Гетерогенність глікозилювання плазмового та клітинного a1-кислого глікопротеїну при порушеннях гемостазу

Ключові слова: б1-кислий глікопротеїн, гемостаз, лектин-ферментний аналіз, глікозильованість, лейкоцити, протокова цитофлуориметрія.

Машейко И.В. Гетерогенность гликозилирования плазменного и клеточного б1-кислого гликопротеина при нарушениях гемостаза. - Рукопись.

Диссертация на соискание научной степени кандидата медицинских наук по специальности 14.01.32 - медицинская биохимия. - Луганский государственный медицинский университет. - Луганск, 2010.

В диссертационной работе исследовано концентрацию, гетерогенность гликозилирования, и распределение лейкоцитов по наличию мембран-ассоциированного и внутриклеточного б1-кислого гликопротеина у больных гепатитом В и С, с циррозом печени вирусной этиологии, с миелопролиферативными заболеваниями и сердечно-сосудистой патологией.

Установлено, что концентрация АГП в плазме крови зависит от типа патологического процесса и достигает наиболее высоких значений при воспалительных процессах вирусной этиологии.

В ходе работы показано, что дегликозилирование антител к АГП не приводит к существенным изменениям их антигенсвязывающей активности, что открывает новые перспективы в разработке методов исследования гликоконъюгатов с использованием лектинов разной специфичности.

С помощью разработанного метода лектин-ферментного анализа установлены общие закономерности изменения степени и характера гликозилирования N-гликанов АГП при вирусных гепатитах, циррозе печени, хронических миелолейкозах и сердечно-сосудистой патологии. Впервые определено наличие терминальной фукозы в составе N-гликанов АГП в норме и при патологии. Впервые установлено, что степень связывания лектинов с углеводными детерминантами АГП при хроническом миелоидном лейкозе и истинной полицитемии снижается, что свидетельствует о значительном уменьшении количества N-гликановых структур в составе АГП при данной патологии. Установлено, что при остром и хроническом вирусных гепатитах, сублейкемическом миелозе повышается степень связывания с MAA-II, SNA-1 и WGA, что свидетельствует о повышении степени сиалированности и наличии разветвлённых N-гликанов; а при циррозе - изменяется характер фукозилирования N-гликанов АГП.

В выполненной работе впервые установлена корреляционная взаимосвязь между уровнем альфа-1-кислого гликопротеина и показателями сосудисто-тромбоцитарного, коагуляционного, антикоагуляционного гемостаза и системы фибринолиза. Показана активация системы гемостаза и отрицательная корреляционная связь средней силы между концентрацией АГП и показателями АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов при хронической сердечной недостаточности.

Впервые установлен факт ассоциированной с микроальбуминурией секреции АГП через почечный барьер, который сопровождается появлением в моче фракции димера данного гликопротеина с молекулярной массой 84 кДa.

Показано увеличение количества лимфоцитов с мембран-ассоциированной и внутриклеточной локализацией АГП при исследуемых патологических состояниях. Установлена тесная связь между уровнем б1-кислого гликопротеина в плазме крови и количеством лейкоцитов, экспрессирующих АГП на поверхности и внутри клетки.

Ключевые слова: б1-кислый гликопротеин, гемостаз, лектин-ферментный анализ, гликозилированность, лейкоциты, проточная цитофлуориметрия.

Mashejko I.V. Heterogeneity of glycosylation of plasma and cellular б1-acid glycoprotein in disorders of haemostasis. - Manuscript.

Thesis for Philosophy Doctor (PhD) degree in Medicine, speciality - 14.01.32 - medical biochemistry. - Lugansk State Medical University. - Lugansk, 2010.

Level of alpha-1-acid glycoprotein, heterogeneity of glycosylation and distribution of leucocytes by the presence of surface-associated and intracellular ORM in patients with hepatitis B and C, cirrhosis, myeloproliferative diseases of blood and cardiovascular disorders were investigated.

It was established that level of alpha-1-acid glycoprotein in blood plasma depends on the type of pathological process and reaches the highest values at inflammatory processes of viral etiology.

During work it was shown, that deglycosylation of antibodies to ORM had not lead to significant changes in their antigen-binding activity that opens new opportunities in working out of methods of research glycoconjugates with using lectins of different specificity.

In the executed work the correlation between level of alpha-1-acid glycoprotein and factors of the vascular-platelet, coagulation, anticoagulation and fibrinolysis systems of haemostasis for the first time were established.

For the first time was established fact of renal secretion of ORM associated with albumin which is accompanied by occurrence in urine fraction of ORM dimer with molecular weight 84 kDa.

Increase of lymphocytes amount with surface- and intracellular localization of alpha-1-acid glycoprotein in investigated diseases was shown. The correlation between level of ORM in blood plasma and lymphocytes amount with surface- and intracellular localization of alpha-1-acid glycoprotein was established.

Key words: alpha-1-acid glycoprotein, haemostasis, enzyme linked lectin assay, glycosylation, leucocytes, flow cytometry.

Размещено на Allbest.ru