Лабораторные методы исследования в клинике детской терапевтической стоматологии

Размещено на http://allbest.ru

Казахстанско-Российский медицинский университет

Кафедра стоматологии и ЧЛХ

СРС на тему:

Лабораторные методы исследования в клинике детской терапевтической стоматологии

Выполнила: Рахманбаева Камила

Группа: 504 «Б»

Алматы 2014

Введение

Лабораторная диагностика основана на применении как общеклинических, так и сложных биохимических и морфологических методов.

Изучение микроскопического строения различных объектов позволяет определять клеточный и бактериальный состав раневой поверхности, качественные изменения клеток слизистой оболочки.

Необходимо проведение клинических анализов крови (общего, на содержание глюкозы для исключения сахарного диабета), а также определение содержания иммуноглобулинов для исключения иммуноглобулинемии, анализ мочи общий, а при подозрении на

Х-гистиоцитоз -- на нейтральный жир. По показаниям проводят цитологические и микробиологические методы исследования пародонтальных карманов.

Основные современные лабораторные методы исследования:

1.Микробиологический

2. морфологические (цитологическое исследование)

3.Биохимический

4.общеклинические (клинический анализ крови, мочи)

5.Иммунологический

Микробиологическое исследование

Главную роль в развитии воспалительных заболеваний пародонта играет бактериальная флора зубного налета, которая является первичным фактором, вызывающим повреждение пародонта.

Позволяют выявить причину воспаления (вид возбудителя заболевания), определить степень его чувствительности к антибиотикам, определить тактику лечения некоторых форм пародонтита. Исследование обычно проводиться до и после лечения для контроль качества лечения.

Взятие материала для микробиологического исследования осуществляют стерильным ватным тампоном или турундой с пародонтального кармана. Десневую жидкость получают с помощью капиллярных трубочек или фильтровальной бумаги. Далее тампон (турунду, фильтровальная бумага) промывают в 10 мл изотонического раствора натрия хлорида, получают суспензию микроорганизмов и осуществляют ее посев на специальные питательные среды. После выращивания культуры ее идентификации подсчитывают количество колоний и определяют их чувствительность к антибиотикам.

При микробиологическом исследовании необходимо соблюдать определенные правила. К взятию материала нельзя принимать никаких лекарственных средств, полоскать рот или чистить зубы. Непосредственно перед взятием материала следует промыть рот теплой водой, очистить поверхность язвы стерильным марлевым тампоном, после чего взять материал из глубины язвы и срочно направить в лабораторию. Материал берут стерильными плотно свернутыми из ваты шариками диаметром 2-5 мм или микробиологической петлей. Высевают его на специальные питательные среды в пробирки или на чашки Петри.

Изменения состава микрофлоры слизистой оболочки ротовой полости условно разделяют на 4 категории:

- Дизбиотичне сдвиги (латентная или компенсова форма);

- Дисбактериоз I-II степени (субкомпенсированная форма);

- Дисбактериоз III степени;

- Дисбактериоз IV степени.

Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам определяют по диаметру окружности свободной от колоний зоны вокруг диска , которая свидетельствует о задержке роста микрофлоры:

-Чувствительный

-Среднечувствительный

-Устойчивый

Цитологическое исследование

Основан на изучении структурных особенностей клеточных элементов и их конгломератов. В стоматологии его применяют для диагностики и определения эффективности лечения деструктивных процессов челюстно-лицевой области.

Они позволяют безболезненно и за короткое время определить характер патологических изменений, происходящих в тканях, проследить динамику процессов в очаге поражения, оценить эффективность лечения.

Объектом исследования служат эрозии, язвы, трещины, пузырьки и пузыри, особенно с признаками гиперкератоза по периферии. Цитологическое исследование проводят в день осмотра больного. Перед исследованием больной полощет рот водой, после чего берут материал на исследование следующими способами.

Первый способ. Предметное стекло после обработки спиртом и высушивания прикладывают к исследуемому участку слизистой оболочки, делают несколько отпечатков с пораженного места и других участков слизистой полости рта.

Второй способ. Мазок берут и переносят на предметное стекло с помощью стерильной ученической резинки.

Третий способ. Забор материала берут путем соскоба. Этот метод применяют при наличии язв, когда трудно взять мазок. Соскоб берут гладилкой, шпателем для замешивания или кюретажной ложечкой, наносят на предметное стекло, высушивают на воздухе и фиксируют спиртом. Существует много модификаций окраски мазков для определения характера опухолевого процесса.

После взятия материала его фиксируют и окрашивают. Полученные препараты изучают в световом Для цитологического исследования содержимого десневой борозды десневой жидкости собирают с помощью стерильных нитей, которые готовят из марли. После высушивания участка обследования нити помещают на дно борозды или кармана тупым зондом с апроксимальных поверхности зубов на 5-8 мин.

После удаления нити готовят мазки-отпечатки, фиксируют их, окрашивают по Романовскому-Гимзе и подсчитывают число клеточных элементов на 100 клеток. Содержание пародонтальных карманов изучают также по методу П. Н. Покровского и М. С. Макаровой в модификации И. А. Бенюмовои (1962).

Цитограмма десневых карманов (Г.М. Барер, Т.И.Лемецька, 1996)

Клеточные элементы в десневой жидкости (%) интактных пародонт Гингивит Пародонтит

Нейтрофилы 2,2 +0,2 83,0 ± 4,9 80,7 ± 2,4

Макрофаги - 0,23 ± 0,01 1,9 ± 0,15

Гистиоциты - 3,0 ± 0,3 5,8 ± 0,21

Эпителиальные клетки 4,2 +0,3 9,4 +0,9 9,1 ± 0,5

Пародонтальные карманы предварительно промывают изотоническим раствором хлорида натрия, стерильной корневой иглой с турундой проводят забор материала и переносят ее на предметное стекло. Препарат фиксируют смесью Никифорова и красят по Граму и Гимза - Романовскому. Микроскопически изучают клеточный состав экссудата, оценка которого позволяет получить представление о защитную реакцию тканей пародонта (наличие или отсутствие фагоцитоза, незавершенный фагоцитоз).

Определяют качественное состояние и количество нейтрофилов, стадию их дистрофии. Обращают внимание на наличие других клеточных элементов: лимфоцитов, полибласты, эпителиальных и плазматических клеток.

Четвертый способ. Метод эмиграции лейкоцитов в ротовую полость (метод Ясиновского) Используют для определения состояния защитных реакций тканей пародонта, степени фагоцитоза и характера реакции воспаления. Для взятия материала проводят полоскания рта 10 мл изотонического раствора натрия хлорида в течение 30 сек (первые три порции сплевывают, следующие три собирают в пробирки для исследования).

Смывы в разведении 1: 9 тщательно перемешивают, подкрашивают 1% водным раствором трипанового синего и 1% водным раствором конго красного (по 1 капле). Пипеткой заполняют специальную камеру. Через 5-10 мин после оседания лейкоцитов выполняют подсчеты в 10 полях зрения с учетом живых и мертвых лейкоцитов, а также клеток плоского эпителия по показателям: среднего числа лейкоцитов в одном поле зрения (живых и мертвых отдельно) и клеток плоского эпителия; количества лейкоцитов, эмигрировавших в 1 мл смывной жидкости по Ясиновскому.

Для определения качественной характеристики клеточных элементов смыва с осадка готовят мазки, фиксируют их в этиловом спирте, окрашивают по Романовскому-Гимзе и подсчитывают относительное количество (на 100 клеток) неизмененных и измененных нейтрофильных лейкоцитов, фагоцитов и лимфоцитов, а также проводят дифференциацию эпителиальных клеток по степени зрелости. В норме 80% лейкоцитов, эмигрировавших в ротовой полости, жизнеспособные, подвижные и способны к фагоцитозу течение 2,5 час.

Оценивается качественный и количественный состав клеток, особенности их окраски. Обращают внимание на такие параметры, как окраска цитоплазмы (базофилия), дистрофические и некротические изменения, фагоцитоз, наличие микробов, агрегация (слипание) клеток и др. Количественные и качественные изменения клеток позволяют судить о развитии воспаления, его активности, направлении развития патологического процесса. По выявленным изменениям можно судить о качественных и количественных изменениях в слизистой оболочке, активность воспаления, степень деструкции тканей, а также отслеживать изменения в динамике.

Интерпретация показателей: Цитологический метод предназначен для оценки воспалительного и деструктивного процессов в пародонте.

Интенсивность воспаления определяется воспалительно-деструктивным индексом (ВДИ). В норме ВДИ= от 0 до 20 ед.

Индекс деструкции (ИД) и ВДИ плотно коррелирует со степенью тяжести воспалительных и деструктивных изменений в пародонте. Так, при гингивите ИД возрастает до 700-1000 ед., ВДИ составляет от 21.0 до 50.0 ед. при пародонтите ИД= 1100-6000 ед., ВДИ= от 9,0 до 50,0 ед.

В ходе лечения снижаются эти индексы, степень снижения соответствует эффективности лечения.

Биохимический метод

Это, прежде всего, биохимический анализ крови. Проводится с целью выявления причины воспаления, сдвигов обменных процессов

Исследование на содержание глюкозы проводят при подозрении на сахарный диабет (сухость во рту, хронический рецидивирующий кандидоз, болезни пародонта и др.).

Для ранней диагностики болезней пародонта используют определение в сыворотке крови и слюне содержания нейраминовой кислоты, фукозы, оксипролина в моче, содержание ферментов протеолиза и их ингибиторов в сыворотке крови и слюне.

Сравнительная оценка этих цифровых показателей до и после лечения рассматривается как тест эффективности лечения.

Содержание витамина Е в крови определенной мере отражает содержание токоферола ацетата в сыворотке крови. Показано определение токоферола ацетата у подростков при физиологическом и особенно патологическом половом созревании.

Насыщение тканей аскорбиновой кислотой уменьшает проницаемость капилляров, стимулирует функциональную деятельность органов и тканей, оказывает положительное влияние на обмен коллагена и др.. Для определения тканевой насыщенности витамином С на слизистую оболочку спинки языка инъекционной иглой наносят каплю индикатора (0,06% раствор натриевой соли 2,6-дихлорфенолиндофенола), который восстанавливается аскорбиновой кислотой при комнатной температуре, - индикатор обесцвечивается.

Время обесцвечивания раствора определяется в секундах. При анализе результатов языковой пробы следует учитывать сезонные колебания содержания в тканях аскорбиновой кислоты.

Пробу Роттера и «языковую» пробу применяют для выявления насыщенности организма витамином С. При постановке пробы Роттера 0,1 мл 0,0025 N свежего раствора красителя Тильманса вводят внутрикожно на внутренней стороне предплечья, время обесцвечивания раствора в случае достаточной насыщенности организма витамином С не превышает 10 мин. Языковая проба: на высушенную поверхность спинки языка инъекционной иглой (диаметр 0,2 мм) с шприца наносят одну каплю индикатора - 0,06% раствора натриевой соли 2,6-дихлорфенолиндофенола (краситель Тильманса), что восстанавливается аскорбиновой кислотой при комнатной температуре, обесцвечивая при этом индикатор. Время обесцвечивания раствора, больше чем 16-20 с, свидетельствует о дефиците аскорбиновой кислоты.

Общий клинический анализ крови

Общий клинический анализ крови - самый распространенный анализ, сдавать который приходилось каждому человеку.

Общей анализ крови широко используется как один из важнейших методов обследования при большинстве заболеваний, а в диагностике заболеваний системы кроветворения - ему отводится ведущая роль. Изменению, происходящие в крови, чаще неспецифические, но в то же время отражают изменения целого организма.

Общий анализ крови включает:

1. изучение количественного и качественного состава форменных элементов крови (клеток крови):

a) определение числа, размеров, формы эритроцитов и содержание в них гемоглобина;

b) определение гематокрита (отношение объема плазмы и форменных элементов);

c) определение общего числа лейкоцитов и процентного соотношения отдельных форм среди них (лейкоцитарная формула);

d) определение числа тромбоцитов

2. исследование СОЭ

Подготовка к исследованию: Специальной подготовки к исследованию не требуется.

Рекомендуется осуществлять забор крови натощак или как минимум через 2 часа после последнего приема пищи.

Материал для исследования: цельная кровь (с ЭДТА).

Норма элементов крови

1. Гемоглобин: (Hb, hemoglobin) - основной компонент эритроцитов (красные кровяные тельца крови), представляет собой сложный белок, состоящий из гема (железосодержащие часть Hb) и глобина (белковая часть Hb).

Возраст	пол	Уровень гемоглобина, г / л
меньше 2 недель		134 - 198
2 недели - 1 месяц		107 - 171
1 - 2 месяца		94 - 130
2 - 4 мес		103 - 141
4 - 6 мес		111 - 141
6 - 9 мес		114 - 140
9 - 12 мес		113 - 141
1 - 6 лет		110 - 140
6 - 9 лет		115 - 145
9 - 12 лет		120 - 150
12 - 15 лет	Ж	115 - 150
	М	120 - 160
15 - 18 лет	Ж	117 - 153
	М	117 - 166

2. Эритроциты: (красные кровяные тельца, red blood cells, RBC) - наиболее многочисленные форменные элементы крови, содержащие гемоглобин,транспортирующие кислород и углекислый газ

Возраст	пол	Уровень эритроцитов, х10 12 клеток / л
меньше 2 недели		3,9 - 5,9
2 недели - 1 месяц		3,3 - 5,3
1 - 2 месяца		3,5 - 5,1
2 - 4 мес		3,9 - 5,5
4 - 6 мес		4,0 - 5,3
6 - 9 мес		4,1 - 5,3
9 - 12 мес		3,9 - 5,9
1 - 3 года		3,8 - 4,9
3 - 6 лет		3,7 - 4,9
6 - 9 лет		3,8 - 4,9
9 - 12 лет		3,9 - 5,1
12 - 15 лет	Ж	3,8 - 5,0
	М	4,1 - 5,2
15 - 18 лет	Ж	3,9 - 5,1
	М	4,2 - 5,6

3.Лейкоциты: (белые кровяные тельца, white blood cells, WBC) - это форменные элементы крови

Возраст	Уровень лейкоцитов, х 10 9 клеток /л
Дети до 1 года	6,0 - 17,5
1 - 2 года	6,0 - 17,0
2 - 4 года	5,5 - 15,5
4 - 6 лет	5,0 - 14,5
6 - 10 лет	4,5 - 13,5
10 - 16 лет	4,5 - 13,0
Дети старше 16 лет	4,5 - 11,0

Лейкоцитарная формула: (Differential White Blood Cell Count, лейкограма) - это процентное соотношение различных видов лейкоцитов.

Возраст	Нейтрофилы а/с (%)	Эозинофилы(%)	Базофилы(%)	Лимфоциты(%)	Моноциты(%)	Нейтрофилы с/я (%)
От 0 до 2 недель	1-5	1-6	0-1	22-55	5-15	30-50
2 недель до 1 года	1-5	1-5	0-1	45-70	4-10	16-45
1года до2 лет	1-5	1-7	0-1	37-60	3-10	28-48
2 лет до 5 лет	1-5	1-6	0-1	33-55	3-9	32-55
5 лет до 7 лет	1-5	1-5	0-1	30-50	3-9	38-58
7 лет до 9 лет	1-5	1-5	0-1	30-50	3-9	41-60
9 лет до 11 лет	1-5	1-5	0-1	30-46	3-9	43-60
11 лет до 15 лет	1-5	1-5	0-1	30-46	3-9	45-60
15 лет и старше	1-5	1-5	0-1	19-37	3-10	47-72

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ, Erythrocyte sedimentation rate, ESR) - показатель скорости разделения крови в пробирке с добавленным антикоагулянтом на 2 слоя: верхний (прозрачная плазма) и нижний (эритроциты, осевшие)

Возраст	пол	СОЭ, мм/ч
Дети до 10 лет		0-10
11- 50 лет	М	0 - 20
	Ж	0 - 15

Биохимический анализ крови

Это лабораторный метод исследования, используемый в медицине, который отражает функциональное состояние органов и систем организма человека. Для биохимического анализа крови нужно подготовиться. Не надо принимать пищу примерно за 6 - 12 часов до исследования. Из жидкости нельзя пить соки, молоко, алкоголь, сладкий чай или кофе. Можно пить воду. Дорогие продукты влияют на показатели крови, они могут привести к неправильным данных чревато неправильное лечение. Взятие крови производится как правило в положении сидя или лежа. На руку выше локтя накладывается специальный жгут. Место забора крови предварительно обрабатывается антисептиком для предупреждения инфицирования. В вену вводится игла и осуществляется забор крови. Кровь переливается в пробирку и отправляется с направлением в биохимическую лабораторию показатель результат норма показатель результат норма

Показатель	Норма
Общий белок	63-84 г/л
Билирубин общий	8,6-20,5 мкмоль/л
Прямой	1,7-5,0 мкмоль/л
АЛТ	0,1-0,7 мккат/л
АСТ	0,1-0,7 мккат/л
Щёлочная фосфатаза	64-306 од/л дети до 644 од/л
Мочевина	1,66-8,30 мкмоль/л
Амилаза	3,3-8,9 мг/(с*л)
Мочевая к-та	0,16-0,45 мкмоль/л
Калий	3,6-5,5 ммоль/л
Креатинин	44-106 мкмоль/л
Натрий	135-155 ммоль/л
Пр. Вельтмана	0,4-0,5 мл
Тимоловая пр.	0-5 од.
Глюкоза	3,61-6,11 ммоль/л
Магний	0,80-1,0 ммоль/л
Холестерин	3,0-5,20 ммоль/л
Железосвязующая способность	44,77-71,64 мкмоль/л
б - холестерин	М. 0,9-1,4 ммоль/л Ж. 1,2-1,7 ммоль/л
Железо	М. 10,6-28,3 ммоль/л Ж. 6,6-26,0 ммоль/л
в-липопротеиды.	25-55 од
Хлориди	95-108 ммоль/л
Общие липиди	9,39 од/л
Триглицериды 0,50-1,88	4-8 г/л ГГТП
Кальций	2,02-2,60 ммоль/л
Фосфор	0,81-1,48 ммоль/л

Исследование мочи

Проводят при воспалительных процессах CO и патологии пародонта (с целью выявления заболевания почек), а также для определения уровня глюкозы в моче и своевременной диагностики сахарного диабета (при сухости в полости рта).

Иммунологические методы

При заболеваниях пародонта наблюдаются значительные изменения общего и местного иммунитета. Часто они первичны и способствуют возникновению патологического процесса. В то же время изменения иммунологической реактивности происходят в ответ на действие микробной флоры и продуктов ее жизнедеятельности на ткани пародонта и организма в целом.

Изучение и анализ динамики местной иммунологической реактивности и резистентности тканей пародонта и полости рта позволяют выделить важные этиопатогенетические аспекты патологии, имеют исключительное значение для прогнозирования, протекания и исхода заболеваний пародонта, а также для рационального построения терапевтических мероприятий.

Для изучения местной иммунологической реактивности, резистентности тканей пародонта и полости рта исследуются показатели неспецифической защиты, специфической защиты и индикаторы регуляторных факторов: лизоцим и иммуноглобулины (в ротовой жидкости), лизоцим сыворотки, фагоцитарная активность нейтрофилов крови, Т-система иммунитета (количество и функция), В-система иммунитета (количество и функция), десневые антигены, цитокины.

Изучение аутофлоры полости рта

Основным признаком угнетения иммунологической реактивности организма является наличие в полости рта кишечной палочки, которая у здоровых людей быстро погибает.

Метод ее проявления прост: стерильный диск с фильтровальной бумаги прикладывают к слизистой под языком, затем диск растирают в стерильной изотоническом растворе хлорида натрия и делают посев полученной суспензии на элективные среды Эндо.

При угнетении реактивности организма оказывается массивное заселения полости рта кишечной палочкой и протеем.

цитологический микробиологический пародонтальный

Проба Мак-Клюра-Олдрича

Проба служит для выявления скрытого отека и носит название пузырного. Она позволяет определить проницаемость соединительной ткани, ее склонность к отекам.

Методика проведения пробы следующая: 0,1 мл изотонического раствора хлорида натрия вводят под эпителий слизистой оболочки нижней губы.

В норме после введения раствора образуется маленький пузырь, который становится незаметным на глаз и на ощупь через 20 мин. Рассасывание пузыря за более короткий период времени свидетельствует о повышенной гидрофильности тканей. Это указывает на нарушение тканевой проницаемости, трофические нарушения и изменение функционального состояния соединительной ткани.

Определение степени эндогенной интоксикации организма

Эндогенная интоксикация представляет собой сложный, многокомпонентный процесс, обусловленный патологической биологической активностью эндогенных продуктов.

У больных пародонтитом источником эндогенной интоксикации является содержание пародонтальных карманов, особенно при абсцедирующая форме.

Определение степени интоксикации организма имеет важное значение и позволяет врачу правильно выработать тактику лечения.

Эндогенную интоксикацию оценивают по клиническим критериям (головная боль, тошнота, плохие сон и аппетит, недомогание), а также по таким лабораторных показателях, как лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) Кальф-Калифа.

ЛИИ рассчитывают по формуле:

ЛИИ = (4Ми + Зю + 2П + С) х (Пл + 1) (Л + Мон) х (Е + 1)

где: Ми - миелоциты; Ю - юные; П - палочкоядерные нейтрофилы;

С - сегментоядерные нейтрофилы; Пл - плазматические клетки;

Л - лимфоциты; Мон - моноциты; Э - эозинофилы.

Все показатели выражают в процентах.

Норма составляет 0,5-1,5.

Биопсия

Проводится в случаях, если затруднена дифференциальная диагностика заболеваний пародонта (болезни крови, злокачественные новообразования и др.).. Секущиеся участки пораженных тканей подвергают гистологическому исследованию.

Во проводниковой или инфильтрационной анестезией с помощью ножниц, скальпеля или специальных инструментов секут участок пораженной ткани.

Вывод

Лабораторные методы исследования осуществляются в лаборатории, после обследования пациента врач стоматолог отправляет больного на лабораторные исследования для уточнения диагноза и затем начинает лечение.

Если есть необходимость стоматолог проводит общее лечение совместно со специалистом.

Литература

1. Детская терапевтическая стоматология Курякина Н.В.

2. Грудянов, Зорина., Методы диагностики воспалительных заболеваний пародонта

3. Грудянов А.И. Пародонтология: Избр. лекции. - М., 1997. -- 32с

4. Н.Ф. Данилевський, А.В. Борисенко Заболевания пародонта Орехова Л. Ю. Заболевания

Размещено на Allbest.ru