Размещено на http://www.allbest.ru/

АНАЛИЗ ПРОЦЕССОВ ЛИМФООБРАЗОВАНИЯ И ЛИМФООБРАЩЕНИЯ У КРЫС ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ЗАТРАВКЕ ИХ НИТРИТОМ НАТРИЯ

Омарова А.С.

Нитраты и нитриты присутствуют в почве, природных водах, во всех растительных материалах и мясе. Нитриты являются менее устойчивыми соединениями по сравнению с нитратами. Уровни содержания этих соединений могут возрастать вследствие применения азотсодержащих удобрений, а также при использовании нитратов и нитритов при производстве и консервировании мясных изделий и некоторых рыбных продуктов принимая во внимание то, что нитраты и нитриты обладают способностью убивать возбудителей ботулизма, кроме того, они придают колбасам привлекательный красный цвет.

Согласно данным литературы, при затравке различными ядами, в том числе и нитритами, патоморфологические изменения в исследованных органах начинались с гемо-микроциркуляторных нарушений в виде полнокровия вен, повышения проницаемости стенки сосудов, развития отёка и кровоизлияний в окружающие ткани; причём авторы отмечают зависимость характера нарушений от доз токсикантов [1]. При действии нитрита натрия в дозе 10 мг/л обнаружилось достоверное снижение гидравлической проводимости брыжейки крысы, явления набухания интерстиция [2]. Нашими предыдущими исследованиями было выявлено, что хроническая затравка крыс нитритом натрия приводила к дегенеративным изменениям адренергической иннервации как кровеносных, так и лимфатических сосудов и узлов. (Статья подана в печать). Исследование процессов лимфодинамики и биохимических показателей, математический анализ процессов, характеризующих функции лимфатической системы у млекопитающих, в условиях хронической затравки нитритом натрия, никем ранее не производились, что и послужило основанием для проведения настоящих экспериментов.

Настоящее исследование посвящено изучению влияния хронического воздействия NaNO2 на лимфоток и процессы лимфообразования. Ранее нами было установлено, что LD50 NaNO2 для крыс, согласно линейному уравнению регрессии Y= 2х - 47,633 , ( R2= 0.99) где х это доза вводимого токсиканта, а Y это количество погибших животных в процентах, (R2 это коэффициент детерминации) равняется 48,82 мг/150г или 325,47 мг/кг. Исходя из этого, нами в этих экспериментах на 15 крысах использовалась доза 16,7мг/100г, в течение 3 месяцев, которая вводилась per os, и вызывала значительные нарушения в состоянии животного, не приводя к его гибели. В конце периода затравки животные брались на острый опыт. Наркоз эфирный. Лимфоток из грудного протока, до диафрагмы замерялся микропипеткой, за определенный интервал времени. В пробах крови из брюшного отдела аорты и лимфы колориметрически исследовалось содержание общего белка. Во второй серии экспериментов (15 крыс) производилось исследование скорости перехода белка, меченного синим Эванса (0,5% раствор, 0,5 мл/100г) из крови в лимфу. Полученные данные были обработаны математически с применением компьютерных программ EXСEL и STATISTICA.

Было установлено, что лимфоток из грудного протока у контрольной группы (10 крыс) составлял 12,35±1,04 мкл/мин/100г, тогда как после затравки он равнялся 4.50±0,9 мкл/мин/100г, (P< 0.01) т.е уменьшался на 64,29%. По сравнению с контролем отмечено существенное снижение содержания белка в лимфе от 4.41±0,44 до 2.04±0,77 (P< 0,01), г% и плазме крови от 6.33±0,83 до 5.79±1,01 г% (p< 0.05) примерно на 7,27 %. На рис 1. представлена диаграмма изменений лимфотока, и содержания общего белка в плазме крови и лимфе в норме и после воздействия токсиканта.

Методом мультивариантной регресии взвешенных средних была получена следующая формула, описывающая отношения между лимфотоком из грудного протока на уровне до диафрагмы и изменений содержания общего белка в плазме крови и лимфе и лимфотоком в норме и после воздействия токсиканта в дозе 16,7мг/100г у крыс:

Y = - 0.78* - 0.90x1 - 1.47x2 + 0.44x3 - 0.86x4 + 2.14x5

(для удобства расчетов данные были преобразованы в натуральные логарифмы на базе e).

Где Y = это показатель лимфотока из грудного протока на уровне до диафрагмы

= это свободный член регрессии, он не равен 0, поскольку, данные в биологических экспериментах, как правило, имеют стартовый уровень.

х1 = это показатель содержания общего белка в плазме крови в норме;

х2 = это показатель содержания общего белка в плазме крови после затравки;

х3 = это показатель содержания общего белка в лимфе в норме;

х4 = это показатель содержания общего белка в лимфе после затравки;

х5 = это показатель лимфотока из грудного протока до диафрагмы в норме;

При этом коэффициент множественной регрессии R= 0.996 ( положительное значение квадратного корня из R2= 0.992 коэффициента множественной детерминации, описывающего наличие отношений между зависимой переменной и набором независимых), при ближались к 1. Следует сказать, что стандартная ошибка отклонений от линии регресии была незначительной (0.006). F- (критерий Фишера)= 952.5, при df= 5.40 и P= 0.000 показали высокий и достоверный уровень связи между исследованными на наличие связи переменными. Всё изложенное доказывает достоверность полученной формулы.

Наблюдаемое нами снижение лимфотока после длительного отравления нитритом натрия в указанной дозе было сопряжено со снижением содержания общего белка в лимфе и плазме крови. Поскольку основным свойством лимфатической системы является отвоз белка, вышедшего из кровеносных сосудов в интерстиций, то одновременное снижение его в крови и лимфе может говорить о нарушении резорбции белка корнями лимфатической системы, определяющей процессы лимфообразования. В наших экспериментах, примерно в трети наблюдений наблюдались явления асцита (накопление отёчной кровянистой жидкости в брюшной полости животных), увеличение веса почек от 1.30 ± 0.10 до 3.47±0.68 г (Р<0,05) и печени от 10.25± 0.25 до 11.25± 1.13 г (Р<0,05) и размера лимфатических узлов в среднем на 122.8%. Эти явления говорят о явном нарушении процессов лимфообразования и дренажной функции лимфатической системы и связанной с ней транспортной функции лимфатической системы.

В следующей серии экспериментов на 15 крысах производилось введение красителя синего Эванса, образующего комплекс с альбуминами плазмы, в системный кровоток в норме и после длительной затравки нитритом натрия. Полученные результаты позволили установить, что если в норме краситель появлялся на 9,5 ± 1,7 мин, то после затравки он появлялся в лимфе на 19,0 ± 0,7 мин (Р<0.05),что по основанию что подтверждает наше предположение о снижении процессов резорбции крупнодисперсной фракции белков, являющихся маркёрами процесса лимфообразования.

кровоток нитрат натрий лимфообразование

*Данные приведены в виде натуральных логарифмов

Мы предполагаем, что деструкция адренергической иннервации сосудов, описанная нами ранее, должна была бы неминуемо повлечь за собой функциональные нарушения в регуляции деятельности этих сосудов и узлов, тем самым явиться причиной наблюдаемых нами застойных морфологических явлений со стороны микрососудов.

Полученные результаты позволяют предположить возможный механизм патологического воздействия нитрита натрия на организм взрослых крыс. Согласно современным представлениям, характер изменений местного кровотока в тканях опеределяется степенью притока кислорода и других необходимых веществ[3]. Недостаток O2, как результат образования метгемоглобина нитритами, вызывает дилатацию артериол, метартериол и прекапиллярных сфинктеров, усиливая приток крови к тканям. Поскольку уровень гемоглобина при длительной затравке нитритом натрия в наших экспериментах (Статья подана в печать) оставался ниже исходного, (несмотря на рефлекторное усиление кроветворения), по-видимому первоначально происходило компенсаторное усиление микроциркуляции с участием регулирующих нервных механизмов, для увеличения доставки кровью О2 к тканям. Как показали наши эксперименты длительное воздействие токсиканта приводило к истощению резервов катехоламинов в адренергических нервных терминалях. Известно, что катехоламины, являясь частью защитного механизма против нитритов, расходуются на их нейтрализацию [4]. В результате этого происходило нарушение нервной регуляции деятельности кровеносных и лимфатических сосудов, которое в свою очередь приводило к сбою дренажной и транспортной функций. И в итоге наблюдались явления отёков лимфатических узлов, признаки стаза в кровеносных сосудах. Вполне вероятно, что длительное поступление нитритов в организм крыс может в итоге напрягать компенсаторные возможности симпато-адреналовой системы этих животных и привести к различным нарушениям функций циркуляторной системы, в частности к нарушению дренажной функции лимфатической системы, явлениям лимфостаза, отёков.

Таким образом, нами установлено, что длительная затравка крыс NaNO2 приводила к значительному нарушению процессов лимфообразования, лимфодренирования и лимфоотока, что явилось причиной генеза застойных явлений и отёков. Нами создано математическое описание отношений между лимфотоком из грудного протока на уровне до диафрагмы и изменений содержания общего белка в плазме крови и лимфе и лимфотоком в норме и после воздействия токсиканта в дозе 16,7мг/100г у крыс.

Литература