Газовая хроматография как фармакопейный метод анализа

Размещено на http://www.allbest.ru/

Российский Университет Дружбы Народов

Медицинский факультет

Кафедра фармацевтической и токсикологической химии

Курсовая работа:

Газовая хроматография как фармакопейный метод анализа. Определение примесей этиленоксида и диоксана методом ГХ

Подготовила: Колесникова Кристина Валерьевна, МФ-502

Проверила: Рахметова Алла Александровна

Москва 2012

Содержание

Цель работы

1. Газовая хроматография

1.1 Сущность метода

1.2 Качественные и количественные характеристики вещества

1.3 Параметры разделения и эффективности колонки

1.4 Практика метода

1.5 Методы обработки хроматограмм

1.6 Способы расчета количества вещества

1.7 Применение газовой хроматографии в фармации

2. Определение содержания остаточных количеств этиленоксида и диоксана (согласно Eur.Ph.)

3. Сравнительный анализ общей фармакопейной статьи "Газовая хроматография" в ГФ XI, JP и Eur. Ph

Вывод

Список использованной литературы

Цель работы

Дать теоретическое объяснение фармакопейному методу анализа "Газовая хроматография". Определить широту применения метода. Сравнить общие фармакопейные статьи "Газовая хроматография" в различных мировых фармакопеях.

1. Газовая хроматография

1.1 Сущность метода

А.Дж. Мартин и Р.Л. Синг впервые в 1941 г. предсказали возможность осуществления газожидкостной хроматографии. В 1949 г. Н.М. Туркельтауб описал хроматографическое разделение газов. Основы метода газовой хроматографии были разработаны в 1952г. А.Дж. Мартином.

Сущность метода ГЖХ (газожидкостной хроматографии) состоит в следующем. Анализируемая смесь (обычно - раствор) летучих компонентов переводится в парообразное состояние и смешивается с потоком инертного газа-носителя, образуя с ним подвижную фазу (ПФ). Эта смесь проталкивается с новой порцией непрерывно подаваемого газа-носителя и попадает в хроматографическую колонку, заполненную неподвижной (стационарной) жидкой фазой (НФ). Разделяемые компоненты распределяются между ПФ и НФ в соответствии с их коэффициентом распределения D, определяемым формулой:

D=C(НФ)/С(ПФ)

где: С(НФ) и С(ПФ) - соответственно содержание (в г/мл) данного компонента в неподвижной и подвижной фазах, находящихся в динамическом равновесии. Равновесный обмен хроматографируемого вещества между НФ и ПФ осуществляется в результате многократного повторения актов сорбция- десорбция по мере движения ПФ вдоль НФ внутри хроматографической колонки. Хроматографирование проводят на газовых (газожидкостных) хроматографах различной конструкции. На рис. 1 показана принципиальная блок-схема газового хроматографа.



Поток газа-носителя (азот, гелий, аргон, водород) из баллона 1через редуктор поступает под некоторым давлением в блок подготовки газов 2, с помощью которого измеряются давление и скорость потока газа-носителя. В испаритель 3, температура которого поддерживается достаточной для быстрого испарения смеси, с помощью микрошприца вводится анализируемая проба в хроматографическую колонку 5, которая находится в термостате 4. Газ-носитель увлекает с собой разделяемую парообразную смесь вдоль хроматографической колонки, так что процессы сорбция- десорбция разделяемых компонентов повторяются многократно, причем каждый раз в системе устанавливается динамическое равновесие разделяемых веществ между ПФ и НФ. Эти многократные переходы разделяемых веществ из ПФ в НФ и обратно совершаются по всей длине хроматографической колонки до тех пор, пока пары разделяемых веществ не покинут колонку, вместе с газом-носителем. После разделения смеси на зоны компонентов последние поступают в детектор 6, в котором генерируется сигнал, усиливаемый усилителем 7 и преобразуемый регистратором 8 в виде записи хроматограммы на бумаге самописца. Поскольку сродство различных разделяемых веществ к НФ различно, то в процессе сорбционных - десорбционных переходов они задерживаются в НФ неодинаковое время, т.к. возникает разность хода. Чем выше температура кипения и относительная растворимость вещества в НФ, т.е. чем больше его коэффициент распределения, тем дольше оно находится в НФ, тем позже покидает хроматографическую колонку. В конце концов, из хроматографической колонки вместе с газом-носителем выходят зоны (объемы) парообразных хроматографируемых веществ, разделяемых полностью или частично.

Если для двух компонентов смеси коэффициенты распределения одинаковы, то они не разделяются. Если же их коэффициенты распределения различны, то разделение происходит, причем первым покидает колонку тот компонент, у которого коэффициент распределения наименьший.

Пары разделенных компонентов вместе с газом-носителем поступают в детектор хроматографа, генерирующий электрический сигнал - тем больший, чем выше концентрация в парогазовой смеси. Электрический сигнал усиливается и фиксируется регистратором хроматографа в виде хроматограммы, записываемой на диаграммной ленте или на мониторе. Эти хроматограммы и используются для идентификации и количественной обработки результатов анализа разделяемой смеси компонентов.

1.2 Качественные и количественные характеристики вещества

Параметры удерживания. Хроматограмма - это зарегистрированная во времени последовательность показаний регистратора. Каждому разделенному компоненту смеси соответствует свой пик на хроматограмме. По оси абсцисс откладывается время (или расстояние), по оси ординат - величина аналитического сигнала, которая тем больше, чем выше содержание данного компонента в разделяемой схеме:

На рисунке 2 схематически показан общий вид хроматограммы в случае разделения двухкомпонентной смеси, состоящей из компонента 1 и компонента 2, сорбируемых в колонке, и компонента, не сорбируемого в колонке. Каждому из двух компонентов на хроматограмме отвечает свой пик. На оси абсцисс отложено время. Вертикальной стрелкой отмечен момент ввода пробы, от которого отсчитывается время ф.

Время удерживания фi - качественная характеристика каждого компонента; измеряется от момента ввода пробы до момента выхода максимума пика. Зависит от различных факторов. Чем выше коэффициент распределения D хроматографируемого вещества, тем больше и его время удерживания.

Время выхода ф0 несорбируемого компонента (растворителя) определяется соотношением:

ф0= L/ н

где: L - длина хроматографической колонки; н - линейная скорость движения газа-носителя.

Исправленное время удерживания ф1`,ф2` соответственно компонентов 1 и 2, равное:

ф1` = ф1 - ф0

ф2` = ф2 - ф0

- это время, в течение которого данный компонент находится в НФ. Исправленное время удерживания пропорционально коэфициенту распределения D данного компонента разделяемой смеси.

Расстояние удерживания l - пропорциональное времени удерживания, т.е. расстояние (мм) на хроматограмме от точки, соответствующей моменту ввода пробы, до абсциссы, отвечающей вершине пика.

Объем удерживания (удерживаемый объем), равный объему ПФ, который выносит из колонки все данное вещество:

V = хф

где: х - скорость удерживания газа-носителя ПФ, ф - время удерживания.

Коэффициент удерживания (замедления) R - это отношение скорости перемещения щ данного компонента вдоль хроматографической колонки к скорости х движения потока газа-носителя и показывает какую долю времени вещество находится в подвижной фазе:

R=w/ н= ф0/ ф

Коэффициент емкости к равен отношению исправленного времени удерживания ф` = ф - ф0 к ф0:

K= (ф- ф0)/ ф0

Эта величина показывает, во сколько раз вещество дольше находится в неподвижной фазе, чем в подвижной; оптимальное значение к лежит в пределах 1,5 - 4.Чем выше к, тем большее время находится в НФ данный компонент.

1.3 Параметры разделения и эффективность колонки

Степень разделения Rs (разрешения пиков) - количественно характеризует разделение двух пиков на хроматограмме и рассчитывается по формуле:

где: ?ф = ф2 - ф1 - разность времени удерживания разделяемых компонентов 1 и 2; a(1) и а(2) ширина пиков; а(1)1/2 и а(2)1/2 - полуширина пиков.

Если Rs < 1, то разделение двух компонентов неполное.

При Rs> 1 - наблюдается полное разделение двух компонентов смеси.

Рис. 3. Разделение ?ф пиков на хроматограмме при различных значениях Rs (схема)

Коэффициент разделения б. Хроматографическое разделение основано на селективности сорбента и различии в термодинамических свойствах хроматографируемых веществ в системе сорбент - элюент. Для вопроса о возможности хроматографического разделения смеси на индивидуальные вещества нужно сопоставить их хроматографические параметры. Для этого используют коэффициент селективности и разделения.

где: ф1 и ф2 - соответственно время удерживания компонентов 1 и 2; ф0 - время выхода несорбируемого компонента; К1 и К2 - коэффициенты распределения компонентов 1 и 2 соответственно.

Коэффициент разделения характеризует селективность ПФ по отношению к двум данным компонентам и относительное расположение разделяемых пиков на хроматограмме. Коэффициент разделения б и степень разделения Rs связаны соотношением:

где: n - так называемое число теоретических тарелок.

Если б=1, то Rs=0, т.е. два хроматографируемых вещества не разделяются. Чем больше, б тем лучше разделение пиков, тем НФ более селективна по отношению к двум разделяемым веществам.

Число теоретических тарелок n. При хроматографическом разделении компонентов смеси осуществляется перенос вещества через границу раздела двух фаз - ПФ и НФ. Чем больше таких переходов, тем более полно разделяются компоненты смеси. Участок зоны внутри колонки, на котором устанавливается равновесное распределение данного вещества между ПФ и НФ, называют теоретической тарелкой.

Число теоретических тарелок n, характеризует число актов сорбции и десорбции вещества и рассчитывается по формуле:

где: ф - время удерживания данного компонента смеси; а 1/2 - полуширина пика.

Высота эквивалентная теоретической тарелке - ВЭТТ - рассчитывается по формуле:

где: L - длина хроматографической колонки; n - число теоретических тарелок; А, В, С - коэффициенты, учитывающие соответственно вклад вихревой диффузии, молекулярной диффузии и сопротивления массопереносу в размываемые зоны хроматографируемого компонента; v- линейная скорость потока движения газа-носителя.

1.4 Практика метода

Газохроматографические колонки представляют собой металлические и стеклянные трубки (прямые, изогнутые, спиральные) с внутренним диаметром 0,1 - 5 мм и длиной до нескольких метров. Они бывают двух типов - наполненные (насадочные) и капиллярные.

Наполненные колонки - металлические или стеклянные трубки длиной 1 - 5 м, с внутренним диаметром 1,5 - 5 мм, обычно изогнутые в виде спирали. Эти трубки заполняются насадкой - частицами твердой основы с нанесенными на их поверхность тонким слоем жидкой НФ.

Капиллярные колонки обычно представляют собой стеклянные (из кварцевого стекла) трубки, внутренняя поверхность которых покрыта тонким слоем жидких НФ. Роль твердого носителя здесь играет внутренняя поверхность самой колонки. Длина капиллярных колонок может составлять от нескольких десятков до нескольких сотен метров, внутренний диаметр - от 0, 1 до 0,6 мм. Капиллярные колонки обеспечивают более высокую эффективность разделения многокомпонентных смесей.

Твердый носитель должен обладать высокой механической прочностью, химической инерцией, малой адсорбционной активностью. Растворение хроматографируемого вещества в жидкой НФ, покрывающей поверхность твердого носителя, не должно осложняться его адсорбцией на носителе. Оптимальный размер зерен носителя чаще всего колеблется в пределах 0,1 - 0,5 мм, его удельная поверхность может составлять 100 - 1000 м²/г. В качестве материалов для твердого носителя используют оксид кремния, оксид алюминия, фторуглероды (тефлон, полихром), полистирол, сополимер стирола и дивинилбензола, а также стеклянные шарики, плавленые кварц, песок, графитовую сажу, кристаллы хлорида натрия и т.д.

НФ представляет собой обычно нелетучую, высококипящую, с низкой вязкостью жидкость различной полярности и химической природой - углеводороды (индивидуальные или смеси) с числом углеродных атомов в цепи от 10 до 30, полиоксаны, полигликоли, полиэфиры, амиды, амины, жирные кислоты и т.д. Предложены многие десятки и даже сотни жидких ПФ. Масса жидкой НФ обычно составляет от 1 до 20% от массы твердого носителя. НФ наносится на поверхность твердого носителя из раствора в соответствующем растворителе при упаривании растворителя.

Детектор представляет собой устройство, регистрирующее во времени содержание хромотографируемого компонента в ПФ на выходе из колонки.

В газовых хроматографах используют детекторы различных типов: Неселективные-термокондуктометрические - катарометры, пламенно-ионизационные, электрохимические; селективные - термоинные, электронозахватные, пламенно-фотометрические и др. В неселективных детекторах генерируемый сигнал не зависит от химической природы разделяемых компонентов, в селективных - зависит. На практике часто используют неселективные детекторы - катарометры и пламенно-ионизационные.

При представлении данных, полученных ГЖХ, обычно указывают следующие характеристики: тип хроматографа и детектора, материал, из которого сделана хроматографическая колонка, ее длина и внутренний диаметр; природа ПФ и твердого носителя; газ-носитель и скорость его потока; температура испарителя и термостата, который поддерживает постоянную температуру; продолжительность анализа; способ обработки хроматограмм.

Обязательным условием является предварительная проверка пригодности хроматографической системы для разделения данной смеси: достижение оптимальных параметров эффективности колонки и разделения компонентов. При предоставлении данных количественногго анализа необходима их статистическая обработка.

1.5 Методы обработки хроматограмм

Идентификация разделяемых компонентов проводится преимущественно двумя способами: с использованием веществ-свидетелей и времени удерживания.

Метод использования веществ-свидетелей.

В тех же условиях, в которых получают хроматограмму разделяемой смеси, записывают хроматограммы веществ-свидетелей, наличие которых предполагается в анализируемой смеси. Фиксируется время удерживания веществ-свидетелей и сравнивают их с временем удерживания того или иного компонента на хроматограмме разделяемой смеси свидетельствовать о том, что данный компонент смеси и вещество-свидетель идентичны.

Иногда вещество-свидетель вносят непосредственно в пробу анализируемой смеси (метод метки). Записывают в одинаковых условиях хроматограммы такой пробы и пробы анализируемой смеси, не содержащей веществ-свидетелей. Если число пиков остается одним и тем же, а интенсивность того или иного пика возрастает при внесении вещества-свидетеля в пробу, это значит что вещество-свидетель и данный компонент-идентичны.

Метод относительных удерживаний. К анализируемой пробе прибавляют вещество сравнения и хроматографируют смесь строго в тех условиях, которые указаны в методике анализа. Определяют относительное удерживание согласно формуле:

где - время удерживания соответственно определяемого компонента, вещества сравнения и несорбируемого компонента. Сравнивают полученные относительные удержитвания с указанными в методике.

1.6 Способы расчета количества вещества

1. Метод абсолютных калибровок: по результатам серии анализов строят график зависимости площади или высоты пика от содержания вещества в пробе gi (г).

количество определяемого вещества будет равно:

g = K ? S = K ?l

2. Метод нормировки основан на том, что сумму площадей или высот всех пиков на хроматограмме принимают за 100%. Содержание определяемого компонента рассчитывается по формуле:

Метод внутренней нормировки применяют при условии регистрации на хроматограмме всех пиков.

3. Метод внутреннего стандарта применяют при отсутствии на хроматограмме пиков некоторых компонентов анализируемой смеси. Метод основан на том, что в анализируемую смесь вводят некоторое определенное количество стандартного вещества. Это вещество должно быть инертным и отсутствовать в определяемой пробе и полностью отделяться от других компонентов смеси; время его удерживания должно быть близким к времени удерживания определяемых компонентов; его концентрация должна быть близка к концентрации определяемых компонентов, пик симметричен. Определяют площади пиков, и для каждого компонента рассчитывают поправочный коэффициент по формуле:

K=(S вн.ст./ Sx)*(Cx/Свн.ст)

где: Sв.ст, Sx площади пиков внутреннего стандарта и определяемого вещества; св.ст, сх - концентрация стандарта и исследуемого вещества в искусственных смесях. Зная поправочный коэффициенты, содержание компонента рассчитывают по формуле:

Х,%=k (mв.ст*Sx)/(m пробы*S вн.ст)* 100

1.7 Применение газовой хроматографии

Газовая хроматография в фармацевтической промышленности применяется для:

ь определения антидепрессантов;

ь определения амфетаминов (амфетимин, метамфетамин, эфедрин, фенметразин и др.);

ь определения алкалоидных препаратов (прокаин, метадон, кокаин, морфин, кодеин, хинин и др.);

ь определения барбитуратов (барбитал, пентабарбитал, фенитоин и др.);

ь определения диуретиков (кофеин, теобромин, теофилин);

ь определения антиконвульсантов;

ь определения антиэпилептиков (фенобарбитал, этотоин, примидон и др.);

ь определения остаточных растворителей в таблетках (трихлорэтилен, хлороформ, метилен хлорид и др.);

ь определения диметилнитрозамина в таблетках, содержащих аминофеназон;

ь определения этилового эфира бромоизовалериановой кислоты в корвалоле;

ь определения этилового спирта в растворе доксициклина гидрохлорида;

ь определения диметилформамида в нафтизине;

ь определения линкомицина В в готовой лекарственной форме;

ь определения камфоры в мази;

ь определения димстиланилина, триэтила;

ь определения остаточных количеств этиленоксида и диоксана.

2. Определение содержания остаточных количеств этиленоксида и диоксана (согласно Eur.Ph.)

Испытание предназначено для определения содержания остаточных количеств этиленоксида и диоксана в веществах, растворимых в воде или диметилацетамиде.

Для веществ, нерастворимых или недостаточно растворимых в этих растворителях, приготовление раствора испытуемого вещества и условия определения методом парофазной газовой хроматографии указывают в частной статье.

Испытание проводят методом парофазной газовой хроматографии.

а) Для веществ, растворимых или смешивающихся с водой, применяют следующую методику.

Испытуемый раствор. 1,00 г испытуемого образца помещают в контейнер вместимостью 10 мл (в зависимости от условий проведения испытания могут применяться контейнеры другого объема) и прибавляют 1 мл воды Р. Контейнер закрывают, содержимое перемешивают до получения однородного раствора и выдерживают в течение 45 мин при температуре 70°С.

Раствор сравнения (а). 1,00 г испытуемого образца помещают в такой же контейнер вместимостью 10 мл, прибавляют 0,50 мл раствора этиленоксида РЗ и 0,50 мл раствора диоксана Р1. Контейнер закрывают, содержимое перемешивают до получения однородного раствора и выдерживают в течение 45 мин. при температуре 70°С.

Раствор сравнения (b). 0,50 мл раствора этиленоксида РЗ помещают в контейнер вместимостью 10 мл, прибавляют 0,1 мл свежеприготовленного раствора 10 мг/л ацетальдегида Р и 0,1 мл раствора диоксана Р1. Контейнер закрывают, содержимое перемешивают до получения однородного раствора и выдерживают в течение 45 мин при температуре 70^оС.

б) Для веществ, растворимых или смешивающихся с диметилацетамидом, применяют следующую методику.

Испытуемый раствор. 1,00 г испытуемого образца помещают в контейнер вместимостью 10 мл (в зависимости от условий проведения испытания могут применяться контейнеры другого объема), прибавляют 1 мл диметилацетамида Р и 0,20 мл воды Р. Контейнер закрывают, содержимое перемешивают до получения однородного раствора и выдерживают в течение 45 мин при температуре 90°С.

Раствор сравнения (а). 1,00 г испытуемого образца помещают в контейнер вместимостью 10 мл и прибавляют 1.0 мл диметилацетамида Р, 0,10 мл раствора диоксана Р и 0,10мл раствора этиленоксида Р2.

Контейнер закрывают, содержимое перемешивают до получения однородного раствора и выдерживают в течение 45 мин при температуре 90°С. хроматография этиленоксид диоксан

Раствор сравнения (b). 0,10 мл раствора этиленоксида Р2 помещают в контейнер вместимостью 10 мл, прибавляют 0,1 мл свежеприготовленного раствора 10 мг/л ацетальдегида Р и 0,1 мл раствора диоксана Р. Контейнер закрывают, содержимое перемешивают до получения однородного раствора и выдерживают в течение 45 мин при температуре 90°С.

Могут быть использованы следующие условия подготовки и ввода равновесной паровой фазы:

- температура уравновешивания - 70°С (90°С для растворов в диметилацетамиде);

- время уравновешивания - 45 мин;

- температура блока ввода газовой пробы - 75°С (150°С для растворов в диметилацетамиде);

- газ-носитель - гелий для хроматографии Р;

- время подачи газа-носителя в контейнер с анализируемой пробой - 1 мин.;

- время ввода газовой пробы - 12 с.

Хроматографируют на газовом хроматографе с пламенно-ионизационным детектором в следующих условиях:

- колонка капиллярная стеклянная или кварцевая длиной 30 м и внутренним диаметром 0,32 мм, внутренняя поверхность которой покрыта слоем полидиметилсилоксана Р толщиной 1,0 мкм;

- газ-носитель - гелий для хроматографии Р или азот для хроматографии Р;

- линейная скорость газа-носителя - около 20 см/с;

- деление потока - 1:20;

- поддерживают температуру колонки 50°С в течение 5 мин., затем повышают до 180°С со скоростью 5°С/мин., затем - до температуры 230°С со скоростью 30°С/мин и поддерживают такую температуру в течение 5 мин;

- температура инжектора - 150°С;

- температура детектора - 250°С.

Хроматографируют подходящий объем, например, 1,0 мл, пробы газовой фазы над раствором сравнения (b). Чувствительность системы регулируют таким образом, чтобы высоты пиков этиленоксида и ацетальдегида на полученной хроматограмме составляли не менее 15% всей шкалы регистрирующего устройства.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- коэффициент разделения пиков ацетальдегида и этиленоксида составляет не менее 2,0;

- отношение сигнал/шум для пика диоксана составляет не менее 5.

Хроматографируют поочередно подходящие объемы, например, по 1,0 мл (или такой же объем, как для раствора сравнения (b)), проб газовых фаз над испытуемым раствором и раствором сравнения (а), получая по три хроматограммы для каждой из проб. Величины площадей пиков этиленоксида и диоксана на хроматограмме испытуемого раствора должны составлять не более половины величин площадей соответствующих пиков на хроматограмме раствора сравнения (а) (1 ррm этиленоксида и 50 ррm диоксана).

Проверка точности. Для каждой пары введений вычисляют разность площадей пиков этиленоксида и диоксана на хроматограмме раствора сравнения (а) и на хроматограмме испытуемого раствора.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное для трех значений разности площадей пиков этиленоксида, составляет не более 15%;

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное для трех значений разности площадей пиков диоксана, составляет не более 10%.

Если навески испытуемого вещества, взятые для приготовления испытуемого раствора и раствора сравнения (а), отличались от 1.00 г более чем на 0,5%, необходимо внести соответствующие поправки.

Содержание этиленоксида в миллионных частях (ррm) вычисляют по формуле:

где: С Ї содержание этиленоксида; A_TЇ площадь пика этиленоксида на хроматограмме испытуемого раствора; A_R Ї площадь пика этиленоксида на хроматограмме раствора сравнения (а); M_Т Ї масса навески испытуемого вещества, взятая для приготовления испытуемого раствора, в граммах; M_R Ї масса навески испытуемого вещества, взятая для приготовления раствора сравнения, в граммах; С - количество этиленоксида, прибавленного к раствору сравнения (а), в микрограммах.

Содержание диоксана в миллионных частях (ррm) вычисляют по формуле:



где: С Ї содержание диоксана; D_Т Ї площадь пика диоксана на хроматограмме испытуемого раствора; D_RЇ площадь пика диоксана на хроматограмме раствора сравнения (а); С Ї количество диоксана, прибавленного к раствору сравнения (а), в микрограммах.

3. Сравнительный анализ общей фармакопейной статьи "Газовая хроматография" в ГФ XI, JP и Eur. Ph

Раздел статьи	ГФ XI	Eur. Ph	JP
Определение газовой хроматографии	Это хроматография, в которой подвижная фаза находится в состоянии газа или пара.	Метод, основанный на введение в колонку газа-носителя в качестве подвижной фазы с целью разделить смесь на ее компоненты за счет использования разной степени сродства компонентов к газу-носителю.	Метод, основанный на разнице распределения компонентов между двумя фазами: газом-носителем и стационарной фазой
Понятие о коэффициенте распределения	Отношение количества вещества в неподвижной фазе к количеству вещества в подвижной фазе (зависит от природы растворенного вещества и количества неподвижной фазы)		К= количество вещества в неподвижной фазе/количество вещества в подвижной.
Время удерживания			tRЃЃ(1Ѓ{k) t0 время удерживания для конкретного соединения при фиксированных хроматографических условиях.
Аппаратура (общая схема)	Системы: измерения и регулирования скорости потока газа-носителя и вспомогательных газов, ввода пробы анализируемого образца, газохроматографические колонки, детектора, регистрации(и обработки),термостатирования и контроля.	Прибор состоит из системы ввода проб, хроматографической колонки, детектора и системы регистрации(самописец)	Прибор:газ-носитель, регулятор потока, система ввода пробы, колонки, термостат колонок, детектора и регистрирующее устройство
Система ввода проб	Состоит из испарителя и мембраны из термостойкой резины. Анализируемые вещества поступают в колонку парообразном состоянии, жидкие пробы вводят микрошприцем.	Введение образца осуществляться с помощью шприца или впускного клапана в стандартным образом если иное не предусмотрено частной статьей.	Порт ввода служит для доставки газа-носителя в колонку при постоянной скорости и, как правило состоит из клапана регулирования давления и манометра. порт ввода пробы также используется для доставки образца.
Стационарная фаза	Газохроматографческая колонка представляет собой прямую, спиральную или U-образную трубку, изготовленную из нержавеющей стали и стекла. Наиболее часто используются колонки длиной 1-3 м.	Стационарные фазы могут быть: - капиллярная колонка из плавленого кремнезема, чьи стенки покрыты стационарной фазой; - колонка из инертных частиц, пропитанных стационарной фазой; - колонка с твердой стационарной фазой.	Капиллярная колонка представляет собой трубку, изготовленную из инертного металла, стекла, кварца или синтетические смолы, стенки которой покрыты стационарной фазой.
Подвижная фаза	Обычно в качестве газа носителя применяется гелий, аргон, азот. (предпочтительнее гелий)	Гелий или азот, как правило, используется в качестве газа-носителя; для капиллярных колонок газ-носитель: азот, гелий водород.
Анализ	- Качественный (метод-свидетелей и метод относительных удерживаний). -Количественный анализ(с учетом измерения параметров пиков веществ на хроматограммах): а)метод абсолютной градуировки(опр. зависимости между кличеством вещества и площадью пика на хроматограмме); б)метод внутренней нормализации(приведение к 100% суммы площадей пиков); в)метод внутреннего стандарта(сравнение параметра введенного вещества со стандартом)		Как правило, анализ проводится с помощью использование внутреннего стандарта. - Метод калибровочной кривой используется в случае недоступности внутренних стандартов и калибровочная кривая представляет собой прямую линию. - Метод измерения пика: а) измерение высоты пика; б)автоматическое измерение высоты пика с помощью детектора. - Метод площадей пиков: а) длина пика умноженная на ширину на полувысоте; б) автоматическое проведение метода

Вывод

По результатам сопоставительного анализа трех общих статей различных Фармакопей(ГФ XI, Eur. Ph., JP) можно сделать вывод об исчерпывающей информации по данному методу в Японской Фармакопее. Однако, в ГФ XI издания метод газовой хроматографии описан удачно и может быть воспроизведен практически. Для выполнения методика, представленная в JP предпочтительнее.

Список использованной литературы

1. Харитонов, Ю.Я Аналитическая химия (аналитика). В 2 кн. Кн.2 Количественный анализ. Физико-химические (инструментальные) методы анализа.:Учеб.для вузов.-2-е изд.,испр.-М.:Высш.шк.,2003.-559 с.:ил.

2. Государственная Фармакопея СССР: Вып.1. Общие методы анализа/МЗ СССР.-11 изд., доп.-М.: Медицина, 1987.-336 с., ил.

3. Европейская Фармакопея

4. Японская Фармакопея

Размещено на Allbest.ru