Мутагенная чувствительность лимфоцитов крови людей различной этнической принадлежности к генотокисинам O. Felineus

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Мутагенная чувствительность лимфоцитов крови людей различной этнической принадлежности к генотокисинам O. felineus

Н.Н. Ильинских, Е.Н. Ильинских, И.Н. Ильинских

Использован описторхин приготовленный по методике предложенной В.А. Фрадкиным (1975). Водно-солевой экстракт готовили из разрушенных путем замораживания и последующего измельчения в гомогенизаторе Поттера марит описторхов, извлеченных из печени кошек, пораженных описторхами. Экстракт стерилизовали через фильтр Зейтца, определяли в нём содержание белка по О.Н. Lowry et al. (1951) и вносили в культуру лимфоцитов здоровых доноров по 0,1 мл экстракта на 2 мл культуральной среды (2,5х10^-8 кг белка/ мл).Изучено влияние опистрхина, на ядерный аппарат клеток 50 культур ФГА-бласттрансформированных лимфоцитов человека. Контакт клеток с описторхином продолжался 4 часа.

Анализ различных морфологических изменений ядра свидетельствует, что после введения описторхина, через 4 часа в культурах, полученных из крови коренных жителей Западной Сибири наблюдается резкое увеличение числа двуядерных клеток, в которых, как правило, одно из ядер имеет лопастные выросты хроматина, а также клеток с микроядрами. Помимо этого нами не отмечено увеличения иных типов патологий.

Анализ площади ядер позволяет заключить, что в культурах ФГА-бласттрансформированных лимфоцитов под влиянием описторхина наблюдается достоверной снижение этого показателя, что сопровождается конденсацией хроматина ядер (P<0,01).

морфологический клетка описторхин

Таблица 1. Частота клеток с различными морфологическими изменениями ядра в ФГА-бласттрансфомированных Т-лимфоцитах после введения описторхина(в %) в культуры клеток, полученных из крови коренных и некоренных жителей Западной Сибири

Примечание: Звездочками отмечены значения достоверно отличающиеся от контроля; одной при P<0,01, двумя при P<0,05

Рис. Число клеток с различным уровнем конденсации хроматина интерфазного ядра в культурах лимфоцитов периферической крови после введения описторхина

Уже через 4 часа после введения описторхина в культурах ФГА-бласттрансформированных лимфоцитов наблюдается появление митозов со слипаниями хромосом, преждевременное расхождение хромосом в метафазе и аномалии расхождения в ана-телофазах.

Отмечено, что описторхин стимулирует деления клеток в условиях культуры лимфоцитов (P<0,01). В результате исследования цитогенетического действия дериватов из марит описторхисов на культуру лимфоцитов периферической крови здоровых доноров установлен факт увеличения общего количества клеток с нарушениями структуры и числа хромосом - до 21,2±0,6% при 4,3±0,2% в контроле (Р<0,001). При этом, в результате 2-х суточной инкубации с дериватами из марит описторхисов общее число клеток с нарушениями структуры хромосом в культуре лимфоцитов периферической крови возрастало более, чем в восемь раз по сравнению с исходным уровнем (1,9±0,2%) и достигало 16,8±0,9% (Р<0,001). При этом содержание клеток с разрывами хромосом составляло 4,5±0,6%(в контроле - до 0,2±0,1%),с хроматидными разрывами - 13,6±1,1% (контроль -1,7±0,2%, Р<0,001).

Количество лимфоцитов с изменённым числом хромосом через 48 часов инкубации достигало 5,8±0,5% при 2,6±0,2% в контроле, при этом число клеток с гипоплоидным набором соответствовало 3,8±0,6% при 1,9±0,1% в контроле (Р<0,01), содержание лимфоцитов с гиперплоидным набором хромосом изменялось не достоверно- 1,0±0,5% (контроль - 0,6±0,1%;Р>0,05).

Распространенность описторхозной инвазии в Западной и Восточной Сибири существенно различается (), что по мнению большинства ученых обусловлено отсутствием (или сниженным числом) моллюсков, промежуточных хозяев описторхид в реках Восточной Сибири. Нами обследовано 1360 человек, проживающих в бассеинах рек Оби, и Енисея.

Изучена частота людей, имеющих высокий уровень в периферической крови лимфоцитов с микроядрами, а также число людей инвазированных O. felineus и имеющих высокие титры антител к капсидным антигенам вируса Эпштейна-Барр. Обследованы жители 9 населенных пунктов, расположенных на берегах рек Оби, Енисея и их притоков. Если число инвазированных описторхисами людей в обском регионе колебалась от 87,1 до 21,4%, то в енисейском описторхоз наблюдался всего у 3-ех человек из 364 обследованных - 0,8%. Установлено, что жители обского региона достоверно чаще имеют повышенный уровень лимфоцитов с микроядрами и высокие титры антител к капсидным антигенам вируса Эпштейна-Барр. Особенно повышенный уровень этих показателей наблюдались у жителей пос. Долонь, расположенном в зоне влияния Семипалатинского атомного полигона и пос. Самусь, находящегося вблизи от Сибирского химического комбината. Обследование жителей Обской популяции показало, что у людей старшей возрастной группы наблюдается повышенный уровень лимфоцитов с микроядрами, что согласуется с высокой пораженностью O. felineus и повышенными титрами антител к капсидным антигенам ВЭБ. В Енисейской популяции таких закономерностей не наблюдалось.

Размещено на Allbest.ru