Наукове обґрунтування методичних підходів визначення специфічної активності дезінфекційних засобів

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

ДЕРЖАВНА УСТАНОВА «ІНСТИТУТ ГІГІЄНИ ТА МЕДИЧНОЇ ЕКОЛОГІЇ ім. О. М. МАРЗЄЄВА НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ»

Автореферат дисертації

на здобуття наукового ступеня

кандидата медичних наук

Наукове обґрунтування методичних підходів визначення специфічної активності дезінфекційних засобів

14.02.01 - гігієна та професійна патологія

Олійник Зоя Анатоліївна

Київ - 2011

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана в ДУ «Інститут гігієни та медичної екології ім. О. М. Марзєєва Національної Академії медичних наук України».

Науковий керівник: доктор медичних наук Сурмашева Олена Василівна, ДУ «Інститут гігієни та медичної екології ім. О. М. Марзєєва Національної Академії медичних наук України», завідувач лабораторії санітарної мікробіології

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор Гаркавий Сергій Іванович, Національний медичний університет імені О. О. Богомольця, завідувач кафедри комунальної гігієни та екології людини з секцією гігієни дітей та підлітків

доктор медичних наук, професор Поліщук Олена Іванівна, ДУ «Інститут епідеміології та інфекційних хвороб ім. Л. В. Громашевського Академії медичних наук України», завідувач лабораторії медичної мікробіології з МПМ

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Дезінфекційні засоби (далі - ДЗ) широко застосовуються для боротьби з шкідливими мікроорганізмами в різних галузях людської діяльності - медичній, ветеринарній, харчовій, фармацевтичній, транспортній, комунальній тощо [Зарицький А. М., 2001; Ибадулин Р. Р., 2008; Коваль І., 2008;]. Застосування ДЗ має запобігати виникненню та розповсюдженню як інфекційних хвороб, що викликаються патогенними мікроорганізмами, так і внутрішньолікарняних інфекцій, харчових отруєнь, токсикоінфекцій та інших патологічних станів, зумовлених умовно-патогенною мікрофлорою [Шандала М. Г., 1997; Салманов А., 2008; Зарицький А., 2008; Морозова Н. С., 2008].

Кожен засіб, що застосовується в Україні для дезінфекції, реєструється в Державному реєстрі дезінфекційних засобів МОЗ. Кількість ДЗ, зареєстрованих в Україні, щорічно зростає. Загалом в Державному реєстрі станом на 13.01.2010 р. нараховувався 791 препарат. При оформленні заявки на державну реєстрацію згідно Порядку державної реєстрації (перереєстрації) дезінфекційних засобів, затвердженого Постановою Кабінету Міністрів України № 908 від 03.07.2006 р. та Порядку організації роботи з державної реєстрації (перереєстрації) дезінфекційних засобів та видачі реєстраційного свідоцтва, затвердженого Наказом МОЗ України № 739 від 06.11.2006 р., має бути представлена відповідна документація з даними про властивості ДЗ, в т.ч. щодо його специфічної активності - здатності засобу спричиняти специфічний знезаражувальний та знешкоджувальний ефект проти мікроорганізмів різних таксономічних груп, а також рекомендованих режимів дезінфекції, визначених в експериментальних умовах.

В Україні визначення специфічної активності ДЗ здійснюється за наступними документами: «Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих веществ» № 739-68 1968 року та Методичні рекомендації "Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів" 2009 року. «Инструкция...» № 739-68 з часу свого створення в СРСР жодного разу не переглядалася, її положення не відповідають сучасним вимогам [Сурмашева О. В., 2008; Таран В. В., 2008]. На сьогоднішньому етапі розвитку дезінфектології перевага надається ДЗ, які мають широкий спектр активності - діють проти бактерій, грибів, мікобактерій туберкульозу, вірусів та спор [Гудзь О. В., 1998; Проданчук М. Г., 2008], однак чинна в Україні нормативно-методична документація не дозволяє визначати фунгіцидну та туберкулоцидну активність ДЗ. З цієї причини у вітчизняних лабораторіях при вивченні специфічної активності ДЗ користуються положеннями російського документу «Методы испытаний дезинфицирующих средств для оценки их безопасности и эффективности» 1998 року, розробленого на основі «Инструкции...» № 739-68, який викликає критику російських науковців [Веткина И. Ф., 2008; Еремеева Н. И., 2009]. Водночас при створенні сучасних методичних документів в Україні, Республіці Білорусь, Російській Федерації та в експерементальних роботах з визначення специфічної активності ДЗ [Корчак Г. І. з співавт., 2005; Марієвський В.Ф. з співавт., 2008] автори використовують положення європейських стандартів групи «Хімічні дезінфектанти та антисептики». Метою розробників даних європейських стандартів є максимальна стандартизація умов проведення випробувань та міжнародна гармонізація [Редгер Х. Й., 2007].

В березні 2004 р. був виданий Закон України № 1629-IV “Про загальнодержавну програму адаптації законодавства України до законодавства Європейського Союзу”, який передбачає приведення нормативно-правових актів України у відповідність до правової системи Європейського Союзу (ЄС), в т.ч. у таких сферах, як охорона здоров'я та життя людей, тварин і рослин, довкілля, технічні правила і стандарти.

Таким чином, наукове обґрунтування методичних підходів визначення специфічної активності дезінфекційних засобів на сучасному рівні, що забезпечить максимально достовірні результати при розробці рекомендованих режимів дезінфекції та буде відповідати законодавству України, є актуальним завданням.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Робота виконана в рамках НДР “Обґрунтування методичних підходів до вивчення специфічної активності дезінфікуючих засобів в Україні”, шифр теми АМН 08.07, № ДР 0107U003039, роки виконання 2007 - 2009. Здобувач є співвиконавцем НДР.

Мета дослідження: визначення та обгрунтування методичних підходів дослідження специфічної дії ДЗ різних хімічних груп проти бактерій, в т. ч. мікобактерій туберкульозу, бактеріальних спор та грибів, та гігієнічна оцінка активності сучасних дезінфектантів.

Завдання дослідження, обумовлені поставленою метою, передбачали:

- в експерементальних умовах дослідити бактерицидну, туберкулоцидну та фунгіцидну дію ДЗ за європейськими стандартами та оцінити методи, що застосовувались;

- адаптувати європейські методи визначення специфічної активності ДЗ до вітчизняних умов;

- розробити методи дослідження специфічної активності дезінфектантів для визначення режимів дезінфекції поверхонь від бактерій, грибів та спор;

- дослідити активність ДЗ проти бактерій, грибів та спор за адаптованими та розробленими методами;

- обгрунтувати методичні підходи визначення специфічної активності ДЗ та критерії її гігієнічної оцінки;

- здійснити гігієнічну оцінку специфічної дії ДЗ різних хімічних груп.

Об'єкт дослідження. Бактерицидна, фунгіцидна, туберкулоцидна та спороцидна активність ДЗ.

Предмет дослідження. Дезінфектанти, музейні тест-штами бактерій, грибів, мікобактерій та спор, поживні середовища, нейтралізатори, тест-об'єкти.

Методи дослідження. Були застосовані мікробіологічні, гігієнічні та статистичні методи досліджень (середнє арифметичне, стандартне відхилення). Обробка результатів проводилася з використанням програми Microsoft Excel-2003.

Наукова новизна одержаних результатів. В ході виконання дисертаційної роботи вперше в Україні:

- в умовах вітчизняної лабораторії досліджено бактерицидну, фунгіцидну та туберкулоцидну активність розчинів глютарового альдегіду та надоцтової кислоти за європейськими стандартами в тесті на носіях та здійснено оцінку методів, що застосовувались;

- адаптовано до вітчизняних умов методи європейських стандартів - кількісний суспензійний метод та метод на носіях;

- розроблено нові методи визначення специфічної активності ДЗ з використанням європейських стандартів та чинної в Україні НМД - спрощений суспензійний та метод на поверхнях;

- обгрунтовано сучасні методичні підходи та критерії гігієнічної оцінки специфічної активності ДЗ.

Практичне значення одержаних результатів. Результати проведених досліджень дозволили вперше в Україні:

- в експерементальних умовах дослідити бактерицидну, фунгіцидну, туберкулоцидну та спороцидну активність ДЗ різних хімічних груп - «Бланідас Актив» (третинні аміни та четвертинні амонійні сполуки), «Р3 Топакс 91» (четвертинні амонійні сполуки), «Р3 коса ДЕЗ» (окисники), «70 % ізопропіловий спирт» (спирти), «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов» (хлорвмісні засоби); визначити спектр активності та тривалість зберігання робочих розчинів нового ДЗ „Бланідас Актив” з використанням адаптованих та розроблених методів;

- розробити рекомендовані режими дезінфекції для ДЗ «Бланідас Актив», «Р3 Топакс 91», «Р3 Коса ДЕЗ», «70 % ізопропіловий спирт», «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов».

Визначені методичні підходи було використано при розробці проекту вітчизняних методичних вказівок (рекомендацій) “Визначення специфічної активності дезінфекційних та антисептичних засобів”.

Впровадження результатів. Розроблено корисну модель „Спосіб визначення бактерицидної активності дезінфікуючих засобів” (Висновок про видачу деклараційного патенту на корисну модель № 7571/1 від 12.05.2010 р.). Розроблено проект методичних вказівок (рекомендацій) “Визначення специфічної активності дезінфекційних та антисептичних засобів”;

Особистий внесок здобувача. Автором особисто проведено критичний аналіз наукової інформації з проблем дисертаційного дослідження, самостійно виконано більшу частину експериментальних досліджень, здійснено обробку первинних результатів, аналіз та узагальнення матеріалу, зроблені висновки.

Апробація результатів дисертації. Основні результати та положення дисертаційної роботи були представлені на науково-практичних конференціях та форумах: Всеукраїнській науково-практичній конференції „Довкілля і здоров'я” (Тернопіль, 2008 р.), науково-практичній конференціії „Актуальні питання гігієни та екологічної безпеки України” (Київ, 2008 - 2010 рр.), міжнародному форумі „Информационные технологии и общество” (Анталія, Туреччина, 2007).

Публікації. За темою дисертації опубліковано 10 робіт: 3 статті у фахових наукових виданнях, рекомендованих ВАК України, 1 - в закордонному журналі, 5 тез у матеріалах науково-практичних конференцій і форумів, отримано 1 деклараційний патент на корисну модель.

Структура та обсяг дисертації. Дисертаційна робота викладена на 135 сторінках машинописного тексту (основний текст - 90 сторінок), ілюстрована 33 таблицями. Дисертація складається із вступу, огляду літератури, розділу, що присвячений опису об'єктів та методів досліджень, 5 розділів власних досліджень, висновків та переліку використаних джерел, який включає 103 посилання.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Матеріали та методи досліджень. Дослідження проводились на базі лабораторії санітарної мікробіології ДУ «Інститут гігієни та медичної екології ім. О. М. Марзєєва Національної Академії медичних наук України» протягом 2006 - 2010 рр.

На першому етапі роботи визначали бактерицидну, дріжджецидну, фунгіцидну та туберкулоцидну активність розчинів глютарового альдегіду (ГА) та надоцтової кислоти (НОК) за європейськими стандартами EN 14561:2006, EN 14562:2006, prEN 14563:2006. Дослідження проводились згідно Угоди з Німецькою групою по проведенню досліджень хімічних засобів та антисептиків в міжнародній організації СЕN ТС 216. Отримані дані пересилали до Німеччини, де проводилась оцінка отриманих результатів щодо збіжності.

На другому етапі здійснювали визначення специфічної активності експерементальних зразків нового дезінфекційного засобу „Бланідас Актив”, розробленого в Україні. З метою визначення базової активності, підбору нейтралізатору та термінів зберігання робочих розчинів було розроблено спрощений суспензійний метод з використанням положень EN 1040:2005, EN 1275:2005 та EN 14347:2005 та „Инструкции...” № 739-68. Проводили порівняння ростових властивостей європейських середовищ - триптон-соєвого агару (ТСА) та агару з солодовим екстрактом (СЕА) з більш використовуваними у вітчизняних лабораторіях поживним агаром (ПА) та агаром Сабуро. Бактерицидну та фунгіцидну активність засобу „Бланідас Актив” визначали в кількісному суспензійному та кількісному тесті на носіях за адаптованими європейськими стандартами prEN 13727:2006, EN 13624:2003, EN 14561:2006, EN 14562:2006. За результатами тесту на носіях розробляли режими дезінфекції об'єктів (медичного інструментарію тощо) методом занурення.

На третьому етапі визначали специфічну активність ДЗ, призначених для знезараження поверхонь - «70 % ізопропіловий спирт» (ІПС), «Р3 Топакс 91», «Р3 коса ДЕЗ», «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов» («Доместос»). Для визначення специфічної активності препаратів в кількісному суспензійному тесті застосовували адаптовані методи європейських стандартів EN 1276:1997, prEN 13727:2006, EN 13727:2003, EN 1650:2008, EN 13624:2003, EN 14348:2005, EN 14347:2005, EN 13704:2002. З метою визначення режимів дезінфекції було розроблено кількісний метод на поверхнях з використанням положень „Инструкции...” № 739-68 з врахуванням підходів європейських стандартів EN 14561:2006, EN 13697:2001, EN 14562:2006, EN 13697:2001, EN 1650:2008, EN 14347:2005, EN 13704:2002. дезінфекційний бактерія гігієнічнй

В усіх дослідженнях тест-штами мікроорганізмів культивували згідно EN 12353:2006. Випробування проводили при температурі 20 єС. Робочі розчини ДЗ готували з використанням жорсткої води (300 мг/л карбонату кальцію, рН 7,0) (у спрощеному суспензійному тесті - стерильної дистильованої води).

Статистична обробка результатів (визначення середнього арифметичного та стандартного відхилення) проводилася з використанням програми Microsoft Excel-2003.

Об'єм проведених досліджень надано в таблиці 1.

Таблиця 1

Етапи, методи та обсяг досліджень

№ з/п	Етап	Кількість досліджень
1	Апробація європейських стандартів
1.1	Визначення бактерицидної активності НОК та ГА за EN 14561:2006	94
1.2	Визначення фунгіцидної активності НОК та ГА за EN 14562:2006	187
1.3	Визначення туберкулоцидної активності НОК та ГА за prEN 14563:2006	50
2	Визначення специфічної активності ДЗ «Бланідас Актив»
2.1	Підбір нейтралізатору	11
2.2	Визначення базової активності у розробленому спрощеному суспензійному тесті	64
2.3	Визначення бактерицидної та фунгіцидної активності в кількісному суспензійному тесті	87
2.4	Визначення бактерицидної та фунгіцидної активності в кількісному тесті на носіях	30
3	Визначення специфічної активності ДЗ, що застосовуються для знезараження поверхонь
3.1	Підбір нейтралізаторів	26
3.2	Визначення бактерицидної та спороцидної активності засобів «Р3 Топакс 91», «Р3 коса ДЕЗ» та «70 % ІПС» в суспензійному тесті	81
3.3	Визначення бактерицидної та спороцидної активності засобів «Р3 Топакс 91», «Р3 коса ДЕЗ» та «70 % ІПС» в тесті на поверхнях	168
3.4	Визначення бактерицидної, фунгіцидної, туберкулоцидної активності засобу «Доместос» в суспензійному тесті	117
3.5	Визначення бактерицидної та фунгіцидної активності засобу «Доместос» в тесті на поверхнях	38

Узагальнена інформація щодо використаних матеріалів надана в табл. 2.

Таблиця 2

Матеріали, що були використані в дослідженнях

№ з/п	Матеріали	Найменування
1	Дезінфекційні засоби	надоцтова кислота (НОК), виробник Lysoform, Німеччина; глютаровий альдегід (ГА), виробник Lysoform, Німеччина; «Р3 Топакс 91», виробник ECOLAB, Німеччина; «Р3 коса ДЕЗ», виробник ECOLAB, Німеччина; «70 % ізопропіловий спирт» (ІПС), виробник Shell Chаmicals Nort East Europe, Польща; «Бланідас Актив», розробник «Лизоформ М», Україна; «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов», виробник Юнілівер Хангарі Мануфекчерінг ЛТД, Угорщина
2	Нейтралізатори	стерильна кінська кров, гліцин, стерильна водопровідна вода, розчини тіосульфату натрію, комплексні нейтралізатори, що містили полісорбат-80, сапонін, лецитин, цистеін, гістидін, натрію тіосульфат, фосфатний буфер з пептоном та натрію хлоридом рН 7,0 у різних комбінаціях та пропорціях;
3	Тест -штами	Staphylococcus aureus ATCC 6538, Enterococcus hirae ATCC 10541, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Escherichia coli ATCC 10536, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 10231, Mycobacterium terrae ATCC 15755, Mycobacterium avium ATCC 15769, спори Bacillus subtilis АТСС 6633
4	Поживні середовища	триптон-соєвий бульон (ТСБ), триптон-соєвий агар (ТСА), поживний агар (ПА), поживний агар з глюкозою, „голодний агар”, солодовий бульон (СЕБ), солодовий агар (СЕА), бульон Сабуро, агар Сабуро, бульон Мідлбрук 7 Н 9 із 10% збагаченням АДС та гліцерилом (МАДС), середовище Мідлбрук і Кох 7 Н 10 із 10% збагаченням ОАДС (СМК)
5	Інтерферуючі речовини	бичачий сироватковий альбумін (БСА) з кінцевою концентрацією в дослідах 0,3 г/л або 3 г/л; баранячі еритроцити 3 г/л
6	Тест-об'єкти	стандартні скляні носії з матовою поверхнею; металеві поверхні обладнання, металеві поверхні приміщень, скляні поверхні, поверхоні силіконових трубок, кафельна плитка

Результати дослідження та їх обговорення

Апробація європейських стандартів в умовах вітчизняної лабораторії. Методи, що використовуються для визначення специфічної активності ДЗ згідно чинної в Україні «Инструкции ...» № 739-68, не відповідають сучасним вимогам, їх застосування призводить до отримання невідтворюваних, необ'єктивних та недостовірних результатів.

З'ясовано, що європейські стандарти групи «Хімічні дезінфектанти та антисептики» EN 14561:2006, EN 14562:2006 та prEN 14563:2006, призначені для визначення бактерицидної, фунгіцидної та туберкулоцидної активності дезінфекційних засобів, які застосовуються для знезараження медичного інструментарію, були відтворюваними в умовах вітчизняної мікробіологічної лабораторії, а результати досліджень, виконані в українській та німецькій лабораторіях - збіжними.

В експериментальних дослідженнях, проведених кількісним методом на носіях в „брудних” умовах при розведенні ДЗ жорсткою водою та при температурі 20 °С згідно EN 14561:2006, EN 14562:2006 та prEN 14563:2006 було отримано наступні результати визначення специфічної активності розчинів ГА та НОК:

Для ГА встановлено наявність бактерицидної активності проти S. aureus в концентрації 0,03 % за 5 хв дії, проти E. hirae - 0,015 % за 60 хв та 0,125 % за 5 хв, дріжджецидної - 0,05 % за 60 хв, туберкулоцидної - 1,0 % за 60 хв, а також відсутність дріжджецидної дії в концентрації 0,03 % за 60 хв, 0,05 % та 0,075 % за 15 хв; фунгіцидної - 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 % за 15 хв; туберкулоцидної - 0,75 % за 60 хв, 1,0 % за 15 хв.

Розчини НОК мали бактерицидну активність проти S.aureus в концентрації 0,025 % за 5 хв; проти E. hirae - 0,03 % за 5 хв; фунгіцидну - 0,5 % за 5 хв; туберкулоцидну - 0,02 % за 60 хв; дріжджецидна дія була відсутня у розчинів в концентрації 0,005 % та 0,01 % за 5 хв; фунгіцидна - 0,05; 0,1; 0,2 % за 5 хв; туберкулоцидна - 0,01 % за 60 хв, 0,02 % за 15 хв; 0,025 % за 15 хв.

Визначення специфічної активності нового експериментального ДЗ «Бланідас Актив». Було розроблено спрощений суспензійний тест з використанням положень європейських стандартів та вітчизняних мікробіологічних підходів, використання якого дозволило підібрати нейтралізатор, визначити спектр дії ДЗ, тривалість збереження активності робочих розчинів та орієнтовні активні концентрації із зменшенням економічних та часових витрат. Сутність методу: суміш 10 мл розчину ДЗ (для водного контролю Nw - дистильованої води) та по 0,1 мл робочої суспензії мікроорганізмів, яка містить біля 8 lg КУО/мл бактерій, біля 7 lg КУО\мл грибів та спор, витримували протягом обраного часу, потім по 1 мл з дослідних проб та Nw переносили в 9 мл нейтралізатору, через 10 хв робили висіви на ПА. Результати досліду зараховували, якщо концентрація бактерій в Nw становила не менше 6 lg для бактерій, не менше 5 lg для грибів та спор. Концентрацію ДЗ вважали активною, якщо на середовищах не було росту або спостерігався ріст поодиноких колоній (до 3), тобто кількість бактерій під впливом розчину ДЗ зменшувалась не менше ніж на 5 lg для бактерій, не менше ніж на 4 lg для грибів та спор.

Було адаптовано до вітчизняних умов європейські стандарти prEN 13727:2006 та EN 14348:2005, кількісний тест на носіях за EN 14561:2006 та EN 14562:2006 для визначення бактерицидної, дріжджецидної та фунгіцидної активності ДЗ: визначено можливість застосування середовищ ПА, агару Сабуро замість ТСА та СЕА, запропоновано моделювання умов «без органічного навантаження» та «брудних» умов використанням БСА 3 г/л без еритроцитів, подовження тривалості експозиції, здійснення контролів методом, адекватним основному методу, розширення застосування методу на носіях не тільки для медичної сфери.

За результатами спрощеного суспензійного тесту визначено ефективність інактивації залишкової активності 0,1 % розчину засобу «Бланідас Актив» комплексним нейтралізатором (лецитин 3 г/л; полісорбат-80 30 г/л; тіосульфат натрію 5 г/л; L-гістидин 1 г/л; сапонін 30 г/л; пептон 1 г/л в фосфатному буфері 0,0025 моль/л); було з'ясовано, що засіб “Бланідас Актив” є дезінфектантом високого рівня - він активний проти бактерій, грибів та спор; встановлені орієнтовні активні концентрації; визначено, що після зберігання протягом 7 діб активність препарату при дії на S.aureus не зменшилася. Оскільки розроблений спрощений суспензійний тест не був достатньо стандартизований, він застосовувався лише для отримання попередніх результатів перед проведенням основних тестів.

За результатами кількісного суспензійного тесту при експозиції 60 хв в «чистих» та «брудних» умовах визначено, що засіб “Бланідас Актив” мав бактерицидну активність в концентрації 0,025 % (на S.aureus - 0,0125 %, на P.aeruginosa та E. hirae - 0,025 %); дріжджецидну - 0,005 %. Активність робочих розчинів засобу не знижувалась при зберіганні протягом 14 діб.

В кількісному тесті на носіях при експозиції 60 хв “Бланідас Актив” проявляв бактерицидну дію в «чистих» умовах в концентрації 0,025 %, в «брудних» - 0,05 % (проти S.aureus - 0,05 %, проти E. hirae - 0,025 %); дріжджецидну - в концентрації 0,025 % в «чистих» та «брудних» умовах.

При здійсненні гігієнічної оцінки специфічної активності ДЗ «Бланідас Актив», визначеної в даному тесті, вважали, що отримані дані можна екстраполювати не тільки на медичний інструментарій, але і на будь-які об'єкти, що знезаражуються зануренням (медичний, косметологічний інструментарій, посуд, іграшки тощо). Розроблено наступні рекомендовані режими дезінфекції даним препаратом в залежності від ступеню органічного забруднення за умов експозиції 60 хв та температурі розчинів біля 20 °С: при знезараженні предметів, що містять незначні кількості білкового забруднення, від бактерій - в концентрації 0,025 %, від дріжджеподібних грибів - в концентрації 0,005 %; при знезараженні предметів, що містять значні кількості білку (крім кров'яних забруднень), від бактерій - в концентрації 0,05 %, від дріжджеподібних грибів - в концентрації 0,025 % .

Визначення специфічної активності ДЗ, що застосовуються для знезараження поверхонь. При дослідженні специфічної активності ДЗ, призначених для знезараження поверхонь, які раніше досліджувались за межами України - «Р3 Топакс 91», «Р3 коса ДЕЗ», «70 % ІПС», „Доместос” - було адаптовано методи чинних європейських стандартів та розроблено кількісний тест на поверхнях з використанням вітчизняних та європейських підходів. Це пов'язано з тим, що для засобів, призначених для застосування на поверхнях в медичних закладах, стандарти відсутні взагалі, а стандарти «комунальної» групи мають ряд розбіжностей із стандартами групи «медицина» та передбачають моделювання лише непористих (металевих) поверхонь. При проведені роботи вважали, що розподіл стандартних методів для ДЗ, призначених для знезараження поверхонь, в залежності від галузі застосування є недоцільним. Дане питання може вирішуватись застосуванням додаткових тест-штамів, інтерферуючих речовин та моделей поверхонь.

Визначення бактерицидної активності ДЗ в кількісному суспензійному тесті проводили згідно адаптованого prEN 13727:2006 із положенями стандартів EN 13727:2002 (контроль нетоксичності нейтралізатора), EN 1276:1997 (моделювання «брудних» умов використанням БСА в концентрації 3 г/л; застосування тест-штаму E. coli) та використанням середовища ПА замість ТСА; фунгіцидної - адаптованого EN 1650:2008 із застосуванням агару Сабуро замість СЕА; туберкулоцидної - адаптованого EN 14348:2005 з моделюванням «брудних» умов використанням БСА в концентрації 3 г/л; спороцидної - EN 13704:2002 з використанням положень EN 14347:2005 (концентрація спор у вихідній суспензії від 8,17 lg КУО/мл до 8,70 lg КУО/мл, використання поживного середовища ТСА, умови інкубації посівів, застосування «водного контролю», спосіб підрахунку колоній, критерій оцінки - редукція не менше 4 lg) та prEN 13727:2006 (метод для засобів, готових до застосування).

Сутність розробленого кількісного методу на поверхнях, призначеного для розробки режимів дезінфекції проти бактерій, грибів або спор, полягала у наступному. На поверхні з різних матеріалів наносили 0,2 - 0,5 мл суспензії мікроорганізмів в концентрації від 7 lg до 8 lg рівномірним шаром, витримували до видимого висихання, потім наносили розчин ДЗ (для водного контролю Nw - жорсткої води), витримували протягом обраного терміну, робили змиви стерильним марлевим тампоном з усієї зараженої площі, ретельно відбивали тампон струшуванням у ємкості з 10 мл нейтралізатору та робили висіви на тверді поживіні середовища. Враховували результати досліджень, в яких Nw становило не менше 6,15 lg. Вважали, що розчин ДЗ має специфічну активність, якщо середня редукція мікроорганізмів за результатами трьох дослідів становила не менше 4 lg.

Для засобів «Р3 Топакс 91», «Р3 коса ДЕЗ», «70 % ІПС» одночасно оцінку здійснювали за «Инструкцией № 739-68» - активною вважали концентрацію, що забезпечувала 100 % загибель мікроорганізмів.

Визначено ефективність нейтралізації розчинів «Р3 Топакс 91» та «Р3 коса ДЕЗ» комплексним нейтралізатором (3 % твін-80, 3 % сапоніну, 0,1 % гістидіну, 0,5 % натрію тіосульфату), «70 % ІПС» - водопровідною водою, «Доместосу» - 5 % натрію тіосульфату.

В кількісному суспензійному тесті було визначено наявність бактерицидної активності розчинів «Р3 Топакс 91» та «Р3 коса ДЕЗ» в концентрації 1 % та «70 % ІПС» при експозиції 5 хв, спороцидної активності 1% розчину засобу «Р3 коса ДЕЗ» при експозиції 5 хв та виявлено відсутність спороцидної активності у 1 % розчину засобу «Р3 Топакс 91» за 60 хв та «70 % ІПС» за 15 хв.

В кількісному тесті на поверхнях було визначено, що 1 % розчини препаратів «Р3 Топакс 91» та «Р3 коса ДЕЗ», а також «70 % ІПС» мали бактерицидну активність на скляних, металевих, силіконових та кахельних поверхнях через 15 хв; 1 % розчин деззасобу «Р3 коса ДЕЗ» при експозиції 60 хв не мав спороцидної активності. При оцінці за критеріями «Инструкции...» № 739-68 1 % «Р3 Топакс 91» на всіх видах поверхонь вважався активним проти бактерій через 30 хв; 1 % «Р3 коса ДЕЗ» вважався активним на скляних поверхнях при експозиції 30 хв та неефективним на поверхнях із силікону та металу навіть через 60 хв; «70 % ІПС» вважався активним на всіх видах поверхонь через 15 хв.

В кількісному суспензійному тесті було визначено, що засіб „Доместос” проявляв бактерицидну активність в „брудних” умовах в концентрації 2,0 % за 5 хв; фунгіцидну - у концентрації 1,2 % через 60 хв або 2,0 % через 15 хв в „чистих” та „брудних” умовах; туберкулоцидну активність - 10 % розчин препарату „Доместос” при експозиції 60 хв в „чистих” та „брудних” умовах. За результатами дослідження активності засобу на поверхнях було розроблено рекомендовані режими дезінфекції.

Здійснено гігієнічну оцінку специфічної активності дезінфектантів - розроблено рекомендовані режими дезінфекції об'єктів методом протирання поверхонь в залежності від ступеню білкового забруднення в наступних режимах:

- засоби «Р3 Топакс 91» та «Р3 коса ДЕЗ» рекомендовано використовувати для знезараження від бактерій поверхонь з металу, силікону, скла, кахелю, що містять незначні кількості білку, методом протирання в концентрації 1 % за умов експозиції 15 хв при витраті розчинів 65 мл на 1 м²;

- засіб «70 % ІПС» рекомендовано використовувати для знезараження від бактерій поверхонь з металу, силікону, скла, кахелю, що містять незначні кількості органічного забруднення, методом протирання за умов експозиції 5 хв при витраті розчинів 65 мл на 1 м²;

- засіб «Доместос» рекомендовано використовувати для знезараження поверхонь з кахелю методом протирання в наступних режимах: при незначному органічному забрудненні - в концентрації 1,0 % при експозиції 5 хв від бактерій та дріжджеподібних грибів; 2,0 % при експозиції 15 хв - від пліснявих грибів; при значному органічному забрудненні - в концентрації 2,0 % при експозиції 5 хв від бактерій; 1,0 % при експозиції 5 хв - від дріжджеподібних грибів; 2,0 % при експозиції 15 хв - від пліснявих грибів.

Враховуючи, що застосовані в роботі методи не охоплюють усі можливі сфери та способи використання ДЗ, були визначені наступні підходи дослідження бактерицидної, дріжджецидної, фунгіцидної, туберкулоцидної, мікобактерицидної, спороцидної активності ДЗ:

- етапність проведення досліджень для нових ДЗ: визначення базової активності суспензійним методом; визначення активності ДЗ в суспензійному тесті з моделюванням умов, наближених до практичних (додаткове забруднення, розширений перелік тест-штамів); визначення активності ДЗ методом з моделюванням способу нанесення ДЗ та використанням тест-об'єктів, за результатами якого розробляються рекомендовані режими дезінфекції; визначення активності ДЗ за межами лабораторії в практичних умовах;

- проведення досліджень в обов'язкових умовах: використання стандартних музейних тест-штамів бактерій S.aureus ATCC 6538, E. hirae ATCC 10541, P. аeruginosa ATCC 9027, Е. сoli ATCC 10536; мікобактерій M. terrae ATCC 15755; грибів C. albicans ATCC 10231, A. niger ATCC 16404; спор B. subtilis АТСС 6633; температури розчинів ДЗ (20±1) °С; термінів експозиції 60 хв - при визначенні бактерицидної, фунгіцидної, мікобактерицидної, 120 хв - спороцидної активності ДЗ; використання жорсткої води для приготування розчинів ДЗ; моделювання додаткового забруднення різного ступеню з використанням стандартних інтерферуючих речовин (бичачий сироватковий альбумін в концентрації 0,03 г/л для „чистих” умов або 0,3 г/л - для „брудних” умов з або без додавання 0,3 г/л баранячих еритроцитів);

- можливість застосування додаткових умов в залежності від особливостей застосування ДЗ: тест-штамів, в т.ч. клінічних; експозицій; температури; інтерферуючих речовин;

використання стандартних реактивів та поживних середовищ - триптон-соєвого агару, поживного агару, солодового агару, агару Сабуро, агару Міддл-Брук або будь-яких інших за умов їх валідації;

регламентування концентрації мікроорганізмів у вихідній мікробній суспензії N: в суспензійному тесті - від 8,17 lg до 8,70 lg для бактерій; від 7,17 lg до 7,70 lg для грибів та спор; від 9,17 lg до 9,70 lg для мікобактерій (при дослідженні засобів, готових до застосування, концентрація мікроорганізмів в суспензійному тесті повинна бути в 10 разів більша); в тестах з використанням тест-об'єктів - від 7,17 до 9,70 lg в залежності від виду мікроорганізму та способу використання ДЗ;

регламентування концентрації мікроорганізмів у водному контролі Nw, що відображує вихідний рівень мікробного забруднення тест-об'єкта: значення повинно бути не менше, ніж сума 2,15 lg та редукції, що вимагається в даному тесті, але не більше, ніж різниця N та 1,3 lg;

- проведення контролів життєздатності культури, нетоксичності нейтралізатора, ефективності нейтралізації;

- здійснення обліку результатів кількісним методом шляхом підрахунку колоній на поживних середовищах та розрахунку вмісту мікроорганізмів в 1 мл проби;

- визначення наявності або відсутності специфічної активності за середнім значенням редукції - кількістю мікроорганізмів, що загинули, визначеної за результатами не менш ніж трьох повторів з точністю до 1 lg; здійснення повторів при дослідженні бактерицидної активності лише для найбільш стійкого тест-штаму;

- застосування наступних критеріїв оцінки специфічної активності за середнім значенням редукції: в суспензійному тесті - для бактерій не менше 5 lg, для грибів, бактеріальних спор та мікобактерій - 4 lg; в тестах із тест-об'єктами - 4 lg.

- розробка рекомендованих режимів дезінфекції за результатами визначення специфічної активності в тестах з моделюванням відповідного способу застосування ДЗ: для об'єктів, що знезаражуються методом занурення або замочування - тесту на носіях; для об'єктів, що знезаражуються методом протирання або зрошування - тесту на поверхнях.

Застосування визначених методичних підходів має забезпечити отримання об'єктивних, відтворюваних та достовірних результатів, а також підвищити ефективність режимів дезінфекції.

ВИСНОВКИ

Науково обгрунтовано вдосконалення методології дослідження специфічної активності ДЗ. Розроблено нові та модифіковано існуючі методи, вивчено специфічну активність дезінфектантів різних хімічних груп та здійснено гігієнічну оцінку.

1. Адаптовано до вітчизняних умов європейські методи визначення специфічної активності ДЗ шляхом їх модифікації (розширення переліку поживних середовищ, подовження термінів експозиції, посилення вимог щодо спороцидної активності).

2. Розроблено нові методи визначення активності ДЗ - спрощений суспензійний тест для визначення базової активності та кількісний тест на поверхнях.

3. Визначено наступні методичні підходи дослідження специфічної активності ДЗ:

- етапність (визначення базової активності ДЗ; визначення специфічної активності з моделюванням практичних умов суспензійним методом; визначення специфічної активності з моделюванням способу застосування ДЗ для розробки режимів дезінфекції; випробування ефективності ДЗ у практичних умовах);

- максимальна стандартизація умов проведення випробувань (стандартні музейні тест-штами мікроорганізмів, які культивуються стандартними методами; умови проведення досліджень - температура, терміни експозиції, тест-об'єкти; інтерферуючі речовини; поживні середовища; реактиви;)

- максимальне наближення до практичних умов (жорстка вода для приготування розчинів ДЗ; використання тест-штамів, що мають високу стійкість до дії ДЗ та відповідають найбільш поширеним збудникам інфекційних хвороб у даній сфері;

- здійснення контролів (концентрації мікроорганізмів у вихідній мікробній суспензії; кількості мікроорганізмів на об'єкті без впливу ДЗ («водний контроль»), життєздатності культури, нетоксичності нейтралізатора, ефективності нейтралізації);

- кількісний облік результатів із проведенням статистичної обробки;

- визначення наявності або відсутності специфічної активності за середнім значенням редукції (кількістю мікроорганізмів, що загинули), яка має становити не менше 4 - 5 lg, в залежності від методу.

4. Досліджено бактерицидну, туберкулоцидну та фунгіцидну активність глютарового альдегіду та надоцтової кислоти за європейськими стандартами EN 14561:2006, EN 14562:2006 та EN 14563:2008; отримані результати були об'єктивними та відтворюваними.

5. Вивчено специфічну активність ДЗ та здійснено її гігієнічну оцінку.

- показано, що препарат «Бланідас Актив» володів бактерицидною та дріжджецидною активністю в концентраціях від 0,005 % до 0,05 %; даний засіб може застосовуватись методом занурення для знезараження слабко забруднених об'єктів в концентрації 0,025 % та дуже забруднених - в концентрації 0,05 % при експозиції 60 хв від бактерій; 0,025 % при експозиції 60 хв - від дріжджеподібних грибів;

- визначено, що препарат «Р3 Топакс 91» в концентрації 1,0 % виявляв бактерицидну активність та не проявляв спороцидної активності; 1,0 % розчин даного засобу може застосовуватись для знезараження від бактерій методом протирання слабко забруднених поверхонь з металу, скла, силікону, керамічної плитки при експозиції 15 хв;

- визначено, що препарат «Р3 Коса ДЕЗ» в концентрації 1,0 % володів бактерицидною та спороцидною активністю в суспензійному тесті, в тесті на поверхнях спороцидна дія була відсутня; 1,0 % розчин даного засобу може застосовуватисьдля знезараження від бактерій методом протирання слабко забруднених поверхонь з металу, скла, силікону, керамічної плитки при експозиції 15 хв;

- препарат «70 % ізопропіловий спирт» проявляв бактерицидну та не мав спороцидної активності; даний засіб може застосовуватись нерозведеним для знезараження від бактерій методом протирання слабко забруднених поверхонь з металу, скла, силікону, керамічної плитки при експозиції 5 хв;

- засіб «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов» проявляв бактерицидну та фунгіцидну активність в концентраціях від 1,0 % до 2,0 % (в залежності від ступеню органічного забруднення), туберкулоцидну - 10,0 %. Даний засіб може застосовуватись методом протирання для дезінфекції поверхонь з кафелю від бактерій в концентраціях від 1,0 % до 2,0 % при експозиції 5 хв (в залежності від ступеню органічного забруднення), дріжджеподібних грибів в концентрації 1,0 % за 5 хв, від пліснявих грибів - 2,0 % за 15 хв.

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

- статті в наукових періодичних фахових виданнях за переліком ВАК України:

1. Актуальні питання оцінки специфічної активності дезінфікуючих засобів / О. В. Сурмашева, З. А. Подзерей, Н. О. Ніконова, А. І. Міхієнкова // Гігієна населених місць : зб. наук. пр. - К., 2008. - Вип. 51. - С. 191-199 (Аналіз літератури, обробка результатів досліджень, написання статті)

2. Значення мікробіологічного обстеження та заходи боротьби з біологічним фактором забруднення у приміщеннях та фондах бібліотек / О. В. Сурмашева, Г. І. Корчак, М. М. Омельченко, А. І. Міхієнкова, Н. О. Ніконова, З. А. Подзерей // Профілактична медицина. - 2008. - № 2. - С. 43-47 (Ідея роботи, аналіз експериментальних даних)

3. Внутрішньолікарняні інфекції: дезінфектологічні аспекти профілактики та боротьби / А. М. Сердюк, О. В. Сурмашева, Г. І. Корчак, Н. О. Ніконова, А. І. Міхієнкова, З. А. Подзерей, Л. І. Романенко, С. М. Березовчук, М. О. Росада // Гігієна населених місць: зб. наук. пр. - К., 2009. - Вип. 54. - С. 160-166 (Аналіз літератури, написання статті)

- в інших фахових журналах та збірках:

1. Олійник З. А. Оцінка бактерицидної та фунгіцидної активності дезінфекційного засобу на основі гіпохлориту натрію за європейськими стандартами / З. А. Олійник // Актуальні питання гігієни та екологічної безпеки України : зб. тез доп. наук.-практ. конф. (Київ, 20-21 травня 2010 р.). - К., 2010. - Вип. 10. - С. 95-96

2. Олійник З. А. Визначення активності нових дезінфікуючих препаратів / З. А. Олійник, А. І. Міхієнкова // Актуальні питання гігієни та екологічної безпеки України : зб. тез доп. наук.-практ. конф. молодих вчених (Київ, 21-22 травня 2009 р.) - К., 2009. - Вип. 9. - С. 75-77 (Проведення досліджень, обробка та аналіз результатів, написання тез)

3. Порівняльна оцінка фунгіцидної активності деззасобів за вітчизняними методичними підходами та європейськими стандартами / З. А. Подзерей, С. М. Березовчук, А. І. Міхієнкова, Л. І. Романенко // Актуальні питання гігієни та екологічної безпеки України : зб. тез доп. наук.-практ. конф. (Київ, 22-23 травня 2008 р.). - К., 2008. - Вип. 8. - С. 66-67 (Проведення досліджень, обробка та аналіз результатів, написання тез)

4. Методические подходы при оценке специфической активности дезинфицирующих средств / Е. В. Сурмашева, Г. И. Корчак, З. А. Подзерей, Н. А. Никонова, С. М. Березовчук // Информационные технологии и общество : материалы форума (Анталия, Турция, 15-22 сентября 2007 р.). - М., 2007. - С. 75-76 (Аналіз літератури)

5. Современные методические подходы к оценке специфической активности дезинфицирующих средств (состояние вопроса в Украине) / Сердюк А. М., Сурмашева Е. В., Корчак Г. И., Подзерей З. А., Михиенкова А. И., Никонова Н. А., Березовчук С. М., Росада М. А., Романенко Л. И. // Дезинфекционное дело. - 2008. - № 2. - С. 27-31 (Проведення досліджень, обробка та аналіз результатів)

6. Ефективність визначення бактерицидної дії дезинфектантів за європейськими та вітчизняними нормативно-методичними документами / О. В. Сурмашева, Г. І. Корчак, З. А. Подзерей, А. І. Міхієнкова, Н. О. Ніконова, С. М. Березовчук // Довкілля і здоров'я : матеріали всеукраїнської наук.-практ. конф. (Тернопіль, 24-25 квітня 2008 р.). - Тернопіль : Укрмедкнига, 2008. - С. 85-86 (Обробка та аналіз результатів, написання тез)

7. Сучасні методичні підходи до визначення протитуберкульозної дії дезінфектантів / О. В. Сурмашева, З. А.Олійник, Н. О. Ніконова, А. І. Міхієнкова, Л. І. Романенко // Актуальні питання гігієни та екологічної безпеки України : зб. тез доп. наук.-практ. конф. (Київ, 20-21 травня 2010 р.). - К., 2010. - Вип. 10. - С.131-133 (Проведення досліджень, обробка та аналіз результатів)

АНОТАЦІЯ

Олійник З. А. Наукове обґрунтування методичних підходів визначення специфічної активності дезінфекційних засобів. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.02.01 - гігієна та професійна патологія (медичні науки). - ДУ „Інститут гігієни та медичної екології ім. О. М. Марзєєва Національної Академії медичних наук України”. - Київ, 2011.

Дисертація присвячена сучасним методам визначення бактерицидної, дріжджецидної, фунгіцидної, туберкулоцидної, мікобактерицидної, спороцидної активності дезінфекційних засобів та її гігієнічній оцінці.

Здійснено апробацію європейських стандандартів групи «Хімічні дезінфектанти та антисептики». Адаптовано до вітчизняних умов європейські методи визначення специфічної активності ДЗ - кількісний суспензійний тест та тест на носіях. Розроблено нові методи - спрощений суспензійний для визначення базової активності дезінфектантів та кількісний на поверхнях для розробки режимів дезінфекції. Досліджено специфічну активність дезінфекційних засобів «Бланідас Актив», «Р3 Топакс 91», «Р3 Коса ДЕЗ», «70 % ізопропіловий спирт», «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов» та розроблено режими дезінфекції різних об'єктів даними засобами. Визначено сучасні методичні підходи та критерії гігієнічної оцінки специфічної активності дезінфектантів, використання яких має забезпечити отримання об'єктивних та достовірних результатів та підвищити ефективність дезінфекції.

Ключові слова: дезінфекційні засоби, методичні підходи, специфічна, бактерицидна, дріжджецидна, фунгіцидна, туберкулоцидна, спороцидна активність, суспензійний тест, кількісний тест на носіях, кількісний тест на поверхнях, режими дезінфекції.

Олийнык З. А. Научное обоснование методических подходов определения специфической активности дезинфицирующих средств. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.02.01 - гигиена и профессиональная патология (медицинские науки). - ГУ «Институт гигиены и медицинской экологии им. А. Н. Марзеева Национальной Академии медицинских наук Украины». - Киев, 2011.

Диссертация посвящена современным методам определения бактерицидной, дрожжецидной, фунгицидной, туберкулоцидной, микобактерицидной, спороцидной активности дезинфицирующих средств (ДС) и ее гигиенической оценке.

Проведена апробация европейских стандандартов группы «Химические дезинфектанты и антисептики» EN 14561:2006, EN 14562:2006 и prEN 14563:2006 в условиях отечественной лаборатории. Показано, что полученные результаты определения бактерицидной, фунгицидной, туберкулоцидной активности растворов глютарового альдегида и надуксусной кислоты являются воспроизводимыми и объективными.

Адаптированы к отечественным условиям европейские методы определения специфической активности ДС - количественный суспензионный тест и тест на носителях. Предложены: использование питательных сред - питательного агара и агара Сабуро вместо триптон-соевого агара и агара с солодовым экстрактом; продление максимальных сроков экспозиции; ужесточение требований к спороцидной активности. Разработаны новые методы - упрощенный суспензионный для определения базовой активности дезинфектантов и количественный на поверхностях с использованием положений «Инструкции…» № 739-68 и европейских стандартов. Научно обосновано усовершенствование методологии определения специфической активности ДС: этапность, приближение к практическим условиям при максимальной стандартизации условий проведения испытаний, осуществление контролей, количественный учет результатов, оценка специфической активности по количеству погибших микроорганизмов (редукции), среднее значение которой должно быть не менше 4 - 5 lg в зависимости от метода.

Исследована специфическая активность ДС «Бланидас Актив», «Р3 Топакс 91», «Р3 Коса ДЕЗ», «70 % изопропиловый спирт», «Доместос - 24 часа защиты от летающих микробов» и сделана ее гигиеническая оценка посредством разработки режимов дезинфекции различных объектов. «Бланидас Актив» рекомендовано использовать для дезинфекции объектов (медицинского инструментария и т. д.) методом погружения от бактерий и грибов рода Candida в концентрациях від 0,025 % до 0,05 % при экспозиции 60 мин в зависимости от интенсивности органического загрязнения; «Р3 Топакс 91» и «Р3 Коса ДЕЗ» - для дезинфекции стеклянных, металлических, силиконовых, кафельных поверхностей от бактерий в концентрациях 1,0 % при экспозиции 15 мин; «70 % ИПС» - для дезинфекции поверхностей из тех же материалов при экспозиции 5 мин; «Доместос» - для обеззараживания кафельных поверхностей от бактерий в концентрациях від 1,0 % до 2,0 % в зависимости от интенсивности органического загрязнения за 5 мин, грибов рода Candida - 1,0 % за 5 мин, плесневых грибов - 2,0 % за 15 мин.

Ключевые слова: дезинфицирующие средства, методические подходы, специфическая активность, суспензионный тест, количественный тест на носителях, количественный тест на поверхностях, режимы дезинфекции.

Oliinik Z.A. Scientific substantiation of methodical approaches for a definition of specific activity of disinfectants. - Manuscript.

The dissertation is presented for Medical Candidate's Degree by the speciality 14.02.01 - «Hygiene and Professional Pathology» (medical sciences). - State Establishment “O.M. Marzeiev Institute of Hygiene and Medical Ecology of the National Academy of Medical Sciences of Ukraine”.- Kyiv, 2011.

The dissertation is devoted to the modern methods for determination of bactericidal, yeasticidal, fungicidal, tuberculocidal, mycobactericidal, sporicidal activity of disinfectants in experimental conditions and its hygienic estimation.

Approbation of the European Standards «Chemical Disinfectants and Antiseptics» group EN 14561:2006, EN 14562:2006 and EN 14563:2008 was conducted under conditions of home laboratory. The European methods for determination the disinfectants' specific activity - the quantitative suspension test and quantitative carrier test - were adapted. New methods the simplified suspension test for determination of disinfectants' base activity and quantitative test on surfaces for development of disinfection modes were elaborated. The specific activity of «Blanidas Active», «P3-Topax 91», «P3-cosa DES», «70 % Isopropyl Alcohol», «Domestos - 24 Hours of Protecting from Flying Microbes» and the disinfection regimes for different objects were developed in experimental terms. Modern methodical approaches and criteria for hygienic estimation of disinfectants' specific activity were determined. They could ensure the objective and authentic results and raise the efficiency of disinfection.

Keywords: disinfectants, methodical approaches, specific activity: bactericidal, yeasticidal, fungicidal, tuberculocidal, mycobactericidal, sporicidal activity, suspension test, quantitative carrier test, quantitative test on surfaces, regimes of disinfection.

Размещено на Allbest.ru