2,12±2,10‰; МЭ - 1,49±2,54‰ и КПЛ - 0,27±0,47‰.

У всех больных хроническими дерматозами (ХД) (n=624) в период обострения было проведено паразитологическое исследование с целью выявления бластоцистной инвазии. Доминирующее положение по частоте встречаемости среди паразитов занимали простейшие: Blastocystis hominis (74,5%), Lamblia intestinalis (38,3%) и Entamoeba coli (18,9%). Обнаружено, что инвазированность B. hominis среди больных атопическим дерматитом составила 89,5%, псориазом артропатическим - 81,5%, вульгарным псориазом - 79,8%, истинной экземой - 71,7%, красным плоским лишаем - 67,7% и микробной экземой - 62,3%, тогда как в группе сравнения этот показатель не превышал 5,8% (рис.1).

Изучение клинической картины хронических дерматозов, наряду с типичными проявлениями, выявило ряд особенностей течения этих заболеваний в сочетании с бластоцистной инвазией. Так, при наличии бластоцистоза удельный вес тяжелых форм псориаза был достоверно больше, чем без паразитоза. При псориазе артропатическом статистических различий в группах по тяжести течения не выявлено. Однако, такие клинические проявления как площадь поражения, выраженность инфильтрации и характер поражения суставов на фоне бластоцистоза носили более выраженный характер у большинства пациентов.

При ИЭ на фоне бластоцистной инвазии, по сравнению с пациентами без бластоцистоза, отмечалось уменьшение количества больных с легким течением заболевания и увеличение - со средней тяжестью заболевания.



Рис.1. Показатели инвазированности бластоцистами больных дерматозами

Атопический дерматит характеризовался большим количеством больных с тяжелыми клиническими проявлениями дерматоза при бластоцистной инвазии, по сравнению с неинвазированными пациентами. Несмотря на отсутствие статистически значимых различий между этими группами тяжелая форма встречалась почти у каждого второго больного с бластоцистами, тогда как у неинвазированных - только у каждого четвертого.

При микробной экземе и красном плоском лишае в сочетании с бластоцистной инвазией преобладали больные с проявлениями заболевания средней тяжести. У пациентов без бластоцистоза доминировали легкие формы течения дерматоза.

Особенности клинического течения хронических дерматозов на фоне бластоцистной инвазии характеризовались увеличением частоты рецидивов при ВП, ИЭ достоверные различия между пациентами с инвазией и без нее выявлены у больных с высокой частотой рецидивов (более 4 раз в год). Необходимо отметить, что у пациентов этой группы отмечались случаи заболеваний без полной ремиссии. При ПА, ИЭ и АтД, наблюдалось увеличение количества больных с частотой рецидивов 2 и более раза в год. При дерматозах без бластоцистоза, наоборот, происходило увеличение количества пациентов с более редкими рецидивами.

Паразитологическое исследование больных дерматозами выявили высокую частоту встречаемости Blastocystis hominis у этих пациентов в период обострения, в то время как в период ремиссии этот показатель снижался до 63,1±6,7% (p<0,05).

Установлено нарастание инвазированности больных бластоцистами в зависимости от продолжительности заболевания с 66,5% пациентов при стаже менее 1 года до 85,6% - свыше 10 лет (p<0,05).

У больных хроническими дерматозами были выделены две морфологические формы простейших B. hominis: вакуолярная и гранулярная.

Преобладающей формой B. hominis в клиническом материале являлась вакуолярная (45,6±2,7%). Характерной морфологической особенностью вакуолярной формы бластоцист являлось наличие центрального тела, занимающего большую часть клетки. Гранулярные клетки бластоцист имели сферическую форму, их цитоплазма содержала большое количества гранул, их размеры, также как и вакуолярных бластоцист, варьировали.

B. hominis амебоидной формы были обнаружены только при культивировании простейших на питательных средах, при длительном хранении культур бластоцист количество амебоидных форм увеличивалось.

С целью аргументации этиологической значимости бластоцист в развитии патологического процесса необходимо подтверждение их вирулентности.

Проведенные исследования показали, что 74,8±2,8% штаммов бластоцист, выделенных у больных дерматозами во время обострения заболевания, обладали вирулентностью, в то время как в период ремиссии доля вирулентных штаммов уменьшалась до 43,2±1,6% (ч²=24,72; p<0,001).

В зависимости от показателей вирулентности все штаммы бластоцист разделили на 4 группы. LD₅₀/lg штаммов 1-ой группы составлял 3,2±0,3, 2-й группы - 4,1±0,6, в 3-й и 4-й группах этот показатель увеличивался до 4,8±0,5 и 5,7±0,4 соответственно.

В период ремиссии показатель LD₅₀/lg для клинических изолятов был ниже, он колебался от 1,9±0,1 до 4,0±0,3. Штаммов с высокими показателями вирулентности (3-4 группы) во время стихания клинических проявлений обнаружено не было.

Следующим этапом работы явилось изучение чувствительности к антипротозойным препаратам бластоцист, выделенных у больных с различной продолжительностью дерматозов, а также в зависимости от стадии заболевания (обострение, ремиссия). В качестве таких препаратов были изучены метронидазол, тинидазол и орнидазол.

Результаты проведенных исследований показали, что в период обострения хронических дерматозов чувствительностью к тинидазолу обладало 51,4±3,1%, к метронидазолу - 41,6±2,4% клинических изолятов бластоцист.

К этим препаратам обнаружено наибольшее количество чувствительных штаммов (258 и 209 соответственно).

Менее эффективным оказался орнидазол, только 148 штамма (29,5±2,6% изолятов) проявили чувствительность к этому лекарственному средству.

В период ремиссии количество штаммов, проявивших чувствительность, увеличилось до 76,2±3,5% (382 штамма) к тинидазолу, 64,4±2,9% (323 штамма) к метронидазолу и 35,7±2,1% (179 штаммов) к орнидазолу.

При проведении частотного анализа установлено, что чувствительность к тинидазолу и метронидазолу в 2-х сравниваемых группах (периоды обострения и ремиссии) встречалась с различной частотой (ч²=14,32; р<0,0002 и ч²=15,63; р<0,0001 соответственно), а к орнидазолу - с одинаковой частотой (ч²=2,18; р>0,05).

Результаты определения минимальной ингибирующей концентрации препаратов показали, что для тинидазола она составила 10^-5 мг/мл, метронидазола - 10^-4 мг/мл и орнидазола - 10^-3 мг/мл.

В зависимости от величины показателей минимальной ингибирующей концентрации антипротозойных препаратов, все изученные штаммы разделили на 4 группы.

У штаммов 1 группы подавление роста на питательной среде происходило при концентрации препаратов 10^-5-10^-4 мкг/мл, 2 группы (средне-чувствительные) - 10^-3-10^-2 мкг/мл, 3 группы (умеренно-устойчивые) - 10^-1 мкг/мл и простейшие 4 группы были устойчивы к действию химиопрепаратов.

Наибольшая чувствительность у бластоцист в период обострения хронических дерматозов выявлена к тинидазолу (1-2 группы).

Среди бластоцист, чувствительных к метронидазолу преобладали штаммы 3 группы. К орнидазолу отмечена наибольшая устойчивость бластоцист. В период ремиссии ХД количество штаммов 3-4 групп уменьшилось, по сравнению с периодом обострения, тогда как количество культур 1 и 2 групп - увеличилось (табл. 3).

Системы ПОЛ-АОС поддерживают хроническое течение дерматозов и участвуют в механизмах развития их обострений. В связи с этим определение биохимических показателей системы «оксиданты-антиоксиданты» целесообразно использовать для оценки риска развития, тяжести клинического течения и прогноза хронических заболеваний кожи (Шепелев А.П. и соавт., 2000).

Таблица 3

Чувствительность клинических изолятов B. homins к антипротозойным препаратам в периоды обострения и ремиссии (%)

Антипротозойные препараты	Чувствительные (1 группа)	Среднечувствительные (2 группа)	Умеренно- устойчивые (3 группа)	Устойчивые (4 группа)
Тинидазол	*	*	*	*
Метронидазол	*	*	*	*
Орнидазол			*

Примечание: в числителе - показатели в период обострения дерматозов; в знаменателе - показатели в период ремиссии дерматозов.

Показана активация свободнорадикальных процессов в крови больных ХД, сопровождающаяся снижением содержания антиокислительных факторов.

В стадию обострения заболеваний у пациентов с бластоцистозом выявлено значительное повышение уровня МДА при ИЭ (1296,2±115,9 мкмоль/л; p<0,05), ВП (1215,2±116,8 мкмоль/л; p<0,05) и ПА (1352,3±144,9 мкмоль/л; p<0,05).

При ХД без бластоцистной инвазии у пациентов наблюдалось менее выраженное изменение уровней МДА. В период обострения у больных ХД в сочетании с бластоцистной инвазией максимальная активность каталазы обнаружена у больных с ПА (0,476±0,09 ммоль/л; p<0,05) и ИЭ (0,434±0,16 ммоль/л; p<0,05).

Таблица 4

Показатели уровней МДА и каталазы в стадию ремиссии дерматозов

Нозологии	МДА (мкмоль/л)	Каталаза (ммоль/л)
	С инвазией	Без инвазии	С инвазией	Без инвазии
ВП	963,3±95,2*/**	876,5±87,1	0,162±0,14*/**	0,115±0,12
ПА	950,2±112,3 */**	877,4±79,6	0,189±0,16*/**	0,102±0,15
ИЭ	994,3±97,1*/**	915,8±82,9	0,14±0,05*	0,12±0,07
МЭ	958,2±96,8*	933,6±101,2	0,11±0,09*/**	0,06±0,04
АтД	940,9±99,5*	885,3±81,3	0,08±0,03*	0,07±0,03
КПЛ	946,7±91,4*	896,9±87,4	0,09±0,05*	0,08±0,04
Здоровые	826,98±97,4	0,026±0,003

Примечание: * - показатель достоверности между больными ХД с бластоцистозом и здоровыми (p₁);

** - показатель достоверности между больными ХД с бластоцистозом и без бластоцистной инвазии (p₂).

В период ремиссии наблюдалось снижение показателей активности МДА и каталазы эритроцитов периферической крови и у больных с бластоцистозом и без этой инвазии. Однако, при бластоцистозе эти изменения были более выражены, особенно у пациентов с ВП, ПА и МЭ (табл.4).

Активность глутатионредуктазы эритроцитов была достоверно понижена в период обострения хронических дерматозов, по сравнению с ремиссией: максимально - при ПА 4,94±1,21 (p<0,05), минимально - при АтД 7,27±1,46 (p<0,05). Сравнение уровня глутатионредуктазы у больных на фоне и без бластоцистной инвазии выявило статистически значимые различия в период обострения дерматозов при ВП 5,62±2,12, ИЭ 6,31±2,15 и АтД 7,27±1,46 (p<0,05).

Накопление в организме R-белков служит важным признаком дестабилизации биологического равновесия, их рассматривают как один из важнейших медиаторов патологического процесса. Выявление R-белков принадлежит к числу наиболее информативных тестов, поэтому количественное определение их в сыворотке крови можно использовать не только для выявления наличия патологического процесса, но и для определения структурно-функциональных изменений клеточных мембран, оценки степени тяжести заболевания и прогнозирования течения дерматозов (Бабанова Н.И., 2002).

Показатели R-белков у пациентов с ВП, ПА, ИЭ, МЭ, АтД и КПЛ на фоне бластоцистоза составили 4,15±0,21; 5,1±0,82; 4,84±0,76; 5,22±1,01; 4,92±0,81 и 4,22±0,63 соответственно (у здоровых - 3,65±0,21). При отсутствии бластоцистной инвазии содержание R-белков достоверно снижалось при ПА, ИЭ, МЭ и АтД до 4,5±0,81; 3,98±0,73; 4,12±0,45; 3,86±0,52 (p<0,05) соответственно. Проведенные исследования выявили повышение уровня R-белков у больных ХД, однако эти изменения у больных с бластоцистной инвазией носили более выраженный характер.

Выявлена устойчивая положительная коррелятивная зависимость между содержанием R-белков и содержанием МДА, что свидетельствует о патогенетическом единстве перекисных нарушений и деструкции клеточных рецепторов. Это подтверждается выявленной сильной положительной достоверной корреляционной взаимосвязью между уровнем МДА и R-белков при ПА (r=+0,79; р=0,024), при ИЭ (r=+0,81; р=0,019) и ВП (r=+0,84; p=0,026). При остальных заболеваниях установлены положительные недостоверные корреляционные взаимосвязи - при МЭ (r=+0,19; p=0,152), АтД (r=+0,13; p=0,581) и КПЛ (r=+0,20; p=0,477).

В ходе исследования выявлены изменения всех звеньев иммунной системы - клеточного, гуморального и фагоцитарного.

Статистически достоверные различия в содержании лейкоцитов в периферической крови у больных хроническими дерматозами на фоне бластоцистоза и здоровыми лицами наблюдались только при ПА и АтД. Аналогичная картина наблюдалась при сравнении количества лимфоцитов у больных ХД с бластоцистозом, достоверные различия отмечены при ВП, ИЭ, АтД и КПЛ по сравнению со здоровыми (p₁<0,05) и при ВП (1,831±0,351·10⁹/л), ИЭ (1,808±0,446·10⁹/л), АтД (2,388±0,637·10⁹/л) в сочетании с инвазией по сравнению с пациентами без бластоцистоза (p₂<0,05).

Определение показателей клеточного иммунитета выявило достоверное повышение CD4 лимфоцитов относительно здоровых лиц у больных ПА, АтД и КПЛ, протекавших на фоне бластоцистной инвазии. По сравнению с больными ХД без бластоцистной инвазии статистически значимая разница в количестве CD4 лимфоцитов выявлена только у пациентов с АтД (0,88±0,58 ·10⁹/л; p<0,05).

На фоне наблюдаемого снижения клеток с супрессорной функцией, возрастало стимулирующее влияние клеток с хелперной направленностью. Содержание CD8-лимфоцитов у больных ХД с бластоцистозом понижалось, однако статистически значимо оно было только у пациентов с ПА и АтД, по сравнению со здоровыми. Соотношение CD4/CD8 субпопуляций Т-лимфоцитов было достоверно повышено у больных псориазом артропатическим и атопическим дерматитом (2,75±0,72 и 2,59±0,31 соответственно) на фоне бластоцистной инвазии.

Определение функциональной активности Т-лимфоцитов выявило фазное изменение их функциональной активности, проявлявшееся в ее повышении в первые годы заболевания, сменяющееся в дальнейшем выраженной депрессией. Так, значения РТМЛ при длительности заболевания до 1 года хотя и были понижены при всех ХД в сочетании с бластоцистозом, однако, по сравнению с больными без бластоцистной инвазии, достоверных отличий не имели (p>0,05).

При стаже заболевания 1-5 лет показатели РТМЛ еще более понижались, что свидетельствует о повышении функциональной активности лимфоцитов. Далее при увеличении длительности заболевания (более 5 лет) активность лимфоцитов постепенно снижалась. Достоверное повышение показателей РТМЛ происходило у пациентов со стажем заболевания от 5 до 10 лет при ИЭ (54,79±12,65%), МЭ (56,07±14,21%) и КПЛ (53,74±11,46%) по сравнению с больными дерматозами без бластоцистной инвазии и здоровыми.

У больных с большим стажем заболевания, более 10 лет, наблюдалось значительное усиление торможения миграции лейкоцитов, особенно выраженное у больных ХД в сочетании с бластоцистозом, что свидетельствовало о депрессии профессиональной активности лимфоцитов.

Проведенные исследования выявили повышение показателей трансформации лимфоцитов в бластные формы в первый год заболевания, наиболее выраженное при ИЭ (53,98±18,67%; p<0,05), МЭ (58,49±15,29%; p<0,05) и АтД (56,37±15,81%; p<0,05) в сочетании с бластоцистной инвазией. Без паразитоза указанные показатели были достоверно ниже (47,69±10,24%; 54,62±12,51%; 46,54±11,46% соответственно) с последующим снижением, максимально выраженным при стаже заболевания более 10 лет (39,16±12,5%; 47,84±12,66%; 41,54±13,82% соответственно).

В характеристике эффекторной активности лимфоцитов большое значение имеют их цитопатогенное действие. Установлено, что цитотоксический эффект проявлялся у большинства больных ХД, однако изменение его показателей в различных группах обследованных происходило по разному. Так, максимальное увеличение цитопатогенной активности лимфоцитов было выявлено у больных ПА, МЭ и АтД в сочетании с бластоцистной инвазией (0,421±0,018; 0,562±0,042 и 0,396±0,026 соответственно; в контроле 0,872±0,032; р<0,05).

Изучение аффинности Е-рецепторов Т-лимфоцитов показало, что количество всех фракций Еа-РОК было снижено, однако статистически достоверным оно было лишь у средне- и высокоаффинных Еа-РОК по сравнению со здоровыми (р<0,05). Сочетание ХД с бластоцистной инвазией способствовало более выраженному снижению аффинности Т-лимфоцитов (рис.2).



Рис.2. Снижение аффинности Еа-РОК Т-лимфоцитов у больных ХД

Изучение состояния гуморального иммунитета выявило отсутствие статистически достоверных различий уровня CD20-лимфоцитов у больных ХД при сочетании с бластоцистной инвазией, по сравнению с дерматозами без бластоцистоза и наличие достоверных различий по сравнению со здоровыми. Наиболее выраженные изменения показателей CD20-клеток отмечались у больных ПА (0,242±0,036•10⁹/л; р<0,05), МЭ (0,248±0,050•10⁹/л; р<0,05) и АтД (0,276±0,044•10⁹/л; р<0,05).

Изучение уровней сывороточных иммуноглобулинов Ig A, Ig M и Ig G были не достоверны при большинстве нозологий (р>0,05), как с бластоцистозом, так и без него. Исключение составили только Ig M и G у больных микробной экземой (1,88±0,32г/л и 13,71±3,71г/л соответственно; p<0,05) и атопическим дерматитом (2,10±0,52г/л и 2,41±0,28/л соответственно; p<0,05), сочетающихся с бластоцистозом.

Особый интерес представляет повышение у обследованных содержание Ig E, который может стимулировать проявление цитотоксичности макрофагов, тучных клеток, нейтрофилов, базофилов, CD16 лимфоцитов и др., а также активировать продукцию цитокинов и усиливать респираторный взрыв нейтрофилов (Бережная, Чехун, Сепиашвили, 2005; Arase, Arase et al., 2003). (Шабашова, Фролова, Бобровская с соавт., 2005) за счет того, что все эти клетки экспрессируют рецепторы для Ig E. У больных ХД уровень Ig E значительно повышался.

У пациентов с АтД наблюдалось максимальное увеличение уровня Ig Е (314,74±31,45 МЕ/мл; у здоровых - 88,26±18,45МЕ/л; р<0,01), при ассоциации АтД с бластоцистной инвазией этот показатель повышался до 399,32±46,29 МЕ/мл.

Достоверное различие отмечалось также между значениями Ig E при сочетании дерматоза с протозойной инвазией в случае АП (237,11±45,96 МЕ/л) и ИЭ (215,28±39,32 МЕ/л), тогда как без бластоцистоза сравнение аналогичных показателей со здоровыми достоверной разницы не выявило.

Определение уровня ЦИК выявило его значительное повышение у всех нозологических групп больных ХД, наиболее выражены указанные изменения были у больных дерматозами в сочетании с бластоцистозом, что является прогностически неблагоприятным признаком (Пыльцев М.А., 2004). У этой группы пациентов уровень ЦИК, по сравнению с больными без бластоцистоза и здоровыми, был при АтД в 1,3 и 2,7; ПА - в 1,2 и 1,9; МЭ - в 1,2 и 2,1 раз больше соответственно. Места отложений ЦИК могут определять расположение высыпаний. В результате, воспаление вместо того, чтобы приводить к устранению своей причины, наоборот, приводит к ее стимуляции.

Анализируя изменения в цитокиновой системе у больных ХД следует отметить значительное повышение уровня провоспалительных цитокинов ИЛ-1в, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-б и интерферон-г. Их среднее значение у больных на фоне бластоцистной инвазии составило 40,75±13,4 пг/мл; 24,6±9,3 пг/мл; 19,0±5,8 пг/мл; 32,5±8,5 пг/мл; 74,7±12,3 пг/мл и 25,4±6,5 пг/мл соответственно (в контроле 16,6±3,5 пг/мл; 18,3±4,7 пг/мл; 1,4±0,3 пг/мл; 6,2±2,3 пг/мл; 7,3±1,4 пг/мл и 20,1±3,2 соответственно), что превышало контрольные значения в 2,45; 1,3; 3,0; 5,2; 10,1 и 1,2 раза соответственно.

Следует отметить, что уровень провоспалительных цитокинов у этих пациентов был достоверно выше не только сравнительно с группой здоровых лиц, но и с группой больных без бластоцистной инвазии (рис.3).