Лікувальні властивості ліпофлавону і корвітину при експериментальній гострій нирковій недостатності

Експериментальна робота присвячена вивченню впливу препаратів кверцетину: ліпосомального - ліпофлавону та водорозчинного - корвітину на функції нирок за умов фізіологічної норми та при експериментальній ГНН. Для дослідження нефропротекторних властивостей використовували різні моделі ГНН: міоглобінуричну (внутрішньом'язове введення 50% розчину гліцеролу у дозі 8 мл/кг маси тіла щурів), токсичну (підшкірне введення мишам етиленгліколю в дозі 10 мл/кг) та гентаміцинову нефропатію (внутрішньом'язове введення щурам гентаміцину сульфату в дозі 80 мг/кг один раз на добу протягом 6 днів). За умов різних моделей доведено, що препарати кверцетину (у дозі 8 мг/кг внутрішньоочеревинно за кверцетином) покращують функціональний стан нирок: нормалізують екскрецію креатиніну, підвищують ШКФ, зменшують протеїнурію. Введення препаратів упродовж 7 діб чинить більш виражену нефропротекторну дію. Препарати кверцетину сприяють нормалізації прооксидантно-антиоксидантної рівноваги, що виявляється у зменшенні утворення продуктів ПОЛ у нирках і плазмі крові. Тривале введення обох препаратів при ГНН зменшує утворення не тільки продуктів ПОЛ (дієнових кон'югатів, ТБК-активних продуктів), але й білків, активує антиоксидантні ферменти та нормалізує вміст неферментних антиоксидантів. Водночас корвітин і ліпофлавон відновлюють фібринолітичну та протеолітичну активність у тварин з ГНН. Досліджувані препарати значно збільшують виживаність тварин за нефротоксичної форми ГНН. Вони також відновлюють гістоструктуру нирок. Отримані результати обґрунтовують доцільність подальшого клінічного вивчення корвітину та ліпофлавону з метою застосування при ГНН .

Ключові слова: гостра ниркова недостатність, кверцетин, корвітин, ліпофлавон, міоглобінурія, гентаміцинова нефропатія, етиленгліколева інтоксикація, нефропротекція.

АННОТАЦИЯ

Горошко А.М. Лечебные свойства липофлавона и корвитина при экспериментальной острой почечной недостаточности. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 14.03.05 - фармакология. - Буковинский государственный медицинский университет МЗ Украины. - Черновцы, 2009.

Экспериментальная работа посвящена изучению влияния препаратов кверцетина: липосомального - липофлавона и водорастворимого - корвитина на функции почек в условиях физиологической нормы и при экспериментальной острой почечной недостаточности (ОПН).

Показано, что использование липофлавона и корвитина в дозе 8 мг/кг (по кверцетину), которые вводили крысам внутрибрюшинно в условиях физиологической нормы, улучшает экскреторную функцию почек, увеличивая скорость клубочковой фильтрации и диурез. При действии препаратов не изменяется ионорегулирующая и кислоторегулирующая функции почек.

Лечебное действие препаратов изучали на разных моделях ОПН: могло-бинурической (моделировали с помощью введения крысам 50 % раствора глицерола внутримышечно в дозе 8 мл/кг), гентамициновой (моделировали введением крысам гентамицина внутримышечно в дозе 80 мл/кг один раз в сутки в течение 6 дней) и токсической этиленгликолевой (этиленгликоль вводили мышам подкожно в дозе 10 мл/кг). Выявлено, что при экспериментальной ОПН значительно измененяются процессы свободнорадикального окисления и структурно-функционального состояния почек: наблюдались повышение содержания ТБК-активных продуктов и продуктов окислительной модификации белков с одновременным снижением активности глутатионпероксидазы, уменьшением концентрации в почках соединений, содержащих SH-группы, по сравнению с контролем. Нарушение экскреторной функции почек проявлялось в значительном снижении диуреза, торможении скорости клубочковой фильтрации, увеличении экскреции креатинина, появлении протеинурии. Применение препаратов кверцетина при глицероловой ОПН увеличивало диурез (на 12 ч - в 3,7 раза, на 24 ч - в 1,9 раза) и скорость клубочковой фильтрации (на 12 ч - в 1,8 раза, на 48 ч - в 2,4 раза, и 96 ч - в 2,3 раза), одновременно увеличилась экскреция креатинина, уменьшилась потеря белка с мочой. При этом продолжительное введение препаратов на протяжении 7 дней проявляло более выраженные нефропротекторные свойства. На фоне применения препаратов кверцетина на гентамициновой модели увеличивались скорость клубочковой фильтрации и диурез, уменьшалась концентрация креатинина в крови и моче, а также концентрация белка в моче.

Препараты кверцетина имеют полимодальные фармакологические свойства, в том числе антиоксидантные, в результате чего нормализуют прооксидантно-антиоксидантное равновесие в организме крыс. При одноразовом введении препаратов уменьшалась интенсивность свободнорадикального окисления (снижалось содержания ТБК-активных продуктов и диеновых конъюгатов). Также введение корвитина и липофлавона нормализовали показатели антиоксидантной защиты (увеличивались активность каталазы, глутатионпероксидазы, повышался уровень соединений, содержащих SH-группы). Оба препарата изменяли концентрацию антиоксиданта церулоплазмина в плазме крови, которая спустя 96 часов эксперимента приближались к показателям контроля. Продолжительное использование двух препаратов кверцетина при ОПН уменьшало образование продуктов перекисного окисления липидов и белков с одновременным увеличением акивности антиоксидантных ферментов и неферментных антиоксидантов до показателей контроля. При гентамициновой нефропатии препараты кверцетина уменьшали содержание продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах и в тканях почек, однако не влияли на содержание окислительно-модифицированых белков.

Также востанавливалась антиоксидантная защита, что выражалось в уменьшении активности каталазы, количества церулоплазмина и увеличении содержания SH-групп. В то же время корвитин и липофлавон востанавливали фибринолитический потенциал и протеолитическую активность в организме крыс при ОПН. Препараты кверцетина увеличивали продолжительность жизни мышей при нефротоксической (этиленгликолевой) ОПН. Оба препарата кверцетина восстанавливали нормальную гистологическую структуру почек у животных с миоглобинурической ОПН и гентамициновой нефропатией.

Полученные результаты дают основание для расширения применения корвитина и липофлавона с учетом их нефропротекторных свойств для дальнейшего изучения и использования в лечении ОПН.

Ключевые слова: острая почечная недостаточность, кверцетин, корвитин, липофлавон, миоглобинурия, гентамициновая нефропатия, этиленгликолевая интоксикация, нефропротекция.

ANNOTATION

Goroshko O.M. The therapeutic properties of lipoflavоn and corvitin is case of experimental acute renal failure. Manuscript.

The thesis for obtaining the academic degree of a Candidate of Pharmaceutical sciences in speciality 14.03.05 - Pharmacology Bukovinion State Medical University. Ministry of Public Health of Ukraine, Chernivtsi, 2009.

The experimental part of the research deals with a study of the effect of quercetin drugs: liposomal - lipoflavon and water-soluble - corvitin on the renal functions both under the conditions of the physiological norm, as well as in experimental acute renal failure. In order to study the nephroprotective properties of the preparations different models of acute renal failure (ARF) were used: myoglobinuric (an i.m. injection of a 50% glycerol solution in a dose of 8 ml/kg of the body weight of rats), gentamycin (an i.m. injection to rats of gentamycin sulphate in a dose of 80 mg/kg, once a day over a period of 6 days) and toxic (a subcutanevus introduction of ethylenglycol in a dose of 10 ml/kg). Under the conditions of ARF of different models it has been corroborated that quercetin preparations (intraperitoneally in a dose of 8 mg/kg accounted for quercetin) improve the functional renal activity with a normalization of the excretion of creatinine, an elevation of the glomerular filtration rate, decreased proteinuria. A prolonged introduction of preparations during 7 days manifests more marked nephroprotection properties at that. The quercetin preparations, having polymodal pharmacological effects and a powerful antioxidant activity, due to normalization of prooxidant-antioxidant balance in the organism of rats that manifest themselves in a decrease of the formation of lipid peroxidation products both in the renal tissue and blood plasma. A prolonged introduction of both medications of quercetin in case of acute renal insufficiency diminishes the formation of not only the products of lipid peroxidation (diene conjugates, thiobarbituric acid reactive substance) but proteins with a simultaneous elevation of the activity of antioxidant enzymes and levels of nonenzymatic antioxidants in the majority of cases to the level of the control group. At the same time, corvitin and lipoflavon activate the tissue fibrinolytic and proteolytic activity and also contribute to the restoration of the fibrinolytic potential and the proteolytic activity in the organism of animals with acute renal failure. The above mentioned agents increase considerably the survival of animals in case of the nephrotoxic form of ARF and restore the histological structure of the renal tissues. The obtained findings substantiate the expediency of further clinical study of corvitin and lipoflavon for the purpose of using while treating acute renal failure.

Keywords: acute renal failure, quercetin, lipoflavоn, corvitin, myoglobinuria, gentamycin-induced nephropathy, ethylene glycol intoxication, nephroprotection.

СПИСОК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ

ГНН -- гостра ниркова недостатність

ПОЛ -- пероксидне окиснення ліпідів

ШКФ -- швидкість клубочкової фільтрації

ДК -- дієнові кон'югати

ОМБ -- окиснювальна модифікація білків

ГП -- глутатіонпероксидаза

ЦП -- церулоплазмін

ТdNa+ -- дистальний транспорт іонів натрію

ТрNa+ -- реабсорбція іонів натрію в проксимальному відділі нефрону

СФА -- сумарна фібринолітична активність

ЛЗ -- лізис азоальбуміну

Размещено на Allbest.ur