Дослідження фармакологічних властивостей та експериментальне обґрунтування простатопротекторної дії екстракту з листя хмелю звичайного

Размещено на http://www.allbest.ru/

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ ХАРКІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

14.03.05 - фармакологія

УДК 615.035.4:615.25:582.635.38

АВТОРЕФЕРАТ

дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук

Дослідження фармакологічних властивостей та експериментальне обгрунтування простатопротекторної дії екстракту з листя хмелю звичайного

ЄФРЕМЕНКО ЕДУАРД

АНАТОЛІЙОВИЧ

Харків 2011

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана на кафедрі біології, фізіології та анатомії людини Національного фармацевтичного університету Міністерства охорони здоров'я України, м. Харків.

Науковий керівник:

доктор медичних наук, професор Гладченко Олег Михайлович, Національний фармацевтичний університет МОЗ України, м. Харків, професор кафедри біології, фізіології та анатомії людини

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор Штриголь Сергій Юрійович, Національний фармацевтичний університет МОЗ України, м. Харків, професор кафедри технології ліків та клінічної фармакології з фармацевтичною опікою ІПКСФ (інститут підвищення кваліфікації спеціалістів фармації) доктор медичних наук, професор Костенко Віталій Олександрович, Українська медична стоматологічна академія, м. Полтава, завідувач кафедри патофізіології

Захист відбудеться "14" квітня 2011 року о 13.00 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради К 64.600.05 в Українському інституті клінічної генетики Харківського національного медичного університету МОЗ України за адресою: 61022, м. Харків, проспект Правди 13.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Харківського національного медичного університету МОЗ України.

61022 м. Харків, пр. Леніна 4.

Автореферат розісланий "10" березня 2011 року.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради Л.С. Озерова

1. ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Сучасний стан захворюваності в Україні відображає досить чітку тенденцію до «омолодження» більшості хвороб. Зокрема, за останніми даними захворюваність на простатит, доброякісну гіперплазію передміхурової залози (ДГПЗ) та рак передміхурової залози (ПЗ) значно виросла серед чоловічого населення середнього та молодого віку.

На простатит хворіють чоловіки молодого та середнього віку (від 20 до 50%). Після 45 років кількість хворих зростає до 70-75 %, а після 60 - сягає 80-85 % (Горпинченко И.И., 2005). Підвищується рівень захворюваності на простатит серед чоловіків репродуктивного віку, тобто серед найбільш працездатного населення країни. Цей факт підтверджує медичне та соціальне значення проблеми лікування простатиту (Гурженко Ю.М., 2005).

У зв'язку із тенденцією до підвищення питомої ваги людей похилого віку в Україні кількість пацієнтів із ДГПЗ буде зростати. Епідеміологічні дані свідчать, що гістологічні ознаки ДГПЗ наявні у 50% чоловіків у віці від 50 до 60 років і у 88% чоловіків у віці від 70 до 80 років (Gomez et al., 2000).

На вітчизняному фармацевтичному ринку провідне місце займають препарати закордонних виробників, серед яких переважають фірми Західної Європи. Такі препарати мають хорошу клінічну ефективність. Але їхня ціна досить висока, надходження на вітчизняний фармацевтичний ринок ускладнене в умовах кризових явищ, що склалися у світі, в тому числі в Україні. Разом з тим альтернативних вітчизняних препаратів недостатньо, тому існує гостра потреба в них.

Лікарські засоби рослинного походження для лікування простатитів виявляють комплексну дію і мають значно менше побічних реакцій у порівнянні з препаратами синтетичного походження (Мазо Е.Б., 2004). Зростання чисельності хворих та високий ризик розвитку небезпечних ускладнень зумовлюють важливість і актуальність питання розробки та створення нових ефективних протизапальних та репаративних засобів на основі лікарської рослинної сировини для їх лікування, що робить доцільним пошук та створення лікарського препарату з рослинної сировини, який би дозволив рішити цю проблему.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Робота виконана у рамках науково-дослідної програми Національного фармацевтичного університету з проблеми МОЗ України “Фармакологічне дослідження біологічно активних речовин та лікарських засобів синтетичного та рослинного походження та їх застосування в медичній практиці (№ Державної реєстрації 0103U000478).

Мета та завдання роботи. Мета роботи -вивчення фармакологічних властивостей водного екстракту з листя хмелю звичайного (ЕЛХ) та експериментальне обґрунтування його застосування в якості простатопротектора при лікуванні запальних захворювань передміхурової залози.

Для досягнення поставленої мети необхідно було вирішити такі завдання:

1. Провести скринінгові дослідження протизапальної активності та визначити умовно ефективну дозу ЕЛХ на моделі карагенінового набряку.

2. Дослідити протизапальну дію ЕЛХ на різних моделях запалення.

3. Провести дослідження репаративної активності ЕЛХ.

4. З'ясувати спектр фармакологічної активності ЕЛХ - анальгезувальні, антиоксидантні, антицитолітичні, мембранопротекторні, спазмолітичні, антимікробні властивості, вплив на видільну функцію нирок.

5. Визначити можливий вплив ЕЛХ на рівень статевих гормонів.

6. Дослідити простатопротекторну активність ЕЛХ на експериментальних моделях простатиту та доброякісної гіперплазії передміхурової залози.

7. Вивчити гостру токсичність та можливу місцевоподразнювальну дію водного екстракту з листя хмелю.

Об`єкт дослідження - пошук нових простатопротекторів із рослинної сировини.

Предмет дослідження - фармакологічні властивості субстанції водного екстракту з листя хмелю звичайного.

Методи дослідження. Фармакологічні, біохімічні, гістологічні, гематологічні, мікробіологічні, токсикологічні, статистичні.

Наукова новизна одержаних результатів. Вперше проведений комплекс фармакологічних досліджень водного ЕЛХ дозволив експериментально встановити значну протизапальну, репаративну, анальгезувальну, мембраностабілізувальну, антиоксидантну, антимікробну, спазмолітичну та антиандрогенну властивості. Встановлено, що досліджуваний екстракт виявляє виразну лікувальну дію в умовах експериментальних простатитів, підтверджену даними фармакологічних, мікробіологічних і біохімічних досліджень, що обгрунтовує доцільність створення на основі водного ЕЛХ лікарського засобу для лікування простатитів.

Наукова новизна роботи підтверджена патентом на винахід № 85926 від 10.03.2009 «Спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин з протизапальною та репаративною активністю».

Практичне значення одержаних результатів. Експериментально встановлено доцільність створення нового засобу на основі ЕЛХ для профілактики та лікування простатитів та ДГПЗ.

Матеріали досліджень впроваджені в науково-педагогічний процес у навчальних закладах: на кафедрі фармакології Житомирського базового фармацевтичного коледжу ім. Протасевича Г.С., кафедрі фармакології Харківської зооветеринарної академії, кафедрі біохімії Національного фармацевтичного університету, кафедрі урології Харківської медичної академії післядипломної освіти, кафедрі фармакології Луганського державного медичного університету.

Особистий внесок здобувача. Автором самостійно проведено патентно-інформаційний пошук, аналіз і узагальнення літературних даних з досліджуваної проблеми. Разом із керівником визначена мета та поставлені завдання дослідження, сформульовані висновки дисертаційної роботи. Самостійно проведені експериментальні дослідження, статистична обробка отриманих результатів та їх узагальнення.

Апробація результатів дисертації. Матеріали роботи викладалися та обговорювалися: на Міжнародній науково-практичній конференції «Створення, виробництво, стандартизація, фармакоекономічні дослідження лікарських засобів та біологічно активних добавок» (м. Харків, 2006); Всеукраїнській науково-практичній конференції студентів та молодих вчених (м. Харків, 2007); міжнародній науково-практичній конференції «Здобутки клінічної і експериментальної медицини» (м. Тернопіль, 2007); Всеукраїнській науково-практичній конференції студентів та молодих вчених «Актуальні питання створення нових лікарських засобів» (м. Харків, 2010); VІІ Національному з'їзді фармацевтів України (м. Харків, 2010).

Публікації. За темою дисертації опубліковано 11 наукових праць, з них 3 статті у фахових наукових виданнях затверджених ВАК України, 8 тез доповідей, 1 патент.

Структура та обсяг дисертації. Дисертація складається зі вступу, огляду літератури, опису матеріалів та методів дослідження, 3-х розділів власних досліджень, аналізу та узагальнення результатів, висновків та переліку використаних джерел. Робота викладена на 179 сторінках друкованого тексту, враховуючи 19 рисунків, 26 таблиць. В роботі використано 285 літературних джерел, з них 181 - кириличною та 104 - латинською графікою.

2. ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Методи дослідження. Вивчено субстанцію водного ЕЛХ звичайного, котра була одержана на кафедрі фармакогнозії НФаУ (м. Харків ) під керівництвом проф. Ковальова В.М. Субстанція виділена з листя хмелю звичайного шляхом екстракції гарячою водою з наступним упарюванням та сушінням.

До складу субстанції входить комплекс біологічно активних речовин: флавоноїди (1,95%), екстрактивні сполуки (29,38%), поліфенольні сполуки, гідроксикоричні кислоти (4,60%), дубильні речовини (1,98%), гумолові кислоти, а також вітаміни ( Ковальов В.М., 2007).

Експериментальні дослідження проводили в лабораторії морфо-функціональних досліджень при кафедрі біології, фізіології та анатомії людини НФаУ, яка сертифікована НААУ (атестат № 2Н502, 2006 р.) та ЦНДЛ НФаУ. Експерименти були проведені у відповідності до вимог комісії з біоетики НФаУ та „Загальних етичних принципів експериментів на тваринах” (Україна, 2001), що узгоджуються з положеннями „Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментальних та інших наукових цілей” (Страсбург, 1985).

В дослідах використовувались експериментальні моделі згідно методичних рекомендацій ("Доклінічні дослідження лікарських засобів" за ред. Стефанова О.В., 2001), а саме: карагенінового, формалінового та зимозанового набряку; асептичного запалення шкіри; лінійних різаних ран; ватної гранульоми; оцтовокислих "корчів"; тетрахлорметанового гепатиту (з визначенням масового коефіціенту печінки, активності АлАТ та пероксидного окиснення ліпідів) та вивчення місцевоподразнювальної дії. Також досліди проводились на моделі хлоретилового простатиту (Ларьяновская Ю.Б., 1999), на моделі ДГПЗ, викликаної введенням тестостерону пропіонату (Дроговоз С.М., 2005).

Визначали вміст статевих гормонів (тестостерону та естрадіолу) в сироватці крові радіоімунологічними методами з використанням наборів РІА-ТЕСТОСТЕРОН-ПР та РІА-ЕСТРАДІОЛ-ПР виробництва ІБОХ АН Республіки Білорусь. Дані дослідження виконувались на базі ТОВ "Б.А.Т." (Біо Аналітичні Технології). Вивчалась мембраностабілізувальна активність ЕЛХ на моделі спонтанного гемолізу (Jager F.C., 1979); спазмолітична активність на моделі спазму сечовивідних шляхів, викликаного хлоридом барію (Коваленко Е.Ю., 2007); антиоксидантна активність за впливом на вміст продуктів, активних відносно тіобарбітурової кислоти (ТБК-АП), та відновленного глутатіону (ВГ) в гомогенатах ПЗ та печінки (Стальная И.Д., 1977); гостра токсичність (Пастушенко Г.В., 1995). Досліджено протимікробну активність методом "колодязів" (Spocner D.F., 1985).

Морфологічні дослідження ПЗ здійснено у відділені патоморфології (завідуючий А.А.Радченко) ДУ «Інститут медичної радіології ім. С.П.Григор'єва АМН України» стандартними методами світлової мікроскопії (забарвлення гематоксиліном і еозином, мікроскоп «БИМАМ Р-11», з'єднаний з відеосистемою «АЗИМУТ ЭНДОКАМ-450»).

Досліджуваний екстракт вводили внутрішньошлунково у вигляді водного розчину один раз на добу. На етапі проведення скринінгових досліджень ЕЛХ вводили в дозах: 1; 5; 10; 20; 30 мг/кг, надалі в умовно терапевтичній дозі 5 мг/кг.

Препаратами порівняння були обрані: «Диклофенак натрію» (ХДФП «Здоров'я народу», м. Харків) як класичний інгібітор ЦОГ, який вводили внутрішньошлунково в ефективній дозі 8 мг/кг (для щурів) і 3,8 мг/кг (для мишей), протизапальний препарат рослинного походження - «Альтан» (НВЦ «Борщагівський ХФЗ, м. Київ»), який вводили внутрішньошлунково в ефективній дозі 1 мг/кг, «Силібор» (ФК «Здоров'я», м. Харків), як стандартний гепатопротектор, який вводили внутрішньошлунково в ефективній дозі 25 мг/кг та «Пепонен» ("TEVA Pharmaceutical Works Co. Ltd", Угорщина /Ізраїль), як стандартний простатопротекторний препарат рослинного походження, який вводили внутрішньошлунково в ефективній дозі 10,8 мг/кг.

Досліди виконано на 330 безпородних білих щурах масою 150-220 г, 164 білих мишах масою 20-30 г та 15 мурчаках масою 300-330 г. Тварин утримували в стандартних умовах на збалансованому харчуванні у віварії ЦНДЛ НФаУ, обладнаному відповідно до санітарних норм.

При застосуванні методів математичної статистики був прийнятий рівень значущості р<0,05. Для статистичної обробки при порівнянні вибірок відносних перемінних, якщо однофакторний дисперсійний аналіз (або критерій Крускала-Уоліса для даних, які не підлягають нормальному закону розподілу) виявив відмінності між експериментальними групами, використовували критерії Ньюмана-Кейлса, для множинних порівнянь - критерій Манна-Уітні. Взаємозв'язок синхронних змін вмісту статевих гормонів оцінювали за коефіцієнтом кореляції Спірмена. Для проведення математичних розрахунків застосовували стандартний пакет статистичних програм Statistica 6.0 (Реброва О.Ю., 2006).

Дослідження фармакологічних властивостей ЕЛХ. На початковому етапі роботи проведені скринінгові дослідження протизапальної активності ЕЛХ в діапазоні доз від 1 до 30 мг/кг на моделі карагенінового набряку. Результати зміни об'єму набряклої лапи в умовних одиницях (уо) наведено на рис.1.

Рис.1. Вплив ЕЛХ на динаміку ексудативної фази запалення на моделі карагенінового набряку у щурів (зміни об'єму набряклої лапи, уо) (n=8)

Примітки:

1. * - відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05;

2. ** - відхилення вірогідне відносно диклофенаку натрію, р<0,05.

ЕЛХ в дозах від 5 до 20 мг/кг забезпечує однаково виражений та співставлюваний з дією альтану за силою протизапальний ефект. В зазначених дозах досліджуваний екстракт виявляє найвиразнішу протизапальну дію, але поступається препарату порівняння диклофенаку натрію. Очевидно, що для подальшого дослідження найдоцільнішим є застосування ЕЛХ в найменшій із зазначених ефективних доз, тому доза 5 мг/кг була визначена як умовно ефективна.

Формалін викликає деструкцію мембранних білків. Використання його в якості флогогену дало змогу поширити уявлення щодо антиексудативної дії ЕЛХ. Отримані результати підтвердили значний вплив ЕЛХ на ексудативну фазу запалення та спроможність досліджуваного засобу стабілізувати мембрани клітин. Так, активність ЕЛХ в дозі 5 мг/кг склала 43,66% порівняно з групою контрольної патології. За вираженістю антиексудативної дії в умовах формалінового набряку ЕЛХ не поступається референс-препаратам альтану (38,21%) та диклофенаку натрію (51,71%).

ЕЛХ у дозі 5 мг/кг виявив антиексудативну активність на моделі зимозанового набряку стопи щурів, оскільки зменшував вираженість набряку через 30 хв. після введення 2% суспензії зимозану на 47,09%. Враховуючи, що на ранніх етапах зимозанового запалення ключову роль відіграє активація ліпоксигенази та утворення лейкотриєнів, можна припустити здатність ЕЛХ інгібувати ці процеси.

Антиальтеративну активність досліджено на моделі асептичного запалення шкіри та підшкірної клітковини в щурів.

У тварин, яким вводили ЕЛХ та препарат порівняння альтан, швидкість загоєння ран була значно більша, ніж у групі контролю. Так, на 7 день лікування швидкість загоєння ран у тварин під впливом ЕЛХ та альтану становила відповідно 1,98 та 1,32, проти 0,37 у тварин групи контролю. На 11 день цей показник складав 8,4 та 6,27 проти 1,06 уо. На 19 день лікування спостерігали повне загоєння дефектів у всіх тварин, яким вводили ЕЛХ, тимчасом як у тварин, яким вводили альтан, повне загоєння ран спостерігали на 21 день. В останній термін експерименту загоєння ран та утворення повноцінного рубця відбувалося лише у 25% щурів групи контролю. Отримані результати дослідження свідчать про виражену антиальтеративну активність, що її виявляє ЕЛХ у дозі 5 мг/кг, та перевагу над препаратом порівняння альтаном у дозі 1мг/кг.

Отримані дані впливу ЕЛХ на проліферативну фазу запалення свідчать про наявність у нього антипроліферативної дії. Встановлено, що ЕЛХ в дозі 5 мг/кг виявляє помірний антипроліферативний ефект: знижує утворення фіброзно-грануляційної тканини на 35,89%, а референс-препарат альтан у дозі 1 мг/кг - на 37,22% відносно тварин групи контролю.

На моделі оцтовокислих «корчів» встановлено, що за знеболювальною активністю ЕЛХ перевершував препарат порівняння альтан у 1,96 раза і не поступався диклофенаку натрію (рис. 2).

Це можна пояснити впливом даного екстракту на периферичні механізми формування болю, котрі пов'язані з інгібуванням ендогенних медіаторів ноцицепції: серотоніну, гістаміну, брадикініну, простагландинів в осередку запалення та зменшенням ексудативного компоненту.

Рис.2. Вплив ЕЛХ на перебіг больового синдрому в мишей на моделі оцтовокислих корчів ( n=6)

Примітки:

1.* - відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05;

2.** - відхилення вірогідне відносно диклофенаку натрію, р<0,05.

При вивченні репаративної активності спостерігалось достовірне зростання рівня загального білка в сироватці крові, збільшення рівня РНК та ДНК у гомогенаті шкіри ураженої ділянки рани на тлі ЕЛХ та препарата порівняння альтану. Зростання вмісту ДНК та РНК у тканинах при введенні ЕЛХ було більшим, ніж при застосуванні альтану, що свідчить про значну (майже в 4 рази) перевагу ЕЛХ над препаратом порівняння.

Виражені репаративні властивості ЕЛХ підтверджено за показниками ранотензіометрії: репаративна активність ЕЛХ у дозі 5 мг/кг становила 77,33% і перевищувала майже в 2 рази таку препарата порівняння альтану в дозі 1 мг/кг, активність якого склала 39,54 %. А міцність рубця при лікуванні дослідних тварин ЕЛХ була в 1,8 раза більшою (р<0,05), ніж при лікуванні експериментальних тварин альтаном.

Провідним механізмом ураження тканин та органів на клітинному рівні при наявності патологічного процесу є ушкодження мембран різних рівнів організації внаслідок активації процесів ПОЛ. Антиоксидантні властивості ЕЛХ вивчали на моделі експериментального тетрахлорметанового гепатиту в щурів у порівнянні з гепатопротектором рослинного походження силібором у дозі 25 мг/кг.

В групі контролю спостерігалось значне порівняно з інтактним контролем зростання вмісту ТБК-АП до 109,4 мкмоль/л у тканині печінки щурів. Активація ПОЛ призводить до виснаження фонду відновленого глютатіону (ВГ), що є складовою антиоксидантної системи: рівень в тканині печінки вірогідно знижувався в порівнянні з інтактними тваринами. Порушення цілісності мембран гепатоцитів викликає цитолітичний синдром, про що свідчить збільшення активності маркерного ферменту цитолізу АлАТ у сироватці крові щурів групи контролю до 2,37 проти 0,74 ммоль/год•л у інтактних тварин.

Під впливом ЕЛХ динаміка показників ПОЛ та АОС була спрямована на відновлення їх вихідного рівня і подібна до змін, що розвивалися на тлі препарату порівняння силібору. ЕЛХ зменшував вміст продуктів ПОЛ: ТБК-АП та ДК відповідно на 28% та 27%. Урегулювання дисбалансу ПОЛ-АОС супроводжувалося гальмуванням цитолітичного синдрому, на що вказує зниження активності АлАТ на 31,6%. Силібор викликав подібні зміни про- та антиоксидантного балансу та зменшував гіпертрансаміназемію.

Отримані результати дозволяють вважати, що за протизапальними, знеболювальними, мембраностабілізувальними властивостями ЕЛХ здатний забезпечити позитивний вплив на перебіг ХП та ДГПЗ. Тому наступним етапом роботи стало вивчення специфічної фармакологічної активності ЕЛХ в умовах експериментального простатиту та вплив досліджуваного екстракту на перебіг експериментальної моделі ДГПЗ у щурів.

Простатопротекторна дія ЕЛХ на тлі хлоретилового ураження ПЗ. Після холодової травми ПЗ, викликаної хлоретилом, у тварин розвивався значний запальний процес, про що свідчать зміни показників крові. У щурів групи контролю вірогідно збільшилась кількість лейкоцитів у 2,3 раза в порівнянні з псевдооперованою групою, ШОЕ - в 3,7 раза. Достовірно зменшилась кількість еритроцитів у 1,44 раза та рівня гемоглобіну - в 1,24 раза. екстракт хміль гіперплазія передміхуровий

В щурів, яких лікували ЕЛХ, спостерігалось значне покращення показників крові в порівнянні з групою контролю. Повністю нормалізувались ШОЕ (до 2,9 мм/год.), кількість лейкоцитів (до 9,2 109/л), еритроцитів (до 8,4 1012/л ) та гемоглобіну (158 г/л). Під дією ЕЛХ ШОЕ зменшилась на 71%, кількість лейкоцитів - на 57%, а вміст еритроцитів збільшився в 1,5 рази, гемоглобіну - на 28%.

Також встановлено, що референс-препарат пепонен має терапевтичну дію, але вона виражена менше, ніж у ЕЛХ. Під дією пепонену ШОЕ зменшилась на 47%, рівень лейкоцитів - на 52%, кількість еритроцитів зросла на 43%, гемоглобіну - на 17% (рис. 3).

Кріотравма викликала не тільки простатит, але й запалення сечовивідних шляхів, про що свідчили показники сечі щурів. У мазку сечі щурів групи контролю лейкоцити повністю заповнювали поле зору (до 65), були наявні епітеліальні клітини та еритроцити у великій кількості (до 30 в полі зору).

Рис.3. Вплив ЕЛХ та пепонену на показники периферичної крові щурів з експериментальним хлоретиловим простатитом (n = 7)

Примітки:

1. *- відхилення вірогідне відносно псевдооперованих тварин, р<0,05;

2. ** - відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05;

3. *** - відхилення вірогідне відносно референс-препарату, р<0,05.

Сеча мала лужну реакцію (7,34) у порівнянні з псевдооперованими тваринами (6,26), в осаді сечі у великій кількості були присутні кристали аморфних фосфатів і трипельфосфатів (рис. 4).

Рис.4. Вплив ЕЛХ та пепонену на показники сечі щурів з експериментальним хлоретиловим простатитом (n = 7)

Примітки:

1. *- відхилення вірогідне відносно псевдооперованих тварин, р<0,05;

2. **- відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05;

3. ***- відхилення вірогідне відносно референс-препарату, р<0,05.

Як видно з рис. 4, у щурів на тлі ЕЛХ добовий діурез збільшився на 56%, відносно контролю, еритроцити в сечі були в нормі (до 1,5 в полі зору), епітеліальні клітини зустрічались не більше 1-2 у полі зору або були відсутні, сеча мала слабку кислу реакцію (5,87).

На відміну від лікованих ЕЛХ тварин, у мазку сечі щурів, які отримували пепонен, кількість лейкоцитів у полі зору складала в середньому 25,2 (9,4 в досліді з ЕЛХ), були присутні еритроцити (3,7 в полі зору, що в 2,5 рази більше ніж у лікованих ЕЛХ) та епітеліальні клітини у значній кількості. Добовий діурез теж збільшувався, але поступався досліджуваному екстракту в 2 рази.

Макро- та мікроскопічне дослідження ПЗ також підтвердили простатопротекторну дію ЕЛХ та пепонену. Так, у тварин із простатитом, яких лікували ЕЛХ, як і в групі псевдооперованих щурів стінка черевної порожнини була блідо-рожевого кольору, сечовий міхур помірний за розміром, містив сечу блідо-рожевого кольору. Стінки сечового міхура були ущільнені лише у 29% щурів. Консистенція залозистої тканини ПЗ помірно пружно-еластична, колір на розрізі сірувато-рожевий, у декількох місцях спостерігаються ущільнення. Сім'яні пухирці нормальні, з гофрованим контуром; яєчка, жирова клітковина та судини візуально не змінені. У 70% тварин, яких лікували пепоненом, спостерігалась подібна макроскопічна картина, що і в щурів, які отримували ЕЛХ.

Лікувально-профілактичне введення ЕЛХ сприяє позитивній динаміці стану ПЗ щурів, які зазнали кріотравми. При мікроскопії у зоні безпосереднього кріовпливу у вентральній частині ПЗ більша частина секреторних одиниць збережена. Частково в деяких з них епітелій десквамований або дистрофічно змінений, але в цілому він достатньо функціонуючий. Ацинуси варіюють за розміром, але при цьому епітелій, що їх вистеляє, залишається високим кубічним з вираженою перинуклеарною світлою зоною.

Значно знижена запальна та судинна реакція в слизовій та м'язовій оболонках сечового міхура та сім'явивідної протоки. Перехідний епітелій практично не змінений.

Препарат порівняння пепонен також захищав ПЗ від кріотравми, але його дія була дещо менше виражена, ніж ЕЛХ (у капсулі залози тільки місцями відзначались осередки запалення).

Таким чином, порівняльний аналіз морфоструктури ПЗ щурів після кріотравми та при лікуванні ЕЛХ та пепоненом, дає підставу для висновку, що ЕЛХ сприяє позитивній динаміці стану ПЗ щурів: знижує запальні явища як у самій залозі, так і в анатомічно суміжних органах (сечовий міхур, сім'явивідна протока), підвищує резистентність секреторних одиниць. Препарат порівняння пепонен теж володіє простатопротекторною дією, але менше впливає на патологічний процес у ПЗ щурів, ніж ЕЛХ.

Простатопротекторна активність ЕЛХ при ДГПЗ. Введення тестостерону пропіонату протягом 21 дня викликає збільшення маси ПЗ щурів групи контролю на 73,9% порівняно з інтактними тваринами (р<0,05). Маса ПЗ щурів, які отримували ЕЛХ, була на 31,7% менша, ніж у групі контролю(p<0,05). У групі тварин, що отримували препарат порівняння пепонен, маса ПЗ була на 24% менша, ніж у групі контролю, що статистично достовірно (р<0,05).

Рис. 5 свідчить, що у щурів, яким вводили тільки тестостерон, об'єм ПЗ складав 0,43±0,04 см3, що на 48,2% більше, ніж у інтактних тварин (0,29±0,03 см3). У тварин, яких лікували ЕЛХ, об'єм ПЗ був на 34,9% менший у порівнянні з групою контролю(р<0,05).

Рис.5. Маса та об'єм ПЗ щурів під впливом ЕЛХ та пепонену на моделі ДГПЗ (n=10)

Примітки:

1. *- відхилення вірогідне відносно інтактних тварин, p<0,05;

2. ** - відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05.

ЕЛХ виявляє здатність зменшувати масу та об'єм гіперплазованої простати, що може бути розцінено як його вплив на статичний компонент ДГПЗ.

Позитивний вплив ЕЛХ на перебіг ДГПЗ підтверджувався також змінами аналізів крові й сечі у дослідних тварин. Референс-препарат пепонен має терапевтичну дію (покращення показників крові), але вона виражена менше, ніж у ЕЛХ. Під дією ЕЛХ ШОЕ зменшилась на 63% (на тлі пепонену - на 43%) кількість лейкоцитів - на 49,7%, (на тлі пепонену - на 44,8%), а кількість еритроцитів збільшилась на 46%, (на тлі пепонену - на 32,8%), рівень гемоглобіну - на 25% (на тлі пепонену - на 16%).

ДГПЗ викликає не тільки зміни в ПЗ, але й запалення сечовивідних шляхів, про що свідчать показники сечі щурів. У тварин з контрольної групи відмічено зниження добового діурезу на 24%, лейкоцити та еритроцити повністю заповнювали поле зору (відповідно 16 та 28 в препараті), наявні епітеліальні клітини. У щурів, яких лікували пепоненом (на відміну від лікованих ЕЛХ), кількість лейкоцитів у полі зору складала 3 - 5 (0-2 в досліді з ЕЛХ), у двох мазках були присутні еритроцити та епітеліальні клітини у значній кількості, добовий діурез теж збільшувався (на 32%), але поступався досліджуваному екстракту листя хмелю (48%).

Визначено рівень ТБК-АП та ВГ в гомогенаті ПЗ щурів. У тварин з ДГПЗ рівень ТБК-АП на 77% вище, ніж у інтактних тварин (р<0,05), а вміст ВГ знизився на 45%) (p<0,05), що підтверджує важливу роль оксидативного стресу в патогенезі ДГПЗ. На тлі ЕЛХ вміст ТБК-АП та ВГ становив відповідно 1,7±0,10 ммоль/мг та 0,88±0,03 мкмоль/г, що на 35% (ТБК) нижче та 32% (ВГ) вище в порівнянні з контролем (р<0,05). У групі тварин, які отримували пепонен, відхилення показників складало 15% (ТБК) та 11% (ВГ) в порівнянні з контролем (р<0,05) (рис. 6).



Рис.6. Рівень ТБК-АП та ВГ в гомогенаті ПЗ щурів із ДГПЗ під впливом ЕЛХ та пепонену (n=10)

Примітки:

1. *- відхилення вірогідне відносно інтактних щурів, р<0,05;

2. ** - відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05;

3. ***- відхилення вірогідне відносно референс-препарату, р<0,05.

Отже, ЕЛХ виявляє антиоксидантну дію та може попереджати гіперплазію ПЗ, що особливо важливо для перспективного простатопротектора.

Стромальна гіперплазія ПЗ має гормонозалежний характер (Лопаткин Н.А., 2003). Тому в дослідних тварин визначили рівні тестостерону, естрадіолу, співвідношення естрадіол/тестостерон крові (рис. 7). Після тритижневого введення тестостерону пропіонату в групі контролю і в щурів, що отримували ЕЛХ та пепонен, його рівень змінився несуттєво: у середньому відповідно 3,76±0,4, 4,58±0,08, 4,00±0,3 мкг/л, тимчасом як в інтактних тварин він склав 3,9±0,3 мкг/л (р>0,05). Проте рівень естрадіолу в тварин з ДГПЗ був на 33% вище, ніж в інтактних тварин (р<0,05). В групі тварин, яким вводили ЕЛХ, рівень естрадіолу на 32% (р<0,05) нижчий у порівнянні з групою контролю. Вміст естрадіолу в групі тварин, що отримали пепонен, складав 0,22±0,02 мкг/л і не відрізнявся від такого в групі контролю. Це вказує на високу простатопротекторну ефективність ЕЛХ, бо ДГПЗ є гормонозалежною доброякісною пухлиною, гіперплазія якої корелює з високим рівнем естрадіолу (Аромире О. К., 2001).



Рис.7. Рівень естрадіолу та співвідношення естрадіол/тестостерон (Е/Т) у щурів з ДГПЗ, під впливом ЕЛХ та пепонену

Примітки:

1. *- відхилення вірогідне відносно інтактних щурів, р<0,05;

2. **- відхилення вірогідне відносно контролю, р<0,05;

3. ***- відхилення вірогідне відносно референс-препарату, р<0,05.

Збільшення співвідношення між естрадіолом і тестостероном сприяє стромальній гіперплазії ПЗ. У тварин, що отримували ЕЛХ, це співвідношення знизилось на 42,6%, що статистично достовірно (р<0,05) в порівнянні з контролем. У щурів, що отримували пепонен, співвідношення естрадіол/тестостерон знизилось лише на 9,8%. Кореляційний аналіз взаємозв'язку рівня тестостерону та естрадіолу в дослідних групах виявив слабкий від'ємний зв'язок в інтактних тварин (с = ?0,48), сильний від'ємний зв'язок у групі контролю (с = ?0,75) та від'ємний зв'язок середньої сили в групах лікованих тварин: с = ?0,67 під впливом ЕЛХ, с = ?0,61 на тлі пепонену. Ці зміни вказують на посилення спряженості обміну статевих гормонів під дією екзогенного тестостерону при моделюванні ДГПЗ та на тенденцію до нормалізації їх обміну під впливом обох досліджуваних засобів.

Таким чином, виходячи з результатів дії ЕЛХ на моделях простатиту та ДГПЗ, можна зробити висновок, що він проявляє простатопротекторну дію.

Антиандрогенна активність. Підшкірні ін'єкції тестостерону у дозі 5 мг/кг протягом 12 діб викликають у самців щурів достовірне збільшення відносної маси андрогензалежних органів: сім'яних пухирців - на 129% (p<0,05), передміхурової залози - на 89% (p<0,05), m. levator ani - на 21% (p<0,05). В групі щурів, що отримали ЕЛХ та тестостерон, достовірно (р<0,05) знизилась відносна маса ПЗ та сім'яних пухирців відповідно у 1,8 і 2,1 раза, порівняно з контролем. Проте ці показники не досягають рівня інтактного контролю.

Отримані результати дозволяють зробити висновок про наявність у досліджуваного ЕЛХ помірної антиандрогенної активності, яка виявляється в умовах введення екзогенного тестостерону, та відсутня при фізіологічному рівні андрогенів. Це суттєво, бо у складному патогенезі ДГПЗ людини одним із основних ланцюгів є дисгормональний баланс, що супроводжується підвищенням рівня ДГТ та відносною гіперестрогенемією (Бабелюк В.Е., 2001).

Спазмолітична активність ЕЛХ. Вивчення впливу на моделі спазму сечовивідних шляхів, викликаного хлоридом барію, свідчить, що ЕЛХ (5 мг/кг) достовірно (p<0,05) збільшує кількість сечі з 0,7±0,12 у групі контролю до 2,13±0,16 мл, а пепонен тільки до 1,08±0,10 проти 1,8±0,19 в інтактних тварин.

Результати вказують на те, що досліджуваний ЕЛХ виявляє виражену спазмолітичну дію на тонус сечового міхура та сечоводів в умовах їх гіпертонусу, індукованого BaCl2. Цей ефект є сприятливим, оскільки при захворюванні на ХП, ХП + ДГПЗ сечовий міхур та простатична частина уретри знаходяться у підвищеному тонусі, що потребує призначення спазмолітиків (б1 -адреноблокаторів).

В розвитку запальних захворювань чоловічої статевої системи особлива увага приділяється мікробному фактору. Тому досліджено протимікробну дію ЕЛХ. В умовах in vitro методом дифузії в агар найбільша чутливість до ЕЛХ (0,1% водний розчин) спостерігалась у культур S. aureus (зона затримки росту складала 23 мм2). Чутливість інших культур, а саме Streptococcus spp., S. epidermidis та Е. coli поступалася S. aureus, про що свідчить менш виражена зона затримки росту цих мікроорганізмів (відповідно 21 мм2, 20 мм2 і 18 мм2). У Proteus vulgaris чутливість до ЕЛХ не виявилась. Встановлено, що досліджуваний екстракт виявляє помірну протимікробну дію. Можна вважати, що застосування ЕЛХ дозволить знизити ризик виникнення інфекційного процесу, запобігти ускладнень та підвищити успішність терапії ХП та ДГПЗ.

Дослідження гострої токсичності та місцевоподразнювальної дії. Обов'язковим фрагментом роботи при фармакологічному вивченні нового засобу є дослідження гострої та специфічної (місцевоподразнювальної) токсичної дії.

Гостру токсичність водного ЕЛХ вивчали на двох видах тварин при одноразовому внутрішньошлунковому та внутрішньоочеревинному введенні. Визначити ЛД50 для досліджуваного екстракту при внутрішньошлунковому введенні не вдалося. Встановлено, що ЛД50 при внутрішньочеревному введенні складає 4360 (3560 - 5170) мг/кг для мишей та 4700 (3900 - 5510) мг/кг для щурів. Це дозволяє віднести досліджуваний екстракт листя хмелю звичайного за класифікацією Сидорова К. К. до класу «відносно нешкідливих» речовин.

Отримані дані дозволили розрахувати КВЧ, який дорівнює 1,09, що свідчить про відсутність видової чутливості.

Вивчення можливої місцевоподразнювальної дії підтвердило її відсутність в ЕЛХ у різних концентраціях при контакті зі слизовою оболонкою ока мурчаків.

Таким чином, різнобічне фармакологічне дослідження ЕЛХ свідчить про наявність у нього виражених протизапальних (антиексудативних, антипроліферативних, антиальтеративних), репаративних, анальгетичних, антиоксидантних, антицитолітичних, мембраностабілізувальних, спазмолітичних, антиандрогенних та антимікробних властивостей, що обґрунтовує доцільність створення на його основі лікарського засобу комплексної простатопротекторної дії.

ВИСНОВКИ

В дисертаційній роботі викладено результати різнобічного експериментального дослідження фармакологічних властивостей водного екстракту з листя хмелю звичайного, теоретично та експериментально обґрунтована доцільність створення на його основі лікарського засобу для лікування простатиту і доброякісної гіперплазії передміхурової залози.

1. Скринінгові дослідження на моделі гострого карагенінового набряку дозволили визначити умовно ефективну дозу водного екстракту листя хмелю, що становить 5 мг/кг. Екстракт з листя хмелю звичайного виявляє виражену антиексудативну активність на моделях гострого запалення, викликаного формаліном (43,66%) і зимозаном (47,09%). Протизапальні властивості екстракту, ймовірно, пов'язані з пригніченням утворення та вивільнення медіаторів запалення, а саме простагландинів, лейкотрієнів, а також зі здатністю стабілізувати клітинні мембрани.

2. Екстракт з листя хмелю звичайного чинить значну антиальтеративну активність, прискорює загоєння ран, викликаних асептичним запаленням при введенні оцтової кислоти, що за ефективністю перевищує препарат порівняння альтан, а також виявляє антипроліферативну активність: зменшує утворювання грануляційно-фіброзної тканини на моделі ватної гранульоми в щурів на 35,89%.

3. Екстракт з листя хмелю звичайного перевершував за аналгетичною активністю препарат порівняння альтан у 1,9 раза (p<0,05) і не поступався диклофенаку натрію.

4. Екстракт з листя хмелю звичайного прискорює загоєння асептичної рани в щурів, та виявляє виражену репаративну активність на моделі лінійних різаних ран і за ефективністю перевищує майже в 2 рази (p<0,05) препарат порівняння альтан.

5. За механізмом дії екстракт з листя хмелю звичайного виявляє антиоксидантну, мембраностабілізувальну, антиандрогенну та спазмолітичну властивості, які сприяють покращенню функції передміхурової залози і усуненню дизуричних проявів.

6. Доведено, що екстракт з листя хмелю звичайного виявляє помірну антимікробну активність по відношенню S.aureus (зона затримки росту складала 23 мм2).

7. Встановлено простатопротекторну активність екстракту з листя хмелю звичайного на моделі хлоретилового простатиту та його перевагу над пепоненом за здатністю пригнічувати запальний процес у передміхуровій залозі за показниками периферійної крові та сечі (зменшення лейкоцитурії в 7,5 рази проти 2,7 раза в групі пепонену).

8. Доведено простатопротекторну дію екстракту з листя хмелю звичайного на моделі доброякісної гіперплазії передміхурової залози та встановлено його перевагу над пепоненом за здатністю пригнічувати процес гіперплазії передміхурової залози за рахунок стабілізації гормонального балансу естрадіолу та тестостерону, співвідношення між якими нормалізується зменшуючись на 42,6% порівняно з контрольною патлологією.

9. Досліджуваний екстракту листя хмелю звичайного за токсикологічними показниками, за класифікацією К.К. Сидорова, відноситься до класу відносно нешкідливих речовин та не чинить місцевоподразнювальної дії.

СПИСОК ПРАЦЬ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Експериментальне дослідження репаративних властивостей екстрактів з листя та шишок хмелю звичайного / В. А. Уланова, О. М. Гладченко, С. І.Берестова, Е. А. Єфременко // Запорожский медицинский журнал - 2007. - №4 (43). - С. 164-166. (Особистий внесок: проведення експерименту, аналіз отриманих даних, написання статті).

2. Експериментальне вивчення протизапальних властивостей екстрактів з листя та шишок хмелю звичайного / Е. А. Єфременко, В. А. Уланова, О. М. Гладченко, С. І. Берестова // Вісник фармації. - 2008.- №1 (53). - С.72 - 75. (Здобувачем особисто проведено фармакологічні дослідження, взято участь в аналізі даних, підготовлено статтю).

3. Антиоксидантные и гепатопротекторные свойства экстракта из листьев хмеля обыкновенного в условиях острого тетрахлорметанового поражения печени у крыс / Э. А. Ефременко, О. М. Гладченко, В. А. Малоштан // Запорожский медицинский журнал.- 2008.-№3 (48). - С.127-130. (Здобувачем особисто проведено фармакологічні дослідження, взято участь в аналізі даних, підготовлено статтю).

4. Пат. 85926 на винахід Україна, МПК А61К 36/18 , 36/185, 131/00. Спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин з протизапальною та антиоксидантною активністю / С. В. Ковальов, В. М. Ковальов, С. І. Берестова, Л. М. Малоштан, О. М. Гладченко, Е. А. Єфременко, В. А. Уланова; власник Національний фармацевтичний університет. - № а 2007 08252; заявл. 06.06.2007; опубл.,10.12.2008, Бюл. №23 - 5 с. (Здобувачем особисто проведено експеримент, узагальнено результати, взято участь в інтерпретації даних).

5. Єфременко Е. А. Вивчення антипроліферативної активності екстрактів хмелю звмчайного / Е. А. Єфременко, В. А. Уланова, О. М. Гладченко // Вісник Української медичної стоматологічної академії: актуальні проблеми сучасної медицини, -2007. Том 7, Випуск 4(20) Полтава С. 310. (Здобувачем особисто проведено фармакологічні дослідження, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

6. Єфременко Е. А. Аналгетична активність екстрактів з листя та шишок хмелю звичайного / / Е. А.Єфременко, В. А. Уланова, О. М. Гладченко // Здобутки клінічної і експериментальної медицини : матеріали наук. - практ. конф., 8 червня 2007р.-Тернопіль, 2007. - С. 150-151. (Здобувачем особисто проведено експеримент, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

7. Єфременко Е. А. Вивчення протизапальної активності екстрактів з листя та шишок хмелю звичайного / Е. А. Єфременко, В. А. Уланова, О. М. Гладченко // Актуальні питання створення нових лікарських засобів: матеріали всеукр. наук.- практ. конф. студ. та молодих вчених, 17-18 травня 2007 р. - Х.: НФаУ, 2007. - С. 206. (Здобувачем особисто проведено фармакологічні дослідження, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

8. Єфременко Е. А. Експериментальне вивчення противиразкових властивостей екстрактів хмелю звичайного / Е. А. Єфременко, В. А. Уланова, О. М. Гладченко // Перспективные инновации в науке, образовании, производстве и транспорте: материалы междунар. наук.- практ. конф., 1-15 июня 2007г. - Одесса, 2007. -- T. 15. -- С. 70. (Здобувачем особисто проведено експеримент, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

9. Єфременко Е. А. Експериментальне дослідження ранозагоюючих властивостей екстрактів хмелю звичайного / Е. А. Єфременко, В. А. Уланова, О. М. Гладченко // Научные исследования и их практическое применение. Современное состояние и пути развития: материалы междунар. наук.- практ. конф., 1-15 октября 2007г. - Одесса, 2007. -- T. 15. -- С. 51. (Здобувачем особисто проведено експеримент, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

10. Єфременко Е. А. Вивчення протимікробної дії екстракту листя хмелю / Е. А Єфременко, О. М Гладченко // Фармація України. Погляд у майбутнє: матеріали VІІ Нац. з'їзду фармацевтів України (Харків, 15-17 верес. 2010 р.). У 2 т. / М-во охорони здоров'я України, Нац. фармац. ун-т ; ред. кол. : В. П. Черних (голова) та ін. ; уклад. : Н. А. Третьякова та ін. - Х. : НФаУ, 2010. -- T. 2. -- С. 49. (Здобувачем особисто проведено експеримент, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

11. Єфременко Е. А. Дослідження впливу екстракту листя хмелю звичайного на перебіг простатиту викликаного струменевим зрошенням передміхурової залози хлоретилом. / Е. А. Єфременко, О. М. Гладченко // Фармація України. Погляд у майбутнє : матеріали VІІ Нац. з'їзду фармацевтів України (Харків, 15-17 верес. 2010 р.). У 2 т. / М-во охорони здоров'я України, Нац. фармац. ун-т ; ред. кол. : В. П. Черних (голова) та ін. ; уклад. : Н. А. Третьякова та ін. - Х. : НФаУ, 2010. -- T. 2. -- С. 50. (Здобувачем особисто проведено фармакологічні дослідження, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

12. Єфременко Е. А. Дослідження спазмолітичної активності екстракту листя хмелю на щурах самцях. / Е. А. Єфременко, О. М. Гладченко // Фармація України. Погляд у майбутнє : матеріали VІІ Нац. з'їзду фармацевтів України (Харків, 15-17 верес. 2010 р.). У 2 т. / М-во охорони здоров'я України, Нац. фармац. ун-т ; ред. кол. : В. П. Черних (голова) та ін. ; уклад. : Н. А. Третьякова та ін. - Х. : НФаУ, 2010. -- T. 2. -- С. 51. (Здобувачем особисто проведено експеримент, взято участь в аналізі даних, підготовлено тези).

АНОТАЦІЇ

Єфременко Е.А. Дослідження фармакологічних властивостей та експериментальне обгрунтування простатопротекторної дії екстракту з листя хмелю звичайного. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.03.05 - фармакологія. - Харківський національний медичний університет МОЗ України, Харків, 2011.

Дисертаційну роботу присвячено виявленню фармакологічних властивостей екстракту з листя хмелю звичайного (ЕЛХ). Встановлено, що в дозі 5 мг/кг досліджуваний екстракт має широкий спектр фармакологічних властивостей: виражену протизапальну (антиексудативну, антипроліферативну, антиальтеративну), репаративну, анальгетичну, антиоксидантну, мембраностабілізувальну, спазмолітичну, антиандрогенну та антимікробну активність.

Наявність простатопротекторної властивості ЕЛХ доведено на експериментальних моделях простатиту та ДГПЗ. Результати обґрунтовують доцільність створення на основі ЕЛХ лікарського засобу комплексної дії для лікування захворювань передміхурової залози.

Досліджуваний екстракту листя хмелю звичайного за токсикологічними показниками, по класифікації К.К. Сидорова, відноситься до класу відносно нешкідливих речовин та не чинить місцевоподразнювальної дії.

Ключові слова: екстракт листя хмелю, простатит, доброякісна гіперплазія передміхурової залози.

Ефременко Э.А. Исследование фармакологических свойств и экспериментальное обоснование простатопротекторного действия экстракта из листьев хмеля обыкновенного. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.03.05 - фармакология. - Харьковский национальный медицинский университет МЗ Украины, Харьков, 2010.

Диссертационная работа посвящена изучению фармакологических свойств экстракта из листьев хмеля обыкновенного (ЭЛХ). Проведенные исследования позволили установить, что ЭЛХ (в дозе 5 мг/кг) обладает широким спектром фармакологической активности.

На моделях острого каррагенинового, формалинового и зимозанового отека ЭЛХ проявляет наиболее выраженный антиэкссудативный эффект, сопоставимый с действием альтана и диклофенака натрия.

На моделях асептического воспаления кожи и подкожной клетчатки, линейных резаных ран и ватной гранулемы ЭЛХ проявляет антиальтеративные, антипролиферативные и репаративные свойства, указывающие, что действие экстракта связано с ингибированием медиаторов воспаления и, наряду с угнетением процессов перекисного окисления липидов, способствует стабилизации клеточных мембран. Угнетение медиаторов воспаления, являющихся также медиаторами боли, объясняет выраженный анальгетический эффект ЭЛХ.

Перечисленные выше свойства ЭЛХ объясняются составом его биологически активных веществ (флавоноиды, дубильные вещества, гумоловые кислоты, витамины и микроэлементы).

На модели хлорэтилового простатита доказано, что ЭЛХ достоверно улучшает показатели крови (уменьшилась СОЭ, снизился лейкоцитоз, увеличилось количество эритроцитов и гемоглобина), нормализовались показатели мочи.

Под влиянием ЭЛХ нормализовалась морфо - и микроструктура простаты. В вентральной ее части большинство секреторных единиц сохранено, в некоторых из них эпителий слущен или дистрофично изменен, но в целом он достаточно активно функционирует. В парапростатической ткани отсутствует или снижена воспалительная реакция.

На экспериментальной модели ДГПЖ отмечено, что под влиянием ЭЛХ достоверно снизилась масса и объем простаты, нормализовались показатели клинических анализов крови и мочи. Под действием ЭЛХ уровень эстрадиола в крови снизился, что привело к нормализации соотношения эстрадиол/тестостерон. В то же время отмечена умеренная антиандрогенная активность, проявляющаяся в условиях гипертестостеронемии и отсутствующая при нормальном содержании тестостерона.

ЭЛХ обладает спазмолитическим действием (увеличивает сниженный диурез, что может быть связано с уменьшением тонуса мочевыводящих путей, вызванным введением хлорида бария).

Исследуемый экстракт обладает умеренным противомикробным действием (наиболее активен в отношении золотистого стафилококка).

Результаты по изучению острой токсичности позволили отнести изученный экстракт к классу практически безвредных веществ. ЭЛХ не оказывает местнораздражающего действия.

Ключевые слова: экстракт из листьев хмеля, простатит, доброкачественная гиперплазия предстательной железы.

Efremenko E.A. Study of pharmacological properties of extracts from leaves of hop and experimental evidence that it may protect the prostate.- The manuscript. The thesis for a Candidate of Medical Sciences Degree by the speciality 14.03.05 - Pharmacology. - Kharkiv National Medical University, Ukraine, Kharkov 2010.

The dissertation is dedicated to the revelation of the pharmacological properties of extracts from the leaves of hops. The extract of hops has a broad pharmacological activity.

Extract from the leaves of hops showed pronounced antiexudative, antialterative, antiproliferative properties in experimental models of acute inflammation. It has analgetic, spasmolytic and average antimicrobial activity.

Test extract has an antioxidant effect and stabilizes cell membranes. Extract from the leaves of hops inhibits inflammation in the prostate and adjaсent organs.

Extract from the leaves of hops stabilize the hormonal balance of estradiol and testosterone, reduces weight and volume of the prostate.

Extract of hops refers to the class of almost harmless substances and has no local irritating action.

Key words: extract from the leaves of hops, prostatitis, benign prostatic hyperplasia.

Підписано до друку 24.02.2011. Формат 60х84/16. Папір офсетний. Гарнітура Times ET. Друк. різографічний. Умовн. Друк. арк. 0.9. Наклад 100 прим. Замов. № 27. Надруковано з готових оригінал-макєтів у друкарні ФОП «Азамаєв В.Р.» Свідоцтво про державну реєстрацію ВО2 № 229278 від 25.11.1998 р..Свідоцтво про внесення суб'єкта видавничої справи до державного реєстру видавців, виготівників і розповсюджувачів видавничої продукції. Серія ХК № 135 від 23.02.05 р.

М. Харків, вул. Познанська 6, к. 84, тел. (057)362-01-52

Размещено на Allbest.ru