Микроскопическое исследование осадка мочи

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Реферат

Микроскопическое исследование осадка мочи



Введение

Микроскопическое исследование осадка мочи проводят ориентировочным методом при общем анализе и количественным подсчётом форменных элементов для более точной оценки степени лейкоцитурии и гематурии.

Ориентировочная микроскопия осадка мочи

Принцип: микроскопическое исследование нативных препаратов мочевого осадка, полученного при центрифугировании мочи.

Оборудование:

1. центрифуга

2. центрифужные пробирки

3. предметные и покровные стекла

4. микроскоп

Ход исследования:

Если элементы организованного осадка встречаются в каждом поле зрения, когда же элементы встречаются в небольшом количестве - числом в препарате. В одном препарате около 20 полей зрения.

1. Утреннюю порцию мочи тщательно перемешивают и помещают в центрифужную пробирку 10 мл исследуемой мочи.

2. Мочу центрифугируют в течении 5-10 мин при 1500 об/мин (или 5 мин при 2000 об/мин).

3. Быстрым наклоном пробирки сливают надосадочную жидкость (верхний слой), а оставшийся осадок пастеровской пипеткой переносят на середину предметного стекла и покрывают покровным. Осадок переносится с минимальным количеством жидкости, чтобы капля не расплылась.

4. Изучение препарата начинают с общего обзора под малым увеличением (8х10). Просматривают весь препарат по периметру и по диагонали. При этом обнаруживают цилиндры, составляют общее представление о количестве солей, слизи и др. Более детальное изучение с количественной оценкой производят при большом увеличении (10х40). При этом детализируют отдельные элементы осадка, приблизительно подсчитывают количество лейкоцитов и эритроцитов в поле зрения, составляют окончательное суждение об осадке мочи в целом.

5. Если элементы организованного осадка встречаются в каждом поле зрения, когда же элементы встречаются в небольшом количестве - числом в препарате. В одном препарате около 20 полей зрения.



1. Элементы организованного осадка мочи

микроскопия моча гематурия лейкоцитурия

Эпителиальные клетки:

1. Клетки плоского эпителия - клетки плоского эпителия полигональной или округлой формы, больших размеров (30-50 мкм), с бесцветной цитоплазмой, с небольшим ядром, в центре цитоплазмы, располагаются поодиночке, скоплениями, группами или пластами. Попадает в мочу из влагалища или из слизистой наружных половых органов. Наличие плоского эпителия в моче свидетельствует о неправильном сборе моче (необходимо повторно сдать анализ мочи после тщательного туалета промежностей). (см. стр. 17)

2. Клетки переходного эпителия - различной формы (полигональные, овальные, «хвостатые») и величины (цилиндрические, округлые), с довольно крупным ядром. Иногда дегенеративными изменениями в виде грубой зернистости и вакуолизации цитоплазмы. Переходный эпителий попадает из почечных лоханок, мочевого пузыря, из верхней части уретры.

3. Почечный эпителий - неправильной округлой формы, небольших размеров (в 1,5-2 раза больше лейкоцитов), слегка желтоватого цвета. Чаще располагается в виде групп или цепочек. Выстилают почечные канальцы.

Норма: клетки плоского и переходного эпителия встречаются от единичных в препарате до единичных в поле зрения.

Клиническое значение: плоский эпителий особого значения не имеет, т.к. выстилает половые органы. Переходный эпителий выстилает мочевыводящие пути. В большом количестве могут встречаться при острых воспалительных заболеваниях мочевого пузыря и лоханок, интоксикациях, а также при мочекаменной болезни и новообразованиях мочевыводящих путей. Клетки почечного эпителия можно встретить при микроскопии осадка при нефритах, интоксикациях, расстройствах кровообращения.

Сочетание почечного эпителия с цилиндрами говорит о тяжёлом поражении почек.

Цилиндры:

1. Гиалиновые цилиндры - имеют нежную структуру, прозрачные, округлой формы на концах. На своей поверхности могут иметь зернистость за счёт аморфных солей или клеточного детрита. Образуется из белка, свернувшегося внутри канальцев, что свидетельствует о протеинурии, вследствие повышенной проницаемости клубочковых капилляров.

2. Зернистые цилиндры - имеют более резкие контуры и состоят из плотной зернистостой массы желтоватого цвета.

3. Восковидные цилиндры - имеют резко очерченные контуры и гомогенную с восковидным блеском желтовато-серую структуру. Образуются из уплотнённых гиалиновых цилиндров при задержке их в канальцах.

4. Эпителиальные цилиндры - состоят из клеток почечного эпителия.

5. Эритроцитарные цилиндры - состоят из изменённых или неизменённых эритроцитов.

6. Лейкоцитарные цилиндры - формируются из лейкоцитов.

7. Жироперерождённые цилиндры - цилиндры покрыты каплями жира различной величины. Могут быть широкими, короткими и длинными, с грубыми и чёткими контурами.

8. Ложные цилиндры - состоят из слизи, на которой расположены клетки, форменные элементы и соли.

9. Цилиндроиды - это уплотнённые слизи различной длины, формы и величины, образования с продольной исчерченностью, неровные по толщине, суженные на концах.

В нормальной моче можно встретить единичные гиалиновые цилиндры (1-2 в препарате).

Клиническое значение: цилиндрурия является симптомом поражения паренхимы почек. Восковидные и гиалиновые цилиндры подтверждают реальность почечной протеинурии. Лейкоцитарные и эритроцитарные цилиндры дают возможность предположить источник лейкоцитурии (6-20 в поле/ зрения) и гематурии.

2. Элементы неорганизованного осадка мочи

Соли:

· Кислые (мочевая кислота, ураты, оксалат кальция)

· Мочевая кислота - имеет вид красивых ярко-жёлтых или золотисто-жёлтых разнообразных кристаллов, встречающихся в виде ромбов, шестигранников, бочонков. Отдельные кристаллы образуют розетки, пучки, снопы. (см. стр. 14)

· Ураты - это мочекислые соли натрия, кальция, калия - представляют собой мелкие кристаллы в виде коричневатого или сероватого песочка, часто покрывающий всё поле зрения. Ураты хорошо растворяются в реактиве Селена (4 г буры, 4 г борной кислоты, 100 г. воды). Реактив Селена следует налить на осадок, перемешать и вновь отцентрифугировать.

· Оксалаты - соли щавелевой кислоты - имеют форму почтовых конвертов и хорошо преломляющих свет. Размер кристаллов может быть различным. Оксалаты могут встречать и в щелочной моче. (см. стр. 14)

· Фосфорнокислый кальций - встречаются в слабокислой и амфотерной моче, иногда в начале щелочного брожения. Кристаллы имеют вид клинка, копья, розетки, веера, букета, снопа.

· Сернокислый кальций - имеют вид длинных бесцветных иголочек.

· Гиппуроновая кислота - ромбической формы бесцветные иглы, таблички.

· Щелочные (кислый мочекислый аммоний, трипельфосфаты, аморфные фосфаты)

· Аморфные фосфаты - имеют вид бесцветной аморфной массы, состоящей из мелких зёрнышек, и очень похожи на ураты. (см. стр. 15)

· Трипельфосфаты - имеют характерную форму, напоминающую гробовые крышки. Встречаются в свежей моче при циститах. (см. стр. 19)

· Кислый мочекислый аммоний - имеет форму коричнево-жёлтых шаров, расположенных поодиночке или скоплениями. Очень часто кристаллы имеют шиповидные выросты. Встречаются как в кислой, так и в щелочной моче. (см. стр. 18)

· Холестерин - появляется при деструктивных поражениях почек, формирования полостей, при хилурии, жировом перерождении почек, эхинококкозе почек, новообразованиях, абсцессе почек. Имеет вид бесцветных четырёхгранных табличек разного размера, прозрачных, с обрезанным углом, ступенеобразными уступами.

· Капли нейтрального жира - хорошо преломляют свет, могут быть в виде скоплений или отдельных капель. Кристаллы жирных кислот обнаруживаются в виде тонких игл. (см. стр. 16)

· Билирубин - встречается при гепатитах, острой атрофии печени, желтухах, при раке, инфекционных заболеваниях. Располагается на клетках в виде игольчатых кристаллов и пластинок жёлтого цвета.

· Гемосидерин - железосодержащая часть гематина. Имеет вид пигментных зёрен золотисто-жёлтого цвета и золотисто-коричневого цвета, которые располагаются внутри эпителиальных клеток и реже - внеклеточно.

· Гематоидин - кристаллический пигмент в виде ромбических табличек, игольчатых кристаллов, собранных в пучки и звёздочки, иногда в виде мелких зёрен или глыбок.

Грибы:

Дрожжевые, плесневые. Чаще дрожжевые грибы рода Кандида, которые надо дифференцировать от эритроцитов и овальных оксалатов.

Бактерии:

Часто подвижные, палочки и кокки (см. стр. 19)

Слизь:

Встречается в виде прозрачных нитей, тяжей и цилиндров. В норме в моче почти не содержится. Слизь чаще появляется при заболеваниях мочевыводящих путей (уретриты, простатиты, циститы).

3. Количественные методы микроскопического исследования осадка мочи

Преимущества количественных методов:

1. Строго стандартизированы.

2. Подсчёт ведётся в счётных камерах.

3. Создаётся возможность определения клеточных элементов в определённом объёме или за определённое время.

Клиническое значение: количественные методы позволяют проводить диагностику и динамическое наблюдение вялотекущих, хронических заболеваний почек.

Камера Фукса-Розенталя

Предназначена для подсчёта форменных элементов ликвора, а также организованного осадка мочи. Она состоит из толстого кварцевого стекла с нанесёнными на нём поперечными прорезами, образующими три поперечно расположенные плоские площадки и шлифованного покровного стекла. Средняя площадка продольной прорезью разделена на две, каждая из которых имеет выгравированную на ней сетку. По обе стороны средней площадки две другие, на 0,2 мм выше средней. Плоскости этих двух площадок служат для притирания покровного стекла. Покровное стекло притирают до радужных колец (Ньютоновых колец). После притирания покровного стекла создаётся камера, закрытая с двух сторон, а с двух других остаются щели (капиллярные пространства), через которые заполняют камеру.

Сетка разграфлена на 16 больших квадратов, каждый из которых состоит из 16 малых.

Площадь сетки равна 16 мм², глубина камеры 0,2 мм.

Объём камеры: 16 х 0,2 = 3,2 мм³ или приблизительно равно 3 мм³.

Правила пользования камерой Фукса-Розенталя:

1. Счётная камера должна быть абсолютно чистой и сухой.

2. Притирают к камере покровное стекло до радужных колец.

3. Заполняют камеру из смесителя или пастеровской пипеткой, поднося к щели на средней пластинке.

4. Недопустимо наличие пузырьков воздуха на сетке камеры, так как это мешает подсчёту.

5. Сосчитывают форменные элементы по всей сетке.

6. После окончания работы камеру следуют обмыть водой (лучше дистиллированной) и вытереть мягкой тряпочкой.

7. Хранить камеру следует в футляре, в сухом помещении.

Метод Нечипоренко

Принцип: определяется количество клеточных элементов в 1 мл мочи.

Достоинства метода:

· Исследуется свежевыделенная моча (срединная порция).

· Необходимо малое количество мочи.

Недостатки метода:

Отсутствие учёта суточных колебаний выделения форменных элементов с мочой.

Ход определения:

1. Для исследования берётся свежевыпущенная моча в средине мочеиспускания.

2. Мочу в банке взбалтывают и наливают 10 мл в мерную центрифужную пробирку.

3. Мочу центрифугируют 3-4 мин при 3000 об/мин.

4. Пастеровской пипеткой с балончиком отсасывают надосадочную жидкость, оставляя 0,5 мл. При обильном осадке оставляют 1 мл.

5. Осадок тщательно перемешивают и пастеровской пипеткой заполняют камеру Фукса-Розенталя.

6. Подсчитывают отдельно количество эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров по всей сетке.

7. Подсчитывают количество клеточных элементов в 1 мкл мочи. Для этого полученное значение эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров делят на 3 (т.к. 3 мкл - объём счётной камеры).

8. Рассчитываем количество элементов в 1 мл мочи, используя формулу:

В норме:

· количество эритроцитов до 1000 в 1

· количество лейкоцитов до 2000 в 1 мл

· цилиндров нет

Метод Аддиса-Каковского

Принцип: подсчёт клеточных элементов, выделенных за сутки.

Достоинства метода:

· Можно учесть суточные колебания выделения форменных элементов с мочой.

Недостатки метода:

· Более трудоёмок.

· Более низкая информативность, т.к. из-за длительного хранения мочи происходит лизис клеточных элементов.

Ход определения:

1. Мочу собирают за 10-12 часов.

2. Измеряют количество собранной мочи.

3. Высчитывают количество мочи выделенной за 12 минут.

4. Перемешивают собранную мочу и наливают высчитанное количество в центрифужную пробирку (если нужно, то в две пробирки).

5. Центрифугируют 3-5 мин при 3000 об/мин.

6. Отсасывают пипеткой с балончиком надосадочную жидкость, оставляя 0,5 мл осадка, если осадок обильной, то оставляют 1 мл.

7. Осадок тщательно перемешиваем и заполняют камеру Фукса-Розенталя.

8. Подсчитывают отдельно эритроциты, лейкоциты и цилиндры по всей сетке.

9. Находим количество элементов в 1 мкл, разделив на 3 полученные результаты.

10. Подсчитываем количество элементов, выделенной за сутки мочи, умножая количество элементов в 1 мкл на 60000 (коэффициент пересчёта).

В норме:

· Эритроцитов до 1000000

· Лейкоцитов до 2000000

· Цилиндров до 20000



Список литературы

1. В.С. Камышников Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике, М., МЕДпресс - информ, 2004.

2. А.А. Кишкун Руководство по лабораторным методам диагностики, М.: ГОЭТАР-Медия, 2007.

3. В.К. Кухта, Т.С. Морозкина, А.Д. Таганович, Э.И. Олецкий, Основы биохимии учебник для учащихся мед. училищ, М, Медицина, 1999.

4. Л.М. Пустовалова Основы биохимии для медицинских колледжей, Ростов - на-Дону, Феникс 2004.

5. Л.М. Пустовалова Практикум по биохимии, Ростов - на-Дону, Феникс 2004.

Размещено на Allbest.ru