- з п'ятої по дев'яту серії відтворювали пептичну виразку за Л.М.Тарасенко зі співавторами, причому тварини з шостої по дев'яту серії знаходилися в стані хронічної нітратної інтоксикації, а сьома, восьма та дев'ята серії отримували неселективний інгібітор NO-синтази - L-NAME (метиловий ефір нітро-L-аргініну), селективний інгібітор індуцибельної NO-синтази - аміногуанідин та субстрат NO-синтазної реакції - L-аргінін відповідно.

- в десятій та одинадцятій серіях відтворювали пептичну виразку за модифікованою методикою Okabe причому в одинадцятій серії на тлі хронічної інтоксикації нітратом натрію.

Евтаназію білих щурів проводили шляхом декапітації під ефірним наркозом.

Нами були використані дві методики відтворення експериментальної ПВ шлунка: за Л.М. Тарасенко, К.С. Непорадою, І.М. Скрипником із деякими змінами (взяття матеріалу проводили на 14, 30, 90 добу) та за модифікованою методикою S. Okabe et al. (взяття матеріалу проводили на 5-у, 7-у, 15-у та 21-у добу після операції). Перша модель відбиває провідні патогенетичні механізми розвитку ПВ у людини (хронічний психоемоційний стрес, цитотоксичний вплив жовчі на СОШ внаслідок дуоденального рефлюксу, зміни режиму харчування). Характерною рисою другої методики є можливість одержання ПВ у певному відділі шлунково-кишкового тракту, висока стабільність відтворення, простота і значний ступінь однорідності морфогенезу.

Хронічну інтоксикацію відтворювали шляхом введення нітрату натрію у дозі 200 мг/кг маси тіла у вигляді водного розчину інтрагастрально за допомогою спеціального зонду щоденно протягом 14, 30 та 90 діб. Для зміни режимів функціонування NO-синтаз використовували препарати виробництва “Sigma” (США): неселективний інгібітор NO-синтаз - L-NAME - вводили внутрішньоочеревинно в дозі 20 мг/кг двічі за 48 та 24 години перед початком відтворення ПВ (пептична виразка) за методом Л.М. Тарасенко зі співавторами; селективний інгібітор індуцибельної NO-синтази - аміногуанідин (Aminoguanidine) - вводили внутрішньоочеревинно в дозі 25 мг/кг двічі за 48 та 24 години перед початком відтворення ПВ за методом Л.М. Тарасенко зі співавторами; субстрат NO-синтазної реакції - L-аргінін - вводили в дозі 100 мг/кг маси інтрагастрально за три дні до початку відтворення ПВ за методом Л.М. Тарасенко зі співавторами.

Біохімічні методи дослідження. Утворення ^.О оцінювали при проведенні тесту з нітросинім тетразолієм (НСТ) (Цебржинский О.И., 2002). При цьому спектрофотометричним НСТ-тестом оцінюється продукція ^.О в гомогенаті тканин СОШ з індукторами у вигляді NADH, NADPH і пірогеналом. Принцип методу визначення концентрації ТБК-реактантів (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г., 1977) базується на здатності 2-тіобарбітурової кислоти (ТБК) утворювати стійкий забарвлений комплекс із малоновим діальдегідом та іншими проміжними оксопродуктами ПОЛ (пероксидне окиснення ліпідів). Приріст концентрації ТБК-реактантів при 1,5-годинній інкубації тканин дає інформацію про стан антиоксидантної системи. Принцип методу визначення активності супероксиддисмутази (Брусов О.С. и соавт., 1976) полягає в тому, що SOD інгібує аутоокислення адреналіну. За різницею швидкості реакції без додавання біологічного матеріалу та з його додаванням обчислюють активність ферменту. Визначення активності каталази (Архипова О.Г., 1980) ґрунтується на її здатності розкладати пероксид водню. Кількість останнього, що залишився в пробі, визначають титруванням 0,1 н розчином калію перманганату. Вміст аденозинтрифосфату (Beutler E. et al., 1975) визначали за допомогою вимірювання оптичної густини реагуючих речовин, яка пропорційна вмісту ATP у пробі. Вміст аденозинди- та монофосфату (ADP і AMP) (Jaworek D. et al., 1974) визначали в одній пробі за допомогою сполучених реакцій. Метод ґрунтується на тому, що AMP у присутності ATP перефосфорилюється ферментом міокіназою з утворенням двох молекул ADP. Молекули ADP фосфорилюються піруваткіназою за рахунок фосфоенолпірувату, який при цьому перетворюється на піруват, котрий можна визначити за допомогою індикаторної реакції з NADH (нікотинамідаденіндинуклеотид відновлений) та ЛДГ. На основі одержаних результатів обчислювали значення енергетичного потенціалу (ЕП) за формулою D.E.Atkinson. Принцип методу визначення вмісту фукози (Dishe i Shettles, 1948), заснований на фотометричному визначенні хромогену, що утворюється в умовах послідовної дії на фукозу сірчаною кислотою та солянокислим цистеїном. Вміст NАNА (N-ацетилнейрамінова кислота) в тканинах визначали за методом Гесса, принцип якого ґрунтується на утворенні хромогену сіаловими кислотами, які виділяються із складу глікопротеїдів у результаті гідролізу безбілкового фільтрату сироватки крові та гомогенату тканин, з розчином оцтової та сірчаної кислот у киплячій водяній бані. Вміст гексуронових кислот визначали карбазоловим методом (Шараев П.Н. и др., 1987), принцип якого базується на нагріванні досліджуваних біологічних субстратів з концентрованою сірчаною кислотою. У результаті реакції цукри перетворюються в альдегід фурфуролу або його гомологи, які з карбазолом утворюють хромоген фіолетово-рожевого кольору. Для оцінки кислотоутворюючої функції СОШ (Тарасенко Л.М., Скрипник І.М., 1998) у порожнину шлунка після перев'язки лігатурою нижнього відділу стравоходу за допомогою шприца через пілорус вводили 1,0 мл дистильованої води. Потім внутрішньошлункову рідину збирали в хімічний стаканчик і вимірювали рН універсальним іонометром И-130 2М з поправкою на розведення.У тканинах СОШ щурів визначали загальну протеолітичну активність за методом (Уголев A.M., Иезуитова Н.Н., Масевич Ц.Г., 1969), який ґрунтується на визначенні приросту гліцину, що утворюється в результаті гідролізу казеїну супернатантом гомогенату тканин. Протеолітичну активність розраховували в мкмолях відщепленого гліцину за 1 хв. інкубації на 1 г тканини.

Ступінь виразкового ушкодження розраховували із застосуванням системи балів (Яковлева Л.В., Оболенцева Г.В., Брюзгінова Л.П., 2001).

Дослідження зрізів проводили на цифровому мікроскопі фірми Olympus "ВХ 41" з використанням спеціальної програми “Olympus DP Soft” та наступним фотографуванням препаратів із дослідженням клітинних і стромальних елементів. Характер дольового співвідношення кровоносних мікросудин, м'язової та власної платівок слизової оболонки визначали з допомогою внутрішньоокулярної сітки (Автандилов Г.Г., 1980).

Для порівняння та оцінки достовірності отриманих результатів використовували розрахунок критерію достовірності Ст'юдента (t).

Результати досліджень. Через 14 діб від початку введення щурам нітрату натрію вірогідних змін загального фону продукції ^.О в тканинах СОШ білих щурів, його утворення мікросомальним і мітохондріальним електронно-транспортними ланцюгами не виявлено. Проте після 30-денного введення нітрату натрію вже відмічається зростання як загального фону продукції ^.О (на 18,1%, Р<0,05), так і його продукції мітохондріальним електронно-транспортним ланцюгом (на 27,1%, Р<0,05). При відтворенні 90-добової інтоксикації загальний фон продукції ^.О перевищує дані інтактної групи на 16,7% (р<0,05). Утворення ^.О мікросомальним і мітохондріальним електронно-транспортними ланцюгами зростає відповідно на 46,0% (р<0,001) та 41,3% (р<0,001). У той же час відмічається вірогідне зниження на 27,3% (р<0,01) утворення ^.О при використанні пірогеналу, що свідчить про зниження функціональної активності NADPH-оксидази лейкоцитів.

Через 14 діб від початку введення в організм білих щурів нітрату натрію вірогідних змін утворення ТБК-реактантів не виявлено. У цей період також відсутні достовірні зміни активності SOD і каталази. Після 30-ї доби інтоксикації вже відмічається вірогідне зростання концентрації ТБК-реактантів після 1,5-годинної інкубації тканин СОШ в залізоаскорбатному буферному розчині (на 29,8%, р<0,05). У цей же час спостерігається збільшення активності SOD на 29,3% (р<0,01) у порівнянні з даними інтактної групи тварин. Відомо, що біосинтез цього ферменту індукується субстратом (тобто ^.О), продукція якого після місячної інтоксикації суттєво зростає. Проте, у цей же період достовірно підвищується приріст концентрації ТБК-реактантів за час інкубації (на 30,1%, р<0,05), що вказує на загальне збідніння антиоксидантного потенціалу в тканинах СОШ білих щурів.

При відтворенні 90-добової інтоксикації концентрація ТБК-реактантів зростає до інкубації в 2,1 рази (р<0,001), а після 1,5-годинної інкубації в залізоаскорбатному буферному розчині - на 86,0% (р<0,001), що вказує на істотну активацію процесів ПОЛ у тканинах СОШ білих щурів. Відмічається суттєве підвищення приросту концентрації ТБК-реактантів за час інкубації (на 64,2%, р<0,001), що вказує на прогресування антиоксидантної недостатності в тканинах СОШ. Це також підтверджується зниженням активності SOD - на 31,5% (р<0,01), каталази - на 52,9% (р<0,001).

На 14 добу від початку введення білим щурам нітрату натрію вірогідні зміни концентрації та співвідношення аденіннуклеотидів, величини ЕП у тканинах СОШ відсутні. Через 30 діб від початку введення білим щурам нітрату натрію відмічається суттєве зниження концентрації AТP на 16,6% (р<0,05) та ЕП на 9,2% (р<0,01). Вміст AMP зростає в 3,2 рази (р<0,001), що свідчить про обмеження активності ресинтезу AТP у тканинах СОШ. Така динаміка залишається й у подальший період розвитку хронічної інтоксикації. Так, на 90 добу інтоксикації спостерігається зменшення в тканинах СОШ вмісту AТP на 24,9% (р<0,001), ADP - на 15,9% (р<0,05), ЕП - на 9,8% (р<0,001). Вміст AMP зростає в 3,0 рази (р<0,001).

Під впливом інтоксикації достовірних змін секреції HCl парієтальними клітинами шлунка не відмічається, про що свідчать величини рН внутрішньошлункової рідини: через 90 діб після введення нітрату натрію - 3,12±0,16; контроль (інтактна група) - 3,12±0,16 (р>0,05). На 14 та 30 добу хронічної інтоксикації нітратом натрію загальна протеолітична активність у СОШ істотно не змінюється. Після 90-денного введення нітрату натрію відзначається збільшення загальної протеолітичної активності в СОШ на 41,9% (р<0,05).

Встановлено, що вміст основного протектора слизової оболонки гастродуоденальної зони - фукози, що зв'язана з білками, за умов 90-добової інтоксикації достовірно не змінюється. Проте, у цей же час відмічається суттєве підвищення вмісту NANA (на 28,6%, р<0,05) та гексуронових кислот (на 32,9%, р<0,05), що свідчить про процес дезорганізації сполучнотканинних структур внаслідок деполімеризації неколагенових білків - глікопротеїнів і протеогліканів.

Після 90-денного введення нітрату натрію відмічаються суттєві зміни в СОШ білих щурів: у 40% тварин спостерігаються ерозивно-виразкові ураження. При цьому множинність ерозій і виразок на 1-го щура дорівнює відповідно 0,2 та 0,5. Середній ступінь виразки (СВ) у групі - 0,7; виразковий індекс - 0,28.

Хронічна інтоксикація нітратом натрію супроводжується істотними структурними змінами в СОШ, що полягають у розвитку дизрегенераторних процесів у вигляді атрофії та гіперплазії. У 40% білих щурів розвиваються ерозивно-виразкові ураження СОШ.

При відтворенні експериментальної ПВ (за Л.М.Тарасенко та співавт.) загальний фон продукції ^.О достовірно не відрізняється від даних інтактної групи. Проте за умов її моделювання на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) указаний показник на 22,2% (р<0,001) перевищує дані серії, у якій вводився нітрат без відтворення ПВ. При відтворенні експериментальної ПВ відмічається суттєве зростання продукції ^.О як мікросомальним і мітохондріальним електронно-транспортними ланцюгами, так і в результаті підвищення NADPH-оксидазної активності лейкоцитів (відповідно на 17,4% (р<0,02); 17,3% (р<0,05) та 50,0% (р<0,01)). За умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації вироблення ^.О мікросомальним електронно-транспортним ланцюгом збільшується на 61,1% (р<0,001), що перевищує величину серії, у якій відтворювали ПВ без введення нітрату на 37,3% (р<0,001). У цих же умовах продукція ^.О мітохондріальним електронно-транспортним ланцюгом збільшується на 58,6% (р<0,001), що на 12,3% (р<0,05) перевищує величину серії, у якій нітрат застосовували без відтворення ПВ, та на 35,2% (р<0,001) - величину серії, у якій відтворювали ПВ без введення нітрату натрію. У тих же умовах достовірні відмінності у виробленні ^.О електронно-транспортним ланцюгом фагоцитів у порівнянні з інтактною групою не відмічаються. Проте величина продукції ^.О NADPH-оксидазою лейкоцитів на 53,1% (р<0,05) перевищує величину серії, у якій нітрат вводили без відтворення ПВ. Це, очевидно, пов'язано зі збільшенням числа лейкоцитів (перш за все нейтрофілів та макрофагів) у місці пошкодження СОШ при відтворенні ПВ.

Введення як неселективного інгібітора NO-синтаз L-NAME, так і селективного інгібітора iNOS аміногуанідину за умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації призводить до зниження продукції ^.О мікросомальним електронно-транспортним ланцюгом (відповідно на 35,8% (р<0,001) та на 29,2% (р<0,001)). В умовах застосування обох інгібіторів NOS вдається виявити достовірне зменшення вироблення ^.О електронно-транспортним ланцюгом фагоцитів при моделюванні ПВ на тлі хронічної інтоксикації у порівнянні з даними серії, у якій відтворювали ПВ без введення нітрату натрію. Пригнічення NOS (синтаза оксиду азоту) та окремо iNOS (індуцибельна синтаза оксиду азоту) обмежує продукцію ^.О мікросомальним електронно-транспортним ланцюгом клітин СОШ, а також NADPH-оксидазою лейкоцитів.

При відтворенні експериментальної ПВ (контрольна серія - без введення нітрату) концентрація ТБК-реактантів зростає до інкубації на 40,1% (р<0,05), а після 1,5-годинної інкубації в залізоаскорбатному буферному розчині - на 30,6% (р<0,05), що вказує на істотну активацію процесів ПОЛ у тканинах пошкодженої СОШ білих щурів. Проте за умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) концентрація ТБК-реактантів до та після інкубації відповідно на 61,8% (р<0,001) та 46,2% (р<0,01) перевищують дані серії, у якій відтворювали ПВ без уведення нітрату. При цьому величина приросту концентрації ТБК-реактантів за час інкубації в прооксидантному буферному розчині на 26,9% (р<0,05) перевищує показник останньої групи, що свідчить про більш значний рівень виснаження антиоксидантних ресурсів.

При відтворенні експериментальної ПВ (без введення нітрату) звертає на себе увагу підвищення активності SOD (на 23,9%, р<0,01) і каталази (на 26,9%, р<0,05). Відомо, що синтез SOD індукується на рівні трансляції субстратом (тобто ^.О), а, як відзначалося вище, у цей період істотно зростає його продукція. Активність каталази індукується на генному рівні H₂O₂, у зв'язку з чим активності каталази і SOD знаходяться у взаємозв'язку, тому що SOD забезпечує каталазу субстратом, а остання регенерує кисень для потреб клітини (Панченко Л.Ф., Герасимов А.М., Антоненко Г.Д., 1981). За умов же моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) активності SOD та каталази не тільки не зростають, а навпаки знижуються: відповідно на 42,4% (р<0,001) та 55,0% (р<0,01) у порівнянні з даними інтактної групи, та на 53,5% (р<0,001) та 64,5% (р<0,001) у порівнянні з результатами серії, у якій відтворювали ПВ без уведення нітрату. Проте достовірних відмінностей при порівнянні з даними серії, у якій вводився нітрат натрію (без відтворення ПВ), не виявлено.

Нами виявлено, що процеси ПОЛ у значній мірі залежать від функціональної активності NOS. Так, введення неселективного інгібітора NO-синтаз L-NAME призводить до достовірного підвищення концентрації ТБК-реактантів як до інкубації (на 34,0%, р<0,01), так і після 1,5-годинної інкубації в залізоаскорбатному буферному розчині (на 28,4%, р<0,02). Ми припускаємо, що більш активний перебіг процесів ПОЛ може бути пов'язаний з інгібуванням конституційної NOS. Очевидно, NO, що виробляється різними джерелами, може чинити різну дію, незважаючи на однакову хімічну структуру. При введенні селективного інгібітора iNOS аміногуанідину, навпаки, концентрація ТБК-реактантів до інкубації в залізоаскорбатному буферному розчині достовірно зменшується (на 17,9% (р<0,05). Відомо, що саме з функціонуванням iNOS пов'язують активацію вільнорадикальних процесів у CОШ (Martin M.J., Jimenez M.D., Motilva V., 2001). Введення білим щурам L-аргініну за умов же моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) не призвело до достовірних змін концентрації ТБК-реактантів. Однак, при цьому виявлене достовірне збільшення величини концентрації ТБК-реактантів до інкубації (на 26,4%, р<0,05) за умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації у порівнянні з серією, у якій нітрат вводили без моделювання ПВ.

Введення інгібіторів NO-синтаз (L-NAME, аміногуанідину) та їхнього субстрату (L-аргініну) достовірно не змінює активність SOD у тканинах СОШ за умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації. При введенні інгібіторів NO-синтаз також не виявляється достовірних змін активності каталази у порівнянні з серією, у якій моделювали ПВ на тлі хронічної інтоксикації. Проте, саме за умов застосування L-NAME та аміногуанідину стає очевидною відсутність достовірного зниження каталази (р>0,05) при відтворенні ПВ на фоні інтоксикації нітратом. Тобто, зменшення ендогенного утворення оксиду азоту в NO-синтазній реакції може попереджувати істотне зниження активності каталази, що розвивається внаслідок взаємодії NO з активним центром цього ферменту. Це припущення, у певній мірі, підтверджується тим фактом, що при застосуванні L-аргініну достовірне зниження активності каталази (на 56,2%, р<0,05) залишається. Виявлена певна неоднозначна залежність між рівнем ПОЛ у тканинах СОШ за умов моделювання ПВ на тлі інтоксикації нітратом та функціональною активністю NO-синтаз. Якщо селективне пригнічення індуцибельної NO-синтази призводить до обмеження ПОЛ, то сукупне інгібування NO-синтаз (у т.ч. конституційної) сприяє активації цього процесу.

Застосування неселективного (L-NAME) та іNOS-селективного (аміногуанідин) інгібіторів NO-синтаз обмежує зниження активності каталази. Введення L-аргініну сприяє активації ПОЛ в умовах ульцерогенезу на тлі хронічної інтоксикації, при цьому активність мідь- та залізовмісних антиоксидантних ферментів (SOD, каталази) істотно не змінюється.

При відтворенні експериментальної ПВ (контрольна серія - без введення нітрату) відмічається істотне зменшення в тканинах СОШ вмісту AТP (на 12,9%, р<0,01), ADP (на 12,7%, р<0,05), ЕП (на 6,9%, р<0,01). Вміст AMP зростає в 2,8 рази (р<0,001). Вказані зміни вмісту та співвідношення аденіннуклеотидів свідчать про збільшення утилізації макроергічних сполук при зниженні їхнього ресинтезу в клітинах ушкодженої СОШ білих щурів. За умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) концентрація AТP у тканинах СОШ на 21,7% (р<0,01) та 32,4% (р<0,001) поступається значенням серій, у яких відповідно вводився нітрат без відтворення ПВ (1) та моделювали ПВ без уведення нітрату (2). У той же час спостерігається підвищення вмісту AMP відповідно в 2,6 (р<0,001)та 2,8 рази (р<0,001). При порівнянні з результатами останніх груп величини ЕП за умов моделювання ПВ на тлі інтоксикації нітратом виявляється зменшення даного показника відповідно на 21,0% (р<0,001) та 23,5% (р<0,001).

При введенні інгібіторів NO-синтаз (L-NAME, аміногуанідину) та L-аргініну ми не виявили статистично достовірних відмінностей одержаних результатів щодо вмісту аденіннуклеотидів у СОШ білих щурів при порівнянні з серією без їхнього застосування перед відтворенням ПВ за умов надлишкового надходження до організму нітрату натрію. Проте розрахунок ЕП доводить, що введення інгібіторів NO-синтаз (як неселективного L-NAME, так і iNOS-селективного аміногуанідину) достовірно обмежує зниження ЕП (відповідно на 17,3% (р<0,02) та 13,0% (р<0,05)) при відтворенні ПВ за умов надлишкового надходження до організму нітрату натрію, що, очевидно, пов'язано зі зменшенням утворення оксиду азоту NOS-джерелом. Як відомо, порушення біоенергетичних процесів за участю NO можуть бути зумовлені інактивацією ферментів, що беруть участь у енергоутворенні (аконітази, сукцинатдегідрогенази, гліцеральдегід-3-фосфатдегідрогенази, NADH-убіхінонредуктази, цитохромів) (Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е., Косицын Н.С., 1998). Можливий також механізм, опосередкований пероксинітритом (Szabo C., Zingarelli B., Oconnor M., Salzman A.L., 1996).

Введення інгібіторів NO-синтаз (L-NAME, аміногуанідину) обмежує падіння енергетичного потенціалу, що, очевидно, пов'язано зі зменшенням утворення оксиду азоту de novo NO-синтазною системою.

При відтворенні експериментальної ПВ (контрольна серія - без введення нітрату) та за умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) достовірних змін секреції HCl парієтальними клітинами шлунка не відмічається, про що свідчать величини рН внутрішньошлункової рідини. Таким чином, такий агресивний чинник як HCl не має суттєвого значення в патогенезі ушкодження СОШ у досліджуваних умовах. Проте, і в контрольній серії (ПВ без введення нітрату), і за умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації нітратом натрію відмічається істотне підвищення загальної протеолітичної активності відповідно на 48,4% (р<0,05) та 58,1% (р<0,01). Але достовірної різниці між величинами загальної протеолітичної активності в цих серіях не виявлено.

При відтворенні експериментальної ПВ (контрольна серія - без введення нітрату) відмічається зменшення в тканинах СОШ вмісту основного протектора слизової оболонки гастродуоденальної зони - фукози, що зв'язана з білками (на 22,3%, р<0,05), та істотне підвищення вмісту гексуронових кислот (на 34,1%, р<0,01). Певна тенденція до збільшення виявлена також щодо концентрації NANA, проте достовірного підвищення виявити не вдалося. У цілому одержані результати дозволяють стверджувати про високий рівень деполімеризації глікопротеїнів слизового бар'єра при розвитку деструктивних змін СОШ.

За умов моделювання ПВ на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) концентрація фукози, що зв'язана з білками, достовірно знижується, як у відношенні до даних серії, у якій вводили нітрат без відтворення ПВ (на 54,1%, р<0,001), так і до результатів, одержаних за умов моделювання ПВ без уведення нітрату (на 37,0%, р<0,01).

При відтворенні ПВ на фоні інтоксикації нітратом звертає на себе увагу суттєве збільшення вмісту NANA та гексуронових кислот у СОШ щурів.

Величина концентрації NANA у СОШ білих щурів на 22,2% (р<0,02) перевищує дані серії, у якій вводили нітрат без відтворення ПВ, та на 29,4% (р<0,01) - результати групи з відтвореною ПВ без уведення нітрату. Значення вмісту гексуронових кислот перевищує дані тільки останньої серії (на 12,7%, р<0,05). До введення інгібітору iNOS виявився чутливим показник вмісту NANA у СОШ білих щурів. Так, введення аміногуанідину обмежує підвищення концентрації NANA на 15,2% (р<0,02). Деяка тенденція до обмеження вмісту NANA та гексуронових кислот відмічається при введенні лабораторним тваринам L-аргініну. Останній, по суті, запобігає достовірному збільшенню цих речовин в умовах як нітратної інтоксикації, так і ульцерогенезу при відтворенні експериментальної ПВ, тобто забезпечує, у певній мірі, протекторну дію по відношенню до сполучнотканинних структур СОШ (Тарасенко Л.М., Непорада К.С., Скрипник І.М., 2002).

Моделювання ПВ за Л.М.Тарасенко, І.М.Скрипником і К.С.Непорадою на тлі хронічної інтоксикації (90 діб) дає можливість виявити достовірне збільшення показника множинності виразок як у порівнянні з даними серії, у якій вводили нітрат без відтворення ПВ (на 17,1%, р<0,05), так і до результатів, одержаних за умов моделювання ПВ без уведення нітрату (на 31%, р<0,01). Показник СВ становить 3,0; ВІ - 3,0.

Згідно отриманих нами даних, на множинність виразок за умов моделювання ПВ на тлі інтоксикації нітратом (90 діб) впливає в певній мірі активність iNOS. Введення інгібітору останньої (аміногуанідину) зменшує число виразок на 1-го щура на 18,4% (р<0,05). При моделюванні ПВ в умовах надлишкового утворення NO при надходженні до організму нітрату натрію відзначається наростання показників тяжкості виразкового процесу в шлунку (збільшення множинності пептичних виразок, середнього ступеню виразки в групі, виразкового індексу). На показник множинності виразок впливає активність iNOS, оскільки введення селективного інгібітору останньої (аміногуанідину) достовірно зменшує число виразок на 1-го щура. Відсутніть зміни цього показника при введенні L-NAME, можливо, пов'язана з протекторною дією NO, що виробляються конститутивною NOS.

Введення L-аргініну перед моделюванням ПВ в умовах надлишкового утворення NO при надходженні до організму нітрату натрію достовірно не позначається на тяжкості виразкового процесу в СОШ.

Нами проведене дослідження морфологічних змін у процесі загоєння виразки пілороантрального відділу шлунка в експерименті при хронічній нітратній інтоксикації. На 21 добу в контрольній групі щурів після експериментального відтворення виразкового дефекту макроскопічно виразка не виявлялася, на ділянці його проекції пальпаторно було відмічено ущільнення стінки шлунка твердої консистенції; мікроскопічно в ділянці серозної оболонки на місці проекції виразки спостерігається утворення грубоволокнистої рубцевої сполучної тканини, в якій наявна велика кількість кровоносних судин, з ділянками метахромазії навколо. Подекуди, за рахунок розростання сполучної тканини, яка була представлена фіброцитами, що мали витягнуту форму, та колагеновими волокнами, форма просвіту судин змінювалась. Появу грубоволокнистої сполучної тканини можна вважати кінцевим результатом перебудови тканини. Таким чином, вищеописана морфологічна картина свідчить про сприятливий плин процесів загоєння гострої виразки пілороантрального відділу шлунка у щурів.

На фоні хронічної інтоксикації нітратом натрію спостерігаються наступні морфологічні особливості патологічних процесів у вигляді атрофії та гіперплазії слизової оболонки шлунка, які негативно впливають на час загоєння відтвореної виразки. На 21 добу виразка стає хронічною, має ті ж самі розміри, що й на момент відтворення. Гістологічно спостерігається грануляційна тканина, що знаходиться на різних стадіях дозрівання.

ВИСНОВКИ