Канцерогенез и мутагенез
Исследование клинического влияния окисленного низкомолекулярного соединения глутатиона NOV-002 на инвазию опухолевых клеток и метастазирование в животной модели. Обоснование эффективности этого препарата в химиотерапии в комбинации с гемцитабином.
| Рубрика | Медицина |
| Вид | научная работа |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 26.11.2017 |
| Размер файла | 423,7 K |
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Научная статья
КАНЦЕРОГЕНЕЗ И МУТАГЕНЕЗ
Аннотация
Gumireddy et al., J Carcinogene Mutagene 2013, S7
http://dx.doi.org/4172/2157-2518.S7-002, открытый доступ.
NOV-002, миметик глутатиона дисульфида подавляет инвазию опухолевых клеток и метастазирование
Kiranmai Gumireddy1#, Anping Li1#, Liii Cao1,2, Jinchun Yan3, Lin Liu1,4, Xiaowei Xu5, Christopher Pazoles6 and Qihong Huang1*
1 The Wistar Institute, 3601 Spruce Street, Philadelphia, PA 19104, USA
2 Central laboratory, Shandong Provincial Qianfoshan Hospital, Jinan, Shandong 250014, P.R. China
3 University of Washington Medical Center, 1959 N.E. Pacific Street, Seattle, WA 98195, USA
4 Department of Oncology, Shandong Cancer Hospital and Institute, Jinan, Shandong 250117, P.R. China
5 Department of Pathology and Laboratory Medicine, Hospital of the University of Pennsylvania, Philadelphia, PA 19104, USA
6Novelos Therapeutics Inc. One Gateway Center, Newton, MA 02458, USA
#Эти авторы внесли равноценный вклад в исследование.
* Ответственный автор: Qihong Huang, The Wistar Institute, 3601 Spruce Street, Philadelphia, PA 19104, USA, E-mail: mailto:qhuang@wistar.org.
Ссылка: Gumireddy K, Li A, Cao L, Yan J, Liu L, et al. (2013) NOV-002, A Glutathione Disulfide Mimetic, Suppresses Tumor Cell Invasion and Metastasis. J Carcinogene Mutagene S7:002. doi:10.4172/2157-2518.S7-002
Защищено авторским правом © 2013 Gumireddy K, et al. Это статья в открытом доступе, которая распространяется по условиям лицензии Creative Commons Attribution License, что позволяет в неограниченном объеме использовать, распространять материал на любом носителе, если дается ссылка на автора и оригинальную работу.
Резюме
Метастазирование является основной причиной смерти от рака. Большинство современных видов медицинского лечения направлены на устранение первичной опухоли, но не оказывают оптимальных эффектов на метастазирование. Отсутствие эффективной терапии для профилактики и лечения метастазов приводит к высоким показателям смертности у онкологических больных с прогрессирующими заболеваниями. В этой статье сообщается, что окисленное низкомолекулярное соединение глутатиона NOV-002 снижает инвазию опухолевых клеток in vitro и метастазы в животной модели в комбинации с препаратом химиотерапии гемцитабином. NOV-002 регулирует клеточные сигнальные пути, подавляя фосфорилирование ErbB2 и P13K, и последующее ингибирование активации Akt и RhoA. Полученные результаты предполагают, что NOV-002 воздействует на клеточные сигнальные пути, играющие важную роль в инвазии и метастазировании, и потенциально может быть эффективным препаратом для лечения метастазов в комбинации с иными препаратами химиотерапии.
Введение
Метастазирование представляет собой распространение опухоли в отдаленные участки после распространения рака из первичной области поражения [1-3]. Если рак диагностировали до распространения заболевания, возможно успешное излечение методами хирургического вмешательства, лучевой терапии и химиотерапии. Но если рак диагностируют после метастазирования, эффективность лечения намного снижается [21. Более того, из-за отсутствия диагностического инструментария, у многих пациентов, не имеющих признаков поражения метастазами, при постановке изначального диагноза метастазы развиваются позднее. Поэтому именно метастазы, а не первичная опухоль, являются причиной большинства смертей, связанных с раком, и поэтому эта перспектива вызывает наибольший страх у онкологических больных [5].
Метастазирование представляет собой многоэтапный процесс, который требует координированных действий целого ряда генов [6-8]. Для завершения этого сложного пути необходима координация генов, отвечающих за каждый этап процесса метастазирования. Было показано, что многочисленные клеточные сигнальные пути либо благоприятствуют метастазированию, либо подавляют его [6-8]. Сигнальная сеть ErbB2 - это сеть, отвечающая за метастазирование. ErbB2 является членом суперсемейства рецептора тирозинкиназы подкласса I [9-12]. ErbB2 играет важную роль в развитии рака у человека.
Экспрессия или активация ERBB2 изменяется на фоне многочисленных типов эпителиального рака, например, рака молочной железы, рака яичника, рака желудка и немелкоклеточного рака легкого [13-16]. ErbB2 также играет важную роль в метастазировании опухоли [17-21]. Активация ErbB2 приводит к стимуляции многочисленных клеточных сигнальных путей, например, пути фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K)-AKT, пути STAT, пути митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK) и SRC тирозинкиназы [9-12]. Активно изучают сигнальный мезанизм ErbB2 и нисходящие сигнальные молекулы, но регуляция ErbB2 с помощью редокс-гомеостаза и ее эффекты на клеточные процессы всесторонне не изучались.
NOV-002, состоящий из динатриевой соли глутатиона дисульфида и цисплатина в соотношении 1,000:1, является миметиком окисленного глутатиона (GSSG), который регулирует окислительный сигналинг. Как было продемонстрировано, NOV002 модулирует клеточный редокс-баланс в человеческих клетках HL-60 [22,23].
Это сопровождается изменением тиолсодержащих белков клеточной поверхности, которые чувствительны к редокс-условиям и регулируют клеточные сигнальные пути в различных клеточных процессах [22,23]. NOV-002 оказывает плеотропные эффекты на клеточные сигнальные пути. Препарат активирует сигнальный путь JNK, отвечающий за пролиферацию клеток [22,23]. Было также показано, что GSSG способен активировать сигнальный путь MAPK, что приводит к клеточной смерти [24,25]. Эффекты GSSG на регуляцию клеточных сигнальных путей зависят от типа клеток.
Хотя редокс-регуляция NOV-002 приводит к плеотропным эффектам на функции клеток, его эффекты на метастазирование еще не изучались. Было показано, что NOV-002 регулирует сигнальный путь ErbB2-PI3K и подавляет инвазию клеток in vitro и метастазирование in vivo в комбинации с препаратом химиотерапии гемцитабином.
Материалы и методы
Антитела и реактивы. Античеловеческая протеинкиназа, фосфо-протеинкиназа-(Thr-308) были приобретены в компании Cell Signaling Technology (Beverly, MA); ErbB2, фосфорилированный тирозин, клон 4Gb, киназа P13 p85 и набор реактивов для активации RhoA были приобретены в компании Upstate Biotechnology (Lake Placid, NY).
Клеточная культура. Раковые клеточные линии человека HCT15, MDA-MB-436, A549, SKOV3 и мышиная раковая клеточная линия 4T1 были посеяны в клетках DMEM, HCT116 на среде McCoy 5A, Co1o205 на среде RPMI с 10 % фетальной бычьей сывороткой (FBS). Все клетки выращивали при температуре 37°C с 5 % C02.
Активность Rho измерялась по реакции преципитации и связывания GTP Rho с агарозными гранулами Rhotekin (набор реактивов для активации Rho, Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY, USA) согласно инструкциям производителя.
Иммуноблоттинг и иммунопреципитация. Иммуноблоттинг и иммунопреципитация проводились, как изложено далее [26, 27]. Вкратце, клетки лизировали в буфере RIPA. Проводили электрофорез на равном количестве белка для каждого образца с 10 % гелем SDS-PAGE и блоттинг на нитроцеллюлозной мембране Hybond, Amersham (Piscataway, NJ). Мембрану блокировали 5 % раствором обезжиренного молока и изучали с помощью соответствующих антител. Белки детектировали методом усовершенствованной хемилюминесценции (ECL, Amersham Pharmacia Biotech).
Клеточные лизаты инкубировали с антителами для иммунопреципитации. Иммунокомплексы разделяли с помощью полиакримидных гелей методом SDS PAGE. Вестерн-блоттинг выполняли, как описано выше.
Вестерн-блоты сканировали и измеряли плотность полос с помощью программного обеспечения Image-Pro Plus (версия 6.0). Относительную плотность рассчитывали путем деления процентного значения для каждого образца на процентное значение соответствующего контроля. Данные представлены в виде среднего значения ± SD в трех независимых экспериментах.
Анализ инвазии. Инвазионные анализы матригелем проводили с помощью камер трансвелла (размер пор 8 мкм; Costar), как описано выше [26]. Вкратце, камеры трансвелла покрывали матригелем с редуцированным количеством фактора роста. На протяжении 24 часов удаляли сыворотку из субкофлюентных клеточных культур и клеточную суспензию добавляли в верхнюю камеру. NOV-002 (10 мкм, 30 мкм, 100 мкм, 300 мкм, 1 мМ) добавляли в клеточную суспензию. Полную среду добавляли в нижние ячейки камер. Клетки, мигрирующие в нижнюю поверхность фильтров, фиксировали и окрашивали. Получали изображения трех различных полей X10 каждой мембраны и подсчитывали число инвазивных клеток. Использовали среднее значение трех анализов для каждого условия эксперимента.
Мышиная модель ортотопического ксенотрансплантата. Чтобы определить животную модель для изучения метастазов и лечения NOV-002, клетки 1X106 4T1-Luc ортопически трансплантировали в скопления жировой ткани в молочной железе 7-недельных мышей Balb/c. Лечение начинали на второй день после трансплантации клеток. Мышей разделяли на четыре группы по 10 животных в группе. Мышам контрольной группы ежедневно вводили солевой раствор (PBS) внутрибрюшинно (50 мкл/мышь) на протяжении первых двух недель и затем на протяжении пяти дней в неделю в течение трех недель. В лечебной группе NOV-002, NOV-002 (100 мг/кг/сутки) вводили и.п. на протяжении первых двух недель и затем пять дней в неделю на протяжении трех недель. В лечебной группе гемцитабина, гемцитабин (5 мг/кг/сутки) вводили и.п. один раз в неделю на протяжении пяти недель. В группе NOV-002 и группе комбинированного лечения гемцитабином и NOV-002 (100 мг/кг/сутки) вводили и.п. на протяжении первых двух недель и затем пять дней в неделю в течение трех недель; гемцитабин (5 мг/кг/сутки) вводили и.п. один раз в неделю на протяжении пяти недель. После трансплантации выполняли рентгеновское обследование мышей с люцифераза-положительными опухолями, используя биолюминесцентную систему Xenogen IVIS, согласно описанной процедуре [28].
Нокдаун экспрессии ErbB2 короткими шпилечными РНК. Для получения ретровирусов осуществляли котрансфекцию человеческих эмбриональных клеток почек (HEK) 293T и 1,0 мкг плазмида, экспрессирующего Retro ErbB2 shRNA, или нетаргетную shRNA и 0,5 мкг упаковочного плазмида SVA, используя липифексамин 2000 (Invitrogen) согласно спецификациям производителя. Вирусы отбирали для анализа через 48 часов методом фильтрации, используя фильтры 0,45 мкм (Millipore). Клетки Co1o205 и A549 трансфектировали полученными ретровирусами и методом иммуноблоттинга определяли эффективность нокдауна.
Анализ жизнеспособности клеток. Жизнеспособность клеток определяли количественным образом, используя набор реактивов для анализа роста клеток MTT (Millipore) согласно протоколу производителя. Вкратце, экспоненциально растущие клетки выращивали в тройном объеме на 96-лучночных плоскодонных плашках с клеточной культурой в объеме 5x103 клеток/плашка в среде 0,l мл и обрабатывали NOV-002 в конечной концентрации 1мМ. Контрольные лунки содержали среду без лекарственного препарата. Через 72 ч клетки инкубировали 0,5 мг/мл MTT (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий бромид) на протяжении 4 часов при температуре 37°C. По окончании инкубации растворяли пурпурные кристаллы MTT-формазана, добавляя 0,1 мл изопропанола и 0,04 N HC1. Жизнеспособность клеток измеряли при 570 нм, используя многолуночный планшет-ридер (Wallac Victor3, PerkinElmer). Соотношение жизнеспособных клеток рассчитывали по следующей формуле: (средняя абсорбция препарата 1мМ/(средняя абсорбция контроля) x 100. Данные представляли в виде среднего значения ± SD трех независимых экспериментов.
Статистический анализ. Средние значения двух точек данных сравнивали по критерию Стьюдента. Значение p<0,05 считали статистически значимым.
Результаты
Определяли эффекты NOV-002 на инвазию клеток раковых клеточных линий различных типов. Было отмечено, что NOV-002 дозозависимым образом подавляет инвазию в клетках рака толстой кишки HCT15, HCT116 и Co1o205, клетках рака молочной железы MDA-MB-436, клетках рака легкого A549 и клетках рака яичников SKOV3 (Рис. 1). Процентная доля супрессии составляла более 90 % при введении 1мМ NOV002 во всех этих клеточных линиях (Рис. 1). Эффект на инвазию NOV-002 не является результатом цитотоксичности, так как 1 мМ NOV-002 не оказывает влияния на клеточную смерть в этих шести раковых клеточных линиях. Полученные результаты позволяют предположить, что NOV-002 может оказывать влияние на молекулы, играющие важную роль в инвазивном процессе.
Рисунок 1: NOV-002 подавляет инвазию клеток
Предполагается, что эффекты NOV-002 на клеточные функции опосредованы его эффектами на белки клеточной поверхности, так окисленный глутатион (GSSG) пассивно не пересекает клеточных мембран [29].
На диаграмме показано число пораженных клеток из человеческих раковых клеточных линий после введения различных доз NOV-002 или контроля (вода) в инвазивном анализе.
Рисунок 2: NOV-002 подавляет фосфорилирование ErbB2 и субъединицы P13K P85
(A) Иммуноблоты фосфорилированного ErbB2 и общего ErbB2 в клетках Сolo205 и A549 при введении различных доз NOV-002 или контроля (вода). (B) Иммуноблоты фосфорилированной субъединицы P13K P85 и общего P85 в клетках Colo205 и A549 после введения различных доз NOV-002 или контроля (вода). Фосфорилирование P85 определяли методом иммунопреципитации с помощью антитела P85 с последующим иммуноблот-анализом с фосфотирозин-специфичным антителом.
Были определены эффекты NOV-002 на активацию ErbB2, так как ErbB2, как было показано, регулирует инвазию клеток при раке [17-21] и регулируется редокс-механизмами [26]. Уровень фосфорилирования ErbB2 достоверно снижался при введении 1мM NOV-002 в клеткиA549 и Co1o205, тогда как общий уровень экспрессии ErbB2 не менялся, что свидетельствует о подавлении активации NOV-002 (Рисунок 2A). ErbB2 регулирует многочисленные клеточные сигнальные пути, в т.ч. P13K, MAPK и SRC [10,12]. Изучали эффекты NOV-002 на активность P13K, играющей важную роль в инвазии клеток и метастазировании [30-32]. Было показано, что уровень фосфорилирования субъединицы P85 P13K коррелирует с активностью P13K [33,341]. Фосфорилирование P85 определяли методом иммунопреципитации с помощью антитела P85 с последующим иммуноблот-анализом при использовании фосфотирозин-специфичного антитела. Уровень фосфорилирования P85 существенно снижался при введении 1мМ NOV-002 в клетки A549 и Colo205, что свидетельствовало о подавлении активации PI3K (Рисунок 2 В). Для определения роли ErbB2 в подавлении клеток выключали ErbB2 в клетках A549 и Colo205, используя короткую шпилечную РНК (shRNAs).
Вестерн-блот-анализ подтвердил, что экспрессия ErbB2 достоверно снижается после введения shRNAs (Дополнительный Рисунок 4). Нокдаун ErbB 2 привел к снижению инвазии в клетках A549 и Colo205 (Дополнительный рисунок 5). Полученные результаты показали, что нокдаун ErbB2 повторяет фенотип супрессии инвазии, индуцированной лечением NOV-002. глутатион метастазирование гемцитабин опухолевая
Серин-треонин киназа Akt и RhoA являются основными нисходящими сигнальными молекулами активации PI3K, которые играют ключевую роль в инвазии клеток [35]. Активация Akt происходит при фосфорилировании в положении Thr308 и/или Ser473 [36,37]. Активная форма Akt редуцируется при введении NOV-002 (Рисунок 3A и Дополнительный Рисунок 6), тогда как общие уровни экспрессии Akt не меняются в зависимости от введения NOV-002.
Преципитационный анализ аффинности активного RhoA из клеточных экстрактов A549 и Colo205 выявил достоверно более низкую экспрессию RhoA после лечения NOV-002, тогда как экспрессия RhoA не меняется в зависимости от лечения NOV-002 (Рисунок 3B).
Полученные результаты позволяют предположить, что NOV-002 подавляет активацию нисходящих сигнальных молекул PI3K Akt и RhoA.
Активность NOV-002 при метастазах определялась в мышиной модели ксенотрансплантата. Было показано, что клеточная линия молочной железы 4T1 вызывает легочные метастазы, если трансплантируется в скопления жировой ткани в молочной железе. Эта линия представляет собой эффективную ортотропную модель ксенотрансплантата для изучения метастазов [27,38]. ErbB2, PI3K, Akt и RhoA выделяются в клетках 4T1 (данные не указаны), вследствие чего эта клеточная линия может использоваться в этом исследовании.
Гемцитабин - нуклеозидный аналог - был комбинирован с NOV-002, так как этот препарат используют для лечения многочисленных видов рака, например, немелкоклеточного рака легкого, рака молочной железы, рака поджелудочной железы и рака мочевого пузыря. Клетки 4T1, стабильно экспрессирующие луциферазу, применяют для трансплантации, и сигналы луциферазы, выявляемые биолюминесцентной системой Xenogen, используют для количественного определения первичной опухоли и развития метастазов [27]. Монотерапия NOV-002 не оказывает эффекта на рост первичной опухоли или метастазы (Рисунки 4A, 4B и 4C) по сравнению с контрольной терапией. Гемцитабин снижал рост первичной опухоли и метастазов приблизительно на 62 % и 58 % соответственно через пять недель после лечения по сравнению с контрольной терапией (Рисунки 4B и 4C). Применение NOV-002 в комбинации с гемцитабином подавляло рост первичной опухоли и метастазирование приблизительно на 66 % и 89 % соответственно по сравнению с контролем (Рисунки 4B и 4C). Несмотря на то, что при комбинации NOV-002 и гемцитабина не выявлено статистического различия по росту первичной опухоли по сравнению с монотерапией гемцитабином, эта комбинация достоверно подавляла рост метастазов опухоли (Рисунки 4A и 4C).
Полученные результаты показывают, что назначение NOV-002 в комбинации с гемцитабином подавляет метастазирование в мышиной модели.
Обсуждение
Результаты настоящего исследования показали, что NOV-002 подавляет фосфорилирование ErbB2, активацию PI3K и их нисходящие цели AKT и RhoA, которые регулируют инвазию клеток и метастазы (Дополнительный Рисунок 7). Проводятся дальнейшие исследования для изучения роли компонентов сигнального пути RhoA/ROCK/LIMK/Cofilin белков RhoA и в-катенина, отвечающих за активацию AKT, в контроле инвазии клеток и метастазирования. Возможно, что NOV-002 подавляет инвазию и метастазирование, регулируя сигнальные молекулы и пути, помимо ErbB2 и PI3K. Требуется провести дальнейшие исследования для определения этих молекул и путей.
Рисунок 3: NOV-002 подавляет активацию Akt и RhoA
(A) Иммуноблоты фосфорилированной Akt и общей Akt в клетках Colo205 и A549 при введении различных доз NOV-002 или контроля (вода). (B) Иммуноблоты активной RhoA и общей RhoA в клетках Colo205 и A549 при введении различных доз NOV-002 или контроля (вода).
Рисунок 4: NOV-002 подавляет метастазы в комбинации с гемцитабином в мышиной модели
(A) Биолюминесцентная визуализация легочных метастазов и первичной опухоли. Изображения получали через пять недель после лечения контрольным препаратом (PBS), NOV-002, гемцитабином или комбинацией NOV-002 и гемцитабина после трансплантации клеток рака молочной железы 4T1 в скопления жира молочной железы.
(B) Количественное определение роста первичной опухоли при введении контрольного препарата (PBS), NOV-002, гемцитабина или комбинации NOV-002 и гемцитабина после трансплантации клеток рака молочной железы 4T1 в скопления жира молочной железы. (C) Количественное определение роста метастазов через пять недель лечения контрольным препаратом (PBS), NOV-002, гемцитабином или комбинацией NOV-002 и гемцитабина после трансплантации клеток рака молочной железы 4T1 в скопления жира молочной железы.12
NOV-002 - миметик глутатиона дисульфида, который способен регулировать редокс-гомеостаз. Проведенные исследования позволяют предположить, что окисленный глутатион пассивно не проникает в клеточную мембрану [291]. Поэтому вероятно, что эффект NOV-002 на клеточные функции опосредован влиянием GSSG на белки клеточной поверхности. ErbB2 - поверхностный рецептор, который может являться потенциальной мишенью для GSSG. В настоящее время проводятся исследования по изучению модификации ErbB2 методом глутатионилирования и его эффектов на функции ErbB. Весьма вероятно, что GSSG оказывает эффект на дополнительные белки клеточной поверхности. Необходима разработка системных методов для идентификации подобных мишеней и изучения механизмов изменения функций таргетных белков GSSG.
Хотя NOV-002 и подавляет активацию ErbB2 и P13K in vitro, монотерапия NOV-002, которая не приводит к цитотоксичности даже при высокой дозировке, не оказывает эффекта на рост первичной опухоли или метастазирование в мышиной модели ксенотрансплантата. Возможно, что опухолевые клетки используют альтернативные сигнальные пути для компенсации частичной инактивации пути ErbB2-PI3K препаратом NOV-002. В ином случае ErbB2-PI3K не является основным путем, отвечающим за метастатический фенотип клеток 4T1. Возможно, что путь ErbB2-PI3K станет преобладающим путем метастазирования лишь после стрессового воздействия на клетки, например, терапией гемцитабином, что может объяснить эффективность NOV-002 в подавлении метастазов в комбинации с гемцитабином. Несмотря на то, что клиническое исследование NOV-002 по изучению немелкоклеточного рака легких так и не продемонстрировало эффективности по улучшению показателей выживаемости, возможно, что лечение будет эффективным для пациентов с раком поздней стадии в комбинации с иными видами химиотерапии.
Редокс-регуляция является одним из важнейших аспектов лечения рака. Раковые клетки выработали различные механизмы, чтобы справляться с окислительным стрессом. Возможно, что возникающие метастатические клетки используют иные механизмы, чем клетки первичной опухоли для поддержания окислительно-восстановительного потенциала клеток. Терапия, которая меняет баланс редокс-регуляции в метастатических раковых клетках, может оказать благоприятный эффект на лечение метастазов. Разработка подобных видов лечения может благоприятствовать лечению этого смертельного заболевания.
Выражение признательности
Настоящее исследование частично финансировалось Novelos. QH осуществлялось при поддержке NCI R01CA148759-01, Breast Cancer Alliance, W.W. Smith, Edward Mallinckrodt J. Foundation. LC осуществлялось National Natural Science Foundation of China (30873025) и Natural Science Foundation of Shandong Province, P.R. China (№ ZR2010HM033).
Библиография
1. Fidler IJ (2003) The pathogenesis of cancer metastasis: the `seed and soil'hypothesis revisited. Nat Rev Cancer 3: 453-458.
2. Steeg PS (2006) Tumor metastasis: mechanistic insights and clinical challenges. Nat Med 12: 8g5-g04.
3. Yan J, Huang Q (2012) Genomics screens for metastasis genes. Cancer Metastasis Rev 31: 419-428.
4. Chambers AF, Naumov GN, Vantyghem SA, Tuck AB (2000) Molecular biology of breast cancer metastasis. Clinical implications of experimental studies on metastatic inefficiency. Breast Cancer Res 2: 400-407.
5. Parker B, Sukumar 5 (2003) Distant metastasis in breast cancer: molecular mechanisms and therapeutic targets. Cancer Biol Ther 2: 14-21.
6. Gupta GP, Massague J (2006) Cancer metastasis: building a framework. Cell 127: 67g-6g5.
7. Gumireddy K, Huang Q (2010) Identification of metastasis genes by a functional genomics approach. Cell Cycle g: 423.
8. Yan J, Yang Q, Huang 0 (2013) Metastasis suppressor genes. Histol Histopathol 28: 285-2g2.
9. Citri A, Yarden Y (2006) EGF-ERBB signalling: towards the systems level. Nat Rev Mol Cell Biol 7: 505-516.
10. Yarden Y, Sliwkowski MX (2001) Untangling the ErbB signalling network. Nat Rev Mol Cell Biol 2:127-137.
11. Hynes NE, Lane HA (2005) ERBB receptors and cancer: the complexity of targeted inhibitors. Nat Rev CancerS: 341-354.
12. Schlessinger J (2004) Common and distinct elements in cellular signaling via EGF and FGF receptors. Science 306: 1506-1507.
13. Slamon DJ, Clark GM, Wong SG, Levin WJ, Ullrich A, et al. (1987) Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of the HER 2/neu oncogene. Science 235: 177-182.
14. Falck VG, Gullick WJ (1989) c-erbB-2 oncogene product staining in gastric adenocarcinoma. An immunohistochemical study. J Pathol 15g: 107-111.
15. Tateishi M, Ishida T, Mitsudomi T, Kaneko 5, Sugimachi K (1991) Prognostic value of c-erbB-2 protein expression in human lung adenocarcinoma and squamous cell carcinoma. Eur J Cancer 27: 1372-1375.
16. Stenman G, Sandros J, Nordkvist A, Mark J, Sahlin P (1991) Expression of the ERBB2 protein in benign and malignant salivary gland tumors. Genes Chromosomes Cancer 3: 128-135.
17. Yu D, Wang SS, Duiski KM, Tsai CM, Nicolson GL, et al. (1994) c-erbB-2/ neu overexpression enhances metastatic potential of human lung cancer cells by induction of metastasis-associated properties. Cancer Res 54: 3260-3266.
18. Li YM. Pan Y, Wei Y, Cheng X, Zhou BP, etal. (2004) Upregulation of CXCR4 is essential for HER2-mediated tumor metastasis. Cancer Cell 6: 459-469.
19. Tan M, Yao J, Yu D (1997) Overexpression of the c-erbB-2 gene enhanced intrinsic metastasis potential in human breast cancer cells without increasing their transformation abilities. Cancer Res 57: 1199-1205.
20. Guy CT, Webster MA, Schaller M, Parsons TJ, Cardiff RD, et al. (1992) Expression of the neu protooncogene in the mammary epithelium of transgenic mice induces metastatic disease. Proc NatI Acad Sci U S A 89:10578-10582.
21. Muller WJ, Sinn E, Pattengale PK, Wallace R, Leder P (1988) Single-step induction of mammary adenocarcinoma in transgenic mice bearing the activated c-neu oncogene. Cell 54: 105-115.
22. Townsend DM, Pazoles CJ, Tew KD (2008) NOV-002, a mimetic of glutathione disulfide. Expert Opin Investig Drugs 17: 1075-1083.
23. Townsend DM, He L, Hutchens 5, Garrett TE, Pazoles CJ, et al. (2008) NOV002, a glutathione disulfide mimetic, as a modulator of cellular redox balance. Cancer Res 68: 2870-2877.
24. Tew KD (2007) Redox in redux: Emergent roles for glutathione 5-transferase P (GSTP) in regulation of cell signaling and 5-glutathionylation. Biochem Pharmacol 73: 1257-1269.
25. Filomeni G, Rotilio G, Ciriolo MR (2003) Glutathione disulfide induces apoptosis in U937 cells by a redox-mediated p38 MAP kinase pathway. FASEB J 17: 64-66.
26. Gumireddy K, Sun F, Klein-Szanto AJ, Gibbins JM, Gimotty PA, et al. (2007) In vivo selection for metastasis promoting genes in the mouse. Proc NatI Acad Sci US A 104: 6696-6701.
27. Gumireddy K, Li A, Gimotty PA, Klein-Szanto AJ, Showe LC, et al. (2009) KLF17 is a negative regulator of epithelial-mesenchymal transition and metastasis in breast cancer. Nat Cell Biol 11: 1297-1304.
28. Huang 0, Gumireddy K, Schrier M, le Sage C, Nagel R, et al. (2008) The microRNAs miR-373 and miR-520c promote tumour invasion and metastasis. Nat Cell Biol 10: 202-210.
29. Brennan JP, Miller JI, Fuller W, Wait R, Begum 5, et al. (2006) The utility of N,N-biotinyl glutathione disulfide in the study of protein 5-glutathiolation. Mol Cell Proteomics 5: 215-225.
30. Samuels Y, Ericson K (2006) Oncogenic P13K and its role in cancer. Curr Opin Oncol 18: 77-82.
31. Jiang BH, Liu LZ (2009) PI3K/PTEN signaling in angiogenesis and tumorigenesis. Adv Cancer Res 102: 19-65.
32. Hafsi 5, Pezzino FM, Candido 5, Ligresti G, Spandidos DA, et al. (2012) Gene alterations in the PI3K/PTEN/AKT pathway as a mechanism of drug-resistance (review). Int J Oncol 40: 639-644.
33. Fruman DA, Meyers RE, Cantley LC (1998) Phosphoinositide kinases. Annu Rev Biochem 67:481-507.
34. Pleiman CM, HertzWM, CambierJC (1994) Activation of phosphatidylinositol-3'kinase by Sic-family kinase 5H3 binding to the p85 subunit. Science 263: 1609-1612.
35. Raftopoulou M, Hall A (2004) Cell migration: Rho GTPases lead the way. Dev Biol 265: 23-32.
36. Rane MJ, Coxon PY, Powell DW, Webster R, Klein JB, et al. (2001) p38 Kinase37. Testa JR, Bellacosa A (2001) AKT plays a central role in tumorigenesis. Proc NatI Acad Sci U S A 98: 10983-10985.
38. Yang J, Mani SA, Donaher JL, Ramaswamy S, ltzykson RA, et al. (2004) Twist, a master regulator of morphogenesis, plays an essential role in tumor metastasis. Cell 117: 927-939.
Размещено на Allbest.ru
Подобные документы
Канцерогенез: определение и основные стадии опухолевой трансформации клеток, классификация и характеристика провоцирующих факторов. Вирусный онкогенез, клинические признаки. Биологические особенности и свойства злокачественных опухолевых клеток.
презентация [1,0 M], добавлен 24.10.2013Опухоли – группа генных болезней с неконтролируемой пролиферацией клеток, их классификация. Механизм действия радиационного канцерогенеза. Действие радиации на ДНК. Основные химические канцерогены. Защитные механизмы опухолевых клеток, их метаболизм.
презентация [1,9 M], добавлен 17.06.2014Изучение понятия и процесса канцерогенеза, ведущего к глубокой опухолевой реорганизации нормальных клеток организма. Рассмотрение основных стадий формирования опухоли, образования вторичных очагов. Исследование роли онкогенов в развитии опухолей.
презентация [1,4 M], добавлен 01.05.2015Содержание ДНК в ядрах опухолевых клеток и изменение числа хромосом. Атипизм обмена нуклеиновых кислот и углеводов. Изменение изоферментного спектра. Накопление в крови эмбриональных белков и ферментов. Изменение функционирования регуляторных систем.
презентация [1,1 M], добавлен 15.09.2015Международное название препарата. Показания и противопоказания к назначению препарата. Клинические критерии эффективности препарата. Возможные взаимодействия препарата. Особенности назначения препарата различным категориям больных. Информация для врача.
курсовая работа [32,4 K], добавлен 30.03.2018Виды злокачественных и доброкачественных опухолей, их биологические особенности, атипизм размножения. Частота выявления болезни. Причины ее возникновения. Цитологическая и гистологическая дифференцировка опухолевых клеток. Их взаимодействие с организмом.
презентация [25,4 K], добавлен 12.04.2014Рассмотрение анамнеза жизни больного. Результаты общих анализов и биопсии. Постановка клинического диагноза: рак гортани. Необходимость облучения опухолевых клеток и выбор оптимальной дозы излучения. Томограмма гортани и уточнение параметров опухоли.
история болезни [506,7 K], добавлен 26.04.2012Использование современных комплексных поливитаминных препаратов в комбинации с адаптогенами "Геримакс Энерджи". Рекомендации по применению терапии для военнослужащих в первые месяцы военной службы, в "адаптационный период" для укрепления их психики.
статья [51,6 K], добавлен 26.11.2010Теоретические аспекты лечения рака желудка. Особенности проведения рандомизированных исследований. Обоснование применения неоадъювантной химиотерапии при злокачественных новообразованиях. Методы оценки ответа опухоли на хирургическое вмешательство.
научная работа [2,7 M], добавлен 30.11.2017Оценка эффективности и безопасности нового лекарственного препарата, расширения его показаний к применению в процессе клинического исследования. Импульс к разработке всеобъемлющих правил проведения клинических исследований, их основные типы и способы.
презентация [1,0 M], добавлен 11.10.2016
