Размещено на http://www.allbest.ru/

МОДЕЛЬ ВОЗДЕЙСТВИЯ ПОЛИМЕРНОГО МАТЕРИАЛА НА КУЛЬТУРУ ФИБРОБЛАСТОВ

Ильин Д.А.

Гранулемы инородных тел, возникшие вследствие воздействия на ткани полимерных соединений, играют значительную роль в виду частого использования при хирургической коррекции [11, 13]. Поверхность имплантанта контактирует с протеинами фибробластов и макрофагов, причем материал оказывает влияние на динамические взаимодействия между клетками, изменяя их способность к миграции [4], пролиферации и дифференцировке [10; 14], а так же развитии фиброзной ткани [4]. Активность таких процессов, как: адгезия, пролиферация и слияние различны для этих типов клеток [10]. Различные материалы для имплантации вызывают определенную тканевую реакцию in vivo и in vitro, оказывает воздействие на клетки соединительной ткани и иммунокомпетентные клетки, что во многом зависит от химического состава материала и характера его поверхности [16].

Значительную роль в репаративных реакциях при воспалении играют фибробласты [1; 2; 3], а традиционные представления о рубцевании ткани как о конечной точке патологического процесса заменяется современной концепцией о потенциально обратимом явлении [9]. Известно, что макрофаги регулируют активность фибробластов [2], и таким образом участвуют в активации фибропластической реакции 7. Роль фибробластов в формировании гранулемы весьма значительна [16], поскольку с одной стороны они участвуют в регуляции образования полинуклеарных макрофагов и тем самым контролируют гистиоцитарную реакцию, а с другой стороны продуцируют волокна соединительной ткани, формирующие капсулу воспалительного очага 7; 8.

Идеальный материал для имплантации не оказывает воздействие на ткань, химически инертен, не обладает канцерогенными и алергенными свойствами [5; 8]. Наиболее перспективными из таких материалов считают тефлон [6; 17] поскольку он соответствует большинству из этих критериев [8]. Существуют исследования влияние тефлона на культуру фибробластов, в которых проверялись токсические и адгезионные свойства материала [12]. Тефлоновые имплантанты вызывают слабовыраженные иммунные реакции, а ткань главным образом содержит богатый коллагеном экстрацеллюлярный матрикс и фибробласты [15]. Однако практически отсутствуют данные о влиянии указанного полимера на процессы пролиферации и дифференцировки фибробластов, что является важным показателем, обеспечивающим адекватную инкапсуляцию материала.

Исходя из вышеизложенного, целью нашего исследования было изучение характера морфологических изменений клеток соединительной ткани при воздействии тефлона. Задачи исследования включали: определение степени выраженности процессов пролиферации и дифференцировки фибробластов in vitro.

Клетки инкубировали при температуре 37 С. Препараты фиксировали 50 % раствором этанола и окрашивали азур - эозином. Культуры клеток были разделены группы. В первой экспериментальной группе через 24 часа предварительной инкубации клеток вносили частицы тефлона и площадью в 2 кв. мм в культуру фибробластов, первоначально содержащую 100 тыс. клеток, полученных от мышей линии C3H. Контролем служили интактные культуры фибробластов. Результаты оценивали на 48 и 72 часа инкубации клеток. Все изменения описаны относительно контроля. Подсчитывали численность дифференцированных форм фибробластов и количество клеток в состоянии митоза в 10 полях зрения.

На 72 часа экспозиции в обеих группах культур наблюдали образование плотного монослоя. В культурах экспериментальной группы отмечали, что фибробласты окружают частицы тефлона. Клетки, расположенные рядом с фрагментами полимера располагались более плотно, чем в удаленных участках монослоя. Это может быть обусловлено контактным торможением. Было отмечено, что присутствие полимерного материала клеточной культуре не влияет на процесс дифференцировки фибробластов. Отсутствовали различия между показателями митотической активности фибробластов, находящихся в непосредственной близости с частицами полимера и на удалении от него. Имелась тенденция к увеличению численности клеток в состоянии митоза (на 12,5 %) в группе культур, инкубируемых с фрагментами указанного материала по сравнению с контрольным показателем. Однако достоверные различия отсутствовали.

Из вышесказанного следует, что присутствие тефлонового полимера практически не влияет на процессы дифференцировки и митотической активности фибробластов in vitro. Возникновение отмеченных морфологических изменений требует дальнейшего уточнения. Данные результаты могут быть применены при разработке моделей воздействия полимерных соединений на клетки соединительной ткани для изучения процесса фиброзирования и индукции гранулем инородных тел, и с целью создания эффективных методов тестирования in vitro имплантационных материалов, применяемых при коррекции ряда заболеваний.

полимерный материал фибропласт культура

Список литературы