Размещено на http://www.allbest.ru/

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ

ОДЕСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

УДК 661.718.6:616.36 - 002:616 - 092.9

Фармакотерапевтична ефективність координаційної сполуки германію з нікотинамідом при експериментальному медикаментозному гепатиті

14.03.05 - фармакологія

Внукова Марина Олександрівна

Одеса - 2008

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана в Луганському державному медичному університеті МОЗ України.

Науковий керівник: доктор медичних наук, професор, заслужений діяч науки і техніки України Лук'янчук Віктор Дмитрович, Луганський державний медичний університет МОЗ України, м. Луганськ, завідувач кафедри фармакології.

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор, член-кореспондент АМН України, заслужений діяч науки і техніки України Кресюн Валентин Йосипович, Одеський державний медичний університет МОЗ України, м. Одеса, завідувач кафедри загальної і клінічної фармакології;

доктор медичних наук, професор, заслужений діяч науки і техніки України Бобирьов Віктор Миколайович, Вищий державний навальний заклад „Українська медична стоматологічна академія” МОЗ України, м. Полтава, завідувач кафедри експериментальної та клінічної фармакології з клінічною імунологією та алергологією.

Захист дисертації відбудеться «22» вересня 2008 р. о 11 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 41.600.01 при Одеському державному медичному університеті МОЗ України за адресою: 65082, м. Одеса, Валіховський пров., 2

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Одеського державного медичного університету МОЗ України за адресою: 65082, м. Одеса, Валіховський пров., 3.

Автореферат розісланий «22» серпня 2008 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради, д.мед.н., доцент В.В. Годован.

Загальна характеристика роботи

Актуальність проблеми. З огляду на провідну роль печінки в біотрансформації ксенобіотиків, є підстави стверджувати, що практично не існує синтетичних ліків, які за певних умов у більшому або меншому ступені не викликали б її структурно-функціональних порушень [Буеверов О.А., 2002; Бондарев Л.С., Клиса М.М., 2004; Полунина Т.Е., 2005]. Це особливо стосується протитуберкульозних засобів, фармакотерапія якими вимагає, із зрозумілих причин, комбінованого застосування препаратів протягом багатьох місяців і навіть років. Такі умови фармакотерапії туберкульозу викликають напруження функціонування ферментних систем, порушення обмінних процесів і морфо-функціонального стану печінки, що, у підсумку, і спричиняє формування токсичного медикаментозного гепатиту [Просвєтов Ю.В., 2000; Чуканов В.И. и соавт., 2004; Saukkonen J.J. et al., 2006; Markov M. et al., 2007; Kaneko Y. et al., 2008].

Найбільш ефективними, у протитуберкульозному відношенні, і в той же час гепатотоксичними є такі препарати як рифампіцин, ізоніазид і піразинамід [Jasmer R.M. et al., 2002; Younossian A.B. et al., 2005; NR. Budha et al., 2008]. Згідно з даними літератури [Гнедько И.И., 2002; Лопаткина Т., Бурневич Є., 2003], частота токсичного гепатиту, що викликається комбінованим застосуванням цих туберкулостатиків, становить 20 % і більше, що диктує гостру необхідність проведення високоефективної та своєчасної фармакокорекції, а також лікарської профілактики.

У теперішній час для корекції медикаментозних уражень печінки найпоширенішими є гепатопротектори тваринного і рослинного походження [Дегтярева И.И. и соавт., 2000; Минушкин О.Н., 2002; Новиков В.Е., Климкина Е.И., 2005]. Однак, незважаючи на досить великий арсенал препаратів, що позитивно впливають на функціонування гепатоцитів при медикаментозних ураженнях, їхня ефективність найчастіше недостатньо висока в плані всебічного захисту або відновлення порушень печінки [Буеверов А.О., 2001; Ушкалова Е.А., 2004].

Виходячи із цього, особливу актуальність набуває пошук і розробка нових високоефективних і безпечних гепатопротекторів з оптимальними фармакодинамічними ефектами та фармакокінетичними параметрами.

Останнім часом увагу вчених-фармакологів привертає біологічна активність органічних сполук германію. У цей час вивчені [Кресюн В.И. и соавт., 1994; Сейфулліна І.Й. та співавт., 2002] різноманітні ефекти германійорганічних сполук, зокрема їх гепатопротекторна активність [Шевченко І.М., 2005; Годован В.В., 2008].

Дослідженнями останніх років, проведеними в лабораторії кафедри фармакології Луганського державного медичного університету (ЛугДМУ), експериментально обґрунтовані доцільність і ефективність профілактичного застосування представника нового класу хімічних сполук - координаційної сполуки германію з нікотинамідом (МІГУ-2) - для запобігання порушень, що розвиваються при гострому пероральному отруєнні динітроортокрезолом [Бабенко М.М., 2008].

Таким чином, вищевикладене можна розцінювати як теоретичне обґрунтування доцільності дослідження гепатопротекторної активності з детоксикуючими властивостями МІГУ-2 в умовах медикаментозного гепатиту, спровокованого багаторазовим введенням комбінації туберкулостатиків: рифампіцину, ізоніазиду та піразинаміду.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Робота виконана в рамках планової НДР МОЗ України кафедри фармакології ЛугДМУ за темою: "Пошук та розробка засобів фармакокорекції екстремальних киснедефіцитних станів" (№ держреєстрації 0103U005539). Дисертант є співвиконавцем даної НДР.

Мета та задачі дослідження. Мета роботи - експериментально обґрунтувати доцільність застосування координаційної сполуки германію з нікотинамідом (МІГУ-2), вивчити основні сторони його фармакодинаміки та особливості фармакокінетики за умов токсичного гепатиту, викликаного протитуберкульозними засобами.

Для досягнення поставленої мети вирішувались наступні задачі:

1. Оцінити вплив МІГУ-2 на стан прооксидантно-антиоксидантної рівноваги в організмі щурів з медикаментозним гепатитом у порівнянні з референтним препаратом - силібором.

2. Дослідити вплив МІГУ-2 у порівнянні із силібором на процеси детоксикації в організмі тварин за умов токсичного ураження печінки туберкулостатиками.

3. З'ясувати в порівняльному аспекті вплив МІГУ-2 та силібору на стан окремих компонентів мікросомального та мітохондріального електронтранспортних ланцюгів гепатоцитів у щурів з токсичним гепатитом.

4. Визначити рівень аденілових нуклеотидів та параметри енергетичного гомеостазу у тварин з токсичним гепатитом при застосуванні МІГУ-2.

5. Вивчити фармакокінетичний профіль МІГУ-2 у здорових щурів та на моделі експериментального медикаментозного гепатиту.

6. З'ясувати вплив МІГУ-2 на структурну організацію гепатоцитів тварин в умовах тривалого надходження протитуберкульозних засобів.

Об'єкт дослідження - фармакокорекція медикаментозного гепатиту, який виникає на тлі застосування протитуберкульозних лікарських засобів.

Предмет дослідження - ефективність координаційної сполуки германію з нікотинамідом при експериментальному медикаментозному гепатиті.

Методи дослідження - фармакологічні, т.ч. фармакокінетичні, біохімічні, біофізичні, морфологічні і статистичні.

Наукова новизна одержаних результатів. Вперше доведено детоксикуючу дію представника принципово нового класу елементоорганічних речовин - комплексної сполуки германію з нікотинамідом за умов хронічної інтоксикації протитуберкульозними засобами. Отримано нові дані про вплив МІГУ-2 на кінетику вільнорадикальних реакцій, прооксидантно-антиоксидантний та енергетичний гомеостази, вуглеводний обмін, а також на стан процесів природної детоксикації на моделі токсичного ураження печінки туберкулостатиками. Вперше отримані дані електронно-парамагнітно-резонансної спектрометрії (ЕПР-спектрометрії) про стан окремих компонентів мітохондріального та мікросомального електрон-транспортних ланцюгів гепатоцитів тварин, що отримували МІГУ-2 в умовах хронічної інтоксикації туберкулостатиками. Вперше проведено порівняльний фармакокінетичний аналіз МІГУ-2 в організмі інтактних тварин і при медикаментозному гепатиті на різних етапах проходження сполуки в організмі. аденіловий гепатит гомеостаз

Новизна отриманих даних підтверджена патентом України № 22954 від 25.04.07р. «Спосіб фармакокорекції токсичного медикаментозного гепатиту».

Практичне значення одержаних результатів. У роботі наведені результати експериментально-теоретичного дослідження ефективності координаційної сполуки германію з нікотинамідом як гепатопротектора з детоксикуючими властивостями при медикаментозному токсичному гепатиті. Отримані в роботі дані дозволяють значно розширити існуючі уявлення про фармакодинаміку та фармакокінетику комплексу германію з біолігандом, а також про механізм його фармакотерапевтичної дії в умовах тривалого застосування протитуберкульозних лікарських засобів.

Результати дослідження можуть слугувати базовими в частині доклінічного вивчення координаційної сполуки германію з нікотинамідом як засобу детоксикації при хронічній гепатотоксичній дії туберкулостатиків, а також вказують на перспективність подальшого фармакологічного дослідження цієї координаційної сполуки як потенційного високоефективного та безпечного лікарського засобу мембранопротекторного типу дії.

Матеріали досліджень впроваджені в навчальний процес на кафедрах фармакології Вищого державного навчального закладу "Українська медична стоматологічна академія", Вінницького національного медичного університету ім. М.І. Пирогова, Національного фармацевтичного університету, Одеського і Тернопільського державних медичних університетів, на кафедрі загальної хімії та полімерів Одеського національного університету ім. І.І. Мечникова.

Особистий внесок дисертанта. Внесок автора в отримання наукових результатів є основним і складається з проведення патентно-інформаційного пошуку, визначення напрямку, обсягу, методів дослідження, постановки мети і формування завдань, виконання всіх етапів експериментального дослідження, статистичної обробки отриманих результатів, аналізу й узагальнення даних та підготовки наукової роботи до друку.

Апробація результатів дисертації. Основні положення дисертаційної роботи доповідалися на: науково-практичній конференції молодих вчених і студентів "Досягнення фундаментальної та прикладної медицини" (Луганськ, 2006); VІ Всеукраїнській науково-практичній конференції "Клінічна фармація в Україні" (Харків, 2007); Науково-практичній конференції з міжнародною участю "Хвороби печінки в практиці клініциста" (Харків, 2007); ІІІ Регіональній науково-практичній конференції молодих вчених і студентів "Актуальні проблеми сучасної фармації та медицини у теорії та практиці" (Луганськ, 2007); Міжнародній науковій конференції студентів і молодих вчених "Актуальні питання в сучасній медицині" (Харків, 2007); Міжнародній конференції молодих вчених "Актуальні проблеми клінічної, експериментальної та профілактичної медицини" (Донецьк, 2007); 76 Міжвузівській науковій конференції студентів і молодих вчених з міжнародною участю "Працюємо, творимо, презентуємо" (Івано-Франківськ, 2007); Всеукраїнській науково-практичній конференції "Сучасні методичні підходи до аналізу стану здоров'я" (Луганськ, 2007); Першій науково-практичній конференції „Безопасность лекарств: от разработки до медицинского применения” (Киев, 2007); Науково-практичній конференції з міжнародною участю "Актуальні питання фармакології" (Вінниця, 2007); VІІ Всеукраїнській науково-практичній конференції з міжнародною участю "Клінічна фармація в Україні" (Харків, 2007).

Публікації. За темою дисертації опубліковано 17 наукових праць, з них 5 статей у наукових профільних журналах, затверджених ВАК України, 1 патент України, 11 тез доповідей.

Обсяг та структура дисертації. Дисертація складається із вступу, огляду літератури, розділу «Матеріали, модель і методи дослідження», 6 розділів власних досліджень, розділу «Аналіз та узагальнення отриманих результатів», висновків, списку літератури, який включає 210 вітчизняних і 140 закордонних джерел. Робота викладена на 182 сторінках комп'ютерного тексту, ілюстрована 19 рисунками і 21 таблицею.

Основний зміст роботи

Матеріали та методи дослідження. Експериментальні дослідження виконані в лабораторії кафедри фармакології ЛугДМУ, яка сертифікована Державним фармакологічним центром (ДФЦ) МОЗ України (посвідчення №07 від 29 вересня 2005 р.) у повній відповідності з вимогами Комісії з біоетики ЛугДМУ (протокол № 10 від 23.01.2007 р.), а також методичними рекомендаціями ДФЦ з доклінічного вивчення нових лікарських засобів (Київ, 2002).

Досліди виконані на 324 білих безпородних статевозрілих щурах обох статей, масою 190-220 гр. Тварини перебували в умовах віварію ЛугДМУ та одержували стандартну дієту у вигляді гранульованого корму за встановленими нормами.

Токсичний медикаментозний гепатит моделювали шляхом інтрагастрального введення комбінації субстанцій засобів протитуберкульозної фармакотерапії: рифампіцину (50 мг/кг) та ізоніазиду (86 мг/кг) у концентрації 2 %, а також піразинаміду (1500 мг/кг) у концентрації 10 % на 2 % крохмальній суспензії щодня протягом 28 днів [Сливка Ю.И. и соавт., 1989; Скакун Н.П., Сливка Ю.И., 1992; Голубева М.Г., 2005; Бережна Л.Г., 2006].

Досліджувана сполука (МІГУ-2) синтезована на кафедрі загальної хімії та полімерів Одеського національного університету ім. І.І. Мечникова під керівництвом з.д.н.т. України, проф. І.Й. Сейфуліної і референтний препарат силібор (ТОВ "Фармацевтична компанія "Здоров'я", м. Харків, Україна) застосовували також перорально в дозах, відповідно, 100 мг/кг та 165 мг/кг у вигляді 5 % водної суспензії щодня протягом 28 днів через 1 год після введення туберкулостатиків.

Забій тварин здійснювали через 24 год після останнього введення протитуберкульозних засобів і досліджуваних речовин. Біосубстратами для проведення комплексних досліджень слугували цільна кров, сироватка крові та печінка, попередньо перфузована охолодженим фізіологічним розчином.

Антирадикальну активність МІГУ-2 на моделі токсичного медикаментозного гепатиту вивчали за допомогою біохемілюмінісценції (БХЛ), яку реєстрували на люмінометрі “Emillite-1105” виробництва фірми «Біо-Хім-Мак» у сироватці крові щурів протягом 5 хв. Кінетику люмінісценції оцінювали за амплітудою швидкого спалаху (І₁), часом індукції повільного спалаху (ф), амплітудою повільного спалаху (І₂), амплітудою кінцевого значення БХЛ (І_К), а також загальною світлосумою реакції (S). Розрахунок досліджуваних параметрів проводили за допомогою спеціально розробленої на кафедрі фармакології ЛугДМУ комп'ютерної програми на базі процесора Intel Pentium-II-450 MHz.

Стан процесів перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) у тварин з гепатитом медикаментозного ґенезу оцінювали за вмістом кінцевих продуктів, що реагують з 2-тіобарбітуровою кислотою (ТБК-реактанти) [Стальная И.Д., Гаришвили Г.Г., 1977].

Стан основних компонентів антиоксидантної системи (АОС) захисту організму оцінювали за активністю двох ключових ферментів її ензимної ланки - супероксиддисмутази (СОД) [Костюк В.А. та співавт., 1990] та каталази [Королюк М.А. та співавт., 1988], а також за рівнем відновленого глутатіону [Sedluck J., Lindsay H., 1969] та вільних SH-груп [Ellman G.L., 1959]. Забезпеченість організму щурів у досліджуваних умовах експерименту ендогенними антиоксидантами оцінювали за інтегральним показником стану перекисної резистентності еритроцитів [Архипова О.Г., 1988]. Використовували також фактор антиоксидантного стану [Купраш Л.П. та співавт., 2000].

Стан детоксикуючої системи організму тварин в досліджуваних умовах експерименту оцінювали за активністю НАДФ-залежної монооксигеназної гідроксилюючої системи печінки за методом О.В. Леоненко та Т.А. Попова (1981). Про стан монооксигеназної системи печінки судили також за тривалістю "тіопенталового" сну [Коцюмбас І.Я. та співавт., 2006].

Ступінь гепатопротекторної активності досліджуваної германійорганічної сполуки оцінювали за такими біохімічними показниками крові, як активність аланінамінотрансферази (АлТ), аспартатамінотрансферази (АсТ) і лужної фосфатази (ЛФ), рівень білірубіну, холестерину, тригліцеридів, сечовини, ліпопротеїдів високої щільності (ЛПВЩ), ліпопротеїдів низької щільності (ЛПНЩ) і загального білка. Всі показники визначали в сироватці крові за допомогою біохімічних наборів фірми "Human Gmb" (Німеччина).

Вивчення зовнішньосекреторної функції печінки здійснювали за методом С.М. Дроговоз та співавт. (1994), а також використовували бромсульфалеїнову пробу за методикою В.В. Меншикова (1971). Масовий коефіцієнт печінки визначали за формулою О.А. Назаренко та співавт. (2004).

Стан мітохондріального та мікросомального ланцюгів транспорту електронів у гепатоцитах оцінювали методом ЕПР за положенням та амплітудою парамагнітних центрів гепатоцитів з g-факторами: 1,94 - залізосірчані білки (ЗСБ); 1,97 - Мо⁵⁺-вмісні комплекси; 2,00 - вільні радикали; 2,03 - нітрозильні комплекси заліза (НКЗ); 2,17 - Мn²⁺-вмісні парамагнітні центри; 2,25 - цитохром Р-450 [Ажипа Я.И., 1983].

Оцінку стану енергетичного гомеостазу у досліджуваних умовах експерименту проводили шляхом визначення рівня АТФ, АДФ та АМФ в еритроцитах методом тонкошарової хроматографії на пластинах фірми “Merk” (Німеччина) [Захарова Н.Б, Рубин В.И., 1980], а також концентрації фосфору неорганічного у сироватці крові за допомогою біохімічного набору фірми “Філісіт-діагностика”(Україна). На підставі отриманих даних розраховували наступні показники: енергетичний заряд (ЕЗ), енергетичний потенціал (ЕП), індекс фосфорилювання (ІФ), порівняльний коефіцієнт (К_пор), термодинамічний контроль дихання (ТКД), ступінь фосфорилювання (СФ) [Лук'янчук В.Д., Савченкова Л.В., 2000]. Активність ферментів енергетичного обміну оцінювали в сироватці крові за допомогою біохімічних наборів фірми “Філісіт-діагностика”, Україна (лактатдегідрогеназа) та “PLIVA-Lachema”, Чехія (креатинкіназа).

Вміст глікогену визначали за методом з орцином [Покровський О.О., 1964], рівень глюкози - за допомогою біохімічних наборів фірми „Філісіт-діагностика”. Концентрацію лактату та пірувату ідентифікували за допомогою неферментативної методики в одній пробі [Герасимов И.Г., Плаксина Е.Н., 2000]. Для більш коректної оцінки стану вуглеводного обміну розраховували окисно-відновний потенціал (ОВП) системи молочна-піровиноградна кислоти [Райскина М.Е. и соавт., 1974].

Фармакокінетику МІГУ-2 вивчали згідно рекомендацій ДФЦ МОЗ України [Головенко М.Я. та співавт., 1995] шляхом визначення його концентрації в сироватці крові, головному мозку, м'язах, серці, печінці, нирках та сечі щурів, які одержували потенційний гепатопротектор на тлі токсичного медикаментозного гепатиту, а також у здорових тварин. Забір біоматеріиалу проводили в динаміці: через 3, 6, 12 і 24 год з моменту одноразового введення германійорганічного комплексу, який ідентифікували за описаною у літературі методикою [Кресюн В.Й. та співавт., 2000].

За допомогою експериментальних даних проводили порівняльний аналіз наступних фармакокінетичних показників: максимальна концентрація речовини (C_max), константа швидкості абсорбції (К₀₁), константа швидкості масопереносу з центральної камери у периферичну (К₁₂), константа швидкості елімінації (К_el), константа швидкості масопереносу з периферичної камери у центральну (К₂₁), константа швидкості екскреції (К_ex), період напівабсорбції (t_1/2,а), період напівелімінації (t_1/2), період напівекскреції (t_1/2,ex), час досягнення максимальної концентрації (t _max), загальний об'єм розподілу (V_d), площа під фармакокінетичною кривою (AUC), середній час утримання речовини в організмі (MRT) та загальний кліренс (Cl_t).

Патоморфологічне дослідження тканини печінки проводили за загальноприйнятою технологією [Меркулов Г.А., 1969]. Отримані дані оброблені статистично за допомогою критерію t Ст'юдента [Гланц С., 1999].

Результати досліджень та їх обговорення. Вплив потенційного гепатопротектора - координаційної сполуки германію з нікотинамідом на прооксидантно-антиоксидантний гомеостаз у щурів на моделі експериментального медикаментозного гепатиту. Біохемілюмінісцентний аналіз гепатопротекторної активності МІГУ-2 на моделі токсичного медикаментозного гепатиту дозволив встановити, що ця сполука суттєво пригнічує інтенсивність перебігу ланцюгових вільнорадикальних реакцій в сироватці крові щурів (табл. 1). Це перш за все реалізується зниженням величин амплітуд швидкого та повільного спалахів БХЛ, кінцевого значення інтенсивності світіння та площі під кривою біохемілюмінісценції, а також збільшенням часу індукції повільного спалаху в досліджуваному біосубстраті у тварин дослідної групи.

Таблиця 1 Вплив МІГУ-2 на показники БХЛ у сироватці крові щурів з токсичним медикаментозним гепатитом (n=7)

Примітки: 1. Р₁ - порівняно з інтактною групою; 2. Р₂ - порівняно з контрольною групою; 3. Всі розходження між значеннями у дослідній та референтній групах не вірогідні.

При дослідженні впливу МІГУ-2 на рівень продуктів деградації фосфоліпідів клітинних мембран у щурів з гепатитом встановлено, що лікувально-профілактичне введення цієї сполуки зменшує вміст кінцевих продуктів ПОЛ - ТБК-реактантів - на 22 % у крові та на 20 % у тканині печінки в порівнянні з контролем (гепатит без лікування).

Виходячи з того, що стан прооксидантно-антиоксидантного гомеостазу організму підтримується за рахунок функціонування АОС, вивчали вплив МІГУ-2 на рівень і активність основних її компонентів у щурів за умов токсичного гепатиту. Показано, що застосування МІГУ-2 істотно попереджає інактивацію СОД і каталази в обох досліджуваних біосубстратах тварин з гепатитом, індукованим рифампіцин-ізоніазид-піразинамідною комбінацією. Так, під впливом МІГУ-2 активність СОД підвищується в 1,8 та 1,6 рази, а каталази - на 21,6 % та 9,2 % у сироватці крові та тканині печінки, відповідно. Разом з тим, досліджувана сполука позитивно впливає на функціонування неферментативної ланки АОС за рахунок підвищення рівня вільних SH-груп як в крові (на 37,7 %), так і в гепатоцитах (на 31,6 %). Крім того, в дослідній групі реєструється вірогідне (Р<0,001) збільшення концентрації глутатіону відновленого у порівнянні з контрольною групою в обох досліджуваних біосубстратах.

Виразні антиоксидантні властивості МІГУ-2 підтверджуються збільшенням перекисної резистентності еритроцитів у крові тварин із медикаментозним гепатитом, а також результатами аналізу величини фактора антиоксидантного стану в обох досліджуваних біосубстратах.

Таким чином, отримані дані дозволяють дійти висновку, що МІГУ-2 має виразну антиоксидантну активність з антирадикальними властивостями.

З метою вивчення впливу МІГУ-2 на процеси детоксикації в організмі тварин в умовах токсичного ураження печінки туберкулостатиками була проведена оцінка стану реакцій І та ІІ фаз біотрансформації. Доведено, що лікувально-профілактичне застосування МІГУ-2 як потенційного гепатопротектора при токсичному гепатиті вірогідно (Р<0,05-0,001) збільшує виведення з організму як 4-аміноантипірину, так и N-ацетил-4-аміноантипірину у всі терміни дослідження. При цьому МІГУ-2 повністю нормалізує процеси ацетилювання у печінці, стабілізуючи концентрацію продукту другої фази біотрансформації амідопірину у сечі щурів на одному рівні з аналогічним в інтактній серії (Р>0,05).

Поряд з цим, пероральне введення МІГУ-2 щурам з токсичним медикаментозним гепатитом істотно (у 3,4 рази) скорочує тривалість „тіопенталового” сну, що ще раз підтверджує здатність сполуки підвищувати функціональну активність метаболізуючої системи печінки.

При вивченні функціонального стану печінки доведено, що лікувально-профілактичне введення МІГУ-2 зменшує активність АлТ та АсТ на 25 % и 26 %, відповідно, у порівнянні з контролем, що вказує на зниження процесів цитолізу у печінці в умовах модельованого гепатиту. Застосування МІГУ-2 у щурів з токсичним ураженням печінки протитуберкульозними засобами також зменшує рівень маркерів холестазу у сироватці крові: білірубіну (на 25 %), холестерину (на 21 %), тригліцеридів (на 32 %) та активність ЛФ (на 29 %), що вказує на нормалізацію синтезу жовчі у печінці, на підвищення її пігментоутворюючої та екскреторної функцій. Водночас координаційна сполука германію з нікотинамідом в умовах токсичного медикаментозного гепатиту нормалізує деякі біохімічні показники крові, а саме: підвищує рівень сечовини (на 23 %), ЛПВЩ (на 33 %) на фоні зниження рівня ЛПНЩ (на 21 %), а також вірогідно (Р<0,01) збільшує вміст загального білку.

Поряд з цим, лікувально-профілактичне введення МІГУ-2 щурам з медикаментозним гепатитом реалізується значним (на 40 %) зменшенням відсотку затримки бромсульфалеїну, що вказує на здатність досліджуваного потенційного гепатопротектора коригувати рівень плазмотоку у печінці, а також інтенсифікувати процеси поглинання та виділення барвника гепатоцитами. Це узгоджується з тим, що МІГУ-2 збільшує обсяг жовчі, що продукується в умовах токсичного ураження печінки протитуберкульозними засобами, який у 2,2 рази перевищує аналогічний параметр у контролі та не має вірогідних розходжень із «здоровими» тваринами (Р>0,05).

Результати визначення інтегрального показника стану гепатобіліарної системи - масового коефіцієнту печінки, який вірогідно (Р<0,01) знижується порівняно з контролем, ще раз підтверджують наявність у координаційної сполуки гепатопротекторних властивостей.

Отже, лікувально-профілактичне застосування МІГУ-2 при токсичному гепатиті, спровокованому протитуберкульозними засобами, істотно модифікує процеси метаболізму ксенобіотиків шляхом активації реакцій як першої та і другої фаз біотрансформації, а також реалізує виразний гепатопротекторний ефект, попереджаючи процеси цитолізу та холестазу, а також нормалізуючи синтетичну функцію печінки.

Порівняльна оцінка впливу МІГУ-2 і силібору на стан окремих парамагнітних комплексів мікросомального і мітохондріального електрон-транспортних ланцюгів гепатоцитів в умовах токсичного процесу, що моделюється, показала, що профілактичне застосування досліджуваного германійорганічного комплексу супроводжується попередженням зниження рівня залізосірчаних білків, семіхінонних радикалів, а також інгібуванням накопичення нітрозильних комплексів заліза. При цьому введення МІГУ-2 запобігає деградації компонентів мікросомального ланцюга транспорту електронів.

Є підстави дійти висновку, що саме мембраностабілізуюча дія МІГУ-2, в основі якої лежать антирадикальні, у т.ч. антиоксидантні властивості, реалізується захистом компонентів електрон-транспортних ланцюгів мітохондрій та ендоплазматичного ретикулуму, сприяючи, таким чином, поліпшенню клітинного дихання та процесів дезінтоксикації організму в умовах тривалої дії на організм комбінації протитуберкульозних засобів.

При вивченні стану енергетичного гомеостазу та вуглеводного обміну у тварин з досліджуваною формою медикаментозної гепатотоксичності при застосуванні МІГУ-2 доведено, що ця сполука перерозподіляє пул аденілових нуклеотидів на користь синтезу АТФ, збільшуючи при цьому рівень фосфору неорганічного і такі парамери енергетичного обміну, як ЕЗ, ЕП, ІФ, ТКД та СФ. Поряд з цим введення МІГУ-2 на фоні токсичного медикаментозного гепатиту знижує активність лактатдегідрогенази (на 10 %) та нормалізує активність креатинкінази на одному рівні з аналогічним в інтактній серії (Р>0,05), індукуючи, таким чином, ефективні шляхи ресинтезу макроергів.

Також доведено, що координаційна сполука германію з нікотинамідом ефективно коригує процеси глікогенолізу та анаеробного гліколізу в умовах тривалого надходження до організму туберкулостатиків у токсичних дозах, зберігаючи рівень глюкози та глікогену з одночасним зниженням концентрації пірувату та лактату в крові. Більш того, на тлі використання МІГУ-2 у тварин з гепатитом на 12 % знижується величина ОВП системи лактат-піруват, що вказує на здатність сполуки запобігати виникненню метаболічного ацидозу.

При вивченні особливостей фармакокінетичного профілю МІГУ-2 на моделі медикаментозного гепатиту встановлено, що під впливом хронічної інтоксикації рифампіцин-ізоніазид-піразинамідною комбінацією у сироватці крові, головному мозку та тканині печінки експериментальних тварин відбувається збільшення процесів абсорбції та депонування досліджуваної сполуки на тлі пригнічення елімінаційних процесів (табл. 2). Це дає підстави зробити висновок про наявність у МІГУ-2 певної тропності до гепатоцитів та властивості затримуватись в організмі, максимально реалізуючи свої фармакотерапевтичні властивості в умовах досліджуваної форми гепатотоксичності.

Таблиця 2 Фармакокінетичні параметри МІГУ-2 при пероральному введенні в нормі та при токсичному медикаментозному гепатиті (n=7)

Примітка: всі розходження крім * вірогідні порівняно зі здоровими тваринами (Р<0,001-0,05).

Вивчення впливу МІГУ-2 на структурну організацію гепатоцитів в умовах тривалого надходження протитуберкульозних засобів дозволило встановити, що на фоні введення цього субституєнту у паренхімі печінки тварин відбуваються наступні зміни: діаметр центральних вен майже у два рази зменшується у порівнянні з контролем, повнокров'я також не поширюється на гемокапіляри (синусоїди) у центральних та периферичних ділянках дольки, діаметр яких вірогідно (Р<0,05) нижче ніж у щурів контрольної серії. Цитоплазма клітин у щурів, що отримували досліджуваний германійорганічний комплекс дрібнозерниста, діаметр цитоплазматичних включень вірогідно (Р<0,05) зменшується у порівнянні з групою щурів з гепатитом без лікування та практично рівний аналогічному в інтактній серії. Діаметр ядра гепатоцитів у тварин, яким вводили МІГУ-2, збільшується на 22 % у порівнянні з тваринами, що не отримували лікування, та знаходиться на одному рівні з інтактною групою (Р>0,05), що вказує на запобігання розвитку апоптот?чних реакцій у печінці. При забарвленні за Маллорі відзначається зниження розростання сполучнотканинних волокон у порівнянні зі щурами, які тривалий час зазнавали дії туберкулостатиків.

Таким чином, в основі гепатопротекторної дії координаційної сполуки германію з нікотинамідом в умовах токсичного гепатиту, спричиненого протитуберкульозними засобами, лежить його здатність запобігати формування розповсюдженої мембранопатії шляхом ефективної регуляції прооксидантно-антиоксидантної рівноваги в силу реалізації вираженої антиоксидантної дії з антирадикальними властивостями. Поряд з цим субституєнт коригує стан основних компонентів аденілнуклеотидної системи та показників енергообміну, модифікує активність ферментів енергетичного гомеостазу, а також нормалізує рівень основних параметрів вуглеводного обміну при досліджуваній формі гепатотоксичності. Гепатопротекторна активність МІГУ-2 реалізується також за рахунок корекції вмісту основних компонентів мітохондріального та мікросомального електронтранспортних ланцюгів гепатоцитів та нормалізації функціонального стану детоксикуючої системи печінки в умовах токсичної дії на печінку рифампіцин-ізоніазид-піразинамідної комбінації.

Висновки

У дисертації наведене нове рішення актуальної наукової проблеми, що виявляється в теоретичному та експериментальному обґрунтуванні доцільності й ефективності застосування координаційної сполуки германію з нікотинамідом як гепатопротекторного засобу при токсичному гепатиті, спровокованому тривалим введенням протитуберкульозних засобів.

Біохемілюмінісцентний аналіз гепатопротекторної активності МІГУ-2 свідчить про його здатність істотно коригувати кінетику надслабкого світіння за рахунок зниження амплітуди швидкого (на 26 %) і повільного (на 41 %) спалахів, збільшення часу індукції повільного спалаху (на 26 %), а також зменшення кінцевого значення (в 1,6 рази) і загальної світлосуми реакції (на 37 %) у щурів з досліджуваною формою гепатотоксичності. МІГУ-2 ефективно регулює прооксидантно-антиоксидантну рівновагу в крові та печінці щурів з медикаментозним гепатитом, на що вказує попередження зниження активності та вмісту основних компонентів ферментативної (СОД, каталаза) і неферментативної (глутатіон, SH-групи) ланок АОС. Виявлена у МІГУ-2 виражена антиоксидантна активність із антирадикальними властивостями не поступається референтному препарату силібору.

МІГУ-2 має виразну здатність (на рівні референтного препарату) нормалізувати реакції І (N-деметилювання) і ІІ (N-ацетилювання) фаз біотрансформації, а також істотно (на 71 %) скорочувати тривалість "тіопенталового" сну при медикаментозному гепатиті. Застосування МІГУ-2 у щурів з досліджуваною формою гепатиту реалізується зменшенням активності АлТ (на 25 %), АсТ (на 26 %), ЛФ (на 29 %), зниженням рівня загального білірубіну (на 25 %), холестерину (на 21 %), тригліцеридів (в 1,5 рази), ЛПНЩ (на 21 %) на тлі підвищення ЛПВЩ (на 33 %), а також рівня сечовини (на 23 %) і загального білку (на 12 %).

Однією із сторін механізму гепатопротекторної дії МІГУ-2 є здатність попереджати інактивацію цитохрому Р-450, а також нормалізувати активність Mo⁵⁺-вмісних ферментів, зберігаючи, таким чином, функціонування мікросомального ланцюга переносу електронів. Поряд із цим, МІГУ-2 запобігає зниженню рівня залізосірчаних білків (на 13,5 %), довгоживучих вільних радикалів (на 10,6 %), а також інгібує накопичення нітрозильних комплексів заліза (в 1,4 рази), нормалізуючи функціонування дихального ланцюга мітохондрій.

Введення МІГУ-2 з лікувально-профілактичною метою на тлі токсичного процесу, що розвивається у печінці тварин, проявляється ефективною (на рівні референтного препарату) регуляцією процесів енергетичного гомеостазу (збільшенням ЕЗ на 25 %, ЕП на 46 %, ІФ більш ніж в 2 рази, ТКД (на 30 %) шляхом попередження дисбалансу в системі АТФ-АДФ-АМФ, нормалізації рівня фосфору неорганічного, а також зниження креатинкінази (на 8,7 %) і активності лактатдегідрогенази (на 22,9 %).

Крім того, гепатопротекторна дія МІГУ-2 реалізується підвищенням рівня глюкози (на 13 %) і глікогену (на 32 %), а також зменшенням вмісту лактату (в 1,5 рази) і пірувату (в 1,4 рази).

Аналіз фармакокінетики МІГУ-2 при пероральному введенні на моделі медикаментозного гепатиту у щурів свідчить, що всі досліджувані параметри зазнають достовірні зміни у порівнянні із "здоровою" серією на всіх етапах проходження сполуки в організмі: абсорбції (збільшення константи швидкості абсорбції у кров і константи масопереносу із центральної камери в тканину головного мозку і печінки на тлі зменшення періоду напівабсорбції речовини, а також підвищення максимальної концентрації у цих біосубстратах); розподілу по органах і тканинах (збільшення обсягу розподілу і площі під фармакокінетичною кривою у крові, головному мозку і печінці); елімінації (зменшення константи швидкості елімінації і зворотнього масопереносу із крові, головного мозку і печінки з відповідним збільшенням періоду напівелімінації і середнього часу утримання в організмі та зменшення загального кліренсу), у т.ч. екскреції із сечею (зменшення константи швидкості екскреції, максимальної концентрації в сечі та площі під фармакокінетичною кривою на тлі збільшення періоду полуекскреції і часу досягнення максимальної концентрації в сечі).

Лікувально-профілактичне застосування координаційної сполуки германію з нікотинамідом у щурів з токсичним медикаментозним гепатитом зменшує застійні явища в печінці (зменшує діаметр центральної печінкової вени і синусоїдних гемокапілярів у 1,8 і 1,3 рази, відповідно), нормалізує діаметр ядра, пригнічує розростання сполучнотканинних волокон, а також зменшує діаметр ліпідних включень на 22 %, запобігаючи жировій інфільтрації в гепатоцитах, що, в остаточному підсумку, реалізується нормалізацією синтезуючої і детоксикуючої функції печінки.

Перелік робіт, опублікованих за темою дисертації

1. Внукова М.А. Влияние координационного соединения германия с никотинамидом на течение свободнорадикальных реакций при экспериментальном токсическом гепатите / В.Д. Лукьянчук , М.А .Внукова // Современные проблемы токсикологии. - 2007. - № 1. - С. 50-52. Внесок дисертанта - виконання експериментальних досліджень, обробка та інтерпретація даних, підготовка матеріалів до друку.

2. Внукова М.А. Прооксидантно-антиоксидантный профиль организма в условиях гепатотоксического действия изониазида, рифампицина и пиразинамида и его фармакокоррекции / М.А. Внукова // Український медичний альманах. - 2007. - Т. 10, № 1. - С. 34-38.

3. Внукова М.О. Фармакологічна корекція гепатотоксичності протитуберкульозних засобів координаційною сполукою германію з нікотинамідом / М.О. Внукова // Військова медицина України. - 2007. - Т. 7, № 1-2. - С. 41-46.

4. Внукова М.А. Влияние координационного соединения германия с никотинамидом на энергетический гомеостаз при экспериментальном медикаментозном гепатите / В.Д. Лукьянчук, М.А. Внукова, И.Й. Сейфуллина, О.А. Шпулина // Український журнал екстремальної медицини ім. Г.О. Можаєва. - 2007. - № 1. - С. 79-85. Внесок дисертанта - виконання експериментальних досліджень та оформлення статті.

5. Внукова М.О. Вплив координаційної сполуки германію з нікотинамідом на процеси природної детоксикації за умов токсичного ураження печінки туберкулостатиками / В.Д. Лук'янчук, М.О. Внукова // Ліки. - 2007. - № 1-2. - С. 59-62 Внесок дисертанта - виконання експериментальних досліджень, обробка та інтерпретація даних, підготовка матеріалів до друку.

6. Пат. 22954 Україна, МПК (2007) A61K 39/29. Спосіб фармакокорекції токсичного медикаментозного гепатиту / Лук'янчук В.Д., Внукова М.О., Сейфулліна І.Й., Шпуліна О.О., Ткаченко В.М.; заявники та та патентовласники Луг. держ. мед. ун.-т.і Одес. нац. ун.-т ім. .І.І. Мечнікова. - № 200701811; заявл. 21.02.2007; опубл. 25.04.2007, Бюл. № 5. - 14 с. Внесок дисертанта - виконання експериментальних досліджень, обробка результатів та оформлення патенту.

7. Vnukova M.A. Сoordinative compounds of germanium - potential means of pharmacotherapy of endo- and exotoxicosis / L.V Chadova., M.A Vnukova // Український медичний альманах. - 2006. - Т. 9, № 2. - С. 178. (Achievements of fundamental and applied medicine: Scientific-applied conference for young scientists and students. Lugansk, 22 of February 2006 year. - Lugansk, 2006). Внесок дисертанта - виконання експериментальних досліджень.

8. Внукова М.А. Теоретическое обоснование целесообразности изучения молекулярных комплексов германия с биолигандами при токсическом воздействии туберкулостатиков / М.А. Внукова // Клінічна фармація в Україні: VI Всеукраїнська наук.-практ. конф., 15 лютого 2007 р. : матеріали. - Харків, 2007. - С. 101-102.

9. Внукова М.А. Возможность фармакологической коррекции активности ферментов-антиоксидантов в условиях токсического лекарственного гепатита / М.А. Внукова // Хвороби печінки в практиці клініциста: наук.-практ. конф. з між нар. участю, 1-2 березня 2007 р. : праці.- Харків, 2007. - С. 73-74.

10. Внукова М.О. Ефективність координаційної сполуки германію з нікотинамідом при ураженні печінки протитуберкульозними засобами / М.О. Внукова // Актуальні проблеми сучасної фармації та медицини в теорії та практиці: III Регіональна наук.-практ. конф. молодих вчених та студентів, 22 березня 2007 р. : тези доп. - Луганськ, 2007. - С. 41-42.

11. Внукова М.А. Биохемилюминисцентный анализ гепатопротекторной активности координационного соединения германия с никотинамидом / М.А. Внукова // Актуальні питання в сучасній медицині: Міжнар. наук. конф. студентів та молодих вчених, 26-28 березня 2007 р. : тези. - Харків, 2007. - С. 35.

12. Внукова М.А. Влияние координационного соединения германия с никотинамидом на неферментативное звено антиоксидантной системы организма при повреждении печени противотуберкулезными средствами / М.А. Внукова // Актуальні проблеми клінічної, експериментальної та профілактичної медицини : Міжнар. конф. молодих вчених, 4-7 квітня 2007 р. : матеріали. - Донецьк, 2007. - С. 49.

13. Внукова М.О. Стан пулу аденілових нуклеотидів у щурів при токсичному медикаментозному гепатиті і застосуванні координаційної сполуки германію з нікотинамідом / М.О. Внукова // Працюємо, творимо, презентуємо : 76-а Міжвуз. наук. конф. студентів та молодих вчених з міжнар. участю, 27-27 квітня 2007 р. : тези доп. - Івано - Франківськ, 2007. - С. 189-190.

14. Внукова М.А. Детоксицирующая активность координационного соединения германия с никотинамидом при токсическом медикаментозном гепатите / М.А. Внукова // Сучасні методичні підходи до аналізу стану здоров'я: Всеукр. наук.-практ. конф., 14-16 травня 2007 р. : тези. -Луганськ, 2007.- С. 37-38.

15. Внукова М.А. Экспериментальная фармакотерапия медикаментозного гепатита координационным соединением германия с никотинамидом / М.А. Внукова // Безопасность лекарств: от разработки до медицинского применения : перв. науч.-практ. конф., 31 мая - 1 июня 2007 г. : материалы. - Киев, 2007.- С. 30-31.

16. Внукова М.А. Состояние параметров энергетического гомеостаза у животных при длительном поступлении противотуберкулезных средств и применении координационного соединения германия с никотинамидом / М.А. Внукова // Вісник Вінницького національного медичного університету - 2007. - № 11 (2/2). - С. 752-753. (Актуальні питання фармакології: наук.-практ. конф. з міжнар. участю. Вінниця, 25-26 жовтня 2007 р. : матеріали).

17. Внукова М.А. ЭПР-спектрометрический анализ протекторного действия координационного соединения германия с никотинамидом в условиях токсического медикаментозного гепатита / М.А. Внукова // Клінічна фармація в Україні: VII Всеукр. наук.-практ. конф., 15-16 листопада 2007 р. : матеріали. -Харків,2007. - С. 132-133.

Анотація

Внукова М.О. Фармакотерапевтична ефективність координаційної сполуки германію з нікотинамідом при експериментальному медикаментозному гепатиті. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.03.05 - фармакологія. - Одеський державний медичний університет МОЗ України, Одеса, 2008.

Дисертація присвячена експериментальному обґрунтуванню доцільності застосування координаційної сполуки германію з нікотинамідом за умов токсичного гепатиту, викликаного протитуберкульозними засобами.

Досліджуваний субституєнт реалізує свою гепатопротекторну активність, насамперед, за рахунок попередження формування розповсюдженої мембранопатії шляхом ефективної регуляції прооксидантно-антиоксидантної рівноваги в силу реалізації вираженої антиоксидантної дії з антирадикальними властивостями. Поряд із цим потенційний гепатопротектор коригує вміст основних компонентів аденілнуклеотидної системи та рівень показників енергообміну, модифікує активність основних ферментів енергетичного гомеостазу, а також нормалізує рівень основних параметрів вуглеводного обміну при формі токсичного процесу в печінці, що моделюється. Гепатопротекторна активність координаційної сполуки германію з нікотинамідом реалізується також за рахунок корекції вмісту основних компонентів мітохондріального та мікросомального електронтранспортних ланцюгів гепатоцитів і нормалізації функціонального стану детоксикуючої системи печінки в умовах хронічного токсичного медикаментозного гепатиту.

Ключові слова: координаційна сполука германію з нікотинамідом, токсичний медикаментозний гепатит, протитуберкульозні засоби, гепатопротекторні властивості.

Аннотация

Внукова М.А. Фармакотерапевтическая эффективность координационного соединения германия с никотинамидом при экспериментальном медикаментозном гепатите. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.03.05 - фармакология. - Одесский государственный медицинский университет МЗ Украины, Одесса, 2008.

Диссертация посвящена экспериментальному обоснованию целесообразности использования координационного соединения германия с никотинамидом в условиях токсического гепатита, вызванного противотуберкулезными средствами.

Комплексными исследованиями установлено, что МИГУ-2 значительно предупреждает гиперактивацию свободнорадикальных реакций в сыворотке крови животных с изучаемой формой гепатотоксичности, на что с высокой степенью достоверности указывают изменения ряда параметров сверхслабого свечения.

Установлено, что исследуемый потенциальный гепатопротектор реализует свою активность путем предупреждения образования конечных продуктов липидпереокисления с одновременным сохранением активности компонентов ферментативного и уровня компонентов неферментативного звеньев антиоксидантной системы защиты организма в крови и ткани печени животных с токсическим гепатитом, спровоцированным рифампицин-изониазид-пиразинамидной комбинацией.

Экспериментально доказано, что пероральное лечебно-профилактическое применение МИГУ-2 у крыс с изучаемой формой гепатита реализуется снижением активности аланинаминотрансферазы (на 25 %), аспартатаминотрансферазы (на 26 %), щелочной фосфатазы (на 29 %), уровня общего билирубина (на 25 %), холестерина (на 21 %), триглицеридов (в 1,5 раза), липопротеидов низкой плотности (на 21 %), на фоне повышения липопротеидов высокой плотности (на 33 %), а также количества мочевины (на 23 %) и общего белка (на 12 %) в сравнении с животными, которым вводили туберкулостатики без лечения (контроль).

Наряду с этим показано, что использование изучаемого субституента позволяет значительно (в 3,4 раза) уменьшить длительность «тиопенталового» сна в сравнении с крысами контрольной серии, что свидетельствует о предупреждении ингибирования системы монооксигеназных ферментов печени. МИГУ-2 увеличивает объем желчи, которая экскретируется в условиях длительного поступления противотуберкулезных средств, а также значительно (на 40 %) и достоверно (Р<0,001) снижает процент задержки бромсульфалеина, что указывает на способность изучаемого соединения нормализовать экскреторную функцию печени.

Данными электро-парамагнитно-резонансной спектрометрии показана способность изучаемого германийорганического соединения предупреждать изменение уровня активных компонентов митохондриальной и микросомальной электронтранспортных цепей гепатоцитов у животных с токсическим медикаментозным гепатитом.

Гепатопротекторное действие МИГУ-2 проявляется также сохранением уровня высокоэнергетических фосфатных связей, устранением дисбаланса в системе адениловых нуклеотидов в эритроцитах крыс с токсическим гепатитом, а также модификацией активности ряда ферментов гликолиза, что реализуется нормализацией основных параметров энергообмена.

Фармакотерапевтическая активность МИГУ-2 реализуется его способностью корригировать активирующийся при воздействии изучаемых патогенных факторов анаэробный гликолиз, путем повышения уровня глюкозы и гликогена и снижения содержания лактата и пирувата, а также величины окислительно-восстановительного потенциала.

Установлено, что в условиях токсического гепатита, спровоцированного туберкулостатиками, происходит существенная модификация кинетики изучаемого германийорганического соединения, которая заключается в усилении процессов абсорбции и депонирования в тканях организма на фоне угнетения экскреторно-элиминационных процессов. Это дает все основания заключить, что МИГУ-2 обладает определенной тропностью к гепатоцитам и, задерживаясь в организме, максимально реализует свои фармакотерапевтические свойства в условиях изучаемой формы гепатотоксичности.

По данным морфометрических исследований лечебно-профилактическое применение координационного соединения германия с никотинамидом у крыс с токсическим медикаментозным гепатитом реализуется уменьшением застойных явлений и фиброза печени, а также предотвращением развития апоптоза и жировой инфильтрации в гепатоцитах, что, в конечном итоге, приводит к нормализации синтезирующей и детоксицирующей функции печени.

По всем установленным показателям гепатопротекторной активности МИГУ-2 не уступает, а в некоторых случаях и превосходит референтный препарат силибор.

Ключевые слова: координационное соединение германия с никотинамидом, токсический медикаментозный гепатит, противотуберкулезные средства, гепатопротекторные свойства.

Summary

Vnukova M.A. Pharmacotherapeutic efficiency of coordinative compound of germanium with nicotinamide in experimental drug-induced hepatitis. - The manuscript.

The dissertation for obtaining an academic degree of the kandidate of medical sciences in speciality 14.03.05. - pharmacology. - Odessa State Medical University of Ministry of Health of Ukraine, Odessa, 2008.