Оценка влияния экстрактов пантов и эмбрионов северного оленя на представителей индигенной микрофлоры толстого кишечника в условиях in vitro

Размещено на http://www.allbest.ru/

ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ЭКСТРАКТОВ ПАНТОВ И ЭМБРИОНОВ СЕВЕРНОГО ОЛЕНЯ НА ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ИНДИГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА В УСЛОВИЯХ IN VITRO

Ахременко Я.А., Ахременко А.К., Красножёнов Е.П.

Для современной медицины актуальной задачей остаётся изучение и поиск лекарственных препаратов, которые оказывали бы на организм благоприятные воздействия без каких-либо побочных явлений, и при этом были бы не менее эффективны, чем синтетические средства. Такими «универсальными» лекарственными препаратами могут быть биологически активные вещества животного происхождения, оказывающие сильные физиологические воздействия на организм человека.

Классическая медицина с недоверием воспринимала рецепты восточной медицины, когда одно и то же лекарство применялось при различных заболеваниях. Однако и по сей день панты оленей являются одним из основных лекарственных средств в китайской и тибетской медицине.

В России в 30-х годах под руководством проф. С.М. Павленко был разработан и предложен спиртово-водный экстракт пантов пятнистого оленя, марала и изюбра - пантокрин. Северный олень по численности значительно превосходит эти виды оленей. Поэтому в 60-х годах под руководством проф. И.И. Брехмана был разработан препарат из пантов северного оленя, названный рантарином. В 80-х годах норильскими учёными был получен ещё один препарат из пантов северного оленя - велкорнин. Якутские учёные разработали свой способ получения экстракта пантов северного оленя - эпсорина.

«Эпсорин» - экстракт пантов северного оленя, рекомендован в виде спиртового экстракта (Патент РФ № 1822785) и экстракта в сахарном сиропе (Патент РФ № 2099067). Последний зарегистрирован как БАД (регистрационное удостоверение № 001570.Р.643.03.2000 МЗ РФ).

В панты оленей и их экстракты входят разнообразные по своей химической природе биологически активные вещества (всего их идентифицировано более 80), которые условно можно разделить на 5 больших групп: минеральные вещества, аминокислоты, пептиды, липиды и основания нуклеиновых кислот.

Уникальная технология получения пантового экстракта, разработанная якутскими учёными (Кершенгольц Б.М., Ахременко А.К., Рогожин В.В. А.с. № 4877777 от 12.10.92), позволяет сохранять более 90% биологически активных веществ, содержащихся в пантах.

В доклинических испытаниях эпсорина на мышах установлен его протективный эффект на процессы регенерации органов кроветворения при холодовом, цитостатическом и радиационном воздействиях. В клинике этот препарат применялся у больных вирусными гепатитами, при этом снижалась вероятность хронизации процесса, а у больных хроническим бронхитом отмечена нормализация ряда иммунологических показателей. Кроме того, у больных с неосложнённым течением абсцессов и флегмон челюстно-лицевой области эпсорин в комплексе традиционной терапии оказывал положительный эффект на клиническое течение и состояние иммунитета. Положительный терапевтический эффект отмечен при применении эпсорина у детей с иммунной недостаточностью при различных заболеваниях дыхательной системы.

Эффективность препаратов из пантов оленей показана в геронтологической и фтизиатрической практике. На здоровых людях установлено, что препараты из пантов северного оленя нормализуют функциональное состояние организма человека в условиях Севера, устраняя дисбаланс клеточных популяций иммунной системы.

Менее известны препараты, полученные из эмбрионов (зародышей) самок пантовых оленей, однако, они высоко ценятся в восточной медицине. Приготовленные из них порошки и отвары применяются при различных отравлениях в качестве противоядия общего характера, при лечении женского бесплодия.

Охотниками Приморья высушенный эмбрион используется как общеукрепляющее средство. Спиртовую настойку порошка применяют при недомоганиях, связанных с простудой и переутомлением. В Якутии заготовки зародышей оленей почти не проводятся, а в Юго-Восточной Азии они являются ценным штучным товаром.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния экстрактов пантов северного оленя и эмбрионов северного оленя на рост представителей индигенной микрофлоры толстого кишечника в условиях in vitro. Поскольку оба этих экстракта применяются в качестве адаптогенов, то они могут обладать способностью оказывать влияние на защитную микрофлору желудочно-кишечного тракта, от состояния которой зависят многие физиологические функции в организме человека.

В наших исследованиях мы использовали водные фракции экстрактов, содержащие их биологически активные компоненты, без примесей и наполнителей.

Опыты проводились по методике, разработанной в Институте питания РАМН И.Б. Куваевой с соавт. (1999г.): из фармакопейных препаратов бифидумбактерина (штамм B. bifidum № 1), лактобактерина (штамм L. acidophylus 317.402) и колибактерина (штамм E. coli М-19) готовили по 4 ряда десятикратных разведений от -1 до -10 в средах, соответствующих каждому микроорганизму (для бифидобактерий - Блаурока, для лактобактерий - стерильное обезжиренное молоко, для эшерихий - мясо-пептонный бульон). Исследуемые экстракты готовили на стерильном физиологическом растворе в трёх концентрациях - минимальной, средней и максимальной (соответственно 10; 50 и 100 мг/мл). Во все пробирки первого ряда раститрованных в питательных средах бифидумбактерина, лактобактерина и колибактерина вносили по 1 мл стерильного физиологического раствора (контроль); в пробирки второго ряда вносили по 1 мл разведения экстрактов в минимальной концентрации; в пробирки третьего ряда - по 1 мл - в средней и в пробирки четвёртого ряда - по 1 мл в максимальной концентрации. Пробирки помещали в термостат и инкубировали при 37 град в течение 72 часов для лакто- и бифидобактерий и 48 часов - для эшерихий.

Учёт результатов проводили в сравнении с контролем по росту микроорганизмов в каждом ряду разведений.

При определении влияния активных компонентов экстракта пантов и экстракта эмбрионов на представителей индигенной микрофлоры толстого кишечника in vitro были получены следующие результаты.

Влияние на рост кишечной палочки. В обоих контрольных рядах наблюдается рост микроорганизмов с выраженным помутнением питательной среды до -8 разведения включительно. В остальных разведениях бульон прозрачный.

В рядах с минимальным содержанием обоих экстрактов рост эшерихий наблюдается во всех разведениях. При дальнейшей оценке влияния экстрактов на рост кишечной палочки видно, что при средней и максимальной концентрации экстракта эмбрионов рост бактерий наблюдается до -10 и -9 разведения соответственно. Тогда как в аналогичных рядах с экстрактом пантов рост эшерихий отмечается лишь до -8 разведения в третьем и до -7 разведения в четвёртом рядах.

Влияние на рост бифидобактерий. В среде Блаурока при росте данных микроорганизмов образуются множественные колонии, напоминающие гвоздики. Так, в обоих контрольных рядах выраженный рост наблюдается до -8 разведения включительно.

В ряду с минимальной концентрацией экстракта эмбрионов рост отмечен также до -8 разведения, со средней концентрацией препарата - до -9 разведения + 1 колония в -10. И в ряду с максимальной концентрацией рост наблюдается до -9 разведения.

В ряду пробирок с минимальной концентрацией экстракта пантов рост бифидобактерий наблюдается во всех разведениях, при средней концентрации - до -8 разведения, а при максимальной - до -6 разведения включительно.

Влияние на рост лактобактерий. Рост лактобактерий на стерильном молоке устанавливается по наличию свёртывания данной среды. В обоих контрольных рядах молоко свернулось до -8 разведения включительно.

Во всех рядах пробирок с различными концентрациями экстракта эмбрионов наблюдается рост лактобактерий во всех разведениях.

В рядах с минимальной и средней концентрацией экстракта пантов также определяется рост микроорганизмов до -10 разведения. А в ряду с максимальной концентрацией препарата свёртывание молока произошло лишь до -8 разведения.

Результаты представлены на рис. 1 и 2.

Таким образом, нами показано, что экстракт эмбрионов северного оленя обладает стимулирующим действием по отношению к представителям индигенной микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Данное явление можно объяснить тем, что эмбриональная ткань является хорошей питательной средой для многих микроорганизмов. Нами выявлено, что добавление в питательную среду эмбрионального экстракта стимулирует рост лактобацилл, бифидобактерий и кишечной палочки.

пантовый экстракт бифидобактерия

Рис. 1 - Влияние экстракта пантов северного оленя на рост индигенной микрофлоры толстого кишечника в условиях in vitro

Рис. 2 - Влияние экстракта эмбрионов северного оленя на рост индигенной микрофлоры толстого кишечника в условиях in vitro

Максимальная концентрация экстракта пантов северного оленя, добавленная в среду культивирования, ингибирует рост бифидобактерий и эшерихий. Возможно, он содержит в себе антибиотикоподобные вещества, способные оказывать ингибирующее действие на жизнедеятельность некоторых видов бактерий. Вероятно, следует продолжить исследования по изучению антибиотической активности данного экситракта с привлечением тест-культур различных микроорганизмов.

В целом небольшие дозы изученных нами экстрактов оказывают благоприятное действие на рост индигенных представителей микрофлоры толстого кишечника в условиях in vitro, что должно учитываться в качестве дополнительной характеристики препаратов и БАД, разрабатываемых на их основе.

Размещено на Allbest.ru