Инсулин-транспортирующие системы крови человека в норме и при сахарном диабете первого типа. Теоретические и прикладные аспекты

Полученные экспериментальные данные позволяют сделать вывод о том, что в крови здоровых доноров в состав связывающего инсулин комплекса входят транспортные белки, в том числе, альбумин, -фетопротеин и трансферин (Гарипова, 2007 б). Установлено, что состав белков связывающего инсулин комплекса при сахарном диабете первого типа достоверно изменяется. Альбумин и -фетопротеин присутствующие в комплексе в норме, в пробах, выделенных из крови больных диабетом, выявляются лишь в следовых количествах и замещаются ₁-кислым гликопротеином и, возможно, другими, не идентифицированными белками.

Различия состава белков, формирующих комплекс с инсулином, в норме и при диабете подтверждаются различием их аминокислотного состава и различным содержанием углеводного компонента в их молекулах. Установлено, что в гликопротеидах, взаимодействующих с инсулином в крови больных сахарным диабетом, снижено по сравнению с нормой, содержание ароматических аминокислот. При использовании в качестве стандарта раствора фенилаланина, установлено, что в пробах здоровых доноров содержание ароматических аминокислот составляет 0,0064±0,0002 мг/мг, по сравнению с 0,00036±0,0005 мг/мг во фракциях больных сахарным диабетом. Аналогичный результат был получен при сравнении в связывающих инсулин фракциях здоровых доноров и больных сахарным диабетом количества серосодержащих аминокислот. Содержание цистеина в пробах из сывороток здоровых доноров было достоверно выше, чем в пробах больных сахарным диабетом (0,0048±0,00008 мг/мг, по сравнению с 0,00021±0,00007 мг/мг). Таким образом, белковый компонент связывающих инсулин фракций плазмы крови больных сахарным диабетом, очевидно, обладает небогатым разнообразием аминокислотного состава, что характерно для транспортных гликопротеидов крови (Марри, 1993). В составе белковой части молекул, образующих комплекс с инсулином в сыворотке крови здоровых доноров, присутствует больше ароматических и серосодержащих аминокислот. Это, вероятно, подтверждает предположение о присутствии в комплексе связывающих инсулин белков здоровых доноров, наряду с транспортными гликопротеидами, альбумина. Проведено количественное определение углеводов в пробах связывающих инсулин фракций крови здоровых доноров и больных сахарным диабетом. Установлено, что в пробах здоровых доноров содержание углеводов составляет 0,00128±0,0004 мг (около 20% по отношению к содержанию белка в пробе), в пробах больных сахарным диабетом - 0,00192±0,0002 мг (40%).

Выявление в связывающем инсулин комплексе липидов и гормонов первой и второй групп. Наличие у связывающих инсулин белков свойств, характерных для липокалинов, послужило основанием для изучения содержания в полученных фракциях липидных структур и гидрофобных гормонов. В полученных аффинно связывающих инсулин фракциях проведено определение холестерола и триглицеридов. В пробах здоровых доноров содержание холестерола составило 0,070,0004 ммоль/л, в пробах больных сахарным диабетом - 0,080,0007 ммоль/л. В связывающих инсулин фракциях здоровых доноров выявлено 0,10100,003 ммоль/л триглицеридов, во фракциях больных диабетом -0,09440,0025 ммоль/л. Установлено, что в связывающих инсулин фракциях сыворотки крови здоровых доноров и больных сахарным диабетом присутствуют следующие гидрофобные гормоны: тироксин (11,0±0,5 нмоль/л), трийодтиронин (1,3 ±0,06 нмоль/л), тестостерон (7,0±0,03 нмоль/л). Достоверного различия в содержании липидов и гидрофобных гормонов во фракциях здоровых доноров и больных сахарным диабетом не выявлено.

В то же время, в составе связывающих инсулин фракций выявлены незначительные количества белковых гормонов: 1МЕ/мл лютеинизирующего гормона, 0,03 мкМЕ/мл тиреотропного гормона, 0,5 МЕ/мл пролактина (Гарипова, 2007). Полученные экспериментальные данные свидетельствуют о том, что выделенные на иммобилизованном инсулине белки, формируют ядро транспортного комплекса, переносящего в плазме крови не только гидрофобные соединения, но и белковые гормоны. Биологическое значение существования выявленного транспортного комплекса может заключаться в повышении надежности доставки гормонов к клеткам-мишеням за счет использования дублирующего механизма их связывания с клетками-мишенями с участием транспортных гликопротеидов и их клеточных рецепторов.

Изучение иммуномодулирующих свойств связывающих инсулин белков сыворотки крови. Присутствие в связывающих инсулин фракциях -фетопротеина и б₁-кислого гликопротеина, обладающих иммуномодулирующим действием (Lester et. al., 1976, Sheppard et. al., 1977, Sell et. al., 1977, Lu et. al., 1984, Fleischer et.al., 1988, Pinheiro et. al., 1992, Mizejewski, 2004, Cavin et. al., 2004, Smith et.al., 2006), послужило основанием для изучения иммуномодулирующих свойств выделенных фракций. Исследование проведено на модели иммунизации белых лабораторных мышей дифтерийным анатоксином. Проведена иммунизация трех групп белых лабораторных мышей: двух опытных и контрольной. Мышей всех групп трехкратно иммунизировали дифтерийным анатоксином. В опыте 1 мышей иммунизировали анатоксином с добавлением инсулинсвязывающих гликопротеидов, выделенных из сывороток крови здоровых доноров, в опыте 2 - при добавлении аналогичной фракции из крови больных сахарным диабетом. Полученные антисыворотки к дифтерийному анатоксину оттитрованы в реакции пассивной гемагглютинации с диагностикумом, выявляющим антитела к дифтерийному анатоксину. Как следует из данных, приведенных на рисунке 6, среднее значение титра антител к дифтерийному токсину в опыте 1 достоверно ниже этого показателя, определенного в контроле. Среднее значение логарифма (log₂) титра в опыте 1 составило 3,76±0,31, в контроле - 6,44±0,39 (различие достоверно с p=0,00035, t₁=10,55). Достоверного влияния связывающих инсулин белков крови больных сахарным диабетом на концентрацию антител к дифтерийному анатоксину не выявлено: концентрация противодифтерийных антител в опыте 2 составила 6,20±0,34 по сравнению с 6,44±0,39 в контроле (t₂ =1,43; р=0,159). Таким образом, концентрация антител к дифтерийному анатоксину в опытной группе с проведением иммунизации на фоне связывающих инсулин белков крови здоровых доноров достоверно ниже, чем в группе контрольных мышей. Следовательно, транспортные белки, на фоне которых проводилась иммунизация, вызвали достоверное снижение иммунного ответа к дифтерийному анатоксину. Вероятно, это свидетельствует о наличии у них иммуносупрессирующих свойств.

Рис. 6. Исследование иммуномодулирующего действия связывающих инсулин фракций крови здоровых доноров и больных сахарным диабетом. Средняя концентрация противодифтерийных антител: 1 - в контрольной группе мышей; 2 - в опыте 1 (иммунизация мышей дифтерийным анатоксином на фоне связывающих инсулин белков здоровых доноров); 3 - в опыте 2 (иммунизация мышей дифтерийным анатоксином на фоне связывающих инсулин белков больных сахарным диабетом).

Биологическое значение подавляющего иммунный ответ действия изучаемых белков крови, очевидно, заключается в предотвращении аутоиммунных реакций к гормонам и биологически активным веществам, входящим в состав транспортного комплекса. Возможно, иммуносупрессирующие свойства белков транспортирующего гормоны комплекса объясняются присутствием в их составе -фетопротеина, в норме выполняющего функцию защиты инсулина и других присутствующих в комплексе гормонов от распознавания клетками иммунной системы. Вероятно, отсутствие иммуносупрессивного действия белков транспортного комплекса при сахарном диабете первого типа объясняется замещением в его составе -фетопротеина белком острой фазы воспалительной реакции кислым ₁- гликопротеином.

*****

Экспериментально доказано, что в крови человека при участии ионов цинка инсулин вовлекается в сложные межмолекулярные взаимодействия с транспортными белками крови и связывается с поверхностью эритроцитов. Таким образом, инсулин транспортируется в крови при участии двух механизмов: сывороточного и эритроцитарного. Значение коэффициента распределения инсулина между эритроном и плазмой крови, в норме составляющее 0,49±0,005, свидетельствует о преобладании в крови здоровых доноров транспорта гормона плазмой крови. Значительно больший вклад сывороточного транспорта в доставку инсулина по сравнению с транспортом других белковых гормонов, свидетельствует о биологической целесообразности снижения его связывания с эритроцитами и включения в транспортирующий гормоны комплекс сыворотки.

Показано, что в норме связывающие инсулин белки плазмы крови обладают иммуносупрессирующими свойствами. Вероятно, биологическое значение включения инсулина в сывороточный комплекс заключается в его защите от аутоиммунного распознавания и в повышении эффективности доставки гормона к клеткам-мишеням. Необходимость взаимодействия инсулина с транспортными белками плазмы крови, возможно, объясняется наличием в его структуре антигенных детерминант, хорошо распознаваемых собственной иммунной системой. Это предположение подтверждается существованием в крови человека транспортных молекул у антигенно родственных инсулину гормонов релаксина (Tager, 1984) и инсулиноподобных факторов роста 1 и 2 (Suikkari et.al., 1988; Lee et.al., 1989).

Установлено, что транспортирующие инсулин белки плазмы крови при физиологических значениях рН формируют транспортный комплекс, ядро которого в норме формируют альбумин, - фетопротеин и трансферин. Выявленный транспортный комплекс является общим для ряда гидрофильных и гидрофобных гормонов. Комплекс, наряду с инсулином, включает примерно 50% всего содержащегося в сыворотке трийодтиронина, значительный процент тестостерона и других гидрофобных гормонов, а также некоторое количество белковых (пролактина) и гликопротеидных (лютеинизирующего и тиреотропного) гормонов. Можно предположить, что транспортный комплекс содержит оптимальное для клеток соотношение гормонов и его биологическое значение заключается в обеспечении дублирующего механизма доставки гормонов за счет клеточных рецепторов к транспортным белкам.

Наряду с транспортирующим гормоны комплексом, инсулин включается также в иммунные комплексы, количественно более представленные в связывающей инсулин фракции больных сахарным диабетом. Показано, что при сахарном диабете первого типа альбумин и -фетопротеин замещаются в транспортном комплексе сыворотки крови ₁-глобулинами, в частности, белком острой фазы воспалительной реакции ₁-кислым гликопротеином. Это приводит к практическому исчезновению иммуносупрессирующих свойств белков ядра транспортного комплекса. Изменение состава белков транспортного комплекса при сахарном диабете, вероятно, является также причиной снижения включения в него инсулина и компенсаторного возрастания связывания инсулина с эритроном.

Так как инсулин включается в транспортный комплекс наряду с другими гормонами, правомерно предположить, что при сахарном диабете первого типа нарушается доставка к клеткам-мишеням не только инсулина, но и других входящих в комплекс гормонов. Возможно, это объясняет многочисленные примеры из клинической практики, свидетельствующие о том, что сахарный диабет первого типа часто сочетается с другими аутоиммунными поражениями эндокринной системы.

Выводы

1. Установлено, что особенность транспорта инсулина в крови человека в сравнении с транспортом других белковых гормонов, заключается в равноценном вкладе в доставку гормона к клеткам - мишеням эритроцитарной и сывороточной транспортных систем.

2. При сахарном диабете первого типа наблюдается достоверное увеличение вклада эритроцитарной системы в доставку инсулина к периферическим тканям, обусловленное снижением его взаимодействия с транспортными белками крови.

3. Разработан и запатентован новый метод синтеза матрицы для аффинной хроматографии, позволяющий получить сорбент с иммобилизованным инсулином, не загрязняющий выделенные связывающие инсулин белки продуктами расщепления полисахаридной матрицы.

4. Показано, что сорбенты, синтезированные на основе нового носителя, обладают высокой специфической емкостью, низкой неспецифической сорбцией, лучшими, по сравнению с бромциан-Сефарозой 4В, гидродинамическими свойствами и повышенной стабильностью.

5. Синтезирован и запатентован сорбент с иммобилизованной фенилбороновой кислотой, на его основе создана диагностическая система для аффинного определения гликозилированной формы гемоглобина в капиллярной крови человека.

6. Разработан метод определения концентрации связывающих инсулин белков сыворотки крови в реакции пассивной гемагглютинации с эритроцитами, сенсибилизированными инсулином.

7. Показано, что транспортирующие инсулин белки плазмы крови при физиологических значениях рН формируют транспортный комплекс, ядро которого в норме формируют альбумин, - фетопротеин и трансферин, для включения инсулина в транспортный комплекс необходимо присутствие ионов цинка.

8. При сахарном диабете первого типа альбумин и - фетопротеин замещаются в транспортирующем инсулин комплексе сыворотки крови белком острой фазы воспалительной реакции кислым ₁- гликопротеином.

9. Показано, что наряду с инсулином, в сывороточный транспортный комплекс включаются гидрофобные (тироксин, трийодтиронин, тестостерон) и гидрофильные (тиреотропный гормон, пролактин, лютеинизирующий гормон) гормоны, а также триглицериды и холестерол.

10. Доказано, что белки транспортирующего инсулин комплекса здоровых доноров обладают иммуносупрессивным действием.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

Статьи, опубликованные в журналах, рекомендованных ВАК

1. Гарипова М.И., Фазлыева В.А., Беишев Я.Х., Хавкин Ю.А. Высокочувствительный вариант изоэлектрического фокусирования с иммунопроявлением. // Лабораторное дело (Клиническая и лабораторная диагностика).-1984.-№3.-С.159-162.

2. Зайцев Е.М., Свиридов В.В., Гарипова М.И., Титова Н.Г., Лебедев В.С. Исследование молекулярной гетерогенности моноклональных и поликлональных антител к дифтерийному токсину. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология.-1985.-№2.-С.37-41.

3. Гарипова М.И., Фролова И.С., Клеева О.Б., Кузнецов В.П. Новый иммуносорбент на основе поливинилового спирта для очистки интерферона. // Доклады академии наук России.-1993.- Т.328.-№6.-736-739.

4. Гарипова М.И., Фролова И.С., Клеева О.Б., Кузнецов В.П. Иммуносорбент для очистки интерферона. // Вопросы вирусологии.-1993.-Т.38.-№3.-С.129.-132.

5. Гарипова М.И. Применение аффинных сорбентов повышенной стабильности в биотехнологии. // Вестник Башкирского университета.-1998.-№1.-С.41-44.

6. Хайбуллина С.Ф., Морзунов С.П., Веселов С.Ю., Гарипова М.И. Ранняя диагностика геморрагической лихорадки с почечным синдромом на основе использования рекомбинантного нуклеокапсидного белка вируса пумала. // Микробиология.- 2003.-№1.-с.55-59.

7. Гарипова М.И., Баранова М.В., Штыкова Л.И. Аффинное выделение инсулинсвязывающего компонента сыворотки крови человека и изучение его биохимической природы. // Вестник Башкирского университета.-2005.-№2.-С. 46-48.

8. Гарипова М.И., Умнова В.Ю., Штыкова Л.И. Инсулинсвязывающий компонент сыворотки человека в норме и при заболевании сахарным диабетом первого типа. // Вестник Башкирского университета.-2005.-№4.-С.44-46.

9. Гарипова М.И. Изучение механизмов транспорта инсулина в крови человека. // Вестник Оренбургского государственного университета .-2007.-№ 75.-С.72-74.

10. Гарипова М.И., Ибрагимов Р.И., Умнова В.Ю., Штыкова Л.И. Инсулинсвязывающий компонент сыворотки крови человека в норме и при заболевании сахарным диабетом первого типа. // Клиническая и лабораторная диагностика. -2008.-№4.-С. 44-45.

Монография

11. Гарипова М.И. Транспорт инсулина в крови человека. -Уфа.- РИЦ БашГУ.-2007.-127 С.

Патенты и авторские свидетельства

12. Гарипова М.И., Леплянин Г.В., Антонова Л.Ф., Хавкин Ю.А. Способ получения иммобилизованных белков. Авторское свидетельство № 1500670.-1989.

13. Гарипова М.И., Басченко И.А., Еркеева И.А., Шигапова А.И. Способ получения носителя для иммобилизации аминосодержащих соединений. Авторское свидетельство № 1789532 22.09.1992.

14. Гарипова М.И., Толстиков Г.А., Монаков Ю.Б., Басченко И.А., Юсупова Ф.Г. Сшитый поливиниловый спирт с иммобилизованной м-аминофенилбороновой кислотой в качестве сорбента для аффинного определения гликозилированного гемоглобина.- Патент на изобретение № 20935525.2002.

15. Гарипова М.И., Давидович М.Г. Пористый силикагель, модифицированный глицерилпропилсиланом и эпихлоргидрином с иммобилизованной мета- аминофенилбороновой кислотой в качестве сорбента для аффинного определения гликозилированного гемоглобина. «Изобретения и полезные модели».- 2004.-N17.-C.564-565. Патент на изобретение № 2231059, зарегистрирован 20.06.2004.

Статьи, материалы, тезисы

16. Гарипова М.И. Изучение изоэлектрических спектров иммуноглобулинов класса Д больных множественной миеломой. // Конференция молодых ученых Башкирского филиала АН СССР-Уфа.-1983.-С.185.

17. Гарипова М.И. Антигенные варианты иммуноглобулинов класса Д человека.- // Конференция молодых ученых Башкирского филиала АН СССР-Уфа.-1983.-С.186.

18. Гарипова М.И., Киреева Т.А., Басченко И.А., Хавкин Ю.А.-Изучение влияния заряда антигена на спектротип антител. // Аффинная хроматография антител-теоретические и прикладные аспекты. 1 Всесоюзная конференция .-Москва-1983.-с.253.

19. Гарипова М.И., Хавкин Ю.А., Свиридов В.В., Зайцев Е.М. Принципы конструирования иммунопрепаратов на основе моноклональных (гибридомных) антител. //Новые направления в биотехнологии. 1 Всесоюзная конференция.-Пущино.-1984.-с.107.

20. Гарипова М.И. Изучение влияния заряда антигена на спектротипы антител. //Конференция молодых ученых Башкирского филиала АН СССР.-Уфа.-1985.-С.152.

21. Гарипова М.И. Методы повышения чувствительности изоэлектрического фокусирования. // Конференция молодых ученых Башкирского филиала АН СССР.-Уфа.-1985.-С.153.

22. Гарипова М.И. Формирование пористой структуры поливинилового спирта с заданными свойствами. // Конференция молодых ученых Башкирского филиала АН СССР.-Уфа.-1985.-С.154.

23. Гарипова М.И., Киреева Т.А., Хавкин Ю.А. Исследование молекулярной гетерогенности моноклональных и поликлональных антител. // 5 Всесоюзный биохимический съезд.-1986.-С.34.

24. Гарипова М.И., Басченко И.А., Смирнова Н.Н. Особенности биоаффинных взаимодействий на ферромагнитных носителях. // 5 конференция молодых ученых социалистических стран по биоорганической химии.-Пущино.-1988.-С.138.

25. Гарипова М.И., Басченко И.А., Сысоева Л.Б. Аффинные сорбенты на основе поливинилового спирта. // Изучение и рациональное использование природных ресурсов.-Уфа.-1991.-С.95.

26. Гарипова М.И., Еркеева И.А., Басченко И.А., Сысоева Л.Б. Выделение и очистка на иммобилизованной гиалуроновой кислоте гиалуронидазы семенников северного оленя. // Изучение и рациональное использование природных ресурсов.-Уфа.-1991.-С.97.

27. Гарипова .И.. Басченко И. А., Юсупова Ф.Г., Маннанова Г.В. Определение гликогемоглобина аффинным методом и его диагностическое значение для выявления сахарного диабета. // Изучение и рациональное использование природных ресурсов.-Уфа.-1991.-С.98.

28. Гарипова М.И., Басченко И.А., Монаков Ю.Б. Иммуносорбент на основе поливинилового спирта. // 1 съезд иммунологов России.-Новосибирск.-1992.-с.86.

29. Гарипова М.И. Разработка аффинной диагностической системы для определения гликогемоглобина в капиллярной крови человека. // Сб. «Современные проблемы эволюционной морфологии и физиологии».-Уфа.-1996.-С.59-63.

30. Гарипова М.И. Аффинные сорбенты повышенной стабильности и их использование в биотехнологии и медицинской диагностике. // Сб. «Современные проблемы эволюционной морфологии и физиологии».-Уфа.-1996.-С.85-89.

31. Гарипова М.И. Бобкова Е.В. Использование сорбента, устойчивого к биодеградации, для аффинного выделения гамма-интерферона. // Сб. «Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета.-1996.-с.56.

32. Хафизова Л.Г., Гарипова М.И., Бобкова Е.В. Выделение фактора переноса, имеющего сайты аффинного связывания с поверхностными антигенами Candida Albicans. // Сб. «Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета.-1996.-С.57.

33. Гарипова М.И. Проблемы и перспективы применения аффинной хроматографии в биотехнологии. // Сб. «Результаты научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета».-1997.-С.7-9.

34. Гарипова М.И. Информативность и методы определения гликозилированного гемоглобина при состояниях, не связанных с сахарным диабетом. // Сб. «Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета.-1997.-С.101-103.

35. Гарипова М.И., Басченко И.А., Зарудий Ф.Х., Давлетов Э.Г. Разработка аффинного метода определения гликозилированного гемоглобина в крови человека. // Здравоохранение Башкортостана.-1997.-№6.-С.55-57.

36. Гарипова М.И. Использование интегральных методов для выявления нарушений углеводного обмена. // Конференция по научно-техническим программам минобразования России.-1997.-С.58-61.

37. Garipova M.I., Kalimullina L.B. Estimation of tissue metabolism damage and approach to it's correction. // 33 International Congress of Physiologica Science.-St.Petersburg.-1997.-p.543.

38. Гарипова М.И., Басченко И.А. Метод оценки влияния экологияческих факторов на организм человека. // 3-й съезд физиологов Сибири и Дальнего Востока-Новосибирскю-1997.-С.36

39. Хафизова Л.Г., Гарипова М.И., Бобкова Е.В. Повторное использование лейкоцитов после вирусиндуцированного синтеза интерферона для получения препарата с активностью фактора переноса. //Сб. «Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета.-1998.-С.140-142..

40. Гарипова М.И., Габдуллина З.З., Веселов С.Ю. Иммуноопределение с использованием метки коллоидным золотом с серебряным усилением. //Сб. «Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета.-1998.-С.126-1129.

41. Гарипова М.И. Метод оценки влияния экологических факторов на организм человека. // 3-й съезд физиологов Сибири и Дальнего Востока-Новосибирск. -1997.-С. 36.

42. Гарипова М.И. Сб. Применение интегральных методов оценки состояния углеводного обмена для раннего выявления дезадаптаций человека. //Сб. Экология человека в свете проблем городской антропоэкосистемы.-Уфа.-1998.-С.42-61.

43. Гарипова М.И., Сысоева Л.Б. Применимость аффинного определения гликозилированного гемоглобина для диагностики сахарного диабета. // Сб. Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского гос. университета.- Уфа-1999.-С. 171-173.

44. Гарипова М.И., Луканин А.С. Показатель, позволяющий прогнозировать тип заживления послеоперационных ран. // Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей.-2001.-С.Петербург.- С.25-26.

45. Гарипова М.И. Применение интегральных показателей состояния углеводного обмена в исследованиях по экологии человека. // Материалы конференции «Экологические, морфологические особенности и современные методы исследования живых систем».- Казань.-2003.-С.62-63.

46. Гарипова М.И., Ибрагимов Р.И., Умнова В.Ю., Штыкова Л.И. Инсулинсвязывающий компонент сыворотки человека в норме и при заболевании сахарным диабетом. // Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Достижения биологической функционологии и их место в практике образования».- Самара.-2003.-С.62-63.

47. Гарипова М.И., Киреева Н.А., Баранова М.В., Елисеева О.С., Першина А.С., Набиуллина Р.Р. Аффинное выделение связывающих инсулин сывороточных гликопротеидов человека и изучение их разнообразия в норме и при сахарном диабете. // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова.- 2007.-т.3.-№1.-С 7-16.

48. Елисеева О.С., Киреева Н.А., Гарипова М.И. Состав связывающих инсулин транспортных белков крови человека. // Материалы международной научной конференции «Проблемы биоэкологи и пути их решения».-Саранск.-2008.-С.303-305.

49. Першина А.С., Киреева Н.А., Гарипова М.И. Соотношение эритроцитарного и сывороточного транспорта инсулина. // Материалы международной научной конференции «Проблемы биоэкологи и пути их решения».- Саранск.-2008.-С.318-319.

Размещено на Allbest.ru