Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Введение

Эозинофилы, или эозинофильные гранулоцитарные лейкоциты, были впервые описаны в конце XIX в. П. Эрлихом (гранулы этих клеток окрашиваются эозином в розово-оранжевый цвет, подобно цвету утренней зари). Однако период интенсивного изучения эозинофилов начался гораздо позднее - в 60-х годах нашего века.

Абсолютное содержание эозинофилов в периферической крови у здоровых лиц подвержено существенным колебаниям и в среднем составляет 50-350 клеток/мм³, или 3-5 эозинофилов на 100 клеток лейкоцитарного ряда [21].

Эозинофилы, как и все другие клетки крови, образуются в костном мозге. На их образование влияют цитокины ИЛ1, ИЛ3, ИЛ5. Интерлейкин-1 (ИЛ1) и ИЛ3 действуют синергично, способствуя повышению количества эозинофильных колониеобразующих клеток. Затем включается ИЛ5, способствуя дифференцировке зрелого эозинофила из его предшественника.

Эозинофилы отличаются от других гранулоцитов происхождением, внутриклеточными структурами, биохимическими субстанциями и адаптационными механизмами. Отделение эозинофилов на ранних этапах миелопоэза, по-видимому, связано с их специальным назначением. Основная роль эозинофилов - защита организма от внешних воздействий - определила главное место их расположения - в покровных тканях, где они окончательно созревают и выполняют свои функции.

1. Эозинофилия. Виды эозинофилии

1.1 Гранулоцитарный ряд

Лейкоциты - белые кровяные клетки, крупнее эритроцитов, но содержатся в крови гораздо меньшем количестве (6000-9000 в 1 мл крови)

Они играют важную роль в защите организма от болезней. Все лейкоциты имеют ядро. Не смотря на наличие ядра, продолжительность жизни лейкоцитов в кровяном русле составляет в норме всего лишь несколько дней. Существует две основные группы лейкоцитов гранулоциты (зернистые лейкоциты) и агранулоциты (незернистые лейкоциты)

Гранулоциты образуются в костном мозге.

Все гранулоциты содержат разделенные на лопасти ядро и зернистую цитоплазму и обладают способностью к амебоидному движению, гранулоциты можно далее подразделять на нейтрофилы, эозинофилы и базофилы.

Нейтрофилы (фагоциты) составляют 70% всех лейкоцитов. Они обладают способностью проходить между клетками, образующими стенки капилляров, и проникать в межклеточные пространства тканей и направляться к инфицированным участкам тела. Нейтрофилы - активные фагоциты, они поглощают и переваривают болезнетворные бактерии.

Эозинофилы содержат цитоплазматические гранулы, окрашиваемые эозином в красный цвет (1,5% общего числа лейкоцитов), но при аллергических состояниях (например, астме или сенной лихорадке) их количество возрастает. Содержание эозинофилов в крови контролируются гормонами коры надпочечников.

Базофилы (0,5 популяции лейкоцитов)

Они вырабатывают гепарин и гистамин.

Агранулоциты содержат ядро овальной формы и незернистую цитоплазму.

Существует два основных вида агранулоцитов: моноциты и лимфоциты

Моноциты (4%) образуются в костном мозге и содержат ядро бобовидной формы.

Активно фагоцитируют бактерии и другие крупные частицы. Способны мигрировать сквозь стенки капилляров в очаги воспаления, где действуют так же, как нейтрофилы.

Лимфоциты (24%) образуются в тимусе (вилочковой железе) и лимфоидной ткани из клеток - предшественниц, поступающих из костного мозга. Имеют округлую форму и содержат очень мало цитоплазмы. Способность к амебоидным движениям ограничена. Главная функция - индукция иммунных реакций или участие в них (образование антител, отторжение трансплантата, уничтожение опухолевых клеток) Продолжительность жизни варьирует от нескольких дней до десяти и более лет.

Гранулоцитарный ряд.

Гранулоциты - клетки, в цитоплазме которых обнаруживается зернистость, специфическая для определенного вида клеток. Различают нейтрофильную, эозинофильную и базофильную зернистость.

Нейтрофильная зернистость розовато-фиолетовой окраски, чаще пылевидная, обильная, не всегда равномерно заполняет цитоплазму.

Эозинофильная зернистость однородна по цвету, форме и величине, крупная, занимает всю цитоплазму. В зрелых клетках имеет кирпично-розовый цвет (кетовая икра), в молодых эозинофильных лейкоцитах - коричневый и буро-синий оттенок.

Базофильная зернистость чаще фиолетового, реже черного цвета, неоднородна по величине и форме, обычно необильна, располагается на ядре и в цитоплазме.



Это клетка чаще всего круглой, реже овальной формы, размером 15 - 16 мкм. Ядро миелобласта имеет нежносетчатую структуру хроматина, в нем отчетливо видны крупные ядрышки (2-3). Цитоплазма светлоокрашенная, базофильная, имеет перинуклеарную зону просветления, небольшое количество нежных азурофильных включений, дает положительную реакцию на пероксидазу.

Промиелоцит - крупная клетка, достигающая 25 мкм и более.

агранулоцит эозинофилия кровь лейкоцит

Ядро и цитоплазма ее представляют собой гамму переходов в сторону как миелобласта, так и более зрелой клетки - миелоцита. Ядро чаще всего имеет слегка овальную, иногда бобовидную форму и располагается эксцентрически. Цитоплазма в одних случаях окружает ядро узким поясом, в других - более широкая. Степень базофилии цитоплазмы может быть различной. Чем ближе клетка к миелоциту, тем больше синяя субстанция вытесняется розовой.

Нейтрофильный промиелоцит содержит небольшую зернистость, количество которой по мере созревания нарастает. Окрашивается зернистость в промиелоците, причем даже в одной клетке неодинаково: в красный, красно-фиолетовый, фиолетовый, коричневатый, фиолетово-синий, темно-сине-красный оттенки.

При крупной базофильной зернистости в цитоплазме промиелоцита, покрывающей нередко и ядро, его можно отнести к базофильному типу, а при крупной зернистости эозинофильного характера - к эозинофильному. На начальных этапах развития клетки эозинофильные гранулы содержат большое количество базофильного вещества, воспринимающего щелочную (синюю) краску, поэтому большинство гранул оказываются окрашенными в грязновато-синий цвет. Такие клетки ошибочно можно принять за базофильные. Во избежание ошибки следует учитывать не только окраску, но и размеры и форму гранул: в клетках эозинофильного ряда они правильной округлой формы и одинакового размера, а в клетках базофильного ряда величина их колеблется от мелких точечных до крупных хлопьевидных образований неправильной формы, располагающихся и на ядре, и в цитоплазме.

Миелоцит. Принято различать две генерации этих клеток - крупные материнские (незрелые) и меньшие дочерние (зрелые) миелоциты.

Дочерние миелоциты образуются из материнских в результате дифференциации при одновременной пролиферации. Следует отметить, что миелоцит является последней клеткой гранулоцитарного ряда, обладающей способностью к пролиферации. В нормальных условиях дочерние миелоциты превращаются в метамиелоциты. Однако при сепсисе, гнойном воспалении крупные зрелые сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты могут развиваться непосредственно из материнских миелоцитов.

Нейтрофильный миелоцит. Ядра миелоцитов отличаются от ядер зрелых лейкоцитов характерным чередованием более светлых и более темных участков хроматина. Рисунок ядер зависит от степени зрелости клеток: более мелкий, сглаженный, рыхлый - у незрелых миелоцитов; резкий, крупный и густой - у зрелых. Материнским миелоцитам свойственны ядра округлой формы, как бы набухшие, а дочерним - овальные или бобовидные, хроматиновая сеть которых характеризуется четко просматривающимися компактными темными тяжами, чередующимися с более светлыми промежутками.

Окраска цитоплазмы миелоцитов зависит от обилия базофильного вещества. У самых молодых миелоцитов цитоплазма окрашивается более интенсивно. Окраска цитоплазмы материнского и особенно дочернего миелоцита синевато-коричневых тонов, неравномерна: в центре клетки, вблизи ядра, в области расположения комплекса Гольджи она менее интенсивна. По наличию этого просветления в цитоплазме миелоциты можно легко дифференцировать даже в тех случаях, когда зернистость плохо окрашивайся или совсем не окрашивается (при лейкозах).

Зернистость миелоцитов мелкая, такого же типа, как и у зрелых нейтрофильных гранулоцитов, но в ней почти всегда можно обнаружить и более крупные зерна. При сепсисе и гнойном воспалении в миелоцитах наблюдается дегенеративная токсикогенная зернистость.

Эозинофильный миелоцит. По характеру строения ядра он мало, чем отличается от нейтрофильного, но цитоплазма его наполнена эозинофильной зернистостью. Окраска ее большей частью желто-красная, однако, нередко можно наблюдать эозинофильную зернистость с базофильным компонентом, имеющую то синий, то фиолетово-красный цвет (возможно, материнский миелоцит). Таких клеток с молодой темной эозинофильной зернистостью особенно много в крови при лейкемии.

Базофильный миелоцит. Ядро его по структуре также напоминает ядро нейтрофильного миелоцита, но отличается некоторым набуханием, из-за чего детали структуры менее четкие. Кроме базофильного вещества в цитоплазме можно обнаружить немного коричневато-фиолетовых нитей. Зернистость отличается от зернистости зрелого базофильного гранулоцита более резко выраженными колебаниями в оттенках окраски отдельных зерен (темно - синяя, синяя и сине-розовая), располагается и в цитоплазме, и на ядре. Можно также обнаружить оксифильные гранулы, которые, по-видимому, появляются в результате токсикодегенеративных изменений зерен.

Нейтрофильный метамиелоцит круглой формы, размером 11-13 мкм, с бобовидным, более компактным, чем у миелоцитов, ядром, которое по сравнению с ядром палочкоядерного нейтрофильного гранулоцита более зрелое и более рыхлое.

Бесструктурная часть цитоплазмы этой клетки в целом оксифильна, но иногда обнаруживаются остатки базофильного вещества и зернистость розовато-фиолетового цвета.

Эозинофильный метамиелоцит имеет диаметр 10 - 12 мкм, округлую форму, сочное бобовидное ядро с более компактным расположением хроматина и обильной, равномерной, крупной эозинофильной зернистостью.

По мере созревания через стадию палочкоядерного эозинофильного гранулоцита переходит в сегментоядерный эозинофильный гранулоцит.

Базофильный метамиелоцит не всегда можно точно определить из-за неясных очертаний ядра.

Поэтому клетки с базофильной зернистостью, которые нельзя с уверенностью отнести к метамиелоцитам по форме и структуре ядра, рекомендуется считать зрелыми базофильными гранулоцитами.

Нейтрофильные гранулоциты палочкоядерные и сегментоядерныеимеют размеры соответственно 11-12 и 8-10 мкм, большие и гигантские формы их могут достигать 20 мкм, а дегенеративные, сморщенные - 7-8 мкм.

Большую часть клетки составляет цитоплазма, обильно, но не всегда равномерно заполненная мелкой зернистостью. Цитоплазма окрашивается по Паппенгейму в розовый цвет, а зернистость - в розово-синеватый или фиолетовый. Нейтрофильная зернистость специфична для этих клеток и отличается от других видов зернистости. Ядро имеет 2-4 сегмента, которые могут соединяться между собой тонкой хроматиновой нитью.

Эозинофильные гранулоциты палочкоядерные и сегментоядерные круглой формы, диаметром 8-12 мкм.



Ядро их палочковидное или состоит из двух сегментов, соединенных тонкой, нежной хроматиновой нитью, реже встречается большее число сегментов (три или четыре). Ядро занимает небольшую часть клетки, а остальная ее часть заполнена характерной зернистостью. Зерна окрашиваются кислыми красителями, особенно хорошо - эозином (напоминают кетовую икру).

Базофильные гранулоциты палочкоядерные и зрелые.

Зернистость клеток окрашивается метахроматически, цвет ее может изменяться от фиолетового до черно-синего. Крупные и более мелкие угловатые и круглые зерна располагаются и в цитоплазме, и на ядре, легко растворимы в воде. Цитоплазма окрашивается в ярко-розовые тона, что особенно хорошо видно в участках, где отсутствует зернистость. Ядро лопастное, иногда круглое или овальное.

1.2 Эозинофилия

Эозинофилия - состояние крови, при котором наблюдается повышение уровня особых клеток крови - эозинофилов. Причин повышения количества эозинофилов множество, но чаще имеют место аллергическая реакция или паразитарные инфекции. При этом наблюдается также инфильтрация (пропитывание) других тканей эозинофилами. Например, при аллергическом насморке эозинофилы можно обнаружить в отделяемом секрете из носа, при бронхиальной астме с бронхитом - в мокроте, при скоплении крови в легких или опухолях плевры - в легочной жидкости.

У взрослого человека нормальным считается количество эозинофилов в крови от 0,02х109/л до 0,3х109/л.

Выделяют следующие степени эозинофилии:

1. Небольшая - до 10% от общего количества лейкоцитов

2. Умеренная - 10-20%.

3. Высокая - свыше 20%.

Стойкая эозинофилия - это чаще всего признак глистных поражений, аллергических реакций, некоторых лейкозов

Гиперэозинофильный синдром с поражением легких включает в себя спектр клинических проявлений, характеризующихся периферической эозинофилией и эозинофильными легочными инфильтратами, но этиология обычно неизвестна. Больные с эозинофильной реакцией на лекарственные препараты могут не иметь какой-либо клинической симптоматики или иметь проявления различных синдромов, включая интерстициальный нефрит, сывороточную болезнь, холестатическую желтуху, гиперчувствительные васкулиты и иммунобластную лимфаденопатию

Основные причины эозинофилии

Ш Паразитарные заболевания (шистосомоз, аскаридоз, трихинеллез, фасциолез, анкилостомоз, описторхоз, филяриоз, малярия, токсокароз, стронгилоидоз, парагонимоз, филяриоз тропический обезьян и собак - синдром Вайнгартена, дифиллоботриоз, эхинококкоз);

Ш Кожные заболевания (пузырчатка, дерматит герпетиформный, кожный лишай, экзема, пемфигус);

Ш Аллергические заболевания (бронхиальная астма, атопический дерматит, сывороточная болезнь, сенная лихорадка, аллергический ринит, эозинофильный фасциит и миозит, поллиноз, отек Квинке, крапивница, колит новорожденных эозинофильный, эозинофильный цистит);

Ш Заболевания крови (лимфогранулематоз, лейкозы, истинная полицитемия, синдром Сезари, пернициозная анемия, семейный гистиоцитоз с эозинофилией и комбинированным иммунодефицитом);

Ш Болезни легких (эозинофильная пневмония, саркоидоз, аллергический аспергиллез, синдром Леффлера, инфильтрат легочный);

Ш Аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, склеродермия);

Ш Заболевания желудка и кишечника (язвенная болезнь, гастроэнтеропатия аллергическая, гастроэнтерит, стафилококковая инфекция у детей);

Ш Ревматические болезни (гранулематоз Вегенера, ревматоидный артрит, периартериит узелковый, фасциит эозинофильный);

Ш Злокачественные новообразования (опухоль Вильямса, карциноматоз, рак влагалища и полового члена, рак щитовидной железы, рак кожи, аденокарцинома матки и желудка);

Ш Иммунодефицитные состояния (Т-лимфопатии, синдром Вискотта-Олдриджа, дефицит иммуноглобулинов;

Ш Другие болезни (эозинофильный синдром, цирроз печени, врожденные пороки сердца, скарлатина, спленэктомия, перитонеальный диализ, период реконвалесценции после острых инфекционных заболеваний, хорея, туберкулез лимфатических узлов казеозный, реакция «трансплантант против хозяина», состояние гипоксии, семейный лейкоцитоз эозинофильный, дефицит магния, радиоактивное облучение, эозинофилия недоношенных);

Ш Прием некоторых лекарственных препаратов (аспирин, папаверин, димедрол, противотуберкулезные препараты, эуфиллин, антибиотики пенициллинового ряда, сульфаниламидные препараты, препараты золота, в-блокаторы, витамины группы В, препараты половых гормонов).

Симптомы

Симптомы эозинофилии обусловлены заболеваниями, при которых данное состояние встречается.

1. Аутоиммунные и реактивные заболевания. При этих болезнях чаще всего, наряду с повышением эозинофилов, отмечаются: анемия; гепатоспленомегалии (увеличение селезенки и печени); снижение веса; фиброз легких; повышение температуры; воспалительные поражения артерий и вен; застойная сердечная недостаточность; боль в суставах; полиорганная недостаточность.

2. Глистные и другие паразитарные инвазии. Помимо повышения содержания эозинофилов, при данных заболеваниях наблюдается: лимфаденопатия - увеличение, болезненность лимфатических узлов; гепатоспленомегалия - увеличение печени и селезенки; симптомы общей интоксикации: тошнота, слабость, снижение аппетита, головные боли и головокружение, повышение температуры тела; миалгии (боль в мышцах), боли в суставах; синдром Леффлера при миграции личинок (кашель с астматическим компонентом, боль в груди, одышка); может быть учащение пульса, гипотония, отеки на лице и веках, сыпь на кожных покровах.

3. Аллергические и кожные болезни. Появление уртикарной сыпи (волдыри), зуд, сухость кожных покровов или мокнутие, вплоть до образования язв на коже, отслоение эпидермиса.

4. Симптомы желудочно-кишечных заболеваний. Поскольку многие заболевания пищеварительной системы приводят к нарушению микрофлоры кишечника, замедляется процесс очищения организма от шлаков, что и приводит к повышенному содержанию эозинофилов. При таких дисбактериозах пациента могут беспокоить рвота и тошнота после приема пищи, боль в околопупочной области, диарея, судороги, признаки гепатита (желтуха, увеличение печени и ее болезненность).

5. Заболевания крови. Для системного гистиоцитоза на фоне эозинофилии характерны частые инфекционные заболевания, увеличение печени и селезенки, поражение лимфоузлов, кашель, цианоз кожных покровов (синюшное окрашивание), диспноэ (затрудненное дыхание). Наряду с эозинофилией, при лимфогранулематозе отмечаются лихорадка, боли в костях и суставах, слабость, зуд на большей части поверхности кожи, лимфаденопатия, увеличение печени и селезенки, может быть кашель. Эозинофилия при неходжкинских лимфомах сопровождается также повышением температуры, слабостью, снижением массы тела и двигательной активности, а также симптомами, характерными для поражения определенных областей. Так, при появлении опухоли в брюшной области отмечают такие симптомы, как жажда, увеличение живота, кишечную непроходимость. Со стороны ЦНС - головные боли, параличи и парезы, снижение зрения и слуха. Могут возникать боли за грудиной, кашель, отек лица, нарушение глотания.

Диагностика

Для выявления эозинофилии проводят в первую очередь общий анализ крови, в котором наблюдается повышение числа эозинофилов, и их процентного соотношения. Могут быть также признаки анемии (снижение числа эритроцитов, уменьшение количества гемоглобина). Для выяснения характера заболевания, приведшего к эозинофилии, необходимо провести биохимический анализ крови (уровень белков, ферментов печени и др.), общий анализ мочи, анализ кала на яйца глистов. Одним из методов подтверждения аллергического ринита является мазок на эозинофилию отделяемого клеток в слизистой оболочке носовой полости, окрашенный по Райту.

Необходимо провести рентгенографию легких при наличии показаний, пункцию пораженного сустава при ревматоидном артрите для выявления эозинофильной инфильтрации, бронхоскопию.

2. Воспаление

Воспаление - это сформировавшаяся в процессе эволюции защитно-приспособительная реакция организма, направленная на локализацию, уничтожение или удаление из организма патогенного агента и характеризующаяся явлениями альтерации, экссудации и пролиферации.

В этом определении следует обратить внимание на три момента.

· Во-первых, воспаление как реакция сформировалась в процессе эволюции. У низших организмов прообразом воспаления является внутриклеточное пищеварение. Когда организмы усложнились, способность к внутриклеточному пищеварению осталась лишь у отдельных клеток, а факторы, сопутствующие внутриклеточному пищеварению, стали участвовать в реакции клетки, органа, ткани на любой чужеродный агент независимо от того, будет он подвергаться внутриклеточному перевариванию или нет. В ходе эволюции процесс, когда-то обеспечивавший питание низкоорганизованных существ, превратился в реакцию организма на чужеродный агент.

· Во-вторых, воспаление исполняет защитно-приспособительную роль и направлено на локализацию, уничтожение или удаление из организма вредоносного фактора. Однако, поскольку воспаление сопровождается повреждением тканей, эта защитная реакция имеет и патологический характер. Поэтому чрезвычайно важно знать механизмы воспаления, с тем чтобы на определенном этапе его развития поддерживать эту реакцию, а на других этапах бороться с ней, если она грозит обширным и глубоким повреждением тканей и органов.

· В-третьих, для воспаления характерно сосуществование трех проявлений: альтерации (повреждение тканей), экссудации (накопление в тканях жидкости) и пролиферации (разрастание клеточных и тканевых элементов). Воспаление - это единственная реакция организма, в которой всегда присутствуют эти три компонента вместе. При опухолях, например, наблюдается альтерация и пролиферация, но нет экссудации; при аллергии мы видим альтерацию и экссудацию, но не наблюдаем пролиферации и т.д. И лишь при воспалении всегда есть в наличии все эти три компонента совместно.

Биологический смысл воспаления заключается в отграничении и ликвидации очага повреждения и вызвавших его патогенных факторов, а также в восстановлении гомеостаза.

Воспаление - это сложный комплекс процессов, который складывается из трех взаимосвязанных реакций - альтерации (повреждения), экссудации и полиферации. Отсутствие хотя бы одной из этих трех составляющих реакций не позволяет говорить о воспалении.

Альтерация - повреждение тканей, при котором возникают разнообразные изменения клеточных и внеклеточных компонентов в месте действия повреждающего фактора.

Экссудация - поступление в очаг воспаления экссудата, т.е. богатой белком жидкости, содержащей форменные элементы крови, в зависимости от количества которых образуются различные экссудаты.

Пролиферация - размножение клеток и формирование внеклеточного матрикса, направленных на восстановление поврежденных тканей.

Необходимым условием развития этих реакций является наличие медиаторов воспаления. Медиаторы воспаления - биологически активные вещества, обеспечивающие химические и молекулярные связи между процессами, протекающими в очаге воспаления и без которых развитие воспалительного процесса невозможно.

Выделяют 2 группы медиаторов воспаления:

Клеточные (или тканевые) медиаторы воспаления, с помощью которых включается сосудистая реакция и обеспечивается экссудация. Эти медиаторы продуцируются клетками и тканями, ocoбенно тучными клетками, базофильными и эозинофильными гранулоцитами, моноцитами, макрофагами, лимфоцитами, клетками APUD-системы и др. Важнейшими клеточными медиаторами воспаления являются:

* биогенные амины, особенно гистамин и серотонин, вызывающие острую дилатацию (расширение) сосудов микроциркуляторного русла, что повышает сосудистую проницаем мость, способствует отеку ткани, усиливает слизеобразование и сокращение гладкой мускулатуры:

* кислые липиды, образующиеся при повреждении клеток и тканей и сами являющиеся источником тканевых медиаторов воспаления;

* медленно регулирующая субстанция анафилаксии увеличивает сосудистую проницаемость;

* эозинофильный хемотаксический «фактор А повышает cocyдистую проницаемость и выход в очаг воспаления эозинофилов:

* «фактор активации тромбоцитов стимулирует тромбоциты и их многогранные функции;

* простагланданы обладают широким спектром действия, в том числе повреждают сосуды микроциркуляции, повышают их проницаемость, усиливают хемотаксис, способствуют пролиферации фибробластов.

Плазменные медиаторы воспаления образуются в результате активации под влиянием повреждающего фактора и клеточных медиаторов воспаления трех плазменных систем - системы комплемента, системы плазмина (каллекриин-кининовой системы) и свертывающей системы крови. Все компоненты этих систем находятся в крови в виде предшественников и начинают функционировать только под влиянием определенных активаторов.

* Медиаторами кининовой системы являются брадикинин и калликреин. Брадикинин усиливает сосудистую проницаемость, вызывает чувство боли, обладает гипотензивным свойством. Калликреин осуществляет хемотаксис лейкоцитов и активирует фактор Хагемана, включая, таким образом, в воспалительный процесс системы свертывания крови и фибринолиза.

* Фактор Хагемана, ключевой компонент системы свертывания крови, инициирует свертываемость крови, активирует другие плазменные медиаторы воспаления, повышает проницаемость сосудов, усиливает миграцию нейтрофильных лейкоцитов и агрегацию тромбоцитов.

* Система комплемента состоит из группы специальных белков плазмы крови, вызывающих лизис бактерий и клеток, компоненты комплемента СЗb и С5b повышают проницаемость сосудов, усиливают движение к очагу воспаления полиморф-i но-ядерных лейкоцитов (ПЯЛ), моноцитов и макрофагов.

Реактанты острой фазы - биологически активные белковые вещества, благодаря которым в воспаление включаются не только система микроциркуляции и иммунная система, но и другие системы организма, в том числе эндокринная и нервная. Среди реактантов острой фазы наибольшее значение имеют:

С-реактивный белок, концентрация которого в крови увеличивается при воспалении в 100-1000 раз, активирует цитолитическую активность Т-лимфоцитов-киллеров. замедляет агрегацию тромбоцитов;

интерлейкин-1 (ИЛ-1), влияет на активность многих клеток очага воспаления, особенно Т-лимфоцитов, ПЯЛ, стимулирует синтез простагландинов и простациклинов в эндотелиальных клетках, способствует гемостазу в очаге воспаления;

Т-кининоген является предшественником плазменных медиаторов воспаления - кининов, ингибирует цистеиновые протеиназы.

Таким образом, в очаге воспаления возникает гамма очень сложных процессов, которые не могут долго протекать автономно, не являясь сигналом для включения различных систем opганизма. Такими сигналами являются накопление и циркуляция в крови биологически активных веществ, кининов. компонентов комплемента, простагландинов, интерферона и др. В результате этого в воспаление вовлекаются система кроветворения, иммунная, эндокринная, нервная системы, т.е. организм в целом. Поэтому в широком плане воспаление следует рассматривать как местное проявление общей реакции организма.

Воспаление обычно сопровождает интоксикация. Она связана не только с самим воспалением, но и с особенностями повреждающего фактора, прежде всего инфекционного агента. По мере увеличения площади повреждения и выраженности альтерации усиливается всасывание токсичных продуктов и нарастает интоксикация, которая угнетает различные защитные системы организма - иммунокомпетентную, кроветворную, макрофагальную и др. Интоксикация часто оказывает определяющее влияние на течение и характер воспаления. С этим в первую очередь связана недостаточная эффективность воспаления, например, при остром разлитом перитоните, ожоговой болезни, травматической болезни и многих хронических инфекционных заболеваниях.

Морфология воспаления

В своем развитии воспаление проходит 3 стадии, последовательность которых и определяет течение всего процесса.

Стадия альтерации

А. Стадия альтерации (повреждения) - начальная, пусковая стадия воспаления, характеризующаяся повреждением тканей. В этой стадии развивается хелюаттракция, т.е. привлечение к очагу повреждения клеток, продуцирующих медиаторы воспаления, необходимые для включения в процесс сосудистой реакции. Хемоаттрактанты - вещества, определяющие направление движения клеток в тканях. Они продуцируются микробами, клетками, тканями, содержатся в крови. Непосредственно после повреждения из тканей выделяются такие хемоаттрактанты, как просеринэстераза, тромбин, кинин, а при повреждении сосудов - фибриноген, активированные компоненты комплемента.

В результате совокупной хемоаттракции в зоне повреждения возникает первичная кооперация клеток, продуцирующих медиаторы воспаления, - скопление лаброцитов, базофильных и эозинофильных гранулоцитов, моноцитов, клеток APUD-системы и др. Только находясь в очаге повреждения, эти клетки обеспечивают выброс тканевых медиаторов и начало воспаления.

В результате действия тканевых медиаторов воспаления в зоне повреждения происходят следующие процессы:

* повышается проницаемость сосудов микроциркуляторного русла;

* в соединительной ткани развиваются биохимические изменения, приводящие к задержке в тканях воды и к набуханию внеклеточного матрикса;

* инициальная активация плазменных медиаторов воспаления под влиянием повреждающего фактора и тканевых медиаторов;

* развитие дистрофических и некротических изменений тканей в зоне повреждения;

* высвобождающиеся из клеточных лизосом и активирующиеся в очаге воспаления гидролазы (протеазы, липазы, фосфолипазы, эластазы, коллагеназы) и другие ферменты играют существенную роль в развитии повреждений клеток и неклеточных структур:

* нарушения функций, как специфических - того органа, в котором возникла альтерация, так и неспецифических - терморегуляции, местного иммунитета и др.

Фазы воспаления



Действие медиаторов воспаления плазменного (гуморального) происхождения

Стадия экссудации

Экссудация - фаза, быстро следующая за альтерацией и выбросом медиаторов. Она складывается из ряда стадий: реакция микроциркуляторного русла с нарушениями реологических свойств крови; повышение сосудистой проницаемости на уровне микроциркуляторного русла; экссудация составных частей плазмы крови; эмиграция клеток крови; фагоцитоз; образование экссудата и воспалительного клеточного инфильтрата.

Действие медиаторов воспаления клеточного (тканевого) происхождения

Реакция микроциркуляторного русла с нарушениями реологических свойств крови - один из ярких морфологических признаков воспаления. Изменения микрососудов начинаются с рефлекторного спазма, уменьшения просвета артериол и прекапилляров, которое быстро сменяется расширением всей сосудистой сети зоны воспаления и прежде всего посткапилляров и венул. Воспалительная гиперемия обусловливает повышение температуры и покраснение воспаленного участка. При начальном спазме ток крови в артериолах становится ускоренным, а затем замедленным. В лимфатических сосудах, как и в кровеносных, вначале происходит ускорение лимфотока, а затем его замедление. Лимфатические сосуды переполняются лимфой и лейкоцитами.

В бессосудистых тканях (роговица, клапаны сердца) в начале воспаления преобладают явления альтерации, а затем происходит врастание сосудов из соседних областей (это происходит очень быстро) и включение их в воспалительную реакцию

Изменения реологических свойств крови состоят в том, что в расширенных венулах и посткапиллярах при замедленном токе крови нарушается распределение в кровяном потоке лейкоцитов и эритроцитов. Нейтрофилы выходят из осевого тока, собираются в краевой зоне и располагаются вдоль стенки сосуда. Краевое расположение нейтрофилов сменяется их краевым стоянием, которое предшествует эмиграции за пределы сосуда.

Изменения гемодинамики и сосудистого тонуса в очаге воспаления приводят к стазу в посткапиллярах и венулах, который сменяется тромбозом. Те же изменения возникают и в лимфатических сосудах. Таким образом, при продолжающемся притоке крови в очаг воспаления отток ее, а также лимфы нарушается. Блокада отводящих кровеносных и лимфатических сосудов позволяет очагу воспаления выполнять роль барьера, предупреждающего генерализацию процесса.

Повышение сосудистой проницаемости на уровне микроциркуляторного русла является одним из существенных признаков воспаления. Вся гамма тканевых изменений, своеобразие форм воспаления в значительной мере определяются состоянием сосудистой проницаемости, глубиной ее повреждения. Большая роль в осуществлении повышенной проницаемости сосудов микроциркуляторного русла принадлежит поврежденным ультраструктурам клеток, что приводит к усилению микропиноцитоза. С повышенной сосудистой проницаемостью связаны экссудация в ткани и полости жидких частей плазмы, эмиграция клеток крови, образованиеэкссудата (воспалительного выпота) и воспалительного клеточного инфильтрата.

Экссудация составных частей плазмы крови рассматривается как проявление сосудистой реакции, развивающейся в пределах микроциркуляторного русла. Она выражается в выходе за пределы сосуда жидких составных частей крови: воды, белков, электролитов.

Эмиграция клеток крови, т.е. выход их из тока крови через стенку сосудов, осуществляется с помощью хемотаксических медиаторов Как уже было сказано, эмиграции предшествует краевое стояние нейтрофилов. Они прилипают к стенке сосуда (в посткапиллярах и венулах), затем образуют отростки-псевдоподии, которые проникают между эндотелиальными клетками - межэндотелиальная эмиграция Базальную мембрану нейтрофилы преодолевают, вероятнее всего, на основе феноменатиксотропии (тиксотропия - изометрическое обратимое уменьшение вязкости коллоидов), т.е. перехода геля мембраны в золь при прикосновении клетки к мембране. В околососудистой ткани нейтрофилы продолжают свое движение с помощью псевдоподий. Процесс эмиграции лейкоцитов носит название лейкодиапедеза, а эритроцитов эритродиапедеза.

Фагоцитоз (от греч. phagos - пожирать и kytos - вместилище) - поглощение и переваривание клетками (фагоцитами) различных тел как живой (бактерии), так и неживой (инородные тела) природы. Фагоцитами могут быть разнообразные клетки, но при воспалении наибольшее значение приобретают нейтрофилы и макрофаги.

Фагоцитоз обеспечивается рядом биохимических реакций. При фагоцитозе уменьшается содержание гликогена в цитоплазме фагоцита, что связано с усиленным анаэробным гликогенолизом, необходимым для выработки энергии для фагоцитоза; вещества, блокирующие гликогенолиз, подавляют и фагоцитоз.

Фагоцитирующий объект (бактерия), окруженный инвагинированной цитомембраной, образует фагосому. При слиянии ее с лизосомой возникает фаголизосома (вторичная лизосома), в которой с помощью гидролитических ферментов осуществляется внутриклеточное переваривание - завершенный фагоцитоз. В завершенном фагоцитозе большую роль играют антибактериальные катионные белки лизосом нейтрофилов; они убивают микробы, которые затем перевариваются. В тех случаях, когда микроорганизмы не перевариваются фагоцитами, чаще макрофагами и размножаются в их цитоплазме, говорят о незавершенном фагоцитозе, или эндоцитобиозе. Таким образом, фагоцитоз не всегда является защитной реакцией организма и иногда создает предпосылки для диссеминации микробов. Образование экссудата и воспалительного клеточного инфильтрата завершает описанные выше процессы экссудации. Выпот жидких частей крови, эмиграция лейкоцитов, диапедез эритроцитов ведут к появлению в пораженных тканях или полостях тела воспалительной жидкости - экссудата. Накопление экссудата в ткани ведет к увеличению ее объема, сдавлению нервных окончаний и появлению боли, возникновение которой при воспалении связывают и с воздействием медиаторов (брадикинин), к нарушению функции ткани или органа.

Обычно экссудат содержит более 2% белков. В зависимости от степени проницаемости стенки сосуда, в ткань могут проникать разные белки. При небольшом повышении проницаемости сосудистого барьера через него проникают в основном альбумины и глобулины, а при высокой степени проницаемости наряду с ними выходят и крупномолекулярные белки, в частности фибриноген. В одних случаях в экссудате преобладают нейтрофилы, в других - лимфоциты, моноциты и гистиоциты, в третьих - эритроциты. При скоплении в тканях клеток экссудата, а не жидкой его части говорят о воспалительном клеточном инфильтрате, в котором могут преобладать как гематогенные, так и гистиогенные элементы.

Продуктивная (пролиферативная) стадия

Пролиферация (размножение) клеток является завершающей фазой воспаления, направленной на восстановление поврежденной ткани. Возрастает число мезенхимальных камбиальных клеток, В- и Т-лимфоцитов, моноцитов. При размножении клеток в очаге воспаления наблюдаются клеточные дифференцировки и трансформации. На различных этапах пролиферации фибробластов образуются продукты их деятельности - белок коллаген и гликозаминогликаны, появляются аргирофильные и коллагеновые волокна, межклеточное вещество соединительной ткани. В процессе пролиферации при воспалении участвует и эпителий, что особенно выражено в коже и слизистых оболочках (желудок, кишечник). При этом пролиферирующий эпителий может образовывать полипозные разрастания. Пролиферация клеток на поле воспаления служит репарации. При этом дифференцировка пролиферирующих эпителиальных структур возможна лишь при созревании и дифференцировке соединительной ткани (Гаршин В.Н., 1939). Воспаление со всеми его компонентами появляется только на поздних этапах внутриутробного развития. У плода, новорожденного и ребенка воспаление имеет ряд особенностей. Первой особенностью воспаления является преобладание альтеративного и продуктивного его компонентов, так как они филогенетически более древние. Второй особенностью воспаления, связанной с возрастом, является склонность местного процесса к распространению и генерализации в связи с анатомической и функциональной незрелостью органов иммуногенеза и барьерных тканей.



Дифференцировка и трансформация клеток при воспалении

3. Методы исследования крови

Лейкоциты или белые кровяные тельца представляют собой клетки иммунной системы, которые защищают человеческий организм от инфекций и вирусов. Именно они представляют собой главный барьер, который является препятствием для проникновения в организм тех или иных инфекций. В состав данных клеток входят особые ферменты, которым свойственно как бы переваривать различные микроскопические организмы. Помимо этого именно эти клетки помогают не только связывать, но еще и расщеплять инородные белковые компоненты, а также продукты распада, которые формируются в человеческом организме в результате их жизнедеятельности. Увеличение числа данных кровяных телец в крови в большинстве случаев является сигналом того, что в человеческом организме поселилась инфекция. Снижение уровня лейкоцитов в крови практически всегда отмечается при ослаблении иммунной защиты организма. Норма содержания лейкоцитов в крови, в случае если человек полностью здоров, количество белых кровяных телец в его крови должно равняться 4,0-9,0 х 109/л.

3.1 Метод подсчета количества лейкоцитов

Определение количества лейкоцитов в счетной камере: Подсчет лейкоцитов под микроскопом проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч после взятия крови.

Реактивы: 3-5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный несколькими каплями раствора метиленового синего (для окраски ядер лейкоцитов). Раствор голубого цвета, длительно годен к употреблению.

Ход определения: В пробирку с 0,4 мл уксусной кислоты набирают из пальца 20 мкл крови (разведение 1:20). Можно использовать стабилизированную антикоагулянтом венозную кровь. Выдувают кровь из пипетки на дно пробирки, затем тщательно перемешивают, повторно набирая и выдувая. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении на 1 мин (для оседания лейкоцитов). Лейкоциты подсчитывают в 100 больших квадратах с малым увеличением (окуляр 10х, объектив 8х). Для большей точности счет лейкоцитов проводят по всей сетке в больших квадратах, неразделенных на малые квадраты и полосы, начиная с левого верхнего угла сетки.

Расчет числа лейкоцитов проводят по формуле:

Х - число лейкоцитов в 1 мкл крови,

а - число лейкоцитов в 100 больших

квадратах,

20 - разведение крови,

100 - число подсчитанных квадратов,

250-объем одного большого квадрата 1/250.

Таким образом, количество лейкоцитов, подсчитанных в 100 больших квадратах, умножают на 50.

При наличии в периферической крови ядросодержащих клеток красного ряда, они не лизируются и подсчитываются вместе с лейкоцитами. В этом случае, чтобы определить истинное количество лейкоцитов, из общего числа посчитанных клеток вычитают количество клеток красного ряда.

Основные источники ошибок при подсчете лейкоцитов в камере:

1. Неправильное соотношение объемов крови и уксусной кислоты, взятые в пробирку.

2. Неправильно подготовленный раствор уксусной кислоты

3. Длительное нахождение пробы при температуре выше 28°С, что может ускорить лизис лейкоцитов в образце и привести к занижению результата.

4 Неправильное заполнение камеры Горяева. Как и при подсчете эритроцитов, камеру необходимо оставлять на 1 минуту для оседания клеток.

5 Недостаточно хорошо отмытая после предыдущего определения камера Горяева.

Оставшиеся в камере лейкоциты могут завышать результаты анализа.

3.2 Методы исследования белой крови

1. Лейкоцитарная формула

Лейкограмма, или как еще называют лейкоцитарная формула, представляет собой соотношение в крови тех или иных форм кровяных клеток, которое выражено в процентах.

Формы лейкоцитов в крови	Процент содержания	Абсолютное значение лейкоцитов в крови (число клеток Ч 109/л)
Лимфоциты	19-37	1,20-3,00
Моноциты	3-11	0,09-0,60
Нейтрофилы палочкоядерные	1-6	0,04-0,30
Нейтрофилы сегментоедерные	47-72	2,00-5,50
Базофилы	0-1	0,0-0,065
Эозинофилы	0,5-5,0	0,02-0,30

Существует пять видов лейкоцитов (лимфоциты, нейтрофилы, моноциты, эозинофилы, базофилы), каждый из них выполняет определенную функцию. Процентное содержание одних видов лейкоцитов уменьшается или увеличивается в организме за счет уменьшения или увеличения других видов лейкоцитов. Те или иные формы белых кровяных телец принимают участие в разнообразных защитных реакциях человеческого организма. В результате, благодаря результатам анализа лейкоцитарной формулы можно получить сведения относительно характера имеющейся патологии. Увеличение числа самых молодых, а также палочкоядерных нейтрофилов принято считать сигналом омоложения крови. В таких случаях специалисты говорят о сдвиге лейкоцитарной формулы влево. Данного рода сдвиг особенно часто отмечается при воспалительных и инфекционных патологиях. Порой он наблюдается и при белокровии, сопровождающемся чрезмерной выработкой лейкоцитов.

2. Ручной метод определения лейкоцитов в крови (окрашивание краской Романовского-Гимза)

Краска Романовского-Гимза состоит из смеси азура, эозина и метиленовой сини. Непосредственно перед употреблением к 10 мл дистиллированной воды нейтральной или слабо щелочной реакции (pH 7,0 - 7,2) прибавляют 10 капель коммерческого красителя Романовского-Гимза. Приготовленный раствор краски тотчас же наливают на фиксированный мазок или лучше предметное стекло с окрашиваемым препаратом погружают в стаканчик с краской. Через 1 ч краску сливают, препарат промывают водой и высушивают на воздухе. После завершения окраски мазки промываются в проточной воде, сушатся на воздухе и исследуются с помощью масляных импрессий (кедровое масло).

Краска Романовского-Гимза, имеющая в растворе сине-фиолетовый цвет, окрашивает протоплазму форменных элементов ткани в голубовато-синий цвет, а ядра клеток, также как и микробные тела, в фиолетово-красный.

В завершении высчитывают лейкоцитарную формулу на приборе minilab.

3. Камера Горяева. (определение лейкоцитов в крови)

Забор и разведение крови осуществляют пробирочным методом. В пробирку вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение 1:21 можно практически считать равным 1:20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5% раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так, же как для подсчета эритроцитов. Подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных). Расчет числа лейкоцитов осуществляется по формуле: В х 4000 х 20/ 1600, где В-количество лейкоцитов подсчитанных в камере. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл достаточно полученную при подсчете сумму разделить пополам и приписать два нуля. При определении количества лейкоцитов камерным методом ошибка составляет в среднем +7%.

3.3 Анализаторы

В ходе практического занятия проходящего в психоневрологическом диспансере по адресу: г. Тверь, ул. Фурманова, 12, под руководством зав. кафедры Воскресенской Н.П, нас ознакомили с методами исследования клеток крови. Анализ проведения осуществлялся как ручным методом, так и с помощью специальных анализаторов:

1. Глюкометр (для определения наличия сахара в крови)

2. Анализатор Mythic 18 (для клинического анализа крови)

3. Биохимический анализатор APEL-101 (для определения глюкозы, креатинина)

4. Анализатор Микролаб-540 (для определения гемоглобина, глюкозы, холестерина, белка)

Размещено на Allbest.ru