Применение иммобилизированных ферментов

Иммобилизованный фермент как искусственно получаемые препараты ферментов, особенности его применения в медицине. Ферментные электроды на основе иммобилизованных ферментов. Применение иммобилизованных ферментов в органическом синтезе, химии полимеров.

Рубрика Медицина
Вид реферат
Язык русский
Дата добавления 14.11.2017
Размер файла 27,6 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

10

Размещено на http://www.allbest.ru/

Одесский национальный университет им.И. И. Мечникова

Кафедра микробиологии, вирусологии и биотехнологии

РЕФЕРАТ

на тему: "Применение иммобилизованных ферментов"

Выполнила:

Студентка 4 курса спец. биотехнология

Нещерет Леся Сергеевна

Одесса - 2017

План

  • Введение
  • 1. Применение иммобилизованных ферментов
  • 1.1 Применение иммобилизованых ферментов в медицине
  • 1.2 Иммобилизованые ферменты и лечебное питание
  • 1.3 Ферментные электроды на основе иммобилизованых ферментов
  • 1.4 Применение иммобилизованных ферментов в органическом синтезе
  • 1.5 Применение иммобилизованных ферментов в химии полимеров
  • 1.6 Особенности переработки целлюлозы с помощью иммобилизованных ферментов
  • Заключение
  • Список использованых источников

Введение

Иммобилизованный фермент - искусственно получаемые препараты ферментов, молекулы которых адсорбированы на полимерной матрице или ковалентно связаны с ней, в результате чего сохраняется их каталитическая активность и значительно повышается устойчивость к денатурирующим воздействиям.

Иммобилизованные ферменты имеют ряд преимуществ в сравнении со свободными молекулами. Прежде всего такие ферменты, представляя собой гетерогенные катализаторы, легко отделяются от реакционной среды, могут использоваться многократно и обеспечивают непрерывность каталитического процесса. Кроме того, иммобилизация ведет к изменению свойств фермента: субстратной специфичности, устойчивости, зависимости активности от параметров среды. Иммобилизованные ферменты долговечны и в тысячи и десятки тысяч раз стабильнее свободных энзимов. Так, происходящая при температуре 65° Стермоинактивациялактатдегидрогеназы, иммобилизованной в 60 % -м полиакриламидном геле, замедлена в 3600 раз по сравнению с нативным ферментом.

Все перечисленное обеспечивает высокую экономичность, эффективность и конкурентоспособность технологий, использующих иммобилизованные ферменты.

1. Применение иммобилизованных ферментов

В настоящее время известны реакции ферментативного превращения практически всех основных классов органических соединений. Особенно успешно биокаталитические приемы применяются в таких процессах, как получение оптически активных аминокислот и других органических кислот; модификация антибиотиков, стероидов, алкалоидов; синтез пептидов, простагландинов, олиго - и полинуклеотидов, нуклеозидтрифосфатов; введение радиоактивной метки в белки, пептиды, аминокислоты и нуклеиновые кислоты; получение фосфолипидов и переработка растительного липидного сырья; специфическое расщепление биополимеров и т.д.

1.1 Применение иммобилизованых ферментов в медицине

Иммобилизованные ферменты - основа одного из главных направлений современной биотехнологии. Сегодня с их помощью уже производятся в больших количествах многие важные продукты. В первую очередь это разнообразные биологически активные вещества. Например, в медицине широко используются индивидуальные аминокислоты; но при их химическом синтезе получается смесь природной и неприродной - левой и правой форм аминокислоты, а организм может усваивать только природную, левую форму. Разделить такие смеси проще всего с помощью ферментов.

Широко используется в медицине способность ферментов реагировать на строго определенные вещества - на этом основаны новые, высокочувствительные методы анализа, применяемые, в частности, в диагностике. Например, если человек болен, то его иммунная система вырабатывает определенные антитела - с помощью ферментов можно их определить; обнаруживать и самих возбудителей заболевания.

иммобилизированный фермент препарат органический

Ферменты значительно упрощают анализ крови: если сегодня для биохимического анализа нужно взять целую пробирку крови, то созданный в самые последние годы иммуноферментный метод позволяет ограничиваться всего одной каплей, чтобы определить содержание около 50 веществ одновременно.

Иммобилизованные ферменты находят применение и непосредственно как лекарственные препараты. Группа ученых под руководством академика Чазова Е.И. создали иммобилизованный ферментный препарат стрептодеказу для растворения тромбов при лечении инфаркта миокарда. После введения данного препарата тромб, если его захватить вовремя, почти бесследно исчезает. Это очень важное и серьезное достижение ферментной технологии.

1.2 Иммобилизованые ферменты и лечебное питание

Иммобилизованные ферменты успешно используются также и в химических процессах пищевой промышленности, в частности для получения глюкозы из крахмала, для получения глюкозо-фруктозного сиропа, для улучшения качества молока путем удаления из него лактозы и т.п.

Благодаря ферментным методам начинает стираться грань между привычными пищевыми технологиями и промышленностью тонкого органического синтеза. Так, фирма "Cetus Corporation" в США разработала процесс, в результате которого образуется фруктоза (пищевой продукт) и окиси алкенов (полупродукт органического синтеза). Для этого глюкозу, полученную из крахмала, окисляют в присутствии иммобилизованного фермента, пиранозо-2-оксидазы до глюкозона, который затем с помощью водорода на палладиевом катализаторе превращают во фруктозу. На первой стадии в качестве побочного продукта образуется перекись водорода, используемая далее для микробиологического окисления этилена или пропилена в соответствующие эпоксиды. Таким образом, в данном технологическом цикле тесно переплетены между собой 3 синтетических метода: ферментативный (первая стадия), химический (вторая стадия) и микробиологический (третья стадия). Именно сочетание разных методов обеспечивает высокую экономичность производства.

Удаление лактозы из молока с помощью иммобилизованных ферментов.

Малосладкий дисахарид - лактоза, присутствующий в молоке, легко усваивается детьми, особенно в младенческом возрасте, а вот у взрослых людей иногда наблюдается интолерантность к молоку, что обусловлено отсутствием лактазы в тонком кишечнике. Молочный сахар (лактоза) не расщепляется до глюкозы и галактозы. После потребления молока такие люди страдают расстройствами желудка, вздутием и болями в нижней части живота. До сих пор нет ясности, является ли отсутствие лактазы наследственным. Такое заболевание особенно широко распространено в развивающихся странах, а ведь именно население этих стран особенно нуждается в таком дешевом и одновременно полноценном продукте питания, как молоко. Чтобы у людей с подобными отклонениями молоко усваивалось, оно было ферментативно обработано с помощью иммобилизованной лактазы.

Итак, проблема была решена, когда молоко стали предварительно обрабатывать иммобилизованной лактазой. Такое лактозное молоко уже получают по соответствующему биотехнологическому процессу.

В Италии с 1975 г. работает завод по переработке молока с помощью иммобилизованной лактазы в диетическое безлактозное молоко. Ежедневно предприятие выпускает 800 л данного диетического продукта.

Более того, разрабатывают ферментативный гидролиз лактозы как дополнительный путь получения глюкозы. Дело в том, что при свертывании молока до 75% лактозы остается в сыворотке, которую пропускают через колонну с иммобилизованной лактазой и получают после дополнительной очистки водный раствор смеси глюкозы и галактозы, которую непосредственно можно использовать в пищевой промышленности.

Превращение глюкозы во фруктозу с помощью иммобилизованной глюкоизомеразы.

Фруктоза слаще глюкозы почти в 2 раза. Фруктоза - это изомер глюкозы. Она имеет ту же самую химическую формулу. Использование фруктозы вместо сахара сулит массу преимуществ. Из-за большей сладости ее можно применять в меньших количествах, что ведет к снижению калорийности продуктов, а это важно для диетологии. Фруктозу в отличие от глюкозы и сахарозы могут потреблять больные диабетом. Дело в том, что пути превращения фруктозы человеческом организме совершенно иные, нежели глюкоза, и не связаны с наличием инсулина. К тому же фруктоза менее вредна для зубов.

Не смотря на все эти положительные факторы, фруктозу до последнего времени применяли крайне ограниченно из-за отсутствия разработок ее промышленного производства. Для того чтобы увеличить сладость глюкозы в 2 раза, достаточно было бы ее просто химически превратить во фруктозу, но все попытки осуществить изомеризацию глюкозы во фруктозу химическим путем с помощью промышленных катализаторов окончились неудачей, поскольку при этом неспецифически образовывались темно окрашенные побочные продукты с плохим вкусом. Очистка фруктозы от них была бы слишком дорогой.

Положение изменилось в 70-х гг., когда в производстве стали применять фермент глюкоизомеразу, который катализирует взаимопревращения глюкозы во фруктозу.

В 1957 г. была открыта глюкоизомераза - внутриклеточный фермент, выделяемый из различных микроорганизмов.

В 1960 г. в США запатентован ферментативный процесс превращения глюкозы во фруктозу.

В 1966 г. японская исследовательская лаборатория фирмы "Шиба сити" описала промышленный процесс с использованием растворимой глюкоизомеразы. При промышленной изомеризации глюкозы в качестве конечного продукта получают не одну фруктозу, а смесь глюкозы и фруктозы (сироп), обладающей высокой сахаристостью.

В 1967 г. американская фирма "Клинтон крон процессинг компани" приступила к производству глюкозо-фруктозного сиропа из глюкозы с помощью растворимой глюкоизомеразы. Но сироп содержал всего 15 % фруктозы. Кроме того, выяснилось, что процесс с участием глюкоизомеразы может быть рентабельным только при многократном использовании дорогостоящего фермента. Глюкоизомераза оказалась идеальным ферментом для иммобилизации: стабильная при высоких температурах, а т.к. субстрат (глюкоза) и продукт реакции (фруктоза) - очень небольшие молекулы, то не возникает проблем с их движением по колонке с иммобилизованным ферментом. Ни глюкоза, ни фруктоза не несут электростатического заряда, поэтому глюкоизомеразу можно было адсорбировать на заряженных группировках целлюлозы.

В 1968 г. концерн "Клинтон" предложил периодический метод превращения глюкозы во фруктозу с помощью иммобилизованного фермента, при котором выход фруктозы составлял 42 %.

В 1978 г. начался новый этап в развитии этого производства. Благодаря применению новых способов разделения удалось получить 55 % фруктозного сиропа.

1.3 Ферментные электроды на основе иммобилизованых ферментов

Иммобилизованные ферменты нашли применение и для аналитических целей в виде ферментных электродов (датчиков или биосенсоров). В любом ферментном электроде обязательно есть собственно электрод, слой иммобилизованного тем или иным способом фермента и, зачастую, диализная полупроницаемая мембрана, предотвращающая диффузию фермента в раствор, но пропускающая низкомолекулярные соединения к поверхности электрода. Достаточно внести электрод в раствор, содержащий специфическое по отношению к ферментному электроду вещество (субстрат), и в приэлектродном слое происходит ферментативная реакция, ее продукты определяют с помощью того или иного электрохимического устройства. Присутствие на электроде фермента-биокатализатора с высокой специфичностью действия - позволяет определять наличие и концентрацию в сложной по составу смеси подчас одного - единственного вещества. В настоящее время с помощью биосенсора можно определить 10 соединений: глюкозу, лактат, этанол, лактозу, галактозу, сахарозу, б-амилазу, б-лизин, мочевую кислоту, холин.

Иммобилизованные ферменты применяются в автоматическом анализе биологических субстратов и лекарственных веществ. Они являются рабочей частью автоматических проточных анализаторов. Ферментные электроды позволяют проводить непрерывный анализ веществ. На основе проточных анализаторов с иммобилизованными ферментами и ферментных электродов созданы биохимические автоматы, позволяющие в короткие отрезки времени проводить обследование больших контингентов людей.

Иммобилизованные ферменты (ферментные электроды) применяют для непрерывного контроля загрязненности окружающей среды токсическими веществами.

1.4 Применение иммобилизованных ферментов в органическом синтезе

В настоящее время большое количество зарубежных фирм занимается созданием нового направления биотехнологии, основанной на катализе с применением иммобилизованных ферментов. Среди реализованных процессов можно указать на получение L-яблочной кислоты гидратацией фумаровой кислоты с помощью фермента фумаразы и получение L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония под действием фермента аспарагиназы. В последнем случае в реакторе объемом 1 м3ежедневно получают 1700 кг продукта.

Близок к промышленному воплощению синтез еще одной ценной кислоты, L-триптофана, из индола и пирувата аммония.

Таким образом, ферменты могут использоваться для реализации промышленных процессов получения различных химических продуктов, которые сейчас синтезируют сложными и дорогими химическими способами. Например, синтез окиси пропилена, представляющей собой маленькую молекулу, состоящую из углерода и водорода, в которую определенным образом введен атом кислорода. Данное химически активное соединение широко используется для синтеза эпоксидных смол. Окись пропилена получают сложным химическим путем, который обходится очень дорого, следовательно, это обстоятельство обуславливает и высокую стоимость эпоксидных смол. Но недавно обозначился новый путь получения окиси пропилена - ферментативный, отличающийся высокой эффективностью и дешевизной.

1.5 Применение иммобилизованных ферментов в химии полимеров

Очень важным является налаживание сотрудничества представителей разных специальностей: биотехнологов, биохимиков, а также представителей полимерной химии, т.к. многие применяемые сейчас носители для иммобилизации ферментов были найдены случайно, и не всегда это самые лучшие носители. Необходимо научиться подбирать оптимальные носители для определенной цели, для определенного фермента, создавать такие носители, которые будут служить не просто опорой для фермента, но и могли бы выполнять за него часть его работы, например, концентрировать субстрат в непосредственной близости от его активного центра.

1.6 Особенности переработки целлюлозы с помощью иммобилизованных ферментов

Больше половины углерода, накапливаемого тканями растений в ходе фотосинтеза, отлагается в них в виде целлюлозы и лигноцеллюлозы. Непосредственно использовать их организмы высших животных и человека не могут, но в природе существуют весьма эффективные ферментные системы, позволяющие мобилизовать этот углерод в виде доступных организму соединений - сахаров. Для человечества было бы очень важно использовать такие процессы, чтобы изменить направление фиксации углерода в растительных тканях. Проблема эта непростая: целлюлоза и лигноцеллюлоза - субстраты очень сложные, и хотя о ферментах, участвующих в их гидролизе, известно довольно много, но еще недостаточно, чтобы можно было управлять этим процессом или создавать новые, более эффективные ферменты. В этой области нужно приложить еще много усилий, но успешное решение проблемы даст нам новый богатый источник получения веществ.

Заключение

Идеи иммобилизации биокатализаторов инициировали и стимулировали бурное развитие одного из важнейших направлений современной биотехнологии - инженерной энзимологии. Цель инженерной энзимологии, ее стратегическая задача состоит в том, чтобы разработать научные основы применения ферментативных катализаторов для создания новых биотехнологических процессов в промышленности, новых методов в терапии и медицинской диагностике, анализе, органическом синтезе и в других областях практической деятельности.

В целом иммобилизация (как инструмент биотехнологии) сама по себе является достаточно развитой в методическом отношении, в будущем здесь следует ожидать лишь детализации отдельных приемов, а наибольший интерес и перспективы связаны с ее практическим использованием. И в этой связи хотелось обратить внимание, что идеи иммобилизации и ее методология приложимы не только к ферментам, но и многим другим соединениям, как высоко-, так и низкомолекулярным (гормонам, витаминам, лекарственным веществам и т.п.).

Список использованых источников

1. http://kursak.net/promyshlennye-processy-s-ispolzovaniem-immobilizovannyx-fermentov/

2. http://farmastudent.com/gotovye-raboty/metody-immobilizatsii-fermentov-i-tselykh-kletok-prodolzhenie.html

3. http://works. doklad.ru/view/6NIAheWp3Oc/all.html

4. http://studopedia. su/19_90560_NO---istochnik-ugleroda--N--CO--biomassa.html

Размещено на Allbest.ru


Подобные документы

  • Изучение видов (низкомолекулярные, макропористые), методов прикрепления в нерастворимой основе, направлений применения (пищевая, фармацевтическая промышленность) иммобилизованных ферментов, определение их преимуществ перед нативными предшественниками.

    реферат [89,1 K], добавлен 31.05.2010

  • Классификация, механизм действия ферментов, их применение в практической деятельности человека. Функционирование ферментов ротовой полости, желудка, тонкого кишечника. Определение основных причин нарушения работы пищеварительных органов у подростков.

    курсовая работа [408,8 K], добавлен 05.10.2014

  • Концепции индукции ферментов подсемейства CYP 3A ксенобиотиками и другими химическими соединениями. Особенности онтогенеза в этом процессе. Генетические аспекты влияющие на активность ферментов подсемейства CYP 3A. Семейства ядерных рецепторов.

    научная работа [390,2 K], добавлен 12.05.2009

  • Задачи ферментов как веществ биологического происхождения, ускоряющих химические реакции. Организованная последовательность процессов обмена веществ. Особенности ферментативного катализа. Лекарственные препараты: ингибиторы и активаторы ферментов.

    презентация [2,9 M], добавлен 27.10.2014

  • Понятие и классификация ферментов (энзимов). Их общие и отличные от неорганических катализаторов свойства, белковая природа. Катализируемые ими реакции. Виды изоферментов и их роль в обмене веществ. Относительная активность ферментов в тканях человека.

    презентация [1,8 M], добавлен 11.11.2016

  • Патогенез инфаркта миокарда. Сущность ферментов вообще и их роль в организме. Значение ферментов в диагностике инфаркта миокарда. Описание ферментов, используемых при диагностике инфаркта миокарда: тропонин I и Т, общая креатинкиназа, изофермент ЛДГ-1.

    реферат [49,0 K], добавлен 12.10.2010

  • Ферментативная система биотрансформации ксенобиотиков. Полиморфизм генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков и патология. Анализ роли полиморфных вариантов генов ферментов метаболизма ксенобиотиков в детерминации бронхиальной астмы и туберкулеза.

    диссертация [245,8 K], добавлен 15.01.2009

  • Применение водорастворимых витаминов, участие их в синтезе различных ферментов. Фармакологическое действие рибофлавина, пиридоксина гидрохлорида. Препараты жирорастворимых витаминов. Употребление препаратов витамина К в лечебных и профилактических целях.

    презентация [7,7 M], добавлен 13.02.2017

  • Методы определения активности, изучение кинетических параметров ферментативных реакций. Методы выделения и очистки ферментов. Изучение субклеточной локализации. Использование ферментов в качестве аналитических реагентов. Определение активности трипсина.

    учебное пособие [104,8 K], добавлен 19.07.2009

  • Иннервация, кровоснабжение и лимфоотток поджелудочной железы, секреция жидкости и электролитов, синтез ферментов. Клиническая картина, этиология и патофизиология острого и хронического панкреатита. Регуляторы секреции ферментов поджелудочной железы.

    реферат [742,5 K], добавлен 24.07.2015

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.