Переливание крови животным

Размещено на http://www.allbest.ru/

Группы крови сельскохозяйственных животных

В последнее десятилетие важное место в интерьерных исследованиях заняло изучение групп крови и других полиморфных систем крови животных. Начало учению о группах крови было положено врачами-медиками, еще в прошлом столетии заметившими, что при переливании крови одного человека другому иногда происходит агглютинация (склеивание) эритроцитов, приводящая к тяжелым осложнениям и даже смерти больного.

В начале XX века Ландштейнер, Янский и другие ученые установили, что это явление зависит от наличия в сыворотке крови особых веществ белкового характера -- антител. Дальнейшее изучение этого вопроса привело к возникновению науки иммунологии. С 1910 г. начали проводить изучение иммунологических явлений у крупного рогатого скота и у сельскохозяйственных животных других видов.

Учение о группах крови животных сводится в кратком изложении к следующему. Когда в кровь животного попадают чужеродные (то есть не свойственные данному животному) белки или иные высокомолекулярные соединения, то для их обезвреживания организм вырабатывает специфические защитные антитела.

Вещества же, вызывающие образование антител, принято называть антигенами. У сельскохозяйственных животных наиболее хорошо изучены антигены (или так называемые факторы крови), расположенные в оболочках эритроцитов, а также вырабатываемые против них антитела. Несмотря на то, что химический состав антигенов и антител исследован еще недостаточно, взаимодействие между ними изучено весьма детально. Оно протекает чаще всего в виде реакций гемолиза и агглютинации.

Если смешать в пробирке эритроциты одного животного с сывороткой крови другого животного, в которой имеется одно или несколько антител против антигенов, находящихся в этих эритроцитах, то при соответствующих условиях антитело свяжется с антигеном, что вызовет разрушение оболочек эритроцитов. Произойдет гемолиз, то есть выход гемоглобина из разрушенных эритроцитов в сыворотку крови, вследствие чего она окрасится в интенсивно красный цвет. Такая реакция называется гемолитическим тестом (гемолитической пробой).

Для протекания гемолиза необходимы определенная температура (20--26°) и присутствие в пробирке комплемента -- вещества не выявленного пока состава, содержащегося в большом количестве в сыворотке крови кроликов и морских свинок. Гемолиз является основным типом реакции между антителами и антигенами у крупного рогатого скота и овец. Взаимодействие антигена и антитела может приводить также к агглютинации (склеиванию) эритроцитов.

Реакция агглютинации применяется при исследовании групп крови у лошадей, свиней, кроликов и кур. Во всех случаях важнейшим свойством антител является их специфичность. Антитело всегда реагирует только со «своим» антигеном, против которого оно выработано, и не реагирует ни с какими другими антигенами; то же можно сказать и об антигене. Такая высокая специфичность и дает возможность проводить анализ групп крови с большой точностью.

Антитела делятся на естественные и иммунные. Естественные антитела содержатся в крови животных с самого рождения или образуются в течение короткого периода после рождения и присутствуют в организме большей частью в течение всей его жизни. К этой группе принадлежит несколько антител крупного рогатого скота, лошадей и свиней. Естественные антитела встречаются далеко не у всех животных данного вида, они немногочисленны и поэтому играют в учении о группах крови весьма ограниченную роль. Гораздо большее значение имеют иммунные антитела, которые удается получать посредством иммунизации животных, то есть введения эритроцитов одних животных (доноров) в кровяное русло или в мускулы других животных (реципиентов). После нескольких инъекций в сыворотке крови реципиента появляются иммунные антитела, выработанные организмом против соответствующих антигенов донора. Конечно, антитела образуются только против тех антигенов, которых нет в эритроцитах самого реципиента. Антигены донора, имеющиеся и у реципиента, не являются для последнего «чужими» веществами, и поэтому против них не вырабатываются антитела.

Донор и реципиент лишь в редких случаях отличаются друг от друга каким-либо одним антигеном. В большинстве случаев в эритроцитах донора имеется несколько антигенов, которых нет у реципиента. Вследствие этого в организме реципиента вырабатывается не одно антитело, а несколько, против всех «чужих» антигенов, и сыворотка его крови дает гемолитическую реакцию не с одним антигеном, а с несколькими. Такая сыворотка называется сырой сывороткой, и для анализа групп крови она непригодна. С целью удаления ненужных антител ее подвергают абсорбции, то есть последовательно смешивают с эритроцитами, содержащими соответствующие антигены, которые связываются с этими антителами (гемолиза при этом не происходит, так как к сыворотке не добавляют комплемент). После такой обработки в сыворотке остается антитело только против одного фактора крови. Такая сыворотка называется специфической антисывороткой и является чувствительным реагентом, с помощью которого в эритроцитах любого животного данного вида (а иногда и других видов) можно обнаружить наличие соответствующего антигена. Специфические сыворотки можно хранить в замороженном или высушенном виде в течение длительного времени.

До настоящего времени в эритроцитах крупного рогатого скота выявлено около 100 факторов крови, которые обозначаются большими буквами латинского алфавита. Когда алфавит был исчерпан, стали обозначать факторы буквами с апострофом или штрихом (например, А') или цифрами (Х1, Х2, Х3). Большинство этих факторов было открыто посредством иммунизации животных.

У лошадей было найдено 8 антигенов, у свиней--30, у овец--26, у кур --60.

При изучении наследования групп крови установлена важная закономерность: потомки могут иметь только такие факторы крови, которые есть хотя бы у одного из его родителей; если у потомка имеется хотя бы один фактор, которого нет ни у отца, ни у матери, это означает, что происхождение данного животного установлено по записям неверно. К этому нужно еще добавить, что у потомка совершенно не обязательно должны быть все факторы, имеющиеся у родителей; если родители являются гетерозиготными по каким-либо из факторов, эти антигены потомок может и не унаследовать. Если бы потомки наследовали все антигены родителей, то у всех особей данного вида имелся бы полный набор факторов крови и иммуногенетический анализ происхождения животных был бы невозможен.

Указанная закономерность и лежит в основе проверки происхождения животных путем анализа групп крови. У потомка и его предполагаемых родителей берут небольшое количество крови (по 10 мл), отделяют при помощи центрифугирования эритроциты, готовят 2%-ную суспензию в физиологическом растворен производят определение имеющихся в эритроцитах антигенов. Для этого каплю суспензии эритроцитов смешивают в отдельных пробирках с двумя каплями каждой специфической сыворотки и каплей комплемента. Наличие гемолиза в пробирке свидетельствует о том, что в эритроцитах имеется этот антиген; если гемолиза нет, то эритроциты данного антигена не содержат.

После окончания анализа сравнивают наборы факторов крови потомка и его родителей и делают тот или иной вывод о происхождении животного. В настоящее время на многих зарубежных станциях искусственного осеменения используют быков, происхождение которых проверено путем анализа группы крови. Если вспомнить, что от быка получают за год несколько тысяч потомков и что ошибки в племенных записях о происхождении быков могут привести к большим ошибкам в племенной работе, становится очевидной важность такой проверки.

Наследование факторов крови у каждого вида животных контролируется несколькими генами. Большинство факторов крови наследуется по типу аллеломорфных признаков: наличие в хромосомах различных аллелей обусловливает наследование тех или иных антигенов. При этом факторы крови могут наследоваться как поодиночке, так и целыми группами или комплексами, включающими от 2 до 8 антигенов каждая. Так, например, передается по наследству как обособленная единица группа факторов BO₁QT₁ дающая гемолитическую реакцию со специфическими сыворотками: анти-В, анти-Q1, анти-Q и анти-Т1. Такие, наследуемые как одно целое, факторы получили название групп крови. Группа крови может состоять из одного или нескольких факторов. Отсюда следует, что в иммунологии сельскохозяйственных животных понятие группы крови несколько отличается от привычного для нас понятия, принятого в медицине.

Каждый ген (точнее, группа аллелей, находящихся в определенном локусе определенной хромосомы) управляет наследованием одной системы крови, включающей от одного до нескольких десятков факторов крови, которые, как уже было сказано, могут образовывать комплексы или группы. У крупного рогатого скота выявлено 11 систем крови. Наиболее простые системы: J, L, N и Z; каждая из них состоит из одного фактора крови. Генотипически эти системы могут быть представлены в виде трех возможных комбинаций:

Животные - гомозиготы, имеющие в каждой из парных хромосом ген данного фактора (например, L/L);

Животные - гетерозиготы, с наличием гена в одной хромосоме и при отсутствии его в другой (обозначение L/--) и, наконец,

Животные, у которых данный ген полностью отсутствует (--/--).

По существу к таким системам можно отнести и систему М, состоящую из двух подгрупп - М₁ и М₂.

Система Z интересна в том отношении, что разработаны специфические антисыворотки, которые позволяют различить животных:

гомозиготных по фактору Z (Z/Z) и

гетерозиготных (Z/--).

Система FV состоит из двух факторов, которые могут встречаться в комбинациях F/F, F/V, V/V.

Из двух факторов состоит также система R'S'.

Система А включает в себя четыре фактора, система SU -- пять.

Гораздо более сложной является система С, состоящая из десяти антигенов, комбинации которых могут составлять 35 групп крови.

Самая сложная система - это система В, включающая свыше 40 антигенов, которые могут образовать около 300 групп крови; каждая из них содержит от 1 до 8 факторов (например, BGK, BO2Y2, D').

Определение групп крови, входящих в систему В и С, дает больше всего данных для племенного анализа и при установлении происхождения животных.

Наличие многочисленных групп крови создает возможность для образования огромного числа комбинаций аллелей, вследствие чего животные, у которых группы крови совершенно одинаковы, практически не встречаются. Исключение составляют лишь однояйцевые двойни, имеющие одинаковый тип крови (то есть совокупность всех групп крови).

В литературе принято обозначать ген соответствующей группы крови большой буквой системы с обозначением аллеля, написанным рядом сверху.

У овец установлено семь систем крови, у свиней - 16, у лошадей - 8, у кур -14. Поскольку учение о группах крови животных еще очень молодо, исследователи продолжают открывать новые антигены и системы крови. Работа по изучению и практическому применению групп крови возможна только в условиях хорошо оборудованной лаборатории, при достаточно большом количестве животных (взрослых или молодых) для иммунизации и получения специфических сывороток. У иммунизированных животных приходится брать много крови (4 - 5 л) для приготовления сывороток, поэтому с этой целью ценных маток и производителей стараются не использовать.

В последние годы в нашей стране и за рубежом, кроме групп крови, стали уделять много внимания изучению полиморфизма белков крови, молока и яиц, выявляемого при помощи электрофореза на крахмальном геле. Оказалось, что многие белки (например, гемоглобин) можно разделить электрофоретическим путем на несколько типов, причем эти типы, подобно группам крови, контролируются особыми генами. Так, у крупного рогатого скота выявлено четыре типа гемоглобина, десять типов трансферринов (5-глобулинов), несколько типов казеина, лактальбумина и лактоглобулина. В яйцах кур обнаружен генетически обусловленный полиморфизм альбуминов и других белков.

Проводятся интересные исследования антигенных свойств спермы производителей. Установлено, что в некоторых случаях в организме самок образуются антитела, губительно действующие на спермии некоторых производителей, что является одной из причин яловости.

Накопление знаний о группах крови и других полиморфных системах привело к возникновению новой науки - иммуногенетики, данные которой все шире используются при разведении животных. Уже говорилось об уточнении происхождения животных путем анализа групп крови. Такое уточнение возможно и для животных, потерявших свой номер (конечно, если типы их крови были определены еще до потери). Анализ групп крови дает возможность отличить однояйцевые (монозиготные) двойни, образовавшиеся из одной оплодотворенной яйцеклетки, от дизиготных однополых двоен. Во время эмбрионального развития разнополых двоен иногда устанавливаются связи (анастомозы) между их кровеносными системами. При этом в организм телочки попадает вместе с кровью бычка мужской половой гормон, вследствие чего нарушается нормальное развитие ее половых органов. По группам крови можно в самом раннем возрасте выявить таких телок -- фримартинов и не планировать их использование для размножения.

Весьма перспективно применение групп крови при анализе происхождения отдельных стад, линий и целых пород скота. Исследования Л. Рендела (1958) и других ученых выявили значительные межпородные различия в группах крови крупного рогатого скота. Поскольку факторы крови (антигены) стойко передаются от родителей к потомкам, изучение групп крови должно сыграть в племенном деле важную роль, помогая установить происхождение пород и отдельных групп животных и взаимоотношения между ними. Так, после анализа групп крови у чешского красно-пестрого скота И. Матоушек пришел к выводу, что в образовании этого скота участвовали многие породы. И. Р. Гиллер (1970) в результате изучения групп крови у симментальского скота в племенных заводах «Тростянец» и «Терезино» выявил довольно значительные различия между этими стадами по распространенности некоторых аллелей системы В.

Чрезвычайно интересной является идея о возможности связи наследования групп крови и других полиморфных признаков с наследованием продуктивных свойств животных, например жирномолочности. Правда, гены, контролирующиенаследование групп крови, по-видимому, не оказывают прямого влияния на развитие тех или иных признаков продуктивности. Но эти гены могут находиться в одних и тех же хромосомах с генами, определяющими продуктивность животных. В этом случае те или иные группы крови могут служить «генетическими маркерами», сигнализирующими о наличии у данного животного генов высокой жирномолочности или других генов, непосредственно связанных с продуктивными свойствами животных. Поскольку группы крови можно определить сразу же после рождения животного, то можно предполагать, что по ним смогут предсказывать его будущую продуктивность. Успешное решение этого вопроса привело бы к «революции» в племенной работе. Имеется довольно много сообщений о связи между отдельными группами крови (а также другими полиморфными признаками) и некоторыми признаками продуктивности животных.

Однако далеко не всегда опубликованные данные потверждаются при повторении исследований в других стадах и группах животных.

Весьма обнадеживающими являются исследования И. Р. Гиллера (1970), который определил группы крови знаменитой коровы Воротки 5992 (племенной завод «Тростянец»), уникальной по жирности молока (6, 04%). Оказалось, что потомки Воротки, унаследовавшие от нее высокую жирномолочность, одновременно унаследовали и аллель O1TG'K' системы В. Те же потомки Воротки, у которых этот аллель отсутствовал, не имели и столь высокой жирномолочности.

Конечно, эти данные еще требуют проверки на других животных, но они, во всяком случае, вселяют надежду на успешное разрешение данной проблемы. На основании приведенного исследования значительно повысилась вероятность устанавливать генетическое сходство между родителями и детьми не статистическими приемами («доли крови», генетическое сходство по формуле С.Райта), а по проценту повторений группы крови родителя у потомка. Такое генетическое сходство не между группами с большой численностью животных, а между индивидуумами было бы очень ценным при работе с линиями и семействами племенных животных для анализа сочетаемости, кроссов и скрещивания.

Переливание крови

- от одного животного к другому удается лишь в случае их генетической близости. Опыты Понфика и Ландуа показали, что только переливания крови животного от другого животного того же вида или стоящего очень близко оказывают благодетельное действие, при переливании же крови от более отдаленной формы, она переносится животными, но нужно известное время для усвоения ее. Чем дальше стоят друг от друга оперируемые животные, тем вреднее действие переливания, и иногда оно приводит к смерти. Опыты эти были недавно повторены Фриденталем. Он показал, что можно взаимно, например, переливать кровь мыши и крысы; зайца, белки и кролика; кошки и оцелота; осла и лошади; антропоморфной обезьяны и человека, но нельзя делать переливку крови между человеком и прочими обезьянами. Обыкновенно, кровяные тельца, попавшие в кровь животного, далеко стоящего от него в генетическом отношении, убиваются и разрушаются в его крови. Так сыворотка лошадиной крови растворяет кровяные тельца кролика, морской свинки, теленка, овцы и человека.

Переливание крови у кошек

Переливание крови всегда считалось высоко эффективным методом интенсивной терапии. Оно широко применяется в медицине и зарубежной ветеринарии, но к сожалению, в нашей отечественной практике применяется редко, хотя данная процедура имеет широкие показания к применению:

острая кровепотеря 30-60 мл. кг.(1\3-2\3)

острая гемолитическая анемия

хронические анемии с гематокритом между 12-15 %

острые кровопотери с гематокритом 20%и меньше

наследственные и преобретенные коагулопатии

тромбоцитопения

лейкопения

гипопротеинемия

Перелитая кровь обладает большим количеством функций;

заместительной, благодаря содержащимся в ней иммуноглобулинам и биологически активным вешествам ;

иммуностимулирующей

оксигенируюшей

питательной

Эритроциты способны адсорбировать на себе токсины, антигены и вирусы. В крови содержатся интерфероны и значительное количество необходимых организму гормонов, минеральных веществ и.т.д.

Показания для переливания:

Острая кровопотеря (более 30 мл. с кг.)

Хроническая кровопотеря с гематокритом менее 20%

Приобретенные коагулопатии

Инфекционные болезни (возможно переливание составляющих крови: эритроцитов, лимфоцитов, плазмы)

Сильные истощения

Отравления (в комплексе с инфузионной терапией)

Сепсис

Лечение с помощью цитостатиков

Послеоперационное лечение после длительных операций

Политравмы

После значительных интоксикации, гнойных процессов (пиометра)

Гипотермии

ДВС - синдром различной этиологии.

Переливание крови у кошек нами использовалось только в тех случаях, когда другие методы лечения оказывались неэффективны.

Инфузионная терапия, кислород.

Для инфузионной терапии нами применяются препараты: Гелофузин, Стабизол, Рефортан, Реополиглюкин, Аминостерил, Инфезол, Реамберин, Гепасол, Липофундин, р-р Рингера, р-р Хартмана, физиологический р-р натрия хлорида, р-р глюкозы 5%, р-р альбумина.

В течение года переливание крови у кошек нами применялось приблизительно в 100 случаях, выживаемость привышает 60%.

Хорошие результаты получены при гастроэнтеритах различной этиологии у котят в возрасте 1-3 мес.; при длительно незаживающих ранах, вызванных патогенной микрофлорой; политравмах, переломах костей таза, конечностей после падения с высоты; при разрывах печени, ушибах почек, разрывах диафрагмы, грудной стенки.

Значительно улучшается состояние после переливания крови у кошек больных хроническими заболеваниями связанными со значительным истощением.

Очень важно использование гематрансфузии при терапии после длительных операций на позвоночнике, так как длительный наркоз вызывает значительную гипотермию и выживаемость прооперированных животных уменьшается.

Объем переливаемой крови зависит от исходного состояния животного, данных лабораторных исследований и составляет от 10 до 100 мл донорской крови на 1 кг массы реципиента. Забор донорской крови производится от доноров предоставляемых владельцами больного животного, при этом предпочтение отдается донорам массой 4-6 кг, возраст 1-5 лет. Перед процедурой взятия крови донор наркотизируется ( пропофол 1-2 мл на кг в\в), кровь берется из яремных вен через иглу 0, 8-1, 2 мм в одноразовый шприц с добавлением стабилизатора CPDA.

Для тестирования совместимости крови применяют несколько методов, один из них пробирочный, удобный к использованию на практике. В пробирку помещают 2 капли сыворотки или гепаринизированной плазмы и 2 капли 3-5% суспензии эритроцитов, через 15мин.визуально оценивают реакцию. Если происходит реакция агглютинации или гемолиз, то кровь не совместима.

За год применения переливания крови у кошек мы не наблюдали отрицательных сторон этого метода. В 20% случаев применялось двух-трехкратное переливание крови от разных доноров. Переливание крови не отменяет, а только дополняет существующие методы интенсивной терапии существенно повышая шансы пациентов на выживание.

Переливание крови у собак

В комплексе лечения переливание крови имеет очень важное значение. В клинической практике гемотрансфузии применяют с заместительной целью (перелитые эритроциты находятся в крови реципиента 30-120 дней), стимулирующей целью (действует на различные функции животного организма), с целью улучшения гемодинамики (увеличивается ОЦК, усиливается работа сердца, повышается минутный объем сердца и т.д.), гемостатической целью (переливание крови оказывает стимулирующее действие на систему гемостаза реципиента, вызывая умеренную гиперкоагуляцию, обусловленную увеличением тромбопластической и снижением антикоагулянтной функции крови) (О.К. Гаврилов, 1982).

У собак имеется семь групп крови, определяемых по антигенной принадлежности: А, В, С, D, Е, F и G. Фактор А у животных имеет такое же значение, как и резус-фактор у людей. Этот фактор имеется примерно у 60-65% животных. Повторное переливание крови животному, у которого этого фактора нет, может привести к тяжелым гемотрансфузиологическим последствиям - гемолизу крови и гибели животного.

Первое переливание крови, как правило, не вызывает тяжелых осложнений из-за слабо выраженных антигенных свойств факторов В-G. Однако в некоторых случаях могут наблюдаться аллергические реакции в виде крапивницы, зуда и т.п., которые могут развиться сразу (ранняя реакция) и спустя несколько дней (поздняя реакция). Во избежание этих осложнений необходимо проводить пробы на групповую и индивидуальную совместимость. Для этого необходимо к 1 мл сыворотки реципиента добавить 0, 1 мл эритроцитов донора. Реакция производится на стекле при температуре 22-250С. учет осуществляют через 5 минут. При отсутствии агглютинации можно приступать к биологической пробе на индивидуальную совместимость.

Биологическая проба на индивидуальную совместимость проводится путем струйного переливания 10-15 мл крови в течение 3 минут крупным породам собак и 3-5 мл - мелким. Проба проводится трехкратно. При этом у животного, по возможности, измеряется артериальное давление, частота пульса, число дыхательных движений до переливания и через 10-15 минут после струйного введения крови. Беспокойство животного, одышка, тахикардия или аритмия, падение давления, рвота, появление болевых ощущений свидетельствуют о несовместимости переливаемой крови.

При переливании крови следует учитывать, что наиболее подходящей для гемотрансфузии является свежая донорская кровь. Заготовленная заранее кровь уже к 10 дню имеет кислую реакцию (рН до 6, 0) и содержит калий в высоких концентрациях (до 8 ммоль/л), что может вызвать аритмию и даже остановку сердца. При переливании заранее заготовленной крови ее необходимо подогревать на водяной бане до температуры 370С, т.к. холодная кровь вызывает гипотермию миокарда, спазм периферических сосудов и ацидоз, легко уходит в кровяное депо. На каждые 200-250 мл цитратной крови вводится 5 мл 10%-ного раствора хлористого кальция, 50 мл 40%-ного раствора глюкозы с 4 ед. инсулина и 20-30 мл 3%-го раствора соды (с целью нейтрализации гиперкалиемии и коррекции ацидоза) (А.А. Бунятян, 1982).

Заготавливая кровь, используют глюгицир (50 мл на 200 мл крови), или следующий состав:

Natrii citrici 2, 2%

Ac. citrici 0, 8%

Glucosi 2, 45%

Aq. destillatae 94, 55%

Такой состав используется в количестве 15 мл на 100 мл крови (М. Закиевич, 1994). Кровь с консервантом можно хранить 21 день при температуре 40С.

Забор крови от животного осуществляется путем венепункции толстой иглой и сливанием ее во флакон с приготовленным консервантом. Для предупреждения коагуляции крови в системе, последнюю необходимо предварительно промыть раствором гепарина или глюгициром, или ввести гепарин донору из расчета 100-200 ед. на 1 кг массы тела. Животному-донору предварительно вводят седативные препараты. Система для взятия крови не должна быть длиннее 25-30 см, т.к. кровь собак склонна к гиперкоагуляции и при большей длине трубки сворачивается в системе. Сосуд для сбора крови необходимо постоянно покачивать с целью перемешивания крови и консерванта.

Без ущерба для здоровья животного можно забирать кровь из расчета 10 мл/кг. Переливают кровь капельно с темпом 40-60 кап/мин из расчета 5-18 мл/кг в час. Повторный забор крови можно производить через 1, 5-2 месяца.

При необходимости можно осуществлять заготовку трупной крови (от животных, погибших в результате травм). Заготовка крови в этом случае принципиально не отличается от описанной выше. Если забор крови производить из сердца, можно получить 80-90 мл на кг массы тела. Гепарин в этом случае вводится из расчета 120 ед/кг. Кровь от трупа можно забирать до 6 часов с момента гибели животного.

Для заготовки плазмы используют раствор следующего состава:

Ac. citrici 40.0

Glucosi 30.0

Ac. chlorici conc. 7 ml

Rivanoli 0.05

Aq. destillatae 950 ml

На 900 мл крови добавляют 100 мл этого раствора. Кровь отстаивают в течение 1-2 часов, полученную плазму осторожно переливают в стерильные флаконы и запечатывают. При температуре -15оС плазму можно сохранять в течение 2 лет. Плазма богата белком, переливание ее показано при острых нарушениях свертываемости крови, гипопротеинемии, интоксикации, для повышения коллоидно-осмотического давления крови.

В повседневной практике врачам довольно часто приходится сталкиваться с проведением различных трансфузиологических операций. Мы остановимся на некоторых из них, имеющих наибольшее значение в лечении больных животных.

Реинфузия крови - переливание крови, излившейся в плевральную или брюшную полости. Реинфузия крови является очень эффективной мерой лечения и предотвращает осложнения, связанные с переливанием донорской крови. Показанием для реинфузии является любая кровопотеря, допускающая использование излившейся в полости (плевральная, брюшная и т.д.) крови. Противопоказаниями являются: гнойное загрязнение излившейся крови, загрязнение излившейся крови мочой или кишечным содержимым, кровотечения, связанные с разрывом матки, почечная недостаточность.

Чаще всего врачу приходится иметь дело с реинфузией крови при разрывах легкого, печени, селезенки, внутрибрюшинных разрывов крупных сосудов. Наиболее простой способ сбора излившейся крови заключается в простом вычерпывании ее из полости ложкой или вымакивания марлей (последний способ значительно хуже, т.к. приводит к существенному разрушению эритроцитов). При сборе крови ее сливают в стерильный флакон с одним из стабилизаторов (глюгицир, цитрат натрия и др.), предварительно профильтровав ее через 4 слоя стерильной марли. После этого флакон закрывают и переливают кровь по обычной методике, осуществляя ее микрофильтрацию через фильтр системы для переливания крови.

Вторым способом забора крови для реинфузии является введение перфорированного трубочного дренажа в брюшную или плевральную полость посредством лапаро- или торакоцентеза. Такой способ позволяет собрать и реинфузировать кровь до оперативного вмешательства, что значительно снижает риск анестезиологического обеспечения, особенно при политравмах, сопровождающихся разрывом паренхиматозных органов и массивной кровопотерей. При эвакуации крови из брюшной полости необходимо убедиться в целостности мочевого пузыря (для этого его необходимо катетеризировать до выполнения лапароцентеза). Небольшие же повреждения кишечника, не сопровождающиеся массивным загрязнением собираемой крови, не являются противопоказанием к ее реинфузии (Е.А. Вагнер с соавт., 1977).

Внутрикостные трансфузии достаточны просты в исполнении, могут использоваться в тех случаях, когда внутривенное введение жидкостей затруднено (гнойные поражения кожи, массивные отеки конечностей и т.д.), а также у щенков и котят. Трансфузии осуществляются внутрикостным введением иглы с мандреном (костномозговая игла Кассирского) в эпифизы костей, крыло подвздошной кости. Перед введением иглы выбривают участок кожи, обрабатывают его как операционное поле (во избежание остеомиелита), прокалывают иглой кожу и подлежащие ткани до кости, затем, преодолевая костный кортикальный слой, получают ощущение "провала" иглы, удаляют мандрен, внутрикостно вводят 0, 5-2 мл 2%-го раствора новокаина и проводят инфузию растворов под давлением. По окончании манипуляции кожу обрабатывают йодом и кубатолом.

Аутогемотрансфузия - переливание крови больному животному, взятой у него заблаговременно. Обычно такая необходимость возникает при повторном переливании крови, когда предполагается большая операция с массивной кровопотерей. У животного заблаговременно берут кровь (за 1-2 недели до предполагаемой операции), а затем ее же переливают во время оперативного вмешательства.

Реинфузия асцитической жидкости в сосудистое русло возможна у животных, больных циррозом печени, имеющих выраженный асцит, рефракторный к обычной диуретической терапии. Это позволяет избавиться от большого количества жидкости в брюшной полости, сохранив при этом белок, восстановить его уровень в плазме. Технически это выполняется следующим образом: после пункции брюшной полости асцитическую жидкость собирают в стерильный флакон, и тут же вводят ее внутривенно капельно со скоростью 10 мл/кг в час. За 1 сеанс можно реинфузировать от 10 до 30 мл/кг асцитической жидкости. Такие реинфузии могут проводиться 2-4 раза через 1-2 суток.

При острой кровопотере инфузионно-трансфузионная тактика зависит от количества излившейся крови.

Степень кровопотери	Общая потеря (от ОЦК), %	Общий объем вводимой жидкости (от объема кровопотери), %	Количество крови (от потери), %	Соотношение растворов
				Солевые растворы	Коллоид. растворы
Легкая	10-14	150-200	-	1	1
Средняя	15-24	200-250	40	1	1
Большая	25-49	300	70	1	2
Массивная	50-60	кровопотеря +300	100	1	3

Введение жидкостей должно осуществляться в две вены одновременно с введением крови.

При острых заболеваниях органов брюшной полости (перитонит, острая кишечная непроходимость) инфузионно-трансфузионная терапия должна проводиться в течение 1-2 часов перед оперативным вмешательством. При низком центральном венозном давлении, выраженной тахикардии объем вводимой жидкости может достигать 0, 5 мл/кг/мин - в первый час и в дальнейшем зависит от показателя ЦВД. Интенсивная терапия должна продолжаться во время операции и в послеоперацинном периоде. Проведение интенсивной терапии в этих случаях должно быть направлено на устранение гиповолемии, коррекцию водно-электролитного баланса и КОС, дезинтоксикацию, восстановление реологических свойств крови.

Переливание крови у мелких домашних животных

Проблема переливания крови у наших питомцев является очень актуальной. Среди всех заболеваний, с которыми приходится сталкиваться ветеринарному врачу, существует огромный перечень как терапевтических, так и хирургических проблем, которые требуют срочного возмещения кровопотери. Это не только травмы, сопровождающиеся массивной кровопотерей, но и распадающиеся опухоли, заболевания селезенки, печени, желудка, нарушения свертывающей системы крови, различные заболевания, при которых наблюдаются тяжелые анемии и т.д.

В таких ситуациях в комплексном лечении зачастую только переливание крови играет решающую роль в спасении вашего любимца. Переливание крови (или гемотрансфузию) в клинической практике применяют с заместительной целью (перелитые эритроциты могут находиться в крови реципиента 30 -120 дней); стимулирующей целью (действуют на различные функции животного организма); с целью улучшения гемодинамики (увеличивается объем циркулирующей крови, усиливается работа сердца, повышается минутный объем сердца и т.д.); гемостатической целью (в кровь поступают свежие компоненты, участвующие в остановке кровотечения). (Фото № 1).

Фото № 1.Переливание крови у собаки с тяжелой травмой. Большая кровопотеря и тяжелый геморрагический шок вынуждают врачей переливать кровь в две вены одновременно.

Как решаются проблемы донорства у животных

Собаки имеют семь групп крови, но слабые антигенные свойства их крови облегчают задачу врача. Первое переливание крови у собак, как правило, не вызывает тяжелых реакций. Однако последующие переливания крови у этих же животных могут привести к тяжелым последствиям, если кровь была подобрана неправильно.

У кошек всего три группы крови, но антигенные свойства их крови выражены очень значительно, поэтому подобрать донора для кошки бывает достаточно сложно. Этим же обстоятельством обусловлено быстрое уничтожение эритроцитов донора антителами кошки-реципиента, что приводит к необходимости повторных переливаний крови. Иногда эритроциты донора погибают в крови реципиента в течение нескольких часов.

Непреложное соблюдение всех правил и технических аспектов (определение совместимости крови по групповой принадлежности, проведение биологической пробы, использование специальных систем для переливания крови) при проведении гемотрансфузии позволяют практически полностью избежать возможных реакций и осложнений при выполнении этой ответственной манипуляции.

Где взять донора

Фото № 2. Реинфузия собственной крови животного при двухстороннем разрыве легких, сопровождающимся сильным кровотечением.

В качестве донора могут быть привлечены практически все здоровые животные в возрасте от 2-х до 8-ми лет, полностью привитые и обследованные на наличие паразитозов крови (в первую очередь дирофиляриоза и бабезиоза). Естественно, животные должны быть клинически здоровы, не находиться в состоянии беременности или течки, они должны быть достаточно крупными (собаки не менее 20 кг, кошки - не менее 3, 5-4 кг), кровь потенциального донора должна быть исследована на групповую совместимость с кровью реципиента еще до начала забора крови.

Найти собаку-донора (особенно для первого переливания крови), как правило, не сложно. Более сложной задачей является подбор донора-кошки. Наиболее подходящими кандидатурами являются близкие родственники реципиента (у этих животных меньше выражены антигенные конфликты при гемотрансфузии). Необходимо учитывать и породные особенности. Например, для сиамских кошек практически не подходит кровь кошек других пород.

В нашем госпитале существует группа постоянных животных - доноров, которые регулярно обследуются и вакцинируются. Эти животные выступают в качестве доноров в самых экстремальных ситуациях: когда необходимо решить вопрос о срочном переливании крови, а также в тех случаях, когда у владельцев потенциального реципиента нет возможности решить эту задачу самостоятельно.

В некоторых случаях, когда во время травмы происходит разрыв печени, селезенки, легких, и кровь изливается в плевральную или брюшную полость, в условиях госпиталя можно собрать ее и вновь влить в сосудистое русло травмированного животного. Эта процедура называется реинфузия крови и является наиболее безопасной, т.к. животному кровопотеря восполняется собственной кровью. (Фото № 2 ).

переливание кровь животное донор

Как происходит процедура переливания крови

Фото № 3. Кровь во флаконе, подготовленная к переливанию.

Фото № 4. Забор крови у кошки из яремной вены.

Обычно у спокойных животных забор крови не представляет особых трудностей. Вена на предплечье пунктируется толстой иглой, и при помощи специальной системы для забора крови производят ее сбор в стерильную посуду со специальным стабилизирующим раствором (он необходим, для того, чтобы предупредить сворачивание крови в емкости). (Фото № 3).Затем эта кровь переливается донору. У животных прямое переливание крови затруднено по техническим причинам. Агрессивным животным приходится вводить легкие снотворные, чтобы психологически их не травмировать и технически облегчить процедуру.

У кошек иногда приходится брать кровь из центральной (яремной) вены. Это вызвано техническими сложностями (тонкие вены на предплечье, введение снотворных и падение артериального давления, спавшиеся вены и т.д.). В таких случаях возникает необходимость сбривания шерстного покрова над участком вены, расположенной в области шеи. Как правило, шерсть на этих участках полностью восстанавливается в течение 3 - 4 недель. (Фото № 4).

Сколько крови можно сдавать одномоментно и как часто животные могут выступать в качестве донора

Без ущерба для здоровья животные могут сдавать 10 мл крови на 1 кг массы тела. Эту процедуру можно выполнять с периодичностью один раз в два месяца. В нашей клинике есть собаки, которые сдавали кровь уже более пятнадцати раз.

После сдачи крови животные-доноры нуждаются в снижении физических нагрузок в течение 2-3 дней и доброкачественном полноценном питании в течение этого же периода времени.

За все время существования донорской службы в нашем госпитале (более 10 лет) и проведения большого количества гемотрансфузий (иногда до пяти манипуляций в день) мы ни разу не наблюдали осложнений или ухудшения состояния у животных-доноров.

В своей работе Ликокк не только попытался защитить гемотрансфузию как способ лечения кровопотери, но и ехидно прокомментировал очень распространенный в то время, универсальный способ лечения почти всех существующих болезней - кровопускание. Он спрашивал: «Если мы пытаемся лечить болезни кровопусканием, то почему мы не имеем права применять лечение абсолютно противоположным способом, а именно гемотрансфузией?».

Он проводил свои эксперименты на собаках и кошках и смог показать опасность межвидового переливания крови. Говоря о возможности лечения кровопотери у людей, Ликокк настойчиво рекомендовал применять только человеческую кровь.

Сначала доктор Ликокк использовал в качестве реципиентов собак и кошек, а в качестве доноров собак и овец. Он провел восемь опытов, в которых методом кровопускания вызывал у исследуемых животных значительную кровопотерю, а затем пытался восполнить ее переливанием донорской крови. С этой целью он применил оригинальную «систему для трансфузий», изготовленную из мочеточника вола, к концам которого прикреплялись иглы из перьев ворона. Один конец этой «магистрали» устанавливался в артерии донора, другой в вене реципиента. Три собаки, которым для лечения кровопотери переливалась кровь от доноров-собак, успешно перенесли этот эксперимент. Две кошки тяжело перенесли переливание собачей крови, но выжили. Но когда кровь ягнят переливалась собакам, из трех выжила только одна. Оценивая результаты экспериментов, Ликокк отметил, что донорская кровь от «животного того же вида обеспечивает поддержание жизни», но кровь от животных других видов «…как оказывается, не отвечает поставленной цели».

Затем Ликокк провел ряд экспериментов с перекрестным переливанием крови между двумя собаками, а также между кошкой и собакой. В итоге доктор Ликокк пришел к окончательному выводу - переливание крови между животными разных видов не только бессмысленно, но и опасно.

В предисловии к изданной диссертации Ликокка редактор журнала восторженно написал: «Эта работа стоит десять тысяч фунтов! …это должно быть напечатано золотыми буквами, и должно быть вколочено в мозги каждому медику» [11].

Вскоре доктор Ликокк вернулся на о. Барбадос. Не известно, продолжал ли он в дальнейшем заниматься врачебной практикой. В 1826 г. Ликокк снова вернулся в Англию, где и умер в 1828 г.

Кстати говоря, в своей диссертационной работе доктор Ликокк лишь вкратце обозначил, что переливание крови по схеме «от человека к человеку» имеет большие перспективы в медицине, и что «… это подтверждено как моими собственными экспериментами, так и подобными экспериментами других». К сожалению, он не упомянул о данном обстоятельстве более подробно. После этого Ликокк вообще больше нигде не публиковался. Поскольку случай успешной гемотрансфузии родильнице, проведенной Джеймсом Бланделлом в августе 1825 г., был опубликован мистером Уоллером, любые сомнения и споры о приоритетах теперь не имеют для научного сообщества никакого значения

Гемотрансфузии

В комплексе лечения переливание крови имеет очень важное значение. В клинической практике гемотрансфузии применяют с заместительной целью (перелитые эритроциты находятся в крови реципиента 30--120 дней), стимулирующей целью (действует на различные функции животного организма), с целью улучшения гемодинамики (увеличивается ОЦК, усиливается работа сердца, повышается минутный объем сердца и т.д.); гемостатической целью (переливание крови оказывает стимулирующее действие на систему гемостаза реципиента, вызывая умеренную гиперкоагуляцию, обусловленную увеличением тромбопластической и снижением антикоагулянтной функции крови) (О. К. Гаврилов, 1982).

У собак имеется семь групп крови, определяемых по антигенной принадлежности: А, В, С, D, Е, F и G. Фактор А у животных имеет такое же значение, как и резус-фактор у людей Этот фактор имеется примерно v 60--65% животных Повторное переливание крови животному, у которого этого фактора нет, может привести к тяжелым гемотрансфузиологическнм последствиям -- гемолизу крови и гибели животного.

Первое переливание крови, как правило, не вызывает тяжелых осложнении из-за слабо выраженных антигенных свойств факторов В--G. Однако в некоторых случаях могут наблюдаться аллергические реакции в виде крапивницы, зуда и т.п., которые могут развиться сразу (ранняя реакция) и спустя несколько дней (поздняя реакция). Во избежание этих осложнений необходимо проводить пробы на групповую и индивидуальную совместимость Для этого необходимо к 1 мл сыворотки реципиента добавить 0, 1 мл эритроцитов донора (рис. 19). Реакция проводится на стекле при температуре +22--25°С. Учет осуществляют через 5 минут. При отсутствии агглютинации можно приступать к биологической пробе на индивидуальную совместимость.

Биологическая проба на индивидуальную совместимость проводится путем струйного переливания 10--15 мл крови в течение 3 мин. крупным породам собак и 3--5 мл -- мелким. Проба проводится трехкратно. При этом у животного, по возможности, измеряется артериальное давление, частота пульса, число дыхательных движений до переливания и через 10--15 мин. после струйного введения крови. Беспокойство животного, одышка, тахикардия или аритмия, падение давления, рвота, проявления болевых ощущений свидетельствуют о несовместимости переливаемой крови.

При переливании крови следует учитывать, что наиболее подходящей для гемотрансфузии является свежая донорская кровь. Заготовленная заранее кровь уже к 10 дню имеет кислую реакцию (рН до 6, 0) и содержит калий в высоких концентрациях (до 8 ммоль/л), что может вызвать аритмию и даже остановку сердца. При переливании заранее заготовленной крови ее необходимо подогревать на водяной бане до температуры +37°С, т.к. холодная кровь вызывает гипотермию миокарда, спазм периферических сосудов и ацидоз, легко уходит в кровяное депо. На каждые 200--250 мл цитратной крови вводится 5 мл 10% раствора хлористого кальция, 50 мл 40% глюкозы с 4 ед. инсулина и 20--30 мл 3% раствора соды (с целью нейтрализации гиперкалиемии и коррекции ацидоза) (А.А.Бунятян, 1982).

Заготавливают кровь, используя глюгицир (50 мл на 200 мл крови), или следующий состав:

Natrii citrici	2, 2%
Ac.citrici	0, 8%
Glucosi	2, 45%
Aq.destillatae	94, 55%

Такой состав используется в количестве 15 мл на 100 мл крови (М.Закиевич, 1994). Кровь с консервантом можно хранить 21 день при температуре +4°С.

Забор крови от животного осуществляется путем венепункции толстой иглой и сливанием ее во флакон с приготовленным консервантом (рис.20). Для предупреждения коагуляции крови в системе, последнюю необходимо предварительно промыть раствором гепарина или глюгициром, или ввести гепарин донору из расчета 100--200 ед. на кг массы тела. Животному-донору предварительно вводят седативные препараты (см. выше). Система для взятия крови не должна быть длиннее 25--30 см, т.к. кровь собак склонна к гиперкоагуляции и при большой длине трубки сворачивается в системе. Сосуд для сбора крови необходимо постоянно покачивать. С целью перемешивания крови и консерванта.

Без ущерба для здоровья животного можно забирать кровь из расчета 10 мл/кг. Переливают кровь капельно с темпом 40--60 кап/мин. из расчета 5--18 мл/кг в час. Повторный забор крови можно проводить через 1, 5-2 месяца.

При необходимости можно осуществлять заготовку трупной крови (от животных, погибших в результате травм). Заготовка крови в этом случае принципиально не отличается от описанной выше. Если забор крови производить из сердца, можно получить 80--90 мл на килограмм массы тела. Гепарин в этом случае вводится из расчета 120 ед./кг. Кровь от трупа можно забирать до 6 ч с момента гибели животного.

Для заготовки плазмы используют раствор следующего состава:

Ac.citrici	40, 0
Glucosi	30, 0
Ac.chlorici conc.	7 ml
Rivanoli	0, 05
Aq.destilatae	950 ml

На 900 мл крови добавляют 100 мл этого раствора. Кровь отстаивают в течение 1-2 ч, полученную плазму осторожно переливают в стерильные флаконы и запечатывают. При температуре -15°С плазму можно сохранять в течение 2-х лет. Плазма богата белком, переливание ее показано при острых нарушениях свертываемости крови, гипопротеинемии, интоксикации, для повышения коллоидно-осмотического давления крови.

В повседневной практике врачам довольно часто приходится сталкиваться с проведением различных трансфузиологических операций. Мы остановимся на некоторых из них, имеющих наибольшее значение в лечении больных животных.

Реинфузия крови -- переливание крови, излившейся в плевральную или брюшную полости. Реинфузия крови является очень эффективной мерой лечения и предотвращает осложнения, связанные с переливанием донорской крови. Показанием для реинфузии является любая кровопотеря, допускающая использование излившейся в полости (плевральная, брюшная и т.д.) крови. Противопоказаниями являются:

1. гнойное загрязнение излившейся крови,

2. загрязнение излившейся крови мочой или кишечным содержимым;

3. кровотечения, связанные с разрывом матки;

4. почечная недостаточность

Чаще всего врачу приходится иметь дело с реинфузией крови при разрывах легкого, печени, селезенки, внутрибрюшинных разрывов крупных сосудов. Наиболее простой способ сбора излившейся крови заключается в простом вычерпывании ее из полости ложкой или вымакивании марлей (последний способ значительно хуже, т.к. приводит к существенному разрушению эритроцитов). При сборе крови ее сливают в стерильный флакон с одним из стабилизаторов (глюгицир, цитрат натрия и др.), предварительно профильтровав ее через 4 слоя стерильной марли. После этого флакон закрывают и переливают кровь по обычной методике, осуществляя ее микрофильтрацию через фильтр системы для переливания крови.

Вторым способом забора крови для реинфузии является введение перфорированного трубочного дренажа в брюшную или плевральную полость посредством лапаро- или торакоцентеза. Такой способ позволяет собрать и реинфузировать кровь до оперативного вмешательства, что значительно снижает риск анестезиологического обеспечения, особенно при политравмах, сопровождающихся разрывом паренхиматозных органов и массивной кровопотерей. При эвакуации крови из брюшной полости необходимо убедиться в целостности мочевого пузыря (для этого его необходимо катетеризировать до выполнения лапароцентеза). Небольшие же повреждения кишечника, не сопровождающиеся массивным загрязнением собираемой крови не являются противопоказанием к ее реинфузии (Е.А.Вагнер с соавт., 1977).

Внутрикостные трансфузии достаточно просты в исполнении, могут использоваться в тех случаях, когда внутривенное введение жидкостей затруднено (гнойные поражения кожи, массивные отеки конечностей и т.д.), а также у щенков и котят. Трансфузии осуществляются внутрикостным введением иглы с мандреном (костномозговая игла Кассирского) в эпифизы костей, крыло подвздошной кости Перед введением иглы выбривают участок кожи, обрабатывают его как операционное поле (во избежание остеомиелита), прокалывают иглой кожу и подлежащие ткани до кости, затем, преодолевая костный кортикальный слой, получают ощущение "провала" иглы, удаляют мандрен, внутрикостно вводят 0, 5--2 мл 2% раствора новокаина и проводят инфузию растворов под давлением. По окончании манипуляции кожу обрабатывают йодом и кубатолом.

Аутогемотрансфузия -- переливание крови больному животному, взятой у него заблаговременно. Обычно такая необходимость возникает при повторном переливании крови, когда предполагается большая операция с массивной кровопотерей. У животного заблаговременно берут кровь (за 1-2 недели до предполагаемой операции), а затем ее же переливают во время оперативного вмешательства.

Реинфузия асцитической жидкости в сосудистое русло возможна у животных, больных циррозом печени, имеющих выраженный асцит, рефракторный к обычной диуретической терапии. Это позволяет избавиться от большого количества жидкости в брюшной полости, сохранив при этом белок, восстановить его уровень в плазме. Технически это выполняется следующим образом: после пункции брюшной полости асцитическую жидкость собирают в стерильный флакон, и тут же вводят ее внутривенно капельно со скоростью 10 мл/кг в час. За 1 сеанс можно реинфузировать от 10 до 30 мл/кг асцитической жидкости. Такие реинфузии могут проводиться 2--4 раза через 1-2 суток.

Инфузионно-трансфузионная тактика при некоторых тяжелых состояниях

При острой кровопотере инфузионно-трансфузионная тактика зависит от количества излившейся крови (см табл.).

Таблица. Соотношение и объем вводимых растворов в зависимости от степени кровопотери